Toma de Muestras de Perros y Gatos

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
MANUAL PRCTICO DE TOMA Y MANEJO DE

MUESTRAS EN PERROS Y GATOS
TRABAJO RECEPCIONAL EN LA MODALIDAD DE:

Trabajo Prctico Educativo
COMO REQUISI TO PARCIAL PARA OBTENER EL TTULO DE
MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

PRESENTA:
Erika Gordillo Cabrera
ASESOR:
MVZ. Nancy Prez Cisneros
VERACRUZ, VER.
JULIO 2010
DEDICATORIAS
A Dios
Por permitirme realizar esta meta , por darle salud a mis seres queridos y
principalme nte por cuidar a mi Pap que est en el cielo apoyndome y dndo me
sus bendiciones en todo momento.
A mi mam Glo ria M. Cabrera Zam udio

Por haberme apo yado desde el inicio de mi carrera, dndome sus bendiciones,
sus conse jos, y por tra nsmitir me su p az y tra nquilidad en los momentos que ms
necesitaba. Por desve larse conmigo, e n mis semanas de exmenes. Gracias
A mis he rma nos Arma ndo, Delia y Glo ria
Por apoyar me desde siempre, por preocuparse siempre por m , por darme sus
consejos.
A mis Tos y p rimos
Por su apoyo a lo largo de mi carrera, y por sus conse jos.
A mi novio Rogelio Calde rn Olmos
Por darme su apoyo, amor y compre nsin, durante mis trabajos, e xmenes etc.
Por siempre decirme si puedes, por ayudarme

a estudiar inm unolog a, por
cuidarme y valora rme.
ii
AGRADECIMIENTOS
A mi asesora Mvz. Nancy Prez Cisneros:

Por ayudarme a rea lizar las tcnicas de cada toma de m uestra,
por preocupa rse
por m trabajo , por haber aceptado ser mi asesora, por estar a
h con su cma ra
cua ndo yo no tra a la m a, por dejar me reali zar las tcnicas y
poder aprender, por
su pacie ncia, apo yo y compre nsin. Y sob re todo a su
perro roco por su
disponibilidad en las tcnicas.
A mis maestros que estuvieron a lo largo de mi car rera.
Al mdico Canseco ( Yopo) por apo yarme e n la presentacin
del trabajo, por
aclarar mis dudas, por su apoyo, y sobre todo enor me paciencia.
A Mvz. Jacque line Pantoja O. (Jackita) por deja rme tomar fo tos a
sus pacientes, y
por dejarme realizar las tcnicas necesarias para este manua l,
tamb in por
proporcionarme info rmacin sobre e l tema.
Al Qumico Francisco J. Lpez Vzque z (Pakito), por de
jarme e ntrar a su
laboratorio y tomar mis fotos. Tambin por ayudar me a
conseg uir el material
iii
adecuado para mis fotos.
A Mvz. Ge naro Cocom P. (Kokis), y a Ren
a tomar las fotos,
incluso por estar en e llas.
por ayudarme
A Rogelio Calder n por apoyarme en todo mome nto.
INDICE GENERAL
Introduccin
Justificacin
Objetivo general
Objetivos especficos
1. Recoleccin, manejo y envo de muestras para hematologa en perros y gatos 4

1.1. Mate rial
1.2. Tcnica vena yugular
1.3. Toma de muestra vena ceflica
11
1.4. Manejo
12
1.5. Envo
12
2. Toma, conservacin y envo de muestra de heces
14
2.1 Material
14
2.2 Tcnica con asa rectal
15
2.3 Conservacin
16
3. Toma de muestra de semen
17
3.1. Mate rial
17
3.2. Tcnica
3.3. Conservacin
17
19
4. Toma, conservacin y envo de muestras en piel
20
4.1. Raspados
20
4 .1.1. Raspado superficial de piel
20
4.1.1.1. Mater ial
20
4.1.1 .2. Tcnica
21
4 .1.2. Raspados profundos de piel
23
4 .1.2.2 . Tcnica
23
23
5. Toma de muestra de cultivo para dermatofitos
26
4.1.2 .1. Material
iv
5.1. Mate rial
26
5.2. Tcnica
5.3. Conservacin
26
28
5.4. Tricograma
5.4.1 Mate rial
5.4.2 Tcnica
29
29
29
6. Examen con lmpara de Word

