GERMINA O DE SEMENTES DE SUCUPIRA-BRANCA

[Pterodon pubescens (BENTH.) BENTH.] I N VI TRO E EX VI TRO

1


MARLY CATARINA FELIPE COELHO
2

JOS EDUARDO BRASIL PEREIRA PINTO
3

AUGUSTO RAMALHO DE MORAIS
4

LUIS PEDRO BARRUETO CID
5

OSMAR ALVES LAMEIRA
6


RESUMO: A Sucupira-branca uma espcie nativa
dos cerrados de importncia medicinal e florestal,
porm suas sementes apresentam baixo poder
germinativo. Com o presente trabalho, objetivou-se
melhorar a sua taxa de germinao. Para tanto,
sementes de sucupira foram submetidas aos seguintes
tratamentos: germinao em areia e in vitro. A
germinao em areia consistiu em colocar sementes
seccionadas e sementes sem tegumentos nesse
substrato. Por outro lado, a germinao in vitro
consistiu em colocar sementes sem tegumentos,
sementes escarificadas e sementes seccionadas em MS
lquido 50% e MS 50% com gar e gar suplementado
com carvo ativado a 0,1%; 0,2% e 0,3%. Utilizou-
se o delineamento inteiramente casualizado. Foi
observado que as sementes seccionadas e
germinadas em areia apresentaram 91% de
germinao, ao passo que as sementes sem
tegumentos apresentaram 55%. Com relao
germinao in vitro, observou-se que a maior
percentagem de germinao, ou seja, 96,66%, foi
obtida quando utilizaram-se sementes sem
tegumentos em MS lquido 50%.
TERMOS PARA INDEXAO: Meio lquido, dormncia, planta medicinal.

IN VITRO AND EX VITRO SEED GERMINATION OF SUCUPIRA-
BRANCA [Pterodon pubescens (BENTH.) BENTH.]

ABSTRACT - White Sucupira [Pterodon pubescens
(Benth.) Benth.] is a plant of medical and forest
importance originated from the Brazilian savanas, and
it has a very low germination rate. This study aimed at
improving White Sucupiras germination rate. In order
to carry out this job, seeds were treated as follow: a) a
longitudinal cut in the end of the seed opposite to the
embryo; b) total removal of the external seed tegument,
and c) sanded with sand paper. Treated seeds were then
placed in washed sand or in vitro. Four different media
were used in vitro: MS modified (half strength MS salts
+ full strength MS vitamins), supplement with zero or
0.7% Agar, and supplemented with activated charcoal
at zero, 0.1, 0.2 or 0.3% (only the media with agar
were supplemented with activated charcoal). A random
block statistical design was used, with four replicates
for each treatment, and at least 25 seeds per each
replicate. The germination rate observed in the
treatments using sand as substrate were 91 and 55%,
respectively, for seeds with the longitudinal cut and the
ones without the tegument, after one month. The treatment
using seed without tegument, incubated in liquid MS
modified medium, gave the best germination rate
observed, with 96.66% of germination after one month.
INDEX TERMS: Liquid medium, dormancy, medicinal plant.


1. Parte da dissertao apresentada UNIVERSIDADE FEDERAL DE LAVRAS(UFLA), pelo primeiro autor, como um
dos requisitos do curso de Mestrado em Agronomia, rea de concentrao Fitotecnia. Apoio Financeiro CAPES
2. Engenheiro Agrnomo, Pesquisador- EMBRAPA/CENARGEN Caixa Postal 02372, 70.770-900, Braslia-D.F.
3. Engenheiro Agrnomo, Dr., Professor Titular/UFLA, Caixa Postal 37, 37.200-000, Lavras MG.
4. Engenheiro Agrnomo, Dr., Professor/UFLA
5. Bilogo, Pesquisador- EMBRAPA/CENARGEN Caixa Postal 02372, 70.770-900, Braslia-D.F.
6. Engenheiro Agrnomo., Pesquisador- EMBRAPA/Amaznia Oriental Caixa Postal 48, 66.095-100, Belm-
Par.

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001
39

INTRODUO
A espcie Pterodon pubescens (sucupira-branca)
uma essncia nativa dos cerrados brasileiros, sendo
encontrada em Minas Gerais, So Paulo, Gois e Mato
Grosso do Sul.
A rvore dessa espcie possui alta resistncia
natural ao apodrecimento. O leo do fruto muito
utilizado na medicina popular, uma vez que confere
proteo contra infeco por cercria de Schistosoma
mansoni, (Mors, Pellegrino e Santos Filho, 1966 e
Dias, 1993) e tambm no tratamento de infeces de
garganta e reumticas (Barros, 1982). No entanto, o
corte intensivo dessa essncia tem contribudo para seu
rpido desaparecimento.
Estudos realizados com germinao permitem
levantar a hiptese de que as sementes de sucupira
possuem dormncia causada pela impermeabilidade dos
tegumentos ao oxignio e gua, possivelmente pela
existncia de inibidores qumicos da germinao (Reis,
1976).
A propagao por semente apresenta srios
obstculos aos mtodos normalmente utilizados pelo
fato de a semente ser coberta com envoltrio lenhoso do
fruto e ainda ser essa camada pontuada de glndulas
oleosas que impedem a penetrao dgua. Em
condies naturais, a semente necessita de mais ou
menos quatro anos para produzir plntulas (Heringer,
1971).
Para superar a dormncia, vrios mtodos
podem ser utilizados, sendo os mais comuns:
embebio em gua, retirada do tegumento, desponte
(corte do tegumento), furo do tegumento, escarificao
mecnica, imerso em gua quente ou fria, gua
oxigenada, escarificao qumica com cido sulfrico,
cido clordrico, soda, acetona e lcool (Santarm e
quila,1995).
Na semente de sucupira, h uma evidncia de
que os inibidores qumicos no estejam participando
diretamente do processo de germinao, j que o
simples corte do tegumento resultou em imediato
aumento da embebio (Reis e Rena, 1987).
Portanto, com o presente trabalho objetivou-se
identificar as melhores condies in vitro e ex vitro
de germinao da semente.

