Om Biomerieux Test-Kits Ot-10300 Package Insert 10300

10300 07887 Q - fr - 2015/03
®
Listeria
Système d'identification des Listeria
INTRODUCTION ET OBJET DU TEST

®
Conseils de prudence
API Listeria est un système standardisé pour P210 : Tenir à l’écart de la chaleur, des surfaces chaudes,
l'identification des Listeria utilisant des tests miniaturisés, des étincelles, des flammes nues et de toute autre source
ainsi qu'une base de données. La liste complète des d’inflammation. Ne pas fumer.
bactéries qu'il est possible d'identifier avec ce système est P280 : Porter des gants de protection/des vêtements de
présente dans le Tableau d'Identification en fin de notice. protection/un équipement de protection des yeux/du
PRINCIPE visage.
® P301 + P312 : EN CAS D’INGESTION: Appeler un
La galerie API Listeria comporte 10 micro-tubes
CENTRE ANTIPOISON/un médecin en cas de malaise.
contenant des substrats sous forme déshydratée, qui
P302 + P352 : EN CAS DE CONTACT AVEC LA PEAU:
permettent la réalisation de tests enzymatiques ou des
Laver abondamment à l’eau.
fermentations de sucres. P304 + P340 : EN CAS D’INHALATION: transporter la
Les réactions produites durant la période d'incubation se personne à l’extérieur et la maintenir dans une position où
traduisent par des virages colorés spontanés ou révélés elle peut confortablement respirer.
par l'addition de réactifs. P305 + P351 + P338 : EN CAS DE CONTACT AVEC LES
La lecture de ces réactions se fait à l'aide du Tableau YEUX: rincer avec précaution à l'eau pendant plusieurs
de Lecture et l'identification est obtenue en consultant la minutes. Enlever les lentilles de contact si la victime en
liste des profils de la notice ou à l'aide d'un logiciel porte et si elles peuvent être facilement enlevées.
d'identification. Continuer à rincer.
PRESENTATION (Coffret de 10 tests) : Pour plus d’informations, consulter la fiche de données
® sécurité.
- 10 galeries API Listeria (STR)
®
- 10 ampoules d’API Suspension Medium, 2 ml (MED)
- 1 ampoule de réactif ZYM B (ZYM B) REACTIFS ET MATERIEL NECESSAIRES MAIS NON
- 10 boîtes d'incubation (INCUB) FOURNIS
- 10 fiches de résultats (SHEET)
Réactifs
- 1 notice fournie dans le kit ou téléchargeable sur
www.biomerieux.com/techlib - McFarland Standard (Réf. 70900), point 1
- Logiciel d'identification apiweb TM (Réf. 40011)
COMPOSITION (consulter bioMérieux)
Galerie Matériel
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La composition de la galerie API Listeria est reportée - Pipettes ou PSIpettes
dans le Tableau de Lecture de cette notice. - Protège-ampoule
- Portoir pour ampoules
Milieu - Equipement général de laboratoire de bactériologie
MED Eau déminéralisée
®
(API PRECAUTIONS D'UTILISATION
Suspension • Pour diagnostic in vitro et pour contrôle micro-
Medium) biologique.
2 ml • Pour usage professionnel uniquement.
• Prendre connaissance des mentions de danger “H” et
Réactif des conseils de prudence “P” cités ci-dessus.
Réactif Fast Blue BB (matière active) 0,12 g • Ce coffret contient des composants d'origine animale.
ZYM B * Méthanol 40 ml La maîtrise de l'origine et/ou de l'état sanitaire des
8 ml Diméthylsulfoxide (DMSO) 60 ml animaux ne pouvant garantir de façon absolue que ces
produits ne contiennent aucun agent pathogène
Les quantités indiquées peuvent être ajustées en fonction des transmissible, il est recommandé de les manipuler avec
titres des matières premières. les précautions d'usage relatives aux produits
* Mention d’avertissement : DANGER potentiellement infectieux (ne pas ingérer; ne pas
inhaler).
Mentions de danger
H226 : Liquide et vapeurs inflammables.
H302 : Nocif en cas d’ingestion.
H311 : Toxique par contact cutané.
H315 : Provoque une irritation cutanée.
H319 : Provoque une sévère irritation des yeux.
H331 : Toxique par inhalation
H335 : Peut irriter les voies respiratoires.
H370 : Risque avéré d'effets graves pour les organes.
bioMérieux SA Français - 1
api® Listeria 07887Q - fr - 2015/03
• Les prélèvements, cultures bactériennes et produits Réactif :

ensemencés doivent être considérés comme poten- Le réactif doit être conservé à l'obscurité à 2-8°C jusqu'à
tiellement infectieux et doivent être manipulés de façon la date limite d'utilisation indiquée sur l'emballage.
appropriée par un personnel compétent et averti. Les Après ouverture de l'ampoule et transfert du réactif dans
techniques aseptiques et les précautions usuelles de le flacon compte-gouttes, le réactif peut être conservé
manipulation pour le groupe bactérien étudié doivent 1 mois (ou jusqu'à la date limite d'utilisation si celle-ci est
être respectées tout au long de la manipulation ; se antérieure) : noter la date d'ouverture sur l'étiquette du
®
référer à "CLSI M29-A, Protection of Laboratory flacon.
Workers From Occupationally Acquired Infections; Le réactif est très sensible à la lumière : vérifier l'aspect
Approved Guideline - Révision en vigueur". Pour du réactif avant son transfert en flacon compte-gouttes.
informations complémentaires sur les précautions de Le réactif présente à l'état normal une teinte jaune à
manipulation, se référer à "Biosafety in Microbiological ambrée. Eliminer le réactif dès qu'un changement de
and Biomedical Laboratories - CDC/NIH - Dernière couleur rose (signe d'altération) est observé. Une
édition", ou à la réglementation en vigueur dans le pays exposition courte à la lumière du laboratoire (environ 1
d'utilisation. heure) entraîne une dégradation du réactif.
• Ne pas utiliser les réactifs après la date de péremption. Veiller à remettre rapidement le réactif au réfrigérateur
• Avant utilisation, s'assurer de l'intégrité de l'emballage et après utilisation.
des composants.
• Ne pas utiliser de galeries ayant subi une altération UTILISATION DU REACTIF
physique : cupule déformée, sachet déshydratant • Ouvrir l'ampoule de réactif comme indiqué au
ouvert, ... paragraphe "Précautions d’utilisation" (ampoule avec
• Avant utilisation, laisser les réactifs revenir à bouchon compte-gouttes).
température ambiante. • Avant utilisation de chaque ampoule de réactif, il est
• Ouvrir les ampoules délicatement comme suit : recommandé de réaliser un contrôle qualité à l’aide de
®
- Placer l'ampoule dans le protège-ampoule. la souche ATCC 33090™ mentionnée dans le
- Tenir l'ensemble verticalement dans une paragraphe Contrôle Qualité afin d’exclure tout réactif
main (bouchon blanc vers le haut). défectueux.
- Bien enfoncer le bouchon. • Délivrer une goutte de réactif.
- Exercer une pression horizontale avec le • Bien refermer le flacon après usage et le conserver
pouce sur la partie striée du bouchon de comme indiqué au paragraphe "Conditions de
façon à casser l'extrémité de l'ampoule. stockage".
- Retirer l'ampoule du protège-ampoule et
conserver le protège-ampoule pour une ECHANTILLONS
®
utilisation ultérieure. API Listeria ne doit pas être utilisé directement à partir
* Ampoule sans bouchon compte-gouttes : des prélèvements d'origine clinique ou autre.
- Enlever délicatement le bouchon. Les microorganismes à identifier doivent dans un premier
* Ampoule avec bouchon compte-gouttes : temps être isolés sur un milieu de culture adapté selon les
- Renverser l'ampoule et la maintenir en techniques usuelles de bactériologie.
position verticale.
MODE OPERATOIRE
- Appliquer une pression latérale sur le
bouchon pour transférer la totalité du réactif Sélection des colonies
dans le flacon compte-gouttes. • Vérifier l'appartenance de la souche à étudier au genre
NOTE : Pour toute utilisation ultérieure, il est Listeria (courts bacilles à Gram positif, polymorphes,
recommandé d'appuyer sur le bouchon avant mobiles à 25°C mais pas à 37°C, catalase positive et
de renverser l'ampoule afin d'aspirer tout excès oxydase négative).
de réactif et d'éviter de le répandre à l'extérieur • Les prélèvements contenant souvent des mélanges de
du bouchon. plusieurs espèces de Listeria, il est préférable de
• Les performances présentées sont obtenues avec la réaliser une subculture sur gélose au sang à partir
méthodologie indiquée dans cette notice. Toute d'une colonie bien isolée. Incuber la boîte 24 heures à
déviation de méthodologie peut altérer les résultats. 36°C ± 2°C.
• L'interprétation des résultats du test doit être faite en NOTE : Les milieux suivants peuvent être utilisés pour
tenant compte du contexte clinique ou autre, de l'origine prélever les colonies avant utilisation de la galerie
du prélèvement, des aspects macro et microscopiques ®
API Listeria :
de la souche et éventuellement des résultats d'autres
- milieux gélosés au sang non sélectifs, à base Columbia
tests, en particulier de l'antibiogramme.
ou TSA, avec ou sans antibiotiques ;
- milieux sélectifs pour Listeria à l'exception du milieu
CONDITIONS DE STOCKAGE McBride qui inhibe l'expression enzymatique des
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Galeries STR: bactéries sur la galerie API Listeria. Si ce milieu est
Les galeries se conservent à 2-8°C jusqu'à la date limite employé pour l'isolement, réaliser une subculture sur
d'utilisation indiquée sur l'emballage. gélose au sang.
Milieux MED:
Les milieux se conservent à 2-30°C jusqu'à la date limite
d'utilisation indiquée sur l'emballage.
Préparation de la galerie LECTURE ET INTERPRETATION

• Réunir fond et couvercle d'une boîte d'incubation et Lecture de la galerie
répartir environ 3 ml d'eau distillée ou déminéralisée [ou
• Ajouter 1 goutte de réactif au test DIM .
toute eau sans additif ou dérivés susceptibles de libérer
• Lire dans les 3 minutes toutes les réactions en se
des gaz (Ex : Cl2, CO2 ...)] dans les alvéoles du fond
référant au Tableau de Lecture de la notice technique.
pour créer une atmosphère humide.
• Noter les réactions en +/- sur la fiche de résultats.
• Inscrire la référence de la souche sur la languette
• Noter également le type d'hémolyse. Le résultat de ce
latérale de la boîte. (Ne pas inscrire la référence sur le
test n’est pas pris en compte dans l’interprétation de la
couvercle, celui-ci pouvant être déplacé lors de la
galerie.
manipulation).
• Sortir la galerie de son emballage individuel. Interprétation
• Placer la galerie dans la boîte d'incubation. L'identification est obtenue à partir du profil numérique.
• Jeter le déshydratant. • Détermination du profil numérique :
Préparation de l'inoculum Sur la fiche de résultats, les tests sont séparés par
®
• Ouvrir une ampoule d’API Suspension Medium (2 ml) groupes de trois et une valeur 1, 2 ou 4 est indiquée
comme indiqué au paragraphe "Précautions pour chacun. En additionnant à l'intérieur de chaque
d’utilisation" (ampoule sans bouchon compte-gouttes). groupe les valeurs correspondant à des réactions
• A l'aide d'une pipette ou d'une PSIpette, prélever positives, on obtient 4 chiffres qui constituent le profil
quelques colonies bien isolées. Utiliser numérique.
préférentiellement des cultures jeunes (18-24 heures). • Identification :
• Réaliser une suspension d'opacité égale à Elle est réalisée à partir de la base de données (V1.2)
1 de McFarland. Cette suspension doit être utilisée * à l'aide du profil numérique :
extemporanément. - Rechercher le profil dans la liste de la notice ; cette
• Observer le type d’hémolyse et le noter sur la fiche de liste n'étant pas exhaustive, en cas de profil
résultats, ce caractère constituant un test additionnel. inexistant, consulter le logiciel ci-dessous ou
Inoculation de la galerie l’Assistance Technique bioMérieux.
• Répartir la suspension bactérienne précédente dans les * à l'aide du logiciel d'identification apiweb TM :
tubes en évitant la formation de bulles (pour cela, - Entrer manuellement au clavier le profil numérique à
incliner la boîte d'incubation vers l'avant et placer la 4 chiffres.
pointe de la pipette ou de la PSIpette sur le côté de la
cupule) :
- Remplir tube et cupule du test DIM (100 µl environ),
en veillant à ne pas créer un ménisque convexe.
- Remplir uniquement la partie tube des tests ESC à
TAG (50 µl environ). 6 510 Listeria monocytogenes
NOTE : La qualité du remplissage est très importante :
des tubes insuffisamment ou trop remplis sont source de
résultats faussement positifs ou négatifs.
• Refermer la boîte d'incubation.
• Incuber 18-24 heures à 36°C ± 2°C en aérobiose.
CONTROLE DE QUALITE
Les galeries, milieux et réactifs font l'objet de contrôles de qualité systématiques à différentes étapes de leur fabrication.
Le Contrôle de Qualité Minimum peut être utilisé pour vérifier que les conditions de stockage et de transport n’ont pas
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d’impact sur les performances de la galerie API LISTERIA. Ce contrôle peut être réalisé en suivant les instructions et
®
critères attendus ci-dessus en lien avec le référenciel CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial
Identification Systems.
®
Le contrôle peut être fait en utilisant la souche Listeria innocua ATCC 33090™ pour évaluer les performances des
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tests DIM et XYL. En effet, des études réalisées par bioMérieux ont montré que sur la galerie API LISTERIA, les tests
DIM et XYL sont les tests les plus sensibles. Par conséquent, lors du contrôle, l’intégrité de la galerie peut être vérifiée
en utilisant la souche Listeria innocua ATCC 33090.
Dans le cas où un Contrôle de Qualité Complet est exigé pour cette galerie, les trois souches suivantes devront être
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testées pour vérifier les réactions positives et négatives de la plupart des tests de la galerie API LISTERIA.
® ®
1. Listeria innocua ATCC 33090™ 3. Listeria monocytogenes ATCC 19115™
®
2. Listeria ivanovii ATCC BAA-139™
®
ATCC : American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
DIM ESC αMAN DARL XYL RHA MDG RIB G1P TAG
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* Occasionnellement (–).
Profils obtenus après culture sur gélose Columbia au sang de mouton.
Il est de la responsabilité de l'utilisateur de s'assurer que le contrôle de qualité est mis en oeuvre conformément à la
législation locale en vigueur.
LIMITES DU TEST PERFORMANCES

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• Le système API Listeria est destiné à l'identification 643 souches de diverses origines et souches de
des bactéries du genre Listeria présentes dans la collection appartenant aux espèces de la base de
base de données (voir Tableau d'Identification en fin données ont été testées :
de notice) et à elles seules. Il ne peut être utilisé pour - 98,91% des souches ont été correctement identifiées
identifier d'autres microorganismes ou exclure leur (avec ou sans tests complémentaires).
présence. - 0,62% des souches n'ont pas été identifiées.
• Seules des cultures pures contenant un seul type de - 0,47% des souches ont été mal identifiées.
microorganisme doivent être utilisées.
ELIMINATION DES DECHETS
RESULTATS ATTENDUS Eliminer le réactif ZYM B non utilisé en suivant les
Se référer au Tableau d'Identification en fin de cette procédures relatives aux déchets chimiques dangereux.
notice pour les résultats attendus des différentes Eliminer tous les réactifs utilisés ou non utilisés (autre
réactions biochimiques. que le réactif ZYM B) ainsi que les matériels à usage
unique contaminés en suivant les procédures relatives
aux produits infectieux ou potentiellement infectieux.
Il incombe à chaque laboratoire de gérer les déchets et
les effluents qu'il produit selon leur nature et leur
dangerosité, et d'en assurer (ou faire assurer) le
traitement et l'élimination selon les réglementations
applicables.
TABLEAU DE LECTURE
QTE RESULTATS
TESTS COMPOSANTS ACTIFS REACTIONS
(mg/cup.) NEGATIF POSITIF
ZYM B / < 3 min
orange pâle
Différenciation
DIM Substrat enzymatique 0,106 rose beige orange
L. innocua / L. monocytogenes
gris beige
Esculine 0,16
ESC hydrolyse (ESCuline) jaune pâle noir
Citrate de fer 0,024
4-nitrophényl-αD-
αMAN 0,045 α-MANnosidase incolore jaune
mannopyranoside
DARL D-Arabitol 0,4 acidification (D-ARabitoL)
XYL D-Xylose 0,4 acidification (XYLose)
RHA L-Rhamnose 0,4 acidification (RHAmnose)
Méthyl-αD- rouge / jaune /

MDG 0,4 acidification (Méthyl-αD-Glucopyranoside)
glucopyranoside rouge orangé jaune orangé
RIB D-Ribose 0,4 acidification (RIBose)
G1P Glucose-1-Phosphate 0,4 acidification (Glucose-1-Phosphate)
TAG D-Tagatose 0,4 acidification (TAGatose)
• Les quantités indiquées peuvent être ajustées en fonction des titres des matières premières.
• Certaines cupules contiennent des composants d’origine animale, notamment des peptones.
METHODOLOGIE p. I
LISTE DES PROFILS NUMERIQUES p. II
TABLEAU D'IDENTIFICATION p. II
BIBLIOGRAPHIE p. III
TABLE DES SYMBOLES p. IV
HISTORIQUE DES REVISIONS
Catégories de type de modification :

N/A Non applicable (première version)
Correction Correction d’anomalies présentes dans la documentation
Modification technique Ajout, révision et/ou retrait d’informations relatives au produit
Administratif Modifications d’ordre non technique perceptibles par l’utilisateur
Remarque : Les modifications mineures de typographie, grammaire et mise en page
n’apparaissent pas dans l’historique des révisions.
Date de Référence du
Type de modification Résumé de la modification
version document
HISTORIQUE DES REVISIONS
Administratif PRESENTATION, ECHANTILLONS, TABLE DES
2015/03 07887Q SYMBOLES
Modification technique COMPOSITION, PRECAUTIONS D’UTILISATION
BIOMERIEUX, le logo bleu, API, et apiweb sont des marques utilisées, déposées et/ou enregistrées appartenant à bioMérieux, ou à l'une de ses filiales, ou à
l’une de ses sociétés.
CLSI est une marque appartenant à Clinical Laboratory and Standards Institute Inc.
La marque ATCC, la dénomination ATCC et tous les numéros de catalogue ATCC sont des marques de American Type Culture Collection.
Les autres marques et noms de produits mentionnés appartiennent à leurs propriétaires respectifs.
673 620 399 RCS LYON

bioMérieux SA Tél. 33 (0)4 78 87 20 00
376 Chemin de l’Orme Fax 33 (0)4 78 87 20 90
69280 Marcy-l'Etoile - France www.biomerieux.com
10300 07887 Q - en - 2015/03
®
Listeria
System for the identification of Listeria
SUMMARY AND EXPLANATION Precautionary statements

®
API Listeria is a standardized system for the P210 : Keep away from heat, hot surfaces, sparks, open
identification of Listeria, which uses miniaturized tests, as flames and other ignition sources. No smoking.
well as a database. The complete list of those organisms P280 : Wear protective gloves/protective clothing/eye
that it is possible to identify with this system is given in the protection/face protection.
Identification Table at the end of this package insert. P301 + P312 : IF SWALLOWED: Call a POISON
CENTER/doctor if you feel unwell.
PRINCIPLE P302 + P352 : IF ON SKIN: Wash with plenty of water.
®
The API Listeria strip consists of 10 microtubes P304 + P340 : IF INHALED: Remove person to fresh air
containing dehydrated substrates which enable the and keep comfortable for breathing.
performance of enzymatic tests or sugar fermentations. P305 + P351 + P338 : IF IN EYES: Rinse cautiously with
During incubation, metabolism produces color changes water for several minutes. Remove contact lenses, if
that are either spontaneous or revealed by the addition of present and easy to do. Continue rinsing.
reagents. For more detailed information consult the material safety
The reactions are read according to the Reading Table data sheet.
and the identification is obtained by consulting the profile
list in the package insert or using the identification REAGENTS AND MATERIAL REQUIRED BUT NOT
software. PROVIDED
Reagents
CONTENT OF THE KIT (Kit for 10 tests) :
® - McFarland Standard (Ref. 70900), No. 1 on the scale
- 10 API Listeria strips (STR) - apiweb TM identification software (Ref. 40011)
®
- 10 ampules of API Suspension Medium, 2 ml (MED) (consult bioMérieux)
- 1 ampule of ZYM B reagent (ZYM B)
- 10 incubation boxes (INCUB) Material
- 10 result sheets (SHEET) - Pipettes or PSIpettes
- 1 Package Insert provided in the kit or downloadable - Ampule rack
from www.biomerieux.com/techlib - Ampule protector
- General microbiology laboratory equipment
COMPOSITION
Strip WARNINGS AND PRECAUTIONS
®
The composition of the API Listeria strip is given in the • For in vitro diagnostic use and microbiological
Reading Table of this package insert. control.
• For professional use only.
Medium • Refer to the hazard statements “H” and precautionary
MED Demineralized water statements “P” indicated above.
(API
® • This kit contains products of animal origin. Certified
Suspension knowledge of the origin and/or sanitary state of the
Medium) animals does not totally guarantee the absence of
2 ml transmissible pathogenic agents. It is therefore
recommended that these products be treated as
Reagent potentially infectious, and handled observing the usual
safety precautions (do not ingest or inhale).
ZYM B * Fast Blue BB (active ingredient) 0.12 g
Methanol 40 ml • All specimens, microbial cultures and inoculated products
reagent
Dimethylsulfoxide (DMSO) 60 ml should be considered infectious and handled
8 ml
appropriately. Aseptic technique and usual precautions
The quantities indicated may be adjusted depending on the titer for handling the bacterial group studied should be
®
of the raw materials used. observed throughout this procedure. Refer to "CLSI
M29-A, Protection of Laboratory Workers From
* Signal word : DANGER
Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline
- Current revision". For additional handling precautions,
refer to "Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories - CDC/NIH - Latest edition", or to the
regulations currently in use in each country.
Hazard statements • Do not use reagents after the expiry date.
H226 : Flammable liquid and vapour. • Before use, check that the packaging and components
H302 : Harmful if swallowed. are intact.
H311 : Toxic in contact with skin. • Do not use strips which have been damaged : cupules
H315 : Causes skin irritation. deformed, desiccant sachet open, etc.
H319 : Causes serious eye irritation.
H331 : Toxic if inhaled.
H335 : May cause respiratory irritation.
H370 : Causes damage to organs.
bioMérieux SA English - 1
api® Listeria 07887Q - en - 2015/03
• Allow reagents to come to room temperature before use. USE OF THE REAGENT
• Open ampules carefully as follows : • Open the ampule of reagent as indicated in the
- Place the ampule in the ampule protector. paragraph "Warnings and Precautions" (ampule with
- Hold the protected ampule in one hand in a dropper-cap).
vertical position (white plastic cap uppermost). • Before using each ampule of reagent, it is
- Press the cap down as far as possible. recommended to perform a quality control test with the
- Position the thumb tip on the striated part of ®
strain ATCC 33090™ indicated in the Quality Control
the cap and press forward to snap off the top paragraph, in order to eliminate any defective reagents.
of the ampule. • Dispense one drop of reagent.
- Take the ampule out of the ampule protector • Carefully close the bottle after use and store it as
and put the protector aside for subsequent use. indicated in the paragraph "Storage conditions".
* For ampule with no dropper-cap :
- Carefully remove the cap. SPECIMENS
* For ampule with dropper-cap : ®
- Turn the ampule upside down and maintain API Listeria is not for use directly with clinical or other
it in a vertical position. specimens.
- Squeeze gently on the cap to release a drop The microorganisms to be identified must first be isolated
to transfer all the reagent into the dropper- on a suitable culture medium according to standard
bottle. microbiological techniques.
NOTE: For subsequent use, it is recommended INSTRUCTIONS FOR USE
to squeeze on the cap before turning the Selection of the colonies
ampule upside down in order to suck back any
spare drops of reagent and thus avoid • Check that the strain belongs to the genus Listeria
sprinkling cap or fingers with the reagent. (short Gram-positive rods which are polymorphic, motile
• The performance data presented were obtained using at 25°C but not at 37°C, catalase-positive and oxidase-
the procedure indicated in this package insert. Any negative).
change or modification in the procedure may affect the • As specimens often contain a mixture of several types of
results. Listeria, it is preferable to make a subculture on blood
• Interpretation of the test results should be made taking agar using a well-isolated colony. Incubate the plate for
into consideration the patient history, the source of the 24 hours at 36°C ± 2°C.
specimen, colonial and microscopic morphology of the NOTE : The following media may be used to take colony
strain and, if necessary, the results of any other tests samples before using the API Listeria strip :
performed, particularly the antimicrobial susceptibility - non-selective blood agar media with a Columbia or TSA
patterns. base and with or without antibiotics ;
- selective media for Listeria, excluding the McBride
STORAGE CONDITIONS medium which inhibits the enzymatic manifestation of
®
Strips STR : bacteria on the API Listeria strip. If this medium is used
for isolation purposes, make a subculture on blood agar.
The strips should be stored at 2-8°C until the expiry date
indicated on the packaging. Preparation of the strip
• Prepare the incubation box (tray and lid) and distribute
Media MED :
about 3 ml of distilled water or demineralized water
The media may be stored at 2-30°C until the expiry date [or any water without additives or chemicals which may
indicated on the packaging. release gases (e.g. Cl2, CO2, etc.)] into the
Reagent : honeycombed wells of the tray to create a humid
atmosphere.
The reagent should be stored in the dark at 2-8°C until the • Record the strain reference on the elongated flap of the
expiry date indicated on the packaging. tray. (Do not record the reference on the lid as it may be
The reagent may be kept for up to 1 month after the misplaced during the procedure).
ampule has been opened and the reagent transferred into • Remove the strip from its individual packaging.
the dropper-bottle, (or until the expiration date if this is • Place the strip in the incubation box.
earlier) : record the date opened on the bottle label. • Discard the desiccant.
The ZYM B reagent is very sensitive to light : check the
appearance of the reagent before transferring it into the Preparation of the inoculum
®
dropper-bottle. The ZYM B reagent is normally yellow to • Open an ampule of API Suspension Medium (2 ml) as
amber in color. Dispose of the reagent if any tint of pink indicated in the paragraph "Warnings and Precautions"
(sign of deterioration) is observed. Exposure to laboratory (ampule with no dropper-cap).
lighting for a short period of time (approx. 1 hour) will • Using a pipette or PSIpette, pick up a few well-isolated
damage the reagent. colonies. It is recommended to use young cultures
Make sure that the reagent is put back in the refrigerator (18-24 hours old).
immediately after use. • Prepare a suspension with a turbidity equivalent to
1 McFarland. This suspension must be used
immediately after preparation.
• Observe the type of hemolysis and record it on the
result sheet. This qualifies as an additional test.
Inoculation of the strip • Determination of the numerical profile :

