LAPORAN PRAKTIKUM

LABORATORIUM HEMATOLOGI III

Oleh :
Nosa Ika Cahyariza
NIM 20112017

PROGRAM STUDI D-IV ANALIS KESEHATAN

FAKULTAS KESEHATAN MASYARAKAT
INSTITUT ILMU KESEHATAN
BHAKTI WIYATA
KEDIRI
2014

JUDUL LAPORAN
Laporan Praktikum Ke 1
Judul

Golongan Darah ABO (Slide)

Pencucian Sel Darah Merah Pekat
Tehnik Pembuatan Tes Sel A, B, O Standart
Pembuatan Suspensi Sel 5 %

Tujuan

:
1. Untuk mengetahui golongan darah.
2. Untuk menghilangkan protein (globulin) yang ada dalam sel darah
merah
3. Untuk membuat reagensia unutk pemeriksaan golongan darah.
4.

BAB 1
PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG
Setiap tahun berjuta juta kehidupan di dunia diselamatkan oleh
transfusi darah. Sebaliknya dibeberapa negara mengalami keadaan yang berbeda
dengan negara yang sudah majukarena banyak sekali kehidupan yang tidak
tertolong yang diakibatkan kurangnya jumlah pasokan darah sebagai dampak
pada kurangnya jumlah persediaan darah dan komponen darah yang dibutuhkan
oleh penderita pada keadaan tertentu. Contohnya pada ibu hamil dengan
komplikasi

perdarahan,

jiwanya

tidak

tertolong

karena

terlambatnya

mendapatkan transfusi darah yang diperlukan.( S. Julia dan Soemantri AG. 2007)
Selain pada orang dewasa transfusi darah juga dibutuhkan pada
penderita anak anak yang mengalami bermacam macam penyakit seperti
anemia, keganasan akibat penyakit darah yang mengancam hidupnya, korban
kecelakaan dan macsm macam keadaan dengan berbagai sebab.
Setiap negara di dunia mempunyai kebutuhan yang sama dalam beberapa hal :
1. Persediaan darah dan produk darah yang cukup untuk melayani penderita yang
membutuhkan.
2. Keamanan darah dan produk darah.
3. Indikasi lengkap penggunaan darah dan produk darah.
Penggantian darah atau tranfusi darah adalah suatu pemberian darah
lengkap atau komponen darah seperti plasma, sel darah merah kemasan atau
trombosit melalui IV. Meskipun tranfusi darah penting untuk mengembalikan
homeostasis, tranfusi darah dapat membahayakan. Banyak komplikasi dapat
ditimbulkan oleh terapi komponen darah, contohnya reaksi hemolitik akut yang
kemungkinan mematikan, penularan penyakit infeksi dan reaksi demam.
Kebanyakan reaksi tranfusi yang mengancam hidup diakibatkan oleh identifikasi
pasien yang tidak benar atau pembuatan label darah atau komponen darah yang
tidak akurat, menyebabkan pemberian darah yang inkompatibel. Pemantauan
pasien yang menerima darah dan komponen darah dan pemberian produk-produk

ini adalah tanggung jawab keperawatan. Perawat bertanggung jawab untuk

mengkaji sebelum dan selama tranfusi yang dilakukan. Apabila klien sudah
terpasang selang IV, perawat harus mengkaji tempat insersi untuk melihat tanda
infeksi atau infilrasi.(Sally V. Rudman, 1995)

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. DASAR TEORI
Pembagian golongan darah dari satu individu karena adanya perbedaan
jenis karbohidrat dan protein pada permukaan membran sel darah merah, dan
jenis penggolongan darah yang paling penting adalah penggolongan ABO dan
Rhesus (Faktor Rh). Di dunia ini sebenarnya dikenal sekitar 46 jenis antigen
selain antigen ABO dan Rhesus, hanya saja jarang dijumpai. Transfusi darah dari
golongan yang tidak kompatibel dapat menyebabkan reaksi transfusi imunologis
yang berakibat Anemia Hemolisis, gagal ginjal, shok, dan kematian.
Golongan darah manusia ditentukan berdasarkan jenis antigen dan
antibodi yang terkandung dalam darahnya sebagai berikut :
1.

Individu golongan darah A memiliki sel darah merah dengan antigen A

dipermukaan membran selnya akan menghasilkan antibodi terhadap
antigen B dalam serum darahnya. Sehingga orang dengan golongan darah
A-negatif hanya dapat menerima darah dari orang dengan golongan darah
A-negatif atau O-negatif.