MATERIAL E MTODOS
Os experimentos foram conduzidos no
Laboratrio de Biotecnologia do Departamento de
Agricultura da Universidade Federal de Lavras e no
Laboratrio de Cultura de Tecidos do Centro Nacional
de Pesquisa de Recursos Genticos e Biotecnologia
(CENARGEN EMBRAPA).
As sementes utilizadas foram coletadas de
populaes do municpio de Brasilndia, norte de
Minas Gerais e em Braslia.
Inicialmente, antes de montar os testes, as
sementes foram desinfestadas em ambiente assptico.
Para tanto, foram imersas em lcool a 70% por um
minuto; em seguida, imergiram-nas numa soluo de
hipoclorito de sdio a 2% por vinte minutos, lavando-as
trs vezes em gua destilada autoclavada.

Teste de Germinao ex vitro
O experimento comparou dois mtodos de
superao de dormncia. Um dos mtodos constou do
seccionamento do tegumento das sementes com um
pequeno corte no lado oposto ao eixo embrionrio e o
outro consistiu na remoo do tegumento. As sementes
foram semeadas em caixas tipo gerbox, contendo areia
lavada e autoclavada a 121C durante 60 minutos.
Foram utilizadas 50 sementes por tratamento, divididas
em dez repeties, sendo cada unidade experimental
constituda por 5 sementes. As caixas foram mantidas
na cmara de germinao a 30C e fotoperodo de 8
horas. O delineamento utilizado foi o inteiramente
casualizado e avaliaram-se, aos 14 dias aps a
semeadura, as seguintes variveis: comprimento de
razes e da parte area, nmero de folhas e germinao.

Teste de Germinao in vitro
a) Superao da dormncia por
seccionamento ou remoo do tegumento.
Como no teste de germinao ex vitro, neste
experimento foram utilizadas sementes com os
tegumentos seccionados e sementes com os tegumentos
removidos.
Utilizou-se meio bsico de MS diludo para
metade da fora dos sais dos macro e micronutrientes,
suplementados com vitaminas de MS e 2% de sacarose,
utilizando-se ponte de papel-filtro como suporte. O
meio de cultura foi ajustado a um pH de 5,8 e
autoclavado a 121C durante 20 minutos. O material
foi cultivado em tubos de ensaio de 20 x 150 mm,
contendo 13 ml de meio de cultura, sob condies de 14
horas de fotoperodo e 28C de temperatura, tapados
com forminhas 24 x 16mm de papel alumnio

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001

40
Rochedo

. O delineamento experimental utilizado foi

o inteiramente casualizado, com parcelas subdivididas
e 6 repeties
sendo cada unidade experimental constituda por 5
tubos de ensaio contendo uma semente por tubo. Os
tratamentos foram constitudos de dois mtodos de
superao de dormncia: secionamento e remoo dos
tegumentos e quatro pocas de avaliao (7, 14, 21 e 35
dias), colocando-se os mtodos nas parcelas e pocas
nas subparcelas. Em cada poca, avaliaram-se as
seguintes variveis: comprimento da raiz, comprimento
da parte area, nmero de folhas e percentagem de
germinao.

b) Superao da dormncia por escarificao
ou remoo do tegumento.
Neste experimento, uma parte das sementes foi
escarificada com lixa da marca 3M 231 Q Wetordry
Imperial paper C 180

. E a outra parte teve seus

tegumentos removidos, como mtodos de superao da
dormncia.
O delineamento experimental utilizado foi o
inteiramente casusalizado, com parcelas subdivididas e
quatro repeties, sendo a unidade experimental
constituda por 6 tubos de ensaios contendo uma
semente por tubo. Os tratamentos foram constitudos da
combinao dos mtodos de superao da dormncia
(sementes escarificadas e sementes sem tegumento)
com cinco meios (gar lavado, meio lquido e gar com
carvo a 0,1%; 0,2% e 0,3%), fatorial (2 x 5) e duas
pocas de avaliao (7 e 28 dias). Nas parcelas,
avaliaram-se os tratamentos que constituram o fatorial,
e na subparcela, as pocas de avaliao.
Os meios de cultura foram preparados a partir
do MS, conforme descrito no experimento anterior, da
seguinte forma: a) meio MS com gar lavado com um
litro de gua deionizada; b) meio MS lquido,
utilizando suporte de papel-filtro e c) meios MS com
gar a 0,7%, suplementado de carvo ativado nas
concentraes de 0,1%; 0,2% e 0,3%.
Aps montagem, o teste foi conduzido nas
mesmas condies do estudo, com sementes com
tegumentos seccionados, avaliando-se, em cada poca,
as seguintes variveis: comprimentos de razes e da
parte area, nmero de folhas e germinao.

