La inmunocromatografía es una técnica común en los sistemas de análisis clínicos porque combina la especificidad y sensibilidad de la técnica de sándwich con resultados rápidos. Se usa para detectar diversos analitos como hormonas, drogas, marcadores cardiacos y tumorales, y antígenos virales en muestras de sangre, orina y saliva. La prueba consiste en una tira de nitrocelulosa con tres zonas donde los anticuerpos capturan y detectan los antígenos en la muestra si están
La inmunocromatografía es una técnica común en los sistemas de análisis clínicos porque combina la especificidad y sensibilidad de la técnica de sándwich con resultados rápidos. Se usa para detectar diversos analitos como hormonas, drogas, marcadores cardiacos y tumorales, y antígenos virales en muestras de sangre, orina y saliva. La prueba consiste en una tira de nitrocelulosa con tres zonas donde los anticuerpos capturan y detectan los antígenos en la muestra si están
La inmunocromatografía es una técnica común en los sistemas de análisis clínicos porque combina la especificidad y sensibilidad de la técnica de sándwich con resultados rápidos. Se usa para detectar diversos analitos como hormonas, drogas, marcadores cardiacos y tumorales, y antígenos virales en muestras de sangre, orina y saliva. La prueba consiste en una tira de nitrocelulosa con tres zonas donde los anticuerpos capturan y detectan los antígenos en la muestra si están
La inmunocromatografía es una técnica común en los sistemas de análisis clínicos porque combina la especificidad y sensibilidad de la técnica de sándwich con resultados rápidos. Se usa para detectar diversos analitos como hormonas, drogas, marcadores cardiacos y tumorales, y antígenos virales en muestras de sangre, orina y saliva. La prueba consiste en una tira de nitrocelulosa con tres zonas donde los anticuerpos capturan y detectan los antígenos en la muestra si están
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USOS CLNICOS DE LA INMUNOCROMATOGRAFA
Es una tcnica muy comn en los sistemas de anlisis a la cabecera del
paciente porque combina la especificidad y la sensibilidad de la tcnica de sndwich con elevada rapidez en mostrar el resultado. Estas tcnicas se emplean para el diagnstico rpido en muestras de sangre, orina, saliva, etc., para detectar numerosos analitos, como hormonas (gonadotropina corinica y lutropina), drogas de abuso, marcadores cardiacos (cTnT y cTnl, CK MB [creatina cinasa MB] y mioglobina), marcadores tumorales (antgeno prosttico especifico [PSA, del ingls prostate specific antigen]), o antgenos virales (VIH).
Consiste en un soporte de plstico sobre el cual se dispone una membrana de nitrocelulosa en que existen tres zonas sucesivas; una primera con un anticuerpo conjugado con una molcula de deteccin, como una partcula de oro, que reconoce el antgeno que se desee detectar, a continuacin, una segunda con un anticuerpo de captura frente a otro eptopo del antgeno y una tercera zona con un anticuerpo frente al anticuerpo conjgado. Al aadir la muestra, esta migra por la membrana de nitrocelulosa e inicialmente entra en contacto con un anticuerpo conjugado. Si existe el antgeno, este se unir al conjugado. Posteriormente contina migrando y arrastra el conjugado hasta una zona en que hay un anticuerpo de captura. En caso de que se encuentre el antgeno unido al anticuerpo conjugado, estos quedaran retenidos en esa zona. La muestra y el resto del anticuerpo conjugado continuaran migrando por la membrana hasta llegar a una tercera zona, donde queda retenido el anticuerpo conjugado por un anticuerpo frente a ste.
Algunos sistemas emplean varios anticuerpos para detectar varios analitos, tal y como ocurre con los equipos para detectar drogas de abuso en orina.
PRUEBA DE INMUNOCROMATOGRAFA
Recientemente se han introducido tcnicas sencillas de inmunocromatografa para la deteccin de antgenos. La prueba se realiza en una pequea tira de nitrocelulosa con tres zonas claves; una, abajo en la que hay anticuerpo de conejo (Ac, IgG) contra el antgeno buscado, marcados con una partcula de oro coloidal (Ac*); en ese lugar se deposita el producto liquido (LCR, orina, etc.).
En la mitad de la tira hay una banda de anticuerpos de conejo (Ac) fijados a la nitrocelulosa dirigidos contra el mismo antgeno y ms arriba otra banda con anticuerpos dirigidos contra las IgG de conejo. Al aadir la muestra en la parte inferior, la reaccin tiene lugar segn el siguiente proceso; si el antgeno buscado est en la muestra reaccionar con los anticuerpos marcados y los complejos Ag Ac*, formados en un contexto fluido, migran hacia arriba por capilaridad y son captados en la segunda zona, en la que se hallan fijados a la nitrocelulosa anticuerpos contra el antgeno (Ac Ag Ac*); all al quedar captados y muy concentrados los complejos inciales, se observa la banda de los anticuerpos marcados con el oro coloidal.
En la tercera zona (superior) hay anticuerpos fijados a la nitrocelulosa, dirigidos contra los anticuerpos de conejo; esta banda es un control para confirmar la correcta migracin de los anticuerpos y debe ser siempre positiva, ya que capta la migracin de los anticuerpos marcados (Ac*), que por su gran exceso siempre estn presentes hayan o no reaccionado previamente con su antgeno.
Prueba de inmunocromatografa para la deteccin de antgeno
Bibliografa
HERNNDEZ, . G. (2010). PRINCIPIO DE BIOQUMICA CLNICA Y PATOLOGA MOLECULAR. BARCELONA (ESPAA): ELSERVIER ESPAA S.I.
PRATS, G. (2005). MICROBIOLOGA CLNICA. BUENOS AIRES (ARGENTINA): PRIMERA EDICIN .