Los fermentadores o biorreactores

LOS FERMENTADORES O BIORREACTORES

El fermentador o biorreactor es el corazn del proceso de fermentacin o conversin
enzimtica. El diseo de biorreactores es una tarea complicada, basada en principios
cientficos y de ingeniera y en muchas reglas empricas. Los aspectos especficos del
biorreactor y su operacin incluyen varias decisiones crticas.
i. Configuracin del reactor: Por ejemplo, debera ser el reactor un tanque agitado por
medios mecnicos o por aire?
ii. Tamao del reactor: Qu tamao de reactor se necesita para alcanzar la velocidad de
produccin deseada?
iii. Condiciones del proceso dentro del reactor: Qu condiciones de reaccin, tales como
temperatura, pH y tensin de oxgeno disuelto deberan mantenerse en el recipiente y
cmo se controlaran dichos parmetros?. Cmo se controlara la contaminacin?.
iv. Modo de operacin: Operara el reactor en discontinuo o mediante un proceso de flujo
continuo?. Debera alimentarse el substrato en forma intermitente?. Debera operar
un reactor solo o en serie con otros?
Las decisiones tomadas en el diseo del reactor tienen un efecto considerable sobre el
rendimiento global del proceso. Todava no existen procedimientos sencillos o estndar para
el diseo de reactores que cubran todos los aspectos del recipiente y su operacin. El
conocimiento de cintica de las reacciones es esencial para comprender como funcionan los
reactores biolgicos, aunque tambin son necesarias otras reas de la ingeniera qumica
como los balances de masa y energa, el mezclado, la transferencia de materia y la
transmisin de calor
Ingeniera de los biorreactores.
Antes de empezar el diseo de un reactor deben definirse claramente ciertos objetivos.
Propsitos sencillos como producir 1 g de anticuerpos monoclonales por da o producir
1000 toneladas de aminocidos por ao, son el punto de partida. Otros objetivos tambin
son importantes. En los procesos industriales, el producto debe fabricarse al menor costo
posible con el fin de maximizar los beneficios comerciales de la empresa. En algunos casos,
los objetivos econmicos se ven superados por asuntos de seguridad, por la necesidad de
obtener productos de elevada pureza o por consideraciones reguladoras. El diseo final del
reactor ser un reflejo de todos estos requisitos y, en la mayora de los casos, representa
una solucin de compromiso a los intereses en conflicto.
En este apartado se considerarn algunas contribuciones a los costos
de
bioprocesamiento para diferentes tipos de producto y la importancia de la ingeniera de
reactores en la mejora del rendimiento global del proceso. Como se muestra en la figura 1,
el valor de los productos de bioprocesado cubre un amplio intervalo de posibilidades.
Precio por Tonelada (U$S)
100.000.000
1.000.000
10.000

Producto
Protenas de cultivo de clulas de
mamferos
Vitamina B12
Levadura de panadera

100
1

Protena de origen unicelular

Agua residual
Figura 1

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Para reducir el costo de cualquier bioproceso es necesario en primer lugar identificar
qu aspectos son los que determinan el costo final. La reduccin de los costos de
produccin vara de un proceso a otro. En la figura 2 se muestra un esquema de tipo
general.
COSTO TOTAL DE PRODUCCIN

Investigacin
y Desarrollo

Materiales de
partida

Fermentacin

Recuperacin
del producto

Administracin
y Marketing

Operacin del
Biorreactor

--Salarios
--Servicios (agua, vapor, aire)
--Seguros
Figura 2
Los componentes ms importantes son:
i. Investigacin y desarrollo.
ii. La etapa de fermentacin o de reaccin
iii. El procesado y recuperacin posterior
iv. La administracin y comercializacin
En muchos de los productos bioprocesados, el costo de administracin y
comercializacin es relativamente pequeo. Entre los productos en los que domina el costo
de la reaccin pueden citarse la biomasa, como la levadura de panadera y las protenas de
origen unicelular, los metabolitos catablicos como el etanol y el cido lctico, y productos
de bioconversin como el jarabe de maz rico en fructosa y el cido 6-aminopenicilanico. Los
productos intracelulares como las protenas, antibiticos, vitaminas y aminocidos presentan
elevados costos de tratamiento posterior en comparacin con los costos de reaccin. Para
productos de biotecnologa nuevos y de alto valor como los anticuerpos y protenas
recombinantes, los costos reales del proceso representan nicamente una pequea parte
del total debido a las enormes inversiones necesarias en investigacin y desarrollo y en
aprobacin regularizadora. La introduccin rpida de los productos en el mercado es la
medida de ahorro ms importante en estos casos, siendo despreciable cualquier ahorro
debido a las mejoras en la eficiencia del rector. Sin embargo, para la mayora de los
productos de fermentacin fuera de esta categora de "productos de alto valor" los costos de
bioprocesado representan una contribucin apreciable al precio final del producto.
Si en la estructura de costos predomina la etapa de reaccin, esto puede deberse a
los elevados costos de las materias primas o al elevado costo de operacin del reactor. Las
contribuciones relativas de todos estos factores dependen del proceso especfico en
cuestin. Por ejemplo, para producir antibiticos de alto valor, el costo de 1000 m 3 de medio
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de cultivo vara entre 25.000 y 100.000 U$S. Por el contrario, el costo de la energa para la
operacin de un fermentador de tanque de 1000 m3 con agitacin, aire comprimido y agua
de refrigeracin es de alrededor de 8.000 U$S. Para productos de alto valor y bajo
rendimiento, como antibiticos, vitaminas, enzimas y pigmentos, el costo del medio de
cultivo representa entre el 60 y 90% de los costos de fermentacin. Para metabolitos de bajo
costo y alto rendimiento como etanol, biomasa y cido lctico, el costo de la materia prima
vara entre el 40% de los costos de fermentacin para el cido ctrico y el 70% para el etanol
producido a partir de melaza. El resto de los costos de operacin de los biorreactores son
principalmente costos laborales y servicios. Como se muestra en la figura 3, la identificacin
de la estructura de costos de los bioprocesos, ayuda a definir los objetivos para el diseo del
reactor. Incluso aunque la reaccin en si misma no sea determinante del costo final,
diferentes aspectos del diseo del reactor, pueden todava ser importantes. Si el costo de
investigacin y desarrollo es el dominante, el diseo del reactor va dirigido hacia la
necesidad de un rpido cambio de escala, siendo esto ms importante que maximizar la
conversin o minimizar los costos de operacin. Para productos biotecnolgicos nuevos
destinados a usos teraputicos, las pautas de regulacin requieren la validacin del
esquema de produccin completo y la garanta de que el control de proceso cumpla ciertas
normas de calidad y seguridad. Cuando el costo de las materias primas es insignificante
tiene prioridad maximizar la conversin del substrato y el rendimiento de producto. Si el
tratamiento posterior del producto es caro, el reactor se disea y opera a fin de maximizar la
concentracin del producto obtenido en el reactor, lo cual evita el costo que representa la
recuperacin del producto a partir de soluciones diluidas. Cuando los costos de la reaccin
son importantes, el reactor debe ser tan pequeo como sea posible con el fin de reducir
tanto los costos de operacin como los de capital. Para alcanzar la velocidad total de
produccin deseada un recipiente de pequeo tamao, la productividad volumtrica del
reactor deber ser suficientemente elevada.
Como se indica en la figura 3, la productividad volumtrica depende de la
concentracin del catalizador y de su velocidad especfica de produccin. Para alcanzar
elevadas velocidades volumtricas, el reactor debe permitir alcanzar la mxima actividad del
catalizador a la mayor concentracin posible del mismo. La extensin en la que pueden
alcanzarse estas concentraciones lmites, depende del funcionamiento del reactor. Por
ejemplo, si la mezcla o la transferencia de materia es inadecuada se producir falta de
oxgeno o de nutriente y la densidad mxima de clulas ser menor. Por el contrario, si los
niveles de efecto de corte (cizalla) del reactor son elevados las clulas se disgregarn y las
enzimas se desactivarn, por lo que disminuye la concentracin efectiva de catalizador.
La productividad especfica mxima se obtiene cuando el catalizador es capaz de
alcanzar elevados niveles de produccin y en aquellas condiciones en el reactor que
permitan el ptimo funcionamiento cataltico. Para metabolitos sencillos como el etanol,
butanol o cido actico, relacionados con el metabolismo energtico de la clula, el
rendimiento mximo terico est limitado por los principios termodinmicos y
estequiomtricos. Por tanto, la reduccin de los costos de produccin y los beneficios
comerciales se basan principalmente en mejoras sobre la operacin del reactor, lo cual
permite que el sistema se aproxime al rendimiento mximo terico.
Para la produccin de antibiticos y enzimas, es ms rentable, en un principio, la
identificacin de las cepas de elevada produccin y las condiciones ambientales ptimas,
que las posibles mejoras en el diseo del reactor y en la operacin del mismo.

