Ind. J. Chem. Res.

, 2016, 3(2), 308-316

EXTRACTION AND CHARACTERIZATION OF CHITOSAN FROM WINDU

SHRIMP SHELL (Penaeus monodon) AND DEPOLYMERIZATION CHITOSAN
PROCESS WITH HYDROGEN PEROXIDE BASED ON HEATING TEMPERATURE
VARIATIONS

Ekstraksi Dan Karakterisasi Kitosan Dari Kulit Udang Windu (Penaeus monodon)
Serta Proses Depolimerisasi Kitosan Dengan Hidrogen Peroksida Berdasarkan Variasi
Suhu Pemanasan

Matheis F.J.D.P. Tanasale1,*, Ivonne Telussa1, Serly J. Sekewael1, Loberth Kakerissa1

Chemistry Department, Faculty of Mathematics and Natural Sciences

Pattimura University, Kampus Poka, Jl. Ir. M. Putuhena, Ambon 97134

*E-mail: mtanasale@fmipa.unpatti.ac.id

Received: Dec 2015 Published: Jan 2016

ABSTRACT

An extraction of chitin from shell of the tiger shrimp (Penaeus monodon), a convertion chitin into chitosan and
depolymerization chitosan into oligochitosan using hydrogen peroxide based on variations in heating
temperature have been done. Chitosan had depolymerized and it’s molecular weight had tested by end group
analysis method and it’s degree of deacetylation had tested by UV-Vis spectrophotometry method. Oligochitosan
had obtained from the conversion of chitin is isolated from the shell of tiger shrimp and from commercial chitin.
The content of chitin obtained in tiger shrimp shells was 35.90% while the result of the conversion of
commercial chitin into chitosan amounted to 62.33%. Characterization of functional groups using FTIR
spectrophotometry showed that the conversion of chitosan from chitin commercial have absorption bands of
3617.56 (OH), 3050.47 - 3127.63 (-NH stretching), 2894.24 (-CH methylene), 1679.06 (-C = O), 1564.30 (-NH
bending), and 1076.30 cm-1 (-CO-). The commercial chitosan which is characterized by FTIR
spectrophotometric method also supports the results of the conversion of chitosan from chitin commercial. In
the process of depolymerization of chitosan by hydrogen peroxide was found that the greater heating temperature
was used, the smaller the percent yield and molecular weight of oligochitosan were at 40 oC, 50 oC, 60 oC and 70
o
C gained weight average molecular oligochitosan were 1030.12 g/mol, 1019, 28 g/mol, 978.12 g/mol, and
908.82 g/mol, respectively.

Keywords: Chitosan, depolymerization, heating temperature, hydrogen peroxide, oligochitosan

PENDAHULUAN kelarutan baik dalam asam-asamorganik encer

Kitin merupakan polimer alami sedangkan kitin tidak larut dalam air dan
(biopolimer) yang terbesar setelah selulosa, kebanyakan pelarut organik tetapi larut dalam
banyak terkandung pada limbah hasil laut, asam mineral pekat seperti HCl, HNO 3, H2SO4,
khususnya golongan udang, kepiting, ketam, dan H3PO4, dan asam format anhidrat. Terkait
kerang (Muzzarelli et al., 2012). Selain itu, kitin dengan kelarutan tersebut maka kitosan menjadi
juga ada di dalam dinding sel cendawan dan lebih menarik dan mempunyai aplikasi yang
kutikula golongan serangga (Austin et al., 1981). lebih luas daripada kitin (Kumar, 2000).
Kitosan merupakan produk deasetilasi kitin Pemanfaatan kitosan masih kurang optimal
melalui reaksi kimia ataupun biokimia dengan karena panjangnya rantai kitosan yang
menggunakan enzim kitin deasetilase yang telah mengakibatkannya sulit larut dalam air. Pada hal
berhasil dimurnikan dan dikarakterisasi dari kelarutan merupakan karakteristik penting untuk
beberapa cendawan (Rukayadi, 2002). Struktur kitosan. Peningkatan kelarutan akan
kitin dan kitosan terdiri dari N-acetil glukosamin memfasilitasi kitosan untuk dapat digunakan
dan glukosamin (Gambar 1) yang terikat dengan lebih luas pada bidang pangan, pertanian,
ikatan β(1,4) glikosida. Kitosan mempunyai farmasi, maupun aplikasi teknik lainnya. Bobot
308
 Matheis F.J.D.P. Tanasale, dkk / Ind. J. Chem. Res., 2016, 3(2), 308-316

