LAPORAN PRAKTIKUM BIOLOGI TUMBUHAN MODUL 1 - STRUKTUR TUMBUHAN

PRAKTIKUM BIOLOGI TUMBUHAN STRUKTUR TUMBUHAN Modul 1 Oleh: Kelompok 06 Ketua Kelompok : Muhammad Yudha Prawira 11217026 Anggota Kelompok : Adam Muhammad Syach 11217009 Faridah Husna 11217040 Ghiffary Rifqialdi 11217025 Isna Mazidna Annisa 11217023 Dosen : Andira Rahmawati S.Si., M.Si. Asisten : Muhammad Arifuddin Bara Tanggal Percobaan : 22 Januari 2019 Tanggal Pengumpulan : 29 Januari 2019 PROGRAM STUDI REKAYASA HAYATI SEKOLAH ILMU DAN TEKNOLOGI HAYATI INSTITUT TEKNOLOGI BANDUNG 2019 LEMBAR PENILAIAN DAN PENGESAHAN Komponen BAB I BAB II BAB III BAB IV BAB V Format Total Nilai Maksimal 10 20 10 40 10 10 100 Nilai Laporan Praktikum Modul Struktur Tumbuhan sebagai syarat untuk memenuhi rangkaian Praktikum Biologi Tumbuhan dalam menempuh studi tingkat sarjana di Program Studi Rekayasa Hayati Institut Teknologi Bandung Jatinangor, 29 Januari 2019 Diperiksa oleh, Asisten Praktikum Mengetahui dan menyetujui, Dosen Pengampu Muhammad Arifuddin Bara Andira Rahmawati S.Si., M.Si. NIM. 11216007 NIP. 118110059 DAFTAR ISI DAFTAR ISI.............................................................................................................i DAFTAR GAMBAR ..............................................................................................iv DAFTAR TABEL ...................................................................................................vi DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ viii RINGKASAN ...................................................................................................... viii BAB I PENDAHULUAN ........................................................................................ 1 1.1 Latar Belakang .................................................................................... 1 1.2 Tujuan ................................................................................................. 1 1.3 Ruang Lingkup ................................................................................... 2 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................ 3 2.1 Mikroskop ........................................................................................... 3 2.2 Tipe Sayatan ....................................................................................... 3 2.3 Struktur Tumbuhan. ............................................................................. 3 2.3.1 Jaringan. ..................................................................................... 3 2.3.2 Sel Utuh Tumbuhan. .................................................................. 4 2.3.3 Plastida....................................................................................... 4 2.3.4 Oleosom. .................................................................................... 5 2.4 Metabolit Sekunder. ............................................................................. 5 2.4.1 Alkaloid. .................................................................................... 5 2.4.2 Terpenoid ................................................................................... 6 2.5 Klasifikasi ............................................................................................ 6 BAB III METODOLOGI ......................................................................................... 7 3.1 Alat dan Bahan ................................................................................. 11 3.2 Langkah Kerja .................................................................................. 11 3.2.1 Pengamatan Sel Utuh .............................................................. 11 3.2.1.1 Pengamatan Sel Tradescantia spathacea. ................... 11 3.2.1.2 Pengamatan Jaringan Epidermis Bawang .................. .12 3.2.2 Pengamatan Plastida ............................................................... .12 3.2.2.1 Pengamatan Jenis Plastida pada Capsicum annuum L. i (Cabai Hijau) ........................................................................ .12 3.2.2.2 Pengamatan Jenis Plastida pada Capsicum annuum (Cabai Merah) dan braktea Streilitzia reginae ..................... .12 3.2.2.3 Pengamatan Jenis Plastida pada Umbi Solanum tuberosum ............................................................................. .12 3.2.3 Pengamatan Oleosom ............................................................. .13 3.2.3.1 Pengamatan Oleosom pada Biji Ricinus communis ... .13 3.2.3.2 Pengamatan Oleosom pada Buah Persea americana. .13 3.2.4 Deteksi Alkaloid dan Terpenoid ............................................. .13 3.2.4.1 Deteksi Alkaloid dan Terpenoid pada Daun Catharanthus roseus .................................................................................... .13 3.2.4.2 Deteksi Alkaloid dan Terpenoid pada Daun Melaleuca leucadendra .......................................................................... .13 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 15 4.1 Pengamatan Struktur Sel pada Stamen Tradescantia spathacea ..... 15 4.2 Pengamatan Jaringan Epidermis Allium cepa L. .............................. 16 4.3 Pengamatan Jenis Plastida pada Capsicum annuum (Cabai Merah) .16 4.4 Pengamatan Jenis Plastida pada Capsicum annuum L.(Cabai Hijau).17 4.5 Pengamatan Jenis Plastida pada braktea Streilitzia reginae ............. .18 4.6 Pengamatan Jenis Plastida pada Solanum tuberosum ....................... .19 4.7 Pengamatan Lipida pada Biji Ricinus communis.............................. .21 4.8 Pengamatan Lipida pada Buah Persea americana ........................... .22 4.9 Menentukan Keberadaan Terpenoid pada Daun Melaleuca leucadendra Menggunakan Reagen Neutral Red ......................................................... 23 4.10 Menentukan Keberadaan Alkaloid pada Daun Melaleuca leucadendra Menggunakan Reagen Jeffrey ................................................................ .25 4.11 Menentukan Keberadaan Terpenoid pada Daun Catharanthus roseus Menggunakan Reagen Neutral Red ........................................................ .26 4.12 Menentukan Keberadaan Alkaloid pada Daun Catharanthus roseus Menggunakan Reagen Jeffrey ................................................................ .28 BAB V PENUTUP ................................................................................................ 30 ii 5.1 Kesimpulan ....................................................................................... 30 5.2 Saran ................................................................................................. 31 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 32 LAMPIRAN ........................................................................................................... 36 iii DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Tradescantia sp. ................................................................................... 6 Gambar 2.2 Allium cepa L. ..................................................................................... 7 Gambar 2.3 Capsicum annuum L. .......................................................................... 7 Gambar 2.4 Streilitzia reginae ................................................................................. 8 Gambar 2.5 Solanum tuberosum .............................................................................. 8 Gambar 2.6 Ricinus communis ................................................................................ 9 Gambar 2.7 Persea americana ................................................................................ 9 Gambar 2.8 Melaleuca leucadendra ..................................................................... 