SP005- 036

Fahrunnida & Pratiwi, Kandungan Saponin Buah, Daun dan Tangkai Daun Belimbing Wuluh

Kandungan Saponin Buah, Daun dan Tangkai Daun

Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)

The Content of Saponin in Fruits, Leaves and Petioles of

Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi L.)

Fahrunnida1, Rarastoeti Pratiwi2

Laboratorium Biokimia, Fakultas Biologi, Universitas Gadjah Mada
Jl. Teknika Selatan, Sekip Utara Yogyakarta, Indonesia
nida13ningrat@gmail.com; rarastp@ugm.ac.id

Abstract: In Indonesia, belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) has been used for traditional medicine, especially to
heal stiff, mumps, rheumatism, ulcers, acne, tinea versicolor, high blood pressure, and dental pain and
cough. This property is predicted comes from its secondary metabolites. Saponin is a compound group of
secondary metabolites which is known to have antitussives and expectorants effect, antiinflammatory,
antibacterial, and cytotoxic activity for cancer therapy. However, scientific information about the location
for saponin accumulation in this plant is still limited. This information is needed for the use of saponin from
A. bilimbi for herbal medicines development. The aim of this study was to know the content of saponin in
fruits, leaves, and petioles of A. bilimbi. This work was initiated with sampling and preparation of samples,
followed by the preliminary tests, including froth test and color test to show the saponin content
qualitatively. Saponin was extracted and isolated by maseration using methanol solvent, and by thin layer
chromatography (TLC) preparative, respectively. Saponin content was measured by spectrophotometer UV-
Vis at 280 nm. Result shows that the highest saponin content, according to the absorbance value, is in the
fruit organ. In A. bilimbi, saponin could be accumulated in the generative organ, although saponin synthesis
is located in leaves. Based on the production of brown ring with Liebermann Burchard (LB) reagent test, it
is suggested that triterpen saponin is the dominant saponin presents in A. bilimbi. Saponin content in A.
bilimbi fruits is higher than saponin content in Musa paradisiaca var. sapientum L. stems. Therefore,
triterpen saponin from A. bilimbi fruits is promising to be developed as commercial herbal medicines.

Keywords: Averrhoa bilimbi L., saponin accumulation, TLC, spectrophotometer

1. PENDAHULUAN merupakan salah satu metabolit sekunder belimbing

wuluh adalah glikosida yang tersusun dari gula yang
Tumbuhan belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L.) berikatan dengan aglikon. Aglikon, (disebut juga
telah dimanfaatkan masyarakat sebagai tanaman sapogenin) memiliki struktur yang terdiri dari rantai
obat tradisional untuk menyembuhkan berbagai triterpenoid atau steroid dan bersifat non polar.
penyakit antara lain pegal linu, gondongan, rematik, Struktur saponin tersebut menyebabkan saponin
sariawan, jerawat, panu, darah tinggi, dan sakit gigi. bersifat seperti sabun atau deterjen sehingga saponin
Kulit batang belimbing wuluh juga diketahui disebut sebagai surfaktan alami (nama saponin
memiliki aktivitas antimikrobia, baik terhadap diambil dari sifat utama ini yaitu “sapo” dalam
bakteri Gram Positif, bakteri Gram Negatif, maupun bahasa Latin yang berarti sabun) (Calabria, 2008;
terhadap fungi (Suddique et. al., 2013). Sementara Hawley & Hawley, 2004)
buah dan bunga belimbing wuluh juga telah banyak Berbagai penelitian telah menemukan bahwa
digunakan masyarakat sebagai obat batuk (Salsa saponin dapat memberikan efek antitussives dan
cited Ardananurdin et. al., 2004; Packer et. al., expectorants (Eccles & Weber, 2009). Efek tersebut
2004). membantu menyembuhkan batuk. Saponin yang
Berbagai macam khasiat yang dimiliki A. memiliki sifat antiinflammatory juga telah terbukti
bilimbi tersebut disebabkan karena tumbuhan ini efektif untuk menyembuhkan edema (respon
memiliki banyak sekali kandungan senyawa antara inflammatory) pada tikus dan memiliki aktivitas
lain saponin, flavonoid dan polifenol (Mursito cited antiinflammatory (Hikino & Kiso cited Seigler,
Ardananurdin et. al., 2004). Saponin yang 1998). Kemampuan saponin tersebut menjadikan