molekul tinggi mengakibatkan kelarutan kitosan menggunakan H2O2 lebih kecil karena kestabilan
rendah dalam air. Hal ini memicuh H2O2. Depolimerisasi kitosan menggunakan
dikembangkannya beberapa usaha dalam H2O2 menyebabkan pembentukan gugus-gugus
memotong ikatan kitosan menjadi oligomer yang karboksil dan mempercepat deaminasi
lebih pendek yang disebut oligokitosan. (Qin dkk., 2002). Bobot molekul yang
dihasilkan dalam proses depolimerisasi kitosan
CH2OH CH2OH sangat dipengaruhi oleh suhu, waktu dan
konsentrasi H2O2. Pada penelitian ini kitosan
O O yang diekstrak dari kulit udang windu
OH O OH O divariasikan suhu pemanasan proses
depolimerisasi kitosan menggunakan hidrogen
perokisda sehingga menghasilkan oligokitosan
NHCOCH2 NH2 dengan berbagai bobot molekul.
(a) (b)
METODOLOGI
Gambar 1. Struktur unit ulang (a) kitin dan (b) Bahan
kitosan Bahan-bahan yang digunakan dalam
penelitian ini adalah sampel limbah udang windu
Oligokitosan dapat dihasilkan dari proses (Penaeus monodon), kitin, kitosan, HCl, NaOH,
depolimerisasi kitosan secara biokimia dengan aseton, NaOCl, CH3COOH, H2O2,
menggunakan enzim (Qin et al., 2006) atau D-glukosamina hidroklorida, kalium ferrisianida,
secara kimia dengan menggunakan asam seperti natrium karbonat, kertas saring whatman No. 40,
HCl, H2SO4, dan CH3COOH (Kabal`nova et al., dan aquades.
2001; Varum et al., 1991; No et al., 2003).
Selain itu, proses depolimerisasi kitosan juga Alat
dapat menggunakan oksidator seperti O3, Peralatan dan instrumen yang akan
NaNO2, dan H2O2 (Allan & Peyron, 1995; Chang digunakan dalam penelitian ini adalah : neraca
et al., 2001; Tanioka et al., 1996; Qin et al., analitik, centrifuge, oven, spektrofotometer UV-
2002; Tian et al., 2004; Mao et al., 2004; visible, spektrofotometer FTIR, pengaduk
Srijanto et al., 2006). Bahkan pada akhir-akhir magnetik, dan peralatan-peralatan gelas.
ini telah digunakan natrium hipoklorit (NaClO)
untuk menghasilkan kitosan dengan bobot Prosedur Kerja
molekul yang lebih rendah atau oligokitosan Ekstraksi kitin dari limbah udang
(Zheng et al., 2015). Akan tetapi, hidrogen berdasarkan metode No et al. (1989).
peroksida lebih banyak digunakan karena mudah Sebanyak 200 g limbah udang windu kering
ditangani, mudah didapat, dan lebih ramah dimasukkan dalam erlenmeyer ditambahkan
lingkungan (Qin et al., 2002). Bahkan untuk NaOH 3,5% dengan perbandingan 1 : 10 (b/v)
mendapatkan oligoktosan yang lebih efektif dan dan dipanaskan dengan hotplate pada suhu 65°C
efisien, beberapa peneliti telah selama 2 jam kemudian didinginkan dan disaring
mengkombinasikan hidrogen peroksida dengan dengan kertas saring Whatman. Residu yang
menggunakan iradiasi microwave (Shao et al., dihasilkan dicuci sampai pH netral kemudian
2003), radiasi sinar gamma (Kang et al., 2007), dikeringkan di dalam oven pada 60°C selama 4
cahaya ultraviolet (Wang et al., 2005), jam. Selanjutnya residu ditambahkan HCl 1N
ultraviolet-teradiasi oksigen (Yue et al., 2009), dengan perbandingan 1 : 15 (b/v) pada suhu
dan asam heteropoli (Huang et al., 2007; Huang kamar dan dibiarkan selama 30 menit, disaring,
et al., 2008). dicuci sampai pH netral, dan dikeringkan pada
Depolimerisasi kitosan menggunakan 60°C selama 4 jam. Kemudian residu tersebut
hidrogen peroksida (H2O2) telah banyak ditambahkan dengan aseton secukupnya,
dipelajari sesuai dengan kemudahan penggunaan disaring, ditambahkan dengan NaOCl 0,315%
dan ketersediannya serta ramah lingkungan dengan perbandingan 1 : 10 (b/v) pada suhu
karena tidak meninggalkan residu yang kamar selama 30 menit, disaring, dicuci sampai
berbahaya. Laju depolimerisasi kitosan