6.1 Mate rial
6.2 Tcnica
30
30
30
7. Cultivo bacteriano
7.1 Material
7.2 Tcnica
8. Tcnicas de coleccin con hisopos de algodn
8.1 Material
8.2 Tcnica
8.3 Envo
9. Tcnica para muestras en cinta adhesiva
9.1 Material
9.2 Tcnica
9.3 Tincin
10. Obtencin de muestras para citologa
10.1 Aspiracin con aguja fina
10.1.1 Aspiracin de ndulos
10.1.1.1 Mater ial
10.1.1.2 Tcnica
10.2 Aguja fina simple sin aspiracin
10.2.1 Mate rial
10.2.2 Tcnica
10.3 Preparacin de los frotis
10.3.1 Frotis en cruz
10.3.2 Frotis estndar
32
32
33
34
34
35
38
39
39
39
40
41
42
42
42
42
44
44
44
46
46
46
47
48
50
51
51
52
52
55
56
56
60
61
61
62
63
63
64
66
67
67
67
67
69
69
69
71
72
72
74
76
76
10.3.3 Frotis lineales

10.3.4 Impresiones
11. Biopsia de piel (tcnica de sacabocados).
11.1 Preparacin de l sitio
11.2 Biopsia excisional o incis ional vs. Biopsia de perforacin
11.3 Material
11.4 Tcnica
11.5 Envo
12. Ob tencin de muestras para biopsia
12.1 Tcnica
12.2 Tipos de biopsia
12.3 Biopsias escisionales e incisionales
12.4 Biopsia con aguja y con trocar
12.4.1 Mate rial
12.5 Manipulacin de los te jidos y de las biopsias
12.5.1 Muestras lquidas
12.5.2 Muestras histolgicas
12.5.3 Fijacin de la muestra
13. Toma, conservacin y envo de muestras de or ina
13.1 Miccin espontnea
13.1.1 Mate rial
13.1.2 Tcnica
13.2 Cis tocentsis
13.2.1 Mate rial
13.2.2 Tcnica
13.3 Catete rizacin
13.3.1 Mate rial
13.3.2 Tcnica
13.4 Conservacin
14. Obtencin de muestras de cavidades corporales
14.1 Toracocentsis
vi
76
76
79
79
79
81
82
84
14.1.1 Mate rial

14.1.2 Tcnica
14.2 Abdominocentsis
14.2.1 Mate rial
14.2.2 Tcnica
14.2.3 Conservacin
14.2.4 Envo
15. Bib liografas
vii
NDICE DE FIGURAS Y CUADROS