220 Pendidikan Biologi, Pendidikan Geografi, Pendidikan Sains, PKLH – FKIP UNS
 Fahrunnida & Pratiwi, Kandungan Saponin Buah, Daun dan Tangkai Daun Belimbing Wuluh

saponin sebagai metabolit sekunder yang penting daun belimbing wuluh, hasil tumbukan buah dan
bagi bidang medis. tangkai daun disaring sehingga serbuk dapat terpisah
Informasi tentang organ tempat akumulasi dari sisa bagian yang belum halus.
saponin pada tanaman belimbing wuluh masih
sangat diperlukan, dalam rangka pemanfaatan 2.2.3. Uji Pendahuluan
tanaman tersebut sebagai sumber saponin. Namun,
hingga saat ini belum banyak informasi mengenai Uji pendahuluan untuk mengetahui kadar saponin
organ pengakumulasi saponin dalam tanaman secara kualitatif dilakukan dengan metode yang
belimbing wuluh. Oleh karena itu, penelitian ini dideskripsikan oleh Suharto et al. (2012). Uji kadar
bertujuan untuk mengetahui kandungan saponin saponin secara kualitatif tersebut terdiri dari uji busa
dalam buah, daun dan tangkai daun belimbing dan uji warna.
wuluh. Uji Busa
Simplisia sebanyak 0,5 gram dimasukkan ke
2. METODE dalam tabung reaksi yang telah berisikan aquades 10
ml, dikocok dan ditambahkan satu tetes larutan asam
2.1. Bahan klorida 2 N. Tabungreaksi tersebut didiamkan dan
diperhatikan ada atau tidak adanya busa stabil.
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu Sampel mengandung saponin jika terbentuk busa
buah, daun dan tangkai daun belimbing wuluh stabil dengan ketinggian 1-3 cm selama 30 detik.
(Averrhoa bilimbi L.), aquades, asam klorida 2 N, Uji Warna
kloroform, pereaksi LB (Liebermann Burchard), Simplisia sebanyak 0,5 gram dimasukkan ke
metanol, alkohol 95%,dan lempeng preparatif silika dalam tabung reaksi yang telah berisikan kloroform
gel 60 F254 Merck. 10 ml, dipanaskan selama 5 menit denganpenangas
air sambil dikocok. Selanjutnya, ditambahkan
2.2. Prosedur Kerja beberapa tetes pereaksi LB. Jika terbentuk cincin
coklat atau violet maka menunjukkan adanya
2.2.1. Pengambilan Sampel saponin triterpen, sedangkan warna hijau atau biru
menunjukkan adanya saponin steroid.
Buah, bunga dan daun belimbing wuluh dikoleksi
dari satu tanaman belimbing wuluh yang tumbuh di 2.2.4. Ekstraksi Sampel
Desa Gunung Gempal, Kec. Wates, Kab. Kulon
Progo, Yogyakarta. Masing-masing sampel organ Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi
diambil untuk 3 ulangan. Dalam pengambilan menggunakan pelarut metanol. Sebanyak 10 g
sampel buah dipilih buah yang berukuran sedang simplisia dari buah belimbing wuluh (A. bilimbi)
dengan panjang sekitar 5-5,5 cm dan berat sekitar 20 dimasukkan ke dalam erlenmeyer kemudian
gram. Untuk sampel daun dipilih daun yang berjarak direndam dengan metanol sebanyak 60 ml.
4-5 cm dari pucuk batang dan dipilih yang berwarna Erlenmeyer ditutup dengan alumunium foil dan
hijau, sedangkan untuk sampel tangkai daun dipilih didiamkan selama 3 hari dengan sesekali dikocok.
yang berwarna hijau dari 2 cabang yang berbeda. Selanjutnya, hasil ekstrak disaring untuk
memperoleh filtrat I dan simplisia yang telah
2.2.2. Preparasi Sampel diekstrak (debris). Debris diekstrak kembali dengan
methanol sebanyak 40 ml dan didiamkan selama 2
Sampel berupa daun belimbing wuluh, dibersihkan hari dengan sesekali dikocok. Hasil ekstrak (filtrat
dengan air kemudian dikering- anginkan selama 3 II) dicampurkan dengan filtrat I, sehingga diperoleh
hari. Sampel daun yang sudah kering kemudian ekstrak cair. Ekstrak cair kemudian dimasukkan ke
diblender hingga menjadi simplicia. Untuk buah dalam mangkuk dan dievaporasi di almari maserasi
belimbing wuluh setelah dibersihkan dengan air, hingga diperoleh ekstrak kental. Hal yang sama juga
buah diiris tipis-tipis kemudian dikering-anginkan dilakukan untuk tangkai daun dan buah belimbing
selama 4x24 jam, sedangkan untuk tangkai daun wuluh.
belimbing wuluh pertama-tama dicuci bersih terlebih
dahulu, kemudian dikeringkan dan dipotong-potong 2.2.5. Isolasi Senyawa Saponin dengan KLT
agar lebih mudah untuk tahap preparasi berikutnya. preparative
Setelah buah dan tangkai daun kering, kedua macam
sampel tersebut kemudian ditumbuk hingga Pemisahan senyawa saponin dalam penelitian ini
didapatkan serbuk dari buah dan tangkai daun. menggunakan eluen kloroform : methanol : air
Untuk mendapatkan simplicia buah dan tangkai (13:7:2) lapisan bawah (Harborne cited Suharto et

