Boudica's final battle: the archaeology of the Boudican Revolt

ESTUDO RADIOISOTÓPICO DA ANEMIA INFECCIOSA EQUINA. II. MASSA ERITROCITÁRIA E VOLUME SANGUINEO DE CAVALOS PURO SANGUE INGLËS DETERMINADOS PELO 51CROMO' CARMELINDO MALISKA SINOPSE.- Foi determinada a massa eritrocitária circulante e. o volume sangüineo em 16 cavalos puro sangue inglês, sendo li normais e 5 com anemia infecciosa eqüina, naturalmente adquirida, empregando-se eritrêcitos marcados com 51Cr. Os animais normais apresentaram massa eritrocitária de 40,64 ml e volume sangüíneo de 102,32 ml por kg de peso, e os portadores de anemia infecciosa eqüina, massa eritrocitária e volume sangüíneo de 21,13 e 107,71 mI/kg de peso. A diferença entre as médias das massas eritrocitárias dos dois grupos é estatisticamente significativa. A massa eritrocitária apresentou correlação significativa com o peso corpnral (r - 0,89), nos animais sãos. INTRODUÇÃO MATERIAL E Mfrronos Desde a publicação da técnica• de marcação dos eritrócitos pelo 'Cr e de sua utilização para determinar a massa eritrocitária circulante por Gray e Sterling (1950a, b) e Sterling e Gray (1950), esse• método vem sendo empregado na determinação da massa eritrocitária e da volemia, não obstante trabalhos recentes terem revelado que outros radioisótopos podem marcar eritrócitos eficientemente (Fischer et ai. 1967). Os glóbulos vermelhos do sangue são marcados pelo N a2mnCr O isa vitro. O ion cromato atravessa a membrana eritrocitária, é reduzido à sua forma trivalente e une-se à fração globmnica da molécula de hemoglobina de forma suficientemente irreversível. As determinações do volume sangüíneo de cavalos, a partir da massa eritrocitária determinada pelo OCr, não ultrapassam de 20, segundo darIas de que dispomos (Madilese et ai. 1984). Barry et ai. (1970) realizaram esse estudo em cães, Wade e Sasser (1970) na ovelha, Fowler et ai. (1984) em ursa bovino com policitemia vera, e Huser et ai. (1967) em macacos. Vários autores calcularam o volume sangilíneo a partir do volume plasmático. e do hematócrito venoso, em diversas espécies (Courtice 1943, Reinolds 1953, Cronin 1954, Howes et ai. 1963; Simpson et ai. 1970). Essa maneira de calcular o volume sangüíneo pelo corante T1824 (azul de Evans) ou albumina marcada com considerando o hematócrito venoso como sendo igual ao hematócrito corporal, pode levar a erros apreciáveis. O presente trabalho visou a determinar a massa critrocitária e o volume sangüíneo em cavalos com anemia infecciosa eqiiina (AIE), tal como é. encontrada em nosso meio, e compará-los aos valores normais, bem como verificar a correlação entre a massa eritrocitária e o peso corporal nos animais sãos. O estudo foi realizado em 11 cavalos puro sangue inglês (PSI) normais e em 5 com anemia infecciosa eqüina 4 . O método de marcação foi descrito previament .e (Maliska 1973). Empregamos o Na!1CrO, em solução isotônica e livre de pirogênio 5, com atividade especifica de 253 mCi/mg Cr. Os glóbulos foram marcados, em frascos esterilizados (de 75 ml), na proporção de 40 rol de sangue para 10 ml de ACD 5. Foi empregada a dose de 2 cCi por kg de peso. Após a marcação dos glóbulos foram adicionados 100 mg de vitamina C , para reduzir o NaCrO não incorporado aos glóbulos vermelhos, evitando-se assim a marcação de eritrócitos circulantes em proporção capaz de determinar erro no cálculo da massa eritrocitária (Mundschenk & Fischer 1982). Foram separados 10 ml de sangue marcado para servir de amostra padrão (AP), reinjetando-se no animal 40 ml. A amostra AP foi lavada por três vezes com solução salina (centrifugando-se durante 5 minutos a 2.000 rpm e pipetando-se o sobrenadante), para eliminar o `Cr não unido aos eritrócitos, e hemolisada com saponina. Vinte minutos após a injeção dos glóbulos marcados, uma amostra de 5 ml de sangue foi retirada da jugular oposta à da injeção, lavada com solução sauna e hemolisada. Segundo Hahn et aI. (1941) e Smith et ai. (1958), o equilíbrio entre eritrócitos marcados e não marcados se da de 10 a 20 mm, após a injeção e segundo lluggmns et ai. (1966), aos 10 mm., em cães espienectomizados, e aos 30 mm., em cães intactos. Foram colhidas amostras aos 10, 20 e 30 mm. em quatro cavalos e verificou-se que as atividades das amostras de 20 e das de 30 mm. eram perfeitamente comparáveis, sendo as das amostras de 10 mm. um pouco maiores. Passou-se então a considerar somente as amostras retiradas aos 20 mm. Aceito para publicaçãoem 23 mal. 1973. Realizado no Laboratório de Radioisótopos da Escola de Medicina o Cirurgia da Federação das Escolas e Faculdades Isoladas do Estado da Guanabaca e no Hospital Octavio Dupont do Jockey Club Brasileiro, com auxilio do Conselbo Nacional de Pesquisas (CNPq). 2 Pesquisador Assistente do CNI'q (3011171). Endereço: Caixa Postal 3043, ZC-00, Rio de Janeiro, GB. Essa denominação, já consagrada, evita contusão colo outros valores hematológicos, como valor globular, etc. 1 O diagnóstico da AIE foi baseado em exanea clínicos, loboratoriai, de soro-precipitação em gelose e anátomo-potológico (Maliska 1973). Sodisim Chroinate CR 101, Farbweilre Hoechst AG, Frankfurt ACD Solotion modified, E.R. Squibb & Sons, Inc., N. ersey. r Redoxon injetável, Roche. Pesq. agrupem. FT,TI., Sér. Vct., 8:95-98. 95 IS)72 96 CARMELINDO MALISKA A atividade das amostras AP e a retirada aos 20 mm. (A,,) foi contada em cintilador de poço, de cristal de NaI (Ti) e escalimetro com eletronica associada' A massa eritrocitria foi calculada pela fórmula Foi empregado o fator de correço Fe: 0,92, do hematócrito venoso (Marcilese et ai. 1964), para o calculo do volume sanguineo total : Volume sanguineo - massa eritrocitária = / aAP inaoa entrõcitária hernatón, venoso X Fse RESULTADOS em que aAP é a atividade específica da amostra dos glóbulos vermelbos injetados, em contagens por minuto A massa eritrocitária dos .16 cavalos PSI estudados está (cpm), aA,, é a atividade específica da amostra reti-- demonstrada no Quadro 1. A diferença entre as médias da massa eritrocitaria dos dois grupos e estatisticamente rada aos 20 mi n., e v o volume da amostra injetada, significativa (P <0,01), em face da aplicaçân do teste t ' E1sdnt Haifa, Israel. de Student. . . Quanao 1. Massa eritrocltdrfa dos 16 cavalos PSI estudados Massa, erittotára Animal ii.' Idade . (aOoo) Seao . Peso (kg) . . Jjeinatócrjto . (%) Volume ,. Relatlo niassafpe,o,. (ml/kg) . Ca,lo, PSI aormos 01 M 3 3,0 38 13 013 37 IS 02 M ,, 450 47 18 792 41 715 04 M 4 420 43 16.788 39,05 C3 M 4 500 44 21 136 42,27 06 1' 3. 370 47 14.937 40,37 2 .340 42 13.1528 4 300 41 II 732 39,11 4. 480 45 20.912 - 43,56 40 17,859 40,11 6 420 .49 .17,384. 41,39 1' 5 405 413 16 294 4023 - 4 407 44 113 181 4064 09 10 M 11 M 12 Itt 13 14 Mdi Deevio padrso . 1 27 8273 303 2. 560 . 