Biotecnologia 1

Biotecnologa Agroindustrial
Universidad Nacional Intercultural de la Amazonia Pgina 0

Ao de la inversion para el desarrollo rural y la seguridad
alimentaria

FACULTAD DE INGENIERIA Y CIENCIAS AMBIENTALES

BIOTECNOLOGIA AGROINDUSTRIAL

Practica N 1
Aislamientos de Levaduras Productoras de Etanol.

DOCENTE:
Blga. Msc. DIANA CASTILLO LLANOS
ESTUDIANTE:
EINSTEIN PALACIOS MARTINEZ
CICLO:
VI
YARINACOCHA PER
2013

I. INTRODUCCION


Tradicionalmente varias especies del genero Saccharomyces han estado relacionada
con produccin de bebidas alcohlicas, dentro de las que destacan: S. cerevisiae, S.
uvarum, S. carlbergensis, S. bayanus, S. ellipsoideus, S. chevalieri, S. oviformis, S.
italicus, S.capensis, S. vini, S. sake, etc. La taxonoma clsica de las levaduras se
basa en caractersticas morfolgicas, fisiolgicas y bioqumicas como son la forma
de las clulas, la apariencia de los cultivos en medio slidos y lquidos, la tolerancia
a diferentes condiciones de cultivo y la posibilidad de asimilar o fermentar
diferentes sustratos.Con estos criterios surgieron todos estos nombre de levaduras
relacionados con la fermentacin alcohlica, y aunque estas metodologas siguen
siendo muy valiosas y ampliamente utilizadas por los taxnomos, son a menudo
insuficientes para estableces con precisin la filogenia de las levaduras. (Garca,
Quintero, Lpez. 2004)
II. OBJETIVOS
Reconocer las fuentes naturales a partir de las cuales se pueden aislar
levaduras productoras de etanol
Aislar levaduras productoras de etanol a partir de diversas fuentes naturales
III. MARCO TEORICO
Cmo se sabe, la fermentacin es una de las formas que tienen los seres vivientes
para metabolizar carbohidratos y obtener algo de la energa qumica acumulada en
aqullos. El azcar de seis tomos de carbono es transformado en compuestos con
menos carbonos, pero que an podran seguir siendo desmontados. Los productos
de las fermentaciones ms comunes son el etanol y el cido lctico. La eleccin de la
ruta a seguir por el organismo, fermentacin o respiracin, est supeditada entre
otros factores por la presencia de oxgeno o no, y por el equipo enzimtico que aqul
posea (Lehninger, 1987).
Prcticamente todos los seres vivientes estudiados fermentan en algn momento de
sus ciclos de vida. Entre los microorganismos, tal vez el que en medios cientficos y
en el mbito profano el ms conocido como fermentador por excelencia es la
levadura del gnero Saccharomyces que produce alcohol etlico y dixido de
carbono. Pero no es la nica levadura que existe o que fermente y tenga utilidad
industrial (Shurtleff, 2006).
Levadura es un nombre genrico que agrupa a una variedad de hongos, incluyendo
tanto especies patgenas para plantas y animales, como especies no solamente
inocuas sino de gran utilidad. De hecho, las levaduras constituyen el grupo de
microorganismos ms ntimamente asociado al progreso y bienestar de la
humanidad. Algunas especies de levaduras del gnero Saccharomyces son capaces
de llevar a cabo el proceso de fermentacin, propiedad que se ha explotado desde
hace muchos aos en la produccin de pan y de bebidas alcohlicas, y que a su vez
ha inspirado un sinnmero de obras de arte que ensalzan al dios del vino y a aquellos


que disfrutan su consumo. Desde el punto de vista cientfico, el estudio de las
levaduras como modelo biolgico ha contribuido de manera muy importante a
elucidar los procesos bsicos de la fisiologa celular. La fermentacin cambiar
gradualmente las caractersticas de los alimentos por la accin de enzimas,
producidas por algunas bacterias, mohos y levaduras ( Shurtleff, 2006).
El microorganismo responsable de la fermentacin alcohlica y de la produccin
del vino es la levadura Saccharomyces cerevisiae. Las levaduras, de manera general,
son hongos unicelulares, a diferencia de otro tipo de hongos a los que conocemos
como filamentosos o mohos. Sin embargo, biolgicamente, ambos tipos de hongos
(unicelulares o filamentosos) son similares. Las levaduras se multiplican en los
medios de cultivo como clulas aisladas individuales que se dividen y, de esta
forma, aumentan su nmero (Lehninger, 1987).
IV. MATERIALES
Material biolgico:
- Masato