• Distribute the bacterial suspension into each tube, On the result sheet, the tests are separated into groups
avoiding the formation of bubbles (tilt the strip slightly of three and a value 1, 2 or 4 is assigned to each. By
forward and place the tip of the pipette or PSIpette adding together the values corresponding to positive
against the side of the cupule) : reactions within each group, a 4-digit numerical profile is
- Fill tube and cupule of the DIM test (about 100 µl), obtained which constitutes the numerical profile.
avoiding the formation of a convex meniscus. • Identification :
- Only fill the tube part of tests ESC to TAG (about This is performed using the database (V1.2)
50 µl). * with the numerical profile :
NOTE : The quality of the filling is very important : tubes - Look up the profile in the list in this package insert ;
which are insufficiently or excessively full may cause false this list is not exhaustive, so if the profile is missing,
positive or false negative results. please consult the software program indicated
• Close the incubation box. below or the bioMérieux Technical Assistance
• Incubate for 18-24 hours at 36°C ± 2°C in aerobic service.
conditions. * with the apiweb TM identification software:
- Enter the 4-digit numerical profile manually via the
READING AND INTERPRETATION keyboard.
Reading the strip
• Add a drop of ZYM B reagent to the DIM test.
• Read all the reactions within 3 minutes by referring to
the Reading Table in this package insert.
• Record whether the reactions are positive or negative
(+/-) on the result sheet. 6 510 Listeria monocytogenes
• Also record the type of hemolysis on the result sheet.
The result of this test is not taken into account for
interpretation of the strip.
Interpretation
Identification is obtained with the numerical profile.
QUALITY CONTROL
The media, strips and reagents are systematically controlled at various stages of their manufacture.
®
Streamlined quality control may be used to confirm acceptable performance of the API LISTERIA system after
shipping/storage. This methodology may be performed by following the instructions above for testing and meeting the
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criteria stated in CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial Identification Systems.
®
Testing may be conducted using Listeria innocua ATCC 33090™ to evaluate the performance of the DIM and XYL
®
tests. Testing performed by bioMérieux has shown that the DIM and XYL tests are the most labile on the API LISTERIA
®
strip. When testing the strip, Listeria innocua ATCC 33090™ can be used to detect degradation.
For those users who are required to perfom comprehensive quality control testing with the strip, the following three
®
strains should be tested to demonstrate positive and negative reactivity for most of the API LISTERIA tests.
® ®
®
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* Occasionally (–).
Profiles obtained after culture on Columbia sheep blood agar.
It is the responsibility of the user to perform Quality Control in accordance with any local applicable regulations.
LIMITATIONS OF THE METHOD WASTE DISPOSAL

®
• The API Listeria system is intended uniquely for the Dispose of unused ZYM B reagent following procedures
identification of bacteria belonging to the genus for hazardous chemical waste.
Listeria included in the database (see Identification Dispose of all used or unused reagents (other than the
Table at the end of this package insert). It cannot be ZYM B reagent) as well as any other contaminated
used to identify any other microorganisms or to disposable materials following procedures for infectious
exclude their presence. or potentially infectious products.
• Only pure cultures of a single organism should be It is the responsibility of each laboratory to handle
used. waste and effluents produced according to their type
and degree of hazardousness and to treat and dispose
RANGE OF EXPECTED RESULTS
of them (or have them treated and disposed of) in
Consult the Identification Table at the end of this accordance with any applicable regulations.
package insert for the range of expected results for the WARRANTY
various biochemical reactions.
bioMérieux disclaims all warranties, express or implied,
PERFORMANCE including any implied warranties of
643 collection strains and strains of various origins MERCHANTABILITY AND FITNESS FOR A
belonging to species included in the database were PARTICULAR USE. bioMérieux shall not be liable for
tested : any incidental or consequential damages. IN NO
- 98.91 % of the strains were correctly identified (with or EVENT SHALL BIOMERIEUX’S LIABLITY TO
without supplementary tests). CUSTOMER UNDER ANY CLAIM EXCEED A
- 0.62 % of the strains were not identified. REFUND OF THE AMOUNT PAID TO BIOMERIEUX
- 0.47 % of the strains were misidentified. FOR THE PRODUCT OR SERVICE WHICH IS THE
SUBJECT OF THE CLAIM.
READING TABLE
QTY RESULTS
TESTS ACTIVE INGREDIENTS REACTIONS
(mg/cup.) NEGATIVE POSITIVE
ZYM B / < 3 min
pale orange
Differentiation
DIM Enzymatic substrate 0.106 pink beige orange
grey beige
Esculin 0.16
ESC hydrolysis (ESCulin) pale yellow black
Ferric citrate 0.024
4-nitrophenyl-αD-
αMAN 0.045 α-MANnosidase colorless yellow
mannopyranoside
DARL D-ArabitoL 0.4 acidification (D-ARabitoL)
XYL D-Xylose 0.4 acidification (XYLose)
RHA L-Rhamnose 0.4 acidification (RHAmnose)
red / yellow /
MDG Methyl-αD-glucopyranoside 0.4 acidification (Methyl-αD-Glucopyranoside)
orange-red yellow-orange
RIB D-Ribose 0.4 acidification (RIBose)
G1P Glucose-1-Phosphate 0.4 acidification (Glucose-1-Phosphate)
TAG D-Tagatose 0.4 acidification (TAGatose)
• The quantities indicated may be adjusted depending on the titer of the raw materials used.
• Certain cupules contain products of animal origin, notably peptones.
PROCEDURE p. I
LIST OF NUMERICAL PROFILES p. II
IDENTIFICATION TABLE p. II
LITERATURE REFERENCES p. III
INDEX OF SYMBOLS p. IV
REVISION HISTORY
Change type categories

N/A Not applicable (First publication)
Correction Correction of documentation anomalies
Technical change Addition, revision and/or removal of information related to the product
Administrative Implementation of non-technical changes noticeable to the user
Note: Minor typographical, grammar, and formatting changes are not included in the
revision history
Release Part Number Change Type Change Summary

date
REVISION HISTORY
Administrative CONTENT OF THE KIT, SPECIMENS, INDEX OF
2015/03 07887Q
SYMBOLS
Technical COMPOSITION, WARNINGS AND PRECAUTIONS
BIOMERIEUX, the blue logo, API and apiweb are used, pending and/or registered trademarks belonging to bioMérieux, or one of its subsidiaries, or one of
its companies.
CLSI is a trademark belonging to Clinical Laboratory and Standards Institute Inc.
The ATCC trademark and trade name and any and all ATCC catalog numbers are trademarks of the American Type Culture Collection.
Any other name or trademark is the property of its respective owner.
673 620 399 RCS LYON

10300 07887Q - de - 2015/03
®
Listeria
System zur Identifizierung von Listeria
EINFÜHRUNG UND TESTERKLÄRUNG Sicherheitshinweis

®
API Listeria ist ein standardisiertes System zur P210 : Von Hitze, heißen Oberflächen, Funken, offenen
Identifizierung von Listeria anhand von miniaturisierten Flammen sowie anderen Zündquellenarten fernhalten.
Reaktionen und einer Datenbasis. Die komplette Liste der Nicht rauchen.
mit dem System zu identifizierenden Mikroorganismen P280 :
finden Sie in der Prozenttabelle am Ende der Arbeits- Schutzhandschuhe/Schutzkleidung/Augenschutz/Gesichts
anleitung. schutz tragen.
P301 + P312 : BEI VERSCHLUCKEN: Bei Unwohlsein
PRINZIP GIFTINFORMATIONSZENTRUM/Arzt anrufen.
®
Der API Listeria Streifen besteht aus 10 Mikroröhrchen, P302 + P352 : BEI BERÜHRUNG MIT DER HAUT: Mit
die dehydrierte Substrate zum Nachweis von viel Wasser waschen.
Enzymaktivität oder Kohlenhydratfermentation enthalten. P304 + P340 : BEI EINATMEN: Die Person an die frische
Die Stoffwechselprodukte, die während der Inkubation Luft bringen und für ungehinderte Atmung sorgen.
entstehen, bewirken Farbumschläge, entweder direkt oder P305 + P351 + P338 : BEI KONTAKT MIT DEN AUGEN:
nach Zugabe der Reagenzien. Einige Minuten lang behutsam mit Wasser spülen.
Die Ablesung der Reaktionen erfolgt anhand der Vorhandene Kontaktlinsen nach Möglichkeit entfernen.
Ablesetabelle, die Identifizierung mit der Profilliste der Weiter spülen.
Arbeitsanleitung oder einer Identifizierungssoftware. Weitere Informationen entnehmen Sie bitte dem
Sicherheitsdatenblatt.
PACKUNGSGRÖSSE (für 10 Tests):
®
- 10 API Listeria Streifen (STR) ZUSÄTZLICH ERFORDERLICHE REAGENZIEN UND
®
- 10 Ampullen API Suspension Medium, 2 ml (MED) MATERIALIEN
- 1 Ampulle ZYM B Reagenz (ZYM B) Reagenzien
- 10 Inkubationswannen (INCUB)
- McFarland Standard 1 (Best.Nr. 70 900)
- 10 Ergebnisblätter (SHEET)
- Identifizierungssoftware apiweb TM (Best.Nr. 40 011)
- 1 Arbeitsanleitung, im Kit enthalten oder als Download
(bei bioMérieux anfragen)
verfügbar unter www.biomerieux.com/techlib
Materialien
ZUSAMMENSETZUNG - Pipetten oder PSIpetten
Streifen - Schutzhülle für Ampullen
®
Die Zusammensetzung des API Listeria Streifens finden - Ampullenständer
Sie in der Ablesetabelle dieser Arbeitsanleitung. - Allgemeine mikrobiologische Laborausrüstung
Medium VORSICHTSMASSNAHMEN
MED Demineralisiertes Wasser • Für die in vitro Diagnostik und die mikrobiologische
(API
® Kontrolle.
Suspension • Nur für die Verwendung durch Fachkundige bestimmt.
Medium) • Beachten Sie die oben genannten Gefahrenhinweise "H"
2 ml und die Sicherheitshinweise "P".
• Dieser Kit enthält Bestandteile tierischen Ursprungs. Da
Reagenz durch die Kontrolle der Herkunft und/oder des Gesund-
Fast Blue BB (aktive Substanz) 0,12 g heitszustandes der Tiere nicht völlig gewährleistet
ZYM B
Methanol 40 ml werden kann, dass diese Produkte keine übertragbaren
Reagenz *
Dimethylsulfoxid (DMSO) 60 ml pathogenen Agenzien enthalten, ist es empfehlenswert,
8 ml
diese als potenziell infektiös zu betrachten und unter
Die angegebenen Mengen können je nach Konzentration der Beachtung entsprechender Vorsichtsmaßnahmen zu
verwendeten Ausgangsmaterialien angeglichen werden. behandeln (nicht einnehmen, nicht einatmen).
* Signalwort: GEFAHR • Alle Proben, mikrobielle Kulturen und beimpfte Produkte
müssen als potenziell infektiös betrachtet und unter
Beachtung geeigneter Vorsichtsmaßnahmen sachgemäß
behandelt werden. Während der gesamten Testdurch-
führung müssen aseptische Arbeitsbedingungen und
entsprechende Vorsichtsmaßnahmen für die zu
Gefahrenhinweis untersuchende Keimgruppe eingehalten werden, siehe
®
H226 : Flüssigkeit und Dampf entzündbar. “CLSI M29-A, Protection of Laboratory Workers from
H302 : Gesundheitsschädlich bei Verschlucken. Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline
H311 : Giftig bei Hautkontakt. – Current revision“. Weitere diesbezügliche
H315 : Verursacht Hautreizungen. Informationen finden Sie in „Biosafety in Microbiological
H319 : Verursacht schwere Augenreizung. and Biomedical Laboratories, CDC/NIH – Latest edition"
H331 : Giftig bei Einatmen. oder in den jeweils gültigen nationalen Richtlinien.
H335 : Kann die Atemwege reizen. • Die Reagenzien nach Ablauf des Verfallsdatums nicht
H370 : Schädigt die Organe. mehr verwenden.
bioMérieux SA Deutsch - 1
api® Listeria 07887Q - de - 2015/03
• Vergewissern Sie sich vor Gebrauch, dass die Das ZYM B Reagenz ist sehr lichtempfindlich: Prüfen Sie
Verpackung und die verschiedenen Bestandteile nicht das Aussehen der Reagenzien, bevor Sie sie in das
beschädigt sind. Tropffläschchen überführen.
• Streifen mit äußeren Anzeichen einer Beschädigung ZYM B hat normalerweise eine gelbliche bis
(deformierte Vertiefungen, geöffnete Trockenmittel- bernsteinartige Färbung. Verwerfen Sie das Reagenz,
beutel etc.) nicht verwenden. sobald sich eine rosa Verfärbung (Verfallsanzeichen)
• Die Reagenzien vor Gebrauch auf Raumtemperatur zeigt. Wenn das Reagenz zu lange dem Licht (ca. 1 h)
bringen. ausgesetzt ist, wird es abgebaut.
• Öffnen Sie die Ampullen wie folgt vorsichtig: Achten Sie darauf, dass das Fläschchen nach Gebrauch
- Stecken Sie die Ampulle in die Schutzhülle sofort wieder in den Kühlschrank gestellt wird.
der Ampulle.
- Halten Sie die Ampulle in der Schutzhülle GEBRAUCH DES REAGENZES
senkrecht (weiße Verschlusskappe nach oben). • Öffnen Sie die Reagenzienampulle wie im Abschnitt
- Pressen Sie die Verschlusskappe so weit „Vorsichtsmaßnahmen“ beschrieben (Ampulle mit Tropf-
wie möglich nach unten. pipette).
- Drücken Sie mit dem Daumen gegen den • Es ist empfehlenswert, für jede Reagenzienampulle vor
gestrichelten Bereich der Verschluss- dem ersten Gebrauch eine Qualitätskontrolle mit dem im
®
kappe, bis die Ampullenspitze abbricht. Abschnitt Qualitätskontrolle genannten ATCC Stamm
- Nehmen Sie die Ampulle aus der Schutz- 33090™ durchzuführen, um jegliches unbrauchbares
hülle und bewahren Sie die Schutzhülle für Reagenz auszuschließen.
einen späteren Gebrauch auf. • Geben Sie einen Tropfen Reagenz ab.
* Ampulle ohne Tropfpipette: • Verschließen Sie das Fläschchen nach Gebrauch
- Entfernen Sie vorsichtig die Verschluss- wieder gut und lagern Sie es wie im Abschnitt
kappe. „Lagerungsbedingungen“ beschrieben.
* Ampulle mit Tropfpipette:
- Drehen Sie die Ampulle um, und halten Sie PROBEN
sie senkrecht. ®
API Listeria darf nicht zur direkten Testung von
- Drücken Sie seitlich auf die Verschluss- klinischen oder anderen Untersuchungsmaterialien
kappe, so dass das gesamte Reagenz in die verwendet werden.
Tropfflasche läuft. Die zu identifizierenden Mikroorganismen müssen zuerst
ANMERKUNG: Für einen späteren Gebrauch gemäß den üblichen mikrobiologischen Verfahren auf
des Reagenzes ist es empfehlenswert, vor einem geeigneten Kulturmedium isoliert werden.
dem Umdrehen seitlich auf die Plastikkappe
zu drücken, um überschüssige Reagenz- TESTDURCHFÜHRUNG
tropfen zu aspirieren und auf diese Weise zu
Auswahl der Kolonien
verhindern, dass überschüssiges Reagenz
ausläuft. • Prüfen Sie, ob der zu untersuchende Stamm zum
• Die angegebene Performance wurde gemäß dem Genus Listeria gehört (kurze, grampositive, polymorphe
Verfahren der vorliegenden Arbeitsanleitung ermittelt. Stäbchen, bei 25°C beweglich, bei 37°C jedoch
Jede Abweichung von diesem Verfahren kann die unbeweglich, Katalase positiv und Oxidase negativ).
Ergebnisse beeinflussen. • Da die Proben oft eine Mischung aus mehreren Listeria
• Bei der Interpretation der Ergebnisse müssen der Spezies enthalten, ist es empfehlenswert, zunächst eine
klinische Hintergrund oder andere Zusammenhänge, die Subkultur auf Blutagar anzulegen (Einzelkolonie).
Probenherkunft, Kolonie- und mikroskopische Morpho- Inkubieren Sie für 24 h bei 36°C ± 2°C.
logie des Stammes sowie gegebenenfalls die ANMERKUNG: Folgende Medien können zur Subkulti-
®
Ergebnisse anderer Test, insbesondere das Antibio- vierung der Keime, die im API Listeria Streifen getestet
gramm, berücksichtigt werden. werden sollen, verwendet werden:
- Nicht selektive Blutagarmedien auf der Basis von
LAGERUNGSBEDINGUNGEN Columbia- oder Trypcase-Soja, mit oder ohne Antibiotika;
Streifen STR: - Selektivmedien für Listeria außer McBride-Medium, das die
®
enzymatische Aktivität der Bakterien im API Listeria
Die Streifen sind bei 2-8°C bis zu dem auf der
Streifen hemmt. Wenn dieses Medium für die Isolierung
Verpackung angegebenen Verfallsdatum haltbar.
benutzt wird, legen Sie bitte eine Subkultur auf Blutagar an.
Medien MED:
Vorbereitung des Streifens
Die Medien sind bei 2-30°C bis zu dem auf der
Verpackung angegebenen Verfallsdatum haltbar. • Stellen Sie eine Inkubationswanne mit Deckel bereit und
geben Sie zur Herstellung einer feuchten Kammer ca.
Reagenz:
3 ml destilliertes oder demineralisiertes Wasser [oder
Das Reagenz muss bei 2-8°C unter Lichtausschluss anderes Wasser ohne Zusätze bzw. Derivate, die Gase
gelagert werden und ist bis zu dem auf der Packung freisetzen können (z.B. Cl2, CO2...)] in die Wanne.
angegebenen Verfallsdatum haltbar.
Nach dem Öffnen der Ampullen und Überführung des
Reagenzes in das Tropffläschchen kann das Reagenz
1 Monat (oder bis zum angegebenen Verfallsdatum, wenn
dieses kürzer ist) aufbewahrt werden: Notieren Sie das
Datum, an dem die Ampullen geöffnet wurden, auf dem
Etikett des Fläschchens.
• Notieren Sie die Referenznummer des Stammes auf ABLESUNG UND INTERPRETATION
dem dafür vorgesehenen seitlichen Abschnitt der Ablesung des Streifens
Inkubationswanne. (Die Referenznummer nicht auf dem
• Geben Sie 1 Tropfen ZYM B Reagenz in den DIM
Deckel notieren, da er während des Arbeitsablaufes
Test.
verwechselt werden oder abhanden kommen kann).
• Lesen Sie innerhalb 3 min alle Reaktionen mit der
• Nehmen Sie den Streifen aus der Verpackung.
Ablesetabelle der Arbeitsanleitung ab.
• Legen Sie den Streifen in die Wanne.
• Notieren Sie die Reaktionen in Form von + oder – auf
• Verwerfen Sie das Trockenmittel.
dem Ergebnisblatt.
Vorbereitung des Inokulums • Notieren Sie außerdem die Hämolyseart. Das Ergebnis
®
• Öffnen Sie eine Ampulle API Suspension Medium (2 dieses Tests wird bei der Interpretation des Streifens
ml) wie im Abschnitt „Vorsichtsmaßnahmen“ (Ampulle nicht berücksichtigt.
ohne Tropfpipette) beschrieben.
Interpretation
• Nehmen Sie mit einer Pipette oder PSIpette einige Ein-
zelkolonien vom Agar ab. Verwenden Sie vorzugsweise Die Identifizierung erhält man anhand des numerischen
junge Kulturen (18-24 h). Profils.
• Stellen Sie eine Keimsuspension entsprechend dem • Erstellung des numerischen Profils:
Trübungsstandard McFarland 1 her. Diese Suspension Die biochemischen Reaktionen auf dem Ergebnisblatt
muss sofort verwendet werden. sind in 3-er Gruppen eingeteilt. Jede positive Reaktion
• Notieren Sie die Art der Hämolyse auf dem Ergebnisblatt; erhält den Wert 1, 2 oder 4 je nach Position des Tests
die Hämolyse hat den Charakter eines Zusatztests. innerhalb der Gruppe (1., 2. oder 3. Test). Die
Zahlenwerte jeder Gruppe werden addiert (negative
Beimpfung des Streifens
Reaktion = 0), so erhält man 4 Ziffern, welche das
• Pipettieren Sie die Keimsuspension in die Mikroröhr- numerische Profil ergeben.
chen des Streifens. Um Blasenbildung am Boden der
• Identifizierung:
Röhrchen zu vermeiden, halten Sie die Inkubations-
Die Identifizierung erfolgt anhand der Datenbasis (V 1.2)
wanne leicht schräg und legen Sie die Pipette oder
* mit dem numerischen Profil:
PSIpette am Rand des Bechers auf:
- Schlagen Sie das Profil in der Profilliste der
- Füllen Sie für den DIM Test Röhrchen und Becher
Arbeitsanleitung nach. Diese Liste erhebt keinen
(ca. 100 µl). Achten Sie darauf, dass sich kein
Anspruch auf Vollständigkeit. Wenn Sie das
konvexer Meniskus bildet.
gesuchte Profil nicht finden, geben Sie es bitte in
- Füllen Sie für die Tests ESC bis TAG nur die
das unten angegebene Softwareprogramm ein oder
Röhrchen (ca. 50 µl).
wenden Sie sich an unseren wissenschaftlichen
ANMERKUNG: Ein korrektes Befüllen ist sehr wichtig. Kundendienst.
Ungenügend oder zu stark gefüllte Röhrchen können zu * mit der Identifizierungssoftware apiweb TM:
falsch positiven oder negativen Ergebnissen führen. - Geben Sie das 4-stellige numerische Profil über die
• Decken Sie die Inkubationswanne ab. Tastatur ein.
• Inkubieren Sie für 18 bis 24 h bei 36°C ± 2°C in aerober
Atmosphäre.
6 510 Listeria monocytogenes
QUALITÄTSKONTROLLE
Die Medien, Streifen und Reagenzien unterliegen in den verschiedenen Stadien der Produktion systematisch
durchgeführten Qualitätskontrollen.
Es kann eine rationalisierte Qualitätskontrolle durchgeführt werden, um sicherzustellen, dass die Leistungsdaten des
®
API LISTERIA Systems durch die Lagerung und den Transport nicht beeinflusst wurden. Diese Kontrolle kann
®
durchgeführt werden, indem die oben genannten Testanweisungen befolgt und die in der Norm CLSI M50-A Quality
Control for Commercial Microbial Identification Systems genannten Kriterien eingehalten werden.
®
Um die Leistung der DIM und XYL Tests zu überprüfen, kann die Testung mit dem Listeria innocua ATCC 33090™
Stamm durchgeführt werden. Die von bioMérieux durchgeführten Tests haben gezeigt, dass die DIM und XYL Tests die
®
empfindlichsten Tests auf dem API LISTERIA Streifen sind. Durch die Testung von Listeria innocua ATCC 33090 kann
eine Qualitätsminderung des Streifens nachgewiesen werden.
Für eine umfassende Qualitätskontrolle des Teststreifens müssen die folgenden drei Stämme getestet werden, um die
®
positiven und negativen Reaktionen für die Mehrzahl der Tests des API LISTERIA Streifens zu kontrollieren.
®
®
®
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* Ergebnis kann manchmal als (–) abgelesen werden.
Profile nach Anzucht auf Columbia-Agar mit Schafblut.
Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, die Qualitätskontrolle in Übereinstimmung mit den jeweils gültigen
Vorschriften durchzuführen.
LIMITIERUNGEN BESEITIGUNG DER ABFÄLLE

®
• Das API Listeria System dient nur zur Identifizierung Entsorgen Sie nicht gebrauchtes ZYM B Reagenz gemäß
der in der Datenbasis enthaltenen Keime der Gattung den Vorschriften für gefährliche chemische Abfälle.
Listeria (siehe Prozenttabelle am Ende der Entsorgen Sie alle gebrauchten oder nicht gebrauchten
Arbeitsanleitung). Andere Mikroorganismen können Reagenzien (bis auf ZYM B Reagenz) sowie
weder identifiziert noch ausgeschlossen werden. kontaminierte Einwegmaterialien gemäß den für infektiöse
• Es dürfen nur Reinkulturen verwendet werden. oder potenziell infektiöse Materialien geltenden
Bestimmungen.
ERWARTETE ERGEBNISSE Es liegt in der Verantwortung jedes Labors, die
Die erwarteten Ergebnisse der verschiedenen bio- entstandenen Abfälle und Abwässer gemäß der jeweiligen
chemischen Reaktionen entnehmen Sie der Prozent- Risikogruppe zu behandeln und deren Entsorgung in
tabelle am Ende dieser Arbeitsanleitung. Übereinstimmung mit den gültigen gesetzlichen
Bestimmungen sicherzustellen.
PERFORMANCE
643 Stämme unterschiedlicher Herkunft und Stämme aus
Stammsammlungen, die zu den Spezies der Datenbasis
gehören, wurden getestet:
- 98,91% der Stämme wurden korrekt identifiziert (mit
oder ohne Zusatztests).
- 0,62% der Stämme wurden nicht identifiziert.
- 0,47% der Stämme wurden falsch identifiziert.
ABLESETABELLE
MENGE ERGEBNISSE
TESTS AKTIVE BESTANDTEILE REAKTIONEN
(mg/Vert.) NEGATIV POSITIV
ZYM B / < 3 min
hellorange
Differenzierung
DIM Enzymsubstrat 0,106 beige-rosa orange
grau beige
Esculin 0,16
ESC Hydrolyse (ESCulin) hellgelb schwarz
Eisencitrat 0,024
4-Nitrophenyl-αD-
αMAN 0,045 α-MANnosidase farblos gelb
mannopyranosid
DARL D-Arabit 0,4 Säurebildung (D-ARabitoL)
XYL D-Xylose 0,4 Säurebildung (XYLose)
RHA L-Rhamnose 0,4 Säurebildung (RHAmnose)
Methyl-αD- Säurebildung (Methyl-αD- rot / gelb /