1,55 Cae&og PSI som ansm6j infecciosa e,9ina 15 itt 5 300 23 7,103 23,89 16 1! 2 210 19 3.812 , 1815 17 M õ 350 25 8348 2383 18 F 3 - 260 22. 6.207 23,88 19 III 5 280 19 4,448 1580 4 280 21,6 5.998 21,13 1.876 3.83 itUdia . Desvio padrAo Peoq. eigropec. bros., Sr. Vet., 8:95-98, 1,41 197 40,135 . 2,61. ESTUDO RADIOTSOTÔFICO DA ANEMIA INFECCIOSA EQÜINA. lI. 97 Nos animais hígidos foi constatada correlação significativa (r = 0,89) entre a massa eritrocitária e o peso corporal (Fig. 1). A massa eritrocitária e o volume sangüineo por kg de peso, nos animais sãos e nos portadores de AIE, estão demonstrados no Quadro 2. QoAIno 2. Valores hematológcos dos 16 cavalo& PSI estudados o - DeterminaçOes Cavaks normais (média ± desvio pads5o) •- a Cavalos voos ATE (médjs ± desvio padeTio) -I .5 a 'a 1- Idade (anos) Peso corporal (lçg) Hrmatócritp veuoso (%) Massa critrocitária (mljkg) Volume plAmé tiro (ml/k) Volume saisgüíneo (rssljkg) 4 ±•. 1,27 407 ± 82,73 44 ± 3,03 •. 40,64 ± 1,55 61,7 ± 5,79 107,3 ± 552 4 280 21,6 21,13 80,1 107,7 ± ± ± ± ± ± 1,41 40,65 2,61 3, 0,97 0.20 o o a a a .5 DISCUSSÃO Nossos resultados estão .satisfatoriamente de acordo com os. obtidos por julian et ai. (1938) em 6 cavalos de corrida, pelo método do P, e com os calculados por Marcilese eI ai. 11104), em 31 1-'SI, pelo "Fe e `Cr, sendo 18 as determinações realizadas com .- eritrócitos marcados com 51 Cr (Quadro 3). QuAImo 3. Autor PESO cORPORAL iSg) Fiç, 1, Diagrama de dia perseo dos calares da massa eritrocifclria e do peso corporal das animais higidor. Massa eritrocitríria e votuose. sangümneo da cavalo, deerosinados -com radioisóto pos (segundo dados da literatura) Método Mas. erit, Julian (1950) 32p 47,1 28,5 Obara (1901) T-1824 10,0 50,8 3 ICr 18,2 22,3 61,4 2 65,5 3 39,8 25,3 18,2 102,1 77,5 61,4 (ml/kg) 50 Fe 'Marciiese (1064) 5 tCr e 59 Fe • De todas as espécies animais estudadas, o cavalo PSI apresenta o maior volume sangüíneo por unidade de peso corporal (Gray & Sterling 1050h, Ceorgi & IIertL zendorf 1984, Huggins et ai. 1968, Huser ei ai. 1967, Simpson ei ai. 1970, Schalm 1981), Somente o cão galgo apresentou valores comparáveis aos do cavalo de cor-• rida (Courtice 1943), porém, essa determinação foi baseada no volume plasmático (pelo T-1824), em que o hematócrito venoso foi considerado como representativo da relação plasma/massa eritrocitária circulante. Sendo o hematócrito venoso maior que o hematócrito corporal (Gibson et ai. 1946, Chaplin et ai. 1953, Comar 1955), o volume sangü (neo, calculado a partir do volume piasinático dividido por 100 menos o hematócrito venoso, apresenta erros apreciáveis. Por outro lado, Courtice não levou em consideração -o plasma retido na coluna de células do hematócrito ("trapped plasma"). E ainda Wade e Sasser (1970) verificaram, em ovelhas, que o volume • plasmático não apresenta correlação significativa com o peso corporal, Por esses motivos, não con- - Vol. saug. (m1/k) N.' cia animais 100,6 71,7 O PSL 5 Perelceron 10 Oav&os mestiços - 31 P01 O cav. de sela 14 oay. traç5o s ideraluos comparáveis os presentes resultados com os calculados. por Courtice em quatro galgos, em que a massa eritrocitária foi de 60 ml/kg, e o volume sangüineo, de 114 ml/kg. Diferenças hematológicas existentes entre cavalos descendentes do árabe e cavalos de outras origens foram descritas por vários autores (Macleod & Ponder 1946, Marcilcse ei ai. 1964). Em 1961, Obara