309
 Matheis F.J.D.P. Tanasale, dkk / Ind. J. Chem. Res., 2016, 3(2), 308-316

pH netral, dan dikeringkan. Residu berupa kitin dengan ηsp adalah viskositas spesifik, c adalah
dianalisis dengan spektrofotometer FTIR. konsentrasi polimer (dalam g/100 mL), a dan k
adalah konstanta untuk pelarut polimer, M adalah
Konversi kitin menjadi kitosan berdasarkan massa molekul, serta [η] adalah viskositas
metode No dan Meyer (1997). intrinsik.
Sebanyak 30 g serbuk kitin dicampurkan dengan
300 mL larutan NaOH 50%, kemudian Penentuan bobot molekul oligokitosan dengan
dipanaskan pada 100oC selama 6 jam. metode analisis gugus ujung (Shao, et al.,
Selanjutnya campuran disaring dengan kertas 2003).
saring Whatman 40. Residu kitosan dikeringkan Pereaksi warna disiapkan dengan
dalam oven sampai bobotnya konstan. Residu melarutkan 0,5 g kalium ferrisianida dalam 1 L
kitosan dikarakterisasi dengan metode natrium karbonat 0,5 M dan disimpan dalam
spektrofotometri FTIR dan ditentukan bobot botol pereaksi berwarna coklat. Larutan standar
molekul dengan metode viskometri. Untuk D-glukosamin hidroklorida (GAH) disiapkan
membandingkan hasil deasetilasi digunakan kitin dengan melarutkan 1,00 g GAH dalam 100 mL
komersil yang memiliki kemurnian yang tinggi. akuades. Pembuatan kurva standar dilakukan
dengan mencampurkan beberapa volume
Preparasi oligokitosan dengan proses berbeda larutan standar GAH dengan 2 mL
depolimerisasi kitosan dengan H2O2. pereaksi warna dalam tabung tertutup, kemudian
Kitosan hasil deasetilasi kitin dari isolasi tepatkan volumenya menjadi 5 mL dengan
limbah kulit udang windu sebanyak 2,0 g akuades. Tabung ditutup, dipanaskan pada air
dimasukkan ke dalam erlemeyer, kemudian mendidih selama 15 menit, dan didinginkan pada
ditambahkan 50 mL H2O2 10%. Setelah itu suhu ruang. Selanjutnya diukur absorbansinya
dibiarkan selama 10 menit dan dipanaskan dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang
dengan variasi suhu pada 40 oC, 50 oC, 60 oC dan gelombang 420 nm. Untuk sampel oligokitosan
70 oC yang masing-masing selama 4 jam. Hasil dilakukan dengan menimbang sejumlah massa
reaksi kemudian didinginkan pada suhu kamar sampel oligokitosan, kemudian dilarutkan
kemudian disaring. Residu yang dihasilkan dengan akuades, ditambahkan 2 mL pereaksi
dicuci dengan aquades sampai pH netral dan warna, ditepatkan volumenya menjadi 5 mL,
dikeringkan pada suhu 60 oC. Proses ini dipanaskan pada air mendidih selama 15 menit,
dilakukan secara duplo. Hasil depolimerisasi didinginkan, dan diukur absorbansinya dengan
kitosan yang diperoleh selanjutnya diuji gugus spektrofotometer UV-Vis pada panjang
fungsinya menggunakan spektrofotometer FTIR gelombang 420 nm. Bobot molekul rata-rata
dan ditentukan bobot molekul dengan metode jumlah ( M n ) dihitung berdasarkan Persamaan
analisis gugus ujung. (3).
W1
Penentuan bobot molekul kitosan. Mn  x215,5 ….. (3)
Dilarutkan 0,1 g kitosan hasil isolasi dalam W2
100 mL HCl 0,01 M dan selanjutnya dibuat dengan W1 adalah bobot oligoglukosamina (g)
larutan viskositas masing-masing 0,1%; 0,2%; dan W2 adalah jumlah GAH yang setara dengan
0,3%; 0,4%; dan 0,5%. Setelah itu ukur waktu absorbansi oligoglukosamina yang berasal dari
alirnya dengan menggunakan viskometer kurva standar.
Ostwald. Viskositas larutan digunakan unutuk
menentukan bobot molekul polimer kitosan Penentuan derajat deasetilasi oligokitosan
dengan bantuan persamaan viskositas spesifik, dengan metode spektrofotometri UV-Vis
viskositas intrinsik (Persamaan 1) dan persamaan (Liu, et al. (2006)).
empirik Mark- Houwink (Persamaan 2). Sebanyak 3 mg kitosan yang dihasilkan
 sp
   lim
C 0 c
….. (1)
dilarutkan ke dalam 50 mL HCl 0,1 M, diukur
absorbansinya dengan spektrofotometer UV-Vis
  kM a ….. (2) pada panjang gelombang 201 nm. Derajat
deasetilasinya dihitung berdasarkan Persamaan 4
dan 5:

