JLK 2 (1) (2018)

JURNAL LABORATORIUM
KHATULISTIWA
e-ISSN : 2597-9531
p-ISSN : 2597-9523
PERBEDAAN PRESISI PEMIPETAN SAMPEL MENGGUNAKAN PIPET SAHLI DAN
MIKROPIPET PADA PEMERIKSAAN HEMOGLOBIN METODE
CYANMETHEMOGLOBIN
Hidayatussalihin, Etiek Nurhayati, Edy Suwandi
Jurusan Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes Pontianak
E-mail : uwee1995@gmail.com
Submitted : 5 Agustus 2018; Revised : 8 September 2018; Accepted : 9 Oktober 2018
Published : 30 November 2018

Abstract
International Commite for Standarization in Hematology (ICSH) recommends hemoglobin examination using Cyan-
methemoglobin method. Examination of Hb Cyanmethemoglobin using sahli pipette in sampling. The Sampling method
flow through the hose. The use of glass pipets do not have high accuracy and precission for less than volumes 1 ml, so in
small fluid displacement less than 1000 (microliter) using micropipet or commonly known as automatic pipette. The aim
of this research was to know the precision value between sampling using the sahli pipette and mikropipet on examina-
tion of hemoglobin value of Cyanmethemoglobin method accepted or not on standard Clinical Laboratoty Improvement
Amendments (CLIA) and to analyze the difference of precision between sampling using pipette sahli and micropipette on
examination of hemoglobin Cyanmethemoglobin method. The design of this study was descriptive anlytic. This research
using EDTA blood examination with the number of 36 test samples. Preliminary period expression used 60 test samples.
The hemoglobin examination using Cyanmethemoglobin method by spectrophotometry. Based on the results of the re-
search, the value of % CV of sahli’s pipet is 4.60% and the value % CV of micropipet is 2.02%. and the value %CV The
maximum recommended by the CLIA can be received from the sahli and mikropipet pipette that is <7%. he data obtained
were statistically analyze by using Willcoxon Test and the result P 0.000 <0.05. The conclution of this research was found
a significant difference between Sahli pipette and micropipette.
Keywords : Precission, Sahli Pipette, Micropipette, Hemoglobin

International Commette for Standarization in Hematology (ICSH) merekomendasikan pemeriksaan hemoglobin den-
gan menggunakan metode Cyanmethemoglobin. Pemeriksaan Hb Cyanmethemoglobin menggunakan pipet sahli dalam
pengambilan sampel. Pengambilan sampel dengan cara dihisap melalui selang. Penggunaan pipet gelas tidak mempu-
nyai akurasi dan presisi yang tinggi untuk volume kurang dari 1 ml, sehingga pemindahan cairan dengan volume kecil
kurang dari 1000 (microliter) orang cenderung menggunakan mikropipet atau biasa juga dikenal dengan pipet otomatis.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui nilai presisi antara pemipetan sampel menggunakan pipet sahli dan mikropi-
pet pada pemeriksaan kadar hemoglobin metode Cyanmethemoglobin diterima atau tidak pada standar Standar Clinical
Laboratoty Improvement Amendments (CLIA) dan menganalisis perbedaan presisi antara pemipetan sampel mengguna-
kan pipet sahli dengan pemipetan sampel menggunakan mikropipet pada pemeriksaan kadar hemoglobin metode Cyan-
methemoglobin. Desain penelitian ini adalah deskriptif analitik. Penelitian ini menggunakan bahan pemeriksaan berupa
darah EDTA dengan jumlah 36 sampel uji. Ditahapan periode pendahuluan digunakan sebanyak 60 sampel uji. Metode
pemeriksaan hemoglobin menggunakan metode Cyanmethemoglobin secara fotometri. Berdasarkan hasil penelitian
yang dilakukan diperoleh nilai %CV pipet sahli sebesar 4,60% dan nilai %CV mikropipet sebesar 2,02%. Nilai %CV-
maksismum yang di rekomendasikan oleh CLIA dapat diterima dari pipet sahli dan mikropipet yaitu <7%. Data yang
diperoleh diolah secara statistik menggunakan uji Willcoxon didapatkan hasil P 0.000<0.05. Sehingga dapat disimpulkan
ada perbedaan signifikan antara pipet sahli dan mikropipet.
Kata Kunci : Presisi, Pipet Sahli, Mikropipet, Hemoglobin