10 Gambar 2.9 Catharanthus roseus .......................................................................... 10 Gambar 4.1 Hasil pengamatan sel stamen Tradescantia sp. .................................. 15 Gambar 4.2 Hasil pengamatan jaringan epitel Allium cepa L. ............................ .16 Gambar 4.3 Hasil pengamatan Capsicum annuum L. .......................................... .17 Gambar 4.4 Pengamatan literatur Capsicum annuum L. ...................................... .17 Gambar 4.5 Hasil pengamatan Capsicum annuum .............................................. .18 Gambar 4.6 Hasil pengamatan braktea bunga Strelitzia reginae .......................... .19 Gambar 4.7 Hasil pengamatan umbi Solanum tuberosum .................................... .20 Gambar 4.8 Hasil pengamatan umbi Solanum tuberosum dengan reagen Lugol .20 Gambar 4.9 Hasil pengamatan biji Ricinus communis ......................................... .21 Gambar 4.10 Hasil pengamatan biji Ricinus communis dengan reagen Sudan III.22 Gambar 4.11 Hasil pengamatan Persea americana .............................................. .22 Gambar 4.12 Hasil pengamatan Persea americana dengan reagen Sudan III ...... 23 Gambar 4.13 Hasil pengamatan daun M.leucadendra .......................................... .24 Gambar 4.14 Hasil pengamatan daun M.leucadendra dengan reagen Neutral Red24 Gambar 4.15 Reaksi senyawa alkaloid dengan reagen Jeffrey ............................. .25 Gambar 4.16 Hasil pengamatan daun M.leucadendra .......................................... .26 Gambar 4.17 Hasil pengamatan daun M.leucadendra dengan reagen Jeffrey ..... .26 Gambar 4.18 Hasil pengamatan C.roseus ............................................................. .27 Gambar 4.19 Hasil pengamatan C.roseus dengan reagen Neutral Red ................. 27 Gambar 4.20 Pengamatan literatur C.roseus dengan reagen Neutral Red ............. 27 iv Gambar 4.21 Hasil pengamatan C.roseus ............................................................. 29 Gambar 4.22 Hasil pengamatan C.roseus dengan reagen Jeffrey ......................... 29 Gambar 4.23 Pengamatan literatur C.roseus dengan reagen Jeffrey ..................... 29 v DAFTAR TABEL Tabel 2.1 Klasifikasi Rhoeo discolor ........................................................................ 6 Tabel 2.2 Klasifikasi bawang merah ......................................................................... 7 Tabel 2.3 Klasifikasi cabai ........................................................................................ 7 Tabel 2.4 Klasifikasi bunga cendrawasih ................................................................. 8 Tabel 2.5 Klasifikasi kayu putih ............................................................................... 8 Tabel 2.6 Klasifikasi kentang ................................................................................... 9 Tabel 2.7 Klasifikasi tapak dara................................................................................ 9 Tabel 2.8 Klasifikasi jarak ....................................................................................... 10 Tabel 2.9 Klasifikasi alpukat ................................................................................... 10 Tabel 3.1 Alat dan bahan pada percobaan ............................................................... 11 Tabel 4.1 Hasil pengamatan kandungan terpenoid daun M.leucadendra ................ 24 Tabel 4.2 Hasil pengamatan kandungan alkaloid daun M.leucadendra .................. 26 Tabel 4.3 Hasil pengamatan kandungan terpenoid daun C.roseus .......................... 27 Tabel 4.4 Hasil pengamatan kandungan alkaloid daun C.roseus ............................ 29 vi DAFTAR LAMPIRAN Lampiran A Data Mentah ...................................................................................... 37 vii RINGKASAN Sel dan jaringan merupakan kesatuan dasar struktural dan fungsional makhluk hidup tidak terkecuali tumbuhan. Jaringan pada tumbuhan terdiri dari sel – sel yang memiliki kesamaan struktur dan fungsi. Jaringan pada tumbuhan dibagi menjadi dua jenis, yaitu jaringan meristem dan jaringan non-meristem. Percobaan kali ini akan menentukan jenis aliran sitoplasma sel rambut stamen Tradescantia spathacea, menentukan sel dasar penysusun jaringan epidermis Allium cepa L., serta menentukan tipe plastida pada Capsicum annuum, braktea bunga Streilitzia reginae, dan umbi Solanum tuberosum. Selain itu, tumbuhan juga memiliki metabolit sekunder yang disimpan di dalam organel selnya, seperti amilum yang disimpan di dalam plastid khususnya dan lipid yang disimpan di dalam oleosom. Percobaan kali ini juga menentukan jenis lipida pada biji Ricinus communis dan buah Persea Americana. Metabolit sekunder dapat berupa alkaloid dan terpenoid yang pada percobaan kali ini akan menguji adanya kandungan alkaloid dan terpenoid pada daun Melaleuca leucadendra dan daun Catharanthus roseus. Dari pengamatan yang telah dilakukan, sel rambut stamen Tradescantia spathacea memiliki jenis aliran sitoplasma berupa aliran sirkulasi. Sedangkan jaringan epidermis Allium cepa L. memiliki sel dasar penyusun jaringan berupa sitoplasma, nukleus, vakuola, dan dinding sel. Dari pengamatan yang telah dilakukan juga dapat disimpulkan bahwa Capsicum annuum memiliki kloroplas untuk cabai hijau dan kromoplas untuk cabai merah. Sedangkan Streilitzia reginae memiliki kromoplas dan Solanum tuberosum memiliki amiloplas. Dari pengamatan yang telah dilakukan baik biji Ricinus communis maupun buah Persea Americana mengandung lipida. Dari uji yang dilakukan, Melaleuca leucadendra dan Catharantus roseus keduanya mengandung alkaloid dan terpenoid. viii BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Indonesia diakui dunia sebagai negara yang paling kaya akan keanekaragaman hayatinya, terdapat sekitar 25.000 spesies tumbuhan berbunga yang melebihi di daerah-daerah tropika lainnya di dunia seperti Amerika Selatan dan Afrika Barat (Zuhud dan Siswoyo, 2001). Tumbuhan memiliki 3 organ utama yaitu daun, batang, dan akar. Organ-organ tersebut tersusun atas jaringanjaringan. Jaringan pada tumbuhan dibagi menjadi dua jenis, yaitu jaringan meristem dan jaringan non-meristem. Jaringan pada tumbuhan terdiri dari sel – sel yang memiliki kesamaan struktur dan fungsi. Didalam sel terdapat banyak organel fungsional seperti plastida. Plastida sendiri terbagi atas beberapa jenis kloroplas, kromoplas, leukoplas, amiloplas, proteinoplas, dan elaioplas. (Taiz dan Zeiger, 2010). Dalam observasi dan penelitian pada studi Biologi, mikroskop ialah alat fundamental yang dapat dipakai untuk memperbesar objek yang diamati. Observasi penyusun tubuh tumbuhan atau hewan amat bergantung pada penggunaan mikroskop. Tanpa mikroskop akan sulit dilakukan observasi bagian tubuh seperti sel dan jaringan (Arianti, 2014). Metabolit sekunder merupakan senyawa yang dihasilkan oleh plantae, mikroba atau hewan melalui proses biosintesis. Umumnya metabolit sekunder berfungsi sebagai senyawa pertahanan diri terhadap musuh dan untuk beradaptasi pada lingkungan tertentu. Metabolit sekunder banyak dimanfaatkan dalam bioindustri sebagai obat, parfum, bumbu dan bahan relaksasi. Secara umum, metabolit sekunder digolongkan menjadi terpenoid, fenil propanoid, poliketida dan alkaloid (Saifudin, 2014). 