e Nakajima determinaram a massa eritrocitária, pelo 'Cr, em dois cavalos mestiços, obtendo valores que correspondem. a 50% dos determinados em cavalos P51 no presente trabalho e por outros autores (Quadros 2 e 3). Diferenças liematológicas desse tipo foram observadas, em bovinos, por Howes et ai. (1983), em que a massa eritrocitária e o volume sangUíneo do zebu foram de 25 e 57m1/kg, e a massa eritrocitária e o volume sangüíneo do Hereford, de 20 e 49 ml/kg de peso. Nos animais com AIE, os resultados revelaram estado de anemia, em que o volume sangUíneo total é perfeiPesq. agropec. bras,, Sér. Ver., 895-98.- 1373 08 CARMELINDO MAUSKA tamente comparável aos valores normais, registrados no presente estudo (Quadro 2) e aos publicados anteriormente (julian et ai. 1956 e Marcilese et ai. 1964). Face à correlação significativa (r = 0,89) entre a massa eritrocitria e o peso carporal nos animais sãos, consideramos que a determinação do volume sangUíneo do cavalo PSI a partir da massa eritroçitária determinada com eritrócitos marcados pelo 'Cr,'empregando-se o fator de correção para o hematócrito venoso, constitui o método mais prático e que apresenta resultados mais precisos depois dos obtidas pela determinação simultânea da massa eritrocitária e do volume plasmático. ACRADECIMENTOS Agradecemos ao Prof. Paulo Dacorso Filho, que nas orientou, encorajou a empreender essa pesquisa e nos apoiou durante a realizeçlo da mesma. Ao Prof. AntÔsia Fernando Goriçalves da Rocha, ,,or nos ter nossibilitado e apoiado as realizaç5o desse trabalho no laboratório que dirige. Ao Dr. Homem Assis Brasil e ao treinador Carlos Morgado, que nos puseram à dieposiçlo cavalos sob sua responsabilidade. - REFE1tfNCIAS Barry, R.C., Heras, L.V. & Grieco, L.P. 1970. Determinacion de maia eritrocitica y volemia en caninos utilizando cromo radioactivo. Valores norinales. Analect Vet. 3:13-18. Chaplin Jr., FL, Hoilison, P.L. & Vettel, H. 1953. The badyj venous hematocrit ratio: Its constancy over a wide hematocrit range. J. clin. Invest. 32:1309-1319. Comar. C.L. 1955. Radiuisotopes in hiolugy and agriculture. McGraw-Hill New York, p. 11-12. Courtire, F.C. 1943. The b]ood volume ai normal animais. I. Physiol., Lond., 102:290-305. Cronin, M.T.I. 1954. The determination of plasma volume and estirnation ef blood volume in the horse, Vet. Rec. 66: 197-200. Fischer, 5., Wulf, R. & Leais, A. 1067. Technetiusn-OOm as a labei for erythrocytes. 5. Nuol. Mcd. 8:229. Fowler, M.E., Corneliu, C.E. & Baker, N.F. 1064. Clissical and erythrokinetic atudies on a case ci bovine polyeythemia vera. Cornell Vet. 54:153-160. Georgi, J.R. & Iiertzendorf, T.T. 1064. Sinsultaneon.s erythrocyte and plasma volume measurements iii sheep using Iron-59. Comei Vet. 54:510-516. Cibson, J,C. 2nd., Penonek, W.C., Seligman, A.M. & Sack, T. 1946. Cirulatin red ccli volume measured simultaneously by radioactive iran and dye niethods. 5.' clin. Invest. 25:838-847. Go»', S.J. & Sterling, K. 1950a. 'lhe tagging of mml 'reis and plasma proteins- with radioactiva dsromium. I. cliii. Invest. • 29:1804-1613. . . Gray, S.' J. & Sterling, E. 1050h. Determinetion • irculating red ccli volume by radioactive chiomium. Scienee 112:179-180. Hahn, P.F., Balfusir, W.M., Ross, J.F., Bala, W.F. & Whipple, G .11. 