MDG 0,4
Glukopyranosid Glukopyranosid) rot orange gelb orange
RIB D-Ribose 0,4 Säurebildung (RIBose)
G1P Glukose-1-Phosphat 0,4 Säurebildung (Glukose-1-Phosphat)
TAG D-Tagatose 0,4 Säurebildung (TAGatose)
• Die angegebenen Mengen können je nach Konzentration der verwendeten Ausgangsmaterialien angeglichen werden.
• Einige Näpfchen enthalten Bestandteile tierischen Ursprungs, vor allem Peptone.
METHODIK S. I
PROFILLISTE S. II
PROZENTTABELLE S. II
LITERATUR S. III
SYMBOLE S. IV
ÄNDERUNGSVERLAUF
Art der Änderung :
N/A Nicht anwendbar (Erste Veröffentlichung)
Korrektur Korrektur von Fehlern im Dokument
Technische Änderung Ergänzung, Überarbeitung und/oder Entfernung von produktspezifischer Information
Administrative Änderung Einfügung von nicht technischen Änderungen, über die der Anwender informiert
werden soll.
Anmerkung: Kleinere Schreib-, Grammatik- und Formatierungsänderungen sind nicht im
Änderungsverlauf enthalten.
Freigabe- Referenz-
Art der Änderung Zusammenfassung der Änderung
Datum nummer
PACKUNGSGRÖSSE, PROBEN, SYMBOLE,
Administrative Änderung
ÄNDERUNGSVERLAUF
2015/03 07887Q ZUSAMMENSETZUNG
Technische Änderung PROBEN
VORSICHTSMASSNAHMEN
BIOMERIEUX, das blaue Logo, API und apiweb sind verwendete, angemeldete und/oder eingetragene Marken von bioMérieux, einer ihrer
Niederlassungen oder eines ihrer Unternehmen.
CLSI ist eine Marke von Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Die Marke ATCC, die Bezeichnung ATCC sowie alle ATCC Katalognummern sind Marken der American Type Culture Collection.
Alle anderen Marken und Produktnamen sind Eigentum ihrer jeweiligen Besitzer.
673 620 399 RCS LYON

bioMérieux SA Tel. 33 (0)4 78 87 20 00
10300 07887Q - es - 2015/03
®
Listeria
Sistema de identificación de Listeria
INTRODUCCIÓN Y OBJETO DEL ENSAYO

®
La galería API Listeria es un sistema estandarizado para Consejo de prudencia
la identificación de Listeria que utiliza ensayos P210 : Mantener alejado del calor, de superficies
miniaturizados, así como una base de datos específica. calientes, de chispas, de llamas abiertas y de cualquier
La lista completa de las bacterias que pueden otra fuente de ignición. No fumar.
identificarse utilizando este sistema está indicada en la P280 : Llevar guantes/prendas/gafas/máscara de
Tabla de Identificación incluida al final de esta ficha protección.
técnica. P301 + P312 : EN CASO DE INGESTIÓN: Llamar a un
CENTRO DE TOXICOLOGĺA/médico si la persona se
PRINCIPIO encuentra mal.
®
La galería API Listeria consta de 10 microtubos que P302 + P352 : EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL:
contienen substratos deshidratados, y permiten la Lavar con abundante agua.
realización de ensayos enzimáticos o de fermentación de P304 + P340 : EN CASO DE INHALACIÓN: Transportar a
azúcares. la persona al aire libre y mantenerla en una posición que
Las reacciones que se producen durante la incubación se le facilite la respiración.
traducen en cambios de color, bien espontáneos o bien P305 + P351 + P338 : EN CASO DE CONTACTO CON
provocados mediante la adición de reactivos. LOS OJOS: Aclarar cuidadosamente con agua durante
La lectura de estas reacciones se realiza con la ayuda de varios minutos. Quitar las lentes de contacto, si lleva y
la Tabla de Identificación, y la interpretación se realiza resulta fácil. Seguir aclarando.
tras consultar la lista de perfiles de la ficha técnica o con Para más información, consulte la ficha de seguridad.
la ayuda de un software de identificación.
PRESENTACIÓN (kit de 10 ensayos): REACTIVOS Y MATERIAL NECESARIOS PERO NO
-
®
10 galerías API Listeria (STR) SUMINISTRADOS
®
- 10 ampollas de API Suspension Medium 2 ml (MED) Reactivos
- 1 ampolla de reactivo ZYM B (ZYM B) - McFarland Standard (ref. 70 900), punto 1
- 10 cámaras de incubación (INCUB) - Programa de identificación apiweb TM (Réf. 40 011)
- 10 hojas de resultados (SHEET)
- 1 Ficha técnica suministrada en el equipo o a Material
descargar en www.biomerieux.com/techlib. - Pipetas o PSIpettes
- Protege-ampollas
COMPOSICIÓN
- Gradillas para ampollas
Galería - Equipo general de laboratorio de bacteriología
®
La composición de la galería API Listeria puede verse en
la Tabla de Identificación de la presente ficha técnica. PRECAUCIONES DE UTILIZACIÓN
Medio • Para diagnóstico in vitro y control microbiológico.
• Exclusivamente para uso profesional.
MED Agua desmineralizada
® • Referirse a las indicaciones de peligro "H" y a las
(API
medidas de precaución "P" indicadas anteriormente.
Suspension
• Este producto contiene compuestos de origen animal.
Medium)
La falta de control sobre el origen y/o el estado sanitario
2 ml
de los animales, no nos permite garantizar de forma
Reactivo absoluta que estos productos no contengan algún
agente patógeno transmisible, por lo que se recomienda
Reactivo Fast Blue BB (matière active) 0,12 g
manipularlos mediante las precauciones de utilización
ZYM B * Méthanol 40 ml
relativas a los productos potencialmente infecciosos:
8 ml Diméthylsulfoxide (DMSO) 60 ml
(no ingerir, ni inhalar).
Las cantidades indicadas pueden ajustarse en función de los • Todas las muestras, cultivos bacterianos y productos
títulos de las materias primas. inoculados deben ser considerados como
* Palabra de advertencia: PELIGRO potencialmente infecciosos y ser manipulados de
manera apropiada.
Durante toda la manipulación deben respetarse las
normas de asepsia y las precauciones habituales de
manipulación para el grupo bacteriano estudiado;
®
consultar: "CLSI M29-A, Protection of Laboratory
Indicación de peligro Workers From Occupationally Acquired Infections;
H226 : Líquidos y vapores inflamables. Approved Guideline - Revisión en vigor". Para
H302 : Nocivo en caso de ingestión. información complementaria sobre las precauciones de
H311 : Tóxico en contacto con la piel. manipulación, consultar: "Biosafety in Microbiological
H315 : Provoca irritación cutánea. and Biomedical Laboratories - CDC/NIH - última
H319 : Provoca irritación ocular grave. edición" o la reglamentación vigente en el país de
H331 : Tóxico en caso de inhalación. utilización.
H335 : Puede irritar las vías respiratorias.
H370 : Provoca daños en los órganos.
bioMérieux SA Español - 1
api® Listeria 07887Q - es - 2015/03
• No emplear los reactivos después de su fecha de Reactivo :

caducidad. Los reactivos deben conservarse en la oscuridad a 2-8ºC
• Antes de su utilización, verificar la integridad del envase hasta la fecha límite de utilización indicada en el envase.
y de sus componentes. Tras la apertura de las ampollas y transferir los reactivos
• No utilizar galerías que hayan sufrido una alteración física: a los frascos cuentagotas, los reactivos pueden
cúpula deformada, bolsa de deshidratante abierta ... conservarse un mes (o hasta la fecha límite de su
• Antes de su utilización, permitir que los reactivos utilización si ésta fuera anterior): anotar la fecha de
alcancen la temperatura ambiente. apertura sobre la etiqueta de los frascos.
• Abrir las ampollas con delicadeza del modo siguiente: El reactivo ZYM B es muy sensible a la luz: verificar el
- Introducir la ampolla en el protege-ampolla. aspecto del reactivo antes de transferirlo al cuenta-gotas.
- Sujetar verticalmente el conjunto en una El reactivo ZYM B presenta en su estado normal una
mano (tapón blanco hacia arriba). coloración amarilla a ámbar. Eliminar el reactivo si se
- Presionar a fondo el tapón. observa una coloración rosa (síntoma de alteración). Una
- Ejercer una presión horizontal con el pulgar exposición corta a la luz del laboratorio (Alrededor de
en la parte estriada del tapón para romper la 1 hora) entraña una degradación del reactivo.
extremidad de la ampolla. Comprobar que el reactivo se guarda en nevera
- Retirar la ampolla del protege-ampolla y inmediatamente después de su utilización.
conservarlo para un próximo uso.
* Ampolla sin tapón cuentagotas : UTILIZACIÓN DEL REACTIVO
- Retirar delicadamente el tapón.
* Ampolla con tapón cuentagotas : • Abrir la ampolla de reactivo según se indica en el
- Invertir la ampolla y mantenerla en posición párrafo "Precauciones de utilización" (ampolla con
vertical. tapón cuentagotas).
- Aplicar una presión lateral sobre el tapón • Antes de utilizar cada ampolla de reactivo, se
para transferir la totalidad del reactivo al recomienda realizar una prueba de control de calidad
®
frasco cuentagotas. con la cepa ATCC 33090™ indicada en el párrafo
NOTA : Para usar posteriormente, se Control de Calidad, con el fin de eliminar cualquier
recomienda apretar en el tapón antes de reactivo defectuoso.
invertir la ampolla con el fin de aspirar todo • Dispensar una gota de reactivo.
resto de reactivo y evitar que se derrame por • Volver a cerrar bien el frasco después de su uso y
el exterior del tapón. conservar según se indica en el párrafo "Condiciones de
• Los resultados deben obtenerse siguiendo la almacenamiento".
metodología indicada en la presente ficha técnica. Toda
MUESTRAS
desviación de la metodología puede alterar la calidad de ®
los mismos. La galería API Listeria no debe ser utilizada
• La interpretación de los resultados del test debe ser directamente a partir de muestras de origen clínico o de
realizada teniendo en cuenta un contexto clínico o de otro tipo.
otro tipo, el origen de las muestras, los aspectos macro En una primera fase, los microorganismos a identificar
y microscópicos de la cepa y, eventualmente, los deben aislarse sobre un medio de cultivo apropiado
resultados de otros tests, particularmente del siguiendo las técnicas usuales en bacteriología.
antibiograma.
MODO OPERATIVO
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Selección de las colonias
Galerías STR: • Verificar que la cepa a estudiar pertenezca al género
Listeria (bacilos cortos, Gram-positivos, polimorfos,
Las galerías se conservan a 2-8ºC hasta la fecha límite
móviles a 25°C pero no a 37°C, catalasa positivos y
de utilización indicada en el envase.
oxidasa negativos).
Medios MED: • Dado que las muestras contienen con frecuencia una
Los medios se conservan a 2-30ºC hasta la fecha límite mezcla de varias especies de Listeria, resulta preferible
de utilización indicada en el envase. realizar un subcultivo sobre agar con sangre a partir de
una colonia bien aislada. Incubar la placa 24 horas a
36°C ± 2°C.
NOTA : Se pueden usar los siguientes medios para aislar
las colonias antes del empleo de la galería
®
API Listeria :
- medios a base de agar con sangre no selectivos, tipo
Columbia o TSA, con o sin antibióticos ;
- medios selectivos para Listeria con excepción del medio
McBride que inhibe la expresión enzimática de bacterias
®
sobre la galería API Listeria. Si se emplease este
medio para el aislamiento, realizar un subcultivo sobre
agar con sangre.
Preparación de la galería
LECTURA E INTERPRETACIÓN
• Reunir fondo y tapa de una cámara de incubación y
repartir aproximadamente 3 ml de agua destilada o Lectura de la galería
desmineralizada [o cualquier agua sin aditivos ni • Agregar una gota de reactivo ZYM B al ensayo DIM .
derivados susceptibles a liberar gases (Ej. Cl2, CO2 ...)] • Pasados 3 minutos leer todas las reacciones haciendo
en los alvéolos del fondo para crear una atmósfera referencia a la Tabla de Identificación de la ficha
húmeda. técnica.
• Escribir la referencia de las muestras o cepas en la • Anotar las reacciones de +/- en la hoja de resultados.
lengüeta lateral de la cámara. (No escribir la referencia • Anotar igualmente el tipo de hemólisis. El resultado de
sobre la tapa, ya que ésta puede resultar extraviada este ensayo no se tiene en cuenta en la interpretación
durante la manipulación). de la galería.
• Sacar una galería de su envase individual.
• Colocar la galería en la cámara de incubación. Interpretación
• Tirar la bolsita antihumedad. La identificación se obtiene a partir del perfil numérico.
Preparación del inóculo • Determinación del perfil numérico:
® En la hoja de resultados, los tests están separados en
• Abrir una ampolla de API Suspension Medium (2 ml)
grupos de 3 y se asigna para cada uno un valor 1, 2 ó 4.
como se indica en el párrafo "Precauciones de
Sumando en el inferior de cada grupo los números que
utilización" (ampolla sin tapón cuentagotas).
corresponden a reacciones positivas, se obtienen
• Con la ayuda de una pipeta o PSIpette, coger colonias
4 cifras que constituye el perfil numérico.
bien aisladas. Se recomienda utilizar cultivos jóvenes
(18-24 horas). • Identificación:
• Realizar una suspensión de turbidez igual a Se realiza a partir de la base de datos (V1.2)
1 de McFarland. Esta suspensión debe ser utilizada de * Con la ayuda del Perfil Numérico:
inmediato. - Localizar el perfil numérico en la lista de la ficha
• Observar el tipo de hemólisis y anotarlo en la hoja de técnica; esta lista no es exhaustiva, en caso de un
resultados, ya que esta característica constituye un perfil inexistente, consultar en el programa
ensayo adicional. informático citados o con la Asistencia Técnica de
bioMérieux.
Inoculación de la galería
* Por medio del software de identificación apiweb TM:
• Repartir la suspensión bacteriana precedente en los - Introducir manualmente por teclado el perfil
tubos, evitando la formación de burbujas (para ello, numérico de 4 cifras.
inclinar la cámara de incubación hacia delante y colocar
la pipeta o la PSIpette en un lado de la cúpula):
- Llenar el tubo y la cúpula del ensayo DIM (100 µl
aprox.), cuidando que no se produzca un menisco
convexo.
- Llenar solamente la parte del tubo de los ensayos 6 510 Listeria monocytogenes
ESC a TAG (50 µl aprox.).
NOTA: La calidad de llenado es muy importante: los
tubos excesiva o insuficientemente llenos originan de
resultados falsos positivos o negativos.
• Cerrar la cámara de incubación.
• Incubar de 18-24 horas a 36ºC ± 2ºC en atmósfera
aerobia.
CONTROL DE CALIDAD
Los medios, galerías y reactivos son objeto de controles de calidad sistemáticos durante las diferentes etapas de su
fabricación.
El Control de Calidad Mínimo, puede ser utilizado para verificar que las condiciones de almacenamiento y transporte no
®
han tenido impacto sobre las prestaciones de la galería API LISTERIA. Este control puede realizarse siguiendo las
®
instrucciones y criterios esperados que aparecen más abajo, junto con CLSI M50-A Quality Control for Commercial
Microbial Identification Systems.
®
El control puede realizarse utilizando la cepa Listeria innocua ATCC 33090™ para evaluar las prestaciones de las
®
pruebas DIM y XYL. En efecto, estudios realizados por bioMérieux han monstrado que en la galería API LISTERIA, las
pruebas DIM y XYL son pruebas más sensibles. Por consecuencia, la integridad de la galería puede verificarse
utilizando la cepa Listeria innocua ATCC 33090.
En el caso en el que se realize un Control de Calidad Completo, las tres cepas siguientes deberán probarse para
®
verificar las reacciones positivas y negativas de la mayoría de las pruebas de la galería API LISTERIA.
® ®
®
®
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* Ocasionalmente (–).
Perfiles obtenidos después de cultivo sobre agar Columbia con sangre de carnero.
El usuario es responsable de asegurarse de que el control de calidad ha sido realizado conforme a la legislación local vigente.
LÍMITES DEL ENSAYO ELIMINACION DE LOS DESECHOS

®
• El sistema API Listeria está destinado únicamente a la Eliminar el reactivo ZYM B no utilizado siguiendo los
identificación de bacterias del género Listeria presentes procedimientos relativos a los desechos químicos
en la base de datos (ver Tabla de Identificación al final peligrosos.
de la presente ficha técnica), y sólo a ellas. No puede Eliminar todos los reactivos utilizados o no utilizados (otro
utilizarse para identificar otros microorganismos ni para que el reactivo ZYM B) así como el material de un solo
excluir su presencia. uso contaminado siguiendo los procedimientos relativos a
• Sólo se deben utilizar cultivos puros que contengan un los productos infecciosos o potencialmente infecciosos.
sólo tipo de microorganismo. Cada laboratorio es responsable de la gestión de los
desechos y efluentes que produce, según su naturaleza y
RESULTADOS ESPERADOS
peligrosidad, garantizando (o haciendo garantizar) su
Consultar la Tabla de Identificación que se incluye al final tratamiento y eliminación según las reglamentaciones
de esta ficha técnica para aclarar los resultados aplicables.
esperados en las diferentes reacciones bioquímicas.
PRESTACIONES
Han sido ensayadas 643 cepas de diversos orígenes, así
como cepas de colección pertenecientes a especies de la
base de datos:
- 98,91% de las cepas han sido identificadas
correctamente (con o sin ensayos complementarios).
- 0,62% de las cepas no han sido identificadas.
- 0,47% de las cepas se han identificado
incorrectamente.
TABLA DE IDENTIFICACIÓN
COMPONENTES CANT RESULTADOS

TESTS REACCIONES
ACTIVOS (mg/cúp.) NEGATIVO POSITIVO
ZYM B / < 3 min.
naranja pálido
Diferenciación
DIM Substrato enzimático 0,106 rosa beige naranja
gris beige
Esculina 0,16
ESC hidrólisis (ESCulina) amarillo pálido negro
Citrato férrico 0,024
4-nitrofenil-αD-
αMAN 0,045 α-MANosidasa incoloro amarillo
manopiranosida
DARL D-Arabitol 0,4 acidificación (D-ARabitoL)
XYL D-Xilosa 0,4 acidificación (XiLosa)
RHA L-Rhamnosa 0,4 acidificación (RHAmnosa) amarillo/
rojo /
MDG Metil-αD-glucopiranosido 0,4 acidificación (Metill-αD-Glucopiranosido) amarillo
rojo anaranjado
acidificación (RIBosa) anaranjado
RIB D-Ribosa 0,4
G1P Glucosa-1-Fosfato 0,4 acidificación (Glucosa-1-Fosfato)
TAG D-Tagatosa 0,4 acidificación (TAGatosa)
• Se pueden ajustar las cantidades indicadas en función de los títulos de las materias primas.
• Ciertas cúpulas contienen componentes de origen animal, especialmente peptonas.
METODOLOGÍA p. I
LISTA DE PERFILES NUMÉRICOS p. II
TABLA DE IDENTIFICACIÓN p. II
BIBLIOGRAFÍA p. III
CUADRO DE SÍMBOLOS p. IV
HISTÓRICO DE REVISIONES
Categoría de tipo de cambio :
N/A No aplica (primera modificación)
Corrección Corrección de anomalías en la documentación
Cambio técnico Adición, revisión y/o eliminación de información relativa al producto
Administrativo Implementación de cambios no técnicos notables para el usuario.
Nota : Los cambios menores de errores tipográficos, gramaticales, y de formato no
aparecen incluidos en el historial de revisiones.
Fecha de Versión Tipo de cambio Resumen de cambios

publicación
PRESENTACIÓN, MUESTRAS,
Administrativo TABLA DE SÍMBOLOS,
HISTÓRICO DE REVISIONES
2015/03 07887Q
COMPOSICIÓN
Cambio técnico
PRECAUCIONES DE UTILIZACIÓN
BIOMERIEUX, el logo azul,API, y apiweb son marcas utilizadas , depositadas y/o registradas pertenecientes a bioMérieux o a cada una de sus filiales, o a cada
una de sus sociedades.
CLSI es una marca perteneciente Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
La marca ATCC, la denominación ATCC y todas las referencias de catálogo ATCC son marcas de American Type Culture Collection.
Las otras marcas y nombres de productos mencionados son marcas comerciales de sus respectivos propietarios.
673 620 399 RCS LYON

10300 07887Q - it - 2015/03
®
Listeria
Sistema di identificazione delle Listeria
INTRODUZIONE E OBIETTIVI DEL TEST

API
®
Listeria è un sistema standardizzato per Consiglio di prudenza
l’identificazione delle varie specie di Listeria che utilizza P210 : Tenere lontano da fonti di calore, superfici calde,
test miniaturizzati insieme ad una base di dati specifica. scintille, fiamme libere o altre fonti di accensione. Non
La lista completa dei batteri che si possono identificare fumare.
con questo sistema è presente nella Tabella di P280 : Indossare guanti/indumenti protettivi/proteggere gli
identificazione che si trova nella parte finale della scheda occhi/il viso.
tecnica. P301 + P312 : IN CASO DI INGESTIONE: contattare un
CENTRO ANTIVELENI/un medico in caso di malessere.
PRINCIPIO P302 + P352 : IN CASO DI CONTATTO CON LA PELLE:
®
La galleria API Listeria è composta da 10 microprovette lavare abbondantemente con acqua.
contenenti dei substrati disidratati, per la ricerca delle P304 + P340 : IN CASO DI INALAZIONE: trasportare
attività enzimatiche e fermentative degli zuccheri. l’infortunato all’aria aperta e mantenerlo a riposo in
Le reazioni prodotte durante l’incubazione si traducono in posizione che favorisca la respirazione.
viraggi cromatici spontanei o rivelati dopo l’aggiunta di P305 + P351 + P338 : IN CASO DI CONTATTO CON GLI
reattivi ausiliari. OCCHI: sciacquare accuratamente per parecchi minuti.
La lettura di queste reazioni, può essere effettuata Togliere le eventuali lenti a contatto se è agevole farlo.
utilizzando la Tabella di Lettura, mentre l’identificazione Continuare a sciacquare.
può essere ottenuta consultando la Lista dei Profili Per informazioni più complete consultare la Scheda di
presente alla fine di questa scheda tecnica o servendosi Sicurezza.
di un Software di identificazione.
REATTIVI E MATERIALI NECESSARI MA NON
CONTENUTO DELLA CONFEZIONE (10 test) :
®
FORNITI
- 10 gallerie API Listeria (STR)
® Reattivi
- 10 fiale di API Suspension Medium, 2 ml (MED)
- 1 fiala di reattivo ZYM B (ZYM B) - McFarland Standard (cod. 70 900), punto 1
- 10 vaschette di incubazione (INCUB) - Software di identificazione apiweb TM (Cod. 40 011)
- 10 schede per la registrazione dei risultati (SHEET) (consultare bioMérieux)
- 1 Scheda tecnica fornita nella confezione o scaricabile Materiale
da www.biomerieux.com/techlib
- Pipette o PSIpette
COMPOSIZIONE - Proteggi-fiale
Gallerie - Porta-fiale
®
La composizione delle gallerie API Listeria è riportata - Materiale generico per laboratorio di batteriologia
nella Tabella di Lettura di questa scheda tecnica.
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
Terreno
• Per diagnostica in vitro e per controllo micro-
MED Acqua demineralizzata biologico.
®
(API • Unicamente per uso professionale.
Suspension • Prestare attenzione alle frasi di rischio “H” ed ai consigli
Medium) di prudenza “P” sopra riportati.
2 ml • Questa confezione contiene dei componenti di origine
animale. Poiché i controlli sull’origine e/o sullo stato
Reattivo
sanitario degli animali non possono garantire in maniera
Reattivo Fast Blue BB (sostanza attiva) 0,12 g assoluta che questi prodotti non contengano nessun
ZYM B * Metanolo 40 ml agente patogeno trasmissibile, si raccomanda di
8 ml Dimetilsulfossido 60 ml manipolarli con le precauzioni d’uso relative ai prodotti
potenzialmente infettivi (non ingerire, non inalare).
Le quantità indicate possono essere aggiustate in funzione dei • I prelievi, le colture batteriche ed i prodotti seminati
titoli delle materie prime utilizzate.
devono essere considerati come potenzialmente infettivi
* Avvertenza: PERICOLO e devono essere manipolati in maniera appropriata da
operatori competenti e preparati. Le tecniche di asepsi e
le precauzioni d’uso per il gruppo batterico studiato
devono essere rispettate durante tutta la manipolazione;
®
fare riferimento a "CLSI M29-A, Protection of
Indicazione di pericolo Laboratory Workers From Occupationally Acquired
Infections; Approved Guideline - Revisione in vigore".
H226 : Liquido e vapori infiammabili. Per informazioni complementari sulle precauzioni nella
H302 : Nocivo se ingerito. manipolazione, fare riferimento a "Biosafety in
H311 : Tossico per contatto con la pelle. Microbiological and Biomedical Laboratories – CDC/NIH
H315 : Provoca irritazione cutanea. - Ultima edizione", oppure alla legislazione in vigore nel
H319 : Provoca grave irritazione oculari. paese di utilizzazione.
H331 : Tossico se inalato.
H335 : Può irritare le vie respiratorie.
H370 : Provoca danni agli organi.
bioMérieux SA Italiano - 1
api® Listeria 07887Q - it - 2015/03
• Non utilizzare i reattivi dopo la data di scadenza. Il reattivo ZYM B in condizioni normali si presenta di colore
• Prima dell’uso verificare l’integrità dell’imballaggio e dei da giallo ad ambrato.
componenti. Non utilizzare il reattivo se questo presenta una colorazione
• Non utilizzare gallerie che abbiano subito una rosa (segno di avvenuta alterazione). Anche una breve
alterazione fisica : cupole deformate, sacchetto del esposizione alla luce del laboratorio (di circa un’ora) provoca
disidratante aperto,… l’alterazione del reattivo.
• Prima dell’uso, riportare i reattivi a temperatura Assicurarsi che il reattivo sia posto nel frigorifero
ambiente. immediatamente dopo l’uso.
• Aprire le fiale delicatamente come indicato di seguito :
- Inserire la fiala nel proteggi-fiala. IMPIEGO DEL REATTIVO
- Impugnare la fiala in posizione verticale • Aprire la fiala del reattivo come indicato nel paragrafo
(cappuccio bianco rivolto verso l'alto). "Avvertenze e Precauzioni" (fiala con cappuccio conta-
- Spingere bene in fondo il cappuccio. gocce).
- Premere orizzontalmente con il pollice sulla • Prima di utilizzare ogni fiala del reattivo, si raccomanda
parte striata del cappuccio fino a rompere di eseguire un controllo di qualità utilizzando il ceppo
l'estremità della fiala. ATCC® 33090™, indicato nel paragrafo Controllo di
- Estrarre la fiala dal proteggi-fiala e Qualità, per escludere qualsiasi reattivo difettoso.
conservare il proteggi-fiala per una • Versare una goccia di reattivo.
successiva utilizzazione. • Dopo l’uso richiudere bene il flacone e conservarlo come
* Fiala senza tappo conta-gocce : indicato nel paragrafo "Conservazione del reattivo".
- Togliere delicatamente il cappuccio.
* Fiala con tappo conta-gocce: CAMPIONI
- Capovolgere la fiala e mantenerla in
I campioni clinici o di altra natura non possono essere
posizione verticale. ®
utilizzati direttamente con API Listeria.
- Esercitare una pressione laterale sul
I microrganismi da identificare con tale galleria devono
cappuccio per trasferire tutto il reattivo nel
dapprima essere isolati su un idoneo terreno di coltura
flacone conta-gocce.
utilizzando le normali tecniche batteriologiche.
NOTA : Per ogni ulteriore utilizzazione, si
raccomanda di premere sul tappo prima di PROCEDIMENTO
capovolgere la fiala per aspirare ogni eccesso
di reattivo ed evitare di spanderlo all’esterno Selezione delle colonie
del tappo. • Verificare che il ceppo da identificare appartenga al
• Le performance riportate di seguito sono state ottenute genere Listeria (corti bacilli Gram positivi, polimorfi,
seguendo il procedimento indicato in questa scheda mobili a 25°C ma non a 37°C, catalasi positivi e ossidasi
tecnica. Qualsiasi deviazione dal procedimento indicato negativi).
può alterare i risultati. • Poiché i prelievi, a volte, contengono
• L’interpretazione dei risultati del test deve tener conto contemporaneamente più specie di Listeria, (colonie
del contesto clinico o di altra natura, dell’origine del miste) è preferibile eseguire una subcoltura su un
campione, degli aspetti macro e microscopici del ceppo terreno al sangue partendo da una colonia bene isolata.
ed, eventualmente, dei risultati di altri esami, in Incubare quindi il terreno per 24 ore a 36°C ± 2°C.
particolare dell’antibiogramma. NOTA: Si consigliano i seguenti terreni di isolamento per
CONDIZIONI DI CONSERVAZIONE la coltura delle colonie da utilizzare per l’allestimento della
®
galleria API Listeria :
Gallerie STR:
- terreni agarizzati al sangue, non selettivi, a base di
Le gallerie si conservano a 2-8°C fino alla data di Columbia o di TSA, con o senza antibiotici ;
scadenza indicata sulla confezione. - terreni selettivi per Listeria tranne il terreno McBride
Terreni MED: poiché inibisce l’espressione enzimatica dei batteri
®
sulla galleria API Listeria. Se si utilizza questo terreno
I terreni si conservano a 2-30°C fino alla data di scadenza per l’isolamento delle colonie,eseguire una subcoltura
indicata sulla confezione. su di un terreno al sangue.
Reattivo : Preparazione della galleria
Il reattivo si conserva al buio a 2-8°C fino alla data di • Riunire fondo e coperchio di una vaschetta di
scadenza indicata sulla confezione. incubazione e distribuire circa 3 ml di acqua distillata o
Dopo l’apertura della fiala ed il suo trasferimento nel demineralizzata [o semplicemente dell'acqua senza
flacone conta-gocce, il reattivo può essere conservato per additivi o derivati che potrebbero liberare gas (ad es.
1 mese (o fino alla data di scadenza se questa è Cl2, CO2 ...)] negli alveoli per creare un ambiente umido.
anteriore) : annotare la data di apertura sull’etichetta • Annotare il riferimento del ceppo sulla linguetta laterale
del flacone. della vaschetta. (Non annotare il riferimento sul
Il reattivo ZYM B è estremamente sensibile alla luce : coperchio, in quanto potrebbe essere spostato al
verificare l’aspetto del reattivo prima di trasferirlo nel momento della manipolazione).
flacone conta-gocce. • Estrarre la galleria dal suo involucro.
• Mettere la galleria nella vaschetta di incubazione.
• Eliminare il disidratante.
Preparazione dell’inoculo LETTURA E INTERPRETAZIONE