FIGURAS
Figura 1. Agujas
Figura 2. Tubos
Figura 3. Sistema vacutainer
Figura 4. Vena yugular
Figura 5. Vena ceflica
Figura 6. Vena safena
Figura 7. Embrocado
Figura 8. Presin dedo pulgar
10
Figura 9. Puncin con sistema vacutainer
10
Figura 10. Conservacin y envo de la muestra
13
Figura 11. Material, recoleccin de heces
14
Figura 12. Lubricante
16
Figura 13. Toma de muestra
16
Figura 14. Portaobjetos
16
Figura 15.Cubreobjetos
16
Figura 16. Extremo de vagina artif icial bovina, adherida a un tubo estril. 17
Figura 17. Estimulacin del pene
18
Figura 18. Paciente en posic in para eyacular
18
Figura 19. Materia l, raspado de piel
21
Figura 20. Aceite para inmers in
22
Figura 21. Raspado superficial en gato
22
22
Figura 23. Cubreobjetos
23
Figura 24. Observacin al microscopio
23
Figura 25. Presin de la pie l
24
Figura 26. Raspado profundo.
24
Figura 27. Extendido de la muestra
25
viii
25
Figura 29. Un cepillo dental estril puede ser empleado para recolectar pelos. 27
Figura 30. La superf icie del agar es tocada delicadamente con las cerdas del
cepillo.
27
Figura 31. Inoculando el medio cultural
27
29
29
Figura 34. muestra en portaobjetos
29
Figura 35. Lmpara de Wood
30
Figura 36. No se muestra f luorescencia en este paciente
31
Figura 37. Materia l para hisopados
34
Figura 38. Citologa vaginal
36
Figura 39. Hisopado conjuntival
36
Figura 40. Hisopado en mucosa oral
36
Figura 41. Hisopado de odo
36
Figura 42. Hisopado en ano
37
Figura 43. Muestra de mucosa conjuntival
37
Figura 44. Muestra de heces
37
Figura 45. Muestra de citologa vaginal
37
Figura 46. Embrocado
42
Figura 47. Aspirado
42
Figura 48. Liberacin de presin
43
Figura 49. Aspirado para presin
43
43
Figura 51. Frotis en cruz
43
Figura 52. Rasurado
44
44
Figura 54. Puncin de masa
45
Figura 55. Puncin en varias direcciones
45
Figura 56. Expulsin del contenido
45
ix
Figura 57. Frotis en cruz
45
Figura 58. Frotis estndar
47
Figura 59. Frontis lineal
48
Figura 60. Se t raza un cuadrado alrededor de la muestra para biopsia 53

Figura 61. El anestsico local se inyecta subcutneamente
53
Figura 62. El instrumento de perforacin se coloca verticalmente sobre la

superficie y se hace rotacin en una sola direccin.
54
Figura 63. La muestra es quitada sujetando su base con una pinza y cortndola. 54
Figura 64. Si la muestra de la biopsia es delgada, sta se coloca sobre un cartn o
abate.
55
Figura 65. M iccin espontnea
68
Figura 66. Materia l para c istocentsis
69
Figura 67. Se introduce la aguja
71
Figura 68. Obtencin de la muestra
71
Figura 69. Frasco estril de boca ancha
71
Figura 70. Se retrae la piel y se introduce la sonda previamente lubricada 73

Figura 71. Obtencin de muestra
74
74
Figura 73. Embrocado del paciente
77
Figura 74. Puncin en perro
77
Figura 75. Puncin en gato
77
Figura 76. Toracocentsis en perro
78
Figura 77. Toracocentsis en gato
78
78
Figura 79. Vlvula de tres vas
78
79
Figura 81. Puncin
80
80
CUADROS
Cuadro 1. Tubos para la obtencin de muestras
Cuadro 2. Sistemas orgnicos y sus correspondientes tcnicas de biopsias
Cuadro 3. Diferentes tipos de biopsias
6
57
60
Cuadro 4. Tipos de agujas de biopsias
62
Cuadro 5. Ventajas y desventajas de las tcnicas con aguja
62
xi
Diariamente durante la prctica mdica profesional