21
 Hidayatussalihin, dkk, Perbedaan Presisi Pemipetan Sampel Menggunakan Pipet Sahli dan Mikropipet .....

PENDAHULUAN standard dari beberapa metode tersebut yang digu-

nakan untuk pemeriksaan kadar hemoglobin adalah
Semakin pesatnya kemajuan teknologi serta metode Cyanmethemoglobine (Hidayat & Sunarti,
pengetahuan masyarakat yang semakin meningkat 2015). International Commette for Standarization
tentang kesehatan akan mendorong tuntutan masyar- in Hematology (ICSH) merekomendasian pemerik-
akat terhadap mutu pelayanan di laboratorium. Mutu saan hemoglobin dengan menggunakan metode Cy-
pelayanan berdasarkan penelitian hasil pelayanan anmethemoglobin (Heryanti, Octaviana, & Sumirah,
laboratorium secara keseluruhan dan salah satu titik 2013).
penting terletak pada mutu pemeriksaan (A, 2000). Metode Cyanmethemoglobin dianjurkan karena
Jaminan mutu pemeriksaan laboratorium diper- larutan standarnya yang stabil, mudah diperoleh dan
lukan untuk menegakkan diagnosa yang tepat. Ter- hampir semua hemoglobin terukur kecuali sulf he-
dapat dua hal penting yang menjadi perhatian dalam moglobin (Sacher, R & McPherson, R, 2004). Pada
jaminan mutu hasil pemeriksaan laboratorium yaitu metode Cyanmethemoglobin sampel yang digunakn
akurasi dan presisi (Dhyanaputri, I. S., Agustini, & sebesar 20 ul maka dari itu ketelitian untuk pemipe-
Puryana, 2013). Akurasi menunjukkan kedekatan taan dengan volume yang kecil sangat penting.
nilai hasil pengukuran dengan nilai sebenarnya, se- Pemeriksaan Hb Cyanmethemoglobin meng-
dangkan presisi merupakan ketelitian atau derajat gunakan pipet sahli dalam pengambilan sampel.
seberapa jauh pengulangan analisis memberikan data Pengambilan sampel dengan cara dihisap melalui se-
yang sama. (Karkalousos & Evangelopoulos, 2011). lang (World Health Organization, 2003). Penggunaan
Secara singkat akurasi dapat diartikan ketepatan dan pipet gelas dan pipet gondok tidak mempunyai akur-
presisi dapat diartikan ketelitian atau reapetability asi yang tinggi untuk volume kurang dari 1 ml, seh-
(pengulangan). ingga pada pemindahan cairan dengan volume kecil
Presisi atau Reapetability adalah derajat kon- kurang dari 1000 (microliter) orang cenderung meng-
sensus antara pengukuran berturut-turut yang telah gunakan mikropipet atau biasa juga dikenal dengan
dilakukan pada sampel yang sama dengan kondisi pipet otomatis (Anonym (1), 2016).
yang sangat mirip, alat yang sama, pengguna yang Pipet otomatis ini memiliki akurasi dan presisi
sama, laboratorium yang sama, metode yang sama yang lebih baik dibanding dengan pipet gelas. Dis-
dan banyak reagen yang sama dalam waktu yang san- amping itu dapat diatur berapapun volumenya dalam
gat singkat misalnya dalam jangka waktu sehari per- range volume pipet tersebut. (Anonym (2), 2016).
cobaan (Karkalousos & Evangelopoulos, 2011). Pipet jenis ini juga tersedia dalam berbagai kapasi-
Banyak jenis pemeriksaan laboratorium yang tas volume, mulai dari 5 µl sampai 1000 µl (World
dilakukan untuk pemeriksaan penyaring terhadap Health Organization, 2003).
kelainan dalam tubuh manusia. Kelainan dapat beras-
al dari penyakit darah atau penyakit yang mengenai METODE PENELITIAN
bagian lain dari tubuh (W & Herniah, 2001). Pemerik-
saan hemoglobin merupakan salah satu pemeriksaan Penelitian ini menggunakan Desain Deskriptif
darah rutin yang paling sering dilakukan oleh setiap Analitik dengan menggunakan bahan pemeriksaan
laboratorium (Norsiah, 2015). berupa darah EDTA dengan 6 kali pengulangan.
Hemoglobin merupkan komponen yang ber- Metode pemeriksaan yang digunakan yaitu Cyan-
fungsi sebagai alat transportasi oksigen (O2) dan kar- methemoglobin. Pemeriksaan hemoglobin meng-
bon dioksida (CO2). Hb tersusun dari globin (empat gunakan pipet sahli dilakukan dengan cara dipipet
rantai protein yang terdiri dari dua unit alfa dan dua 5ml larutan pengencer Drabkin dan 0,02ml darah
unit beta) dan heme (mengandung atom besi dan por- vena atau kapiler. Sebelum dipipet darah vena atau
phyrin: suatu pigmen merah). Pigmen besi hemoglo- kapiler botol berisi darah dengan antikoagulan di-
bin bergabung dengan oksigen. Hemoglobin yang bolak-balikkan berulang kali selama kurang lebih 1
mengangkut oksigen darah (dalam arteri) berwarna menit. Kemudian dimasukkan darah kedalam larutan
merah terang sedangkan hemoglobin yang kehilangan pengencer Drabkin dan bilas pipet dengan menghis-
oksigen (dalam vena) berwarna merah tua. Satu gram ap larutan dan menyemprotkannya kembali sebanyak
hemoglobin mengangkut 1,34 mL oksigen. Kapasitas tiga kali. Larutan dikocok hingga homogen dan did-
angkut ini berhubungan dengan kadar Hb bukan jum- iamkan selama 5 menit. Dengan larutan pengencer
lah sel darah merah (Kementrian Kesehatan Republik Drabkin, diposisikan jarum penunjuk spektrofotom-
Indonesia, 2011). eter pada angka nol. kemudian dimasukkan larutan
Banyak metode yang digunakan untuk pemerik- darah pasien yang sudah diencerkan ke dalam tabung
saan kadar hemoglobin, diantaranya metode Tallquist, reaksi atau kuvet spektrofotometer dan ukur absorb-
Sahli, Cuppersulfat dan Cyanmethemoglobine. Gold ansinya (World Health Organization, 2003).