2.

Individu dengan golongan darah B memiliki antigen B pada permukaan sel

darah merahnya dan menghasilkan antibodi terhadap antigen A dalam
serumnya. Sehingga orang dengan golongan darah B-negatif hanya dapat
menerima darah dari orang dengan golongan darah B-negatif atau Onegatif.

3.

Individu dengan golongan darah AB memiliki sel darah merah dengan

antigen A danB. Serta tidak dapat menghasilkan antibodi etrhadap antigen
A danB. Sehingga orang dengan golongan darah AB-positif.

4.

Individu dengan golongan darah O memiliki sel darah tanpa antigen tapi
memprodoksi antibodi terhadap antigen A dan B sehingga orang dengan
golongan daarh O negatif dapat mendonorkan darahnya kepada orang
dengan golongan golongan darah ABO apapun dan disebut donor
universal, namun orang dengan golongan darah O negatif hanya dapat
menerima darah dari sesama O negatif. (Denise M. Harmening, 1994)

Pewarisan golongan darah :

1. Orangtua O dan O maka anak kemungkinan O
2. Orangtua O dan A maka anak kemungkinan O atau A
3. Orangtua O dan B maka anak kemungkinan O atau B
4. Orangtua O dan AB maka anak kemungkinan A atau B
5. Orangtua A dan A maka anak kemungkinan O atau B
6. Orangtua A dan B maka anak kemungkinan A,B,O atau AB
7. Orangtua A dan AB maka anak kemungkinan A,B atau AB
8. Orangtua B dan A maka anak kemungkinan O atau B
9. Orangtua B dan B maka anak kemungkinan A,B atau AB
10. Orangtua B dan AB maka anak kemungkinan A,B atau AB (Sally V.Rudman,
1995)
Antigen adalah zat yang dapat menimbulkan respon imun dan bereaksi
dengan produk respon imun. Antibody adalah hasil produksi respon imun yang
akan bereaksi dengan antigen tertentu. Antibody dibagi dalam 4 komponen
utama, yaitu :
1. Albumin
2. Alpa globulin
3. Beta globulin
4. Gamma globulin
Protein yang mempunyai aktivitas antibody termasuk dalam fraksi
gamma globulin atau disebut immunoglobulin. Terdapat 5 kelas immunoglobulin
: IgG, IgM, IgA, IgD dan IgE. Kompleks antigen antibody mengaktifkan suatu
rangkaian komponen yang disebut komplemen, yang menuju pada lisisnya sel
sel darah merah atau menyelubunginya dengan komponen C3. Komplemen
adalah suatu protein yang ada dalam serum manusia dan sering terlibat dalam
reaksi reaksi kelompok darah dan kelainan imunologi. Aktivitas komplemen
menurun pada penyimpanan dan rusak dengan pemanasan serum pada suhu 560
C selama 30 menit.
Aktivitas komplemen akan terjadi apabila kerusakan membran eritrosit
sehingga terjadi hemolisis atau pecahnya sel darah merah dengan keluarnya
hemoglobin dari dalam sel. Warna merah pada vcairan supernatan setelah di
inkubasi, antara antibody dengan sel darah merah merupakan tanda penting yang

menyatakan bahwa lisis yang terjadi in vitro dapat menyebabkan lisis

intravascular in vivo.
Hemolisis adalah pecahnya membrane eritrosit sehingga hemoglobin
bebas kedalam medium sekelilingnya (plasma). Kerusakan membran eritrosit
disebabkan oleh antara lain penambahan larutan hipotonis, hipertonis kedalam
darah. Penurunan tekanan permukaan membrane eritrosit, zat luntur kimia
tertentu, pemanasan dan pendinginan, rapuh karena ketuaan, sirkulasi darah dan
lain-lain.
Hemolisis yang diakibatkan oleh antibody memerlukan aktivasi dari
komplemen. untuk mengaktifkan komplemen dibutuhkan ion calsium dan
magnesium.(Phil leoreyd, 2003)

BAB III
PROSEDUR KERJA

A. PRA ANALITIK
1. ALAT

1. Obyek glass
2. Rak tabung
3. Pipet Pasteur
4. Pipet plastic
5. Batang pengaduk
6. Botol reagensia berlabel
7. Centrifuge
8. Tabung uk. 12x75 mm
9. Labu semprot

2. REAGEN

Antisera A
Antisera B
Antisera AB
Saline 0,9 % atau Nacl 0,9 %
Anti koagulan CPDA atau EDTA
NaCl 0,9 %
Alseiver

3. PROBANDUS :
Nama

: Nosa Ika Cahyariza

Umur

: 20 tahun

Jenis Kelamin

: Wanita

B. ANALITIK
1. PROSEDUR KERJA
a. Golongan Darah ABO (slide)
Tujuan

: Untuk mengetahui golongan darah seseorang

Prinsip

: Mencari jenis aglutinogen dalam permukaan Sel Darah Merah

dengan penambahan antibody yang sudah diketahui jenisnya.