tenemos la necesidad de
establecer diagnsticos precisos que nos permita n
seleccionar y administrar la
N
terapia adecuada, INTRODUCCI
de manera
que
est plename nte
justificada en una situacin y
una pato loga particular. (Aguilar et al, 2005).
En la actualidad para realizar stos diagnsticos contamos
con la patologa clnica
vete rinaria, que constituye una disciplina que ha
tenido una evoluci n muy
significativa en los ltimos trei nta aos. (Ag uilar et al,
2005).
Con los resultados o diagnsticos que se obtienen a
travs del an lisis de
laboratorio, tambin se p uede hacer un pronstico para
tomar decisiones
teraputicas. (Ag uilar et al, 2005).
La patolog a clnica co mo especialidad incluye la
formacin e n hematologa
clnica, bioqumica clnica y citolog a clnica, los
avances q ue se han tenido en
stas reas, ahora nos permite n efectuar diagnsticos q
ue, antes, era n muy
difciles. Es importa nte la participacin de esta
disciplina e n gastroenterolog a,
1
dermatologa , endocrinologa, urolog a , neurolog a ,
ofta lmolog a, neumolog a,
neonatologa, i nfectolog a, geriatra, etc. (Ag uilar et al,
2005).
La exactitud de las e valuaciones de laboratorio
JUSTIFICACI N
Como se mencion a nteriormente, los e xme nes laboratoriales son una
herra mienta indispensable para complementar un diagnstico, por lo que es
necesario conocer las tcnicas adecuadas para la obtencin, preparacin y
manejo de dichas muestras, con el fin de evitar erro res en los resultados q ue
conlle ven a un diagnstico equivocado.
Aunq ue e xiste una gran variedad de libros, revistas, pginas de internet, etctera,
donde podemos encontrar tcnicas para la toma de muestras, no siempre
podemos obtener las en un mismo texto, y nos vemos e n la necesidad de acudir a
varios, esa fue la ra zn por la cual se decidi realizar un manual donde e xpliq ue
de manera sencilla y didctica, las tcnicas ms comunes q ue se utilizan en la
prctica diaria de clnica de perros y gatos.
ste trabajo rene los mtodos necesarios para la obtencin, co nservacin y
envo de la muestra en un solo ma nual, evita ndo con esto q ue el mdico tenga
que acudir a diversos te xtos, que te nga como consecuencia una prdida de tiempo
que podra aplicar al paciente.
Ya que no hay material fotogrfico en un solo texto, que conte nga las tcnicas
ms comunes q ue se practica n e n clnica de perros y gatos, en este ma nual se
incluye n imgenes, q ue e xpliq ue detalladamente las tcnicas y procedimientos
adecuados para la toma, co nser vacin y envo de m uestras en perros y gatos,
tanto para mdicos que estn en la prctica profesio nal, as como para los q ue
estn en formacin, ya que es la mejor forma de conocer la tcnica y poder
realizarla adecuadamente .
OBJETIVO GENERAL
Reunir en un so lo trabajo los procedimientos ms comunes q ue se rea liza n

en un consultorio veterinario para la ob tenci n y ma nejo de muestras.
OBJETIVOS ESPECFICOS
Que los profesionistas obtengan una gua para obte ncin de muestras de
manera adecuada.
Un material didctico que sirva de apoyo para las e xperiencias educativas
de clnica y medicina y cir uga de perros y gatos.
ste manual est diseado con el fi n de apoya r a estudiantes q ue estn
interesados en la clnica de pequeas especies y

a mdicos que ya estn
en la prctica mdica profesional, a poya ndo
con imge nes las tcnicas
ms com unes e n la toma de muestras e n per ros
y ga tos.
1. RECOLECCIN, MANEJO Y ENVO DE MUESTRAS PARA

HEMATOLOGA EN PERROS Y GATOS.
1.1. M ATERIAL
Agujas co n tubos al vaco normalmente ag ujas de calibre 20 G, color
amarillo, 21 G colo r ve rde, 22 G color negro con longitudes de 1 a 1
pulgada, a seleccionar de acue rdo con e l vaso sa nguneo a puncio nar.
(Nez et al, 2007).
Figura 1. Agujas
Tomado de: www.klinika-medical.de l/.../venble/kanuelen.jpg
Figura 2. Tubos
Tomado de: www.proveedormedico.com/TUBOSVACUTAINER.jpeg
Tubos co n EDTA, tap n lila, de capacidades 3.0 a 10.0 ml.

Tubos con Citra to de Sodio, tapn azul claro, de capacidades de 3.0 a 10.0
ml.
Tubos co n heparina, tapn verde.
Tubos sin anticoag ulante tiene n tapn ro jo, y vie nen e n capacidades de 3.0,
5.0, 7.0 y 10.0 ml.
Tubos de tapn amarri llo.
Si no se tiene n Vacutainer disponibles, se p ueden utilizar jeri ngas de 3 ml
con agujas del No. 22 de 1 a 1 1\2 pulgadas. (Ne z e t al, 2007).
Torundas de a lgodn
Alcohol al 70%
Isodi ne esp uma
Ligadura
Mquina para rasurar
CUADRO 1. TUBOS PARA OBTENCIN DE MUESTRAS

