O documento fornece informações sobre biossegurança em laboratórios de microbiologia, incluindo equipamentos de proteção individual e coletiva, métodos de desinfecção e esterilização, e classificação de laboratórios de acordo com o nível de risco biológico.
O documento fornece informações sobre biossegurança em laboratórios de microbiologia, incluindo equipamentos de proteção individual e coletiva, métodos de desinfecção e esterilização, e classificação de laboratórios de acordo com o nível de risco biológico.
Título original
01 e 02 - Conhecendo o laboratório de microbiologia
O documento fornece informações sobre biossegurança em laboratórios de microbiologia, incluindo equipamentos de proteção individual e coletiva, métodos de desinfecção e esterilização, e classificação de laboratórios de acordo com o nível de risco biológico.
O documento fornece informações sobre biossegurança em laboratórios de microbiologia, incluindo equipamentos de proteção individual e coletiva, métodos de desinfecção e esterilização, e classificação de laboratórios de acordo com o nível de risco biológico.
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Conhecendo o Laboratório de
Microbilogia: Biossegurança, Desinfecção e Vidarias e equipamentos na Microbiologia
Prof. Me. Johnatan Sousa
Biomédico @dr.johnatansousa BIOSSEGURANÇA BARREIRAS DE CONTENÇÃO
Barreiras de contenção primária
- Equipamentos de proteção individual (EPI)
- Equipamentos de proteção coletiva (EPC)
Barreiras de contenção secundária
- Desenho e estrutura física dos laboratórios
EPIs
• Os EPI deverão ser:
– Cuidados, descontaminados e higienizados para prolongar sua vida útil; – Quando forem descartáveis não deverão ser reaproveitados.
• Os EPI não podem provocar:
– Alergias ou irritações; – Devem ser confortáveis; – Atóxicos. NR-6: EPI
• Jaleco – Devem ser de mangas longas, punho sanfonado, usados sempre fechados sobre as vestimentas pessoais; – Nunca usados diretamente sobre o corpo; – Sempre descontaminar antes da lavagem; – Não usar fora do ambiente de laboratório. NR-6: EPI JALECOS AVENTAIS PVC NR-6: EPI
• Luvas – Previne tanto a contaminação das mãos, ao manipular material contaminado, quanto o experimento – Confeccionadas com material resistente e maleável, anatômicas, baixa permeabilidade; – A utilização de luvas, em hipótese alguma, exclui o ato da lavagem das mãos. NR-6: EPI
• Luvas – Barreira de proteção, prevenindo tanto a contaminação das mãos, ao manipular material contaminado, quanto o experimento – Confeccionadas com material resistente e maleável, anatômicas, baixa permeabilidade; – A utilização de luvas, em hipótese alguma, exclui o ato da lavagem das mãos.
LUVA DE LÁTEX NR-6: EPI
• Luvas – Barreira de proteção, prevenindo tanto a contaminação das mãos, ao manipular material contaminado, quanto o experimento – Confeccionadas com material resistente e maleável, anatômicas, baixa permeabilidade; – A utilização de luvas, em hipótese alguma, exclui o ato da lavagem das mãos.
LUVA DE LUVA DE LÁTEX KEVLAR NR-6: EPI
• Como calçar as luvas:
– É o último EPI a ser utilizado; – Selecione o tipo correto e o tamanho – Verifique depois de calçá-las se o punho está isolado. NR-6: EPI
• Como remover as luvas:
– É o primeiro EPI a ser retirado; – Retire-a e segure-a com a mão enluvada. – Introduza o dedo sem luva sob a luva puxe-a enrolando-as como uma bolsa.; – Descarte-as de forma segura. NR-6: EPI
• Óculos de Segurança – Destinado a proteção dos olhos contra borrifos, salpicos, gotas, respingos de material biológico NR-6: EPI
• Máscaras – Proteção de boca e nariz contra respingos e inalação de partículas em aerossol. NR-6: EPI
SIMBOLOGIA EQUIPAMENTO DE PROTEÇÃO COLETIVA
Equipamentos destinados a proteger os trabalhadores
aos riscos de contaminação. EQUIPAMENTO DE PROTEÇÃO COLETIVA Podem ser gerados por:
- Misturar cultivos; - Gotas de meio de cultura;
- Remoção de tampas de borracha;
- Flambar alça de platina;
- Inocular culturas com pipeta;
CABINES DE SEGURANÇA BIOLÓGICA (CSB)
- Classe I;
- Classe II;
- Classe III. Características
Protege operador e meio ambiente
- O ar flui através do espaço de
trabalho e atravessa um sistema de filtros HEPA que sai para o duto que se comunica com o sistema de exaustão do prédio
PROTEÇÃO COMPROMETIDA: correntes de ar
- Protege operador, produto e meio ambiente; Utilizam fluxo de ar com uma abertura frontal para o acesso á área de trabalho e para introdução e remoção de materiais
“Uma cortina de ar impede que as
contaminações originadas do ar ambiental tenham acesso à área de trabalho” Ducto para exaustão da sala CERTIFICAÇÃO DA CSB
• Já existe certificação no Brasil (fabricantes);
• A cada 6 meses ou 1000 horas de uso; • Após projeção de líquido ou qualquer dano físico sobre o filtro HEPA. USO CORRETO DA CSB
- Ligar circulação de ar e luz UV durante 15-20 min
antes e depois de seu uso;
- Usar microqueimador automático ou incinerador
elétrico (fire boy); - Descontaminar a superfície interior com gaze estéril, embebida em álcool etílico 70%; - Limpar todos os equipamentos antes e depois de usar a CSB; BOAS PRÁTICAS LABORATORIAIS BOAS PRÁTICAS LABORATORIAIS
• Toda amostra biológica deve ser considerada potencialmente
contaminada;
• Nunca manipular materiais não identificados;
• Não atender o telefone ou abrir portas usando luvas
descartáveis;
• Evitar trabalhar sozinho.