310
 Matheis F.J.D.P. Tanasale, dkk / Ind. J. Chem. Res., 2016, 3(2), 308-316

161,1AV  0,0128M warna diperoleh setelah tahap depigmentasi

DA  ….. (4) karena zat warna pada kulit udang windu larut
3,3615M  42,1AV
dalam aseton. Proses depigmentasi tidak
DD  (1  DA)100% ….. (5) memberikan hasil yang memuaskan karena
warna residu yang dihasilkan masih putih
dengan A adalah absorbans, V adalah volume kecoklatan.
larutan dan M adalah bobot kitosan. Cara yang Jika dibandingkan dengan hasil-hasil
sama juga dilakukan terhadap kitosan komersil. penelitian yang lainnya (khususnya dari jenis
krustasea), hasil penelitian ini memiliki
perbedaan yang cukup signifikan. Perbandingan
HASIL DAN PEMBAHASAN hasil-hasil tersebut dapat dilihat pada Tabel 2.
Perbedaan ini dapat disebabkan karena
Ekstraksi kitin dari limbah udang berbedanya jenis hewan dan habitat hidup.
Kulit udang windu banyak mengandung Udang windu pada penelitian ini merupakan
kitin tetapi juga masih mengandung protein, hasil budi daya di pertambakan udang Desa
mineral, dan zat warna. Setelah dipisahkan dari Arara (Maluku Tengah) sedangkan penelitian
daging, kulit udang memerlukan tiga tahap yang lain berasal dari pasar lokal yang tidak jelas
proses kimia agar diperoleh kitin. Ketiga tahap habitat hidupnya.
tersebut adalah tahap deproteinisasi, tahap
demineralisasi, dan tahap depigmentasi. Setiap Tabel 2. Perbandingan kandungan zat kimia
tahap-tahap tersebut memerlukan kondisi-kondisi pada kulit hewan krustasea
optium yang tergantung dari bahan dasar dan Komposisi zat kimia (%)
jenis bahan dasar. Dari studi literatur yang Zat Udang Kepiting
dilakukan, metode ekstrasi kitin dari limbah Penelitian ini
Windua Rajunganb
udang yang dilaporkan oleh No et al. (1989) Protein 25,10 43,38 4,16
adalah yang terbaik. Hasil penelitian tentang Mineral 26,45 2,71 60,00
massa dan komposisi zat kimia dalam kulit Zat warna 14,84 3,70 1,10
udang windu dapat dilihat pada Tabel 1. Kitin 33,61 50,21 35,80
Sumber: a. Tanasale dkk (2006); b. Tanasale dkk (2012)
Tabel 1. Bobot dan komposisi zat kimia dalam
kulit udang windu Untuk membuktikan adanya kitin dalam
Zat Bobot (g) Kadar (%) sampel kulit udang windu maka dilakukan
Protein 4.16 4.16 pengujian dengan menggunakan
Mineral 60,00 60,00 spektrofotometer FTIR sehingga terlihat pita-pita
Zat warna 1,10 1,10 yang khas dari senyawa kitin seperti yang
Kitin 34,71 34,71 diperlihatkan pada Gambar 2. Spektrum FTIR
kitin hasil isolasi memiliki pita-pita serapan yang
khas yaitu pita yang muncul pada 3566,44 cm-1
Protein akan larut dalam suasana basa
(lebar) adalah pita serapan –OH, 1653,02 cm-1
sehingga selisih antara bobot sampel dengan
adalah pita serapan vibrasi ulur (stretching)
bobot setelah tahap deproteinasi merupakan
C=O, dan 1558,51 cm-1 adalah pita serapan
kadar protein yang ada dalam kulit udang
vibrasi tekuk (bending) –N-H yang merupakan
windu. Demikian juga pada selisih bobot antara
ciri khas dari kitin yaitu gugus fungsi –N-H
sebelum dan setelah tahap demineralisasi
dalam –NH-CO- (gugus amin yang terasetilasi).
merupakan bobot mineral. Mineral utama yang
Jika dibandingkan dengan spektra FTIR untuk
ada pada kulit udang windu adalah CaCO3 dan
kitin komersil (Gambar 2), maka dapat
sedikit Ca3(PO4)2 yang larut dalam suasana asam
disimpulkan bahwa hasil isolasi yang diperoleh
klorida menurut reaksi :
merupakan senyawa kitin. Hasil ini juga
CaCO3(s) + 2HCl(aq)  CaCl2(aq) + H2O(g) + CO2(g) didukung penelitian sebelumnya, seperti yang
Ca3(PO4)2(s) + 4HCl(aq)  2CaCl2(aq) + Ca(H2PO4)2(aq) telah dilaporkan oleh Tanasale dkk (2006).
Proses demineralisasi ditandai dengan
terbentuknya gas CO2, sedangkan kadar zat

311
 Matheis F.J.D.P. Tanasale, dkk / Ind. J. Chem. Res., 2016, 3(2), 308-316

Konversi kitin menjadi kitosan mengandung zat-zat yang akan larut dalam
Kitosan merupakan produk deasetilasi dari larutan basa kuat panas.
kitin dengan NaOH pekat panas. No dan Meyers Selanjutnya kitosan hasil konversi
(1997) menyatakan bahwa konsentrasi NaOH dikarakterisasi dengan menggunakan metode
yang digunakan untuk deasetilasi antara 40–50% spektrofotometri FTIR yang hasil spektrumnya
pada suhu 80–1500C. Kondisi ini digunakan dapat dilihat pada Gambar 4. Spektrum kitosan
karena struktur sel-sel kitin tebal dan kuatnya hasil konversi dari kitin komersil memiliki pita-
ikatan hidrogen intramolekul antara atom pita serapan khas yaitu 3617,56 (-OH), 3050,47
hidrogen pada gugus amin dan atom oksigen – 3127,63 (-N-H ulur), 2894,24 (-C-H metilen),
pada gugus karbonil. 1679,06 ( -C=O), 1564,30 (-N-H tekuk), dan
1076,30 cm-1 (-C-O-). Walaupun terlihat adanya
noise yang mungkin disebabkan karena masih
adanya NaOH akibat proses pencucian yang
kurang sempurna, hasil ini memiliki kemiripan
dengan spektrum FTIR kitosan komersil yang
diperlihatkan pada Gambar 5. Spektrum kitosan
komersil memiliki pita-pita serapan khas yaitu
3629,13 (-OH), 2888,45 (-C-H metilen), 1653,99
( -C=O), 1559,47 (-N-H bending), dan 1068,58
cm-1 (-C-O-).

Gambar 2. Spektrum FTIR kitin hasil isolasi

Gambar 4. Spektrum FTIR kitosan hasil konversi

dari kitin komersil.