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FACTOR DETERMINANTE DEL COSTO

Investigacin
y Desarrollo

Materiales de
partida

Maximizar la
conversin del
sustrato

Operacin del
biorreactor

Maximizar el
rendimiento del
producto

Maximizar la
Productividad
Minimizar el
volumen del
reactor

Recuperacin
del producto

Maximizar la
concentracin
del producto

Maximizar
velocidad de
cambio de
escala,
Minimizar riesgo
de
contaminacin

Figura 3

Configuraciones del biorreactor.

El tanque cilndrico, con o sin agitacin, es el reactor ms utilizado en bioprocesado.
Sin embargo, existe una gran cantidad de configuraciones de fermentadores en diferentes
industrias de bioprocesos. Continuamente se desarrollan biorreactores para aplicaciones
especficas.
Los reactores utilizados en fermentaciones anaerobias sin inyeccin de aire ni
agitacin son de construccin ms sencilla. En la siguiente discusin sobre configuracin de
biorreactores, se supondr que son para operacin aerobia.
Tanques agitados.
En la figura 4 se muestra un tpico biorreactor aireado y agitado. La mezcla y
dispersin de las burbujas se alcanza mediante agitacin mecnica, lo cual requiere una
relativa gran cantidad de energa por unidad de volumen. Los deflectores se utilizan para
disminuir la formacin de vrtices. Existe una amplia variedad de formas y tamaos de
rodetes que producen diferentes tipos de flujo dentro del recipiente. En los fermentadores
altos se instalan varios rodetes, sobre un mismo eje, para mejorar la mezcla.
Generalmente slo el 70 - 80% del volumen de los reactores agitados se llena con
lquido, lo que permite que exista un espacio en la parte superior para retirar las gotas que
arrastra el gas de salida y dar cabida a cualquier espuma que se forme. Si la formacin de
espuma es un problema, se puede instalar otro rodete llamado separador de espumas. Otra
posibilidad consiste en aadir agentes antiespumantes al medio de cultivo, aunque estos
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pueden reducir la transferencia de oxgeno, por lo que se suele preferir la opcin de la
dispersin mecnica de la espuma.

Figura 4
El factor de forma de los reactores agitados, es decir, la relacin entre la altura y el
dimetro, puede variar considerablemente. La forma ms barata de la construccin tiene
una relacin aproximada de 1, ya que esta forma presenta la menor superficie y, por tanto,
necesita la mnima cantidad de material para un determinado volumen. Sin embargo,
cuando se necesita aireacin la relacin de forma aumenta, lo cual proporciona tiempo de
contacto mayor entre las burbujas que ascienden y el liquido as como una mayor presin
hidrosttica en el fondo del reactor.
Los tanques agitados se utilizan para reacciones con enzimas libres e inmovilizadas,
as como para el cultivo de clulas en suspensin e inmovilizadas. Cuando se utilizan
determinados catalizadores que pueden ser daados o destruidos por el rodete cuando gira
a gran velocidad, es necesario tener un cuidado especial. Elevados niveles de efecto
cortante pueden tambin daar clulas sensibles.
Columna de burbujas
Otra alternativa al reactor agitado la constituyen aquellos reactores sin agitacin
mecnica. En los reactores de columna de burbujas, la aireacin y la mezcla se alcanzan
mediante la inyeccin de gas, proceso que requiere menos energa que la agitacin
mecnica. Las columnas de burbujas se utilizan industrialmente para la produccin de
levaduras para panadera, cerveza y vinagre. Y en el tratamiento de aguas residuales. Las
columnas de burbujas son de estructura muy sencilla. Como lo muestra la figura 5, consisten
generalmente en un recipiente cilndrico con alturas superiores al doble del dimetro. En la
produccin de levaduras para panadera es normal utilizar una relacin altura dimetro de
3:1, mientras que en otras aplicaciones pueden utilizarse torres con relaciones de 6:1.

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Aparte del difusor para la inyeccin del aire, los reactores de columnas de burbujas no
presentan estructuras internas.

Figura 5
Algunas veces, en los reactores muy altos se instalan placas horizontales perforadas para
evitar la coalescencia de las burbujas y lograr una mejor redistribucin del aire. Las ventajas
de este tipo de reactores incluyen los bajos costo de capital, la ausencia de partes mviles y
un adecuado rendimiento en la transferencia de calor y masa. Al igual que en los tanques
agitados, la formacin de espuma puede ser un problema que necesite una dispersin
mecnica o la adicin de un agente antiespumante.
La hidrodinmica de la columna de burbujas y las caractersticas de la transmisin de
calor depende por completo del comportamiento de las burbujas formadas en el difusor.
Existen diferentes regmenes de flujo dependiendo del caudal de gas, del diseo del difusor,
del dimetro de la columna y de las propiedades del medio como puede ser la viscosidad.
Un flujo homogneo se produce solamente con caudales bajos de gas y cuando las burbujas
que abandonan el difusor se distribuyen a lo largo de toda al seccin de la columna. En el
flujo homogneo, todas las burbujas ascienden con la misma velocidad y no existe
retromezcla de la fase gas. La mezcla del lquido en este tipo de rgimen de flujo es
bastante limitada y se reduce nicamente a su arrastre en la estela de las burbujas.
Normalmente se opera a mayores velocidades de gas, donde se desarrolla un flujo catico
de circulacin y se produce el denominado flujo heterogneo que se muestra en la figura 6.