RESULTADOS E DISCUSSO
Teste de Germinao ex vitro
Pelos resultados apresentados na Tabela 1,
observou-se que as sementes com os tegumentos
seccionados foram superiores s sementes com os
tegumentos removidos, em relao ao comprimento da
raiz e germinao.
O seccionamento no tegumento das sementes
favoreceu maior rapidez na germinao. O mesmo foi
observado por vrios autores, como Barradas e Handro
(1974), que trabalharam com sementes de barbatimo
[Stryphnodendron barbadetiman (Vell.) Mart.] e
compararam a germinao de sementes seccionadas e
sementes intactas, em experimento estabelecido em
placas de Petri sob condies de germinador. O mesmo
foi observado por Ferreira (1976) em seu experimento
com maric [Mimosa bimucronata (DC.) O. K.], em
que o seccionamento da semente possibilitou cerca de
100% de germinao em menos de 48 horas. O
seccionamento do tegumento promoveu rapidez de
germinao nas leguminosas Acacia bonariensis Gill e
Mimosa bimucronata (DC.) O.K., conforme Ferreira,
Joo e Heuser (1992); tambm em Acacia senegal (L.)
Willd por Danthu et al. (1992); com Cassia sieberiana
D C. por Todd-Bockarie et al. (1993); com Senna
macranthera (Colladon) Irwin e Barneby por Santarm
e quila (1995).
quila e Fett Neto (1988), no entanto,
observaram que em Leucaena leucocephala (Lam.) De
Wit o seccionamento proporcionou alta porcentagem de
germinao, mas as plntulas cresceram menos do que
as plntulas provenientes de sementes submetidas a
outros mtodos de quebra de dormncia. Gosling,
Samuel e Jones (1995) relataram que sementes de
Leucaena leucocephala submetidas ao seccionamento e
sob 40C de germinao apresentaram alto ndice de
mortalidade.
Reis, Brune e Rena (1985), em estudo
comparativo com sementes intactas de sucupira- branca
e utilizando vrias formas de superao de dormncia,
observaram que o corte no tegumento apresentou
porcentagem de germinao e energia germinativa pelo
menos cinco vezes superior ao controle.
Neste experimento, no qual compararam-se a
germinao de sementes seccionadas e o
desenvolvimento de sementes sem o tegumento,
observou-se que as sementes seccionadas apresentaram
36% de germinao superior obtida com sementes
sem o tegumento. As sementes que foram submetidas
remoo dos tegumentos sofreram um severo ataque de
fungos. Em experimento realizado por Melo, Ribeiro e
Lima (1979) com sementes de sucupira-branca,

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001
41
ocorreu tambm forte ataque de fungos nas sementes,
embora tenham sido tratadas com soluo aquosa de
hipoclorito de sdio a 0,2%. A remoo do tegumento
muito provavelmente facilitou o ataque de fungos.
TABELA 1 - Valores mdios para os parmetros comprimento de raiz e da parte area, nmero de folhas e
porcentagem de germinao, em funo dos mtodos de superao da dormncia de sementes de sucupira-branca,
cultivados ex vitro. UFLA, Lavras MG.

Comprimento (cm)
Mtodos de superao
de dormncia
Raiz Parte area
Nmero de
Folhas
Germinao
(%)
Seccionamento do tegumento 1,96a 1,51a 1,48a 91a
Remoo do tegumento 1,43b 1,28a 1,18a 55b
Mdias com a mesma letra na coluna no diferem estatisticamente pelo teste F a 1% de probabilidade.

Para as espcies tropicais, segundo Mascarenhas
et al. (1987) e Le Roux, citado por Harry e Thorpe
(1994), as sementes que so utilizadas para explante
devem ser desinfestadas antes da remoo dos embries
ou no caso de germinao assptica. O procedimento da
desinfestao deve ser rigoroso por causa do alto grau
de contaminao natural. Geralmente utiliza-se a
combinao HgCl
2
NaOCl e etanol

Teste de germinao in vitro
a) Superao da dormncia por
seccionamento ou remoo do tegumento