22
 JLK 2 (1) (2018) hlm. 21 - 25

Pemeriksaan hemoglobin menggunakan nakan pipet sahli sebesar 13.9167g/ul dan 0.64006
mikropipet dilakukan dengan pipet volum, dimasuk- sedangkan nili rata-rata dan SD mikropipet sebesar
kan 5 ml larutan pengencer Drabkin ke dalam tabung. 14.2894 dan 0.2894. Tingkat ketelitianan atau pre-
Dengan mikropipet dipipet sampel sebanyak 0,02 sisi dinyatakan dalam (%CV) didapatkan pemipetan
ml lalu dicampurkan ke larutan Drabkin di dalam sampel menggunakan pipet sahli sebesar 4,60% dan
Tabung. Pemipetan dengan mikropipet digunakan Mikropipet 2,02%. Setelah dilakukan pemeriksaan di
dengan menggunakan metode Reverse. Kemudian periode pendahuluan dan pengujian pemipetan bahan
dikocok larutan hingga homogen dan didiamkan se- pemeriksaan mengunakan pipet sahli dan mikropipet
lama 5 menit. Dengan larutan pengencer Drabkin, maka tahapan selanjutnya melakukan plotting.
diposisikan jarum penunjuk spektrofotometer pada
angka nol. Masukkan larutan darah pasien yang su-
dah diencerkan ke dalam tabung reaksi atau kuvet
spektrofotometer, ukur absorbansinya (World Health
Organization, 2003).