Figura 6

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En este rgimen, las burbujas y el lquido tienden a ascender por el centro de la
columna, mientras que en las proximidades de las paredes existe un flujo descendiente de
lquido. La circulacin del lquido arrastra a las burbujas y se produce una cierta retromezcla
del gas. El tiempo de mezcla del lquido en las columnas de burbujas depende del tipo de
flujo.
Reactores de tiro o corriente de aire (air lift).
Al igual que en las columnas de burbujas, en estos reactores la mezcla se produce sin
agitacin mecnica.
Existen varios tipos diferentes de reactores de tiro de aire. El rasgo caracterstico que
los diferencia de la columna de burbujas es que las corrientes de flujo de lquido estn ms
definidas debido a la separacin fsica de las corrientes ascendentes y descendentes. Como
se muestra en la figura 7, el gas es inyectado nicamente en la parte de la seccin del
reactor denominado "riser" El gas existente en el reactor y la disminucin de la densidad
producen un movimiento de lquido ascendente en el "riser". El gas se retira del lquido en la
parte superior del reactor dejando el lquido ms pesado libre de las burbujas y se recircula
a travs del "downcomer". En estos reactores el lquido circula como resultado de la
diferencia de densidades entre el "riser" y el "downcomer".
En los reactores de bucle interno de las figuras 7(a) y 7(b) el "riser" y el "downcomer"
estn separados por un deflector interno o tubo de tiro. El aire puede inyectarse bien en el
tubo de tiro o en el anillo. En los reactores de tiro de aire de bucle externo de la figura 7(c),
se conectan dos tubos verticales separados mediante pequeas secciones horizontales en
la parte superior e inferior.

Figura 7
En este dispositivo, la separacin del gas es ms efectiva que en los reactores de
bucle interno ya que el "riser" y el "downcomer" se encuentran separados. Asimismo, en el
"downcomer" se arrastran muy pocas burbujas, lo que provoca que la diferencia de
densidades entre los fluidos del "riser" y del "downcomer" aumente y la circulacin del

Los fermentadores o biorreactores

lquido sea ms rpida. Por consiguiente la mezcla es mejor en los reactores de bucle
externo que en los de bucle interno.
Los reactores de tiro de aire proporcionan generalmente mejores mezclas que las
columnas de burbujas, excepto cuando se opera a velocidades bajas de lquido. La
configuracin de tiro de aire le confiere mayor estabilidad al flujo de lquido que en la
columna de burbujas, pudiendo utilizarse mayores caudales de gas sin producir problemas
de operacin como puede ser el flujo pistn o nebulizaciones.
Reactores agitados mecnicamente y por aire, Comparacin de las caractersticas de
operacin
Tanto los tanques agitados como los reactores de columnas de burbujas y los de tiro
de aire pueden conseguir una mezcla y transferencia de materia adecuadas con fluidos de
baja viscosidad. Cuando se necesita un fermentador de gran tamao (50-500 m3) para un
cultivo de viscosidad baja, el reactor de columna de burbujas representa una eleccin muy
atractiva debido a que es simple y barato, tanto desde el punto de vista de instalacin como
de operacin. Los reactores agitados mecnicamente no son prcticos para volmenes
superiores a los 5000 m3 ya que la potencia necesaria para conseguir una mezcla adecuada
llega a ser extremadamente alta.
Si el cultivo tiene una alta viscosidad, los reactores agitados por aire no proporcionan
una mezcla suficiente y, por tanto, la transferencia de materia es deficiente. En ese caso, los
reactores agitados mecnicamente son ms apropiados ya que mediante ese sistema se
pueden suministrar mayores potencias. A pesar de todo, las velocidades de transferencia de
materia disminuyen rpidamente en los reactores agitados mecnicamente cuando la
viscosidad supera los 50-100 cP.
Un punto importante a la hora de elegir un reactor agitado por aire y mecnicamente
es el referido a la transmisin de calor. La agitacin mecnica genera mucho ms calor que
la inyeccin de gas comprimido. Cuando el calor de reaccin es elevado, como es el caso
de produccin de protenas de origen unicelular a partir de metanol, la eliminacin del calor
producido por el rozamiento mecnico puede ser un problema, por lo que es preferible
utilizar un reactor agitado por aire. Los reactores tanque agitado mecnicamente y los
agitados por aire representan la gran parte de las configuraciones de biorreactores utilizadas
para cultivos aerobios. Sin embargo, pueden utilizares otras configuraciones diferentes para
determinados procesos de carcter especfico.
Transferencia de calor
En los reactores biolgicos, si el calor generado durante la conversin del sustrato es
inadecuado para mantener el sistema en un nivel aceptable de temperatura, el calor debe
ser agregado o removido.
La determinacin de los requerimientos de transferencia de calor surge de una
consideracin del balance global de energa. En un sistema con presin constante y con
cambios despreciables en la energa cintica y potencial, el balance de energa puede
conducirse en trminos de cambios de entalpa, es decir calor de las transformaciones
qumicas o transformaciones de fases (evaporacin, condensacin), flujo de calor sensible
en las corrientes msicas y transferencias a los fluidos de intercambio. Consideremos:
Qmet= velocidad de generacin de calor por crecimiento celular y mantenimiento
Qag= velocidad de generacin de calor por agitacin mecnica
Qgas= velocidad de generacin de calor por aireacin
Qacc= velocidad de acumulacin de calor
Qexch= velocidad de transferencia de calor por intercambio
Qevap= velocidad de prdidas de calor por evaporacin
Qsens= velocidad de ganancia de entalpa sensible de la corriente ( salida entrada)

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Luego, el balance
Qmet + Qag + Qgas = Qacc + Qexch + Qevap + Qsens
En condiciones experimentales, Qevap y Qsens son despreciables. En condiciones de
diseo de un reactor se asume que Qacc= 0, y el calor Qag y el Qgas se determinan de
correlaciones, restando slo averiguar el Qmet para calcular el calor de intercambio
necesario:
Qecch= Qmet + Qag + Qgas
Donde
Qmet= Vreactor X/Y
Y= coeficiente de generacin de calor (g.cel./kcal)
Luego
Qecch= UA.T
Clculo del coeficiente de generacin de calor (Y)
La clula usa la energa qumica muy eficientemente pero como en todo proceso real,
algo de la energa que hay en los sustratos, es liberada como calor. La generacin del calor
metablico, determina los requerimientos de intercambio en el biorreactor. La produccin de
calor celular, es producto del metabolismo energtico y de crecimiento celular. Se define el
Y ( gramos de masa celular por kilocalora de calor evolucionado). Si Y s son los gramos de
masa celular producida por gramo de sustrato consumido y Hs y Hc son los calores de
combustin en kilocaloras por gramos de sustrato y material celular respectivamente, se
puede escribir:

Y g.cel. / kcal

Ys g.cel. / g.sustrato
Hs Ys Hc kcal / g.sustrato

Esto se deduce de un balance de energa sobre dos caminos como se muestra en el

siguiente esquema para un crecimiento aerbico:
O2 + sustrato

I: Combustin total
Hs, kcal/g.sust.oxidado

CO2 + H2O

Hc, kcal/g.cel.comb.
II: Respiracin celular

III: Combustin
Material celular
H2O + CO2 + clulas

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De este esquema puede deducirse que de la diferencia entre el calor generado por
gramo de sustrato completamente oxidado (Hs, kcal/g.sust.oxidado) menos el calor de la
combustin celular (YsHc), ser una aproximacin razonable al calor generado por gramo
de sustrato consumido en la fermentacin que produce clulas, agua y CO2. Con datos
experimentales de entalpa puede determinarse Y y en caso de no disponer de los mismos
se pueden calcular mediante balance de grado de reductancia. Como aproximacin puede
considerarse un valor promedio de 104 a 124 kcal/mol de O2. Por ejemplo en la siguiente
estequiometra el clculo sera:
CH1.66N0.20 O0.27 (biomasa) + 1.28 O2

