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    Test de La Catalase: Réalisé Par

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    Ayoub Qrirou
    Le document décrit un test de la catalase réalisé par deux étudiants. Il explique ce qu'est la catalase, son rôle dans la décomposition du peroxyde d'hydrogène, et la procédure pour réaliser le test sur une colonie bactérienne.

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    Ayoub Qrirou
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    Ayoub Qrirou
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    Test de la catalase

    Réalisé par :
     QRIROU AYOUB
     EL GUERCH AYOUB

    Filière :
     Agro-
    Industrie

    Année universitaire :
    2018-2019
    Plan
    • Introduction
    Rappel
    • Gram + et Gram - :
     La différence se retrouve au niveau de leur paroi et membrane.
    Cette différence vient de la présence du maillage du
    peptidoglycane qui sera différent entre les deux types de bactéries.

     Cette différence détermine si la bactérie est considérée Gram- ou


    Gram+ suite à la coloration de Gram : après cette coloration, les
    bactéries qui apparaissent rose sont Gram- et les bactéries
    violettes Gram+.
    Gram + Gram -

    Fixation

    Violet de gentiane

    Mordançage au lugol

    Décoloration

    Recoloration à la fuchsine
    ou à la safranine
    • H 2O 2 :
     Le peroxyde d'hydrogène est un composé chimique de formule
    H2O2. Sa solution aqueuse est appelée eau oxygénée. Elle est
    incolore et légèrement plus visqueuse que l'eau.

     Le peroxyde d'hydrogène existe naturellement chez les êtres vivants


    comme sous-produit de la respiration cellulaire. Tous les organismes
    aérobies possèdent des enzymes, appelées peroxydases, qui
    catalysent la dismutation de H2O2 en H2O et O2 :

    2 H2O2 → 2 H2O +O2


    La catalase
    • Définition :
    La catalase est une enzyme qui permet la dismutation du
    peroxyde d'hydrogène (eau oxygénée) en eau et dioxygène.
    • Structure de la catalase :
    Les catalases sont retrouvées chez tous les organismes aérobies,
    dans les peroxysomes des eucaryotes. Ce sont des enzymes
    formées de quatre chaînes peptidiques, chacune composée de plus
    de 500 acides aminés. Elles contiennent des atomes de Fer au
    sein de hèmes, qui constituent les sites actifs de la protéine.
    • Principe :

     Cette enzyme est produite en abondance par les bactéries à métabolisme


    respiratoire (AS et AAF) qui peuvent détruire les peroxydes. La catalase
    est une enzyme qui catalyse :

    2 H2O2 → 2 H2O +O2

     La plupart des microorganismes aérobies possèdent une catalase, en


    particulier les bacilles Gram négatifs aérobies. Son absence est donc un
    critère d'identification intéressant. Par exemple, parmi les coques Gram +
    aérobies, seuls les Streptococcaceae sont catalase
    négative. Lactobacillus et Erysipelothrix sont les seuls groupes de bacilles
    Gram + aérobies non sporulés dépourvus de catalase.

     Le rôle des peroxydases ou des catalases contenues dans les peptones ou


    dans certains additifs (sang. . .) des milieux est déterminant pour permettre
    le développement aérobie des bactéries catalase négative comme
    les Streptococcaceae.
    • Technique :

     Déposer sur une lame une goutte d’eau oxygénée (peroxyde d’hydrogéne)
    à l’aide d’une pipette Pasteur.

     Prélever une colonie à l’aide de l’anse.

     Dissocier la colonie dans la goutte.


    • Lecture :

     apparition de bulles, dégagement gazeux de


    dioxygène : catalase +

     pas de bulles : catalase –

    Cause d’erreurs : réalisation du test sur un


    bouillon contenant la catalase, à partir d’une
    gélose au sang qui possède une activité
    catalasique, suspension bactérienne
    insuffisante, eau oxygénée périmée.

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