TAPON ANTICOAGULANTE SECTOR MATERIAL
Vidrio
EDTA Hemato loga
o
plstico
Gel separador
Serolog a
com ati vador de
cogulo
bioqumica
plstico
Citrato
de
Sodio
Vidrio
Hemato loga
(Coagulacin) Vidrio
Siliconizado
Serolog a
sin
anti-coagulante
bioqumica
plstico
Heparina
Sdica
Fluorato de
sdio + EDTA Bioqumica
Vidrio
Bioqumica
e
Vidrio
Inm unolog a
Vidrio
o
plstico
Tomado de: He matologa serie b lanca, p rcticas de

laboratorio, Lpez, 2007 .
SISTEMA VACUTAINER
AGUJA.
TUBO.
CAMISA.
TAPN. ETIQUETA.
Figura 3. Sistema Vacutainer

Tomado de: He matologa serie b lanca, p rcticas de laboratorio, Lpez, 2007.
1.2. TCNICA VENA YUGULAR

Para obtener una muestra de sangre e n perro s y gatos se recomienda
puncionar las venas cef licas, safe nas yug ula

res. (Figuras 4, 5, 6).
Dependiendo de la talla de los animales, por e jemplo
para perros pequeos
y gatos, se recomienda toma r la m uestra sa
ngunea de vena yugular.
(Nez, 2005) .
Figura
4. Vena yugular
Figura 5. Vena Ceflica
Figura 6. Vena safe

na
8
Un primer a yuda nte debe sujetar al perro en posicin decbito ester nal
sobre el borde de la mesa de e xploraci n. (Tachika, 2008).
El ayuda nte sujetar el cue llo y la cabeza del animal con una mano y con la
otra mano sujetar ambos miembros torcicos, para evitar

que el perro los
mueva d urante el procedimiento.
El ayudante debe procurar que el cue llo del perro se encuentre extendido
para realizar la preparacin a ntisptica del mismo y

prepararse para la
ve nopunci n yug ular.
Se limpia la zona que va a puncio nar con antispticos, como isodine
espuma y alco hol al 70%, este debe secarse con

una tor unda, para e vitar
que penetre por capilaridad y se prod uzca hemo
lisis; que afecte la calidad
de la muestra. Esto afecta la calidad de la misma,
tanto para hemograma
como para bioqumica y citolog a. (Aguilar et al,
2005).
Figura 7. Embrocado
Para que la sangre se acum ule en el i nterior de la ve na seleccionada, se
puede hacer presi n sobre la regin lateral a la lnea media del cue llo , justo
cranea l a la entrada del trax, para hacer que resalte la vena yugular .
9
Figura 8. Presin dedo pulgar

Posteriormente se introduce e n la vena, la aguja con el sistema Vacutai ner ,
y se coloca el tubo segn el e xame n que se va a

realizar, se deja llenar
partes del tubo, y posteriorme nte se retira la aguja
de la vena, y se coloca
un algod n con a lcohol, haciendo presin en
donde se hizo la p uncin.
(Nez et al, 2005).
Figura 9. Puncin co n sistema

vacutainer.
Cuando se utili za una jeri nga sin anticoagulante para tomar la muestra, la
transferencia al tubo se efecta sin aguja y e l Vacutaine r color lila sin tap n,
dejando deslizar la sangre por la pared del t ubo para evitar la hemlisis.
10
Inmediatamente desp us se tapa y se me zcla sua veme nte co n el EDTA k3

con un mo vimiento de sube y baja unas 10 veces, evitando agitar
vigorosamente para mantener sin hemlisis la m uestra.
Si hay presencia de cogulos en la m uestra, se debe rea lizar nuevamente.
1.3.
TOMA
CEFLICA
DE
MUESTRA
VENA
Un primer ayuda nte debe sujetar al perro en posicin decbito esterna l sobre
la mesa de exploracin. El ayuda nte sujetar el cue llo y la cabeza del animal
con una ma no y con la otra mano se toma la ar ticulacin del codo del
miembro torcico que le quede ms cmodo, tratando de extender el
antebrazo del pe rro. ( Tachika, 2008).
Se realiza la preparacin asptica (rasurado, la vado y embrocado) de la

