PRACTICA N1 COLORIMETRIA FUNDAMENTO TEORICO El anlisis colorimtrico forma parte del anlisis qumico fotomtrico, que se basa en la medicin

de la cantidad de luz absorbida por una solucin coloreada (espectrofotometra, colorimetra) o por una suspensin (turbidimetra) o en la cantidad de luz difundida por una suspensin (nefelometra). En colorimetra, generalmente se usa luz blanca, y las determinaciones se efectan con un colormetro. En el caso que el equipo cuente con una celda fotoelctrica para la medicin el instrumento ser un fotocolormetro.Las tcnicas fotomtricas se fundamentan en la capacidad que tiene la luz de ser absorbida en un determinado medio. En una tcnica fotomtrica, siempre habr una fuente luminosa, un medio que absorba la luz y un artefacto que sea capaz de medir la intensidad de la luz transmitida a travs del medio absorbente.

La base de estas tcnicas de medicin es la variacin de la intensidad del color de una matriz (el medio absorbente). Esta variacin es producida por la cantidad relativa o concentracin de algn componente del sistema. Para el caso la seleccin del color a usar es mediante un filtro. La ventaja de uno respecto del otro est en la seleccin del color que representa una determinada longitud de onda. En el caso del espectrofotmetro se dispone del espectro completo con una vasta gama de longitudes de onda a seleccionar. En el caso del fotocolormetro slo se dispondr de las longitudes de onda incorporadas en el filtro. El espectrofotmetro es un instrumento ms verstil que el fotocolormetro, sin embargo su desventaja est en su costo siendo este sustancialmente ms alto. Cuando llega luz (monocromtica o heterocromtica) a un medio homogneo, una parte de la luz incidente se refleja, otra es absorbida por el medio y el resto es transmitida. Si la intensidad de la luz incidente es I0, la de la luz absorbida Ia, la de la transmitida It y la de la luz reflejada Ir, se tiene: I0 = Ia + It +Ir

Para interfaces aire vidrio, que son las que se tienen al efectuar las determinaciones con cubetas de vidrio, un 4% de la luz incidente se refleja. En la medicin, se puede eliminar Ir empleando una cubeta de comparacin similar; en tal caso: I0 = Ia + It En 1760, Lambert investig la relacin entre I0 e It e It; posteriormente, en 1852, Beer estudi la absorcin de la luz por las soluciones. La espectrofotometra y la colorimetra, se basan en las leyes de Lambert y de Beer. La Ley de Lambert - Beer establece que cuando pasa luz monocromtica por un medio transparente, la disminucin de la intensidad, con el espesor del medio, es proporcional a la intensidad de la luz, lo que equivale a decir que la intensidad de la luz transmitida disminuye exponencialmente al aumentar aritmticamente el espesor del medio absorbente, o que espesores iguales de un mismo medio absorben la misma fraccin de la luz incidente. Se puede expresar esta ley mediante la ecuacin: Log ( I / It) = A = a * b * C Donde: A = absorbancia o densidad ptica a = coeficiente de absorcin (propio de cada sustancia a una determinada longitud de onda) b = espesor de la cubeta de medicin expresada en centmetros C = concentracin del analito La transmitancia, conceptualmente equivalente a la cantidad de luz que sale del medio, se expresa segn la ecuacin: T = It / I0 Reemplazando en la ecuacin de la Ley de Lambert Beer se tiene. A = -Log T

Para fines prcticos, en la cuantificacin de analitos de inters clnico se puede fcilmente llegar a establecer que, en aquellas soluciones que se cumple la Ley de Lambert Beer, la concentracin de la sustancia X comparada contra una solucin de la misma sustancia X en concentracin conocida (estndar) estar definida por: Cx / Ax = Cstd / Astd Despejando Cx queda: CX = Cstd *AX / Astd.

En trminos generales, el colormetro es el dispositivo que permite la cuantificacin de un color y permite su comparacin con otro. Una vez hecha la cuantificacin, el valor numrico asignado al color estudiado permitir su adecuada clasificacin en la escala de colores. Funciones del colormetro El colormetro tiene tres funciones especficas, que son: 1. Determinar el valor numrico de un color. 2. Llevar a cabo una comparacin entre colores. 3. Establecer la intensidad y los matices del color estudiado. Aplicaciones del colormetro Entre las principales aplicaciones del colormetro se encuentran: - Clasificacin de colores. - Pruebas de absorbancia. - Correccin de errores en monitores y pantallas. - Calibracin de colores de impresoras. - Caracterizacin de polmeros en base a su color. - Anlisis de concentraciones qumicas.