1.2 Tujuan Tujuan dari praktikum Modul 01 Struktur Tumbuhan ini adalah sebagai berikut: 1. Menentukan bagian-bagian sel penyusun pada stamen dan jenis aliran sitoplasma Tradescantia sp. (Rhoeo discolor) 2. Menentukan bagian-bagian sel penyusun pada jaringan epidermis Allium cepa L. (bawang merah) 3. Menentukan jenis plastida pada daging buah Capsicum annuum L. (cabai hijau) 1 4. Menentukan jenis plastida pada daging buah Capsicum annuum (cabai merah) 5. Menentukan jenis plastida pada braktea bunga Streilitzia reginae (cendrawasih) 6. Menentukan jenis plastida pada umbi Solanum tuberosum (kentang) menggunakan reagen I2KI (Lugol) 7. Menentukan lipida yang terdapat pada biji Ricinus communis (jarak) menggunakan reagen Sudan III 8. Menentukan lipida yang terdapat pada buah Persea americana (alpukat) menggunakan reagen Sudan III 9. Menentukan keberadaan terpenoid yang terdapat pada daun Melaleuca leucadendra (kayu putih) menggunakan reagen Neutral Red 10. Menentukan keberadaan alkaloid yang terdapat pada daun Melaleuca leucadendra (kayu putih) menggunakan reagen Jeffrey 11. Menentukan keberadaan terpenoid yang terdapat pada daun Catharantus roseus (tapak dara) menggunakan reagen Neutral Red 12. Menentukan keberadaan alkaloid yang terdapat pada daun Catharantus roseus (tapak dara) menggunakan reagen Jeffrey 1.3 Ruang Lingkup Praktikum Biologi Tumbuhan Modul 01: Struktur Tumbuhan dilaksanakan pada hari Selasa, 15 Januari 2018. Percobaan dilaksanakan di Laboratorium Instruktural I, Labtek IA lantai II ITB Jatinangor. Percobaan dilaksanakan selama 3 jam dengan kondisi pada temperatur 2429℃. Parameter-parameter pada percobaan ini sebagai berikut: struktur sel, jenis-jenis plastida serta cara menentukannya, dan metabolit sekunder berupa alkaloid dan terpenoid. 2 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Mikroskop Mikroskop merupakan alat yang dipakai peneliti untuk mengobservasi benda mikro atau struktur material. Mikroskop memiliki bagian-bagian seperti lensa okuler, lensa objektif, meja, lensa kondenser, dan beberapa bagian lainnya. Pada mikroskop, terdapat dua lensa untuk perbesaran, yaitu lensa okuler yang dekat dengan mata pengamat dan lensa objektif yang dekat dengan objek. Ada total empat buah lensa pada lensa objektif pada mikroskop umumnya, yaitu 4x, 10x, 40x, dan 100x. Dengan perbesaran lensa okuler sebesar 10x, maka total perbesaran objek pada mikroskop menjadi perkalian dari perbesaran jumlah okuler dengan lensa objektif. Selain itu, ada meja preparat yang berguna sebagai alas dari preparat itu sendiri. Untuk memfokuskan cahaya pada spesimen, mikroskop memiliki lensa kondenser (Arianti, 2014). 2.2 Tipe Sayatan Terdapat berbagai macam tipe sayatan untuk jaringan tumbuhan, salah satunya yaitu sayatan melintang dan membujur. Untuk menghilangkan PEG, baiknya sayatan dibilas dengan akuades lalu diwarnai dengan acridin-cryzodin red 5% kemudian didehidrasi dengan alkanol dan disimpan dalam xilol. (Tellu, 2004). Sayatan paradermal pada daun merupakan sayatan yang berlandaskan prinsip Sass (1951), sementara sayatan melintang merupakan sayatan yang berlandaskan prinsip Johansen (1940) (Hafiz, 2013). 2.3 Struktur Tumbuhan 2.3.1 Jaringan Jaringan dalam adalah sekumpulan sel yang memiliki bentuk dan fungsi yang sama. Jaringan-jaringan yang berbeda dapat bekerja sama untuk suatu fungsi fisiologi yang sama membentuk organ. Tumbuhan dapat melakukan pertumbuhan secara terus-menerus karena memiliki suatu jaringan yang bersifat embrional yang disebut sebagai jaringan meristem. Jaringan meristem memiliki dua tipe utama jaringan, yaitu meristem apikal dan meristem lateral. Jaringan meristem apikal merupakan jaringan meristem yang memungkinkan jaringan tumbuhan tumbuh memanjang (pertumbuhan primer) dan dapat ditemukan pada ujung akar, ujung batang (tunas), 3 serta di dalam kuncup aksilaris tunas. Sementara jaringan meristem lateral merupakan jaringan yang memungkinkan terbentuknya kambium vaskular sehingga menyebabkan pertumbuhan membesar (sekunder) pada tumbuhan. (Campbell et al., 2008). 2.3.2 Sel Sel merupakan unit struktural dan fungsional terkecil mahkluk hidup. Sebagai unit struktural berarti setiap mahluk hidup tersusun dari sel atau sel-sel. Sel yang menyusun tubuh makhluk hidup pada umumnya berukuran sangat kecil, hanya dapat dilihat dengan bantuan mikroskop. Sel mampu melakukan semua aktivitas kehidupan dan sebagian besar reaksi kimia untuk mempertahankan kehidupan berlangsung di dalam sel. Kebanyakan makhluk hidup tersusun atas sel tunggal, atau disebut organisme uniseluler, misalnya bakteri dan amoeba. Makhluk hidup lainnya, termasuk tumbuhan, hewan, dan manusia merupakan organisme multiseluler yang terdiri dari banyak tipe sel terspesialisasi dengan fungsinya masing-masing (Campbell et al., 2008). 2.3.3 Plastida Plastida merupakan salah satu organel sel bermembran ganda yang memiliki bermacam- macam fungsi seperti fosintesis, penyimpanan pati, penyimpanan pigmen, dan transformasi energi dan terdapat di dalam sel eukariotik. Kloroplas merupakan organel berklorfil yang tergolong ke dalam plastida, sementara itu plastida yang memiliki kandungan pigmen selain klorofil disebut kromoplas, dan plastid yang tidak berpigmen disebut leukoplas. Leukoplas sendiri terdiri atas beberapa jenis plastida yaitu amiloplas, proteinoplas, dan elaeoplas (Taiz dan Zeiger, 2010). Plastida berpigmen berarti memiliki warna. Karena memiliki warna, plastida bergimen dapat dibedakan langsung melalui bentuknya. Kloroplas berbentuk seperti cakram, tersusun dalam lapisan tunggal dalam sitoplasma tetapi bentuk dan posisinya berubah-ubah sesuai dengan intensitas cahaya. Bentuk kromoplas sama seperti kloroplas, yang membedakannya hanya pigmen yang terkandung dalam plastida tersebut. (Campbell et al., 2008). Plastida tidak berpigmen berarti tidak memiliki warna. Untuk membedakan plastida tersebut dapat dilakukan dengan menggunakan uji. Sebagai contoh, untuk menentukan amiloplas dalam suatu sel dapat menggunakan reagen I2KI (Lugol). Amiloplas merupakan plastida yang menyimpan amilum (Campbell et al., 2008). Sedang kan Lugol berfungsi untuk menguji adanya kandungan amilum (karbohidrat). Apabila suatu organel sel ditetesi berubah warna menjadi biru 4 tua atau biru kehitaman, berarti organel tersebut mengandung amilum atau karbohidrat (Thomson et al., 2004). 2.3.4 Oleosom Di dalam biji, triasilgliserol disimpan di dalam suatu organel penyimpan lemak yang disebut oleosom atau sphereosom. Organel ini memiliki membran selapis yang terbentuk dari fosfolipid dengan bagian hidrofilik menghadap ke sitoplasma dan bagian hidrofobik berikatan langsung dengan interior triasilgliserol. (Taiz dan Zeiger, 2010). Untuk menentukan oleosom dapat dilakukan dengan menggunakan uji. Oleosom dalam suatu sel dapat ditentukan menggunakan reagen Sudan III. (Taiz dan Zeiger, 2010). Sudan III adalah pewarna diazo lisokrom (larut dalam lemak). Secara struktural mirip dengan azobenzene. Sudan III berfungsi untuk menguji adanya kandungan lipid. Apabila suatu organel sel ditetesi berubah warna menjadi merah, berarti organel tersebut mengandung lipid (Handayani, 2017). 2.4 Metabolit Sekunder Metabolit sekunder merupakan hasil metabolisme yang memiliki jalur produksi sendiri dan diproduksi dalam jumlah yang relativ sedikit namun kontinual. Metabolit sekunder umumnya berfungsi sebagai zat yang dihasilkan untuk pertahanan diri. Plantae lazimnya memanfaatkan metabolit sekundernya sebagai atraktan, phtoaleksin, zat pelindung dari sinar UV, dan sebagai alelopati (Marlinda et al., 2012). Metabolit sekunder dihasilkan melalui jalur utama dan disintesis pada sel tertentu serta dalam keadaan tertentu. Jalur pembentukan metabolit sekunder terdiri dari 3 jalur, antara lain: jalur asam malonat, jalur asam mevalonat, dan jalur asam sikhimat. Asam sikhimat dan asam malonat memiliki jalur biosintesis yang menggunakan asam amino alifatik, aromatik, dan fenilpropanoid, dimana produk akhir metabolisme ini berupa lignin, flavonoid, isoflavonoid dan senyawa antioksidan. Sementara itu, jalur pembentukan asam mevalonat membentuk senyawa terpenoid, steroid, dan saponin (Dhaniaputri, 2015). 