regin dorsal del tercio medio distal del radio y ulna, que es la zona que se va
a puncionar . El ayudante que est sujeta ndo el brazo del perro aplica una
ligadura sobre la articulacin del codo para interrumpir el retorno ve noso y
hacer resaltar la ve na, durante un mximo de diez seg undos antes de la
ve nopunci n, el mantenerlo por ms tiempo, produce un fa lso aumento del
hematocrito por ma yor re tencin de eritrocitos q ue en e l plasma y podr a
ocultar la p resencia de anemia en algunas ocasiones.
Para tomar la m uestra se debe to mar con una ma no e l miembro torcico del
perro, de manera de e vitar movimie nto i ndeseable.
La venop uncin se reali za introducie ndo la aguja de la jeringa , con el bisel de
la misma apunta ndo hacia arriba, en un ng ulo de 45 grados
aproximadame nte, sobre la vena ceflica que se e ncuentra resaltada por la
11
presin. Una vez q ue se ha atra vesado la piel, el tejido subcutneo y la pared

del vaso sanguneo, se realizar una ligera aspiracin del mbolo, pa ra
verificar q ue efecti vame nte se i ntrod ujo la aguja a l vaso sang uneo.
Se colecta la muestra y se deposita inmediatame nte en los tubos especficos

para su transporte (co n o sin a nticoag ulante ).
1.4. MANEJO DEL PACIENTE
El paciente debe encontrarse lo menos e xcitado posible para minimizar las
variaciones fisiolgicas que stos estados pro vocan. (Aguilar

et al, 2005).
La adecuada conte ncin facilita una ve nopunci n limpia y p recisa y evita la
contami nacin de la muestra.
Cuando se req uiera muestra de sa ngre y orina, se deben colectar antes de
cualq uier trata miento . Pero cuando el paciente se e

ncuentra en trata miento
por va intravenosa ( venas ceflicas o safena), la
muestra sang unea debe
1.5. ENVO
tomarse del miembro opuesto o de las ve nas yug
ulares.
Las muestras debe n esta r identificadas: Nomb re del paciente, especie,
raza, edad, ho ra y fecha de m uestreo . (Aguilar et al,

2005) .
Esto para cualquier dete rminaci n, ya sea para he matologa, bioqumica,

urianlisis y cito loga de lquidos etc.
12
Sealar con tinta roja si el animal es sospechoso de rabia, tuberculosis,
brucelosis, leptospirosis, salmonelosis u o tra e nfermedad

transmisible al
hombre , para a umenta r las preca uciones en el mane jo.
Describir la historia clnica co n los hechos ms rele va ntes: Diarrea, vmito,

anorexia, hipore xia, fiebre, etc. Con una d uraci n de x d as.
Indicar si el a nimal est recibiendo tratamiento y el tiempo de recibirlo.
Particula rme nte en el caso de fluidoterapia, corticoterapia de

larga accin,
transfusiones sang uneas, etc., en stos dos ltimos,
aunque su
administracin haya sido concluida, sus efectos p uede n
Elperdurar
envo de la por
muestra5para
o sangre entera con o sin anticoagulante debe
estar refrigerada e ntre +4 y +8C, y debe llegar a l
ms das.
laboratorio antes de las
24 horas tras su extraccin. Se debe proteger los tubos frente a
Se
dejar la muestra a la temperatura de la pieza durante unos
losrecomienda
go lpes.
15 minutos y no expo nerla al sol antes de refrigerarla (4C), para evitar un
choque t rmico y hem lisis de la m uestra.
Figura 10. Conservacin y envo de la m uestra
13
2. TOMA, CONSERVACIN Y ENVIO DE MUESTRA DE HECES
Hay dos formas en las que se puede recolectar excremento

en perros y
gatos: (Corona, 2009).
a) Con asas rectales, en el interior del recto del paciente.
b) Del sue lo tan pronto como defeque el anima l.
2.1. M ATERIAL
Asas rectales de plstico
Recipiente recolector de p lstico limpio o estril.
Gel lubricante
Portaobjetos
Cubreobjetos
Solucin sali na
Figura 11. Material para reco leccin de heces
14
2.2. TCNICA CON ASA RECTAL

