Patologia Molecular

Patologia molecular
Principais classes de mutação

 Deleções: de 1bp até megabases
 Inserções: incluindo duplicações
 Substituições de uma única base:
o Mutação com troca de sentido: trocam um aa por outro no produto gênico
o Mutação sem sentido: substitui um códon de aa por um de terminação
o Mutação nos sítios de encadeamento: criam ou destroem limites exon-intron
 Mutações de mudança de fase de leitura
 Mutações dinâmicas: repetições in tandem que mudam de tamanho de uma geração para outra
Qual a relação com o fenótipo?
Qual a relação com quantidade ou função do produto gênico?
Porque uma mudança pode ser patogênica?
Nomenclatura
Descrição de efeito de um alelo
 Alelo nulo ou amorfo: não elabora produto

 Hipomorfo: quantidade ou função reduzida do produto
 Hipermorfica: quantidade ou função aumentada do produto
 Meromorfo: cria uma nova função para proteina
 Antimorfo: atividade antagoniza com a do produto normal
Descrição de mutações
 Substituições de aminoácidos:
• Código de 1 letra (A, C, D, E, F, G, H, I, K, M, N, P, Q, R, S, T, V, W, Y e X - stop codon)
• Código de 3 letras (Arg, Gly, Stop, etc)
• Ex.: R117H ou Arg117His; G542Stop
 Substituição de nucleotídeos:
• No códon de iniciação ATG, o A é +1.
• Base imediatamente anterior ao ATG é -1
• Número do nucleotídeo seguido da mudança (1162G>A)
• Diferenciar entre DNA genômico (g.) ou cDNA (c.)
• Mudanças em íntrons quando se conhece só o cDNA
• # especificar número do intron (IVSn) ou o número da posição do éxon mais próximo- 621 +1G>T ;
IVS4 +1G>T
 Deleções ou inserções:
• del para deleções
• ins para inserções
• Ex.: F508del; 6232-6236delATAAG ; 409-410insC
Mutação de ganho de função X mutação de perda de função
Mutação pode causar mudança fenotípica por:
1. Mutação de perda de Função (amorfa ou hipomorfa)

o Em geral fenótipos recessivos
o Haplo-insuficiencia  fenótipo dominante
o Interferência em alelo normal  dominante negativo
Obs: se tiver mais de 50% da quantidade normal de proteína, o organismo funciona normalmente
2. Mutação de ganho de função (hipermorfo ou neomorfo)

o Em geral fenótipos dominantes
o Sinaliza ou não desliga quando devia
o Novas funções - neomorfo
Heterozigoto composto: duas cópias alteradas: a e a’  aa não significa que as mutações são iguais, pode ser aa’. Significa
que ele tem 2 mutações
Aa: alelo mutado em a interfere em A, dessa maneira a doença pode ser recessiva mesmo tendo característica dominante
em Aa.
Conceito de Doença dominante: afeta mais de uma geração; transmitido para homem e mulher; transmitido de homem
para homem pelo menos uma vez.
Perda de função
Mutações de ponto podem produzir mesma mudança patológica que deleções, em geral por perda de função
EX: Mutações trucantes: interrompem desenvolvimento normal da cadeia de aminoácido
Mutação dinâmica: aumenta ou diminui de tamanho
Ganho de função
Uma só mutação causa determinada patologia  provável ganho de função
 Ganho de função  mudança mais específica que perda de função

 Fenótipo de ganho de função é diferente de fenótipo de deleção
Porque uma única mutação pode ser responsável pela maioria ou todos os casos de uma doença? SLIDE
 Espectro mutacional restrito: mutação de ganho de função. EX: acondroplasia

 Consequencias são diretamente derivadas do produto gênico. Ex: Anemia falciforme
 Mecanismo molecular torna mais provável que uma determinada mudança seja mais provável que outras. Ex: X-
frágil
 Efeito fundador Ex: doenças metabólitas em judeus
 Seleção a favor de heterozigotos
É difícil avaliar se uma alteração no DNA é ou não patogênica
 Nem toda variação em pessoa afetada é patogênica

o Variantes
 Ganho de Função
o Mutação deve ser específica
o Outras mudanças provavelmente não serão patogênicas (ao menos para a doença em questão)
 Perda de Função
o Mais heterogêneas
o Testes in vitro ou in vivo ou estudo da natureza da mutação podem ajudar
A mudança no DNA é ou não patogênica?
 Deleções de genes inteiros, mutações sem sentido e mudanças de fase normalmente destroem a função do
gene;
 Substituição de nucleotídeos conservados GT...AG , que flanqueiam íntrons, afetam encadeamento (outras
mudanças devem ser testadas in vitro, ou por RT-PCR);
 Mutações de troca de sentido que afetam domínios funcionais da proteína podem ser patogênicas;
 Se a substituição do aa for em região conservada na mesma espécie ou família gênica;
 Substituição de aa com características muito diferentes (polar por não polar,ácido por básico) devem ser
patogênicos;
 Presença da alteração no afetado mas não em seus pais.
Mutações por perda de função