CO2 + 0.10 N2 + 0.83 H2O

Con la consideracin antes mencionada, el calor de combustin de 104 kcal/ mol de

O2, da como resultado una liberacin de calor de combustin de las bacterias de

1.28molO 2 104kcal / molO 2

kcal
6.41
12 1.661 0.2014 0.27 16 g
g
Sin embargo, el peso celular medido experimentalmente incluye cenizas (10 %), con lo
que
Hc(0.90)(6.41)= 5.81 kcal/grs. Cel seca
Los valores de Y dependen del microorganismo y del sustrato metabolizado. En
general los hidrocarburos producen ms calor que las especies parcialmente oxigenadas
(Y(CH4) Y(CH3OH)) y Y(n-alcanos) Y(glucosa). Por lo tanto, con sustratos ms
reducidos, hay necesidad de mayor remocin de calor en el biorreactor.
Lechos empaquetados
Los reactores de lecho empaquetado se utilizan con biocatalizadores inmovilizados o
en forma de partculas. El reactor consiste en un tubo, generalmente vertical, relleno
empaquetado con partculas de catalizador. El medio de cultivo puede alimentarse por la
parte superior o inferior de la columna y forma una fase lquida continua entre las partculas.
En los lechos empaquetados, el dao debido al desgaste de las partculas es mnimo en
comparacin con los reactores agitados. Los reactores de lecho empaquetado han sido
utilizados a escala comercial con clulas y enzimas inmovilizadas para la produccin de
aspartato y fumarato, la conversin de penicilina a cido 6-aminopenicilnico y en la
resolucin de ismeros de aminocidos.
La transferencia de materia entre el medio lquido y el catalizador slido se facilita
trabajando a caudales elevados de lquido a travs del lecho para lo cual normalmente de
recircula el lquido, tal como se muestra en la figura 8. Para evitar que el catalizador se
arrastre fuera de la columna se colocan pantallas a la salida del lquido. Las partculas
deben ser relativamente incompresibles y capaces de soportar su propio peso en la columna
sin deformarse y obstruir el flujo de lquido.

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Los fermentadores o biorreactores

Figura 8
El medio recirculado debe estar tambin limpio y libre de desechos para evitar el
taponamiento del lecho. La aireacin se realiza generalmente en un recipiente separado, ya
que si se inyectara el aire directamente en el lecho, la coalescencia de las burbujas
producira bolsas de gas y canalizaciones o una distribucin deficiente del flujo. Los lechos
empaquetados no pueden utilizarse en procesos que produzcan grandes cantidades de
dixido de carbono u otros gases que puedan quedar atrapados en el relleno.
Lechos fluidizados
Cuando se hace fluir hacia arriba un lquido sobre un lecho empaquetado de partculas
de catalizador de tamao y densidad apropiados, este se expande debido al movimiento
ascendente de las partculas. Este es el fundamento de operacin de los reactores de lecho
fluidizado, tal como se lo muestra en la figura 9.

Figura 9
Aprovechando que las partculas presentes en el lecho fluidizado estn en continuo
movimiento y no se producen canalizaciones ni atascos en el mismo, el aire puede
introducirse directamente en la columna. Los reactores de lecho fluidizado se usan en el
tratamiento de residuos con arena o un material similar que soporta las mezclas de
poblaciones microbiana. Tambin pueden utilizarse con organismos floculantes en los
procesos de fabricacin de la cerveza o en la produccin de vinagre.

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Los fermentadores o biorreactores

Lecho de goteo
El reactor de lecho de goteo (en ingls, trickle bed) es otra variante de lecho
empaquetado. Como se muestra en la figura 10, el lquido es rociado en forma de "spray"
sobre la parte superior del empaquetamiento y las gotas descienden a travs del lecho en
forma de pequeas corrientes. El aire puede introducirse por la base, y puesto que la fase
lquida no es continua a travs de la columna, el aire o cualquier gas se mueve con relativa
facilidad alrededor del empaquetamiento. Este tipo de reactores se utiliza ampliamente para
el tratamiento aerobio de aguas residuales.

Figura 10
Consideraciones prcticas para la construccin de biorreactores
Los biorreactores industriales para operaciones aspticas se disean generalmente
como recipientes de acero capaces de resistir desde vaco completo hasta presiones de 3
atm a 150-180 C. En los reactores de gran tamao se colocan "bocas de hombre" para
permitir la entrada de trabajadores a su interior y as realizar la limpieza y el mantenimiento
del mismo, mientras que los reactores pequeos se disean con una tapa desmontable. En
los fermentadores a escala de laboratorio se utilizan habitualmente las tapas planas,
mientras que en los reactores de gran tamao se utilizan extremos torisfricos o elpticos.
Los fermentadores de gran tamao estn equipados con mirillas para inspeccionar el
contenido del reactor. Es normal tambin la colocacin en la tapa superior la colocacin de
boquillas para el ingreso de medio de cultivo, antiespumantes y cidos o lcalis, como as
tambin tuberas de salida de gases, manmetros de presin y vlvulas de seguridad para el
caso de emergencias. Tambin es normal la colocacin de sensores de pH, de temperatura
y de concentracin de oxgeno disuelto, as como disponer de una salida, esterilizable con
vapor, para la toma de muestras. El reactor debe poder drenarse completamente mediante
vlvulas ubicadas en el punto ms bajo del reactor. Si el reactor se agita por medios
mecnicos debe instalarse un agitador en la parte superior o inferior del mismo.
Reglas fundamentales
La prctica de un buen diseo incorpora varias reglas fundamentales. Estas reglas
estn dirigidas especialmente al trabajo asptico, es decir a mantener el proceso de
fermentacin libre de contaminacin.
Cuando se trata con organismos patgenos aparecen problemas adicionales, porque
el diseo debe contemplar la necesidad de contener esos organismos. Los microorganismos
son una fuente rica en protena, mucha de las cuales resultan extraas al cuerpo humano.

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Los fermentadores o biorreactores