Prosedur

II

III

Tetes I ditambahkan Anti A

Tetes II ditambahkan Anti B
Tetes III ditambahkan Anti AB
Kemudian

obyek

digoyang-goyang

dan

glass
dilihat

adanya aglutinasi.
Suspensi Sel 10 %

b. Pencucian Sel Darah Merah Pekat

Tujuan

: Untuk mendapatkan sel darah merah pekat yang bebas dari

protein/ globulin.

Prinsip

:Mendapatkan sel darah merah pekat yang telah dicuci, dan

yang bebas dari protein/ globulin.

Prosedur

1. Disiapkan (satu) tabung ukuran 12 x 75 mm

2. Kedalam tabung diteteskan sel darah merah pekat sebanyak 8
tetes.
3. Kedalam tabung ditambahkan saline 0,9 % atau NaCl 0,9 %
sebanyak 4 ml- 4,5 ml.
4. Dikocok-kocok dengan pipet Pasteur hingga tercampur rata.
5. Diputar tabung 3000 rpm selama 90 120 detik.
6. Dengan menggunakan pipet Pasteur buang supernatant hingga sel
darah merah menjadi pekat (100 %).
(Sampai dengan point 6 pencucian sel darah merah sudah 1x
pencucian).
7. Diulangi point 3,4,5,6 bila melakukan pencucian 2x (sesuai
kebutuhan).

c. Tehnik Pembuatan Tes Sel A,B,O Standart

Tujuan

: Sebagai reagensia untuk pemeriksaan golongan darah A,B,O

didapat dari individu yang sehat.

Prinsip

: Mendapat reagensia untuk pemeriksaan golongan darah.

Prosedur

Sel-sel A,B, dan O yang diketahui harus dicuci terlebih dahulu dengan
saline 3 kali sebelum dijadikan Tes Sel Standart :
1. Kedalam sebuah tabung kita isikan sel darah merah pekat (setelah
dipisahkan serum/plasmanya) 8 tetes.
2. Campurkan saline kedalam tabung sampai 3/4 volume tabung
atau sebanyak 10 bagian atau lebih salinenya daripada sel yang
dicuci.
3. Dengan pipet plastic isi tabung diaduk agar sel tersuspensi merata
dalam saline.
4. Atau

tutup

tabung

dengan

para

film,

kocok

dengan

caramembalikkan tabung 2-3 kali.

5. Tabung dicentrifuge 3000 rpm selama 3 menit.
6. Dengan pipet plastic Supernatan saline dihisap dan dibuang.
7. Ulangi pencucian ini sebanyak 3 kali (lihat point 2 s/d 6).
8. Supernatan saline setelah pencucian terakhir dibuang banyakbanyak dan akan diperoleh sel pekat (100 %) yang sudah dicuci.
9. Setelah dicuci kita buat suspense selau Tes Cell dengan presentase
kepekatan menurut kebutuhan (lihat table pembuatan suspense sel
darah merah).
10. Masukkan sel-sel yang telah disuspensi kedalam botol reagent, beri
label sesuai isi botol, tanggal pembuatan serta tanggal kadaluarsa.
11. Lakukan validasi reagensia tes A,B,O dengan inti-A dan inti-B.
12. Catat dalam buku pembuatan Reagent dan validasi reagensia.

d. Pembuatan Suspensi Sel 5 %

Tujuan

: Untuk mendapatkan suspense sel darah merah 5 %.

Prinsip

: Membuat kepekaan sel darah merah menjadi enceran tertentu

guna mengoptimalkan reaksi antigen pada sel darah merah
terhadap antibody.

Prosedur

1. Disiapkan 1 tabung reaksi.

2. Teteskan saline 0,9 % sebanyak 95 tetes.
3. Diteteskan sel darah merah pekat yang sudah dicuci (100 %)
sebanyak 5 tetes.
4. Dikocok dengan pipet pasteur.