EQUIPOS Y MATERIALES Colormetro Fiolas Vasos de precipitado

SUSTANCIAS Solucin madre de permanganato de potasio KMnO4 de concentracin molar de 5X10-4 Preparar disoluciones, segn criterios de los alumnos operadores.

PROCEDIMIENTOS Realizar clculos para la preparacin de la solucin madre y las diluciones Calibrar la balanza Preparar la solucin y las diluciones Realizar lecturas en el comparador primero con la solucin madre y el solvente Realizar comparaciones con la solucin madre y las disoluciones preparadas

CALCULOS

Preparacin de la solucin madre PMKMnO4=158 158------------------1M-----------------1000ml X--------------------0.001M------------100ml X=0.00158g

Hallando las nuevas concentraciones que fueron diluidas

Solucin problema 28.5 28.6 28.8 28.9

patrn 14.0 14.9 13.5 14.95

10-3x14=28.5 x C1 C1=4.91x10-4 10-3x14.9=28.6 x C2 C2=5.20x10-4 10-3x13.5=28.8 x C3 C3=4.68x10-4 10-3x14.95=28.9 x C4 C4=5.17x10-4

CONCLUSIONES Las concentraciones halladas a partir de la solucin madre fueron disminuyendo conforme se hizo las diluciones. Diferentes sustancias qumicas absorben diferentes frecuencias de luz. Los colormetros se basan en el principio de que la absorbancia de una sustancia es proporcional a su concentracin, y es por eso que las sustancias ms concentradas muestran una lectura ms elevada de absorbancia. Se usa un filtro en el colormetro para elegir el color de luz que ms absorber el soluto, para maximizar la precisin de la lectura.

BIBLIOGRAFIA http://quimica.ugto.mx/revista/TallerBasicoUvVis.pdf http://bioquibi.webs.ull.es/practicas/2.pdf http://www.panreac.es/spanish/practicas/p29.pdf http://www.quiminet.com/articulos/el-analisis-de-color-colorimetria-y-colorimetro2704601.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Color%C3%ADmetro

PRCTICA N 02 ESPECTROMETRIA VISIBLE FUNDAMENTO TEORICO La tcnica de la espectrofotometra UV-vis se aplica fundamentalmente a lquidos y disoluciones, aunque tambin a gases. Como el disolvente influye en la longitud de onda de las bandas, es muy importante elegir el ms adecuado en cada caso; lo ideal es que este no absorba en la regin de inters. Algunos hidrocarburos saturados (como el hexano), as como el metanol, el ter dietlico o el agua, solo absorben a muy bajas longitudes de onda, en el UV lejano. El tetracloruro de carbono, que es un buen disolvente de compuestos orgnicos, no es recomendable en esta tcnica porque presenta una banda de absorcin a 257 nm que puede interferir. La muestra se introduce en celdas o cubetas fabricadas, generalmente, de cuarzo (para la regin UV) o de plstico o vidrio (para la visible), pues estas especies no absorben en esas zonas del espectro electromagntico (si el vidrio comn absorbiera en el visible, al mirar a travs de un cristal incoloro los objetos no se veran del color que tienen). Habitualmente, para lquidos se emplean celdas de 1 cm de anchura como las que se muestran en la figura siguiente. Las de gases son bastante ms anchas para compensar su menor concentracin; efectivamente, al aumentar la longitud del camino ptico que ha de recorrer la radiacin, esta podr excitar a ms molculas. Los instrumentos UV normalmente permiten registrar el espectro entre 200 y 380 nm mediante ptica de cuarzo, es decir, empleando este material en todo el sistema ptico. Los componentes atmosfricos O2, H2O y CO2 son transparentes en esa regin. Pero si se desea obtener el espectro entre 10 y 200 nm (intervalo en el que s absorben estos gases), la cmara de muestras del instrumento debe estar preparada para poder hacer el vaco en su interior; por eso, dicha regin se conoce como de UV de vaco. Otra opcin es purgar la cmara con un gas no absorbente que desplace a los dems.

El espectrmetro UV-visible Para obtener el espectro UV-visible, la muestra se ha de colocar en el lugar adecuado para que la radiacin procedente de una fuente y seleccionada por un monocromador o un sistema de filtros pase a su travs. Parte de la radiacin de cada longitud de onda la absorber la muestra y parte se transmitir. Un detector medir la potencia de la radiacin transmitida para cada longitud de onda. El conjunto de estos elementos, junto con el resto de dispositivos pticos necesarios para conducir la radiacin, constituye un espectrmetro UV-visible (ver la siguiente figura). La representacin de la absorbancia medida por el detector frente a la longitud de onda es el espectro UV-visible.