2.4.1 Alkaloid Alkaloid adalah sebuah golongan senyawa basa bernitrogen yang kebanyakan heterosiklik dan terdapat di tumbuhan. Alkaloid mengandung paling sedikit satu atom nitrogen yang bersifat basa. Alkaloid biasanya diklasifikasikan menurut kesamaan sumber asal molekulnya, didasari dengan jalur metabolisme yang dipakai untuk membentuk molekul (Simbala, 2009). 5 Untuk menentukan senyawa alkaloid dapat dilakukan dengan menggunakan uji. Senyawa alkaloid dalam suatu sel dapat ditentukan menggunakan reagen Jeffrey. Reagen Jeffrey merupakan reagen yang digunakan dalam uji histokimia. Jeffrey berfungsi untuk menguji adanya kandungan alkaloid. Apabila suatu organel sel ditetesi berubah warna menjadi coklat berarti organel tersebut mengandung terpenoid (Lamar, 2002). 2.4.2 Terpenoid Terpenoid merupakan derivat dehidrogenasi dan oksigenasi dari senyawa terpen. Rumus molekul terpen adalah (C5H8)n. Terpenoid mempunyai kerangka karbon yang dibangun oleh dua atau lebih unit C-5 yang disebut unit isopren. Secara struktur kimia terpenoid merupakan penggabungan dari unit isoprena, dapat berupa rantai terbuka atau siklik, dapat mengandung ikatan rangkap, gugus hidroksil, karbonil atau gugus fungsi lainnya (Lenny, 2006). Untuk menentukan senyawa terpenoid dapat dilakukan dengan menggunakan uji. Senyawa terpenoid dalam suatu sel dapat ditentukan menggunakan reagen Neutral Red. Neutral Red adalah pewarna eurhodin yang digunakan untuk pewarnaan dalam histologi dengan rumus molekul C15H17N4. Neutral Red berfungsi untuk menguji adanya kandungan terpenoid. Apabila suatu organel sel ditetesi berubah warna menjadi merah muda, berarti organel tersebut mengandung alkaloid (Winckler, 1974). 2.5 Klasifikasi Klasifikasi Rhoeo discolor dapat dilihat pada tabel 2.1 Tabel 2.1 Klasifikasi Rhoeo discolor Kingdom Plantae Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Liliopsida Subkelas Commelinidae Ordo Commelinales Famili Commelinaceae Genus Rhoeo Spesies Rhoeo discolor Gambar (Sumber : amazon.com) 6 Klasifikasi bawang merah dapat dilihat pada tabel 2.2 Tabel 2.2 Klasifikasi bawang merah Kingdom Plantae Gambar Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Liliopsida Subkelas Liliidae Ordo Liliales Famili Liliaceae (Sumber : Genus Allium cnnindonesia.com) Spesies Allium cepa L. Klasifikasi cabai dapat dilihat pada tabel 2.3 Tabel 2.3 Klasifikasi cabai Kingdom Plantae Gambar Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Magnoliopsida Subkelas Asteridae Ordo Solanales Famili Solanaceae (Sumber : Genus Capsicum tokopedia.com) Spesies Capsicum annuum L. 7 Klasifikasi bunga cendrawasih dapat dilihat pada tabel 2.4 Tabel 2.4 Klasifikasi bunga cendrawasih Kingdom Plantae Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Magnoliopsida Subkelas Zingiberidae Ordo Zingiberales Famili Zingiberaceae Genus Streilitzia Spesies Streilitzia reginae Gambar (Sumber : tokopedia.com) Klasifikasi kayu putih dapat dilihat pada tabel 2.5 Tabel 2.5 Klasifikasi kayu putih Kingdom Plantae Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Magnoliopsida Subkelas Rosidae Ordo Myrtales Famili Myrtaceae Genus Malaleuca Spesies Malaleuca leucadendra Gambar (Sumber : tokopedia.com) 8 Klasifikasi kentang dapat dilihat pada tabel 2.6 Tabel 2.6 Klasifikasi kentang Kingdom Plantae Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Magnoliopsida Subkelas Asteridae Ordo Solanales Famili Solanaceae Genus Solanum Spesies Solanum tuberosum Gambar (Sumber : segiempat.com) Klasifikasi tapak dara dapat dilihat pada tabel 2.7 Tabel 2.7 Klasifikasi tapak dara Kingdom Plantae Gambar Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Magnoliopsida Subkelas Asteridae Ordo Gentianales Famili Apocynaceae Genus Catharanthus (Sumber : Spesies Catharanthus roseus tokopedia.com) 9 Klasifikasi jarak dapat dilihat pada tabel 2.8 Tabel 2.8 Klasifikasi Jarak Kingdom Plantae Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Magnoliopsida Subkelas Rosidae Ordo Euphosbiales Famili Euphorbiaceae Genus Ricinus Spesies Ricinus communis L. Gambar (Sumber : bukalapak.com) Klasifikasi alpukat dapat dilihat pada tabel 2.9 Tabel 2.9 Klasifikasi alpukat Kingdom Plantae Gambar Superdivisi Spermatophyta Divisi Magnoliophyta Kelas Magnoliopsida Subkelas Magnoliidae Ordo Laurales Famili Lauraceae (Sumber : Genus Persea liputan6.com) Spesies Persea americana 10 BAB III METODOLOGI 3.1 Alat dan Bahan Pada percobaan Modul 01: Struktur Tumbuhan ini, untuk menunjang pelaksanan praktikum kami menggunakan alat dan bahan sebagai berikut : Tabel 3.1 Alat dan bahan pada percobaan Alat Bahan Kaca Objek (5) I2/KI (1 ml) Kaca Penutup (5) Sudan III (1 ml) Petri dish (1) Reagen Neutral Red (1 ml) Pinset (1) Reagen Jeffrey (1 ml) Jarum jara (1) Air (100 ml) Tissue (1 gulung) Rambut stamen Tradescantia spathacea (1 helai) Silet yang masih baru dan tajam (1) Bawah merah (1 buah) Mikroskop (1) Cabai merah (1 buah) Cabai hijau (1 buah) Braktea bunga cendrawasih (1 kelopak) Umbi kentang (1 buah) Daun kayu putih (1 buah) Daun tapak dara (1 buah) Biji jarak (1 buah) Alpukat (1 buah) 3.2 Langkah Kerja 3.2.1 Pengamatan sel utuh 3.2.1.1 Pengamatan Sel Tradescantia spathacea (Rhoeo discolor) 11 Satu helai rambut stamen Tradescantia spathacea diambil dari bunga yang mekar dengan menggunakan pinset. Kemudian rambut stamen tersebut diletakkan di atas kaca objek yang telah diberi setetes air terlebih dahulu. Lalu kaca objek ditutup dengan kaca penutup. Spesimen kemudian diamati dibawah mikroskop 3.2.1.2 Pengamatan Jaringan Epidermis Bawang (Allium cepa L.) Satu buah bawang merah dikupas, lalu dipotong menjadi beberapa bagian. Kemudian dilepaskan masing-masing cadangan makanannya dan diambil jaringan epidermisnya. Jaringan epidermis bawang diletakkan di atas kaca objek yang telah diberi setetes air. Kaca objek kemudian ditutup dengan kaca penutup. Lalu jaringan epidermis bawang diamati dibawah mikroskop. 3.2.2 Pengamatan Plastida 3.2.2.1 Pengamatan Jenis Plastida pada Daging Buah Capsicum annuum L. (Cabai Hijau) Cabai hijau disayat menggunakan silet dengan tipe sayatan melintang. Kemudian sayatan diletakkan diatas kaca objek yang telah ditetesi dengan air. Kaca objek kemudian ditutup, lalu diamati dibawah mikroskop. 3.2.2.2 Pengamatan Jenis Plastida pada Capsicum annuum (Cabai Merah) dan Braktea Streilitzia reginae (Cendrawasih) Daging buah cabai merah braktea bunga cendrawasih disayat menggunakan silet dengan tipe sayatan melintang, kemudian masing-masing hasil sayatan diletakkan di atas kaca objek yang telah ditetesi dengan air. Masing-masing kaca objek kemudian ditutup dengan kaca penutup, lalu diamati dibawah mikroskop. 3.2.2.3 Pengamatan Jenis Plastida pada Umbi Solanum tuberasum (Kentang) Umbi kentang disayat menggunakan silet, kemudian hasil sayatan diletakkan di atas kaca objek yang telah ditetesi dengan air. Kaca objek ditutup dengan kaca penutup lalu diamati di bawah mikroskop. Setelah itu, tanpa membuka kaca penutup, sayatan umbi kentang ditetesi dengan reagen lugol (I2/KI) dan kemudian setelah didiamkan selama 2-3 menit diamati kembali di bawah mikroskop. Hasil pengamatan dibandingkan antara sebelum dan sesudah penetesan reagen. 12 3.2.3 Pengamatan Oleosom 3.2.3.1 Pengamatan Oleosom pada Biji Ricinus communis (Jarak) Diambil bagian yang berwarna putih pada biji jarak, kemudian di letakkan diatas kaca objek yang telah ditetesi air. Kaca objek ditutup dengan kaca penutup lalu diamati dibawah mikroskop. Setelah itu, tanpa membuka kaca penutup, biji jarak ditetesi dengan reagen sudan III dan kemudian setelah didiamkan 2-3 menit diamati kembali di bawah mikroskop. Hasil pengamatan dibandingkan antara sebelum dan sesudah penetesan reagen. 