Gambar 3. Spektrum FTIR kitin komersil

Proses deasetilasi dalam basa kuat panas

menyebabkan hilangnya gugus asetil pada kitin
melalui pemutusan ikatan antara karbon pada
gugus asetil dengan nitrogen pada gugus amin.
Hasil konversi kitin komersil menjadi
kitosan adalah sebesar sekitar 62,33%. Hasil ini
jauh melebihi kitosan yang diperoleh dari kitin
hasil isolasi dari kulit jenis krustasea yang
masing-masing hanya 19,07% (udang windu
(Tanasale dkk (2006)) dan 22,06% (kepiting Gambar 5. Spektrum FTIR kitosan komersil
rajungan (Tanasale dkk (2012)). Perbedaan ini
disebabkan karena kitin komersil memiliki Derajat deasetilasi dan bobot molekul kitosan
kemurnian yang tinggi sehingga kandungan Derajat deasetilasi adalah suatu parameter
kitosan juga tinggi. Ini juga menunjukkan mutu kitosan yang menunjukkan persentasi
bahwa hasil isolasi yang dilakukan masih gugus asetil yang dapat dihilangkan dari
rendamen kitin maupun kitosan. Semakin tinggi

312
 Matheis F.J.D.P. Tanasale, dkk / Ind. J. Chem. Res., 2016, 3(2), 308-316

derajat deasetilasi kitosan, maka gugus asetil dengan hasil penelitian yang dilakukan oleh
kitosan semakin rendah sehingga interaksi antar Kilikily (2009) dengan sampel yang sama yaitu
ion dan ikatan hidrogennya akan semakin kuat udang windu, bobot molekul untuk kitosan hasil
(Knoor, 1982). isolasi selama 2 jam lama pemanasan pada
Pengukuran derajat deasetilasi proses deasetilasi, diperoleh bobot molekul
menggunakan metode UV-Vis pada Persamaan 4 sebesar 9 x 106 g/mol dengan derajat deasetilasi
dan 5. Penentuan derajat deasetilasi dengan 76%. Perbedaan ini dikarenakan kecilnya nilai
metode UV-Vis lebih efektif dan memiliki derajat deasetilasi yang berpengaruh pada makin
tingkat ketelitian yang tinggi sehingga hasilnya bertambahnya bobot molekul kitosan.
lebih akurat karena menggunakan instrumen
yang memiliki tingkat ketelitian yang tinggi. 6
Derajat deasetilasi dihitung untuk mengetahui
besarnya gugus asetil yang hilang dari kitin 4
y = 68.65x + 1.9682

ηsp/c
sehingga berubah menjadi kitosan. Derajat
R² = 0.9672
deasetilasi yang diperoleh sebesar 93,71%. 2
Berdasarkan standar protein biopolimer (1994)
maka produk kitosan tersebut telah memenuhi 0
kriteria standar mutu (≥ 70 %). Menurut 0 0.02 c (%) 0.04 0.06
Aumelia dkk (2005), suhu dan waktu pemanasan
dalam NaOH menentukan derajat deasetilasi dan Gambar 6. Kurva hubungan antara ηsp/C vs C
semakin tinggi suhu dan waktu pemanasan maka
derajat deasetilasi semakin tinggi.
Penentuan bobot molekul ditentukan dengan Depolimerisasi kitosan menghasilkan
menggunakan viskositas Ostwald untuk oligokitosan
mengukur viskositas larutan polimer. Adapun Kitosan dapat didegradasi atau diputuskan
beberapa parameter viskositas larutan polimer melalui hidrolisis, degradasi oksidatif
terlihat pada Tabel 3. (depolimerisasi) dan pirolisis. Pemutusan ikatan
glikosidik adalah tahap utama dalam proses
Tabel 3. Parameter viskositas untuk penentuan depolimerisasi. Pada umumnya, degradasi
berat molekul kitosan didasarkan pada konsentrasi reaktan dan suhu,
c t
t/t0 ηsp ηsp /c tingkat kemurnian, derajat deasetilasi dan bobot
(%) (detik)
molekul kitosan (Makuuchi, 2008).
0 80,35 1 0 ∞ Pada penelitian ini, kitosan didepolimerisasi
0,01 82,33 1,02464219 0,02464219 2,464219042 menggunakan H2O2 10 % pada variasi suhu
0,02 85,86 1,068574984 0,068574984 3,428749222 40oC, 50oC, 60oC dan 70oC secara duplo. Kitosan
0,03 90,80 1,130056005 0.130056005 4,335200166
dilarutkan sempurna dalam H2O2 selama 10
menit sebelum dimasukkan ke dalam oven
0,04 95,13 1,18394524 0,18394524 4,598630989
supaya terjadinya pembentukan gugus-gugus
0,05 101,69 1,265588052 0,26558805 5,311761045 karboksil dan mempercepat deaminasi.
Perlakuan dengan H2O2 dapat mengubah struktur
Dari Tabel 3 dapat dibuat kurva yang zat penyebab warna. Hal ini terlihat dari residu
menggambarkan hubungan antara viskositas yang diperoleh berupa kristal padatan yang
reduksi terhadap konsentrasi seperti terlihat pada berwarna putih. Bobot oligokitosan rata-rata
Gambar 6. Penentuan bobot molekul kitosan hasil depolimerisasi kitosan dengan variasi suhu
ditentukan berdasarkan viskositas intrinsik terlihat pada Tabel 4.
menurut Persamaan 1 dan 2. Viskositas intrinsik Dari hasil yang diperoleh, terlihat bahwa
menunjukkan kemampuan polimer untuk suhu proses depolimerisasi kitosan berpengaruh
meningkatkan viskositas larutan. Viskositas terhadap bobot oligokitosan yang diperoleh
intrinsik diperoleh dari kurva ηsp/c yang yakni kenaikan suhu akan menurunkan bobot
diekstrapolasi hingga c mendekati 0, agar dapat oligokitosan yang dihasilkan. Tian et al. (2004)
meniadakan pengaruh konsentrasi. Dari hasil telah menjelaskan mekanisme depolimerisasi
perhitungan diperoleh bobot molekul kitosan kitosan dengan H2O2 yang diawali dengan suatu
sebesar 8,67 x 104 g/mol. Jika dibandingkan