HASIL DAN PEMBAHASAN

Penelitian ini menggunakan pipet sahli dan

mikropipet masing-masing satu buah dimana tips dari
mikropipet selalu di ganti saat penggunaannya dima-
na dalam penelitian ini menggunakan 30 responden
yang diambil darahnya kemudian dibagi menjadi Gambar 1. Grafik Lingkaran Plotting uji Presisi
dua. Tahapan periode pendahuluan dalam penelitian Berdasarkan grafik di atas menunjukkan bahwa
ini di ukur sebanyak 60 bahan pemeriksaan dengan hasil yang didapat memeiliki tingkat kedekatan hasil
masing-masing pengambilan bahan pemeriksaan atau derajat konsistensi yang baik dimana hasil tidak
menggunakan Pipet Sahli 30 bahan pemeriksaan dan ada yang keluar dari batas ±1SD.
Mikropipet 30 bahan pemeriksaan yang kemodian Uji presisi dilakukan dengan mengukur 1 bahan
diukur dengan spektrofotometer metode Cyanmethe- pemeriksaan yang sama, dalam rentang waktu yang
moglobin. Hasil pemeriksaan ini digunakan sebagai relatif sama, alat yang sama, ditempat yang sama dan
kartu kontrol dalam uji presisi pemipetan sampel dilakukan oleh orang yang sama. Dalam uji presisi
menggukana pipet sahli dan mikropipet. Kemudian dilakukan pengulangan pemeriksaan pada sampel uji
dihari terakhir dilakukan pemeriksaan kadar hemo- paling sedikit 6 kali pengulangan (Riyanto, 2014).
globin untuk hasil uji presisi yang nantinya akan di Pada penelitian ini bahan dilakukan pemeriksaan se-
plotting di peta kontrol yang didapat. cara Triplo pada setiap pengulangan.
Tabel 1. Hasil Pemeriksaan Hemoglobin Mengguna- Tabel 3. Hasil Uji Perbedaan Presisi Pemipetan
kan Pipet Sahli dan Mikropipet Metode Cyanmethe- Sampel Menggunakan Pipet Sahli Dan Mikropipet
moglobin. Mikropipet – Pipet Sahli
PENGULANGAN PIPET SAHLI (S) MICROPIPET (M)
Z -2.817b
a b c A B C
Asymp. Sig. (2-tailed) 0.000
1 13,90 13,90 13,94 14,41 13,97 13,97
Dari tabel 3 di atas dapat dinyatakan bahwa Ha
2 13,38 13,83 13,60 14,12 14,12 14,05
diterima yang berarti ada perbedaan signifikan antara
3 13,90 14,01 14,08 14,82 14,19 14,97
pipet Sahli dan mikropipet. Uji presisi pemipetan
4 16,24 14,23 13,80 14,19 14,23 14,23
sampel menggunakan pipet sahli dan mikropipet pada
5 13,49 13,27 13,27 14,71 14,38 14,01 pemeriksaan kadar hemoglobin metode Cyanmethe-
6 13,90 13,90 13,86 14,45 14,16 14,23 moglobin dilakukan setelah tahapan periode pendahu-
Tabel 2. Hasil Statistik Deskriptif Uji Presisi Pemer- luan selesai. Dari hasil pemeriksaan kadar hemoglo-
iksaan Hemoglobin menggunakan Pipet Sahli dan bin pada periode pendahuluan didapatkan hasil pipet
Mikropipet Metode Cyanmethemoglobin. sahli rata-rata 13.8517 dan nilai SD 2.31177 sedan-
N Minimum Maksimum Mean Std. CV gkan mikropipet rata-rata 14.0400 dan SD 2.31444.
Deviation (%)
Gold standard pada penelitian ini adalah pemi-
SAHLI 18 13.27 16.24 13.9167 .64006 4.60 petan sampel menggunakan pipet sahli. Dari analisis
18 13.97 14.97 14.2894 .28841 2.02 data yang dilakukan pada pemeriksaan dengan pipet
Berdasarkan tabel di atas menujukkan bahwa sahli didapatkan rata- rata sebesar 13,9167 g/ul, dan
nilai rata-rata dan SD pemipetan sampel menggu- mikropipet rata- rata sebesar 14.2894 g/ul. Tingkat

23
 Hidayatussalihin, dkk, Perbedaan Presisi Pemipetan Sampel Menggunakan Pipet Sahli dan Mikropipet .....

ketelitian atau presisi dinyatakan dalam %CV dimana ditentukan.