Medio de cultivo:
- Agar sabouraud
- Solucin salina peptonada (SSP)

Material de vidrio:
- Pipetas
- Tubos de ensayo
- Matraz de 250 ml
- Placas Petri
- Mecheros

Equipos:
- Autoclave
- Estufa

V. PROCEDIMIENTO


Obtencin de la muestra:

-En un matraz colocar 250ml de masato.
- Dejar reposar por medio hora hasta observar una capa de sedimento.
- Extraer 5ml del sedimento en un tubo de ensayo esterilizado.

Preparacin de diluciones:
- Trabajar muy cerca al fuego de un mechero
- Con el sedimento extrado realizar diluciones de 10
-1
y 10
-2
.
- Pipetear una gota de las diluciones realizadas y cultivarlo en Agar
Sabouraud
- Dejar reposar a T ambiente por 48 horas.

En nuestro grupo de trabajo (grupo 1)se prepararon las siguientes
muestras:
1 muestra de masato a 10
-1
,en Agar Sabouraud
1 muestra de masato a 10
-2
,en Agar Sabouraud
VI. RESULTADOS
Despus de haber pasado las 48 horas en la estufa lo que se procedi a observar fue
lo siguiente:

VII. DISCUSIN


Garca, Quintero, Lpez. 2004 Afirma que Tradicionalmente varias especies del
genero Saccharomyces han estado relacionada con produccin de bebidas
alcohlicas, dentro de las que destacan: S. cerevisiae, S. uvarum, S. carlbergensis, S.
bayanus, S. ellipsoideus, S. chevalieri, S. oviformis, S. italicus, S.capensis, S. vini, S.
sake, etc. la apariencia de los cultivos en medio slidos y lquidos, la tolerancia a
diferentes condiciones de cultivo y la posibilidad de asimilar o fermentar diferentes
sustratos. En la prctica realizada se observ en el masato una especia de levadura;
Saccharomyce ssp. Comparando con la bibliografa se puede afirmar que realizo
correctamente la prctica.
VIII. CONCLUSION
A travs de esta prctica se logr reconocer las fuentes naturales de las cuales
se pueden aislar levaduras productoras de etanol, en este caso se estudiaron
muestra de masato dando resultados positivos.

Se logr aislar y observar productoras de etanol en nuestro caso solo del
masato en el cual se observ levaduras de la especie Saccharomyces, y con
esto se puede afirmar que se realiz la prctica de manera adecuada.

IX. BIBLIOGRAFIA
Garca Garibay, Quintero Ramrez, Lpez Mungua. Biotecnologa
alimentaria. Noriega editores, Mxico. 2004, Pagina 267.
Lehninger A. Bioqumica. 2da Edicin. Editorial Omega. Barcelona, Espaa.
1987, pp.1117.
Shurtleff W, Aoyagi A. Libros de Tempeh: la fermentacin. Corporacin
tempeh.info. 2006.

X. ANEXOS


ANEXO 1
AGAR SABOURAUD

65 g / 1000 ml Agua destilada

Calculo para 30 ml de Agar Sabuoraud:

1000 ml agua -------------- 65 g AS
30 ml agua -------------- X
X =

= 1.95 g AS.
Autoclave a 15 lb, 121 C durante 15 minutos.
ANEXO 2
SOLUCION SALINA PEPTONADA (SSP)

Agua destilada 1000 ml
Sal 8.5 g
Peptona 1 g
Peptona
1000 ml agua --------------- 1 g peptona
30 ml agua --------------- X
X =

= 0.03 g de peptona
Sal
1000 ml agua ------------- 8.5 g sal
30 ml agua ------------- X
X =

= 0.255 g redondeando = 0.2 gr de sal.

Autoclave a 15 lb, 121 C durante 15 minutos.

ANEXO 3


Esquema general de diluciones de muestra a analizar, y medios de
cultivo en placas Petri

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= 0.255 g redondeando = 0.2 gr de sal.

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