3.2.3.2 Pengamatan Oleosom pada Buah Persea americana (Alpukat) Buah alpukat disayat menggunakan silet, kemudian diletakkan di atas kaca objek yang telah ditetesi air. Kaca objek ditutup dengan kaca penutup lalu diamati dibawah mikroskop. Setelah itu, tanpa membuka kaca penutup, sayatan buah alpukat ditetesi dengan reagen sudan III dan kemudian setelah didiamkan 2-3 menit diamati kembali di bawah mikroskop. Hasil pengamatan dibandingkan antara sebelum dan sesudah penetesan reagen. 3.2.4 Deteksi Alkaloid dan Terpenoid 3.2.4.1 Deteksi Alkaloid dan Terpenoid pada Daun Catharanthus roseus (Tapak Dara) Daun tapak dara disayat dengan tipe sayatan melintang menggunakan silet. Dibuat dua sayatan dan masing-masing sayatan diletakkan di atas kaca objek yang telah ditetesi air. Kaca objek ditutup dengan kaca penutup kemudian masing-masing sayatan diamati dibawah mikroskop. Setelah itu, tanpa membuka kaca penutup, salah satu sayatan ditetesi dengan reagen Neutral Red, dan sayatan yang lain ditetesi dengan reagen Jeffrey. Kemudian setelah didiamkan selama 2-3 menit, masing-masing sayatan diamati kembali dibawah mikroskop. Hasil pengamatan dibandingkan antara sebelum dan sesudah penetesan reagen. 3.2.4.2 Deteksi Alkaloid dan Terpenoid pada Daun Melaleuca leucadendra (Kayu Putih) Daun kayu putih disayat dengan tipe sayatan melintang menggunakan silet. Dibuat dua sayatan dan masing-masing sayatan diletakkan di atas kaca objek yang telah ditetesi air. Kaca objek ditutup dengan kaca penutup kemudian masing-masing sayatan diamati dibawah mikroskop. Setelah itu, tanpa membuka kaca penutup, salah satu sayatan ditetesi dengan reagen Neutral Red, dan sayatan yang lain ditetesi dengan reagen Jeffrey. 13 Kemudian setelah didiamkan selama 2-3 menit, masing-masing sayatan diamati kembali dibawah mikroskop. Hasil pengamatan dibandingkan antara sebelum dan sesudah penetesan reagen. 14 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Pengamatan Struktur Sel pada Stamen Tradescantia spathacea (Rhoeo discolor) Dari hasil pengamatan yang kami lakukan pada sel rambut stamen Tradescantia sp. (Rhoeo discolor) menggunakan mikroskop, bagian-bagian sel yang terdapat pada Tradescantia sp. (Rhoeo discolor) dapat dilihat pada gambar 4.1. Gambar 4.1 Hasil pengamatan sel stamen Tradescantia sp. Bunga Rhoeo discolor diambil sel rambut stamennya kemudian di buat preparat dengan reagen air dan diamati pada mikroskop. Pada gambar 4.1 dapat dilihat bahwa sel rambut stamen Rhoeo discolor terdapat inti sel yang berada ditengah, vakuola, dinding sel dan sitoplasma. Sel rambut stamen berbentuk lonjong dan memanjang. Antara satu sel dengan sel lain saling terhubung dan di dalamnya ada aliran sitoplasma (Beck, 2010). Aliran sitoplasma adalah aliran yang terdapat pada sel tumbuhan yang masih melakukan proses metabolisme. Aliran sitoplasma ada 2 yaitu aliran sirkulasi dan aliran rotasi. Pada sel rambut stamen Rhoeo discolor aliran sitoplasmanya merupakan aliran sirkulasi yaitu aliran sitoplasma yang akan menggerakkan plastida melewati vakuola ke segala arah. Aliran sirkulasi biasanya terdapat pada sel tumbuhan yang masih muda (Taiz dan Zeiger, 2010). Pada percobaan yang dilakukan oleh Veit Schubert et al. (2014), didapatkan hasil pengamatan yang didapatkan peneliti pada sel tersebut terdapat inti sel, dinding sel, vakuola, dan 15 sitoplasma. Peneliti mengamati adanya pergerakan aliran sitoplasma keseluruh arah (aliran sirkulasi). Hal tersebut sesuai dengan hasil pengamatan yang kami dapatkan. 4.2 Pengamatan Jaringan Epidermis Allium cepa L. (Bawang Merah) Dari hasil pengamatan melalui mikroskop pada jaringan epitel dari Allium cepa L. memiliki bagian-bagian sel yang dapat dilihat pada gambar 4.3. Sitoplasma Nukleus Dinding Sel Gambar 4.2 Hasil pengamatan jaringan epitel Allium cepa L.. Jaringan epitel bawang merah diambil menggunakan pinset dengan reagen air. Pada gambar 4.2 dapat dilihat bahwa epitel dari Allium cepa L. memiliki bagian-bagian sel seperti dinding sel, sitoplasma, dan nukleus serta terdapat bulatan-bulatan kecil berwarna hitam yaitu sklerenkim. Hal ini didukung oleh Robinson (2018), Allium cepa memiliki bagian bagian sel yaitu sitoplasma, nukleus dan dinding sel yang memberikan struktur kepada jaringan epitel dari bawang merah tersebut. 4.3 Pengamatan Jenis Plastida pada Capsicum annuum (Cabai Merah) Dari hasil pengamatan yang kami lakukan pada daging buah cabai hijau menggunakan mikroskop dengan perbesaran total 400x, bagian sel dapat dilihat pada gambar 4.3. 16 Kloroplas Gambar 4.3 Hasil pengamatan Capsicum annuum Daging buah cabai hijau disayat dengan tipe sayatan melintang dengan reagen air. Pada gambar 4.3 dapat dilihat bahwa daging buah cabai hijau terdapat plastida yang berisi bulatan kecil berwarna hijau yang merupakan klorofil (zat hijau daun). Plastida tersebut merupakan kloroplas. Kloroplas berfungsi sebagai tempat untuk fotosintesis (Taiz dan Zeiger, 2002). Pada percobaan yang dilakukan oleh Elzbieta Weryszko-Chmielewska dan Zenia Michalojc, peneliti asal Polandia, didapatkan hasil seperti pada gambar 4.4. Kloroplas Gambar 4.4 Pengamatan literatur Capsicum annuum (Sumber: Weryszko-Chmeilewska dan Michalojc, 2011) Hasil pengamatan yang didapatkan peneliti, kloroplas pada daging buah cabai hijau dapat terlihat pada sel parenkimnya. Hal tersebut sesuai dengan hasil pengamatan yang kami dapatkan. 4.4 Pengamatan Jenis Plastida pada Capsicum annuum L. (Cabai Hijau) 17 Dari hasil pengamatan yang kami lakukan pada daging buah cabai merah menggunakan mikroskop dengan perbesaran total 400x, bagian sel dapat dilihat pada gambar 4.5. Kromoplas Gambar 4.5 Hasil pengamatan Capsicum annuum Daging buah cabai merah disayat dengan tipe sayatan melintang dengan reagen air. Pada gambar 4.5 dapat dilihat bahwa daging buah cabai merah memiliki plastida berisi pigmen karotenoid yang berwarna merah. Plastida tersebut merupakan kromoplas. Kromoplas merupakan jenis plastid yang memiliki kandungan karotenoid yang lebih tinggi dari klorofil (Taiz dan Zeiger, 2002). Hasil pengamatan yang didapatkan Weryszko-Chmeilewska dan Michalojc (2011), kromoplas yang berisi berbagai warna pigmen pada daging buah cabai merah dapat terlihat pada sel epidermis cabai. Munculnya kromoplas juga menunjukkan tanda penuaan pada cabai. 4.5 Pengamatan Jenis Plastida pada braktea Streilitzia reginae (Cendrawasih) Dari percobaan yang telah dilakukan terhadap braktea bunga Strelitzia reginae (cendrawasih) dengan reagen air diperoleh hasil pengamatan sebagai berikut : 18 Kromoplas Leukoplas Gambar 4.6 Hasil pengamatan braktea bunga Strelitzia reginae Pengamatan jenis plastida pada braktea bunga ini dilakukan dengan pengambilan sampel berupa sayatan melintang. Pada gambar 4.6 dari hasil praktikum diperoleh hasil pengamatan plastida tak berwarna (leukoplas) di bagian tengah braktea sedangkan plastida berwarna (kromoplas) kuning pucat hingga oranye pada bagian lainnya. Hal ini terjadi karena pada bunga ini terdapat lima evolusi plastida, yaitu leukoplas, kloroplas, kromoplas kuning pucat, kromoplas kuning tua, dan kromoplas oranye (Simpson et al., 1975). Warna kuning hingga oranye pada kromoplas tersebut dihasilkan oleh paling sedikit 19 karotenoid (Tappi and Menziani, 1955). 