semakin kecil nilainya maka semakin tinggi tingkat Tingkat ketelitian atau presisi dinyatakan dalam
ketelitiannya. Berdasarkan hasil penelitian didap- impresisi %CV menunjukam nilai mikropipet lebih
atkan %CV pipet sahli sebesar 4.60% sedangkan kecil dibanding pipet sahli yang berarti tingkat ket-
Mikropipet sebesar 2.20%. Hasil tersebut menunjuk- elitian mikropipet lebih tinggi. Hal ini disebabkan
kan bahwa tingkat ketelitian Mikropipet lebih tinggi komponen yang dimiliki mikropipet telah dirancang
dibanding pipet sahli. Namun demikian kedua hasil untuk meminimalisir kesalahan dari proses pemipe-
tersebut masih dapat diterima karena masih di bawah tan. Sedangkan komponen pipet sahli yang sederhana
nilai standar %CV maksimum yang direkomendasi- memiliki faktor kesalahan sistematis yang lebih ban-
kan oleh Clinical Laboratoty Improvement Amend- yak. Nilai tersebut ditunjukkan pada hasil pemerik-
ments (CLIA) yaitu 7%. saan kadar hemoglobin menggunakan pipet sahli di-
Pemeriksaan Hemoglobin metode Cyanmethe- pengulangan keempat terdapat nilai yang lebih tinggi
moglobin menggunakan pipet sahli dalam pemipetan dari beberapa pemeriksaan sebeum dan sesudahnya.
sampel. Pemipetan dilakukan dengan cara dihisap Dari nilai tersebut juga terjadi penurunan hasil yang
melalui selang (World Health Organization, 2003). signifikan dapat pula disebabkan oleh kesalahan yang
Pada metode Cyanmethemoglobin sampel yang di- dipengaruhi oleh stabilitas listrik dan instrumenta-
gunakan sebesar 20 ul maka dari itu ketelitian untuk si yang digunakan. Kesalahan sistematis merupakan
pemipetaan dengan volume yang kecil sangat pent- kesalahan yang dapat diketahui secara pasti atau dit-
ing. Perbedaan hasil dapat dilihat dari nilai rata-rata imbulkan oleh adanya faktor tetap yang mengakibat-
kadar hemoglobin pemipetan sampel menggunakan kan hasil pengujian yang cenderung lebih rendah atau
mikropipet yang lebih tinggi dari pipet sahli. Tinggin- lebih tinggi dari yang seharusnya. Faktor yang juga
ya kadar hemoglobin dapat disebabkan oleh banyak- mempengaruhi kesalahan sistematis yaitu ketrampi-
nya volume yang dipipet dari suatu alat. Dari hasil uji lan tenaga laboratorium dalam penggunaan alat ser-
kelayakan penggunaan pipet juga menunjukkan vol- ta penggunaan bahan standar atau kontrol yang tidak
ume yang dipipet oleh mikropipet lebih banyak dari mampu telusur (A, 2000).
pipet sahli yaitu pipet sahli 0.0198 gram dan mikropi-
pet 0.0201 dengan batas toleransi 1% dimana faktor PENUTUP
konversi disuhu 270C sebesar 0.9965 untuk berat jenis
aquades. Namun demikian hasil tersebut dapat diter- Hasil pemeriksaan kadar hemoglobin dengan
ima karena tidak melebihi batas toleransi yang telah pemipetan sampel menggunakan pipet sahli memiliki
ditentukan. Suhu juga dapat berpengaruh terhadap nilai (%CV) sebesar 4,60% sedangkan hasil pemer-
alat-alat gelas yang dapat menyebabkan pemuaian. iksaan kadar hemoglobin dengan pemipetan sampel
Pontianak memiliki suhu yang tinggi mencapai 300C menggunakan mikropipet memiliki nilai (%CV)
dalam penelitian ini proses pengerjaan dilakukan da- sebesar 2,02%. Dari batas nilai (%CV) maksimun
lam ruangan dengan suhu kurang lebih 270C. yang direkomendasikan oleh Clinical Laboratoty Im-
Penggunaan pipet gelas dan pipet gondok tidak provement Amendments (CLIA) yaitu 7% maka nilai
mempunyai akurasi dan presisi yang tinggi untuk (%CV) dari pipet sahli dan mikropipet dapat diteri-
volume kurang dari 1 ml, sehingga pada pemindahan ma, tetapi dari hasil tersebut dapat ditarik kesimpulan
cairan dengan volume kecil kurang dari 1000 (micro- bahwa penggunaan mikropipet lebih presisi daripada
liter) orang cenderung menggunakan mikropipet atau pipet sahli dalam pemeriksaan hemoglobin.
biasa juga dikenal dengan pipet otomatis (Anonym
(1), 2016). DAFTAR PUSTAKA
Metode yang baik adalah yang mempunyai akur-
asi dan presisi yang baik. Untuk tujuan penanganan A, H. (2000). System Manajemen Mutu Laboratori-
penyakit dan pemantauannya, pemilihan metode um Sesuai ISO/IEC 17025: 2000 “general
dengan presisi yang baik lebih dianggap penting dari Requirent For The Competence of Testing
pada akurasi yang baik (Kementrian Kesehatan Re- And Calibration Laboratories.”
publik Indonesia, 2013). Hasil penelitian menunjuk- Anonym (1). (2016). Jenis-jenis Pipet dan Fungsinya.
kan tingkat presisi mikropipet lebih tinggi diband- Retrieved from http://www.alatlabor.com/
ing pipet sahli. Dalam arti klinis pada penelitian ini article/detail/54/pipet-pipet-ukur-pipet-
tidak ada perbedaan yang signifikan antara pemipe- tetes
tan sampel menggunakan pipet sahli dan mikropipet Anonym (2). (2016). Spesifikasi Micropipet. Re-
namun demikian dalam pemantauan hasil di quality trieved from http://www.pt-abs.com/
qontrol hasil tersebut terdapat perbedaan yang sig- product/macropipette-socorex-p335592.
nifikan meskipun keduanya masih dalam batas yang