®
• Aprire una fiala di API Suspension Medium (2 ml) Lettura della galleria
come indicato al paragrafo “Avvertenze e Precauzioni”
• Aggiungere 1 goccia di reattivo ZYM B al test DIM .
(fiala senza cappuccio conta-gocce).
• Procedere entro 3 minuti alla lettura di tutte le reazioni
• Servendosi di una pipetta o di una PSIpetta, prelevare
facendo riferimento alla Tabella di Lettura di questa
alcune colonie ben isolate utilizzando preferibilmente
scheda tecnica.
colonie giovani (18-24 ore).
• Annotare le reazioni +/- sulla scheda per la registrazione
• Preparare una sospensione d’opacità equivalente a
dei risultati.
quella dello standard 1 di McFarland ed utilizzarla
• Annotare anche il tipo di emolisi. Il risultato di questo
immediatamente.
test (aggiuntivo) non viene preso in considerazione
• Annotare sull’apposita scheda per la registrazione dei
nell’interpretazione della galleria.
risultati l’eventuale tipo di emolisi riscontrata (questa
Interpretazione
informazione rappresenta un test aggiuntivo).
L'identificazione è ottenuta mediante un profilo
Inoculo della galleria numerico.
• Distribuire la sospensione batterica precedentemente • Determinazione del profilo numerico:
preparata nelle microprovette evitando la formazione di Sulla scheda dei risultati, i test sono separati in gruppi di
bolle (a tale scopo, inclinare in avanti la vaschetta di tre e ad ognuno viene attribuito un valore pari a
incubazione e sistemare la pipetta o la PSIpetta sul lato 1, 2 o 4. All’interno di ogni tripletta vengono sommati fra
interno della cupola) : di loro i valori corrispondenti alle sole reazioni positive,
- Riempire provetta e cupola del test DIM (con circa ottenendo così numero di 4 cifre che costituisce il profilo
100 µl di sospensione) evitando di creare un numerico.
menisco convesso.
- Riempire solo la provetta dei test da ESC a TAG (con • Identificazione:
circa 50 µl di sospensione). Si ottiene partendo dalla base dei dati (V1.2)
* Utilizzando il profilo numerico:
NOTA : La qualità del riempimento è molto importante: un - Ricercare il profilo nella lista dei profili della scheda
riempimento insufficiente o eccessivo delle micro- tecnica; poiché questa lista non è esaustiva, in caso
provette può provocare risultati falsamente positivi o di profilo inesistente, consultare il software indicato
negativi. di seguito o il Customer Service bioMérieux.
• Richiudere la vaschetta di incubazione. * Tramite il software di identificazione apiweb TM :
• Incubare per 18-24 ore a 36°C ± 2°C in aerobiosi. - Digitare sulla tastiera il profilo numerico a 4 cifre.
CONTROLLO DI QUALITÀ
Le gallerie, i terreni, ed i reattivi sono sottoposti a controlli di qualità sistematici nelle diverse fasi del ciclo produttivo.
Il Controllo di Qualità Minimo può essere utilizzato per verificare che le condizioni di conservazione e di trasporto non
®
hanno impatto sulle performance della galleria API LISTERIA. Questo controllo può essere eseguito seguendo le
®
istruzioni ed i criteri riportati sopra, vincolati al referenziale CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial
Per valutare le performance dei test DIM e XYL, il Controllo può essere fatto utilizzando il ceppo Listeria innocua
® ®
ATCC 33090™. In effetti, studi eseguiti da bioMérieux hanno mostrato che sulla galleria API LISTERIA, i test DIM e
XYL sono i test più sensibili. Quindi, quando viene eseguito il controllo, l’integrità della galleria può essere verificata
utilizzando il ceppo Listeria innocua ATCC 33090.
Nel caso in cui per questa galleria si debba eseguire un Controllo di Qualità Completo, per verificare le reazioni
®
positive e negative della maggior parte dei test della galleria API LISTERIA dovranno essere testati i tre ceppi seguenti.
® ®
®
®
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* Occasionalmente (–).
Profili ottenuti dopo coltura su agar Columbia con sangue di montone.
E’ responsabilità dell’utilizzatore assicurarsi che il controllo di qualità corrisponda a quanto previsto dalla legislazione
vigente.
LIMITI DEL METODO PERFORMANCE

®
• Il sistema API Listeria è destinato all’identificazione Sono stati testati 643 ceppi di diversa origine e ceppi di
dei batteri appartenenti al genere Listeria inclusi nella collezione appartenenti alle specie incluse nella base
base dei dati (vedere la Tabella di Identificazione alla dei dati:
fine della scheda tecnica) e solo di questi. Non può - il 98,91% dei ceppi sono stati identificati
essere utilizzato per identificare altri microrganismi o correttamente (con o senza test complementari).
per escluderne la presenza. - lo 0,62% dei ceppi non è stato identificato.
• Devono essere utilizzate solo colonie pure, contenenti - lo 0,47% dei ceppi non è stato identificato
cioè un solo tipo di microrganismo. correttamente.
RISULTATI ATTESI SMALTIMENTO DEI RIFIUTI

Per i risultati attesi per le differenti reazioni biochimiche, Smaltire il reattivo ZYM B non utilizzato seguendo le
fare riferimento alla Tabella di identificazione, presente procedure relative ai rifiuti chimici pericolosi.
nella parte finale di questa scheda tecnica. Smaltire tutti i reattivi utilizzati o non utilizzati (ad
esclusione del reattivo ZYM B) ed i materiali monouso
contaminati seguendo le procedure relative ai prodotti
infettivi o potenzialmente infettivi.
E’ responsabilità di ogni laboratorio gestire i rifiuti e gli
effluenti prodotti a seconda della loro natura e della loro
pericolosità ed assicurarne (o farne assicurare) il
trattamento e lo smaltimento conformemente alla
legislazione vigente.
TABELLA DI LETTURA
QUANTITA’ RISULTATI
TEST COMPONENTI ATTIVI REAZIONI
(mg/cup.) NEGATIVO POSITIVO
ZYM B / < 3 min
arancione chiaro
Differenziazione
DIM Substrati enzimatici 0,106 rosa-beige arancione
grigio-beige
Esculina 0,16
ESC idrolisi (ESCulina) giallo chiaro nero
Citrato di ferro 0,024
4-nitrofenil-αD-
αMAN 0,045 α-MANnosidasi incolore giallo
mannopiranoside
DARL D-Arabitolo 0,4 acidificazione (D-ARabitoLo)
XYL D-Xilosio 0,4 acidificazione (XiLosio)
RHA L-Ramnosio 0,4 acidificazione (RAmnosio)
Metil-αD- Acidificazione (Metil-αD- rosso / giallo/

MDG 0,4
glucopiranoside Glucopiranoside) rosso arancione giallo arancione
RIB D-Ribosio 0,4 acidificazione (RIBosio)
G1P Glucosio-1-fosfato 0,4 acidificazione (Glucosio-1-fosfato)
TAG D-Tagatosio 0,4 acidificazione (TAGatosio)
• Le quantità indicate possono essere aggiustate in funzione dei titoli delle materie prime.
• Alcune cupole contengono dei componenti di origine animale, in particolare dei peptoni.
PROCEDIMENTO p. I
LISTA DEI PROFILI NUMERICI p. II
TABELLA DI IDENTIFICAZIONE p. II
BIBLIOGRAFIA p. III
TABELLA DEI SIMBOLI p. IV
TABELLA DELLE REVISIONI

Legenda dei tipi di modifica :
N/A Non applicabile (prima versione)
Correzione Correzione di anomalie documentali
Modifica tecnica Aggiunta, modifica e/o rimozione di informazioni relative al prodotto
Amministrativa Implementazione di modifiche non tecniche da evidenziare all’utilizzatore
Nota : Le modifiche minori di tipografia, di grammatica e di impaginazione non sono
riportate nello storico delle revisioni
Data di Riferimento del Tipo di Riepilogo delle modifiche

emissione documento modifica
TABELLA DEI SIMBOLI, CONTENUTO
Amministrativa DELLA CONFEZIONE, CAMPIONI
2015/03 07887Q TABELLA DELLE REVISIONI
COMPOSIZIONE
Modifica tecnica
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
BIOMERIEUX, il logo blu, API e apiweb sono marchi utilizzati, depositati e/o registrati di proprietà di bioMérieux o di una delle sue filiali o di una delle sue
società.
CLSI è un marchio di Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Il marchio ATCC, la denominazione commerciale ATCC e tutti i numeri di catalogo ATCC sono marchi di proprietà di American Type Culture Collection.
Gli altri marchi e nomi di prodotti menzionati sono marchi commerciali dei loro rispettivi detentori.
673 620 399 RCS LYON

376 Chemin de l'Orme Fax 33 (0)4 78 87 20 90
10300 07887Q - pt - 2015/03
®
Listeria
Sistema de identificação das Listeria
INTRODUÇÃO E OBJECTIVO DO TESTE Advertência de perigo

®
O API Listeria é um sistema padronizado para a H226 : Líquido e vapor inflamáveis.
identificação das Listeria que utiliza mini-testes e uma H302 : Nocivo por ingestão.
base de dados. A lista completa das bactérias possíveis H311 : Tóxico em contacto com a pele.
de identificar com este sistema encontra-se no Quadro de H315 : Provoca irritação cutânea.
Identificação no final deste folheto informativo. H319 : Provoca irritação ocular grave.
H331 : Tóxico por inalação.
PRINCÍPIO H335 : Pode provocar irritação das vias respiratórias.
® H370 : Afecta os órgãos.
A galeria API Listeria comporta 10 microtubos que
contêm os substratos desidratados e permitem a
realização de testes enzimáticos ou fermentações de Recomendação de prudência
açúcares. P210 : Manter afastado do calor, superfícies quentes,
As reacções produzidas durante o período de incubação faísca, chama aberta e outras fontes de ignição. Não
traduzem-se pelas mudanças de cor espontâneas ou fumar.
reveladas através da adição de reagentes. P280 : Usar luvas de protecção/vestuário de
A leitura destas reacções é efectuada com o Quadro de protecção/protecção ocular/protecção facial.
Leitura e a identificação obtém-se consultando a lista dos P301 + P312 : EM CASO DE INGESTÃO: caso sinta
perfis do folheto informativo ou com um sistema de indisposição, contacte um CENTRO DE INFORMAÇÃO
identificação. ANTIVENENOS/médico.
P302 + P352 : SE ENTRAR EM CONTACTO COM A
APRESENTAÇÃO (Embalagem de 10 testes): PELE: lavar abundantemente com água.
® P304 + P340 : EM CASO DE INALAÇÃO: retirar a pessoa
- 10 galerias API Listeria (STR) para uma zona ao ar livre e mantê-la numa posição que
®
- 10 ampolas de API Suspension Medium, 2 ml (MED) não dificulte a respiração.
- 1 ampola de reagente ZYM B (ZYM B) P305 + P351 + P338 : SE ENTRAR EM CONTACTO
- 10 caixas de incubação (INCUB) COM OS OLHOS: enxaguar cuidadosamente com água
- 10 fichas de resultados (SHEET) durante vários minutos. Se usar lentes de contacto, retire-
- 1 Folheto Informativo fornecido na embalagem ou a as, se tal lhe for possível. Continuar a enxaguar.
transferir a partir de www.biomerieux.com/techlib. Para mais informações, consultar a ficha de segurança.
COMPOSIÇÃO REAGENTES E MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO

Galeria FORNECIDOS
®
A composição da galeria API Listeria é descrita no Reagentes
Quadro de Leitura deste folheto informativo.
- McFarland Standard (Ref. 70 900), ponto 1
TM
Meio - Programa de identificação apiweb (Refª 40 011)
(consultar a bioMérieux)
MED Água desmineralizada
®
(API Materiais
Suspension - Pipetas ou PSIpetas
Medium) - Protector de ampola
2 ml - Suporte para ampolas
- Equipamento geral de laboratório de bacteriologia
Reagente
Reagente Fast Blue BB (matéria activa) 0,12 g PRECAUÇÕES DE UTILIZAÇÃO
ZYM B * Metanol 40 ml • Para diagnóstico in vitro e controlo microbiológico.
8 ml Dimetilsulfoxido (DMSO) 60 ml • Unicamente para uso profissional.
As quantidades indicadas podem ser ajustadas em função dos • Ver as indicações de perigo “H” e os conselhos de
títulos das matérias-primas. prudência “P” citados acima.
* Palavra-sinal: PERIGO • Este dispositivo contém componentes de origem animal.
O controlo da origem e/ou do estado sanitário dos
animais não podem garantir de maneira absoluta que
estes produtos não contenham nenhum agente
patogénico transmissível, é recomendado manipulá-los
com as precauções de utilização relativas aos produtos
potencialmente infecciosos (não ingerir; não inalar).
bioMérieux SA Português - 1
api® Listeria 07887Q - pt - 2015/03
• As amostras, culturas bacterianas e produtos semeados Reagente:

devem ser considerados potencialmente infecciosos e O reagente deve ser conservado no escuro a 2º - 8º C até
manipulados de maneira apropriada. As técnicas à data de validade indicada na embalagem.
assépticas e as precauções habituais de manipulação Depois da abertura da ampola e da transferência do
para o grupo bacteriano estudado devem ser reagente para o frasco conta-gotas, o reagente pode ser
respeitadas durante toda a manipulação; consultar o conservado durante 1 mês (ou até à data de validade
"CLSI M29-A, Protection of Laboratory Workers from indicada se esta for anterior): anotar a data da abertura
occupationally Acquired Infections; Approved Guideline na etiqueta do frasco.
- Revisão em vigor". Para informações complementares O reagente ZYM B é muito sensível à luz: verificar o
sobre as precauções de manipulação, consultar o aspecto do reagente antes de o transferir para o frasco
"Biosafety in Microbiological and Biomedical conta-gotas.
Laboratories - CDC/NIH – Última edição", ou a O reagente ZYM B apresenta, no seu estado normal, uma
regulamentação em vigor no país de utilização. cor amarela a âmbar. Eliminar o reagente se observar
• Não utilizar os reagentes após a data de validade. uma viragem de cor a rosa (sinal de alteração). Uma
• Antes da utilização, assegurar-se de que a embalagem pequena exposição à luz do laboratório (cerca de 1 hora)
e os componentes não estão danificados. provoca a degradação do reagente.
• Não utilizar galerias que tenham sofrido uma alteração Ter o cuidado de colocar rapidamente o reagente no
física: cúpula deformada, saqueta/sachet desidratante frigorífico após utilização.
aberta, …
• Antes da utilização, deixar os reagentes atingir a UTILIZAÇÃO DO REAGENTE
temperatura ambiente. • Abrir a ampola de reagente como indicado no parágrafo
• Abrir cuidadosamente as ampolas, como abaixo indicado: "Precauções de utilização" (ampola com tampa conta-
- Colocar a ampola no protector de ampola. gotas).
- Segurar o conjunto verticalmente numa mão • Antes da utilização de cada ampola de reagente, é
(tampa branca para cima). aconselhado efectuar um controlo de qualidade
®
- Fechar bem a tampa. utilizando a estirpe/cepa ATCC 33090™ mencionada
- Premir horizontalmente com o polegar a no parágrafo Controlo de Qualidade para excluir
parte estriada da tampa de forma a partir a qualquer reagente defeituoso.
extremidade da ampola. • Deitar uma gota de reagente.
- Retirar a ampola do protector de ampola e • Fechar bem o frasco depois da utilização e conservá-lo
conservá-lo para uma posterior utilização. como indicado no parágrafo "Condições de
Ampola sem tampa conta-gotas : armazenamento".
- Retirar delicadamente a tampa.
* Ampola com tampa conta-gotas : AMOSTRAS
®
- Virar a ampola ao contrário e mantê-la na O API Listeria não deve ser utilizado directamente a
posição vertical. partir das amostras de origem clínica ou outras.
- Premir na parte lateral da tampa para Os microrganismos a identificar devem primeiro ser
transferir a totalidade do reagente para o isolados num meio de cultura adaptado segundo as
frasco com conta-gotas. técnicas habituais de bacteriologia.
NOTA: Para qualquer utilização posterior, é
aconselhado premir a tampa antes de virar a PROCEDIMENTO
ampola ao contrário de forma a aspirar Selecção das colónias
qualquer excesso de reagente e evitar • Verificar se a estirpe/cepa a estudar pertence ao género
espalhá-lo no exterior da tampa. Listeria (bacilos curtos Gram positivos, polimorfos,
• O comportamento funcional apresentado é obtido com o móveis a 25° C mas não a 37° C, catalase positiva e
procedimento indicado neste folheto informativo. oxidase negativa).
Qualquer desvio à metodologia pode alterar os • Para as colheitas/coletas que contêm, frequentemente,
resultados. misturas de várias espécies de Listeria, é preferível
• A interpretação dos resultados do teste deve ser efectuar uma sub-cultura em gelose de sangue a partir
efectuada tendo em conta o contexto clínico ou outro, a de uma colónia bem isolada. Incubar a placa 24 horas a
origem da amostra, os aspectos macro e microscópicos 36° C ± 2° C.
da estirpe/cepa e, eventualmente, os resultados de NOTA: Os meios seguintes podem ser utilizados para
outros testes, em especial, do antibiograma. colher/coletar as colónias antes da utilização da galeria
®
API Listeria :
CONDIÇÕES DE ARMAZENAMENTO - meios gelosados de sangue não selectivos, em base
Galerias STR: Columbia ou TSA, com ou sem antibióticos ;
As galerias conservam-se a 2º-8ºC até à data de validade - meios selectivos para Listeria com a excepção do
indicada na embalagem. meio McBride que inibe a expressão enzimática das
®
bactérias na galeria API Listeria. Se este meio for
Meios MED:
utilizado para o isolamento, efectuar uma sub-cultura
Os meios conservam-se a 2º - 30º C até à data de em gelose de sangue.
validade indicada na embalagem.
Preparação da galeria
• Juntar fundo e tampa de uma caixa de incubação e
distribuir cerca de 3 ml de água destilada ou
desmineralizada [ou qualquer água sem aditivos ou
derivados susceptíveis de libertarem gases (Ex : Cl2,
CO2 ...)] nos alvéolos do fundo para criar uma
atmosfera húmida.
• Inscrever a referência da estirpe/cepa na lingueta lateral LEITURA E INTERPRETAÇÃO

da caixa. (Não inscrever a referência na tampa, esta Leitura da galeria
pode ser deslocada durante a manipulação).
• Adicionar 1 gota de reagente ZYM B ao teste DIM .
• Retirar a galeria da embalagem individual.
• Ler nos 3 minutos a seguir todas as reacções
• Colocar a galeria na caixa de incubação.
consultando o Quadro de Leitura do folheto informativo.
• Deitar fora o desidratante.
• Anotar as reacções em +/- na ficha de resultados.
Preparação do inóculo • Anotar também o tipo de hemólise. O resultado deste
®
• Abrir uma ampola de API Suspension Medium (2 ml) teste não é tido em conta na interpretação da galeria.
como indicado no parágrafo "Precauções de utilização" Interpretação
(ampola sem tampa conta-gotas).
A identificação é obtida a partir do perfil numérico.
• Utilizando uma pipeta ou uma PSIpeta, colher/coletar
algumas colónias bem isoladas. Utilizar de preferência • Determinação do perfil numérico :
culturas recentes (18 - 24 horas). Na ficha de resultados, os testes são separados por
• Efectuar uma suspensão com opacidade equivalente a grupos de três e um valor 1, 2 ou 4 é indicado para
1 de McFarland. Esta suspensão deve ser utilizada cada um. Adicionando em cada grupo os valores
imediatamente após a sua preparação. correspondentes às reacções positivas, obtém-se 4
• Observar o tipo de hemólise e anotar na ficha de algarismos que constituem o perfil numérico.
resultados, este caracter constituindo um teste • Identificação :
adicional. Esta é efectuada a partir da base de dados (V1.2)
* com o perfil numérico :
Inoculação da galeria
- Procurar o perfil na lista do folheto informativo, não
• Distribuir a suspensão bacteriana anterior nos tubos sendo esta lista exaustiva, em caso de perfil
evitando a formação de bolhas (para isso, inclinar a inexistente, consultar o programa abaixo ou a
caixa de incubação para a frente e colocar a ponta da Assistência Técnica da bioMérieux.
pipeta ou da PSIpeta de lado na cúpula) : * com o programa de identificação apiweb :
TM
- Encher o tubo e a cúpula do teste DIM - Introduzir manualmente no teclado o perfil numérico
(aproximadamente 100 µl), tendo o cuidado de criar com 4 algarismos.
um menisco convexo.
- Encher unicamente os tubos dos testes ESC a TAG
(cerca de 50 µl).
NOTA: A qualidade do enchimento é muito importante:
os tubos insuficiente ou demasiadamente cheios podem
causar resultados falsamente positivos ou negativos. 6 510 Listeria monocytogenes
• Fechar novamente a caixa de incubação.
• Incubar 18 - 24 horas a 36° C ± 2° C em aerobiose.
CONTROLO DE QUALIDADE
Os galerias, meios e reagentes são sujeitos a controlos de qualidade sistemáticos nas diferentes etapas do seu fabrico.
O Controlo de Qualidade Mínimo pode ser utilizado para verificar se as condições de armazenamento e de transporte
®
não têm impacto no comportamento funcional da galeria API LISTERIA. Este controlo pode ser efectuado seguindo as
®
instruções e critérios esperados acima em relação ao referencial CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial
®
O controlo pode ser efectuado utilizando a estirpe/cepa Listeria innocua ATCC 33090™ para avaliar o
comportamento funcional dos testes DIM e XYL. Com efeito, os estudos efectuados pela bioMérieux demonstraram que
a galeria API LISTERIA, os testes DIM e XYL são os mais sensíveis. Em consequência, no controlo, a integridade da
galeria pode ser verificada utilizando a estirpe Listeria innocua ATCC 33090.
No caso em que um Controlo de Qualidade Completo é exigido para esta galeria, as três estirpes/cepas seguintes
®
deverão ser testadas para verificar as reacções positivas e negativas da maioria dos testes da galeria API LISTERIA.
® ®
®
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* Ocasionalmente (–).
Perfis obtidos após cultura em gelose Columbia com sangue de carneiro.
É da responsabilidade do utilizador assegurar que o controlo de qualidade é efectuado em conformidade com a
legislação local em vigor.
LIMITES DO TESTE COMPORTAMENTO FUNCIONAL