313
 Matheis F.J.D.P. Tanasale, dkk / Ind. J. Chem. Res., 2016, 3(2), 308-316

sistem kesetimbangan pada Persamaaa (4) dan metode viskometri, hasil yang akurat hanya bila
(5) serta reaksi total seperti Persamaan (6). bobot molekulnya 104 g/mol sedangkan
oligokitosan sendiri memiliki bobot molekul
Tabel 4. Bobot oligokitosan rata-rata hasil sekitar 2x103 g/mol.
depolimerisasi kitosan dengan H2O2 pada variasi Dari hasil penelitian diperoleh bobot
suhu 40 oC, 50 oC, 60 oC dan 70 oC molekul oligokitosan berdasarkan variasi suhu
Oligokitosan Wo (g) W (g) Persen (%) pemanasan dan hasilnya dapat dilihat pada Tabel
OKA 2,00055 1,611 80,52 5 menjelaskan bahwa kenaikan suhu akan
menurunkan bobot molekul oligokitosan.
OKB 2,00055 1,595 79,73
Menurut Makuuchi (2008) bobot molekul
OKC 2,00055 1,521 76,03 menurun dipengaruhi oleh suhu, waktu, dan
OKD 2,00055 1,265 63,23 konsentrasi H2O2 yang meningkat. Suhu yang
Ket: meningkat akan mempercepat proses
OK = Oligokitosan hasil depolimerisasi kitosan dengan
H2O2 pada variasi suhu (A= 400C, B= 500C, C= 600C depolimerisasi rantai utama kitosan sehingga
dan D= 700C) bobot molekul oligokitosan yang dihasilkan
Wo = Bobot kitosan sebelum depolimerisasi menurun. Jika dibandingkan dengan hasil
W = Bobot oligokitosan yang dihasilkan
penelitian yang dilakukan oleh Srijanto dkk
R-NH2 + H+ = R-NH3+ .... (4) (2006) dengan variasi suhu 60 oC, 70 oC, 80 oC
H2O2 = H+ + HOO- .... (5) dan 90 oC, dan variasi waktu 10 menit, 15 menit
R-NH2 + H2O2 + H+ = R-NH3+ + HOO- + H+ .... (6) dan 20 menit, bobot molekul oligokitosan yang
diperoleh sebesar 5000 g/mol - 12000 g/mol
Anion HOO- sangat tidak stabil dan sangat dengan bobot molekul kitosan sebesar 1,14 x 106
mudah terdekomposisi menjadi radikal hidroksil g/mol - 1,79 x 106 g/mol. Perbedaam ini
yang sangat reaktif (Persamaan 7 dan 8). disebabkan karena pereaksi yang digunakan
berbeda yaitu HNO2 dan HNO2 merupakan
HOO- → OH- + O• .... (7)
H2O2 + HOO- → HO• + O2- + H2O .... (8) oksidator yang lebih lemah dibandingkan dengan
H2O2. Laju depolimerisasi kitosan menggunakan
Radikal hidroksil adalah oksidator kuat. Aksi H2O2 lebih kecil, ini disebabkan kestabilan H2O2.
kimia utama HO• dengan suatu polisakarida
adalah sangat cepat seperti diperlihat pada Tabel 5. Bobot molekul (BM) oligokitosan rata-
Persamaan (9) dan (10). Radikal HO•menarik rata hasil depolimerisasi kitosan dengan
satu atom H dan membentuk air sehingga akan beberapa perlakuan suhu
Absorbansi W1 W2 BM
membentuk produk oksidasi larut air dengan Oligokitosan
rata-rata (g) (g) (g/mol)
bobot molekul rendah. OKA 0,399 0,02 0,004184 1030,13
OKB 0,403 0,02 0,0042285 1019,29
(GlcN) – (GlcN) + HO• → (GlcN)m – (GlcN)n + H2O … (9)
(GlcN)m – (GlcN)n + H2O → (GLcN)n + (GlcN)m .... (10) OKC 0,422 0,02 0,0044065 978,12
OKD 0,455 0,02 0,0047425 908,82
Pengaruh suhu depolimerisasi terhadap bobot Ket:
molekul oligokitosan OK = Oligokitosan hasil depolimerisasi kitosan dengan
H2O2 pada variasi suhu (A= 400C, B= 500C, C= 600C
Bobot molekul oligokitosan dilakukan dan D= 700C)
dengan metode UV-Vis dengan kalium W1 = Bobot oligokitosan yang ditimbang untuk pembuatan
ferisianida sebagai reagen warna. Hal ini larutan untuk pengukuran UV-Vis
W2 = Bobot oligokitosan berdasarkan hasil regresi larutan
disebabkan karena D-glukosamin hidroklorida standar.
dan oligokitosan memiliki hemiasetal hidroksil BM = Bobot molekul oligokitosan
dalam molekulnya sehingga keduanya akan
berwarna bila ditambahkan kalium ferisianida. Pada suhu 40 oC, 50 oC, 60 oC, dan 70 oC
Hemiasetal hidroksil pada gula reduksi dapat terlihat bahwa penurunan bobot molekul sangat
berwarna bila direaksikan dengan kalium signifikan. Hal ini dimungkinkan pada suhu
ferisianida. Bobot molekul oligokitosan tidak tinggi terjadi penurunan deprotonisasi dari
dapat ditentukan dengan metode viskometri –NH3+, yang membantu mempercepat pemutusan
seperti pada bobot molekul kitosan karena dalam rantai utama kitosan secara depolimerisasi.
Karena pada proses depolimerisasi ini bersifat