La inhalacin de grandes dosis de microorganismos, normalmente producir una reaccin
en la mayora de los humanos.
En consecuencia se debern extremar los cuidados a fin de evitar cualquier
procedimiento o diseo que permita un escape de suspensin o aerosol de microorganismos
fuera del fermentador.
Las reglas a tener en cuenta son:
a.- No hacer conexiones directas entre partes estriles y no estriles del sistema. Las
bacterias tienen posibilidades de desarrollar dentro de vlvulas cerradas.
b.- Minimizar las conexiones bridadas. Debido a posibles vibraciones y a expansin trmica
de los equipos, las conexiones bridadas se mueven y pueden dar lugar a entrada de los
contaminantes.
c.- Dentro de lo posible, se debe usar construcciones soldadas y asegurarse de pulir bien
todas las soldaduras, de modo que no se acumulen slidos del medio que puedan resistir la
esterilizacin.
d.- Evitar los espacios muertos, cavidades y similares. Los slidos pueden acumularse en
ellos y convertirse en un ambiente aislado donde los contaminantes escapen a la
esterilizacin.
e.- Asegurarse que varias partes del equipo puedan esterilizarse en forma independiente.
f.- Todas las conexiones del recipiente debern estar provistas de sellos de vapor.
g.- Usar vlvulas que sean fciles de limpiar, mantener y esterilizar. Por ejemplo vlvulas
esfricas, a diafragma y globo con vstago no elevable.
h.- Mantener una presin positiva en el fermentador de forma tal que siempre pierda hacia
fuera. (Esto no es aplicable con los patgenos).
El tamao del recipiente depende de las siguientes consideraciones:
a.- Capacidad total diseada para la fermentacin.
b.- La importancia del riesgo de prdidas costosas cuando se contamina un fermentador
muy grande.
c.- La capacidad de fabricacin del constructor, en lo referente al montaje in situ vs. El
transporte. En la actualidad se construyen recipientes de 200 m3 o ms.
Requerimientos de Potencia en Fermentadores Agitados
Sistemas no aereados: Fludos newtonianos
La mayora de los medios de fermentacin exhiben caractersticas newtonianas antes de ser
inoculados, no obstante despus de un crecimiento sustancial, la biomasa y la
transformacin que ella hace sufrir al medio ( degradacin de compuestos, produccin de
metabolitos) confieren a las suspensiones en fermentacin, propiedades reolgicas muy
diferentes de las del medio inicial. Las modificaciones son ms pronunciadas cuando se
tratan de organismos filamentosos que liberan polisacridos durante el crecimiento.
Las variables que caracterizan el comportamiento dinmico del fermentador son las
siguientes:
1- Variables que caracterizan la geometra:
D: Dimetro del biorreactor [L]
Di: Dimetro del agitador [L]
HL: Altura del lquido [L]
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l: Ancho de los bafles [L]
Li: Altura de las paletas de las turbinas [L]
Hi: Ancho de las paletas de las turbinas [L]
2- Variables que caracterizan el fludo que se agita:
: densidad [M. L-3]
: viscosidad [M.L-1.T-1]
: tensin superficial [M.T-2]
3- Variables cinemticas y dinmicas:
P: Potencia absorbida por el agitador, que se desa evaluar [M.L2.T-3]
N: velocidad de agitacin [T-1]
g: aceleracin de la gravedad

HL

Hi
Li
Di
H2

D
En el esquema se pueden observar las dimensiones caractersticas de un Biorreactor de
Tanque agitado con agitador tipo Rushton. Las dimensiones caractersticas se dan a
continuacin:
D/Di = 3

H2/Di = 1

HL/D = 1

Li/Di = 0.25

Hi/Di = 0.25

l/D = 0.1

La agitacin queda definida por:

f(D, Di, HL, l, Li, Hi, , , , P, N, g)= 0
Se tiene adems los siguientes nmeros adimensionales:

14

Los fermentadores o biorreactores

Re= . N . Di2/ nmero de Reynolds (fuerzas inerciales/fuerzas viscosas)
Np= P/ ( . Di5 . N3 ) nmero de potencia (fuerzas externas/fuerzas inerciales)
La curva que expresa las variaciones de Np en funcin de Re, para un determinado
tipo de agitador se denomina curva de potencia. En la Figura 11 se dan curvas
caractersticas.

Figura 11
En los procesos a gran escala, frecuentemente es necesario multiplicar el nmero de
impulsores a los efectos de proveer potencia suficiente para lograr la absorcin deseada de
oxgeno
De acuerdo al tamao del fermentador sern necesarios ms de un agitador. Este
nmero est dado por
(HL - Di) / Di Ni (HL - 2 Di) / Di
En la que Ni es el nmero de agitadores a instalar.
El espaciado apropiado en general, est dado por la siguiente relacin:
Di Hi 2 Di
Siendo Hi, el espaciado existente entre los impulsores.
La potencia que se consume es proporcional al nmero de agitadores. Los datos que
se muestran el la Figura 11 representan la conducta de un biorreactor agitado con un solo
impulsor. Usando un diseo de fermentador estndar, Fukuda y otros (1968), encontraron
una relacin entre el nmero de potencia con un agitador y el nmero de potencia para N i
impulsores. (Figura 12).

15

Los fermentadores o biorreactores

Figura 12
Sistemas aireados: Fludos newtonianos
La aireacin, involucra una disminucin de la potencia necesaria para la agitacin. Se
define el nmero de aireacin: Na.
Na= Qa / (N. Di3)
Donde Qa es el caudal de aire [m3/seg].
Existe una relacin para cada tipo de agitador dada por:
Pg / P = f (Na)
en la cual Pg representa la potencia que se consume por el agitador en las condiciones
de aereacin y agitacin definidas por Na.
Operacin asptica
La mayora de las fermentaciones aparte de las de la industria de la alimentacin y
bebidas se realizan utilizando cultivos puros y condiciones aspticas. El mantenimiento del
reactor libre de organismos no deseados es especialmente importante en cultivos de
crecimiento lento, los cuales pueden verse invadidos rpidamente por contaminantes. Los
fermentadores deben ser capaces de operar aspticamente durante varios das, algunas
veces, incluso meses.
Generalmente, entre 3-5% de las fermentaciones realizadas en plantas industriales se
pierden debido a fallos en el proceso de esterilizacin. Sin embargo, la frecuencia y causas
de la contaminacin difiere considerablemente de un proceso a otro.
Por ejemplo, la naturaleza del producto en las fermentaciones de antibiticos
proporciona cierta proteccin contra los contaminantes, de manera que menos del 2% de los
16

Los fermentadores o biorreactores

mismos se pierden debido a contaminaciones por microorganismos. Por el contrario, en la
produccin a escala industrial de -interfern de fibroblastos humanos cultivados en
biorreactores de 50 litros se ha encontrado una contaminacin del 17%.
Los fermentadores industriales estn diseados para la esterilizacin "in situ" con
vapor a presin. El reactor debe disponer de un nmero mnimo de estructuras internas,
puertas, boquillas y otros accesorios, que aseguren que el vapor alcance a todas partes del
equipo. Para que la esterilizacin sea efectiva, todo el aire del recipiente y de las tuberas de
conexin debe ser desplazado por vapor. El reactor debe estar libre de grietas y zonas
estancas donde puedan acumularse lquidos o slidos, por lo que normalmente se utilizan
soldaduras pulidas como mtodos de unin.
Tras la esterilizacin, todo el medio nutriente y el aire que entra al fermentador debe
ser estril. Tan pronto cuando se para el flujo de vapor, se introduce aire estril con el fin de
mantener una ligera presin positiva en el reactor y evitar la entrada de los contaminantes
existentes en el medioambiente. A su vez se colocan filtros que previenen el paso de
microorganismos en las lneas de salida de gases. Esto permite mantener el cultivo dentro
del fermentador y previene de la contaminacin que se producira en caso de un descenso
de la presin de operacin.
El flujo de lquidos y gases desde y hacia el fermentador se controla por medio de
vlvulas. Puesto que las vlvulas son un potencial foco de contaminantes, su construccin
debe ser apta para la operacin asptica. Los diseos comunes de vlvulas exclusa y globo,
tienden a presentar fugas alrededor del vstago de la vlvula y acumulan slidos del cultivo
en el mecanismo de cierre. Aunque estas vlvulas se utilizan en la industria de la
fermentacin, no son aconsejables si se necesita un elevado nivel de asepsia. Para ello se
recomiendan las vlvulas de estrangulamiento y de diafragma. Estos diseos utilizan
mangas flexibles o diafragmas de manera que el mecanismo de cierre est aislado del
contenido de la tubera y no existen espacios muertos en la estructura de la vlvula. Como
cierre de la vlvula se utiliza goma o neopreno, capaces de aguantar repetidos ciclos de
esterilizacin. El mayor inconveniente que presenta este tipo de vlvulas es la necesidad de
revisar regularmente estos componentes. Si se desea minimizar costos en la construccin
de fermentadores, es ventajosa la utilizacin de vlvulas tipo esfrico.
En reactores agitados, otro potencial punto de entrada de contaminantes es la unin
entre el eje del agitador y el reactor (prensa estopa). El espacio existente entre el eje del
agitador y el espacio del reactor debe estar sellado. Si el fermentador opera durante largos
perodos de tiempo, el desgaste de las juntas facilita la entrada de contaminantes. Para
prevenir este tipo de contaminacin se han diseado varios tipos de cierre del agitador. En
los fermentadores de gran tamao se utiliza normalmente cierres mecnicos. En estos
dispositivos, una parte del ensamblaje permanece estacionaria mientras que la otra gira
sobre el eje. Las superficies de ambos componentes, realizadas con mquinas de precisin,
se presionan mediante muelles o fuelles de expansin y son enfriadas y lubricadas con
agua. Los cierres mecnicos construidos con carburo de silicio y carburo de tungsteno, son
especialmente indicados para su utilizacin en los fermentadores. Los cierres del agitador
son especialmente un punto crtico del reactor, especialmente si este tiene su entrada por la
parte inferior. En este caso debera instalarse un cierre mecnico doble para evitar fugas. En
los recipientes pequeos pueden utilizarse mecanismos de transmisin magnticos para
acoplar el eje del agitador y el motor, de manera que el eje no perfore el recipiente. Con este
dispositivo puede transmitirse potencia suficiente para agitar recipientes de hasta 800 litros.
Sin embargo, la utilidad de los agitadores magnticos es bastante limitada para cultivos
viscosos, especialmente cuando se necesitan elevadas velocidades de transferencia de
oxgeno.