Seminar Nasional Konservasi dan Pemanfaatan Sumber Daya Alam 2015 221
 Fahrunnida & Pratiwi, Kandungan Saponin Buah, Daun dan Tangkai Daun Belimbing Wuluh

al., 2012). Lempeng preparatif silika gel 60 F254

Merck disiapkan dengan ukuran panjang 20 cm dan
lebar 20 cm. Ekstrak kental dari buah belimbing
wuluh (A. bilimbi) yang telah dilarutkan dengan
alkohol 95% ditotolkan sepanjang lempeng tepi
bawah dan diangin-anginkan beberapa saat.
Lempeng dimasukkan ke dalam chamber yang berisi (a) (b) (c)
eluen yaitu campuran homogen lapisan bawah
Gambar 1. Pembentukan busa saponin. Hasil uji busa pada
pelarut antara kloroform: metanol: aquades (13:7:2). daun (a); tangkai daun (b); dan buah (c) belimbing wuluh
Lempeng dibiarkan terelusi hingga eluen mencapai menunjukkan reaksi positif sehingga ketiga sampel organ
batas atas lempeng kemudian dikeluarkan dan tumbuhan tersebut mengandung saponin berdasar hasil uji
dikeringkan di udara. Pengamatan bercak kualitatif busa.
menggunakan lampu UV 254 dan 366 nm. Lempeng
juga disemprotkan pereaksi LB (Liebermann Dasar reaksi uji busa adalah sifat senyawa
Burchard) pada kedua bagian tepi dan bagian saponin yang mudah larut dalam air dan
tersebut dipanaskan dengan hair dryer untuk menimbulkan busa ketika dikocok. Fungsi air adalah
memperjelas warna bercak yang terbentuk. Bercak sebagai pelarut, sedangkan HCl 2 N berfungsi
yang terbentuk pada bagian tepi lempeng sebagai pereaksi (Suharto et al., 2012). Hasil uji
dihubungkan dengan garis dari tepi satu ke tepi kualitatif warna menunjukkan bahwa sampel
lainnya. Bagian dalam garis dikerok dengan mengandung saponin triterpen dengan terbentuknya
membuang bagian yang telah dipanaskan dan cincin coklat (Gambar 2).
dilarutkan dengan alcohol 95% sebagai isolat. Hal
yang sama juga dilakukan untuk daun dan tangkai
daun belimbing wuluh).