4.6 Pengamatan Jenis Plastida pada Solanum tuberosum (Kentang) Dari percobaan yang telah dilakukan terhadap umbi kentang Solanum tuberosum (kentang) dengan reagen air diperoleh hasil pengamatan sebagai berikut : 19 Leukoplas Gambar 4.7 Hasil pengamatan umbi Solanum tuberosum Pengamatan jenis plastida pada umbi Solanum tuberosum (kentang) dilakukan dengan pengambilan sampel berupa sayatan melintang. Pada gambar 4.7 terdapat plastida tak berwarna (leukoplas). Sampel tersebut selanjutnya dilakukan uji kandungan amilum dengan menggunakan reagen Lugol. Berikut hasil pengamatan sampel terhadap reagen Lugol. Leukoplas tereaksi dengan lugol Gambar 4.8 Hasil pengamatan umbi Solanum tuberosum dengan reagen Lugol Pada gambar 4.8 diperoleh plastida berwarna ungu atau biru kehitaman pada transisi antara plastida yang tereaksi dengan lugol dengan yang tidak tereaksi. Warna ungu atau biru kehitaman 20 pada plastida ini menunjukkan bahwa plastida tak berwarna pada gambar 4.7 mengandung amilum yang merupakan amiloplas. Warna biru kehitaman terbentuk karena ion triodida (I3- ) berikatan kompleks dengan amilum.(Madhu et al., 2016). Berikut hasil pengamatan uji amilum pada umbi Solanum tuberosum (kentang) berdasarkan literatur (Peterson et al., 2008). Hasil pengamatan yang diperoleh pada percobaan ini sudah sesuai dengan literatur karena Peterson et al. menyatakan bahwa sel-sel pada umbi akar kentang mengandung butiran besar amilum sederhana yang berwarna ungu jika diuji dengan reagen I2KI (Peterson et al., 2008). 4.7 Pengamatan Lipida pada Biji Ricinus communis (Jarak) Dari percobaan yang telah dilakukan terhadap biji Ricinus communis (jarak) dengan reagen air diperoleh hasil pengamatan sebagai berikut : Leukoplas Gambar 4.9 Hasil pengamatan biji Ricinus communis Pengamatan lipida pada biji Ricinus communis (jarak) dilakukan dengan pengambilan sampel berupa isi biji jarak berwarna putih dan digunakan mikroskop binokuler. Pada gambar 4.9 terdapat plastida tak berwarna (leukoplas). Untuk menentukan jenis leukoplas yang terdapat pada sampel ini dapat digunakan berbagai reagen. Sampel tersebut selanjutnya dilakukan uji kandungan lipida dengan menggunakan reagen Sudan III. Berikut hasil pengamatan sampel terhadap reagen Sudan III. 21 Lipida Gambar 4.10 Hasil pengamatan biji Ricinus communis dengan reagen Sudan III Pada gambar 4.10 diperoleh noda-noda kuning pada sampel. Reagen Sudan III umumnya digunakan untuk mendeteksi keberadaan lipid (Horobin, 2002). Dalam hal ini sampel mengandung lipida karena warna kuning dihasilkan oleh reagen Sudan III yang terlarut dalam lemak (Sen, 2015). Oleh karena itu, leukoplas yang terdapat pada sampel adalah elaioplas. Hasil pengamatan yang diperoleh pada percobaan ini sudah sesuai dengan literatur karena Yuldasheva et al. (2002) menyatakan bahwa biji Ricinus communis mengandung lipid. 4.8 Pengamatan Lipida pada Buah Persea Americana (Alpukat) Dari percobaan yang telah dilakukan terhadap daging buah Persea Americana (alpukat) dengan reagen air diperoleh hasil pengamatan sebagai berikut : Leukoplas 22 Gambar 4.11 Hasil pengamatan Persea americana Pengamatan lipida pada buah Persea americana (alpukat) dilakukan dengan pengambilan sampel berupa sayatan daging buah dan digunakan mikroskop binokuler. Pada gambar 4.11 terdapat plastida tak berwarna (leukoplas). Sampel tersebut selanjutnya dilakukan uji kandungan lipida dengan menggunakan reagen Sudan III. Berikut hasil pengamatan sampel terhadap reagen Sudan III : Lipida Gambar 4.12 Hasil pengamatan Persea americana dengan reagen Sudan III Pada gambar 4.12 diperoleh plastida-plastida yang berwarna kuning pada sampel yang menunjukkan bahwa terdapat lipida pada plastida tersebut. Hasil pengamatan yang diperoleh pada percobaan ini sudah sesuai dengan literatur karena Peterson et al. (2008) menyatakan bahwa hasil uji lipida dengan uji Sudan (III atau IV) pada Persea Americana (alpukat) akan menghasilkan warna uji jingga-merah (Peterson et al., 2008). 4.9 Pengamatan Keberadaan Terpenoid pada Daun Melaleuca leucadendra (Kayu Putih) Menggunakan Reagen Neutral Red Dalam menentukan keberadaan senyawa terpenoid pada daun kayu putih dapat dilakukan pengujian menggunakan metode histokimia. Pada percobaan yang kami lakukan, kami menggunakan reagen Neutral Red untuk menguji keberadaan senyawa terpenoid pada daun Melaleuca leucadendra (kayu putih). Kemampuan reagen Neutral Red sebagai indikator pH 23 mengakibatkan perubahan warna pada sayatan yang diamati. Jika sayatan berada dalam keadaan asam, maka akan menghasilkan warna merah dan jika sayatan berada dalam keadaan basa maka akan meghasilkan warna kuning. Terpenoid merupakan senyawa sintesis yang berasal dari asam asetat. (Encyclopedia Britannica, 2019). Sehingga terpenoid akan bereaksi dengan reagen Neutral Red menghasilkan warna merah. Tabel 4.1 Hasil pengamatan kandungan terpenoid daun M.leucadendra Nama Tanaman Reagen air Lapisan Jaringan epidermis Reagen Jeffrey Hasil Lapisan Jaringan epidermis palisade Positif mengandung senyawa terpenoid palisade Melaleuca pada bagian leucadendra epidermis dan (kayu putih) jaringan palisade. Gambar 4.13 Hasil Gambar 4.14 Hasil pengamatan daun pengamatan daun M.leucadendra M.leucadendra dengan reagen Neutral Red Perubahan warna sayatan daun Melaleuca leucadendra dapat dilihat pada tabel 4.1. Pada gambar 4.13 dan gambar 4.14 terlihat perubahan warna daun kayu putih dari warna hijau menjadi merah. Daun kayu putih yang diamati menggunakan reagen air terlihat berwarna hijau karena pada umumnya daun memiliki plastid berpigmen hijau yang disebut klorofil. Sedangkan daun kayu putih yang diamati menggunakan reagen Neutral Red terlihat berwarna merah karena hal tersebut menunjukkan bahwa daun kayu putih mengandung senyawa terpenoid. 24 Berdasarkan studi literatur yang telah dilakukan Meisarani, et al. (2016) dan Hefiansyah, et al. (2012) disebutkan bahwa daun Melaleuca leucadendra (kayu putih) yang tersebar di Indonesia mengandung banyak senyawa turunan tepenoid, seperti α- pinene (1,23%); sineol (32,15%); α-terpineol (8,87%); kariofilen (2,86%); α- kariofilen (2,31%); Ledol (2,17%); dan Elemol (3,11%). 4.10 Menentukan Keberadaan Alkaloid pada Daun Melaleuca leucadendra (Kayu Putih) Menggunakan Reagen Jeffrey Pada percobaan selanjutnya, dilakukan uji kandungan alkaloid pada daun Melaleuca leucadendra menggunakan metode histokimia dengan reagen Jeffrey yang akan merubah warna sayatan yang mengandung alkaloid menjadi kuning kecoklatan. (Prayoga et al, 2014) Gambar 4.15 Reaksi senyawa alkaloid dengan reagen Jeffrey (Sumber: Donna, 2015) Reaksi antara senyawa alkaloid yang terkandung dalam tapak dara dengan reaksi reagen Jeffrey yang digunakan terlihat pada gambar 4.15, sehingga dapat menimbulkan warna kuning kecoklatan pada sayatan yang diamati dibawah lensa mikroskop. 25 Tabel 4.2 Hasil pengamatan kandungan alkaloid daun M.leucadendra Nama Tanaman Reagen air Jaringan Reagen Jeffrey Lapisan Kandungan epidermis alkaloid Palisade Hasil Positif mengandung Melaleuca senyawa alkaloid leucadendra hampir diseluruh (kayu putih) bagian daun. Gambar 4.16 Hasil Gambar 4.17 Hasil pengamatan daun pengamatan daun M.leucadendra M.leucadendra dengan reagen Jeffrey. Pada tabel 4.2 menunjukkan terjadinya perubahan warna pada daun kayu putih yang mulanya berwarna hijau ketika diamati menggunakan reagen air, gambar 4.16, berubah warna menjadi warna kuning kecoklatan ketika diamati menggunakan reagen Jeffrey, gambar 4.17. Hal ini menunjukkan bahwa daun Melaleuca leucadendra (kayu putih) positif mengandung senyawa alkaloid. Namun sayangnya, sayatan yang kami buat tidak cukup tipis sehingga mengakibatkan gambar yang terlihat pada lensa mikroskop pun tidak begitu jelas dan sulit diidentifikasi bagian manakah senyawa alkaloid terakumulasi pada daun Melaleuca leucadendra (kayu putih). 