17

Los fermentadores o biorreactores

Inoculacin y muestreo del fermentador
En el diseo del fermentador debe tenerse en cuenta la necesidad de inoculacin y
recogida de muestra de manera asptica. El inoculo de reactores de gran tamao procede
de reactores mas pequeos. Con el fin de evitar la contaminacin durante dicha operacin,
ambos recipientes se mantienen a presin positiva de aire. El mtodo de transferencia
asptica ms sencillo consiste en presurizar el recipiente que contiene el inoculo con aire
estril, de manera que el cultivo es arrastrado hacia el fermentador grande.

Figura 13
En la figura 13 se muestra un ejemplo del sistema de tuberas y conexiones de
vlvulas que se necesitan para el traspaso. El fermentador y sus tuberas, y el tanque que
contiene el inoculo y sus tuberas incluyendo las vlvulas H e I, se esterilizan por separado
antes de aadir el cultivo al tanque del inoculo. Con las vlvulas H e I cerradas, el recipiente
pequeo se une al fermentador mediante las conexiones A y B. Dado que estas conexiones
estn abiertas antes de ser unidas, estas deben esterilizarse antes de abrir el tanque de
inoculo. Con las vlvulas D, H, I y C cerradas, y con las vlvulas A y B ligeramente abiertas,
el vapor fluye a travs de E, F y G, saliendo lentamente por A y B. Tras 20 minutos de
esterilizacin con vapor se cierran las vlvulas E y G y los conectores A y B, por lo que la
ruta desde el tanque del inoculo hasta el fermentador se encuentra esterilizada. Se abren las
vlvulas D y C para que fluya aire estril al fermentador y mantener as la lnea bajo presin
positiva. Entonces se cierra la vlvula F y se abren las vlvulas H e I y se usa aire estril
para forzar el contenido existente en el tanque del inoculo a entrar al fermentador. La lnea
que conecta los recipientes se vaca de la mayora del lquido residual soplando con aire
estril. Posteriormente se cierran las vlvulas D, C, H e I, con el fin de aislar el fermentador y
vaciar el tanque del inoculo que ahora puede desconectarse en los puntos A y B.
Para recoger caldo para anlisis se colocan en los fermentadores lugares de
muestreo. En la figura 14 se presenta una posicin tpica de muestreo que mantiene el
carcter asptico del proceso.
Inicialmente la vlvula A est cerrada, mientras que las vlvulas B y C estn abiertas con el
fin de mantener una barrera de vapor entre el reactor y el ambiente exterior. Entonces se
cierra la vlvula C, se cierra parcialmente la vlvula B para permitir que el vapor y el
condensado fluyan a travs de la puerta de muestreo. Para el muestreo se abre durante un
breve instante la vlvula A para enfriar la tubera y extraer cualquier condensado que
pudiera diluir la muestra y posteriormente se descarga el caldo.

18

Los fermentadores o biorreactores

Figura 14
Materiales de construccin
Los fermentadores se construyen con materiales que puedan soportar repetidos ciclos
de limpieza y esterilizacin con vapor. Los materiales que se encuentran en contacto con el
caldo y los medios de fermentacin deben ser no reactivos y no absorbentes. Para construir
fermentadores de hasta 30 litros de capacidad se utiliza el vidrio. Las ventajas del vidrio son
varias: es liso, no txico, resistente a la corrosin y transparente, lo que permite una rpida
inspeccin del contenido del recipiente. Puesto que se necesitan vas de entrada para el
medio, el inoculo, el aire y para los diferentes instrumentos de medicin como los sensores
de pH y de temperatura, los fermentadores de vidrio se equipan generalmente con tapas de
acero inoxidable que permiten la colocacin de juntas y uniones de manera segura y
sencilla.
La mayora de los fermentadores a escala piloto y a gran escala se construyen en
acero inoxidable resistente a la corrosin (AISI 316), aunque tambin se han utilizado acero
dulce revestido de acero inoxidable. Para la camisa y otras superficies aisladas del caldo
puede utilizarse acero inoxidable de menor calidad.(AISI 304). En todas las partes del
fermentador que entran en contacto con el cultivo debe evitarse el cobre y materiales que lo
contengan debido a su efecto txico sobre las clulas. Las superficies interiores de acero
estarn pulidas a espejo para facilitar la limpieza y esterilizacin del reactor y las
soldaduras se nivelan antes de ser pulidas. En todos los casos se preferir el electropulido
al pulido mecnico.
Diseo del difusor
El difusor, los rodetes y los deflectores determinan la eficacia de la mezcla y de la
transferencia de oxgeno en los biorreactores agitados. En los biorreactores se utilizan
normalmente tres tipos de difusores: porosos, de orificio y de boquilla. Los difusores porosos
de vidrio, cermica o metal sinterizado se utilizan en aplicaciones a pequea escala, ya que
el gas que puede atravesarlos es limitado debido a la gran resistencia al flujo que ofrece
este tipo de difusores. Un problema aadido puede ser el crecimiento de clulas en los
pequeos orificios que puede llegar a bloquear el difusor. Los difusores de orificio, tambin
conocidos como tuberas perforadas, estn constituidos por pequeos agujeros realizados
en la tubera, la cual se coloca dentro de un anillo o atravesada en la base del reactor. En
este difusor, los agujeros deben ser lo suficientemente grandes como para minimizar los
taponamientos. Los difusores de orificio se han utilizado en produccin de levaduras y
protenas de seres unicelulares as como en el tratamiento de residuos. Los difusores de
boquilla se utilizan en muchos biorreactores agitados tanto a escala de laboratorio como a
escala de produccin. Estos difusores consisten en una nica tubera abierta o semiabierta
que proporciona una corriente de burbujas de aire. Las ventajas que representa este difusor,
19