2.2.6. Pengukuran Kadar Senyawa Saponin

dengan Spektrofotometri UV-Vis

Isolat yang diperoleh dari hasil KLT preparatif

diukur secara kuantitatif dengan spektrofotometri (a) (b) (c)
UV-Vis. Isolat sebanyak 2 ml dimasukkan ke dalam
kuvet spektrofotometer UV-Vis Pengamatan Gambar 2. Pembentukan cicin coklat pada uji warna
dilakukan pada panjang gelombang 209 nm yang saponin. Hasil uji warna pada daun (a); tangkai daun (b);
dan buah (c) belimbing wuluh menunjukkan reaksi positif
merupakan panjang gelombang maksimal untuk
ditandai dengan adanya cincin coklat sehingga ketiga
senyawa saponin (Suharto et. al., 2012). sampel organ tumbuhan tersebut mengandung saponin
triterpen.
2.2.7 Analisis Data
Pemisahan senyawa saponin dalam penelitian
Analisis data dilakukan dengan menggunakan ini menggunakan metode KLT dengan eluen
ANAVA untuk menguji beda kadar saponin dari kloroform : methanol : air (13:7:2) lapisan bawah
ketiga organ tumbuhan saponin yaitu buah, daun dan (Harborne cited Suharto et al., 2012). Hasil KLT
tangkai daun belimbing wuluh. kemudian diamati di bawah lampu UV 254 dan 366
nm. Saponin terlihat sebagai bercak coklat atau ungu
3. HASIL DAN PEMBAHASAN sesuai dengan hasil uji warna (Gambar 3).

Pengujian kandungan saponin dalam buah, daun dan

tangkai daun belimbing wuluh (A. bilimbi) secara
kualitatif dilakukan dengan uji busa, uji warna dan
KLT preparatif, sedangkan pengujian kandungan
saponin secara kuantitatif dilakukan dengan
spektrofotometri UV-Vis.
Berdasarkan hasil uji kualitatif busa terlihat
bahwa sampel mengandung saponin dengan
terbentuknya busa stabil dengan ketinggian 1-3 cm Gambar 3. Hasil Isolasi senyawa saponin belimbing wuluh
selama 30 detik (Gambar 1). pada KLT. Bercak coklat dan ungu menunjukkan
keberadaan senyawa kolompok saponin.

222 Pendidikan Biologi, Pendidikan Geografi, Pendidikan Sains, PKLH – FKIP UNS
 Fahrunnida & Pratiwi, Kandungan Saponin Buah, Daun dan Tangkai Daun Belimbing Wuluh

Hasil spektrofotometri saponin buah, daun dan (Cheesbrough, 2006). Menurut Katzung dalam
tangkai daun belimbing wuluh (A. bilimbi) Hartini (2012) saponin merupakan senyawa yang
ditunjukkan pada Gambar 4. memiliki tegangan permukaan yang kuat yang
berperan sebagai antimikrobia dengan mengganggu
3 kestabilan membrane sel bakteri yang menyebabkan
2,5 lisis sel. Hal ini disebabkan karena saponin yang
Absorbansi