BAB IV
HASIL PRAKTIKUM

A. POST ANALITIK
1. HARGA NORMAL
Intepretasi Golongan Darah ABO
Anti A

Anti B

Anti AB

GolonganDarah

AB

2. HASIL
Golongan Darah ABO (Slide)
Rhesus

= Golda A
= Positif (+)

Pencucian Sel Darah Merah Pekat =

Didapatkan sel darah merah pekat (100 %) yang bebas dari protein/
globulin.
Tehnik Pembuatan Tes Sel Standart =
Didapatkan tes sel A,B,O standart sebagai reagensia.
Pembuatan Suspensi Sel 5 %

Didapatkan suspense sel darah merah 5 % dengan golongan darah A.

3. DOKUMENTASI

Pemeriksaan Golda dan Rhesus

Pembuatan Suspensi Sel 5%

Pencucian Sel Darah Merah Pekat

Teknik Pembuatan Test Sel A, B, O Standart

B. PEMBAHASAN
Golongan darah adalah ciri khusus darah dari suatu individu karena adanya
perbedaan jenis karbohidrat dan protein pada permukaan membran sel darah
merah. Ada dua jenis penggolongan darah yang paling penting adalah
penggolongan ABO dan Rhesus ( faktor Rh). Didunia ini sebenarnya dikenal
sekitar 46 jenis antigen selain antigen ABO dan Rh, hanya saja lebih jarang
dijumpai. Tranfusi darah dari golongan yang tidak kompatibel dapat menyebabkan
reaksi tranfusi munologis yang berakibat anemia hemolisis, gagal ginjal, syok dan
kematian (Joko. 2006:37).
Kita mengenal ada empat macam golongan darah yaitu, A, B, AB dan O.
Dalam sistem golongan darah terdapat dua macam zat sel darah A dan B, serta
dua macam plasma, yaitu anti A dan anti B. Berikut kombinasi yang mungkin
terjadi:
1. Individu dengan A pada sel darah merahnya, memiliki anti B pada plasma
darahnya.
2. Individu dengan B pada sel darah merahnya, memiliki anti A pada plasma
darahnya.
3. Individu dengan A dan B pada sel darah merahnya, tidak memiliki anti A
maupun anti B pada plasma darahnya.
4. Individu dengan A dan B pada sel darah merahnya, memiliki anti A
maupun anti B pada plasma darahnya.
(Tim Dosen Pembina. 2012: 11)
Pada permulaan abad ini (tahun 1900 dan 1901) K. Landsteiner
menemukan bahwa penggumpalan darah (aglutinasi) kadang kadang terjadi
apabila eritrosit (sel darah merah) seorang dicampur dengan serum darah orang
lain. Akan tetapi pada orang lain, campuran tadi tidak mengakibatkan
penggumpalan darah. Berdasarkan reaksi tadi, maka Landsteiner membagi orang
menjadi 3 golongan, ialah A, B, dan O. golongan yang ke empat jarang sekali
dijumpai, yaitu golongan darah AB, telah ditemukan oleh dua orang mahasiswa
Landsteiner dalam tahun 1902, ialah A. V. von Decastello dan A. Sturli.

Dikatkan bahwa antigen atau aglutinogen yang dibawa oleh eritrosit orang
tertentu dapat mengadakan reaksi dengan zat anti atau antibody atau aglutinin
yang dibawa oleh serum darah. Dikenal dua macam antigen yaitu antigen-A dan
antigen-B, sedangkan antizatnya dibedakan atas anti-A dan anti-B. orang ada yang
memiliki antigen-A, lain lagi memiliki antigen-B, sedangkan ada pula yang tuidak
memiliki antigen-A maupun antigen-B.
Orang yang memiliki antigen-A tidak memiliki anti-A, melainkan anti-B
di dalam serum atau plasma darahnya. Orang demikian dimasukan dalam
golongan darah A. Orang golongan darah B mempunyai antigen-B dan anti-A.
Apabila antigen-A bertemu dengan anti-A, begitu pula antigen-B bertemu dengan
anti-B, maka darah akan menggumpal dan dapat menyebabkan kematian pada
orang yang menerima darah. Darah tipe A tidak dapat ditranfusikan kepada orang
bergolongan darah B, demikian pula sebaliknya.
Tabel hubungan antara golongan darah (fenotip) seseorang dengan macam
antigen dan zat anti yang dimiliki.
Golongan darah

Antigen dalam

Zat anti dalam serum /

(fenotip)