®
• O sistema API Listeria destina-se à identificação das Foram testadas 643 estirpes/cepas de diversas origens
bactérias do género Listeria presentes na base de e estirpes/cepas de colecção pertencentes às espécies
dados (consultar o Quadro de Identificação no final do da base de dados :
folheto informativo) e apenas a estas. Não pode ser - 98,91% das estirpes/cepas foram correctamente
utilizado para identificar outros microrganismos ou identificadas (com ou sem testes complementares).
excluir a sua presença. - 0,62% das estirpes/cepas não foram identificadas.
• Devem ser utilizadas culturas puras que contêm um - 0,47% das estirpes/cepas foram mal identificadas.
único tipo de microrganismo. ELIMINAÇÃO DE RESÍDUOS
RESULTADOS ESPERADOS Eliminar o reagente ZYM B não utilizado seguindo os
Consultar o Quadro de Identificação no final deste procedimentos relativos aos resíduos químicos
folheto informativo para os resultados esperados das perigosos.
diferentes reacções bioquímicas. Eliminar todos os reagentes utilizados ou não utilizados
(excepto o reagente ZYM B), bem como os materiais
de utilização única contaminados seguindo os
procedimentos relativos aos produtos infecciosos ou
potencialmente infecciosos.
É da responsabilidade de cada laboratório gerir os
resíduos e os efluentes que este produz consoante a
sua natureza e o seu perigo, e assegurar (ou fazer
assegurar) o tratamento e a eliminação em
conformidade com as regulamentações aplicáveis.
QUADRO DE LEITURA
COMPONENTES QTD RESULTADOS

TESTES REACÇÕES
ACTIVOS (mg/cúp.) NEGATIVO POSITIVO
ZYM B / < 3 min
laranja pálido
Diferenciação
DIM Substrato enzimático 0,106 beige rosado laranja
beige acinzentado
Esculina 0,16
ESC hidrólise (ESCulina) amarelo pálido negro
Citrato de ferro 0,024
4-nitrofenil-αD-
αMAN 0,045 α-MANosidase incolor amarelo
manopiranosido
DARL D-Arabitol 0,4 acidificação (D-ARabitoL)
XYL D-Xylose 0,4 acidificação (XYLose)
RHA L-Rhamnose 0,4 acidificação (RHAmnose)
vermelho / amarelo /
MDG Metil-αD-glucopiranosido 0,4 acidificação (Metil-αD-Glucopiranosido)
vermelho alaranjado amarelo alaranjado
RIB D-Ribose 0,4 acidificação (RIBose)
G1P Glucose-1-Fosfato 0,4 acidificação (Glucose-1-Fosfato)
TAG D-Tagatose 0,4 acidificação (TAGatose)
• As quantidades indicadas podem ser ajustadas em função dos títulos das matérias-primas.
• Algumas cúpulas contêm componentes de origem animal, nomeadamente peptonas.
PROCEDIMENTO p. I
LISTA DOS PERFIS NUMÉRICOS p. II
QUADRO DE IDENTIFICAÇÃO p. II
BIBLIOGRAFIA p. III
QUADRO DE SÍMBOLOS p. IV
HISTÓRICO DAS REVISÕES
Alterar tipo de categorias :

N/A Não aplicável (primeira publicação)
Correção Correção de anomalias na documentação
Alteração técnica Adição, revisão e/ou remoção de informações relativas ao produto
Administrativas Implementação de alterações não técnicas percetíveis para o utilizador
Nota : As modificações menores de tipografia, gramática e configuração de página
não aparecem no histórico de revisões.
Data da Referência do
Tipo de modificação Resumo da modificação
versão documento
HISTÓRICO DAS REVISÕES
Administrativa APRESENTAÇÃO , AMOSTRAS ,
2015/03 07887Q QUADRO DE SÍMBOLOS
COMPOSIÇÃO
Modificação técnica
PRECAUÇÕES DE UTILIZAÇÃO
A BIOMERIEUX, o logotipo azul, api e apiweb são marcas utilizadas, depositadas e/ou registadas, propriedade exclusiva da bioMérieux ou de uma das suas filiais
ou de uma das suas empresas.
CLSI é uma marca da propriedade da Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
A marca ATCC, a denominação ATCC e todos os números de catálogo ATCC são marcas da American Type Culture Collection.
As outras marcas e nomes de produtos mencionados são marcas comerciais dos respetivos proprietários.
Brasil: Distribuído por bioMérieux Brasil, S.A. - Estrada do Mapuá, 491 - Jacarepaguá - R.J. - CEP 22710-261
CNPJ: 33.040.635/0001-71
Atendimento ao Consumidor Tel.: 0800-264848
Prazo de Validade, N° de Lote, N° de Registro de Ministério da Saúde e Responsável Técnico:
VIDE EMBALAGEM
673 620 399 RCS LYON

10300 07887Q - el - 2015/03
®
Listeria
Σύστημα ταυτοποίησης της Listeria
ΠΕΡΙΛΗΨΗ ΚΑΙ ΕΠΕΞΗΓΗΣΗ Δήλωση επικινδυνότητας

®
Το API Listeria αποτελεί ένα προτυποποιημένο σύστημα H226 : Υγρό και ατμοί εύφλεκτα.
για την ταυτοποίηση της Listeria, που χρησιμοποιεί H302 : Επιβλαβές σε περίπτωση κατάποσης.
εξετάσεις σε μικρογραφία, καθώς και μια βάση H311 : Τοξικό σε επαφή με το δέρμα.
δεδομένων. Ο πλήρης κατάλογος εκείνων των H315 : Προκαλεί ερεθισμό του δέρματος.
οργανισμών που είναι δυνατόν να ταυτοποιηθούν με αυτό H319 : Προκαλεί σοβαρό οφθαλμικό ερεθισμό.
το σύστημα παρατίθεται στον Πίνακα Ταυτοποίησης στο H331 : Τοξικό σε περίπτωση εισπνοής.
τέλος αυτού του εσώκλειστου οδηγιών. H335 : Μπορεί να προκαλέσει ερεθισμό της
αναπνευστικής οδού.
ΑΡΧΗ ΜΕΘΟΔΟΥ H370 : Προκαλεί βλάβες στα όργανα.
®
Η ταινία API Listeria αποτελείται από 10 μικροσωλήνες Δήλωση προφύλαξης
που περιέχουν αφυδατωμένα υποστρώματα τα οποία P210 : Μακριά από θερμότητα, θερμές επιφάνειες,
καθιστούν δυνατή την εκτέλεση ενζυμικών εξετάσεων ή σπινθήρες, γυμνές φλόγες και άλλες πηγές ανάφλεξης.
ζυμώσεων σακχάρων. Μην καπνίζετε.
Κατά τη διάρκεια της επώασης, ο μεταβολισμός προκαλεί P280 : Να φοράτε προστατευτικά γάντια/προστατευτικά
χρωματικές μεταβολές που είτε είναι αυτόματες ή ενδύματα/μέσα ατομικής προστασίας για τα
αποκαλύπτονται με την προσθήκη των αντιδραστηρίων. μάτια/πρόσωπο.
Οι αντιδράσεις διαβάζονται σύμφωνα με τον Πίνακα P301 + P312 : ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΚΑΤΑΠΟΣΗΣ: Καλέστε το
Ανάγνωσης και η ταυτοποίηση γίνεται με αναφορά στον ΚΕΝΤΡΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΑΣΕΩΝ/γιατρό εάν αισθανθείτε
κατάλογο προφίλ στο εσώκλειστο οδηγιών ή αδιαθεσία.
χρησιμοποιώντας το λογισμικό ταυτοποίησης. P302 + P352 : ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΠΑΦΗΣ ΜΕ ΤΟ
ΔΕΡΜΑ: Πλύντε με άφθονο νερό.
ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΟ ΤΗΣ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑΣ (Συσκευασία για P304 + P340 : ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΙΣΠΝΟΗΣ: Μεταφέρατε
10 εξετάσεις): τον παθόντα στον καθαρό αέρα και αφήστε τον να
-
®
10 ταινίες API Listeria ξεκουραστεί σε στάση που διευκολύνει την αναπνοή.
-
®
10 φύσιγγες API Suspension Medium, 2 ml P305 + P351 + P338 : ΣΕ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΕΠΑΦΗΣ ΜΕ ΤΑ
- 1 φύσιγγα αντιδραστηρίου ZYM B ΜΑΤΙΑ: Ξεπλύνετε προσεκτικά με νερό για αρκετά λεπτά.
- 10 κυτία επώασης Εάν υπάρχουν φακοί επαφής, αφαιρέστε τους, εφόσον
- 10 φύλλα αποτελεσμάτων είναι εύκολο. Συνεχίστε να ξεπλένετε.
- 1 Εσώκλειστο οδηγιών παρέχεται στη συσκευασία ή Για περαιτέρω πληροφορίες, αναφερθείτε στο Φύλλο
μπορείτε να το κατεβάσετε από το Δεδομένων Ασφαλείας Υλικού.
www.biomerieux.com/techlib.
ΑΠΑΙΤΟΥΜΕΝΑ ΜΗ ΠΑΡΕΧΟΜΕΝΑ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΑ
ΣΥΝΘΕΣΗ ΚΑΙ ΥΛΙΚΑ
Ταινία Αντιδραστήρια
®
Η σύνθεση της ταινίας API Listeria δίνεται στον Πίνακα - McFarland Standard (Κωδ. 70 900), No. 1 στην
Ανάγνωσης αυτού του εσώκλειστου οδηγιών. κλίμακα
- Λογισμικό ταυτοποίησης apiweb TM (Κωδ. 40 011)
Υλικό (συμβουλευθείτε την bioMérieux)
MED Απιονισμένο ύδωρ Υλικά
®
(API
Suspension - Πιπέττες ή PSIpettes
Medium) - Εσχάρα για φύσιγγες
2 ml - Προστατευτική συσκευή φυσίγγων
- Γενικός μικροβιολογικός εργαστηριακός εξοπλισμός
Αντιδραστήριο
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΕΙΣ ΚΑΙ ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ
Αντιδραστήριο Fast Blue BB (δραστικό συστατικό) 0,12 g
ZYM B * Μεθανόλη 40 ml • Για in vitrο διαγνωστική χρήση και μικροβιολογικό
8 ml Διμεθυλσουλφοξίδιο (DMSO) 60 ml έλεγχο.
• Αποκλειστικά για επαγγελματική χρήση.
Οι αναγραφόμενες ποσότητες μπορούν να ρυθμίζονται ανάλογα • Αναφερθείτε στις δηλώσεις επικυνδυνότητας "Η" και
με τον τίτλο των πρώτων υλών που χρησιμοποιούνται. προφύλαξης "P" παραπάνω.
* Προειδοποιητική λέξη: ΚΙΝΔΥΝΟΣ • Αυτή η συσκευασία περιέχει προϊόντα ζωικής
προέλευσης. Πιστοποιημένη γνώση της προέλευσης
ή/και της υγειονομικής κατάστασης των ζώων δεν
εγγυάται πλήρως την απουσία μεταδιδόμενων
παθογόνων παραγόντων.
Γι’ αυτό συνιστάται αυτά τα προϊόντα να
αντιμετωπίζονται ως δυνητικώς μολυσματικά και με
τήρηση των συνήθων μέτρων ασφαλείας (να μην
λαμβάνονται από την πεπτική ή την αναπνευστική οδό).
bioMérieux SA Ελληνικά - 1
api® Listeria 07887Q - el - 2015/03
• Όλα τα δείγματα, οι μικροβιακές καλλιέργειες και τα ΣΥΝΘΗΚΕΣ ΦΥΛΑΞΗΣ

ενοφθαλμισμένα προϊόντα θα πρέπει να θεωρούνται Ταινίες STR:
μολυσματικά και να αντιμετωπίζονται καταλλήλως.
Οι ταινίες θα πρέπει να φυλάσσονται στους 2-8°C μέχρι
Άσηπτες τεχνικές και οι συνήθεις προφυλάξεις χειρισμού
την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στη συσκευασία.
για τη μελετώμενη βακτηριακή ομάδα θα πρέπει να
τηρούνται σε όλη την διάρκεια της διαδικασίας. Υλικά MED:
®
Αναφερθείτε στο έγγραφο "CLSI M29-A, Protection of Tα υλικά μπορούν να φυλάσσονται στους 2-30°C μέχρι
Laboratory Workers From Occupationally Acquired την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στη συσκευασία.
Infections; Approved Guideline - Τρέχουσα
αναθεώρηση". Για πρόσθετες προφυλάξεις κατά το Αντιδραστήριο:
χειρισμό, αναφερθείτε στο "Biosafety in Microbiological Tο αντιδραστήριο θα πρέπει να φυλάσσεται στο σκοτάδι
and Biomedical Laboratories – CDC/NIH – Τελευταία στους 2-8°C μέχρι την ημερομηνία λήξης που
έκδοση", ή στους ισχύοντες κανονισμούς κάθε χώρας. αναγράφεται στη συσκευασία.
• Μην χρησιμοποιείτε αντιδραστήρια μετά την ημερομηνία Το αντιδραστήριο μπορεί να διατηρηθεί μέχρι και 1 μήνα
λήξης. αφού ανοιχτεί η φύσιγγα και αφού μεταφερθεί το
• Πριν από τη χρήση, βεβαιωθείτε ότι η συσκευασία και τα αντιδραστήριο στη σταγονομετρική φιάλη, (ή μέχρι την
περιεχόμενα είναι άθικτα. ημερομηνία λήξης, αν αυτή παρέλθει νωρίτερα):
• Μην χρησιμοποιείτε ταινίες οι οποίες παρουσιάζουν καταγράψτε την ημερομηνία ανοίγματος στην ετικέτα
φθορές: παραμορφωμένα κυπέλια, ανοικτός φακελίσκος της φιάλης.
αφυγραντή, κλπ. Tα αντιδραστήρια ZYM B είναι πολύ ευαίσθητο στο φως:
• Αφήστε τα αντιδραστήρια να έλθουν σε θερμοκρασία ελέγξτε την εμφάνιση του αντιδραστηρίου πριν το μεταφέρετε
δωματίου πριν από τη χρήση. στη σταγονομετρική φιάλη.
• Ανοίξτε τις φύσιγγες προσεκτικά ως εξής: Tο αντιδραστήριο ZYM B κανονικά είναι χρυσοκίτρινου
- Τοποθετήστε την φύσιγγα στην προστατευτική χρώματος. Απορρίψτε το αντιδραστήριο σε περίπτωση
συσκευή φυσίγγων. που παρατηρηθεί οποιαδήποτε ρόδινη απόχρωση
- Κρατήστε την προστατευμένη φύσιγγα με το (ένδειξη αλλοίωσης). Η έκθεση στο φως του εργαστηρίου
ένα χέρι σε κάθετη θέση (το λευκό πλαστικό για μια μικρή χρονική διάρκεια (1 ώρα περίπου) θα βλάψει
κάλυμμα προς τα πάνω). το αντιδραστήριο.
- Πιέστε το κάλυμμα προς τα κάτω για όσο Βεβαιωθείτε ότι το αντιδραστήριο έχει επανατοποθετηθεί
μεγαλύτερη απόσταση γίνεται. στο ψυγείο αμέσως μετά τη χρήση.
- Τοποθετήστε το ρύγχος στο ραβδωτό τμήμα
του καλύμματος και πιέστε προς τα εμπρός ΧΡΗΣΗ ΤΟΥ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΟΥ
για να αφαιρέσετε σπάζοντας την κορυφή
της φύσιγγας. • Ανοίξτε την φύσιγγα του αντιδραστηρίου όπως
- Βγάλτε την φύσιγγα από την προστατευτική υποδεικνύεται στην παράγραφο "Προειδοποιήσεις και
συσκευή φυσίγγων και φυλάξτε την Προφυλάξεις" (φύσιγγα με σταγονομετρικό κάλυμμα).
προστατευτική συσκευή για επόμενη χρήση. • Πριν χρησιμοποιήσετε την κάθε φύσιγγα του
αντιδραστηρίου, συνιστάται να διεξάγετε μια εξέταση
* Για φύσιγγα χωρίς σταγονομετρικό κάλυμμα:
ποιοτικού ελέγχου με το στέλεχος ATCC® 33090™
- Προσεκτικά αφαιρέστε το κάλυμμα.
όπως υποδεικνύεται στην παράγραφο Ποιοτικός
* Για φύσιγγα με σταγονομετρικό κάλυμμα:
Έλεγχος, με σκοπό να αποφευχθούν τυχόν
- Αναποδογυρίστε την φύσιγγα και κρατήστε
ελαττωματικά αντιδραστήρια.
την σε κάθετη θέση.
• Διανείμετε μια σταγόνα αντιδραστηρίου.
- Πιέστε απαλά το κάλυμμα για να
• Κλείστε προσεκτικά την φιάλη μετά τη χρήση και
απελευθερώσετε μια σταγόνα για να
φυλάξτε την όπως υποδεικνύεται στην παράγραφο
μεταφέρετε όλο το αντιδραστήριο στη
"Συνθήκες φύλαξης".
σταγονομετρική φιάλη.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Για περαιτέρω χρήση, συνιστάται να
ασκηθεί πίεση στο κάλυμμα πριν ΔΕΙΓΜΑΤΑ
®
αναποδογυριστεί η φύσιγγα, ώστε να Το API Listeria δεν προορίζεται για απευθείας χρήση με
αναρροφηθούν όποιες περίσσειες σταγόνες του κλινικά ή άλλα δείγματα.
αντιδραστηρίου και έτσι να αποφευχθεί η διάχυση Οι μικροοργανισμοί προς ταυτοποίηση πρέπει πρώτα να
του αντιδραστηρίου στο κάλυμμα ή στα δάχτυλα. απομονωθούν σε κατάλληλο υλικό καλλιέργειας σύμφωνα
• Τα δεδομένα απόδοσης της μεθόδου που με πρότυπες μικροβιολογικές τεχνικές.
παρουσιάζονται ελήφθησαν ακολουθώντας τη
διαδικασία η οποία περιγράφεται σε αυτό το εσώκλειστο ΟΔΗΓΙΕΣ ΧΡΗΣΗΣ
οδηγιών. Οποιαδήποτε αλλαγή ή τροποποίηση της Επιλογή των αποικιών
διαδικασίας μπορεί να επηρεάσει τα αποτελέσματα.
• Ελέγξτε ότι το στέλεχος ανήκει στο γένος Listeria (κοντά
• Η ερμηνεία των αποτελεσμάτων της εξέτασης πρέπει να
Gram-θετικά βακτηρίδια τα οποία είναι πολυμορφικά,
γίνεται λαμβάνοντας υπόψη το ιστορικό του ασθενή, την
κινητικά στους 25°C αλλά όχι στους 37°C, καταλάση-
προέλευση του δείγματος, τη μορφολογία των αποικιών
θετικά και οξειδάση-αρνητικά).
και τη μικροσκοπική εικόνα του στελέχους και, αν
• Καθώς τα δείγματα συχνά περιέχουν ένα μείγμα από
χρειάζεται, τα αποτελέσματα από όποιες άλλες
διάφορα είδη Listeria, είναι προτιμότερο να φτιάξετε μια
εξετάσεις έχουν πραγματοποιηθεί, ιδιαίτερα τις εξετάσεις
ανακαλλιέργεια σε αιματούχο άγαρ χρησιμοποιώντας
ευαισθησίας στα αντιμικροβιακά.
μια καλά απομονωμένη αποικία. Επωάστε το τρυβλίο
για 24 ώρες στους 36°C ± 2°C.
ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Τα ακόλουθα υλικά μπορούν να ΑΝΑΓΝΩΣΗ ΚΑΙ ΕΡΜΗΝΕΙΑ

χρησιμοποιηθούν για να πάρουμε δείγματα αποικιών πριν Ανάγνωση της ταινίας
®
τη χρήση της ταινίας API Listeria: • Προσθέστε μια σταγόνα αντιδραστηρίου ZYM B στην
- μη-εκλεκτικά, αιματούχα άγαρ υλικά με βάση Columbia ή εξέταση DIM .
TSA, με ή χωρίς αντιβιοτικά; • Διαβάστε όλες τις αντιδράσεις μέσα σε 3 λεπτά με βάση
- εκλεκτικά υλικά για Listeria, αποκλείοντας το υλικό τον Πίνακα Ανάγνωσης σε αυτό το εσώκλειστο οδηγιών.
McBride το οποίο αναστέλλει την ενζυμική εκδήλωση • Καταγράψτε αν οι αντιδράσεις είναι θετικές ή αρνητικές
®
των βακτηριδίων στην ταινία API Listeria. Εάν αυτό το (+/-) στο φύλλο αποτελεσμάτων.
υλικό χρησιμοποιείται για σκοπούς απομόνωσης, • Επίσης καταγράψτε το είδος της αιμόλυσης στο φύλλο
φτιάξτε μια ανακαλλιέργεια σε αιματούχο άγαρ. αποτελεσμάτων. Το αποτέλεσμα αυτής της εξέτασης δεν
πρέπει να λαμβάνεται υπόψη για την ερμηνεία της ταινίας.
Προετοιμασία της ταινίας Ερμηνεία
• Προετοιμάστε το κυτίο επώασης (δίσκος και κάλυμμα) Η ταυτοποίηση προκύπτει με το αριθμητικό προφίλ.
και διανείμετε περίπου 3 ml απεσταγμένου ή • Προσδιορισμός του αριθμητικού προφίλ:
απιονισμένου ύδατος [ή οποιουδήποτε ύδατος χωρίς Στο φύλλο αποτελεσμάτων, οι εξετάσεις χωρίζονται σε
πρόσθετα ή χημικά που μπορεί να απελευθερώσουν ομάδες των τριών και για κάθε μια δίνεται τιμή 1, 2 ή 4.
αέρια (π.χ. Cl2, CO2, κλπ.)] σε κυψέλες του δίσκου για Προσθέτοντας τις τιμές οι οποίες αντιστοιχούν σε θετικές
να δημιουργήσετε μια υγρή ατμόσφαιρα. αντιδράσεις μέσα σε κάθε ομάδα, προκύπτει ένας
• Καταγράψτε τον κωδικό του στελέχους στο επίμηκες 4ψήφιος αριθμός προφίλ, ο οποίος συνιστά το
πτερύγιο του δίσκου. (Μην καταγράφετε τον κωδικό στο αριθμητικό προφίλ.
κάλυμμα, διότι μπορεί να τοποθετηθεί λανθασμένα κατά • Ταυτοποίηση:
τη διάρκεια της διαδικασίας). Εκτελείται χρησιμοποιώντας τη βάση δεδομένων (V1.2)
• Αφαιρέστε την ταινία από την ατομική της συσκευασία. * με το αριθμητικό προφίλ:
• Τοποθετήστε την ταινία στο κυτίο επώασης. - Αναζητήστε το προφίλ στον κατάλογο των προφίλ σε
• Απορρίψτε τον αφυγραντή. αυτό το εσώκλειστο οδηγιών.
Προετοιμασία του εναιωρήματος Αυτός ο κατάλογος δεν είναι πλήρης, επομένως αν
®
• Ανοίξτε μια φύσιγγα API Suspension Medium (2 ml) όπως το προφίλ λείπει, παρακαλούμε συμβουλευτείτε το
υποδεικνύεται στην παράγραφο "Προειδοποιήσεις και πρόγραμμα λογισμικού που αναγράφεται
Προφυλάξεις" (φύσιγγα χωρίς σταγονομετρικό κάλυμμα). παρακάτω ή την Τεχνική Υποστήριξη της
• Χρησιμοποιώντας μια πιπέττα ή PSIpette, λάβετε bioMérieux.
μερικές καλά απομονωμένες αποικίες. Συνιστάται να * με το λογισμικό ταυτοποίησης apiweb TM:
χρησιμοποιείτε νέες καλλιέργειες (18-24 ωρών). - Εισάγετε το 4ψήφιο αριθμητικό προφίλ χειροκίνητα
• Προετοιμάστε ένα εναιώρημα με θολερότητα ισοδύναμη χρησιμοποιώντας το πληκτρολόγιο.
με 1 McFarland. Το εναιώρημα αυτό πρέπει να
χρησιμοποιηθεί αμέσως μετά την προετοιμασία.
• Παρατηρείστε το είδος της αιμόλυσης και καταγράψτε το
στο φύλλο αποτελεσμάτων. Αυτό χαρακτηρίζεται σαν
μια συμπληρωματική εξέταση.
Ενοφθαλμισμός της ταινίας 6 510 Listeria monocytogenes
• Διανείμετε το βακτηριακό εναιώρημα σε κάθε
σωληνάριο, αποφεύγοντας το σχηματισμό φυσαλίδων
(γείρετε την ταινία ελαφρώς προς τα εμπρός και
τοποθετήστε το ρύγχος της πιπέττας ή της PSIpette
στην πλαϊνή επιφάνεια του κυπέλιου):
- Γεμίστε το σωληνάριο και το κυπέλιο της εξέτασης
DIM (περίπου 100 µl), αποφεύγοντας το
σχηματισμό ενός κυρτού μηνίσκου.
- Γεμίστε μόνο το τμήμα του σωληναρίου των
εξετάσεων ESC έως TAG (περίπου 50 µl).
ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Η ποιότητα του γεμίσματος είναι πολύ
σημαντική: σωληνάρια τα οποία είναι ανεπαρκώς ή
υπερβολικά γεμισμένα μπορεί να προκαλέσουν ψευδώς
θετικά ή ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα.
• Κλείστε το κυτίο επώασης.
• Επωάστε για 18-24 ώρες στους 36°C ± 2°C σε αερόβιες
συνθήκες.
ΠΟΙΟΤΙΚΟΣ ΕΛΕΓΧΟΣ
Οι ταινίες, τα υλικά και τα αντιδραστήρια ελέγχονται συστηματικά σε διάφορα στάδια της παραγωγής τους.
Εκλογικευμένος ποιοτικός έλεγχος μπορεί να χρησιμοποιηθεί για να επιβεβαιωθεί η αποδεκτή απόδοση του
®
συστήματος API LISTERIA μετά τη μεταφορά/φύλαξη. Η μεθοδολογία αυτή μπορεί να εφαρμοστεί ακολουθώντας τις
®
παραπάνω οδηγίες για την εξέταση και συμφωνώντας με τα κριτήρια που δηλώνονται στο CLSI M50-A Quality Control
for Commercial Microbial Identification Systems. (Ποιοτικός Έλεγχος για Εμπορικά Συστήματα Μικροβιακής Ταυτοποίησης).
®
Ο έλεγχος μπορεί να διεξαχθεί χρησιμοποιώντας Listeria innocua ATCC 33090 για να αξιολογηθεί η απόδοση των
εξετάσεων DIM και XYL. Ο έλεγχος που πραγματοποιήθηκε από τη bioMerieux έδειξε ότι οι εξετάσεις DIM και XYL είναι
®
οι πιο ευαίσθητες στην ταινία API LISTERIA. Κατά τον έλεγχο η ακεραιότητα της ταινίας μπορεί να επαληθευτεί
χρησιμοποιώντας το στέλεχος Listeria innocua ATCC 33090.
Για εκείνους τους χρήστες που τους ζητείται να διεξάγουν αναλυτική εξέταση ποιοτικού ελέγχου με την ταινία, θα
πρέπει να εξετάζονται τα τρία παρακάτω στελέχη για να εκδηλώνεται θετική και αρνητική αντιδραστικότητα για τις
®
περισσότερες από τις εξετάσεις API LISTERIA.
® ®
®
®
ATCC :American Type Culture Collection, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, USA.
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* Περιστασιακά (–).
Προφίλ που προέκυψαν μετά από καλλιέργεια σε άγαρ Columbia με αίμα προβάτου.
Αποτελεί ευθύνη του χρήστη να διεξάγει τον Ποιοτικό Έλεγχο σύμφωνα με τους εκάστοτε τοπικούς ισχύοντες
κανονισμούς.
ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΜΕΘΟΔΟΥ ΑΠΟΡΡΙΨΗ ΑΠΟΒΛΗΤΩΝ