Muitas mudanças podem causar perda de função
 Deleção
o Gene inteiro
o Parte do gene
 Inserção de seqüência no gene
 Fragmentação
o Translocação
o Inversão
 Impedimento de atuação do promotor
o Mutação
o Metilação
 Desestabilização do mRNA
o Mutação no sítio de poliadenilação
o Diminuição do RNA mediada por mutação sem sentido
 Impedimento do correto encadeamento
o Desativação do sítio doador
o Desativação do sítio receptor
o Ativação de sítio de encadeamento oculto
 Mudança de fase na tradução (del ou ins de + ou - que múltiplos de 3 nucleotídeos)
 Conversão para códon de terminação
 Substituição de aa essencial
 Impedimento de processamento posterior à transcrição
 Impedimento do correto posicionamento celular
Alfa talassemia: deleção de gene inteiro
Distrofina: deleção de parte do gene; mudança de fase
Distrofia de duchene: translocação X autossomo
IMPORTANTE:
 Deleções e inserções que causam mudança de fase são mais graves;

 Mutações sem sentido costumam instabilizar mRNA;
 Substituições em seqüências codificadoras são mais patogênicas por causa de problemas de sinalização do
que por causa da mudança de aminoácido
Mutações epigenéticas podem eliminar função de genes
 Silenciamento de gene por metilação de DNA
Ex: Sindrome de deficiência mental ligada ao X – tipo X frágil
 Mudanças na configuração da cromatina

o Resultantes de rearranjos cromossômicos
o Supra regulação ou silenciamento gênico
o Ex.: LINFOMA DE BURKITT - Translocação aproxima MYC de região de imunoglobulina =
hiperexpressão de MYC
 Memória
o Imprinting
o Ex.: Síndromes de Prader-Willi e Angelman
 Mudanças na conformação da proteína

o Pode se propagar por uma população de moléculas proteicas
 Príons
 Processos naturais de agregação de proteínas em estruturas subcelulares
 Mutações de Perda de Função tendem a ser recessivas:

o Função do organismo normal com nível de 50% de ação gênica
o Alça de retroativação compensando a baixa dose, aumentando transcrição do alelo normal (mais
raro)
 HAPLOINSUFICIENCIA: redução de 50% causa fenótipo anormal
o Número menor de genes
o Padrão de herança dominante
o Algumas funções são mais sensíveis:
 Sistemas de sinalização quantitativa que depende da ocupação de receptor
 Produtos gênicos que competem entre si (importantes no desenvolvimento ou no
metabolismo)
 Produtos gênicos que cooperam entre si, com razão fixa (como a alfa e beta globinas)
 Efeito Dominante Negativo

o Polipeptídeo mutante interfere no normal
o Efeitos mais graves que deleções e mutações sem sentido
Mutações de ganho de função

 Rara. Mais comum em câncer.
 Hiperexpressão patogênica
o Replicação gênica em massa
o Transposição de um gene para um ambiente de cromatina altamente ativa
 Poucas doenças são causadas por hiperexpressão
Mecanismos de ganho de função
 Hiperexpressão
o Doença de Charcot-Marie-Tooth (PMP22)
 Receptor permanentemente ligado
o Doença de McCune-Albright (GNAS1)
 Aquisição de novo substrato
o Deficiência de α1-antitripsina (PI)
 Canal iônico intempestivamente aberto
o Paramiotonia congênita (SCN4A)
 Multímeros estruturalmente anormais
o Ostegênese imperfeita (COL2A1)
 Agregação protéica
o Doença de Huntington (HD)
 Gene quimérico
o Leucemia mielóide crônica (BCR-ABL)
Mutações de ganho de função e mudanças qualitativas
 Puberdade Precoce Familial

o Receptor luteinizante constitutivamente ativo
 Hiperplasia de Tiróide Autossômica Dominante
o Mutação ativadora no receptor do hormônio estimulante da tiróide
 Condrodistrofia Metafisária de Jansen
o Ativação constitutiva de receptor de hormônio paratiróideo
 Sindrome de McCune-Albright
o Proteína Gsα constitutivamente ativa
Do gene à doença
 Fenótipo na perda de função depende do nível residual do produto gênico

o Mais de 50% do produto ainda é normal
 Mutações de ganho ou perda causam doenças diferentes (no mesmo gene)
 Variabilidade Intrafamiliar
 Muitas doenças são clinicamente variáveis, mesmo dentro da família...COM MESMA MUTAÇÃO!
o Efeitos de outros genes (modificadores)
o Efeitos ambientais (incluindo efeitos aleatórios)
 Haploinsuficiência é especialmente sujeita a efeito de modificadores
Correlação fenótipo-genótipo em doenças mitocondriais é difícil