2 merupakan senyawa semipolar dapat larut dalam

1,5 lipid dan air, sehingga senyawa ini akan
1 terkonsentrasi dalam membrane sel microbia.
0,5 Saponin triterpen juga dapat mengobati
0 hepatitis kronis dan menghambat pengikatan sel
daun tangkai daun buah HIV-1 (Seigler, 1998). Berdasarkan penelitian yang
dilakukan oleh Ali et al. (2014) menunjukkan bahwa
sebelum pengenceran setelah pengenceran 5x
ekstrak buah belimbing wuluh ternyata memiliki
aktivitas sitotoksik, sehingga ekstrak buah belimbing
Gambar 4. Nilai absorbansi sampel belimbing pada panjang wuluh berpotensi sebagai sumber senyawa bioaktif
gelombang 209 nm. Absorbansi ditunujukkan pada kondisi untuk terapi kanker. Hasil penelitian sebelumnya
sebelum pengenceran (a) dan setelah pengenceran 5x (b) mengenai kandungan saponin batang pisang (Musa
paradisiaca var. sapientum L) menunjukkan bahwa
Dari Gambar 4 diketahui bahwa nilai nilai absorbansi yang berkorelasi dengan kandungan
absorbansi saponin tertinggi terdapat pada organ saponin batang pisang adalah sebesar 2,754. Nilai
buah belimbing wuluh (A. bilimbi) yaitu sebesar absorbansi kndungan saponin buah belimbing wuluh
2,528. Nilai absorbansi saponin yang melebihi 2 pada penelitian ini adalah sebesar 3,582, sehingga
menunjukkan kepekatan dari saponin terukur, kandungan saponin buah belimbing wuluh lebih
sehingga pada penelitian ini kemudian dilakukan tinggi dibandingkan kandungan saponin pada batang
pengenceran sebanyak 5 kali dan diukur kembali pisang.
nilai absorbansinya. Hasil spektrofotometri sampel Kemampuan saponin triterpen sebagai senyawa
setelah pengenceran menunjukkan bahwa nilai aktif tersebut dapat dikembangkan sebagai obat
absorbansi saponin tertinggi terdapat pada buah komersial alami. Buah belimbing wuluh yang
yaitu sebesar 0,716 (sehingga diketahui bahwa merupakan organ pengakumulasi saponin dapat
kandungan saponin buah belimbing wuluh pada dimanfaatkan sebagai sumber saponin triterpen yang
dasarnya adalah 5 kali dari nilai tersebut yaitu dapat dikembangkan menjadi obat komersial alami.
sebesar 3,582). Hasil ANAVA menunjukkan bahwa
kadar saponin di tiga organ sebelum pengenceran 4. KESIMPULAN
berbeda sangat nyata sementara setelah pengenceran
5 kali. Dari hasil tersebut diketahui bahwa Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan bahwa
kandungan saponin tertinggi terdapat pada buah. buah, daun dan tangkai daun belimbing wuluh
Menurut Firdaus et al. (2014) sintesis saponin pada mengandung saponin triterpen. Kadar saponin
tumbuhan dilakukan di daun. Namun pada fase tertinggi terdapat pada organ buah. Buah belimbing
tertentu, misalnya pada saat pembungaan (flowering) wuluh memiliki potensi untuk dimanfaatkan sebagai
dan perkembangan buah (fruit bearing) akumulasi sumber saponin triterpen yang dapat dikembangkan
saponin terjadi pada organ generatif (Liener, 2012). menjadi obat komersial alami.
Buah merupakan salah satu organ generatif, maka
akumulasi saponin tumbuhan belimbing wuluh pada
masa perkembangan buah akan dialihkan ke organ 5. UCAPAN TERIMA KASIH
buah tersebut.
Saponin yang terdapat pada belimbing wuluh Laboratorium Biokimia Universitas Gadjah Mada.
adalah saponin triterpen dengan dihasilkannya cincin Rifqy Baehaqi atas bantuannya dalam pengambilan
coklat pada uji warna saponin dengan reagen LB sampel tumbuhan belimbing wuluh.
(Suharto et al., 2012). Saponin triterpen dapat
memberikan efek antitussives dan expectorant yang 6. DAFTAR PUSTAKA
membantu menyembuhkan batuk (Eccles & Weber,
2009). Beberapa bakteri yang dapat menyebabkan Ali, M. R., Hossain, M., Runa, J. F., Hasanuzzaman,
batuk yaitu Bordetella pertussis yang menyebabkan M. (2013). Preliminary cytotoxic activity of
penyakit batuk rejan (Stanley, 2002) atau different extracts of Averrhoa bilimbi (fruits).
Mycobacterium tuberculosis yang menyebabkan International Current Pharmaceutical Journal,
penyakit batuk kronis pada penderita tuberkolosis 2(3), 83-84.