®
• Το σύστημα API Listeria προορίζεται μόνο για την Απορρίψτε το μη χρησιμοποιημένο αντιδραστήριο ZYM B
ταυτοποίηση των βακτηριδίων που ανήκουν στα γένη ακολουθώντας τις διαδικασίες για επικίνδυνα χημικά
Listeria που συμπεριλαμβάνονται στη βάση δεδομένων απόβλητα.
(δείτε Πίνακα Ταυτοποίησης στο τέλος αυτού του Απορρίψτε όλα τα χρησιμοποιημένα ή μη
εσώκλειστου οδηγιών). Δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί για χρησιμοποιημένα αντιδραστήρια (άλλα από το
να ταυτοποιήσει οποιουσδήποτε άλλους μικροοργανισμούς αντιδραστήριο ZYM B) καθώς και οποιαδήποτε άλλα
ή για να αποκλείσει την παρουσία τους. επιμολυσμένα αναλώσιμα υλικά ακολουθώντας τις
• Μόνον καθαρές καλλιέργειες αποκλειστικά ενός διαδικασίες για μολυσματικά ή δυνητικώς μολυσματικά
οργανισμού πρέπει να χρησιμοποιηθούν. προϊόντα.
Αποτελεί ευθύνη κάθε εργαστηρίου να αντιμετωπίζει τα
ΕΥΡΟΣ ΑΝΑΜΕΝΟΜΕΝΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ απόβλητα και τα υγρά εκροής που παράγονται, σύμφωνα
με τον τύπο και τον βαθμό επικινδυνότητάς τους και να τα
Συμβουλευτείτε τον Πίνακα Ταυτοποίησης στο τέλος
διαχειρίζεται και να τα απορρίπτει (ή να αναθέτει τη
αυτού του εσώκλειστου οδηγιών για το εύρος των
διαχείριση και απόρριψή τους) σύμφωνα με τους εκάστοτε
αναμενόμενων αποτελεσμάτων για τις διάφορες
ισχύοντες κανονισμούς.
βιοχημικές αντιδράσεις.
ΑΠΟΔΟΣΗ
Εξετάστηκαν 643 στελέχη συλλογής και στελέχη
διάφορων προελεύσεων που ανήκουν σε είδη που
συμπεριλαμβάνονται στη βάση δεδομένων:
- 98,91 % των στελεχών ταυτοποιήθηκαν σωστά (με ή
χωρίς συμπληρωματικές εξετάσεις).
- 0,62 % των στελεχών δεν ταυτοποιήθηκαν.
- 0,47 % των στελεχών ταυτοποιήθηκαν λανθασμένα.
ΠΙΝΑΚΑΣ ΑΝΑΓΝΩΣΗΣ
ΠΟΣ. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ
ΕΞΕΤΑΣΕΙΣ ΔΡΑΣΤΙΚΑ ΣΥΣΤΑΤΙΚΑ ΑΝΤΙΔΡΑΣΕΙΣ
(mg/κυπ.) ΑΡΝΗΤΙΚΑ ΘΕΤΙΚΑ
ZYM B / < 3 λεπτά
απαλό πορτοκαλί
Διάκριση
DIM Ενζυμικό υπόστρωμα 0,106 ρόδινο μπεζ πορτοκαλί
γκρίζο μπεζ
Εσκουλίνη 0,16
ESC υδρόλυση (Εσκουλίνη) απαλό κίτρινο μαύρο
Κιτρικός σίδηρος 0,024
4-νιτροφαινύλ-αD-
αMAN 0,045 α-Μαννοζιδάση άχρωμο κίτρινο
μαννοπυρανοζίδη
DARL D-Αραβιτόλη 0,4 οξίνιση (D-Αραβιτόλη)
XYL D-Ξυλόζη 0,4 οξίνιση (Ξυλόζη)
RHA L-Ραμνόζη 0,4 οξίνιση (Ραμνόζη)
Μεθυλο-αD- οξίνιση (Μεθυλο-αD- ερυθρό / κίτρινο /

MDG 0,4
γλυκοπυρανοζίδη Γλυκοπυρανοζίδη) πορτοκαλί-ερυθρό κίτρινο-πορτοκαλί
RIB D-Ριβόζη 0,4 οξίνιση (Ριβόζη)
G1P Φωσφορική-1-Γλυκόζη 0,4 οξίνιση (Φωσφορική-1-Γλυκόζη)
TAG D-Ταγατόζη 0,4 οξίνιση (Ταγατόζη)
• Οι αναγραφόμενες ποσότητες μπορούν να ρυθμίζονται ανάλογα με τον τίτλο των πρώτων υλών που χρησιμοποιούνται.
• Ορισμένα κυπέλια περιέχουν προϊόντα ζωικής προέλευσης, ειδικά πεπτόνες.
ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ σελ.I
ΚΑΤΑΛΟΓΟΣ ΑΡΙΘΜΗΤΙΚΩΝ ΠΡΟΦΙΛ σελ.II
ΠΙΝΑΚΑΣ ΤΑΥΤΟΠΟΙΗΣΗΣ σελ.IΙ
ΑΝΑΦΟΡΕΣ ΑΡΘΡΟΓΡΑΦΙΩΝ σελ.IΙΙ
ΠΙΝΑΚΑΣ ΣΥΜΒΟΛΩΝ σελ.ΙV
ΙΣΤΟΡΙΚΟ ΑΝΑΘΕΩΡΗΣΕΩΝ
Κατηγορίες τύπου αλλαγής :
Δ/Ε Δεν εφαρμόζεται (Πρώτη Δημοσίευση)
Διόρθωση Διόρθωση ανωμαλιών της τεκμηρίωσης
Τεχνική αλλαγή Προσθήκη, αναθεώρηση ή/και απομάκρυνση πληροφοριών που σχετίζονται με το προϊόν
Διαχειριστική αλλαγή Εφαρμογή μη τεχνικής αλλαγής αισθητή στο χρήστη
Σημείωση : Μικρές τυπογραφικές, γραμματικές αλλαγές και αλλαγές μορφοποίησης δεν
περιλαμβάνονται στο ιστορικό αναθεώρησης.
Ημερομηνία κυκλοφορίας Κωδικός Τύπος Αλλαγής Περίληψη Αλλαγής

ΠΕΡΙΕΧΟΜΕΝΟ της ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑΣ ,
Διαχειριστική
ΔΕΙΓΜΑΤΑ , ΠΙΝΑΚΑΣ ΣΥΜΒΟΛΩΝ
αλλαγή
2015/03 07887Q ΙΣΤΟΡΙΚΟ ΑΝΑΘΕΩΡΗΣΕΩΝ
ΣΥΝΘΕΣΗ
Τεχνική αλλαγή
ΠΡΟΕΙΔΟΠΟΙΗΣΕΙΣ ΚΑΙ ΠΡΟΦΥΛΑΞΕΙΣ
Η ονομασία BIOMERIEUX, ο κυανός λογότυπος, οι ονομασίες API και apiweb αποτελούν χρησιμοποιημένα, κατατεθειμένα ή/και καταχωρημένα εμπορικά
σήματα που ανήκουν στη bioMérieux ή μιας εκ των θυγατρικών της, ή σε μια από τις εταιρείες της.
Η ονομασία CLSI αποτελεί εμπορικό σήμα που ανήκει στην Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Tο εμπορικό σήμα ATCC, η εμπορική επωνυμία ATCC και οποιοιδήποτε και όλοι οι αριθμοί καταλόγου ATCC είναι εμπορικά σήματα της American Type
Culture Collection.
Οποιαδήποτε άλλη ονομασία ή εμπορικό σήμα είναι ιδιοκτησία του αντίστοιχου ιδιοκτήτη.
673 620 399 RCS LYON

10300 07887Q - sv - 2015/03
®
Listeria
System för identifiering av Listeria
SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING Faroangivelse

®
API Listeria är ett standardiserat system för identifiering H226 : Brandfarlig vätska och ånga.
av Listeria. Systemet utnyttjar miniatyriserade tester H302 : Skadligt vid förtäring.
tillsammans med en databas. En fullständiga lista över de H311 : Giftigt vid hudkontakt.
organismer som är möjliga att identifiera med detta H315 : Irriterar huden.
system återfinns i Identifieringstabellen, i slutet av denna H319 : Orsakar allvarlig ögonirritation.
bipacksedel. H331 : Giftigt vid inandning.
H335 : Kan orsaka irritation i luftvägarna.
METOD H370 : Orsakar organskador.
®
API Listeria strips består av 10 mikrobrunnar Skyddsangivelse
innehållande dehydrerade substrat som möjliggör P210 : Får inte utsättas för värme, heta ytor, gnistor,
utförandet av enzymatiska tester eller jäsning av socker. öppna lågor och andra antändningskällor. Rökning
Under inkubationen framkallar metabolismen färgföränd- förbjuden.
ringar, som antingen är spontana eller avslöjas genom P280 : Använd
tillsats av reagenser. skyddshandskar/skyddskläder/ögonskydd/ansiktsskydd.
Reaktionerna avläses enligt Avläsningstabellen och P301 + P312 : VID FÖRTÄRING: Vid obehag, kontakta
identifieringen sker med hjälp av profillistan i GIFTINFORMATIONSCENTRALEN/läkare.
bipacksedeln, eller med hjälp av identifieringsprogrammet. P302 + P352 : VID HUDKONTAKT: Tvätta med mycket
vatten.
KITETS INNEHÅLL (Kit för 10 tester): P304 + P340 : VID INANDNING: Flytta personen till frisk
®
- 10 API Listeria strips (STR) luft och se till att andningen underlättas.
®
- 10 ampuller med API Suspension Medium, 2 ml P305 + P351 + P338 : VID KONTAKT MED ÖGONEN:
(MED) Skölj försiktigt med vatten i flera minuter. Ta ur eventuella
- 1 ampull med ZYM B reagens (ZYM B) kontaktlinser om det går lätt. Fortsätt att skölja.
- 10 inkubationsboxar (INCUB) För ytterligare information, se säkerhetsdatabladet.
- 10 rapportblad (SHEET)
- 1 bipacksedel REAGENSER OCH NÖDVÄNDIGT MATERIAL (SOM
INTE MEDFÖLJER)
INNEHÅLLSDEKLARATION Reagenser
Strips - McFarland Standard (Art.nr. 70 900), nr 1 på skalan
®
API Listeria-stripsets innehåll anges i Avläsningstabellen - apiweb TM programvara för identifiering (Art.nr. 40 011)
i denna bipacksedel. (kontakta bioMérieux)
Medium Material
MED Avmineraliserat vatten - Pipetter eller PSIpetter
(API
® - Ampullställ
Suspension - Ampullskydd
Medium) - Allmän utrustning för mikrobiologiskt laboratorium
2 ml
FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER
Reagens • Används för in vitro-diagnostik och mikrobiologisk
ZYM B- Fast Blue BB (aktiv ingrediens) 0,12 g kontroll.
reagens * Metanol 40 ml • Endast för professionell användning.
8 ml Dimetylsulfoxid (DMSO) 60 ml • Se faroangivelser "H" och skyddsangivelser "P" som
anges ovan.
De angivna mängderna kan variera beroende på titern hos de • Detta kit innehåller produkter av animaliskt ursprung.
använda råmaterialen. Certifierade data angående ursprunget och/eller
* Signalord: FARA hälsotillståndet hos djuren garanterar inte total frånvaro
av överförbara patogena agens. Det rekommenderas
därför att dessa produkter behandlas som potentiellt
infektiösa och handhas enligt sedvanliga
försiktighetsåtgärder (ska inte förtäras eller inandas).
bioMérieux SA Svenska - 1
api® Listeria 07887Q - sv - 2015/03
• Alla prover, odlingar av mikroorganismer och Reagens:

inokulerade produkter skall anses infektiösa och Reagenset ska förvaras mörkt vid 2-8°C fram till sista
behandlas på ett lämpligt sätt. Sterilteknik och förbrukningsdatum som anges på förpackningen.
sedvanliga försiktighetsåtgärder för att handha den Reagenset kan bevaras i upp till 1 månad sedan ampullen
speciella gruppen av bakterier skall iakttas under hela har öppnats och reagenset överförts till droppflaska (eller
®
proceduren. Se "CLSI M29-A, Protection of Laboratory till sista förbrukningsdagen om denna inträffar
Workers from Occupationally Acquired Infections; dessförinnan). Anteckna öppningsdatum på flaskans
Approved Guideline - Aktuell revidering". För ytterligare etikett.
information angående försiktighetsåtgärder vid ZYM B-reagenset är mycket ljuskänsligt: kontrollera
hantering, se "Biosafety in Microbiological and reagensets utseende innan det förs över till droppflaskan.
Biomedical Laboratories - CDC/NIH - Senaste ZYM B-reagenset är normalt gul- till bärnstensfärgat.
upplagan", eller de f.n. gällande reglerna i det aktuella Kassera reagenset om det har en rosafärgad nyans
landet. (tecken på försämring). Exponering för laboratorieljus
• Använd inte reagenser efter sista förbrukningsdatum. under kort tid (ca 1 timma) skadar reagenset.
• Kontrollera före användning att förpackning och Reagenset skall ställas tillbaka i kylskåp omedelbart efter
komponenter är intakta. användning.
• Använd inte strips som har blivit skadade: deformerade
kupoler, öppen påse med torkmedel etc. REAGENSETS ANVÄNDNING
• Låt reagenset anta rumstemperatur före användning.
• Öppna ampullerna försiktigt enligt följande: • Öppna ampullen med reagens så som anges i avsnittet
- Placera ampullen i ampullskyddet. "Försiktighetsåtgärder" (ampull med dropplock).
- Håll den skyddade ampullen i vertikal • Före användning av en reagensampull rekommenderas
position med en hand (det vita plastlocket att ett test för kvalitetskontroll utförs med stammen
®
uppåt). ATCC 33090™ enligt avsnittet ”Kvalitetskontroll”, i
- Tryck ner locket så långt som möjligt. avsikt att utesluta eventuell defekt reagens.
- Sätt tummen på lockets räfflade del och • Tryck ut en droppe av reagenset.
tryck framåt för att bryta av ampullens topp. • Förslut försiktigt flaskan efter användning och förvara
- Ta ut ampullen från ampullskyddet och lägg enligt avsnittet “Förvaring”.
skyddet åt sidan för senare användning.
* För ampull utan dropplock: PROVER
®
- Ta försiktigt av locket. API Listeria är inte avsett för direkt användning med
* För ampull med dropplock: kliniska eller andra prover.
- Vänd ampullen upp och ner och behåll den i Mikroorganismerna som ska identifieras måste först
vertikal position. isoleras på ett lämpligt medium i enlighet med
- Tryck försiktigt på locket för att släppa ut en standardiserade mikrobiologiska tekniker.
droppe och överför allt reagens till
droppflaskan. BRUKSANVISNING
OBS: För upprepad användning Val av kolonier
rekommenderas det att trycka hårt på locket
innan ampullen vänds upp och ned. Detta gör • Kontrollera att stammen tillhör släktet Listeria (korta
att kvarvarande droppar av reagenset sugs Grampositiva stavar, vilka är polymorfa och motila vid
tillbaka, vilket förhindrar att lock och fingrar blir 25°C, men inte vid 37°C, samt katalaspositiva och
nedstänkta. oxidasnegativa).
• Data angående prestanda som presenterats har • Eftersom proverna ofta innehåller en blandning av olika
uppnåtts med hjälp av den metod som anges i denna Listeria-typer, är det lämpligt att odla en subkultur på
bipacksedel. Varje ändring i utförandet kan påverka blodagar med en välisolerad koloni. Inkubera plattan
resultaten. under 24 timmar vid 36°C ± 2°C.
• Tolkningen av testresultaten skall göras med hänsyn till OBS: Följande medier kan användas för att ta prover av
®
patientens anamnes, provkällan, stammens koloniala kolonier innan API Listeria strips används:
och mikroskopiska morfologi och, om nödvändigt, - icke-selektiva blodagarmedia med en Columbia- eller
resultaten av andra utförda tester, speciellt antibiotika- TSA-bas och med eller utan antibiotika;
känslighet. - selektiva medier för Listeria, förutom McBride-mediet,
vilket inhiberar enzymatisk manifestation av bakterier på
®
FÖRVARING API Listeria strips. Om mediet används för isolering,
Strips STR: odla en subkultur på blodagar.
Stripsen ska förvaras vid 2-8°C fram till sista förbruknings-
datum som anges på förpackningen.
Medier MED:
Medierna ska förvaras vid 2-30°C fram till sista
förbrukningsdatum som anges på förpackningen.
Preparering av stripset AVLÄSNING OCH TOLKNING

• Gör i ordning en inkubationsbox (platta och lock) och Avläsning av stripset
fördela ca 3 ml destillerat vatten eller avmineraliserat • Tillsätt en droppe ZYM B-reagens till DIM -testet.
vatten [eller annat vatten utan tillsatser och kemikalier • Avläs reaktionerna inom 3 minuter med hjälp av
som kan utveckla gaser (t.ex Cl2, CO2,)] i håligheterna Avläsningstabellen i denna bipacksedel.
på plattan för att skapa en fuktig atmosfär. • Anteckna positiva eller negativa reaktioner (+/-) på
• Anteckna stambeteckningen på den förlängda fliken på rapportbladet.
plattan. (Anteckna inte beteckningen på locket eftersom • Anteckna också typ av hemolys på rapportbladet.
det kan komma att förläggas under arbetet). Resultatet av det här testet tas inte med i tolkningen av
• Ta ut stripset ur dess förpackning. stripset.
• Placera stripset i inkubationsboxen.
• Kasta påsen med torkmedel. Tolkning
Identifiering görs med hjälp av den numeriska profilen.
Preparering av inokulatet
® • Kodning av den numeriska profilen:
• Öppna en ampull med API Suspension Medium (2 ml)
På rapportbladet delas testet upp i grupper om tre,
så som anges i stycket "Försiktighetsåtgärder" (ampull
varpå varje grupp tilldelas ett talvärde: 1, 2 eller 4.
utan dropplock).
Genom att addera de värden som motsvarar positiva
• Använd en pipett eller PSIpett för att ta upp en
reaktioner inom varje grupp erhålls en 4-siffrig numerisk
välisolerad koloni. Det rekommenderas att använda
profil.
unga kulturer (18–24 timmar gamla).
• Bered en suspension med en turbiditet motsvarande • Identifiering:
1 McFarland. Suspensionen måste användas direkt Denna utförs med hjälp av databasen (V1.2)
efter beredning. * med den numeriska profilen:
• Observera typ av hemolys och anteckna på - Sök upp profilen i profillistan som finns i denna
rapportbladet. Detta utgör ett tilläggstest. bipacksedel. Denna lista är inte fullständig. Om en
profil saknas, se mjukvaruprogrammet som finns
Inokulering av stripset angivet nedan eller bioMérieux Technical
• Fördela den beredda bakteriesuspensionen i varje Assistance service.
brunn: undvik bildning av bubblor (luta stripset något * med apiweb TM identifieringsprogram:
framåt och sätt pipettens eller PSIpettens spets mot - Skriv in den 4-siffriga numeriska profilen manuellt
sidan av kupolen): via tangentbordet.
- Fyll brunn och kupol för DIM testet (ca 100 µl),
undvik bildandet av en konvex yta.
- Fyll endast brunnen för testerna ESC till TAG (ca
50 µl).
OBS: Det är mycket viktigt att påfyllningen görs rätt:
brunnar som är otillräckligt fyllda eller överfyllda kan 6 510 Listeria monocytogenes
orsaka falskt positiva eller falskt negativa resultat.
• Stäng inkubationsboxen.
• Inkubera under 18-24 timmar vid 36°C ± 2°C under
aeroba förhållanden.
KVALITETSKONTROLL
Medier, strips och reagenser är systematiskt kvalitetskontrollerade vid olika steg i tillverkningen.
®
Rationaliserad kvalitetskontroll (Streamlined quality control) kan tillämpas för att bekräfta att API LISTERIA-systemet
har en acceptabel prestanda efter leverans/lagerhållning. Denna metod kan utföras genom att följa instruktionerna ovan
®
för att testa och uppfylla kriterierna i CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial Identification Systems.
®
Testning kan utföras med hjälp av Listeria innocua ATCC 33090™ för att utvärdera prestandan hos DIM och XYL-
testerna. Tester utförda av bioMérieux har visat att DIM och XYL-testerna är den mest labila på API LISTERIA-stripset.
När stripset skall testas kan Listeria innocua ATCC 33090 användas för att detektera degradering.
För de användare som måste utföra omfattande tester för kvalitetskontroll av stripset bör följande tre stammar testas
®
för att påvisa positiv och negativ reaktivitet för de flesta av API LISTERIA-testerna.
® ®
®
®
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* I vissa fall (–).
Profiler som erhållits efter odling på Columbia fårblodsagar.
Det är användarens ansvar att utföra kvalitetskontroll i enlighet med de lokalt tillämpliga bestämmelserna.
METODENS BEGRÄNSNINGAR PRESTANDA

®
• API Listeriasystemet är endast avsett för identifiering 643 kommersiellt tillgängliga stammar och stammar av
av bakterier som tillhör släktet Listeria och som ingår i olika ursprung, tillhörande arter inkluderade i
databasen (se Identifieringstabellen i slutet av denna databasen, testades:
bipacksedel). Det kan inte användas för identifiering - 98,91% av stammarna blev korrekt identifierade (med
av andra mikroorganismer eller för att utesluta deras eller utan kompletterande tester).
närvaro. - 0,62% av stammarna identifierades inte.
• Endast rena kulturer från en enda organism bör - 0,47% av stammarna blev felidentifierade.
användas.
AVFALLSHANTERING
FÖRVÄNTADE RESULTAT Avfallshantering av oanvänt ZYM B-reagens bör ske i
Intervallet för de förväntade resultaten för de olika enlighet med procedurer för kemiskt farligt avfall.
biokemiska reaktionerna framgår av Avfallshantering för alla använda eller oanvända
Identifieringstabellen i slutet av denna bipacksedel. reagenser (förutom ZYM B-reagens), liksom för andra
kontaminerade engångsmaterial, ska ske i enlighet med
procedurer för infektiösa eller potentiellt infektiösa
produkter.
Det är varje laboratoriums ansvar att handha avfalls-
och avloppsprodukter efter typ och farlighetsgrad och
behandla och avlägsna dem (eller få dem behandlade
och avlägsnade) i enlighet med alla tillämpliga
föreskrifter.
AVLÄSNINGSTABELL
mgd RESULTAT
TEST AKTIVA INGREDIENSER REAKTIONER
(mg/kup.) NEGATIVT POSITIVT
ZYM B / < 3 min
svagt orange
Differentiering
DIM Enzymsubstrat 0,106 rosabeige orange
gråbeige
Esculin 0,16
ESC hydrolys (ESCulin) svagt gul svart
Järncitrat 0,024
4-nitrofenyl-αD-
αMAN 0,045 α-MANnosidas färglös gul
mannopyranosid
DARL D-arabitoL 0,4 surgörning (D-ARabitoL)
XYL D-Xylos 0,4 surgörning (XYLos)
RHA L-Rhamnos 0,4 surgörning (RHAmnos)
röd / gul /
MDG Metyl-αD-glukopyranosid 0,4 surgörging (Metyl-αD-glukopyranosid)
orange-röd gul-orange
RIB D-Ribos 0,4 surgörning (RIBos)
G1P Glukos-1-Fosfat 0,4 sururgörning (Glukos-1-Fosfat)
TAG D-Tagatos 0,4 surgörning (TAGatos)
• De angivna mängderna kan variera beroende på titern hos de använda råmaterialen.