As sementes sem tegumento tiveram maior
crescimento do que as sementes com tegumentos
seccionados. Nesse caso, provavelmente o tegumento
ainda agiu como uma barreira, impedindo rapidez no
processo de embebio da semente, em relao ao
embrio, que tinha maior rea de superfcie de absoro
em contato com o meio lquido, ao passo que as sementes
seccionadas atingiram a mxima germinao somente aos
26 dias (Figura 1 e 2). Rapidez de germinao, pela
retirada do tegumento, foi relatada por Radhamani, Malik
e Chandel (1991) com vrias espcies de Citrus: C.
aurantifolia (Chritsm.), Swingle, C. limonia Osbeck, C.
limon (L.), Burm. f., C. reticulata Blanco, C. aurantium L.,
C. maxima (Burm.) Merill, C. maderaspatana Tanaka e
Poncirus trifoliata (L.) Raf., em que as sementes com
tegumento precisaram de 32, 30, 32, 31, 70, 85, 80 e 32
dias para germinar e sem o tegumento reduziram para
25, 20, 27, 26, 35, 36, 35 e 28 dias, respectivamente.
A remoo dos tegumentos das sementes de
Fraxinus ornus L. (freixo) e Sorbus domestica L. foi a
maneira encontrada para obteno das plantas.
Sementes de Fraxinus com tegumento germinaram
apenas 7%, no havendo germinao para sementes
com tegumento de Sorbus domestica, conforme
Arrillaga, Marzo e Segura (1992).
Nas sementes seccionadas, observou-se leve
colorao amarronzada exsudando no local do corte das
sementes; provavelmente ocorreu oxidao dos fenis, o
que tambm foi observado por Ashburner, Thompson e
Burch (1993) no cultivo de embries de coco (Cocus
nucifera L.) in vitro, sendo necessrio a
suplementao de carvo ativado a 0,2% no meio de
cultura. Na sucupira-branca, a oxidao fenlica foi
atenuada pelo uso do meio lquido.
Cantos et al. (1998) observaram que a baixa
germinao de pinheiros, Juniperus oxycedrus L. (subsp.
oxycedrus e subsp. macrocarpa) estava relacionada com a
presena de inibidores no endosperma e com o
impedimento mecnico da testa. Obteno de plantas
foram conseguidas quando inocularam embries in vitro.
Ainda com relao s sementes seccionadas,
verificou-se uma germinao heterognea,
diferentemente das sementes sem o tegumento, que
apresentaram desenvolvimento bem homogneo. As
sementes sem tegumento atingiram cerca de 90% de
germinao aos 7 dias de cultivo, como mostra a Figura
2. Para as sementes seccionadas, o percentual de
germinao mximo ocorreu aos 26 dias. Tambm
foram observados para as sementes sem tegumentos
maior comprimento da parte area e maior nmero de
folhas, em menor tempo (Figura 3 e Figura 4). Nota-se
que houve um acrscimo mdio no comprimento da
parte area de 0,14 cm e de 0,13 cm para sementes sem
o tegumento e com o tegumento seccionado,
respectivamente, para cada dia de avaliao; com
relao ao nmero de folhas, houve um acrscimo

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001

42
mdio de 0,18 e 0,16 folhas para sementes sem o
tegumento e com o tegumento seccionadas,
respectivamente, em funo do aumento de um dia na
avaliao (Figura 4).
TABELA 2 - Valores mdios para os parmetros comprimento de raiz e da parte area, nmero de folhas e
porcentagem de germinao em funo dos mtodos de superao da dormncia de sementes de Sucupira-branca,
cultivados in vitro. UFLA, Lavras - MG.

Comprimento (cm)
Mtodos de superao de
dormncia
Raiz Parte area
Nmero de
Folhas
Germinao
(%)
Remoo do tegumento 5,448
a
2,955
a
2,90a 95
a

Seccionamento do tegumento 3,792b 1,814b 2,00b 80b
Mdias com a mesma letra na coluna no diferem pelo teste de F, a 1% de probabilidade.



0, 0
2, 0
4, 0
6, 0
8, 0
10, 0
7 14 21 35
pocas de Aval i ao ( di as )
C
o
m
p
r
i
m
e
n
t
o

d
e

R
a
i
z
.

(
c
m
)
ST = 0, 245X + 0, 74 R^2 =0, 8922
TS = 0, 266X - 1, 34 R^2 = 0, 9865

FIGURA 1 - Comprimento de razes, em funo das pocas de avaliao, de sementes de sucupira-branca sem o
tegumento (ST) e de sementes com o tegumento seccionado (TS), cultivadas in vitro. UFLA, Lavras - MG,
1999.



0%
50%
100%
7 14 21 35
pocas de Aval i ao (di as)
%

G
e
r
m
i
n
a

o
ns ST = -0, 002X^2 + 0, 011X + 0, 838 R^2 =0, 8909
TS = -0, 002X^2 + 0, 088X - 0, 083 R^2 = 0, 8909


Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001
43
FIGURA 2 - Representao e equao de regresso para porcentagem de germinao em funo das pocas de
avaliao para os dois diferentes tipos de mtodos de superao de dormencia: sem tegumento (ST) e sementes com
o tegumento seccionado (TS) cultivados in vitro. UFLA, Lavras - MG.

= 0,1416X + 0,2269 R^2 = 0,8656
= 0,1309X - 0,7053 R^2 = 0,9657
0,0
1,0
2,0
3,0
4,0
5,0
6,0
0 7 14 21 28 35 42
pocas de Avaliao (dias)
C
o
m
p
r
i
m
e
n
t
o

d
a

p
a
r
t
e

a

r
e
a

(
c
m
)
E
S

FIGURA 3 - Comprimento da parte area em funo das pocas de avaliao de sementes de Sucupira-branca sem
o tegumento (ST) e de sementes com o tegumento seccionado (TS) cultivada in vitro. UFLA, Lavras - MG.