Los fermentadores o biorreactores

son la baja resistencia al flujo de gas y el mnimo riesgo de taponamiento. Tambin se han
desarrollado otros diseos diferentes de difusores. En los difusores eyector-inyector de dos
fases, el gas y el lquido se bombean simultneamente a travs de una boquilla para
producir pequeas burbujas. En los diseos combinados difusor-agitador construidos para
los fermentadores de menor tamao, se utiliza un eje de agitador hueco para la salida del
aire. Independientemente del diseo del difusor, ste debe tener en cuenta la posibilidad de
realizar la limpieza del interior de la tubera in situ.
Mezclado
El mezclado es una operacin fsica que hace al fluido ms uniforme, eliminando
gradientes de concentracin, temperatura y otras propiedades.
El mezclado incluye:
i. Combinacin de los componentes solubles del medio, como los azcares
ii. La dispersin de gases, como el aire, cuando atraviesa el lquido en pequeas
burbujas
iii. El mantenimiento de la suspensin de partculas slidas, como las clulas
iv. Donde es necesario, la dispersin de los lquidos inmiscibles para formar una
emulsin o suspensin de gotas finas
v. La mejora de la transmisin del calor hacia o desde el lquido
El mezclado es una de las operaciones ms importantes en el bioprocesado. Para
crear las condiciones ambientales ptimas para la fermentacin, los biorreactores deben
proporcionar a las clulas acceso a todos los substratos, incluyendo el oxgeno en los
cultivos aerobios. No es suficiente con llenar el fermentador con el medio rico en nutrientes,
ya que a menos que el cultivo se encuentre bien mezclado se formarn zonas sin nutrientes
en aquellos puntos de mayor consumo por parte de las clulas. Este problema aumenta si la
mezcla no mantiene en suspensin uniforme la biomasa.
La mezcla se puede alcanzar de diferentes maneras, siendo la ms comn en el
bioprocesado la agitacin mecnica mediante el rodete.
Equipo de mezcla
Los tanques agitados se construyen generalmente de forma cilndrica con la base
conformada de tal manera de eliminar esquinas y cavidades donde las corrientes del fluido
no puedan penetrar y propiciar la formacin de regiones estancadas.
La mezcla se alcanza utilizando un rodete instalado sobre el fondo del tanque. El
efecto rotatorio del rodete consiste en bombear el lquido y crear un flujo regular. El lquido
es empujado fuera del rodete, circula a travs del reactor y peridicamente regresa a la
regin del rodete. Para que exista una mezcla eficaz con un solo rodete, la profundidad del
lquido en el tanque no debe ser superior a 1.0-1.25 veces el dimetro del mismo.
Los deflectores, que son lminas metlicas unidas a la pared del tanque por medio de
soportes, reducen los vrtices del lquido. Para prevenir la formacin de vrtices,
generalmente es suficiente colocar cuatro deflectores regularmente espaciados. La anchura
ptima de los deflectores depende del diseo del rodete y de la viscosidad del fluido, pero es
del orden de 1/10 a 1/12 el dimetro del tanque. Para lquidos de baja viscosidad, los
deflectores se colocan perpendiculares a la pared del tanque, tal como se muestra en la
figura 15(a). Los deflectores tambin pueden montarse separados de la pared a una
distancia de 1/50 el dimetro del tanque o formando un ngulo, tal como se muestra en la
figura 15(b y c). Estas disposiciones evitan la sedimentacin y la formacin de zonas
estancadas al lado de los deflectores durante la mezcla de suspensiones viscosas de
clulas.

20

Los fermentadores o biorreactores

Figura 15
En la figura 16 se muestran algunos diseos de rodetes aunque existen muchos ms.
Algunos rodetes presentan tambin palas planas; en otros, como las hlices y los tornillos
helicoidales, la pendiente de las palas vara en forma continua.
La eleccin del rodete depende de varios factores, entre los que se destacan la
viscosidad del fluido que se va a mezclar y la sensibilidad del sistema al esfuerzo de corte
(cizalla mecnica).

Figura 16
El rodete ms usado en la industria de la fermentacin es la turbina de disco con 6
palas planas. Este se conoce tambin como turbina Rushton.

21

Los fermentadores o biorreactores

Control de la evaporacin
A los cultivos aerobios se les inyecta aire de manera ininterrumpida. Sin embargo, la
mayora de los componentes del aire son inertes y salen directamente a travs de la lnea de
salida de gases. Si el aire que entra al fermentador se encuentra seco, el agua del medio
est continuamente siendo extrada del mismo y abandona el sistema como vapor. La
prdida de agua por evaporacin durante un perodo de varios das puede ser importante.
Este problema es ms significativo en los reactores agitados por aire, ya que los caudales
de gas para una mezcla y transferencia de materia adecuadas es generalmente mayor que
en los reactores agitados mecnicamente.
Para evitar problemas de evaporacin, el aire inyectado en los fermentadores puede
humectarse previamente hacindolo burbujear a travs de columnas de agua situadas fuera
del fermentador. De esta manera el aire hmedo que entra al fermentador tiene menos
capacidad de evaporacin que el aire seco. Los fermentadores pueden equiparse tambin
con condensadores de agua fra para retornar al caldo cualquier vapor arrastrado en el gas
de salida. La evaporacin puede ser importante cuando se trabaja con productos o
substratos ms voltiles que el agua. Por ejemplo, las especies Acetobacter se utilizan para
producir cido actico a partir de etanol en un proceso altamente aerobio que requiere
grandes cantidades de aire. Para reactores agitados operando con caudales de aire de 0,51,0 v v m (volmenes de aire por volumen de medio y por minuto) se ha encontrado que
partiendo de una concentracin inicial de alcohol del 5% se pierde el 30-50% del substrato
en 48 horas debido a la evaporacin.
Monitorizacin y control de los biorreactores
El ambiente existente en el interior de los reactores debe permitir una ptima actividad
cataltica. Parmetros como la temperatura, el pH la concentracin de oxgeno disuelto, la
velocidad del agitador y la velocidad de difusin de aire tienen un importante efecto sobre el
rendimiento de la fermentacin y sobre las reacciones enzimticas. Para proporcionar un
ambiente adecuado, las propiedades del sistema deben estar monitorizadas y as poder
controlar cualquier desviacin de los valores deseados. En la industria de la fermentacin
existen varios niveles del control de proceso. El ms simple es el control manual, que
requiere un operador humano para manipular dispositivos como bombas, motores y
vlvulas. El control automtico se utiliza para mantener los parmetros en sus valores
prefijados. Debido al aumento del uso de computadoras en la industria de la fermentacin es
posible utilizar estrategias avanzadas de control y optimizacin basadas en modelos
matemticos de fermentacin.
CAMBIO DE ESCALA
En general, scale-up (cambio de escala) est asociado con la transferencia o
mejoramiento de los procesos obtenidos en el laboratorio a escala industrial. Es conocido
que en la industria qumica y farmacutica, los procesos comerciales se realizan en base a
datos experimentales.
En la industria qumica, en la dcada del 1930 los cambios se realizaban en un
incremento individual que no deba pasar un factor de 10. No obstante en la actualidad, se
han utilizado factores mayores.
En la industria fermentativa, los reactores con los mayores volmenes se encuentran
en la produccin de antibiticos, fermentacin alcohlica y planta de tratamiento de
efluentes.
El propsito del cambio de escala es la seleccin de las condiciones de diseo y de
operacin para asegurar que el efecto de las diferentes variables sobre el proceso es el
mismo en unidades de diferentes tamaos. El objetivo es obtener similares rendimientos con
la misma calidad de producto.
Los caminos que uno puede escoger para aumentar la productividad son:
22