1941. RecL cell volume circsilatissg and total as determined by racho troo. Science 93:87-88. Howes, J.R., }lentges 'Jr., J.F. & Feaster, J.P. 1963. Blood volume of brahaman and herelord cattle as mensured by. . seruns albsimiii. I. Anim, Sci. 22:183-187. Ilugguns, R. A., Smitls, E. L. & Deavers, S. 1068. Cr-taggea red cehl equiiibration in dogs. Am. I. Physiol. 211:283-287. Huser, H.J., Rieber, E.E. & Berman, A.R. 1967.. Experimental evidence of exceas hemoiysis in the course ol ehronic iron defieiency anemia. J. Lab. ciin. Med. 69:405.414. Julian, L.M., Lawrence, 5H,, Beriin, N.I. & Ilyde, . CM. 1956. Blood volume, body wter and body fat aI tha bona. I. anpl. Fhysiol. 8:051-653. Macleod, I. &. Ponder, E. 1948. An observation on the red ceil content blood of tbe thoroughbred liome. Science 103:73., Maliska, C. 1973. Estudo radioisotópico da anemia infecciosa eqtiina. 1. DuraçSo dos eritrócitoa marcados com wCromo em cavalos puro sangue ing1s. Pesq.. agropec. bras., Sér. Veh, 8: 91-94. ., .... .. , Mancilese, N. A., Valsecehi, R. M., Figueiras, li. D., Camberos, li. R. & Varei, 5. E.' 1004.. Normal blood 'volumes -iii the horse. Aos. 5, Fhysiol. 207:223-227. ,, :. ' ' . Mundschenk, II. & Fischer, J. 1962. Zur Reaktionskinetik der. Mamkierong normislen nienschlicher Erythrocyten niit Ça01CrO und 51 Cr Cio. l'flügers Arch. ges. Physiol. 275:46-63. Obara J. & Nnkajima, H. 1961. Life span of Cr 55-labe1ed ery throcytes ia equine infectuous anemia. Jap. I. vet. Sei. 23: 207-210. .... Reynolds, M. 1953. P1sma nnd lilooci volume in lhe cow using T-1824 hematocril methúd. Aro, J. Physiol, .173:421-427. Schalm, 0W, 1981. Veterinary- Iiematohogy. Les & Febiger, Philadelphia, p, 18-20. Simpson, J.G., Gilmartin, W.G. & Ridgway, S.H. 1970. Blood volume and other hematologia values lo young elephnt senis (Mirosznga ar.gustirostrfs). Am. J. vet. Rei. 31:1449-1452. Smith, E.L., Huggins, R.A., Xraisstz, L., Seiberi, R.A. & Deavera, S. 1956. Determinatiun of ccli volume in niassive - transfusions using Fe55 and Cr51. J. Physiol. 186:07-100. Sterling, E. & Cray,' S.J. 1960.. Detennination of circtilating red ccli volume in man by radioactive hromiwn. I. cliii. Invest. 29:1614-1619. Wade Jr., L. & Saiser L.B. 1970. Body water, plasma volume and erythroeyte volume in sheep. Aos. 5. vet. Res. 31: - ' 1376-1387. AissnsAcT.- Maliska, C. [Radioisoto pia .studies ort equine unfeaticus encosta. II, Red ccii mass and Uood volume ai. Thoroughbred horses determined with uchromium,]. Estudo. radioisotópico da anemia infecciosa eqüina. II. Massa eritrocitária e volume sangüíneo de cavalos puro sangue inglês determinados pela 51 Crorno. - Pesquisa Agropecudrta lIra-. .sileira, Série Veterinária (1073) 8, .95-98 EPt, eni Caixa Postal -3043, ZC-00, Rio de, Janeiro, Brazil. ' -, . . . - . - • .. ' - .. - ' Reci ceIl mass and blood volume of 16 Thoroughbred horses, 11 healthy, and 5 with. naturaily acquirecl Equine lnfectious Anemia, were determined. by means - of SlCr-tagged erythrocytes. The mean values obtained in healthy Thoroughbred horses were as foliows: ; red cell mass 40,64 and blood volume 102,32 nil/kg body weight. .The mean red cdl mass and blood volume in anemia ho-rses were respectively 21,13 and 107,71. nil/kg body weight. The dífference in the red ceil mass values between 'the two groups was statistically significant (P < 0,01), There was significant correlation between erythrocyte mass and body. weight (r = 0,89) in healthy horses. Peaq. agropec. bois., Sér. Vet., 8:95-98. 1973