= 0,18X - 0,62 R^2 = 0,9291
= 0,16X - 1,08 R^2 = 0,9775
0,0
2,0
4,0
6,0
8,0
0 7 14 21 28 35 42
pocas de Avaliao (dias)
F
o
l
h
a
s
(
n

)
ST
TS

FIGURA 4 - Nmero de folhas em funo das pocas de avaliao de sementes de sucupira-branca sem o
tegumento (ST) e de sementes com o tegumento seccionado (TS) cultivadas in vitro. UFLA, Lavras - MG.


Observou-se um comportamento diferente na
germinao in vitro em relao germinao ex
vitro do experimento anterior. Na germinao ex
vitro de sucupira-branca, melhor germinao ocorreu
com sementes seccionadas; j na germinao in vitro,
o melhor desempenho germinativo foi das sementes
sem tegumento.
Com o cultivo in vitro de sementes sem
tegumento de sucupira-branca neste experimento
obtiveram alto ndice de germinao e maior velocidade
devido ausncia de tegumento, que ao ser inoculado,
rapidamente iniciou o metabolismo da germinao
atravs da embebio. Outro fator que contribuiu foi o
meio bsico, rico em nutrientes e em estado lquido. O
estdio de maturao das sementes, com os cotildones
cheios de reservas. Inclusive este um fator
interessante visto que o cultivo de embries muitas
vezes empregado com embries imaturos, geralmente
sendo necessrio o emprego de reguladores de
crescimento, como no caso da obteno de hbridos de
Vicia narbonensis L. x Vicia faba L. (fava) por

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001

44
Lazaridou, Roupakias e Economou (1993). Alta
porcentagem de germinao de embries imaturos de
damasco (Prunus armeniaca L.) foi conseguida tambm
por Burgos e Ledbetter (1993), obtendo-se mais de 80%
de germinao com embries medindo de 5 a 9mm de
comprimento. Emershad e Ramming (1994) relataram
altas percentagens de germinao de embries de
nectarina (Prunus persica var. nucipersica Schneid) e
pssego [Prunus persica (L.) Batsch], cultivados em
meio bsico WPM, os quais atingiram 98% e 100% de
germinao, respectivamente, em que 100%
desenvolveram-se em plantas. A ameixa (Prunus
salicina Lindl.), cultivada em meio C2d, obteve 98% de
germinao, com 100% dos embries sendo convertidos
em plantas. Thiagarajan e Murali (1994), com cultivo
de embries imaturos de neem [Azadirachta indica (A.
Juss)], obtiveram mais de 89% de germinao de
embries a partir de 3 mm de comprimento.

b) Superao de dormncia por escarificao
ou remoo do tegumento.
O teste de germinao de sementes sem
tegumento de sucupira-branca in vitro possibilitou
um estudo mais detalhado do comportamento desses
propgulos em diferentes meios. A germinao in
vitro tem como objetivo a produo de explantes
juvenis e asspticos para o estabelecimento de
experimentos in vitro. O ideal neste caso a
produo de plntulas vigorosas e bem homogneas.
O resultado das anlises de varincia mostrou
diferenas significativas quanto aos mtodos de
superao de dormncia e meios (P < 0,01) para todos
os parmetros: comprimento da raiz, parte area,
nmero de folhas e percentagem de germinao. As
avaliaes que foram feitas afetaram significativamente
(P < 0,01) o comprimento da raiz, parte area e nmero
de folhas formadas, no afetando a germinao. Quanto
s interaes, observamos: entre mtodos de superao
de dormncia x meio, no afetaram nenhum parmetro
avaliado; mtodo de superao de dormncia x
avaliao com diferenas significativas para
comprimento de raiz, altura da parte area e nmero de
folhas, entre meios x avaliaes, afetaram todos
parmetros menos a germinao. A interao tripla
somente foi significativa (P < 0,05) para percentagem
de germinao.
As sementes sem tegumentos tiveram melhores
resultados em relao ao comprimento da raiz, parte
area, nmero de folhas e percentagem de germinao,
quando comparadas com as sementes escarificadas
(Tabela 3). Geralmente, as sementes escarificadas
apresentam altas porcentagens de germinao e
desenvolvimento, quando comparadas com outros
mtodos de superao de dormncia, comumente
realizados em laboratrios de qualidade de sementes.
Diferentemente do que foi obtido com a germinao de
sucupira-branca, Rodrigues, Aguiar e Sader (1990)
observaram a eficincia da escarificao com lixa na
poro distal do eixo embrionrio em trs espcies de
Cassia; esse teste de germinao foi conduzido em
substrato de areia esterilizada.
Porcentagem de 100% de germinao foi obtida
por Gonzlez-Melero, Prez-Garcia e Martinez-
Laborde (1997) com sementes da leguminosa Coronilla
valentina ssp. glauca L., C. juncea L., com 92% de
germinao, e C. minima L., com 98%, quando as
sementes foram submetidas escarificao, em teste de
germinao conduzido em placas de Petri. Lemos Filho
et al. (1997) observaram que a escarificao promoveu
mais de 80% de germinao nas sementes das
leguminosas arbreas Senna macranthera (Collad.)
Irwin e Barneby (fedegoso), Senna multijuga (Rich.)
Irwin e Barneby (farinha-seca) e Stryphnodendron
polyphyllum Mart. (barbatimo-da-mata), em testes
conduzidos com papel-filtro em caixas tipo gerbox.