Existen dos tipos de aparatos: de un solo haz y de doble haz (como el de la figura anterior). En los de un solo haz el detector mide primero los valores de potencia transmitida, P, para cada longitud de onda cuando en la cmara de muestra se coloca simplemente una cubeta vaca o llena de un blanco (el disolvente, por ejemplo); despus mide la potencia transmitida por la muestra, P, para cada longitud de onda. Un ordenador efecta el cociente entre ambos valores para cada , calcula el logaritmo de este cociente y as obtiene la diferencia de absorbancias entre el sistema muestra+disolvente y el disolvente solo, es decir, da la absorbancia debida solo al analito disuelto. Lo justifica la siguiente demostracin matemtica:

Este modo de proceder ofrece la ventaja adicional de que no es necesario medir la potencia de la fuente, P0, con lo que se evita el problema de las fluctuaciones a las que suele estar sometida. En los espectrmetros de doble haz el haz de radiacin producido por la fuente se divide en dos mediante algn dispositivo ptico como un divisor de haz o un semiespejo. Este refleja la mitad de la radiacin que le llega y deja pasar a su travs la otra mitad. Una de las mitades se dirige hacia la cubeta donde se halla la referencia y la otra va a la que contiene la muestra. Dos detectores miden las potencias de las radiaciones que salen de ambas cubetas. Esto permite calcular la absorbancia de la muestra, como se acaba de explicar. Otros instrumentos cuentan con un solo detector, pero van equipados con un espejo de sectores o un cortador ptico cuya funcin es dirigir alternativamente el haz a la referencia y a la muestra. Fuentes y detectores Como fuentes se suelen emplear lmparas de deuterio o de hidrgeno, que emiten por excitacin elctrica radiacin UV continua desde 160 a 400 nm, o, para la zona del visible, una lmpara incandescente de filamento de wolframio al que se mezcla una pequea cantidad de yodo, lo que mejora sus propiedades. Puede usarse el mismo instrumento para las dos regiones con solo cambiar de fuente. Tambin se suelen emplear lmparas de arco de xenn, que producen un espectro de radiacin continua que cubre la regin UV entre 200 y 380 y toda la visible. En cuanto al detector, para la regin visible puede usarse una clula fotovoltaica dentro de la cual se genera una corriente elctrica proporcional al nmero de fotones que recibe. Para la regin UV se emplean fototubos de vaco o, si se han de medir potencias pequeas, una variedad de ellos que se llama tubo fotomultiplicador. Este dispositivo, como su nombre indica, multiplica el efecto de cada fotn que le llega. Es muy sensible en ambas regiones pero las radiaciones muy potentes lo daan. Se usan cada vez ms los detectores de matriz de diodos. Contienen centenares o miles de pequeos detectores llamados fotodiodos, cada uno de los cuales registra una longitud de onda determinada, por lo que el

espectro se obtiene de una vez (en un tiempo del orden de un segundo). En la figura siguiente se ilustra cmo se dirige toda la radiacin mediante un elemento dispersante a

una matriz de diodos.

Fotmetros, espectrofotmetros y colormetros Existe discrepancia o confusin a la hora de dar nombre a los distintos aparatos que se emplean en espectroscopa UV-visible. Siguiendo el criterio de Skoog (2001), los instrumentos formados simplemente por una lmpara (habitualmente de wolframio), un filtro para seleccionar la longitud de onda (comnmente de gelatina de diversos colores) y un detector adecuado que responda a la regin de inters (clula fotovoltaica si es en el visible) se deben llamar fotmetros. Y los que tienen algn tipo de monocromador, espectrofotmetros. La principal diferencia entre unos y otros es que los fotmetros solo permiten seleccionar algunas longitudes de onda, mientras que con los espectrofotmetros puede hacerse un barrido de longitudes de onda dentro de un cierto intervalo (por ejemplo todo el visible y el UV prximo). Adems, un filtro suele dejar pasar fotones de longitudes de onda dentro de un intervalo 30 o 40 nm mucho mayor que un monocromador (comnmente del orden de 1 nm, aunque pueden alcanzar dos rdenes de magnitud menos). Tambin se puede optar por un filtro de interferencias, que deja pasar radiacin dentro de un ancho de banda de unos 10 nm. Por otro lado, el sistema de deteccin de los espectrofotmetros es ms sensible. La IUPAC, en su Libro Dorado, desaconseja la palabra espectrofotmetro y recomienda usar siempre espectrmetro, denominando espectrmetros de filtros a los que tienen filtros.