 Mesma mudança em diferentes síndromes/gravidades
 Razões
o Heteroplasmia tecido específica
o mtDNA é mais variável que o DNA nuclear, podendo haver mais variabilidade em algumas doenças
por efeito de modificadores
o Doenças de efeito quantitativo
o Efeito nuclear no perfil da doença
Gene subjacente a uma doença pode não ser óbvio

 Nem sempre mutações que levam a deficiência numa proteína se localiza no seu gene estrutural
o Agamaglobulinemia – várias LX // genes das imunoglobulinas – cr. 2, 14 e 22
 Um defeito gênico – muitas enzimas alteradas
o Deficiência de co-fatores comuns
o Deficiência de transportadores comuns
 Mutações costumam afetar subconjunto de tecidos
o Padrão de expressão tecido específico não é bom previsor de fenótipo
 Nem todo tecido onde o gene se expressa é afetado
 Pode haver expressão do gene em tecidos onde não tem função
 Perda de função pode afetar mais uns tecidos que outros por causa das diferenças de
funções e necessidades
 Ganho de função pode ser patológico em alguns tipos celulares e não enm outros
Heterogeneidade de lócus é regra e não exceção
 HETEROGENEIDADE DE LÓCUS: MESMA DOENÇA-DIFERENTES GENES
 FAZ SENTIDO!
o Doenças são causadas frequentemente por problemas em VIAS FISIOLÓGICAS OU DE
DESENVOLVIMENTO
o Peptídeos codificados em diferentes genes, mas que ATUAM DE FORMA AGREGADA
Classificação clinica x classificação molecular

 Classificação clinica: sintomas
 Classificação molecular: gene, localização e tipo de mutação
Defeitos cromossômicos
 Genes contíguos e síndrome de microdeleções: genes letais ou sensíveis a doses
o Ex: síndrome de williams – deleção submicroscópica
 Aneuploidias e desequilíbrio de dosagem
o Fenotipos de monossomia e trissomia
 Efeitos de uns poucos genes + pequenos distúrbios do desenvolvimento

Patologia Molecular

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Patologia Molecular

Enviado por

Dados do documento

Título original

Direitos autorais

Formatos disponíveis

Compartilhar este documento

Compartilhar ou incorporar documento

Opções de compartilhamento

Você considera este documento útil?

Este conteúdo é inapropriado?

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Patologia Molecular

Enviado por

Direitos autorais:

Formatos disponíveis

Patologia molecular

Principais classes de mutação

Qual a relação com o fenótipo?

Qual a relação com quantidade ou função do produto gênico?

Porque uma mudança pode ser patogênica?

 Alelo nulo ou amorfo: não elabora produto

1. Mutação de perda de Função (amorfa ou hipomorfa)

2. Mutação de ganho de função (hipermorfo ou neomorfo)

EX: Mutações trucantes: interrompem desenvolvimento normal da cadeia de aminoácido

Mutação dinâmica: aumenta ou diminui de tamanho

Uma só mutação causa determinada patologia  provável ganho de função

 Ganho de função  mudança mais específica que perda de função

 Espectro mutacional restrito: mutação de ganho de função. EX: acondroplasia

É difícil avaliar se uma alteração no DNA é ou não patogênica

 Nem toda variação em pessoa afetada é patogênica

A mudança no DNA é ou não patogênica?

Mutações por perda de função

Alfa talassemia: deleção de gene inteiro

Distrofina: deleção de parte do gene; mudança de fase

Distrofia de duchene: translocação X autossomo

 Deleções e inserções que causam mudança de fase são mais graves;

 Mudanças na configuração da cromatina

 Mudanças na conformação da proteína

 Mutações de Perda de Função tendem a ser recessivas:

 Efeito Dominante Negativo

Mutações de ganho de função

Mecanismos de ganho de função

Mutações de ganho de função e mudanças qualitativas

 Puberdade Precoce Familial

 Fenótipo na perda de função depende do nível residual do produto gênico

Correlação fenótipo-genótipo em doenças mitocondriais é difícil

Gene subjacente a uma doença pode não ser óbvio

Classificação clinica x classificação molecular

Você também pode gostar