TABELA 3 - Valores mdios de comprimento de raiz e da parte rea, nmero de folhas e ndice de germinao,
em funo dos mtodos de superao da dormncia de sementes de sucupira-branca cultivados in vitro. UFLA,
Lavras - MG.

Comprimento (cm) Mtodos de superao de
Dormncia Raiz Parte area
Nmero de
Folhas
ndice de
Germinao

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001
45
Remoo do tegumento 1,68a 1,41a 1,37a 1,26a
Escarificao do tegumento 1,22b 1,13b 1,13b 1,07b
Mdias com a mesma letra, na colunas, no diferem entre si na linha, pelo Teste F a 1% de probabilidade.
O cultivo in vitro de sementes de Sucupira-
branca, escarificadas atravs de lixa, no apresentou
boa germinao. O tegumento remanescente muito
provavelmente ainda agiu como barreira a germinao.
Observou-se grande desuniformidade na germinao,
alm de apresentar uma forte colorao marrom ao
redor da semente nos meios com gar e manchar o
papel-filtro no meio lquido, muito provavelmente pela
liberao de fenis. Esse fenmeno da oxidao
tambm foi relatado por Siqueira e Inoue (1991) com
cultivo de tecidos do coqueiro (Cocos nucifera L.);
segundo eles, o processo de oxidao se deve
principalmente intoxicao dos tecidos por fenis
liberados por tecidos recm-feridos, testou-se o meio
lquido, ao contrrio de sua localizao fixa, prxima
aos explantes, no meio slido.
De maneira geral, no houve diferena na
primeira avaliao em relao aos cinco diferentes tipos
de meios. No entanto, na segunda avaliao, percebe-se
a superioridade do meio lquido em relao aos outros
meios. Em seguida, os meios suplementados com
carvo ativado, principalmente na concentrao a
0,3%, apresentaram-se como os melhores no cultivo de
propgulos de Sucupira-branca e, por ltimo, o gar
lavado (Tabela 4).
A presena de carvo ativado, principalmente
em altas concentraes no cultivo in vitro de Sucupira-
branca, causou um engrossamento na raiz e um maior
crescimento desta. Observou-se tambm uma colorao
verde mais intensa nos fololos. Segundo Pasqual e
Pinto, citados por Pasqual, Ribeiro e Ramos (1990), o
carvo ativado utilizado pelo poder de absorver
substncias inibitrias do meio ou produtos txicos
liberados pelos explantes, como tambm pode promover
o crescimento de embries.
O carvo ativado pode interferir com os
compostos polifenlicos produzidos pelos explantes,
modificando o ndice entre polifenis conjugados e
polifenis livres, influenciando o potencial
organognico do desenvolvimento das gemas e das
razes, Druart et al., citado por Dumas e Monteuuis
(1995). Conforme Druart e Wulf (1993), o carvo
ativado tambm absorve 5-hydroxymethylfurfural
produzido pela autoclavagem da sacarose, impurezas do
gar, etileno produzido pela cultura, como tambm
absorve componentes do meio de cultura, como as
vitaminas, citocininas, auxinas e cido ascrbico.
Os propgulos de Sucupira-branca tiveram pior
desempenho em meio de gar lavado. Nas sementes
escarificadas, a forte oxidao localizada ao redor das
sementes deve ter dificultado a germinao. Com a
lavagem do gar, teve-se como objetivo reduzir a
provvel presena de resduos txicos e reduzir as
concentraes de elementos qumicos, muitas vezes em
excesso nos gar purificados, conforme Hadrami et
al. (1993).

TABELA 4 - Valores mdios de comprimento de raiz e da parte area, nmero de folhas e ndice de germinao
em funo dos meios de cultura. UFLA, Lavras - MG.

Comprimento (cm) Meios de
Cultura
Raiz Parte area
Nmero
de folhas
ndice de
Germinao
MS c/ gar lavado 1,22 b 1,12 c 1,15 b 1,09 b
MS lquido 1,79 a 1,48 a 1,42 a 1,27 a
MS c/ gar + car. 0,1% 1,38 b 1,19 bc 1,19 b 1,15 b

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001

46
MS c/ gar + car. 0,2% 1,32 b 1,16 bc 1,22 b 1,11 b
MS c/ gar + car. 0,3% 1,48 b 1,38 ab 1,26 b 1,20 b
Mdias com a mesma letra na coluna no diferem pelo teste de Tukey (5%).