314
 Matheis F.J.D.P. Tanasale, dkk / Ind. J. Chem. Res., 2016, 3(2), 308-316

acak maka pada suhu tinggi yaitu pada suhu UCAPAN TERIMA KASIH
70 oC dan adanya proton NH3+, energi yang Ucapan terima kasih ditujukan kepada Lembaga
diberikan kepada sistem cenderung dapat Penelitian Universitas Pattimura Ambon dan
memutuskan ikatan glikosidik dari rantai-rantai Direktorat Riset dan Pengabdian Masyarakat
pendek kitosan dibandingkan rantai-rantai utama Kementerian Riset, Teknologi, dan Pendidikan
yang panjang membentuk kitosan dengan bobot Tinggi atas disetujui dan didanainya penelitian
molekul kecil yang terlarut dalam cairan. ini sesuai dengan surat perjanjian pelaksanaan
Bobot molekul oligokitosan yang pekerjaan penelitian Hibah Bersaing tahun
dihasilkan, jauh lebih kecil dari bobot molekul anggaran 2015, nomor : 30/UN13.2/SPK-PJ/LP-
kitosan yang sebesar 8,67 x 104 g/mol. HB/2015 tanggal 28 Agustus 2015.
Pemutusan ikatan β-glikosidik pada proses
depolimerisasi diperoleh ukuran molekul yang DAFTAR PUSTAKA
lebih kecil sehingga bobot molekul pun semakin
kecil. Bobot molekul monomer kitosan adalah Aulia, F, Khusnul, A., Andrew, S, dan Nurinci,
161 g/mol. Dalam penelitian ini, monomer D, 2013,Makalah Ikan Kakap Merah.
kitosan pada oligokitosan terdiri dari 5-6 unit Fakultan Pertanian Universitas Gadjah
monomer, dan jika dibandingkan dengan Mada, Yogyakarta.
monomer kitosan dalam kitosan isolasi adalah Allan, G.G. & Peyron, M. 1995. Molecular
538 unit monomer kitosan. Berdasarkan jumlah weight manipulation of chitosan I: kinetics
monomer yang diperoleh, diperkirakan bahwa of depolymerization by nitrous acid.
kitosan tersebut telah mengalami depolimerisasi Carbohydrate Research, 277, 257–272.
sehingga membentuk oligokitosan. Hal ini Aumelia, W., Basmal, J., dan Suryaningrum.,
diperkuat dengan data yang diperoleh dari bobot 2005, Pengaruh konsentrasi asam monokloro
oligokitosan rata-rata pada proses depolimerisasi asetat dan jenis pelarut sebagai bahan
kitosan disertai penurunan bobot molekul dan pengendap terhadap produksi karboksimetil
ukuran molekul yang kecil. Jadi, semakin tinggi kitin, Jurnal Penelitian Perikanan Indonesia,
suhu pemanasan maka bobot molekul 11(4): 89–100.
oligokitosan yang dihasilkan akan semakin kecil. Austin, P.R., Brine, C.J., Castle, J.E., & Zikakis,
J.P. 1981. Chitin: new facets of research.
KESIMPULAN Science, 212, 749–753.
Chang, K.L.B., Tai, M.C., & Xiao, L. 2001.
Berdasarkan penelitian yang telah Kinetics and products of degradation of
dilakukan, maka dapat disimpulkan bahwa chitosan by hydrogen peroxide. J. Agric.
kandungan kimia dalam kulit udang windu Food Chem., 49, 4845–4851.
adalah protein 4,16%, mineral 60,00%, zat warna Huang, Q.Z., Wang, S.M., Huang, J.F., Zhou,
1,10%, dan kitin 35,90%. Konversi kitin L.H., & Guo Y.C. 2007. Study on the
komersil menjadi kitosan komersil mencapai heterogeneous degradation of chitosan with
62,33%. Kitosan hasil konversi dari kitin hydrogen peroxide under the catalysis of
komersil memiliki pita-pita serapan khas yaitu phosphotungstic. Carbohydrate Polymers,
3617,56 (-OH), 3050,47 – 3127,63 (-N-H 68, 761–765.
stretching), 2894,24 (-C-H metilen), 1679,06 Huang, Q.Z., Zhuo, L.H., & Guo, Y.C. 2008.
(-C=O), 1564,30 (-N-H bending), dan 1076,30 Heterogeneous degradation with H2O2
cm-1 (-C-O-). Makin besar suhu pemanasan yang catalysed by phosphotungstate.
digunakan dalam proses depolimerisasi kitosan Carbohydrate Polymers, 72, 500–505.
dengan hidrogen peroksida maka makin kecil Kabal`nova, N.N., Murinov, K.Y., Mullagaliev,
persen hasil dan bobot molekul oligokitosan I.R., Krasnogorskaya, N.N., Shereshovets,
yang dihasilkan yakni pada 40 oC, 50 oC, 60 oC, V.V., Monakov, V.B., & Zaikov, G.E. 2001.
dan 70 oC diperoleh bobot molekul rata-rata Oxidative destruction of chitosan under the
oligokitosan berturut-turut sebesar 1030,12 effect of ozone and hydrogen peroxide. J.
g/mol, 1019, 28 g/mol, 978,12 g/mol, dan 908,82 Appl. Polym. Sci., 81, 875–881.
g/mol. Kang, B., Dai, Y.D., Zhang, H.Q., & Chen, D.
2007. Synergetic degradation of chitosan