Lo que no es aceptable, por ms extendido que est, es llamar colormetros a los espectrmetros de filtro que operan en la regin visible, como suele ser la tendencia de muchos fabricantes (vase en la figura de al ladola imagen de un espectrmetro de filtros rotulado colorimeter). En su acepcin original, un colormetro era un instrumento que hoy da cabe calificar de rudimentario y obsoleto cuya particularidad principal es que el detector es el ojo humano, mediante el cual se compara la intensidad de color de una disolucin problema con disoluciones patrn de concentraciones conocidas para estimar la concentracin. (Se han ideado ingeniosas variantes como el colormetro Duboscq, que permite determinaciones rpidas y sencillas empleando un solo patrn.) La ley de BEER- LAMBERT relaciona la intensidad de luz entrante en un medio con la intensidad saliente despus de que dicho medio se produzca absorcin la relacionase entre ambas intensidades puede expresarse a travs de las siguientes relaciones: Para lquidos:

Para gases:

Dnde: , son las intensidades saliente y entrante respectivamente.

, es la absorbancia, que puede calcularse tambin como: :es la longitud atravesada por la luz en el medio, :es la concentracin del absorbente en el medio. :es el coeficiente de absorcin, e: coeficiente de extincin de cada de cada sustancia

es el coeficiente de absorcin: : es la longitud de onda de la luz absorbida. :es el coeficiente de extincin

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1.3 Instrumentacin para la medicin de absorbancias de la luz visible y ultravioleta: espectrofotmetro UV-visible La medicin de absorbancia de la luz por las molculas se realiza en unos aparatos llamados espectrofotmetros. Aunque pueden variar en diseo, en especial con la incorporacin de ordenadores para el anlisis de datos, todos los espectrofotmetros constan, segn se indica en la figura, de: Una fuente de energa radiante: lmpara de deuterio y tungsteno. Un monocromador para la seleccin de radiaciones de una determinada longitud de onda: filtros, prismas, redes de difraccin. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o tubos) que contenga la muestra Pueden ser de vidrio, cuarzo o plstico transparente. Para medir en UV se deben usar las de cuarzo o slice fundido, porque el vidrio no transmite la radiacin UV. MATERIAL Y EQUIPO Espectrofotmetro para regin Visible Vasos de precipitado de 250 ml Papel secante

SUSTANCIAS Solucin madre de permanganato de potasio de concentracin molar de Preparar disoluciones segn criterios de los alumnas operadores PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL Realizar clculos para la preparacin de la solucin madre y la disolucin Calibrar la balanza Preparar la solucin de las diluciones Realizar lecturas en el equipo utilizado Realizar comparacin con la solucin madre y la dilucin

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Longitud de onda (nm) 470 475 480 485 490 495 500 505 510 515 520 525 530

Absorbancia 0.07 0.145 0.18 0.21 0.23 0.26 0.32 0.37 0.39 0.42 0.49 0.55 0.54

Transmitancia 76 72 66 62 59 55 48.5 43 41 38 32 28 29

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CUESTIONARIO 1.- definir porque se manifiesta el pico ms alto Los picos ms altos indican los valores mximos de A para la concentracin de la solucin empleada durante la prctica. En este caso, se tiene un valor aproximado de 0,31 correspondiente a una = 410 nm. Se puede observar que el valor de A para la ltima medicin (=600nm) es poco congruente con el comportamiento de la curva hasta el punto inmediatamente anterior y presenta una cada brusca, lo que puede deberse a no haber cuadrado el cero de absorbancia para dicha longitud de onda. 2.- explicar por qu se encuentran picos diferentes picos espectrales En la figura 1 se observa que, La curva del centro de la grfica (en azul) es el resultado experimental de la variacin de la absorbancia en funcin de . La presencia de picos y valles en las partes ms bajas Indica que la sustancia no absorbe igual cantidad de radiacin a diferentes longitudes de onda, y que tiene rangos en dicha en donde la absorbancia es mxima

CONCLUSIONES La absorbancia es la capacidad que tiene algunos compuestos para absorber la radiacin electromagntica pudo observar como dependiendo de la concentracin la longitud de onda a la cual se le aplique un rayo puede alcanzar el punto mximo de absorcin Segn esto la longitud de onda y la absorbancia son proporcionales hasta alcanzar el punto mximo y de all empieza a descender en el caso la experimentacin empieza a descender desde 525nm BIBLIOGRAFIA http://practicaslaboratorio08.blogspot.com/2013/04/practica-22-espectrofotometria-de.html http://www.slideshare.net/joselgallego/informe-de-laboratorio-8908350 http://www.espectrometria.com/espectrometra_ultravioleta-visible http://www.basculasbalanzas.com/instrumentos-de-medicion/espectrofotometria-visible.html

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