Los fermentadores o biorreactores

Aumentar la escala.
Cambiar la cepa.
Cambiar el modo de operacin de un proceso.
Cambiar el medio de cultivo.
Durante el cambio de escala todas las variables cambian, pero debemos evitar un
cambio en la cintica.
El cambio de escala est asociado con la transferencia de los datos obtenidos en el
laboratorio a escala piloto a la escala industrial. Como una de las formas consista en
aumentar el volumen, veremos como se afectan las siguientes propiedades:
Volumen final

Nmero de
generaciones

Esterilizacin

Dinmica del fluido

Influencia sobre el Nmero de generaciones

Si definimos como bo= biomasa inicial (cfu) y b= biomasa final (cfu)

1 db

b dt
Integrando la ecuacin anterior entre bo y b nos queda la expresin de la biomasa en
funcin del tiempo:
b= bo e.t

o expresado en forma logartmica ln b/bo= t

(1)

Por otra parte sabemos que el tiempo en fase exponencial t puede expresarse en
trminos de tg (tiempo de generacin) y el Ng (nmero de generaciones):
t = Ng tg

(2)

Por otro lado tg= ln 2/

Reemplazando en la ecuacin (2) y despejando Ng
Ng= t / ln2 y de la ec (1) Ng= (ln b/bo ) / ln 2 = (ln b - ln bo ) / ln 2
Pero b = X. V ; donde X= conc. celular en cfu/ml y V= volmen en ml
Ng=( ( ln V.X ) - ln bo ) / ln 2
De la ecuacin anterior podemos ver que el aumento de volmen asociado al cambio
de escala trae aparejado un incremento en el nmero de generaciones.

23

Los fermentadores o biorreactores

Dinmica del fludo
Suponiendo que las condiciones de aireacin que dan la mxima productividad en una
fermentacin especfica han sido establecidas en un fermentador piloto y luego transferidas
al fermentador de escala proceso tiene la misma configuracin geomtrica, el problema se
concentra en estimar la velocidad de aireacin en el gran recipiente y se asume por
simplicidad agitacin no mecnica.
Puesto que las propiedades fsicas del caldo en el fermentador grande son las mismas
que en el de laboratorio, se puede asumir:
(kLa)1 = (kLa)2
Los coeficientes volumtricos de transferencia pueden escribirse en funcin de las
siguientes propiedades:

kl.a

F.H
db

3/ 2

.1 / 2 .V

donde
F= velocidad de flujo de gas
H= altura de lquido
db= dimetro de la burbuja
= velocidad terminal ascendente de la burbuja
V= volmen de lquido
Un criterio muy utilizado en el cambio de escala de procesos aerbicos es utilizar el
mismo coeficiente de transferencia de masa de la escala de laboratorio, de donde
(kLa)1 = (kLa)2
siendo 1= escala de laboratorio
2= escala industrial
Considerando db1 = db2 y 1 =2

kl.a1
(F / V )1 .HL1

1
kl.a 2
(F / V )L 2 .HL 2
Por lo tanto

HL 2
(F / V )1

HL1 (F / V ) 2
Por ejemplo si nuestro equipo industrial es 5 veces ms alto que el de laboratorio:
HL2 = 5 HL1
Reemplazando esta equivalencia en la ecuacin anterior

HL 2
(F / V )1

=5
HL1 (F / V ) 2

y si (F/V)1 = 1 v.v.m

24

Los fermentadores o biorreactores

En el fermentador industrial debemos aplicar una relacin (F/V)2 = 0,2 v.v.m.
Esterilizacin
Una esterilizacin fue corrida a escala piloto en un recipiente de 1000 lts. con un
medio que contena 106 esporas/cm3, requirindose una probabilidad de 1 batch en 1000
esterilizaciones.
Calculemos el factor = ln( No / N)= 34,5
Si se requiere la misma probabilidad de contaminacin en el reactor de 10000 dm 3, y
se parte con un medio que posee la misma carga inicial de esporas, luego
= 36,8
El factor de esterilizacin aumenta con el cambio de escala, lo que hace necesario
conocer el factor de degradacin de los nutrientes para escoger un correcto valor de
temperaturas y tiempos.
Mtodos de Cambio de Escala ms frecuentemente empleados
El cambio de escala de biorreactores geomtricamente semejantes, se lleva a cabo
generalmente por alguno de los siguientes mtodos:
- Igual potencia de agitacin por unidad de volumen.
- Igual coeficiente de transferencia de masa
- Mximo esfuerzo de corte
- Igual tiempo de mezclado
Todos los factores antes mencionados estn relacionados con las variables del
sistema pero de diferentes formas. Los ms comnmente empleados son los criterios
basados en igual potencia de agitacin por unidad de volumen e igual coeficiente de
transferencia de masa.
Potencia por unidad de volumen constante
La potencia suministrada al sistema por la agitacin y aireacin tiene diferentes
efectos sobre la conducta hidrodinmica del sistema y las caractersticas de transferencia de
masa. La relacin P/V determina el valor del nmero de Reynolds el que influye en el grado
de turbulencia y en el coeficiente de transferencia de masa, especialmente en la
transferencia del oxgeno desde las burbujas de gas. Por un lado, la velocidad de agitacin
lineal, NDi, determina el mximo esfuerzo de corte en el tanque como el tamao de las
burbujas.
Cuando el fluido en el tanque es completamente turbulento, el nmero de potencia es
P N3Di5
Como el volumen vara proporcionalmente al Di3, luego
P/V N3Di2
Con la imposicin de igual potencia por unidad de volumen,
N23 Di22 = N13 Di12, de donde

25

Los fermentadores o biorreactores

D
N1 N 2 i2
Di1

2/3

Este mtodo fue empleado en el escalado de la produccin de penicilina. En general,

los fermentadores tenan una potencia de 2 kW/m3, con una velocidad de agitacin
calculada de acuerdo a la expresin antes citada.
Coeficiente Volumtrico de transferencia de masa constante
A menudo es un criterio muy utilizado, ya que en los procesos aerobios es importante
garantizar esta transferencia, aunque no hay garanta de un buen mezclado. Un gran
nmero de correlaciones que relacionan el KLa con la Potencia por unidad de volumen y la
velocidad superficial, han sido relacionadas y presentan la siguiente forma:

k L a k(Pg / V ) x v s y
donde
Pg= potencia en el sistema aireado
V= volumen de lquido en el recipiente
vs= velocidad superficial del aire
k, x, y son factores empricos especficos del sistema bajo investigacin.
Cooper y otros (1944) determinaron kLa en varios recipientes agitados y aireados
(volmenes superiores a 66 dm3) con un solo impulsor usando la tcnica del sulfito y
derivaron en la siguiente expresin:

k L a k(Pg / V ) 0.95 v s 0.67

Puede observarse que los valores de KLa son prcticamente proporcionales a la P g/V.
Sin embargo, Bartholomew (1960), demostr que la relacin dependa del tamao del
recipiente obteniendo la siguiente tabla:
Escala
Laboratorio
Planta piloto
Planta de produccin

Exponente de Pg/V
0.95
0.67
0.5

Los recipientes empleados por Bartholomew contenan ms de un agitador en tanto

que el recipiente empleado por Cooper posea slo uno. Es posible que los agitadores
colocados en la parte superior, consuman ms potencia que los inferiores.

26