24
 JLK 2 (1) (2018) hlm. 21 - 25

aspx
Dhyanaputri, I. S., Agustini, N. P. ., & Puryana, I. S.
(2013). Akurasi Dan Presisi Hasil Analisis
Kadar Protein Terlarut Ikan Tuna. Juru-
san Analis Kesehatan Poltekkes Kemenkes
Denpasar.
Heryanti, D., Octaviana, E., & Sumirah, M. (2013).
Perbedaan Kadar Hemoglobin Metode Sian-
methemoglobin Dengan Waktu Inkubasi 3
Menit dan 5 Menit.
Hidayat, N., & Sunarti, S. (2015). Validitas Pemer-
iksaan Kadar Hemoglobin Menggunakan
Metode Hb Meter Pada Remaja Putri di
MAN Wonosari. Kesehatan Masyarakat,
9(1).
Karkalousos, P., & Evangelopoulos, A. (2011). Quali-
ty Control in Clinical Laboratories.
Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. (2011).
Pedoman Interprestasi Data Klinik. Jakar-
ta.
Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. (2013).
Peraturan Menteri Kesehatan RI Nomor 43.
Jakarta.
Norsiah, W. (2015). Perbedaan Kadar Hemoglobin
Metode Sianmethemoglobin dengan dan
tanpa Sentrifugasi Pada Sampel Leukosito-
sis. Medical Laboratory Technology Jour-
nal, 1(2).
Riyanto. (2014). Validasi dan Verifikasi Metode Uji :
Sesuai dengan ISO/IEC17025 Laboratori-
um Pengujian dan Kalibrasi (1st ed.). Yogy-
akarta: Deepublish.
Sacher, R, A. &, & McPherson, R, A. (2004). Tin-
jauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laborato-
rium. Jakarta: Buku Kedokteran ECG.
W, A., & Herniah. (2001). Perbedaan Kadar He-
moglobin Sampel Bercak Darah Kertas
S&S903 dan Kertas Whatman-1 Dengan
Sampel Darah Langsung.
World Health Organization. (2003). Manual of Basic
Techniques for a Health Laboratory. Gene-
va.

25