• Vissa kupoler innehåller produkter av animaliskt ursprung, i synnerhet peptoner.
METOD s. I
LISTA ÖVER NUMERISKA PROFILER s. II
IDENTIFIERINGSTABELL s. II
REFERENSLITTERATUR s. III
SYMBOLER s. IV
REVIDERINGSHISTORIK
Kategorier av ändringstyper :
ET Ej tillämpligt (första publicering)
Korrigering Korrigering av avvikelser i dokumentationen
Teknisk ändring Tillägg, revidering och/eller borttagning av information relaterat till produkten
Administrativt Införande av icke-tekniska ändringar av betydelse för användaren
Obs! Mindre typografiska ändringar samt ändringar av grammatik och formatering är
inte inkluderade i revideringshistoriken.
Publiceringsdatum Artikelnummer Typ av ändring Sammanfattning av ändringar

KITETS INNEHÅLL, PROVER, SYMBOLER
Administrativt
REVIDERINGSHISTORIK
2015/03 07887Q
INNEHÅLLSDEKLARATION
Teknisk ändring
FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER
BIOMERIEUX, den blå logotypen, API och apiweb är patentsökta och/eller registrerade varumärken som tillhör och används av bioMérieux eller något av dess
dotterbolag, eller ett av dess företag.
CLSI är ett varumärke som tillhör Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Varumärket och varunamnet ATCC och alla ATCC-katalognummer är varumärken som tillhör American Type Culture Collection.
Alla övriga namn eller varumärken tillhör dess respektive ägare.
673 620 399 RCS LYON

10300 07887Q - da - 2015/03
®
Listeria
System til identifikation af Listeria
RESUMÉ OG FORKLARING
®
API Listeria er et standardiseret system til identifikation Sikkerhedssætning
af Listeria, som anvender minimerede tests så vel som en P210 : Holdes væk fra varme, varme overflader, gnister,
specielt tilpasset database. Den komplette liste over de åben ild og andre antændelseskilder. Rygning forbudt.
organismer, som det er muligt at identificere med dette P280 : Bær
system, er angivet i Identifikationstabellen nederst på beskyttelseshandsker/beskyttelsestøj/øjenbeskyttelse/ans
denne indlægsseddel. igtsbeskyttelse.
P301 + P312 : I TILFÆLDE AF INDTAGELSE: I tilfælde af
PRINCIP ubehag, ring til en GIFTINFORMATION/læge.
®
API Listeria strip består af 10 mikrorør, der indeholder P302 + P352 : VED KONTAKT MED HUDEN: Vask med
dehydrerede substrater, som muliggør gennemførelse af rigeligt vand.
12 enzymatiske tests eller sukkerfermentationer. P304 + P340 : VED INDÅNDING: Flyt personen til et sted
Under inkubationen danner metabolismen med frisk luft og sørg for, at vejrtrækningen lettes.
farveforandringer, der enten er spontane eller afsløres P305 + P351 + P338 : VED KONTAKT MED ØJNENE:
ved tilsætning af reagenser. Skyl forsigtigt med vand i flere minutter. Fjern eventuelle
Reaktionerne aflæses efter Aflæsningstabellen, og kontaktlinser, hvis dette kan gøres let. Fortsæt skylning.
identifikation opnås ved at se i profillisten i denne
For yderligere oplysninger henvises til
indlægsseddel eller ved hjælp af identifikationssoftwaren. sikkerhedsdatabladet.
KITTETS INDHOLD (SÆT TIL 10 TESTS):
®
- 10 API Listeria strips (STR) NØDVENDIGE MEN IKKE MEDFØLGENDE
®
- 10 ampuller med API Suspensionsmedium, 2 ml REAGENSER OG MATERIALER
(MED) Reagenser
- 1 ampul med ZYM B reagens (ZYM B) - McFarland Standard (Ref. 70 900), Nr. 1 på skalaen
- 10 inkubationsæsker (INCUB) - apiweb™ identifikationssoftware (Ref. 40 011) (spørg
- 10 resultatark (SHEET) bioMérieux)
- 1 indlægssedlen kan downloades fra
www.biomerieux.com/techlib. Materiale
- Pipetter eller PSIpetter
SAMMENSÆTNING
- Ampul-stativ
Strip - Ampulbeskytter
®
Sammensætningen af API Listeria strip'en er angivet i - Almindeligt laboratorieustyr til mikrobiologi
Aflæsningstabellen på denne indlægsseddel.
Medium ADVARSLER OG FORSIGTIGHEDSREGLER
• Til in-vitro diagnostisk brug og mikrobiologisk
MED Demineraliseret vand kontrol.
®
(API • Kun til professionel brug.
Suspensions- • Se faresætninger "H" og sikkerhedssætninger "P" er
medium) anført ovenfor.
2 ml • Dette kit indeholder produkter af animalsk oprindelse.
Certificeret kendskab til dyrenes oprindelse og/eller
Reagens sundhedstilstand er ikke nogen fuldgyldig garanti for, at
der ikke er indeholdt nogen overførbare patogene
ZYM B Fast Blue BB (aktiv ingrediens) 0.12 g
stoffer. Det anbefales derfor, at disse produkter
reagens* Methanol 40 ml
behandles som potentielt smittefarlige og håndteres
8 ml Dimethylsulfoxid (DMSO) 60 ml
under iagttagelse af de normale
De angivne mængder kan justeres, afhængigt af titeren for de sikkerhedsforanstaltninger (må ikke indtages eller
anvendte råmaterialer. indåndes).
• Alle prøver, bakteriekulturer og podede produkter skal
* Signalord: FARLIGT betragtes som smittefarlige og håndteres i
overensstemmelse hermed. Der skal anvendes aseptisk
teknik og sædvanlige forholdregler for håndtering af den
undersøgte bakteriekultur gennem hele denne
®
procedure. Se venligst "CLSI M29-A, Protection of
Laboratory Workers from Occupationally Acquired
Faresætning Infections; Approved Guideline - Gældende revision".
H226 : Brandfarlig væske og damp. For yderligere forsigtighedsforanstaltninger ved
H302 : Farlig ved indtagelse. håndtering henvises til "Biosafety in Microbiological and
H311 : Giftig ved hudkontakt. Biomedical Laboratories – CDC/NIH – Seneste
H315 : Forårsager hudirritation. udgivelse", eller de bestemmelser, der aktuelt anvendes
H319 : Forårsager alvorlig øjenirritation. i det enkelte land.
H331 : Giftig ved indånding. • Reagenserne må ikke anvendes efter udløbsdatoen.
H335 : Kan forårsage irritation af luftvejene. • Kontrollér inden brug, at emballage og komponenter er
H370 : Forårsager organskader. intakte.
bioMérieux SA Dansk - 1
api® Listeria 07887Q - da - 2015/03
• Brug ikke strips, der er beskadiget: deformerede BRUG AF REAGENSET

brønde, åbne poser med tørremiddel, … • Åbn ampullen med reagenset som angivet i afsnittet
• Lad reagenser antage stuetemperatur før brug. "Advarsler og forholdsregler" (ampul med dråbehætte).
• Åbn forsigtigt ampullerne som følger: • Inden hver ampul med reagens tages i brug, anbefales
- Anbring ampullen i ampulbeskytteren. det at udføre en kvalitetskontroltest med stammen
- Hold den beskyttede ampul i den ene hånd i ATCC
®
33090™ som nævnt i afsnittet om
lodret stilling (med den hvide plasthætte kvalitetskontrol for at eliminere defekte reagenser.
øverst). • Tryk en dråbe af reagenset ud.
- Tryk hætten så langt ned som muligt. • Luk forsigtigt flasken efter brug og opbevar den som
- Anbring spidsen af tommelfingeren på angivet i afsnittet "Opbevaringsbetingelser".
hættens rillede del og tryk udefter for at
knække toppen af ampullen. PRØVER
- Tag ampullen ud af ampulbeskytteren og læg ®
API Listeria må ikke bruges direkte sammen med
beskytteren til side til senere brug. kliniske eller andre prøver.
De mikroorganismer, der skal identificeres, skal først
* For ampul uden dråbehætte: isoleres på et egnet dyrkningsmedium i
- Tag forsigtigt hætten af. overensstemmelse med normale mikrobiologiske
* For ampul med dråbehætte: teknikker.
- Vend ampullen på hovedet og hold den i
lodret stilling.
- Klem forsigtigt på hætten for at frigøre en BRUGSANVISNING
dråbe eller for at overføre hele reagenset til Udvælgelse af kolonierne
dråbeflasken. • Kontrollér, at stammen hører til genus Listeria (korte
BEMÆRK : For senere brug anbefales det at Gram-positive stave, som er polymorfe, bevægelige ved
trykke på dråbehætten, inden ampullen 25°C, men ikke ved 37°C, katalase-positive og oxidase-
endevendes, for at overskydende negative).
reagensdråber kan suges tilbage og dermed • Da prøverne ofte indeholder en blanding af flere typer
undgå sprøjt med reagens på hætte eller Listeria, er det tilrådeligt at fremstille en subkultur på
fingre. blodagar med en velisoleret koloni. Inkubér pladen i
• De fremlagte præstationsdata blev fundet ved 24 timer ved 36°C ± 2°C.
anvendelse af den procedure, der er angivet på denne BEMÆRK: Følgende medier kan anvendes til at udtage
indlægsseddel. Enhver ændring eller modifikation af ®
prøver af kolonien, før API Listeria-strip'en anvendes:
denne procedure kan påvirke resultaterne. - ikke-selektivt blodagarmedium med en Columbia eller
• Ved fortolkning af testresultaterne skal der tages højde TSA-basis og med eller uden antibiotika ;
for patientens sygehistorie, prøvens kilde, stammens
- selektive medier for Listeria, med undtagelse af
kolonimæssige og mikroskopiske morfologi, samt, om
McBride medium (som hæmmer den enzymatiske
nødvendigt, resultaterne af eventuelle andre udførte ®
prøver, specielt de antibakterielle følsomhedsmønstre. manifestation af bakterier på API Listeria-strip'en).
Hvis dette medium anvendes til isoleringsformål, skal
der fremstilles en subkultur på blodagar.
OPBEVARINGSFORHOLD
Strips STR: Præparering af strip'en
Strips skal opbevares ved 2-8°C indtil den udløbsdato, der • Præparer inkubationsæsken (bakke og låg) og fordel
er angivet på emballagen. cirka 3 ml destilleret eller demineraliseret vand [eller
eventuelt vand uden tilsætningsstoffer eller kemikalier,
Medier MED: der kan frigive gasser (f.eks. Cl2, CO2, etc.)] i bakkens
Medier kan opbevares ved 2-30°C indtil den udløbsdato, fordybninger for at skabe en fugtig atmosfære.
der er angivet på pakningen. • Notér stammereferencen på bakkens forlængede klap.
(Notér ikke referencen på låget, da det kan blive flyttet
Reagens : under proceduren).
Reagenset skal opbevares i mørke ved 2-8°C indtil den • Fjern strip'en fra dens individuelle pakning.
udløbsdato, der er angivet på pakningen. • Anbring strip'en i inkubationsæsken.
Reagenset kan opbevares i op til en måned efter, at • Kassér tørremidlet.
ampullen er åbnet og reagenset er overført til
Præparering af inokulum
dråbeflasken (eller indtil udløbsdatoen, hvis denne ligger ®
tidligere): Notér åbningsdatoen på flaskens etiket. • Åbn ampullen med API suspensionsmedium (2 ml)
Reagenset ZYM B er meget lysfølsomt: kontroller som angivet i afsnittet "Advarsler og forsigtighedsregler"
reagensets udseende, inden det hældes på dråbeflaske. (ampul uden dråbehætte).
ZYM B reagenset er normalt gult til ravfarvet. Bortkast • Saml nogle få velisolerede kolonier op ved hjælp af en
reagenset, hvis der observeres antydning af lyserødt i det pipette eller PSIpette. Det anbefales at anvende unge
(tegn på nedbrydning af aktive ingredienser). Reagenset kulturer (18-24 timer gamle).
bliver ødelagt hvis det udsættes for laboratorie lys i et • Præparer en opløsning med en turbiditet svarende til
kortere tidsrum (approx. 1 time). 1 McFarland. Denne suspension skal anvendes
Sørg for at reagenset efter brug straks sættes tilbage i umiddelbart efter præpareringen.
køleskab. • Bemærk hæmolysetypen og notér den på resultatarket.
Dette gælder som en ekstra test.
Inokulation af strip'en Fortolkning

• Fordel bakteriesuspensionen i hvert af rørene, og Identifikation opnås med den numeriske profil.
undgå, at der dannes bobler (vip strip'en let fremad og • Bestemmelse af den numeriske profil :
anbring spidsen af pipetten eller PSIpetten mod siden af På resultatarket er de forskellige tests opdelt i grupper
brønden) : på tre, og der er tildelt en værdi på 1, 2 eller 4 for hver.
- Fyld rør og brønd på DIM testen (cirka 100 µl), og Ved at addere værdierne svarende til positive reaktioner
undgå, at der dannes en konveks overflade. inden for den enkelte gruppe opnås der en 4-cifret
- Fyld kun rørdelen af testene ESC til TAG (ca. 50 µl). numerisk profil, der udgør den numeriske profil.
BEMÆRK: Kvaliteten af fyldningen er meget vigtig: Rør, • Identifikation :
der er utilstrækkeligt fyldt eller overfyldt, kan give falsk Denne udføres ved hjælp af databasen (V1.2)
positive eller negative resultater. * med den numeriske profil:
• Luk inkubationsæsken. - Find frem til profilen i listen på denne indlægsseddel.
• Inkubér i 18-24 timer ved 36°C ± 2°C under aerobe Denne liste er ikke altomfattende, så hvis profilen
betingelser. mangler, kontroller med nedenstående
identifikationssoftware eller kontakt bioMérieux teknisk
AFLÆSNING OG FORTOLKNING service.
* med apiweb™ identifikationssoftware:
Aflæsning af strip - Indtast den 4-cifrede numeriske profil manuelt via
• Tilsæt en dråbe ZYM B reagens til DIM testen. tastaturet.
• Aflæs alle reaktioner inden for 3 minutter ved at
konferere med Aflæsningstabellen på denne
indlægsseddel.
• Notér om reaktionerne er positive eller negative (+/-) på
resultatarket.
• Notér også hæmolysetypen på resultatarket. Der tages 6 510 Listeria monocytogenes
ikke hensyn til resultatet af denne test ved fortolkning af
strip'en.
KVALITETSKONTROL
Medier, strips og reagenser kontrolleres systematisk på forskellige trin under fremstillingen.
®
En effektiv kvalitetskontrol kan anvendes til bekræftelse af acceptabel præstation af API LISTERIA systemet efter
levering/opbevaring. Denne metodologi kan udføres ved at følge ovenstående instruktioner for testning og imødegåelse
®
af kriterier angivet i CLSI M50-A Quality Control for Commercial Identification Systems.
®
Testning kan foretages med anvendelse af Listeria innocua ATCC 33090™ til vurdering af præstationen af DIM og
®
XYL test’ne. Tests udført af bioMérieux har vist, at DIM og XYL test’ne er de mest ustabile i API LISTERIA strip’en. Når
strip’en testes, kan Listeria innocua ATCC 33090 anvendes til detektion af nedbrydning.
For de brugere, som skal udføre omfattende kvalitetskontroltestning af strip’en, er det bedst at anvende følgende tre
®
stammer til demonstration af positiv og negativ reaktivitet for de fleste API LISTERIA tests.
® ®
®
®
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – V – +* –
3. – + + + – + + – – –
* Lejlighedsvis (–).
Profilerne er opnået efter dyrkning på Columbia fåreblodsagar.
Det er brugerens ansvar at foretage kvalitetskontrol i overensstemmelse med lokalt gældende bestemmelser.
METODENS BEGRÆNSNINGER PRÆSTATIONER

®
• API Listeria-systemet er udelukkende beregnet til 643 indsamlingsstammer og stammer af forskellig
identifikation af de bakterier, der hører til genus oprindelse, som hører til species, der er inkluderet i
Listeria, der er medtaget i databasen (se databasen, blev testet:
Identifikationtabel nederst på denne indlægsseddel). - 98,91 % af stammerne blev korrekt identificeret
Det kan ikke benyttes til at identificere nogen andre (med eller uden supplerende tests).
mikroorganismer eller til at udelukke, at de er til stede. - 0,62 % af stammerne blev ikke identificeret.
• Der bør kun anvendes rene kulturer af en enkelt - 0,47 % af stammerne blev fejlidentificeret.
organisme.
BORTSKAFFELSE AF AFFALD
FORVENTEDE RESULTATER
Bortskaffelse af ubrugt ZYM B reagens skal ske ifølge
Se Identifikationsoversigten i slutningen af denne proceduren for farligt kemisk affald.
indlægsseddel for forventede resultater for de Bortskaf alle brugte eller ubrugte reagenser (med
forskellige biokemiske reaktioner. undtagelse af ZYM B reagens) så vel som alle andre
kontaminerede engangsmaterialer i henhold til
procedurer for infektiøse eller potentielt infektiøse
produkter.
Det er ethvert laboratoriums ansvar at håndtere det
affald og spildevand, der opstår, i overensstemmelse
med dets type og grad af farlighed, og at behandle og
bortskaffe det (eller få det behandlet og bortskaffet) i
henhold til gældende forskrifter.
AFLÆSNINGSTABEL
AKTIVE MÆNGDE RESULTATER
TESTS REAKTIONER
INDHOLDSSTOFFER (mg/brønd) NEGATIVE POSITIVE
ZYM B / < 3 min
lys orange
Differentiering
DIM Enzymatisk substrat 0,106 lyserød beige orange
grå beige
Esculin 0,16
ESC hydrolyse (ESCulin) lysegul Sort
Ferricitrat 0,024
4-nitrofenyl-αD-
αMAN 0,045 α-MANnosidase farveløs gul
mannopyranosid
DARL D-ArabitoL 0,4 acidifikation (D-ARabitoL)
XYL D-Xylose 0,4 acidifikation (XYLose)
RHA L-Rhamnose 0,4 acidifikation (RHAmnose)
rød / gul /
MDG Metyl-αD-glucopyranosid 0,4 acidifikation (Metyl-αD-Glucopyranosid)
orange-rød gul-orange
RIB D-Ribose 0,4 acidifikation (RIBose)
G1P Glukose-1-Fosfat 0,4 acidifikation (Glukose-1-Fosfat)
TAG D-Tagatose 0,4 acidifikation (TAGatose)
• De angivne mængder kan justeres, afhængigt af titeren for de anvendte råmaterialer.

• Visse brønde indeholder produkter af animalsk oprindelse, specielt peptoner.
PROCEDURE s. I
LISTE OVER NUMERISKE PROFILER s. II
IDENTIFIKATIONSTABEL s. II
LITTERATURHENVISNINGER s. III
SYMBOLFORTEGNELSE s. IV
REVISIONSHISTORIK
Ændringstyper :
I/R Ikke relevant (første udgivelse)
Rettelse Rettelse af fejl i dokumentation
Teknisk ændring Tilføjelse, ændring og/eller fjernelse af oplysninger vedrørende produktet
Administrativt Implementering af ikke-tekniske ændringer, som ses af brugeren
Bemærk: Mindre typografiske, grammatiske og formateringsmæssige ændringer er ikke
medtaget i revisionshistorikken.
Frigivelsesdato Delnummer Ændringstype Ændringsresumé

KITTETS INDHOLD, PRØVER,
Administrativt SYMBOLFORTEGNELSE
2015/03 07887Q REVISIONSHISTORIK
SAMMENSÆTNING
Teknisk ændring
ADVARSLER OG FORHOLDSREGLER
BIOMÉRIEUX, det blå logo, API og apiweb er anvendte, under registrering og/eller indregistrerede varemærke tilhørende bioMérieux eller et af dets
datterselskaber, eller en af dets virksomheder.
CLSI er et varemærke tilhørende Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
ATCC-varemærket og handelsnavnet samt ethvert og alle ATCC-katalognumre er varemærker tilhørende American Type Culture Collection.
Alle andre handelsnavne og varemærker er den respective ejers ejendom.
673 620 399 RCS LYON

10300 07887Q - pl - 2015/03
®
Listeria
Zestaw do identyfikacji Listeria
WPROWADZENIE
®
API Listeria jest wystandaryzowanym zestawem do Zwrot określający środki ostrożności
identyfikacji Listeria, który wykorzystuje zminiaturyzowane P210 : Przechowywać z dala od źródeł ciepła, gorących
testy, jak również specjalnie opracowaną bazę danych. powierzchni, źródeł iskrzenia, otwartego ognia i innych
Pełna lista organizmów, które można zidentyfikować przy źródeł zapłonu. Nie palić.
użyciu tego systemu jest podana na końcu niniejszej P280 : Stosować rękawice ochronne/odzież
instrukcji w Tabeli Identyfikacyjnej. ochronną/ochronę oczu/ochronę twarzy.
P301 + P312 : W PRZYPADKU POŁKNIĘCIA: w
ZASADA DZIAŁANIA przypadku złego samopoczucia skontaktować się z
®
Pasek API Listeria składa się z 10 mikroprobówek OŚRODKIEM ZATRUĆ/lekarzem.
zawierających odwodnione substraty, które umożliwiają P302 + P352 : W PRZYPADKU KONTAKTU ZE SKÓRĄ:
przeprowadzenie testów enzymatycznych lub fermentacji umyć dużą ilością wody.
cukrów. P304 + P340 : W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ DO
Procesy metaboliczne zachodzące podczas inkubacji DRÓG ODDECHOWYCH: wyprowadzić lub wynieść
powodują zmiany koloru, które są albo spontaniczne, lub poszkodowanego na świeże powietrze i zapewnić mu
wywołane przez dodanie odczynników. warunki do swobodnego oddychania.
Po odczytaniu reakcji według Tabeli Odczytów, otrzymuje P305 + P351 + P338 : W PRZYPADKU DOSTANIA SIĘ
się identyfikację przez porównanie z Książką Kodów lub DO OCZU: ostrożnie płukać wodą przez kilka minut.
stosując program komputerowy. Wyjąć soczewki kontaktowe, jeżeli są i można je łatwo
usunąć. Nadal płukać.
ZAWARTOŚĆ ZESTAWU (Zestaw na 10 testów):
®
Więcej informacji znajduje się w Karcie Charakterystyki
- 10 pasków API Listeria (STR) Produktów Niebezpiecznych.
®
- 10 ampułek API Suspension Medium, 2 ml (MED)
- 1 ampułka odczynnika ZYM B (ZYM B) WYPOSAŻENIE WYMAGANE NIE NALEŻĄCE DO
- 10 komór inkubacyjnych (INCUB) ZESTAWU
- 10 kart wyników (SHEET)
Odczynniki
- 1 Ulotka techniczna zawarta w opakowaniu lub
- Standard McFarlanda (Ref. 70 900), Nr 1 w/g skali
dostepna do pobrania na stronie:
- Oprogramowanie komputerowe do identyfikacji
www.biomerieux.com/techlib
apiweb TM (Ref. 40 011) (skontaktuj się z bioMérieux)
SKŁAD
Materiały
Pasek - Pipety lub PSIpety
®
Skład paska API Listeria podano w tej instrukcji w Tabeli - Osłona na ampułkę
Odczytów. - Statyw do ampułek
Podłoże - Wyposażenie zazwyczaj stosowane w laboratorium
mikrobiologicznym
MED Woda demineralizowana
®
(API ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
Suspension
Mediu • Do diagnostyki in vitro i kontroli mikrobiologicznej.
2 ml • Do wykorzystania wyłącznie przez profesjonalistów.
• Należy zapoznać się z zagrożeniami "H" i ostrzeżeniami
Odczynnik "P" wymienionymi powyżej.
• Produkt zawiera materiały pochodzenia zwierzęcego.
Odczynnik Fast Blue BB (aktywny składnik) 0.12 g
Świadectwo pochodzenia i/lub stanu sanitarnego
ZYM B * Metanol 40 ml
zwierząt nie gwarantuje w pełni nieobecności czynników
8 ml Dimetylosulfotlenek (DMSO) 60 ml
chorobotwórczych. Dlatego należy obchodzić się z nim
Wskazane stężenia mogą być regulowane w zależności od zgodnie z zasadami postępowania z materiałem
miana użytego surowego materiału. potencjalnie zakaźnym (nie spożywać i nie wdychać).
* Hasło ostrzegawcze: NIEBEZPIECZENSTWO • Wszystkie próbki pobrane od pacjentów, hodowle
bakteryjne i wykorzystane produkty są potencjalnie
zakaźne i powinny być traktowane zgodnie z zalecanymi
środkami ostrożności.
Należy stosować techniki aseptyczne i zwykłe procedury
obowiązujące przy pracy ze szczepami bakteryjnymi
Zwrot określający zagrożenie ®
zgodnie z "CLSI M29-A, Protection of Laboratory
H226 : Łatwopalna ciecz i pary. Workers From Occupationally Acquired Infections;
H302 : Działa szkodliwie po połknięciu. Approved Guideline - Bieżąca wersja".
H311 : Działa toksycznie w kontakcie ze skórą. Dodatkowe środki ostrożności zawarte są w "Biosafety
H315 : Działa drażniąco na skórę. in Microbiological and Biomedical Laboratories –
H319 : Działa drażniąco na oczy. CDC/NIH – Ostatnie wydanie", lub regulowane
H331 : Działa toksycznie w następstwie wdychania. przepisami właściwymi dla poszczególnych państw.
H335 : Może powodować podrażnienie dróg
oddechowych.
H370 : Powoduje uszkodzenie narządów.
bioMérieux SA Polski - 1
api® Listeria 07887Q - pl - 2015/03
• Nie używać odczynników przeterminowanych. Odczynnik ZYM B jest bardzo wrażliwy na światło:
• Przed użyciem sprawdzić, czy opakowania sprawdzić przejrzystość odczynnika przed przeniesieniem
poszczególnych składników są nienaruszone. do butelki z kroplomierzem.
• Nie używać pasków uszkodzonych : odkształcone Odczynnik ZYM B prawidłowo ma żółty do bursztynowego
studzienki, otwarty środek odwadniający, ... kolor. Należy wyrzucić odczynnik, jeśli zaobserwuje się
• Przed użyciem doprowadzić odczynniki do temperatury jakikolwiek odcień różowego (oznaka zepsucia).
pokojowej. Wystawienie w laboratorium na światło, na krótki okres
• Ampułki otwierać ostrożnie w następujący sposób: czasu (około 1 godz.), powoduje rozkład odczynnika.
- Umieścić ampułkę w osłonie. Natychmiast po użyciu odczynnik umieszczać w lodówce.
- Trzymać osłoniętą ampułkę w jednej ręce w
pozycji pionowej (białą plastikową nasadką SPOSÓB UŻYCIA ODCZYNNIKA
do góry). • Otworzyć ampułkę zgodnie z paragrafem "Środki
- Wcisnąć nasadkę do dołu tak daleko jak to ostrożności" (ampułka z nasadką z kroplomierzem).
możliwe. • Przed użyciem każdej ampułki zaleca się
- Umieścić kciuk na wyżłobionej części przeprowadzenie kontroli jakości z użyciem szczepu
nasadki i nacisnąć od siebie tak, aby ATCC® 33090™ wskazanego w paragrafie Kontrola
odłamać końcówkę ampułki znajdującą się Jakości w celu wyeliminowania wadliwych odczynników.
wewnątrz nasadki. • Odmierzyć jedną kroplę odczynnika.
- Wyjąć ampułkę z osłony, którą należy • Po użyciu zamknąć dokładnie butelkę i przechowywać
odłożyć do kolejnego użycia. zgodnie z paragrafem "Przechowywanie".
* Dla ampułki z nasadką bez kroplomierza :
- Ostrożnie zdjąć nasadkę.
MATERIAŁ DO BADAŃ
* Dla ampułki z nasadką z kroplomierzem : ®
- Przekręcić ampułkę do góry dnem Paski API Listeria nie są przeznaczone do
i pozostawić w pozycji pionowej. bezpośrednich badań materiału klinicznego lub innych
- Ściskając delikatnie nasadkę przenieść po próbek.
kropli cały odczynnik do butelki Identyfikowany mikroorganizm musi być najpierw
z kroplomierzem. wyizolowany na podłożach hodowlanych zgodnie ze
UWAGA : Przed ponownym użyciem, zaleca standardowymi technikami mikrobiologicznymi.
się ścisnąć nasadkę zanim odwróci się
ampułkę do góry dnem, co pozwala na SPOSÓB WYKONANIA
zassanie z powrotem wiszących kroplii Wybór kolonii bakteryjnych
pozwala na uniknięcie zanieczyszczenia • Sprawdzić, czy badany szczep należy do rodzaju
odczynnikiem nasadki i palców. Listeria (krótkie Gram-dodatnie pałeczki, które są
• W celu osiągnięcia odpowiednich wyników należy polimorficzne, ruchliwe w 25°C, ale nie wykazują ruchu
stosować procedurę zawartą w opakowaniu. Każda w 37°C, katalazo-dodatnie i oksydazo-ujemne).
modyfikacja procedury może wpływać na wyniki. • Ponieważ próbki zawierają często mieszaninę kilku
• W interpretacji wyników testu należy wziąć pod uwagę typów Listeria, zaleca się założenie hodowli wtórnej na
historię choroby pacjenta, miejsce pobrania materiału, agarze krwawym używając dobrze wyizolowanej kolonii.
makro- i mikroskopową morfologię oraz jeśli będzie Płytkę inkubować przez 24 godziny w 36°C ± 2°C.
konieczne, wyniki innych przeprowadzonych testów,
szczególnie lekowrażliwości. UWAGA: Można używać następujących podłóż, aby
uzyskać hodowle wykorzystywane na paskach
®
PRZECHOWYWANIE API Listeria:
- niewybiórcze podłoża agarowe z krwią, w których jako
Paski STR: podstawa występują agar Columbia lub TSA,
Paski powinny być przechowywane w temperaturze 2-8°C uzupełnione lub nie antybiotykami;
do końca daty ważności podanej na opakowaniu. - wybiórcze podłoża dla Listeria, za wyjątkiem podłoża
McBride, które hamuje aktywność enzymatyczną
Podłoża MED: ®
bakterii na pasku API Listeria. Jeśli podłoże to zostanie
Podłoża powinny być przechowywane w temperaturze użyte do wyizolowania bakterii, należy założyć hodowlę
2-30°C do końca daty ważności podanej na opakowaniu. wtórną na agarze krwawym.
Odczynniki : Przygotowanie paska
Odczynniki powinny być przechowywane w ciemności, • Przygotować komorę inkubacyjną (podstawkę
w temperaturze 2-8°C do końca daty ważności podanej i pokrywkę) i nanieść około 3 ml destylowanej lub
na opakowaniu. demineralizowanej wody [lub jakiejkolwiek wody bez
Odczynniki można używać przez 1 miesiąc po otwarciu dodatków lub związków chemicznych, z których mogą
ampułki i przeniesieniu do butelki z kroplomierzem, (lub wydzielać się gazy (np. Cl2, CO2, itd.)] na podstawkę
do upłynięcia daty ważności oznaczonej na opakowaniu, w kształcie plastra miodu, w celu wytworzenia komory
jeśli przypada ona wcześniej): należy zanotować datę wilgotnej.
otwarcia na etykiecie butelki. • Zanotować numer szczepu na wydłużonej części
podstawki. (Nie notować numeru na pokrywce,
ponieważ może ona ulec zamianie w trakcie badań).
• Wyjąć pasek z indywidualnego opakowania.
• Umieścić pasek w komorze inkubacyjnej.
• Usunąć środek odwadniający.
Przygotowanie inokulum ODCZYT I INTERPRETACJA