315
 Matheis F.J.D.P. Tanasale, dkk / Ind. J. Chem. Res., 2016, 3(2), 308-316

with gamma radiation and hydrogen Qin, C.Q., Du, Y.M., & Xiao, L. 2002. Effect
peroxide. Polym. Degrad. Stab., 92, 359– of hydrogen peroxide treatment on the
362. molecular weight and structure of chitosan.
Kilikily, K., 2009, Variasi waktu pemanasan Polym. Degrad. Stab., 76, 211–218.
pada proses deasetilasi kitin, Skripsi Sarjana, Rukayadi, Y. 2002. Kitin deasetilase dan
Jurusan Kimia Fakultas Matematika dan pemanfaatannya. Hayati, 9, 130–134.
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Shao, J., Yang, Y., & Zhong, Q. 2003. Studies
Pattimura, Ambon. on preparation of oligoglucosamine by
Knoor, D., 1982, Function properties of chitin oxidative degradation under microwave
and chitosan, J.Food.Sci, 47: 36. irradiation. Polym. Degrad. Stab., 82, 395–
Kumar, M.N.V.R. 2000. A review of chitin and 398.
chitosan applications. Reactive & Srijanto, B., Paryanto, I., Masduki, &
Functional Polymers, 46, 1–27. Purwatiningsih. 2006. Pengaruh derajat
Liu, D., Wei, Y., Yao, P., Y. & Jiang, L. 2006b deasetilasi bahan baku pada depolimerisasi
Determination of the degree of acetylation of kitosan. Akta Kimindo, 1, 67–72.
chitosan by UV spectrophotometry using Tanasale, M.F.J.D.P., Killay, A. & Saily, M.
dual standards. Carbohydrate Research, 2006. Kitosan dari limbah udang windu
341, 782–785. (Penaeus monodon) sebagai adsorben fenol.
Makuuchi, K., 2008, Comparative analysis of J. Alchemy 5: 23–30.
hydrogel and Oligo-Chitosan, EB System Tanasale, M.F.J.D.P., Killay, A. & Laratmase,
Comporation, Japan, 1–6. M.S. 2012. Kitosan dari limbah kulit
Mao, S., Shui, X., Unger, F., Simon, M., Bi, D., kepiting rajungan (Portunus sanginolentus
& Kissel, T. 2004. The polymerization of L.) sebagai adsorben zat warna biru
chitosan: effects on physicochemical and metilena. J. Natur Indo., 14: 165–171.
biological properties. Inter. J. Pharm., 281, Tanioka, S., Matsui, Y., Irie, T., Tanigawa, T.,
45–54. Tanaka, Y., Shibata, H., Sawa, Y, & Kono,
Muzzarelli, R.A.A., Boudrant, J., Meyer, D., Y. 1996. Oxidative depolymerization of
Manno, N., DeMarchis, M., & Paoletti. M.G. chitosan by hydroxyl radical. Biosci.
2012. Current views on fungal Biotech. Biochem., 60, 2001–2004.
chitin/chitosan, human chitinases, food Tian, F., Liu, Y., Hu, K., & Zhao, B. 2004.
preservation, glucans, pectins and inulin: a Study of depolymerization behavoir of
tribute to Henri Braconnot, precursor of the chitosan by hydrogen peroxide.
carbohydrate polymers science, on the chitin Carbohydrate Polymers, 57, 31–37.
bicentennial. Carbohydrate Polymers, 87, Varum, K.M., Anthonsen, M.W., Grasdalen, H.,
995–1012. & Smidsrod, O. 1991. 13C-NMR studies of
No, H.K., Nah, J.W., & Meyers, S.P. 2003. the acetylation sequences in partially N-
Effect of time/temperature treatment deacetylated chitins (chitosans).
parameters on depolymerization of chitosan. Carbohydrate Research, 217, 19–27.
J. Appl. Polym. Sci., 87, 1890–1894. Wang, S.M., Huang, Q.Z., & Wang, Q.S. 2005.
No, H.K. & Meyers, S.P. 1997. Preparation of Study on the synergetic degradation of
chitin and chitosan. Dalam R.A.A. chitosan with ultraviolet light and hydrogen
Muzzarelli dan M.G. Peter, Chitin peroxyde. Carbohydrate Research, 340,
Handbook, European Chitin Society, 475– 1143–1147.
489. Yue, W., Yao, P., & Wei, Y. 2009. Influence of
No, H. K., Meyer, S. P., & Lee., 1989, Isolation ultraviolet-irradiated oxygen on
and characteristisation of chitin from depolymerization of chitosan. Polym.
crawfish shell waste, J. Agricul Food Chem, Degrad. Stab., 94, 851–858.
37 : 575–579. Zheng, X., Yin, Y., Jiang, W., Xing, L., & Pu, J.
Qin, C., Li, H., Xiao, Q., Liu, Y., Zhu, J., & Du, 2015. Synthesis and characterization of low
Y. 2006. Water-solubility of chitosan and molecular weight chitosan. BioResources,
its antimicrobial activity. Carbohydrate 10, 2338–2348.
Polymers, 63, 367–374.

316