CONCLUSES
a) as sementes com tegumentos seccionadas e
cultivadas ex vitro apresentaram 36 de germinao
superior obtida com sementes sem o tegumento;
b) em condies in vitro, as sementes sem
tegumento tiveram maior rapidez de germinao e
desenvolvimento do que as sementes seccionadas;
c) para a condio in vitro; as sementes sem
tegumento apresentaram-se como melhor mtodo de
superao de dormncia em relao s sementes
escarificadas e seccionadas;
d) o cultivo de sementes sem tegumentos in
vitro apresentou plntulas com maior homogeneidade;
e) o meio lquido favoreceu uma rapidez de
desenvolvimento nas sementes sem tegumentos
cultivadas in vitro;

AGRADECIMENTO
Os autores agradecem EMBRAPA, FINEP e
CNPq, pelo apoio financeiro.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
QUILA, M.E.A.; FETT NETTO, A.G. Influncia de
processos de escarificao na germinao e
crescimento inicial de Leucaena leucocephala
(Lam.). De Wit. Revista Brasileira de Sementes,
Braslia, v. 10, n.1, p. 73-85, 1988.
ARRILLAGA, I.; MARZO, T.; SEGURA, J. Embryo
culture of Fraxinus ornus and Sorbus domestica
removes seed dormancy. HortScience, Alexandria,
v.27, n. 4, p. 371, Apr. 1992.
ASHUBURNER, G. R; THOMPSON, W. K; BURCH,
J.M. Effect of anaphthaleneacetic acid and sucrose
levels on the development of cultured embryos of
coconut. Plant Cell, Tissue and Organ Culture,
Dordrechet, v. 35, p. 157-163, 1993.
BARRADAS, M.; M. HANDRO, W. Algumas
observaes sobre a germinao da semente do
barbatimo, Stryphnodendron barbadetiman (Vell.)
Mart. (Leguminosae Mimosoideae). Boletim de
Botnica, So Paulo, v. 2, p. 139-150, 1974.
BARROS, M.A.G. Flora medicinal do Distrito Federal.
Revista Brasil Florestal, Braslia, v. 12, p. 35-45,
1982.
BURGOS, L.; LEDBETTER, C.A. Improved efficiency
in apricot breeding: Effects of embryo development
and nutrient media on in vitro germination and
seedling establishment. Plant Cell, Tissue and
Organ Culture, Dordrecht, v. 35, p. 217-222,
1993.
CANTOS, M.; CUERVA, J.; ZRATE, R.;
TRONCOSO, A. Embryo rescue and development
of Juniperus oxycedrus subsp. oxycedrus and
macrocarpa. Seed Science and Technology, New
Delhi, v. 26, n. 1, p. 193-198, 1998.
DANTHU, P.; ROUSSEL, J.; DIA, M.; SARR, A.
Effect of different pretreatments on the germination
of Acacia senegal seeds. Seed Science and
Technology, New Delhi, ndia, v. 20, n. 1, p. 111-
117, 1992.
DIAS, F. da L. Estudo da genotoxicidade in vivo e in
vitro dos cercaricidas naturais leo de sucupira e
cremantina em clulas de mamferos. Ribeiro
Preto: Faculdade de Medicina de Ribeiro Preto:
USP, 1993. 105p. (Tese-Doutorado).
DRUART, Ph; WULF, O. de. Activated charcoal
catalyses sucrose hydrolysis during autoclaving.
Plant Cell, Tissue and Organ Culture, Dordrecht,
v. 32, p. 97-99, 1993.
DUMAS, E.; MONTEUUIS, O. In vitro rooting of
micropropagated shoots from juvenile and mature
Pinus pinaster explants: influence of activated