4.11 Menentukan Keberadaan Terpenoid pada Daun Catharanthus roseus (Tapak Dara) Menggunakan Reagen Neutral Red Dalam pengujian kerberadaan senyawa terpenoid pada daun Catharantus roseus (tapak dara) juga digunakan metode histokimia dengan reagen Neutral Red. 26 Tabel 4.3 Hasil pengamatan kandungan terpenoid daun C.roseus Nama Tanaman Reagen air Reagen Neutral Reagen Neutral Red Red dari literatur Hasil Lapisan Epidermis Positif Mesofil daun Lapisan Catharantu s roseus mengandung Epidermis Mesofil daun Lapisan Mesofil Epidermis daun (Tapak Gambar 4.18 Gambar 4.20 Dara) Hasil Pengamatan literatur pengamatan C.roseus. Gambar 4.19 Hasil pengamatan C.roseus. dengan reagen Neutral Red. C.roseus. dengan reagen Neutral Red. senyawa terpenoid dibagian epidermis dan sebagian jaringan (Sumber: Donna, bunga karang 2015) Madhani (2016) dalam penelitiannya menyatakan bahwa hasil uji fitokimia ekstrak methanol daun Catharantus roseus mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, fenolik, tanin, dan terpenoid, sedangkan fraksi n-heksan mengandung tanin, fraksi etil asetat mengandung alkaloid, flavonoid, fenolik dan tanin, serta fraksi n-butanol mengandung alkaloid, flavonoid, fenolik, tanin dan terpenoid. Pada tabel 4.3 menunjukkan perbandingan hasil pengamatan yang telah kami lakukan dengan hasil pengamatan yang telah dilakukan sebelumnya. Gambar 4.18 dan gambar 4.19 menunjukkan terjadinya perubahan warna sayatan daun tapak dara yang kami amati menggunakan reagen air dan reagen neutral red. Penggunaan reagen neutral red mengakibatkan terjadinya perubahan warna menjadi warna merah atau warna yang lebih gelap di bagian daun yang mengandung senyawa terpenoid sebagai akibat dari reaksi neutral red, bereaksi dengan senyawa terpenoid yang bersifat asam. (Astuti et al., 2017, EBI, 2018, Encyclopedia Britannica, 2019) 27 Pada gambar 4.20 warna merah terlihat dibagain tepi daun yang merupakan bagian epidermis dan warna yang lebih gelap pada bagian dalam yang diperkirakan merupakan jaringan bunga karang. Pada percobaan yang telah dilakukan oleh Donna (2015) juga menunjukkan hasil yang serupa, bahwa sayatan melintang daun Catharantus roseus yang diamati menggunakan reagen Neutral Red menghasilkan warna merah pada bagian tepi sayatan daun. Kedua hal ini menunjukkan bahwa daun Catharantus roseus (tapak dara) menghasilkan senyawa alkaloid sebagai metabolit sekundernya yang sebagian terakumulasi di bagian epidermis daun. 4.12 Menentukan Keberadaan Alkaloid pada Daun Catharanthus roseus (Tapak Dara) Menggunakan Reagen Jeffrey Pada pengujian daun Catharantus roseus berikutnya, dilakukan untuk menentukan keberadaan senyawa alkaloid pada daun Catharantus roseus menggunakan metode histokimia dengan reagen Jeffrey. Dilansir dari website BPOM RI (2015), tanaman tapak dara mengandung senyawa kimia aktif vinkristin. Vinkristin merupakan senyawa yang termasuk kedalam vinca alkaloids, yaitu senyawa alkaloid yang biasa digunakan sebagai obat kanker. Selain vinkristin, yang termasuk kedalam vinca alkaloid adalah vinblastin, vinorelbin, dan vindesin. Keempat senyawa tersebut secara alami dapat diekstrak dari tanaman Catharanthus roseus (Suvvari, 2016) Data hasil pengamatan yang telah kami lakukan dan perbandingannya dengan percobaan yang terlebih dahulu dilakukan tersaji dalam tabel 4.4. Gambar 4.21 merupakan gambar penampang melintang daun tapak dara yang diamati menggunakan reagen air. Sedangkan gambar 4.22 merupakan gambar penampang melintang daun tapak dara yang diamati menggunakan reagen Jeffrey. Pada percobaan yang kami lakukan menunjukkan perubahan warna kuning kecoklatan ketika diamati menggunakan reagen Jeffrey, seperti terlihat pada gambar 4.22. Pada pengamatan yang telah dilakukan oleh Fauzan et al. (2014), yaitu pada gambar 4.23, pun menunjukkan hasil yang serupa bahwa sayatan melintang daun Catharantus roseus dengan reagen Jeffrey mengakibatkan warna kuning kecoklatan hampir di seluruh bagian daun. 28 Tabel 4.4 Hasil pengamatan kandungan alkaloid daun C.roseus Nama Tanaman Reagen air Reagen Jeffrey Mesofil Kandungan daun alkaloid Reagen Jeffrey literature Kandungan alkaloid Epidermis mengandung alkaloid, roseus (Tapak Dara) Positif senyawa Lapisan Catharantus Hasil Gambar 4.23 hampir Gambar 4.21 Hasil Gambar 4.22 Hasil Pengamatan diseluruh pengamatan pengamatan literature bagian daun. C.roseus C.roseus dengan C.roseus dengan dan reagen Jeffrey. reagen Jeffrey terakumulasi (Sumber : pada bagian Fauzan et al., mesofil daun. 2014) Warna kuning kecoklatan yang muncul merupakan akibat dari reaksi alkaloid dengan reagen Jeffrey seperti yang tertera pada gambar 4.22 (Donna, 2015). Menurut Brossi (1990) reaksi ini bisa terjadi pada bagaian ovula, epidermis, pembuluh angkut, kambium gabus, gabus, buah dan biji, serta mesofil daun. 29 BAB V PENUTUP 5.1 Kesimpulan Berdasarkan pengamatan dan praktikum yang kami lakukan, kami dapat menyimpulkan bahwa: 1. Dari hasil pengamatan mikroskop, rambut stamen Tradescantia sp. (Rhoeo discolor) memiliki organel-organel seperti inti sel, dinding sel, vakuola, dan sitoplasma yang memiliki jenis aliran sirkulasi. 2. Dari hasil pengamatan mikroskop, bagian-bagian sel penyusun pada jaringan epidermis Allium cepa L. adalah sitoplasma, nukleus,vakuola, dan dinding sel. 3. Dari hasil pengamatan mikroskop, jenis plastida daging buah Capsicum annuum L. (cabai hijau) berupa kloroplas. 4. Dari hasil pengamatan mikroskop, jenis plastida daging buah Capsicum annuum (cabai merah) berupa kromoplas. 5. Dari hasil pengamatan mikroskop, jenis plastida braktea bunga Streilitzia reginae (bunga cendrawasih) berupa kromoplas 6. Dari hasil pengamatan mikroskop dengan menggunakan reagen I2KI, jenis plastida umbi Solanum tuberosum berupa amiloplas. 7. Dari hasil pengamatan mikroskop dengan menggunakan reagen Sudan III, pada biji Ricinus communis (biji jarak) terdapat lipida. 8. Dari hasil pengamatan mikroskop dengan menggunakan reagen Sudan III, buah Persea americana (alpukat) terdapat lipida. 9. Dari hasil pengamatan mikroskop dengan menggunakan reagen Neutral Red, daun Melaleuca leucadendra (kayu putih) terdapat terpenoid. 10. Dari hasil pengamatan mikroskop dengan menggunakan reagen Jeffrey, daun Melaleuca leucadendra (kayu putih) terdapat alkaloid. 11. Dari hasil pengamatan mikroskop dengan menggunakan reagen Neutral Red, daun Catharanthus roseus (tapak dara) terdapat terpenoid. 12. Dari hasil pengamatan mikroskop dengan menggunakan reagen Jeffrey, daun Catharanthus roseus (tapak dara) terdapat alkaloid. 30 5.2 Saran Untuk mengefisienkan pengerjaan pengamatan praktikum ini, kami sarankan untuk praktikum yang akan datang : 1. Sebaiknya praktikan mempelajari cara menyayat sampel sebelumnya. 2. Sebaiknya praktikan lebih teliti dalam menyayat sampel. 3. Sebaiknya seluruh praktikan lebih memahami penggunaan mikroskop dan fungsi dari bagian-bagiannya. 31 DAFTAR PUSTAKA Arianti, E. (2014).Mikroskop Sederhana Dari Botol Plastik sebagai Alat Pembelajaran pada Pengamatan Sel. EduBioTropika. 2(2): 244-250 Astuti, M. D., Sriwinarti, T., Mustikasari, K. (2017). Isolation and Identification of Terpenoid compound from n-hexana extract of Permot Plant Bracts (Passifora floetida L.). Sains dan Terapan Kimia. 11(2). 