Seminar Nasional Konservasi dan Pemanfaatan Sumber Daya Alam 2015 223
 Fahrunnida & Pratiwi, Kandungan Saponin Buah, Daun dan Tangkai Daun Belimbing Wuluh

Ardananurdin, A., Winarsih, S., & Widayat, M. Bunga Belimbing Wuluh (Averrhoa Bilimbi)
(2004). Uji efektifitas dekok bunga belimbing Sebagai Antimikroba Terhadap Bakteri
wuluh (Averrhoa bilimbi) sebagai antimikroba Salmonella Typhi Secara In Vitro. Jurnal
terhadap bakteri Salmonella Typhi secara in Kedokteran Brawijaya, 20 (1), 30-34.
vitro. Jurnal Kedokteran Brawijaya, 20(1), 30- Liener, I. (2012). Toxic Constituents of Plant
34. Foodstuff. Elsevier.
Calabria, L. M. (2008). The Isolation and Salsa. (2003). in Ardananurdin, A., Winarsih, S., &
Characterization of Triterpene Saponins from Widayat, M. (2004). Uji Efektifitas Dekok
Silphium and the Chemosystematic and Bunga Belimbing Wuluh (Averrhoa Bilimbi)
Biological Significance of Saponins in the Sebagai Antimikroba Terhadap Bakteri
Asteraceae. ProQuest. Salmonella Typhi Secara In Vitro. Jurnal
Cheesbrough, M. (2006). District Laboratory Kedokteran Brawijaya, 20 (1), 30-34
Practice in Tropical Countries (2nd ed). Seigler, D. S. (1998). Plant Secondary Metabolism.
Cambridge University Press. Springer Science & Business Media.
Eccles, R. & Weber, O. (2009). Common Cold. Siddique, K. I., Uddin, M. N., Islam, S., Parvin, S.,
London: Springer. & Shahriar, M. (2013). Phytochemical
Firdaus, S., Wahid, A., Javed, F., & Sadia, B. (2014) screenings, thrombolytic activity and
Changes in leaf phenolics concentrations antimicrobial properties of the bark extracts of
determine the survival of evening primrose Averrhoa bilimbi. J App Pharm. Sci., 3 (03),
(Oenothera biensis) in various seasons. Int. J. 094-096.
Agric. Biol, 16, 819-824. Stanley, J. (2002). Essentials of Immunology and
Hawley, T. S. & Hawley, R. G. (2004). Flow Serology. Cengage Learning.
Cytometry Protocols. Humana Press, Inc. Suharto, M. A. P., Edy, H. J., Dumanauw, J. M.
Hikino & Kiso. (1988). in Seigler, D. S. (1998). (2012). Isolasi dan identifikasi senyawa saponin
Plant Secondary Metabolism. Springer Science dari ekstrak methanol batang pisang ambon
& Business Media. (Musa paradisiaca var. sapientum L.).
Mursito, (2002). in Ardananurdin, A., Winarsih, S., Pharmacon Journal, 1(2), 86-92.
& Widayat, M. (2004). Uji Efektifitas Dekok

224 Pendidikan Biologi, Pendidikan Geografi, Pendidikan Sains, PKLH – FKIP UNS