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001
47
charcoal. Plant Cell, Tissue and Organ Culture,
Dordrecht, v. 40, p. 231-235, 1995.
EMERSHAD, R.L.; RAMMING, D.W. Effects of
media on embryo enlargement, germination and
plant development in early-ripening genotypes of
Prunus grown in vitro. Plant Cell, Tissue and
organ Culture, Dordrecht, v. 37, p. 55-59, 1994.
FERREIRA, A. G. Germinao de sementes de Mimosa
bimucronata. (DC.) OK. (Maric) I. Efeito da
escarificao e do pH. Cincia e Cultura, Santa
Maria, v. 28, n. 10, p. 1200-1204, out. 1976.
FERREIRA, A. G.; JOO, K. H. L.; HEUSER, E. D.
Efeitos de escarificao sobre a germinao e do pH
no crescimento de Acacia bonariensis Gill e
Mimosa bimucronata (D. C.) O. K. Revista
Brasileira de Fisiologia Vegetal, Braslia, v. 4, n.
1, p. 63-65, jul.1992.
GONZALEZ-MELERO, J. A.; PEREZ-GARCIA, F.;
MATINEZ-LABORDE, J. B. Effect of temperature,
scarification and gibberellic acid on the seed
germination of three shrubby species of Coronilla L.
(Leguminosae). Seed Science and Technology,
New Delhi, ndia, v. 23, p. 521-532, 1995.
GOSLING, P.G.; SAMUEL, Y.K.; JONES, S. K. A
systematic examination of germination temperature,
chipping and water temperature/soak duration
pretreatments on the seeds of Leucaena
leucocephala. Seed Science and Technology, New
Delhi, v. 23, n. 2, p. 521-532, 1995.
HADRAMI, I. EL.; HOUSTI, F.; MICHAUS-
FERRIRE, N.; CARRON, M.P.; DUZAC, J.
Effects of gelling agents and liquid midium on
embryogenic potential, polyamines and enzymatic
factors in browning in Hevea brasiliensis Calli.
Journal of Plant Physiology, Stuttgard, v. 141, p.
230-233, 1993.
HARRY, I.S.; THORPE, T. A. In vitro culture of forest
trees. In: VASIL, J. K. ; THORPE, T. A. (eds).
Plant cell and tissue culture. Dordrecht: Cluwer
Academic Publishers, 1994. cap. 21, p. 539-560.
HERINGER, E. P. Flora micolgica do Cerrado e suas
implicaes no ecossistema dessa Flora. Revista
Cerrado, Braslia, n. 12, 1971.
LAZARIDOU, T. B.; ROUPAKIAS, D. G.;
ECONOMOU, A.S. Embryo rescue in Vicia faba
and Vicia narbonensis. Plant Cell, tissue and
Organ Culture, Dordrecht, v. 33, p. 297-301,
1993.
LEMOS FILHO, J.P. de; GUERRA, S.T.M.; LOVATO,
M.B.; SCOTTI, M.R.M.M.L. Germinao de
sementes de Senna macranthera, Senna multijuga e
Stryphnodendron polyphyllum. Pesquisa
Agropecuria Brasileira, Braslia, v. 32, n. 4, p.
357-361, abr. 1997.
MASCARENHAS, A.F.; KENDURKAR, S.V.;
GUPTA, P.K.; KHUSPE, S.S.; AGRAWAL, D.C.
Teak. In: BONGA, J.M.; DURZAN, D.J. (eds). Cell
and Tissue Culture in Forestry. Dordrecht:
Martinus Nijhoff Publishers. , 1987. v. 3, cap. 23, p.
300-315.
MELO, J.T. de; RIBEIRO, J.F.; LIMA, V.L.G. de F.
Germinao de sementes de algumas espcies
arbreas nativas do cerrado. Revista Brasileira de
Sementes, Braslia, v. 1, n. 2, p. 8-12, 1979.
MORS, W.B.; PELLEGRINO, J.; SANTOS FILHO,
M.F. dos. Ao profiltica do leo dos frutos de
Sucupira-branca, Pterodon pubescens Benth.,
contra a infeco pelo Schistosoma mansoni. Anais
da Academia Brasileira de Cincias, Rio de
Janeiro, v. 38, p. 325-330, dez. 1966. (Suplemento)
PASQUAL, M.; RIBEIRO, V.G.; RAMOS, J.D.
Influncia do GA
3
e do carvo ativado sobre o
enraizamento in vitro de embries de laranja
Natal. Pesquisa Agropecuria Brasileira,
Braslia, v. 25, n. 10, p. 1477-1482, out. 1990.
RADHAMANI, J.; MALIK, S.K.; CHANDEL, K.P.S.
Seedcoat characteristics in relation to the
physiology of seed germination in Citrus and its
allied genus. Seed Science and Technology, New
Delhi, v. 19, n. 3, p. 611-621, 1991.
REIS, G.G. dos; RENA, A.B. Estudos sobre a
dormncia de sementes de sucupira (Pterodon
pubescens Benth): Viabilidade, perda e absoro de
gua, respirao e presena de inibidores. Revista
rvore, Viosa, v. 11, n. 2, p. 105-118, jul/dez.
1987.

Cinc. agrotec., Lavras, v.25, n.1, p. 38-48, jan./fev., 2001

48
REIS, G.G. dos. Estudos sobre a dormncia de
sementes de sucupira (Pterodon pubescens
Benth). Viosa: UFV, 1976. 41p. (Tese - Mestrado
em Fisiologia Vegetal).
REIS, G.G. dos; DRUNE, A.; RENA, A.B. Estudos
sobre a dormncia de sementes de sucupira
(Pterodon pubescens Benth): tratamento para
superao da dormncia. Revista rvore, Viosa,
v. 9, n. 1, p. 49-57, jan/jul. 1985.
RODRIGUES, E.H. de A.; AGUIAR, J.B. de; SADER,
R. Quebra de dormncia de sementes de trs
espcies do gnero Cassia. Revista Brasileira de
Sementes, Braslia, ano 12, n. 2, p. 17-27, 1990.
SANTARM, E.R.; QUILA, M.E.A. Influncia de
mtodos de superao de dormncia e do
armazenamento na germinao de sementes de
Senna macranthera (Colladon) Irwin e Barneby
(Leguminosae). Revista Brasileira de Sementes,
Braslia, v. 17, n. 2, p. 205-209, 1995.
SIQUEIRA, E.R. de; INOUE, M.T. Controle de
oxidao na cultura de tecidos do coqueiro.
Pesquisa Agropecuria Brasileira, Braslia, v. 26,
n. 7, p. 949-953, jul. 1991.
THIAGARAJAN, M.; MURALI, P.M. Optimum
conditions for embryo culture of Azadirachta indica
(A. Juss). Indian Forester, Tamil Nadu, v. 120, n.
6, p. 500-503, June. 1994.
TODD-BOCKARIE, A.H.; DURYEA, M.L.; WEST, S.H.;
WHITE, T.L. Pretreatment to overcome seed coat
dormency in Cassia sieberiana. Seed Science and
Technology, New Delhi, v. 21, n. 2, p. 383-398, 1993.