80 – 89 Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia. (2015). Tapak dara Catharanthus roseus (L.) Don. Diambil dari http://mesotsmkos.pom.go.id/news/tapak-dara-catharanthus-roseusl-don. Diakses pada 25 Januari 2019 pukul 20.25 WIB Beck, C. B. (2010). An Introduction to Plant Structure and Development, Plant Anatomy for The Twenty-First Century Second Edition. Cambridge: Cambridge University Press. Brossi, A. (1990). The Alkaloid. San Diego: Academic Press Campbell, N. A., Jane B. R., Lisa A. U., Michael L.C., Steven A. W., Peter V. M., Robert, B. J. (2008).Biologi (Edisi ke-8). Jakarta: Erlangga Dhaniaputri, R. (2015). Mata Kuliah Struktur dan Fisiologi Tumbuhan sebagai Pengantar Pemahaman Proses Metabolisme Senyawa Fitokimia. Prosiding Seminar Nasional Pendidikan Biologi, FKIP Donna, R. (2015). Analisis Kualitatif Metabolit Sekunder &Struktur Penghasil Pada Tumbuhan. Bandung: Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati, ITB. Encyclopedia Britannica. (2019). Terpene Chemical Compound. Diambil dari https://www.britannica.com/science/terpene. Diakses pada 24 Januari 2019 pukul 22.03 WIB European Bioinformatics Institute. (2018). CHEBI:86370 - neutral red. Diambil dari https://www.ebi.ac.uk/chebi/chebiOntology.do?chebiId=CHEBI:86370. Diakses pada 24 Januari 2019 pukul 21.51 WIB Fauzan, M., Andri I., Soraya, N. G., Amalia, A., Islamiah, P. W. N. (2014). Analisis Kualitatif Metabolit Sekunder, Struktur Penghasil, Dan Kayu Pada Tanaman. Bandung: Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati, ITB. Diambil dari https://edoc.site/modul-1-5-pdf-free.html. Diakses pada 25 Januari 2019 pukul 22.23 WIB 32 Hafiz,P., Dorly, S. R. (2013). Karakteristik Anatomi Daun dari Sepuluh SpesiesHoya Sukulen Serta Analisis Hubungan Kekerabatannya. Buletin Kebun Raya, 16(1): 58-73 Handayani, S. (2017). Histochemical and chemical analysis of hypocotile Bruguiera gymnorhiza (L) Lamk during the mature phase. Jurnal Teknologi Pangan, 10(2). Helfiansyah. (2013). Isolasi, identifikasi dan pemurnian senyawa 1,8 sineol minyak kayu putih (Malaleuca leucadendron). ASEAN journal of System Engineering, 1(1). 19-24 https://jurnal.ugm.ac.id/ajse/article/view/2350/2113 Horobin, R. W. (2002). Dis-, tris- and polyazo dyes. Conn’s Biological Stains. Handbook of dyes, stains and fluorochromes for use in biology and medicine. Oxford: BIOS Scientific Publishers. p. 125-144. Lamar-Jones, M. (2002). Connective tissue and stains. Theory and practice of histological techniques, 5th edn. Churchill Livingstone, Edinburgh, 158-161. Lavis, L. D. (2011). Histochemistry: Live and in Color. Journal of Histochemistry & Cytochemistry 59(2) 139–145. Diambil dari https://journals.sagepub.com/. Diakses pada 24 Januari 2019 pukul 17.56 Lenny, S. (2006). Senyawa terpenoida dan steroida. Senyawa Terpenoida dan Steroida. Madhani, I. V. (2016) Identifikasi Metabolit Sekunder Dan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Bunga Tapak Dara (Catharanthus Roseus). Diambil dari https://prosiding.farmasi.unmul.ac.id/. Diakses pada 26 Januari 2019 pukul 07.34 WIB Madhu, S., Evans, H. A., Doan-Nguyen, V. V. T., Labram, J. G., Wu, G., Chabinyc, M. L., Seshadri, R., Wudl, F., (2016). Infinite Polyiodide Chains in the Pyrroloperylene-Iodine Complex: Insights into the Starch-Iodine and Perylene-Iodine Complexes. Angewandte Chemie International Edition. 55 (28): 8032–8035. Marlinda, M., Mesike S. S., Andy D. W. (2012). Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dan Uji Toksisitas Ekstraksi Etanol Biji Buah Alpukat. Jurnal FMIPA Unsrat. 1(1): 24-28. Meisarani. (2016). Kandungan senyawa kimia dan bioaktivitas Melaleuca leucadendron Linn. Suplemen. 14(2).123-144. Diambil dari http://jurnal.unpad.ac.id/farmaka/article/view/10818/5159. Diakses pada tanggal 25 Januari 2019 pukul 8.36 WIB 33 Peterson R. L., Peterson, C. A., Melville, L. H. (2008). Teaching Plant Anatomy Through Creative Laboratory Exercises. NRC Research Press. Prayoga, I., Esyanti, R., Rahmawati, A. (2014). Analysis of Secondary Metabolite Production in Somatic Embryo of Pasak Bumi (Eurycoma longifoliaJack.). Procedia Chemistry. 13. 112118. Diambil dari https://www.sciencedirect.com/. Diakses pada 24 Januari 2019 pukul 16.20 WIB Robinson, P. (2018). The Cell Structure of an Onion. Diambil dari https://sciencing.com/cellstructure-onion-5438440.html. Diakses pada 27 Januari 2019 pukul 22.11 WIB Saifudin, A. (2014). Senyawa alam metabolit sekunder: Teori, konsep, dan teknik pemurnian. Deepublish. Schubert, V., Rudnik, R., Schubert, I. (2014). Chromatin associations in Arabidopsis interphase nuclei. Frontiers in genetics, 5, 389. Sen, D. J., Rutvi, P., Clive, D., Kinsuk, S. (2015). Sudan Dyes As Lipid Soluble Aryl-Azo Naphthols For Microbial Staining. Journal Of Pharmaceutical And Medical Research, (2)3: 417-425. Simbala, H. E. (2009). Analisis senyawa alkaloid beberapa jenis tumbuhan obat sebagai bahan aktif fitofarmaka. Pacific Journal, 1(4), 489-494. Simpson, D. J., Baqar, M. R., Lee, T. H. (1975). Ultrastructure and carotenoid composition of chromoplasts of the sepals of Strelitzia reginae Aiton during floral development. Ann. Bot. (Lond.) 39:175–183 Suvvari, A. S. (2016). Pharmacological Activity of Vinca Alkaloids. Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry. 4(3). 27-34. Diambil dari http://www.rroij.com/open- access/pharmacological-activity-of-vinca-alkaloids-.pdf. Diakses pada 25 Januari 2019 pukul 20.34 WIB. Taiz, L., Zieger, E. (2010). Plant Physiology. 5th ed. Massachusetts : Sinauer Associates, Inc. Taiz, L., Zeiger, E. (2002). Plant Physiology (third edition). Sunderland : Sinauer Assiciates, Inc. 34 Tappi, G., Menziani, E. (1955) Sui carotenoidi di Strelitzia reginae. Gazz. Chim. Ital.85:720– 724 Tellu, A. T. (2005). Kunci Identifikasi Rotan (Calamussp.) Asal Sulawesi Tengah Berdasarkan Struktur Anatomi Batang. BIODIVERSITAS, 6(2):113-117 Thomson, F. C., Vallon, V., Blantz, R. C. (2004). Lugolsdney Function in Early Diabetes: the Tubular Hypothesis of Glomerular Filtration. Am J Physiol Renal Physiol. 286: F8–F15. Weryszko-Chmeilewska, E., Michalojc, Z. (2011). Anatomical Traits Of Sweet Pepper (Capsicum annuum L.) Fruit. Acta Agrobotanica, 64(4), 181-188. Winckler, J. (1974). Vital staining of lysosomes and other cell organelles of the rat with neutral red (author's transl). Progress in histochemistry and cytochemistry, 6(3), 1. Yuldasheva, N. K., Ul'chenko, N. T., Glushenkova, A. I. (2002). Lipids of Ricinus communis Seeds. Chemistry of Natural Compounds - CHEM NAT COMPD. 38. 413415. Zuhud, R., Siswoyo, S. (2001). Rancangan Strategi Konservasi Tumbuhan Obat Indonesia. Kerjasama Pusat Pengendalian Kerusakan Keanekaragaman Hayati BAPEDAL dengan Fakultas Kehutanan IPB. Jakarta. 35 LAMPIRAN 36 Lampiran A Data Mentah Gambar A.1 Hasil pengamatan sel stamen Tradescantia sp. Gambar A.2 Hasil pengamatan jaringan epitel Allium cepa L. Gambar A.3 Hasil pengamatan Capsicum annuum L. Gambar A.4 Pengamatan literatur Capsicum annuum L. 37 (Sumber: Weryszko-Chmeilewska dan Michalojc, 2011) Gambar A.5 Hasil pengamatan Capsicum annuum Gambar A.6 Hasil pengamatan braktea bunga Strelitzia reginae Gambar A.7 Hasil pengamatan umbi Solanum tuberosum Gambar A.8 Hasil pengamatan umbi Solanum tuberosum dengan reagen Lugol 38 Gambar A.9 Hasil pengamatan biji Ricinus communis Gambar A.10 Hasil pengamatan biji Ricinus communis dengan reagen Sudan III Gambar A.11 Hasil pengamatan Persea americana Gambar A.12 Hasil pengamatan Persea americana dengan reagen Sudan III 39 Gambar A.13 Hasil pengamatan daun Melaleuca l. Gambar A.14 Hasil pengamatan daun Melaleuca l. dengan reagen Neutral Red Gambar A.15 Reaksi senyawa alkaloid dengan reagen Jeffrey (Sumber: Donna, 2015). Gambar A.16 Hasil pengamatan daun Melaleuca l. 40 Gambar A.17 Hasil pengamatan daun Melaleuca l. dengan reagen Jeffrey Gambar A.18 Hasil pengamatan Catharanthus r. Gambar A.19 Hasil pengamatan Catharanthus r. dengan reagen Neutral Red Gambar A.20 Pengamatan literatur Catharanthus r.dengan reagen Neutral Red (Sumber: Donna, 2015) 41 Gambar A.21 Hasil pengamatan Catharanthus r. Gambar A.22 Hasil pengamatan Catharanthus r. dengan reagen Jeffrey Gambar A.23 Pengamatan literatur Catharanthus r. dengan reagen Jeffrey (Sumber : Fauzan et al., 2014) 42