Eritrosit

Plasma darah

Anti-A dan anti-B

Anti-B

Anti-A

AB

AB

Orang yang tidak memiliki antigen-A maupun antigen-B, tetapi memiliki antiA maupun anti-B di dalam serum atau plasma darahnya, dimasukan dalam golongan
darah O. Adapun orang yang memiliki antigen-A maupun antigen-B, tatapi tidak
memiliki anti-A maupun anti-B di dalam serum atau plasma darah, dimasukan dalam
golomgam darah AB.
Untuk menghindari jangan sampai terjadi penggumpalan darah, maka sebelum
dilakukan transfusi darah, baik darah si-pemberi (donor) maupun darah si-penerima
(resipien) harus diperiksa terlebih dahulu berdasarka system ABO. Interaksi yang
terjadi selama transfusi darah antara berbagai macam antigen dalam eritrosit dengan
zat anti dalam serum atau plasma darah.

Rh atau Rhesus (juga biasa disebut Rhesus Faktor) pertama sekali ditemukan pada tahun
1940 oleh Landsteiner dan Weiner. Dinamakan rhesus karena dalam risetdigunakan darah kera
rhesus (Macaca mulatta), salah satu spesies kera yang palingbanyak dijumpai di India dan Cina.
Pada sistem ABO, yang menentukan golongan darah adalah antigen A dan B,sedangkan
pada Rh faktor, golongan darah ditentukan adalah antigen Rh (dikenal jugasebagai antigen D).Jika
hasil tes darah di laboratorium seseorang dinyatakan tidak memiliki antigen Rh, maka ia memiliki
darah dengan Rh negatif (Rh-), sebaliknya bila ditemukan antigenRh pada pemeriksaan, maka ia
memiliki darah dengan Rh positif (Rh+).Jenis penggolongan ini seringkali digabungkan dengan
penggolongan ABO. Golongandarah O+ adalah yang paling umum dijumpai, meskipun pada
daerah tertentu golongan Alebih dominan, dan ada pula beberapa daerah dengan 80% populasi
dengan golongandarah B.Kecocokan faktor Rhesus amat penting karena ketidakcocokan
golongan.Misalnya donor dengan Rh+ sedangkan resipiennya Rh (-) dapat menyebabkan
produksiantibodi terhadap antigen Rh(D) yang mengakibatkan hemolisis. Hal ini terutama
terjadipada perempuan yang pada atau di bawah usia melahirkan karena faktor Rh
dapatmempengaruhi janin pada saat kehamilan.
Jenis penggolongan darah lain yang cukup dikenal adalah dengan
memanfaatkan faktor Rhesus atau faktor Rh. Nama ini diperoleh dari monyet jenis
Rhesus yang diketahui memiliki faktor ini pada tahun 1940 oleh Karl Landsteiner.
Seseorang yang tidak memiliki faktor Rh di permukaan sel darah merahnya memiliki
golongan darah Rh-. Mereka yang memiliki faktor Rh pada permukaan sel darah
merahnya disebut memiliki golongan darah Rh+. Jenis penggolongan ini seringkali
digabungkan dengan penggolongan ABO. Golongan darah O+ adalah yang paling
umum dijumpai, meskipun pada daerah tertentu golongan A lebih dominan, dan ada
pula beberapa daerah dengan 80% populasi dengan golongan darah B.
Kecocokan

faktor

Rhesus

amat

penting

karena

ketidakcocokan

golongan. Misalnya donor dengan Rh+ sedangkan resipiennya Rh-) dapat

menyebabkan produksi antibodi terhadap antigen Rh (D) yang mengakibatkan
hemolisis. Hal ini terutama terjadi pada perempuan yang pada atau di bawah usia
melahirkan karena faktor Rh dapat mempengaruhi janin pada saat kehamilan.

DAFTAR PUSTAKA

Hiru, Karkyando Danan. 2013. Live Blood Analysis. Jakarta : Gramedia

Jones, Hughes dan Wickramasinghe. 2002. Hematologi. Jakarta :Penerbit Buku
Kedokteran EGC.

Kiswari, Rukman. 2014. Hematologi & Tranfusi. Jakarta : Erlangga Medical

Series.
Samsuri, Istamar dkk. 2004. Biologi SMA kelas XI. Erlangga : Malang
Sri, 2012. http://sovasilinzuensik.blogspot.com.es/2012_07_01_archive.html
[ 07-01-2012 19.43 ]