Classificação dos laboratórios
• Nível 1 de Biossegurança (NB-1):
– Nenhum ou baixo risco individual e para a comunidade; – Pouca probabilidade de causar enfermidades humanas; – Ex: Bacillus subtilis, Lactobacillus casei Classificação dos laboratórios • Nível 2 de Biossegurança (NB-2): – Risco individual moderado e risco comunitário limitado; – A exposição ao agente patogênico pode provocar doença humana ou animal; – Dispõe de medidas eficazes de tratamento e prevenção. – Ex: Clostridium tetani, Staphylococcus aureus, Escherichia coli. Classificação dos laboratórios • Nível 3 de Biossegurança (NB-3): – Microrganismos com elevado risco infeccioso podendo causar doenças sistêmicas sérias e potencialmente letais; – Existe profilaxia e/ou tratamento. – Ex: Bacillus anthracis, Brucella, Mycobacterium tuberculosis, Burkholderia pseudomallei Métodos de Desinfecção e Esterilização em microbiologia Quando utilizar?
• Limpeza de bancadas;
• Esterilização de alça microbiológica
• Limpeza de material utilizado em cabine de segurança
biológica;
• Vidrarias utilizadas em microbiologia em laboratórios;
• Preparação de meios de cultura em laboratório;
Métodos de Desinfecção em microbiologia Métodos do controle do crescimento Microbiano
• Desinfecção • ANTI-SEPSIA
– Pode ser afetado por diferentes fatores:
• Limpeza prévia do material; • Período de exposição ao germicida; • Concentração da solução germicida; • Temperatura e o pH do processo de desinfecção Métodos do controle do crescimento Microbiano
• Principais soluções desinfetantes utilizadas em
microbiologia:
– Agentes de superfície;
– Álcool 70%;
– Hipoclorito 1% ou 2% MÉTODOS QUÍMICOS MAIS USADOS
• Agentes de superfície (tensoativos ou surfactantes)
podem reduzir a tensão superficial entre as moléculas de um líquido. – Sabão • Pouco valor anti-séptico (mais importante na remoção mecânica através da esfregação).
– Detergentes (ácido-aniônico) • ânion da molécula reage com a membrana plasmática (atuam sobre um amplo espectro de micróbios e não são tóxicos) • Detergente neutro MÉTODOS QUÍMICOS MAIS USADOS
• Álcoois: – Desnatura proteínas e dissolve lípídios; – Promove desinfecção a antissepsia; – Atua contra bactérias, Mycobacterium, fungos e vírus.
Age e evaporam sem deixar resíduo
MÉTODOS QUÍMICOS MAIS USADOS
• HALOGÊNIOS – Particularmente Cloro (agente antimicrobiano efetivo) – Ação germicida é causada pelo ácido hipocloroso (HOCl) quando adicionado à água; – Para descarte de material: 1% – Lavagem de piso e material contaminado: 2%
É um forte oxidante que impede o funcionamento de boa parte do sistema
enzimático celular. Outras soluções
• Álcool-éter ou Álcool-acetona;
• Álcool-ácido;
• Solução fisiológica;
• Hidróxido de sódio 10-40%
• Corantes Métodos de Esterilização em microbiologia Esterilização
• É o processo de inativação total por meio de agentes
físicos e químicos de todas as formas de vida quanto a capacidade reprodutiva, inclusive os endosporos. • Métodos Físicos: – Radiação ionizante e não ionizante; – Calor seco; – Calor úmido Radiação ionizante
• Não disseminados na esterilização de rotina.
• Produtos descartáveis em microbiologia.
• Atuam destruindo o DNA por raios gama e feixes de elétrons
de alta energia.
• Radiação de alta penetração.
Radiação não ionizante
• Radiação não muito penetrante.
• Usado para controle de ambiente fechado. • Atuação ocorre lesando o DNA pela luz UV com lâmpada UV (germicida). • Radiação de baixa penetração. Calor seco
• Chama direta: queima os contaminantes até se tornarem
cinzas. – Alças de laboratórios.
• Incineração: queima até se tornarem cinzas.
– Curativos contaminados, – Carcaça de animais – Panos de limpeza – Outros resíduos de laboratório com ou sem descontaminação prévia. Calor seco
• Esterilização com ar quente(Fornos de Pasteur)
• Método muito efetivo de esterilização, mas requer
temperaturas elevadas e tempo excessivo (170ºC – 2 horas).
• Atua através da oxidação:
– vidros vazios, – Instrumentos, agulhas e seringas de vidro. Calor seco
Incineração: materiais de Flambagem: esterilização de Estufa: esterilização de
hospital contaminado alça de inoculação vidraria (170ºC/2 horas) Calor úmido
• Autoclavação: – É um dos métodos mais eficazes de destruição de microrganismos. – Normalmente usa-se 121ºC a 01 atm durante 15 min. – Esterilizar roupas, instrumentos médicos, odontológicos, cirúrgicos e materiais reutilizáveis. – Esterilizar meios de culturas, soluções e reagentes que não contenham compostos termolábeis. – Descontaminação de Resíduos de Serviços de Saúde antes de serem descartados para seu destino final. Calor úmido
• Autoclaves de esterilização • Temperatura de trabalho 121ºC x Pressão x Tempo de esterilização. Calor Seco
• Incinerador Vidrarias Vidrarias em microbiologia Vidrarias em microbiologia Vidrarias em microbiologia Equipamentos Equipamentos Equipamentos Vídeos
• http://eaulas.usp.br/portal/video.action?idIte m=17686 • https://www.youtube.com/watch?v=xJannNQ Pors Grato pela atenção!
