Trabalho - Antibiograma

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Aline Anglica Isabel Moreira Robson Silva Orientador(a): Izabel Paixo TB09T-2

Introduo
Diante de tantos microorganismos patgenos conhecidos atualmente, v-se a necessidade de avaliao da sensibilidade dos mesmos, j que o sucesso do controle de uma infeco depende do grau de resistncia do patgeno, na presena de algumas drogas antimicrobianas.

Objetivos
Conhecer a tcnica de antibiograma e a sua legislao vigente.

Antibiograma
Antibiograma um exame cuja finalidade verificar quais so os

antibiticos mais indicados para o tratamento da infeco causada pela bactria isolada no material clnico analisado, classificando a bactria em sensvel, intermediria ou resistente droga.

Fonte: <www.sanidadaanimal Info/cursos/curso/8/imagens/ Antibiograma.jpg>

Antibiograma- Formas de determinao


Mtodo de diluio: concentraes variadas do antibitico so

inoculadas com o microorganismo. A concentrao mais baixa do antibitico, que evita o crescimento microbiano aps incubao a concentrao inibitria mnima, a medida da sensibilidade.

Fonte: Food Science. < http://www.scielo.br/ scielo.php?script=sci_arttext&pid= S0101-20612000000300013>

Antibiograma- Formas de determinao


Mtodo da difuso do disco: discos de papel impregnados com o

antibitico so colocados uniformemente na superfcie do gar semeado com o microorganismo. Forma-se ento, indicando se o microorganismo ou no sensvel droga, dependendo do tamanho do dimetro formado pelo halo de inibio.

Fonte: Fciencia <http://www.fciencias.com/ 2014/01/23/testes-de-susceptibilidade-aos-antimicrobianos- laboratorio-online/antibiograma/>

Antibiograma
Devido

sua simplicidade e por poderem ser realizados rapidamente, os mtodos de difuso com disco tm preferncia sobre os de diluio para os testes de rotina, mas indispensvel que sejam, rigorosamente padronizados.

Fonte: Placa realizada no laboratrio de Micro I - Prtica: antibiograma - Senai /MG

Aplicao
Indicados para qualquer organismo responsvel por um processo

infeccioso que exija terapia antimicrobiana. Quando acredita-se que o microorganismo possa ser resistente. Estudos de epidemiologia da resistncia e na avaliao de novos agentes antimicrobianos.

Legislao segundo ANVISA Seleo do disco de antibitico


Reconhecimento que alguns agentes antimicrobianos podem ser

agrupados em classes, baseando-se no seu espectro de atividade.

Fonte:<http://www.ebah.com.br/content/ ABAAAelSoAK/relatorio-antibiograma>

Legislao segundo ANVISA Reagentes para o teste de difuso em disco


Meio de cultura gar MH:

- Demonstra reprodutibilidade aceitvel - Contem baixo teor de inibidores de sulfonamida, trimetoprim e tretaciclina. - Existe um grande acervo de dados e experincias realizados com esse meio.

Legislao segundo ANVISA Reagentes para o teste de difuso em disco


Para padronizar a densidade do inoculo para um teste de

sensibilidade, deve-se usar um controle de turbidez de BaSO4, equivalente a uma soluo padro de MacFarland 0,5. 8 Isso resulta numa suspenso contendo aproximadamente 1,5 x 10 UFC/ml

Fluxograma

Fonte: http://www.anvisa. gov.br/servicosau de/manuais/clsi/cl si_OPASM2A8.pdf

Disco de Agente Antimicrobiano para Testes


-Lactmicos Principal modo de ao: a inibio da sntese da parede celular espectro: gram-negativas. ex: ampicilina e amoxicilina Glicopeptdeos Principal modo de ao: a inibio da sntese da parede celular num stio diferente do dos -lactmicos. espectro: gram-positivas. ex: vancomicina Aminoglicosdeos Principal modo e ao: inibem a sntese protica bacteriana em nvel ribossmico. espectro: bacilos gram-negativas aerbicas. ex: estreptomicina

Disco de Agente Antimicrobiano para Testes

Macroldeos Principal forma de ao: inibem a sntese protica em nvel ribossmico. espectro: amplo espectro. ex: eritromicina Tetraciclinas Principal forma de ao: inibem a sntese protica em nvel ribossmico. espectro: algumas gram-positivas e algumas gran-negativas. ex: tetraciclina e minociclina

Disco de Agente Antimicrobiano para Testes

Quinolonas Principal forma de ao: inibio da atividade da DNA-girase. espectro: amplo espetro. ex: Ciprofloxacina
Inibidores da Via Metablica do Folato (sulfonamidas) Principal forma de ao: inibio da via metablica do folato nas bactrias espectro: amplo ex: sulfisoxazol

Disco de Agente Antimicrobiano para Testes


Classes de Droga nica:

Essas classes representam agentes antimicrobianos para os quais no h produtos relacionados que sejam apropriados para testes in vitro. Incluem: cloranfenicol, clindamicina, linezolida e quinupristina dalfopristina, que inibem a sntese protica, bem como a rifampina, que inibe a sntese do RNA

Legislao segundo ANVISA Mtodo de suspenso direta das colnias


Preparar o inculo fazendo uma suspenso direta, em caldo de soja

trptica ou soluo salina de colnias isoladas numa placa de gar de 18-24h (deve-se usar um meio no seletivo, como gar sangue.
A soluo ajustada ate obter turbidez que coincida com a escala

de MacFarland 0,5.

Legislao segundo ANVISA Inoculao


Mergulha-se a swab estril na suspenso ajustada. O swab deve ser

girado varias vezes e apertado firmemente contra a parede interna no tubo. Isso ajudar a retirar qualquer excesso de inculo no swab. Inocular o swab em toda a superfcie estril do gar. Repetir outras duas vezes.

Legislao segundo ANVISA Aplicao dos discos


Cada disco deve ser pressionado de encontro placa, de maneira a

assegurar contato completo com a superfcie do gar. Os discos devem ser distribudos por igual, de maneira que a distncia de centro para centro no exceda 24mm. Incubar as placas invertidas na estufa a 35 C, aps 15 minutos da aplicao.

Legislao segundo ANVISA Leitura das placas e interpretao dos resultados


Aps 16-18 horas de incubao examina-se cada placa. Os halos de inibio resultantes sero uniformemente circulares. Os

halo de inibio ser considerado a rea sem crescimento detectvel a olho nu. Os halos so medidos com paqumetros ou rguas. Interprete o tamanho dos halos de acordo com a tabela, classificando os organismos como sensveis, intermedirios ou resistentes aos agentes testados.

Legislao segundo ANVISA Leitura das placas e interpretao dos resultados


Tabela referente ao tamanho dos halos de inibio:

Fonte: <www.scielo.br/ Php?script=sci_arttex&pid =S1516-359819990050027>

Legislao segundo ANVISA Leitura das placas e interpretao dos resultados


Sensvel: uma infeco por uma determinada cepa pode ser tratada

adequadamente com a dose do agente antimicrobiano. Exceto quando houver contra-indicao. Intermediria: taxa de resposta podem ser inferiores quelas apresentadas por isolados sensveis. Resistente: as cepas resistentes no so inibidas pelas concentraes sistmicas dos agentes antimicrobianos.

Concluso
Com o trabalho foi possvel conhecer a tcnica de antibiograma juntamente com a sua legislao. Entender como funciona a prtica e a sua execuo de forma correta.

Muito Obrigado a Todos!

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