®
• Otworzyć ampułkę API Suspension Medium (2 ml) Odczyt paska
zgodnie z paragrafem "Środki ostrożności" (ampułka • Dodać kroplę odczynnika ZYM B do testu DIM .
z nasadką bez kroplomierza). • Odczytać wszystkie reakcje w ciągu 3 minut korzystając
• Używając pipety lub PSIpety, pobrać kilka dobrze z Tabeli Odczytu zawartej w instrukcji.
wyizolowanych kolonii. Zaleca się używanie młodych • Zanotować, czy wynik jest pozytywny, czy negatywny
hodowli (18-24 godzinnych). (+/-) na karcie wyników.
• Przygotować zawiesinę bakteryjną o zmętnieniu • Na karcie wyników zanotować również typ hemolizy.
odpowiadającym 1 w skali McFarlanda. Zawiesinę tę Wynik tego testu nie jest brany pod uwagę
użyć natychmiast po sporządzeniu. w interpretacji paska.
• Sprawdzić typ hemolizy i zanotować na karcie wyników.
Stanowi ona test uzupełniający. Interpretacja
Napełnianie paska Identyfikację otrzymuje się z profilu numerycznego.
• Nanieść zawiesinę bakteryjną do mikroprobówek, • Określanie profilu numerycznego:
unikając tworzenia pęcherzyków (przechylić pasek Na karcie wyników testy podzielone są na grupy po trzy,
delikatnie do przodu i umieścić końcówkę pipety lub każdy odpowiednio o wartości 1, 2 lub 4. Przez dodanie
PSIpety przy bocznej ściance wgłębienia): do siebie wartości odpowiadających pozytywnym
- Napełnić probówkę i wgłębienie testu DIM (około reakcjom w obrębie każdej grupy otrzymuje się 4
100 µl), unikając tworzenia menisku wypukłego. cyfrowy profil numeryczny.
- Napełnić wyłącznie probówki testów od ESC do TAG • Identyfikacja:
(około 50 µl). Uzyskuje się ją używając bazy danych (V1.2)
UWAGA : Jakość napełnienia jest bardzo ważna: * z profilu numerycznego:
nadmierne lub niedostateczne wypełnienie probówek - Sprawdzić profil na liście w tej instrukcji; lista ta nie
może dawać fałszywie pozytywne lub fałszywie wyczerpuje wszystkich możliwości, więc jeśli brak
negatywne wyniki. jest tam profilu, należy zastosować program
• Zamknąć komorę inkubacyjną. komputerowy wskazany poniżej lub przez
• Inkubować przez 18-24 godzin w 36°C ± 2°C przedstawiciela firmy bioMérieux.
w warunkach tlenowych. * z oprogramowania komputerowego apiweb TM:
- Wprowadzić 4 cyfrowy profil numeryczny manualnie
przy użyciu klawiatury.
KONTROLA JAKOŚCI
Podłoża, paski i odczynniki są systematycznie poddawane kontroli jakości na różnym poziomie procesu produkcji.
®
Do oceny systemu API LISTERIA po transporcie/magazynowaniu może być używana Częściowa Kontrola Jakości.
Ta metodyka może być wykonywana według załączonych instrukcji badania w celu spełnienia kryteriów Kontroli Jakości
®
dla komercyjnych systemów identyfikacji mikrobiologicznej CLSI M50-A.
®
Do oceny testów DIM oraz XYL użyć można szczepu wzorcowego Listeria innocua ATCC 33090™. Badania
®
prowadzone przez bioMérieux wykazały, że testy DIM i XYL są najmniej trwałe w zestawie API LISTERIA. Szczepu
Listeria innocua ATCC 33090 można używać do wykrycia rozkładu.
Dla użytkowników, którzy zobowiązani są prowadzić Pełną Kontrolę Jakości pasków zaleca się trzy następujące
®
szczepy dla sprawdzenia dodatniej i ujemnej reaktywności większości testów zestawu API LISTERIA.
® ®
®
®
1. + + + + – + + – – –
2. + + – + + – + + +* –
3. – + + + – + + – – –
* Sporadycznie (–).
Profile otrzymane z hodowli na agarze Columbia z krwią baranią.
Użytkownik jest zobowiązany do prowadzenia kontroli jakości zgodnie z lokalnymi przepisami.
OGRANICZENIA METODY OCENA TESTU

®
• System API Listeria służy wyłącznie do identyfikacji Przebadano 643 szczepów, z kolekcji i różnych źródeł,
bakterii należących do rodzaju Listeria zawartych należących do gatunków zawartych w bazie danych :
w bazie danych (patrz Tabela Identyfikacyjna na - 98.91 % szczepów prawidłowo zidentyfikowano
końcu tej instrukcji). Nie może być używany do (z lub bez testów uzupełniających).
identyfikacji innych mikroorganizmów lub wykluczania - 0.62 % szczepów nie zidentyfikowano.
ich obecności. - 0.47 % zostało nieprawidłowo zidentyfikowanych.
• Należy używać tylko czysto wyizolowanych bakterii.
POSTĘPOWANIE ZE ZUŻYTYMI TESTAMI
ZAKRES SPODZIEWANYCH WYNIKÓW Odczynnika ZYM B należy pozbywać się zgodnie
W Tabeli Identyfikacyjnej na końcu instrukcji sprawdzić z procedurą dla niebezpiecznych związków
zakres spodziewanych wyników dla różnych testów chemicznych.
biochemicznych. Zużytych lub niezużytych odczynników (innych niż
odczynniki "ZYM B"), jak również innych skażonych
jednorazowych materiałów należy pozbywać się
zgodnie z procedurami dotyczącymi produktów
zakaźnych lub potencjalnie zakaźnych.
Obowiązkiem każdego laboratorium jest pozbywanie
się zużytych testów i wytworzonych ścieków w
zależności od typu i stopnia zabezpieczenia
laboratorium oraz dezynfekować je i usuwać (zlecić
dezynfekcję i usuwanie) zgodnie z zatwierdzonymi
procedurami.
TABELA ODCZYTÓW
STĘŻENIE WYNIKI
TEST AKTYWNE SKŁADNIKI REAKCJE/ENZYMY
(mg/probówka) NEGATYWNY POZYTYWNY
ZYM B / < 3 min
blado pomarańczowy
Rozróżnienie
DIM Substrat enzymatyczny 0,106 różowo-beżowy pomarańczowy
szaro-beżowy
Eskulina 0,16
ESC hydroliza (eskulina) blado żółty czarny
Cytrynian żelaza 0,024
4-nitrofenylo-αD-
αMAN 0,045 α-mannozydaza bezbarwny żółty
mannopiranozyd
DARL D-arabitol 0,4 zakwaszenie (D-arabitol)
XYL D-ksyloza 0,4 zakwaszenie (ksyloza)
RHA L-ramnoza 0,4 zakwaszenie (ramnoza)
czerwony / żółty /
Metylo-αD-
MDG 0,4 zakwaszenie (metylo-αD-Glukopiranozyd) pomarańczowo- żółto-
glukopiranozyd
czerwony pomarańczowy
RIB D-ryboza 0,4 zakwaszenie (ryboza)
G1P Glukozo-1-fosforan 0,4 zakwaszenie (Glukozo-1-fosforan)
TAG D-tagatoza 0,4 zakwaszenie (tagatoza)
• Wskazane stężenia mogą być regulowane w zależności od miana użytego surowego materiału.
• Niektóre mikroprobówki zawierają produkty pochodzenia zwierzęcego, zwłaszcza peptony.
METODYKA str. I
LISTA PROFILI NUMERYCZNYCH str. II
TABELA IDENTYFIKACYJNA str. II
PIŚMIENNICTWO str. III
TABELA SYMBOLI str. IV
TABELA HISTORII ZMIAN
Typ zmiany
N/D Nie dotyczy (pierwsze wydanie)
Poprawka Korekta nieprawidłowości w dokumentacji
Zmiana Techniczna Uzupełnienie, korekta i/lub usunięcie informacji dotyczących produktu
Administracyjne Wdrożenie zmian innych niż techniczne, istotnych dla użytkownika
Uwaga: Historia zmian nie zawiera drobnych zmian graficznych, gramatycznych oraz
dotyczących formatowania.
Data wydania Numer serii Typ zmiany Zestawienie zmian
ZAWARTOŚĆ ZESTAWU, MATERIAŁ DO

Administracyjna BADAŃ, TABELA SYMBOLI
2015/03 07887Q TABELA HISTORII ZMIAN
SKŁAD
Zmiana Techniczna
OSTRZEŻENIA I ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
BIOMERIEUX i jego niebieskie logo, API i apiweb są znakami towarowymi używanymi, w trakcie rejestracji i/lub zastrzeżonymi, należącym do bioMérieux,
jednego z jego podmiotów zależnych lub jednej z jego firm.
CLSI jest znakiem towarowym należącym do Clinical and Laboratory Standards Institute Inc.
Znak i nazwa handlowa ATCC oraz wszystkie numery katalogowe ATCC są znakami towarowymi należącymi do American Type Culture Collection.
Wszystkie pozostałe nazwy i znaki towarowe są własnością ich posiadaczy.
673 620 399 RCS LYON

api® Listeria 07887 Q - xl - 2015/03
METHODOLOGIE / PROCEDURE / METHODIK / TECNICA / PROCEDIMENTO /

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ / METOD / METODYKA
Gélose au sang / Blood agar / Blutagar /

Agar con sangre / Agar al sangue /
Gelose de sangue / Αιματούχο άγαρ /
Blodagar / Agar krwawy
1 McF
API Suspension Medium 2 ml
DIM
API Listeria ESC TAG
18:00 - 24:00 36°C ± 2°C
DIM : ZYM B
API Listeria
bioMérieux SA I
api® Listeria 07887Q - xl - 2015/03
LISTE DES PROFILS NUMÉRIQUES / LIST OF NUMERICAL PROFILES /

LISTE DER NUMERISCHEN PROFILE / LISTA DE PERFILES NUMÉRICOS /
LISTA DEI PROFILI NUMERICI / LISTA DOS PERFIS NUMÉRICOS /
ΚΑΤΑΛΟΓΟΣ ΑΡΙΘΜΗΤΙΚΩΝ ΠΡΟΦΙΛ / LISTA ÖVER NUMERISKA PROFILER /
PROFILLISTE / LISTA PROFILI NUMERYCZNYCH
2 150 Listeria ivanovii 3 750 Listeria ivanovii

2 170 Listeria ivanovii 3 770 Listeria ivanovii
2 250 Listeria ivanovii 6 010 Listeria monocytogenes
2 310 Listeria seeligeri/ivanovii 6 110 Listeria monocytogenes/innocua
2 311 Listeria welshimeri 6 120 Listeria grayi
2 330 Listeria ivanovii 6 130 Listeria grayi
2 350 Listeria ivanovii 6 310 Listeria seeligeri/welshimeri
2 370 Listeria ivanovii 6 311 Listeria welshimeri
2 410 Listeria monocytogenes 6 410 Listeria monocytogenes
2 510 Listeria monocytogenes 6 450 Listeria monocytogenes
2 550 Listeria monocytogenes/ivanovii 6 510 Listeria monocytogenes
3 110 Listeria seeligeri/innocua/ivanovii 6 711 Listeria welshimeri
3 120 Listeria grayi 7 110 Listeria innocua
3 130 Listeria grayi/ivanovii 7 111 Listeria welshimeri
3 210 Listeria seeligeri/ivanovii 7 301 Listeria welshimeri
3 250 Listeria ivanovii 7 310 Listeria seeligeri/welshimeri/innocua
3 300 Listeria seeligeri/ivanovii 7 320 Listeria grayi
3 310 Listeria seeligeri/ivanovii 7 330 Listeria grayi
3 311 Listeria welshimeri 7 500 Listeria innocua
3 330 Listeria ivanovii 7 510 Listeria innocua
3 350 Listeria ivanovi 7 520 Listeria grayi
3 510 Listeria innocua 7 710 Listeria welshimeri/innocua
3 520 Listeria grayi 7 711 Listeria welshimeri
3 730 Listeria ivanovii
TABLEAU D'IDENTIFICATION / IDENTIFICATION TABLE / PROZENTTABELLE /

TABLA DE IDENTIFICACION / TABELLA DI IDENTIFICAZIONE / QUADRO DE IDENTIFICAÇÃO /
ΠΙΝΑΚΑΣ ΤΑΥΤΟΠΟΙΗΣΗΣ / IDENTIFIERINGSTABELL / IDENTIFIKATIONSTABEL /
TABELA IDENTYFIKACYJNA
% de réactions positives après 18-24 heures à 36°C ± 2°C / % of positive reactions after 18-24 hours at 36°C ± 2°C /
% der positiven Reaktionen nach 18-24 Std. bei 36°C ± 2°C / % de las reacciones positivas después de 18-24 horas a 36°C ± 2°C /
% di reazioni positive dopo 18-24 ore a 36°C ± 2°C / % das reacções positivas após 18-24 horas a 36°C ± 2°C /
% θετικών αντιδράσεων μετά από 18-24 ώρες στους 36°C ± 2°C / % positiva reaktioner efter 18-24 timmar vid 36°C ± 2°C /
% positive reaktioner efter 18-24 timer ved 36°C ± 2°C / % reakcji pozytywnych po 18-24 godzinach w 36°C ± 2°C
API LISTERIA V1.2 DIM ESC αMAN DARL XYL RHA MDG RIB G1P TAG ßHEM*
Listeria grayi 99 100 99 100 1 16 33 100 0 0 -

Listeria innocua 99 100 98 100 2 66 98 0 0 0 -
Listeria ivanovii 88 100 0 99 97 4 99 33 91 0 ++
Listeria monocytogenes 0 100 98 97 0 98 100 0 5 0 +(-)
Listeria seeligeri 97 100 5 99 99 0 99 0 0 0 +
Listeria welshimeri 90 100 96 100 98 76 99 0 0 97 -
* Bergey's Manual of Systematic Bacteriology p./str. 1241
LEGENDE / KEY / LEGENDE / LEYENDA / LEGENDA / ΚΛΕΙΔΙ / NYCKEL / NØGLE (ßHEM) :

++ 100 % + > 90 % + (–) 70 - 90 % – < 10 %
bioMérieux SA II
BIBLIOGRAPHIE / LITERATURE REFERENCES / LITERATUR /

BIBLIOGRAFIA / ΑΝΑΦΟΡΕΣ ΑΡΘΡΟΓΡΑΦΙΩΝ / REFERENSLITTERATUR /
LITTERATURHENVISNINGER / PIŚMIENNICTWO
1. BEUMER R.R., TE GIFFEL M.C., KOK M.T., ROMBOUTS 7. MacGOWAN A.P., MARSHALL R.J., REEVES D.S. et al.
F.M. Evaluation of the API 20 STREP System for Identifying
Confirmation and identification of Listeria spp. Listeria species.
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2. BILLE J. 8. MacLAUCHLIN J.
Listeria. The identification of Listeria species
(1991) Méd. et Hyg., 49, 621-624. (1997) Int. J. Food Microbiol., 38 (1), 77-81.
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Identify Listeria isolates. (1985) Zbl. Bakt. Hyg., A 260, 221-231.
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4. BOERLIN P., ROCOURT J., PIFFARETTI J.C. Listériose humaine : épidémiologie et prévention.
Taxonomy of the Genus Listeria by using Multilocus Enzyme (1991) La lettre de l'infectiologue, VI, 14-18.
Electrophoresis. 11. SNEATH P.H.A., MAIR N.S., SHARPE M.E., HOLT J.G.
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Evaluation of media for determining haemolytic activity and (1986) Williams and Wilkins, Co., Baltimore, MD.
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Evaluation of the Mast ID and API 50 CH Systems for
Identification of Listeria spp.
(1990) Appl. Environ. Microbiol., 56, 657-660.
bioMérieux SA III
TABLE DES SYMBOLES / INDEX OF SYMBOLS / SYMBOLE / CUADRO DE SIMBOLOS /

TABELLA DEI SIMBOLI / QUADRO DOS SÍMBOLOS / ΠΙΝΑΚΑΣ ΣΥΜΒΟΛΩΝ /
SYMBOLER / SYMBOLFORTEGNELSE / TABELA SYMBOLI
Symbole / Symbol Signification / Meaning / Bedeutung

Símbolo / Simbolo Significado / Significato / Επεξήγηση
Σύμβολο Betydelse / Betydning / Znaczenie
Référence du catalogue / Catalogue number (GB) / Catalog number (US)
Bestellnummer / Número de catálogo / Numero di catalogo
Referência de catálogo / Αριθμός καταλόγου
Katalognummer / Katalognummer / Numer katalogowy
Dispositif médical de diagnostic in vitro
In Vitro Diagnostic Medical Device / In Vitro Diagnostikum
Producto sanitario para diagnóstico in vitro
Dispositivo medico-diagnostico in vitro
Dispositivo médico para diagnóstico in vitro
In Vitro Διαγνωστικό Ιατροτεχνολογικό προϊόν
Medicintekniska produkter för in vitro diagnostik
Medicinsk udstyr til in vitro-diagnostik / Wyrób do diagnostyki In Vitro
Fabricant / Manufacturer / Hersteller / Fabricante
Fabbricante / Κατασκευαστής / Tillverkare / Producent
Limites de température / Temperature limit
Temperaturbegrenzung / Límite de temperatura
Limiti di temperatura / Limites de temperatura
Περιορισμοί θερμοκρασίας / Temperaturbegränsning
Temperaturbegrænsning / Przestrzegać zakresu temperatury
Utiliser jusque / Use by date / Verwendbar bis
Fecha de caducidad / Utilizzare entro / Prazo de validade
Ημερομηνία λήξης / Använd före / Holdbar til / Użyć przed
Code du lot / Batch code / Chargenbezeichnung / Código de lote
Codice del lotto / Código do lote / Αριθμός Παρτίδας
Lot nummer / Lotnummer / Kod partii
Consulter les instructions d'utilisation / Consult Instructions for Use
Gebrauchsanweisung beachten / Consulte las instrucciones de uso
Consultare le istruzioni per l'uso / Consulte as instruções de utilização
Συμβουλευτείτε τις οδηγίες χρήσης / Se handhavandebeskrivningen
Se brugsanvisning / Sprawdź w instrukcji obsługi
Contenu suffisant pour "n" tests / Contains sufficient for <n> tests
Inhalt ausreichend für <n> Prüfungen
Contenido suficiente para <n> ensayos
Contenuto sufficiente per "n" saggi
Conteúdo suficiente para “n” ensaios
Περιεχόμενο επαρκές για «ν» εξετάσεις / Räcker till "n" antal tester
Indeholder tilstrækkeligt til "n" test / Wystarczy na wykonanie <n> testów
Conserver à l’abri de la lumière / Protect from light
Lichtgeschützt lagern / Conservar protegido de la luz
Conservare al riparo della luce / Conservar ao abrigo da luz
Προστατέψτε από το φως / Skyddas mot ljus
Beskyttes mod lys / Chronić przed świtałem
Date de fabrication / Date of manufacture / Herstellungsdatum / Fecha de
fabricación / Data di fabbricazione / Data de fabrico / Ημερομηνία
Παραγωγής / Tillverkningsdatum / Produktionsdato / Data produkcji
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INTRODUCTION ET OBJET DU TEST

• Les prélèvements, cultures bactériennes et produits Réactif :

Préparation de la galerie LECTURE ET INTERPRETATION

LIMITES DU TEST PERFORMANCES

Méthyl-αD- rouge / jaune /

HISTORIQUE DES REVISIONS

Catégories de type de modification :

Modification technique COMPOSITION, PRECAUTIONS D’UTILISATION

673 620 399 RCS LYON

SUMMARY AND EXPLANATION Precautionary statements

Inoculation of the strip • Determination of the numerical profile :

LIMITATIONS OF THE METHOD WASTE DISPOSAL

Change type categories

Release Part Number Change Type Change Summary

673 620 399 RCS LYON

EINFÜHRUNG UND TESTERKLÄRUNG Sicherheitshinweis

6 510 Listeria monocytogenes

LIMITIERUNGEN BESEITIGUNG DER ABFÄLLE

Methyl-αD- Säurebildung (Methyl-αD- rot / gelb /

673 620 399 RCS LYON

INTRODUCCIÓN Y OBJETO DEL ENSAYO

• No emplear los reactivos después de su fecha de Reactivo :

LÍMITES DEL ENSAYO ELIMINACION DE LOS DESECHOS

COMPONENTES CANT RESULTADOS

Fecha de Versión Tipo de cambio Resumen de cambios

673 620 399 RCS LYON

INTRODUZIONE E OBIETTIVI DEL TEST

Preparazione dell’inoculo LETTURA E INTERPRETAZIONE

6 510 Listeria monocytogenes

LIMITI DEL METODO PERFORMANCE

RISULTATI ATTESI SMALTIMENTO DEI RIFIUTI

Metil-αD- Acidificazione (Metil-αD- rosso / giallo/

TABELLA DELLE REVISIONI

Data di Riferimento del Tipo di Riepilogo delle modifiche

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INTRODUÇÃO E OBJECTIVO DO TESTE Advertência de perigo

COMPOSIÇÃO REAGENTES E MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO

• As amostras, culturas bacterianas e produtos semeados Reagente:

• Inscrever a referência da estirpe/cepa na lingueta lateral LEITURA E INTERPRETAÇÃO

LIMITES DO TESTE COMPORTAMENTO FUNCIONAL

COMPONENTES QTD RESULTADOS

HISTÓRICO DAS REVISÕES

Alterar tipo de categorias :

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ΠΕΡΙΛΗΨΗ ΚΑΙ ΕΠΕΞΗΓΗΣΗ Δήλωση επικινδυνότητας

• Όλα τα δείγματα, οι μικροβιακές καλλιέργειες και τα ΣΥΝΘΗΚΕΣ ΦΥΛΑΞΗΣ

ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Τα ακόλουθα υλικά μπορούν να ΑΝΑΓΝΩΣΗ ΚΑΙ ΕΡΜΗΝΕΙΑ

ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΜΕΘΟΔΟΥ ΑΠΟΡΡΙΨΗ ΑΠΟΒΛΗΤΩΝ

Μεθυλο-αD- οξίνιση (Μεθυλο-αD- ερυθρό / κίτρινο /

Ημερομηνία κυκλοφορίας Κωδικός Τύπος Αλλαγής Περίληψη Αλλαγής

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SAMMANFATTNING OCH FÖRKLARING Faroangivelse

• Alla prover, odlingar av mikroorganismer och Reagens:

Preparering av stripset AVLÄSNING OCH TOLKNING

METODENS BEGRÄNSNINGAR PRESTANDA

• De angivna mängderna kan variera beroende på titern hos de använda råmaterialen.

Publiceringsdatum Artikelnummer Typ av ändring Sammanfattning av ändringar

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