Un prime r ayuda nte debe sujetar al per ro que deber estar en
cuadripedestacin sobre la mesa de exploracin. El ayudante sujetar el
cuello y la cabe za del animal con una mano y con la otra mano sujetar la
parte caudal del per ro, abra zando el a bdomen del mismo, para e vitar que el
perro se mue va durante el procedimiento. ( Tachika, 2008)
Se lubrica el asa rectal y se introduce e n el recto del paciente, dando giros

para poder extraer la muestra de excreme nto, se necesitan
aproximadame nte de 1 a 2gr , dependiendo el e xa men que se va a realizar.
Como se muestra en las figuras 12 y 13. Se retira el asa rectal y la pequea
cantidad de excreme nto q ue salga pegada a la punta, se extiende sobre un
portaobjetos.
Posteriormente se coloca la muestra en un recipiente de plstico de tapa

ancha, e n caso de ser para un examen para microbiologa debe ser un
recipiente estri l.
Se aaden unas cua ntas gotas de solucin salina isotnica a la muestra,
con la fi nalidad de convertirla en una suspe

nsin acuosa, y se co loca un
cubreobje tos para poder
visualizar
la
muestra a travs del ob jetivo
panormico y seco dbil (10X) de un
microscopio ptico, en busca de
huevos de parsitos. Figuras 14 y 15. (Quiroz,
2002).
15
Figura 12. L ubrica nte

13. Toma de muestra
Figura

Cubreobjetos
Figura 15.
2.3. Conservacin
Se recomienda no refrigerar la muestra, se debe llevar cua nto a ntes al laboratorio
con el fin de obte ner resultados confiables, ma ntene rse a lejada de la luz, y en un
sitio fresco. [consultado el 15 de abril del 2010].
(http://www.cenavece.sa lud.gob.m x/.../procedimientos_basicos_en_la_toma_de_m
uestras_finales.pdf).
16
3. TOMA DE MUESTRA DE SEMEN
3.1. MATERIAL
Vagina artificial
Tubo recolector estril
3.2. TCNICA
El seme n se obtiene e n una vagina artificial. (Feldma n et al, 2000).
Figura 16
Extremo de vagina artificial bo vina, ad herida a un tubo estril.
La tarea ms difcil es la estim ulacin del macho, por lo ge neral no se

necesita una hembra.
Se da masaje al pene y b ulbo erctil de ntro del prep ucio, cuando el b ulbo
erctil comienza a a umentar de tamao se desliza el prepucio en direccin
posterior y se exterioriza el pene co n el b ulbo erctil.
Extrado el pene y el b ulbo erctil el reco lector sostiene con firmeza la base
del pene en direccin proxima l al bulbo, se utili zan lo s dedos pulgar e ndice
17
proporcionando masaje y presin; dura nte la ereccin o inmediatamente

despus inician los impulsos p lvicos con una d uracin de 5 -30 seg.
Figura 17. Estim ulacin del pe ne
Figura 18. Paciente e n posicin para e yacular
La fase inicial del e yaculado consta de lquido prost tico sin esperma y la
segunda fraccin es rico en esperma.
El seme n se obtiene de 2 a 5 mi nutos, es relati vame nte resistente al choque
trmico.
Se colectar seme n mientras su co nsistencia sea bla nquecina o cremosa y
turbio.
18
3.3 CONSERVACIN
3.3.1 . SEMEN REFRIGERADO
Mediante la agregacin de diluyentes es posible

refrigerar el semen, disminuye ndo
el metabolismo de los espermato zoides mante
nindolo a tempera turas de 4 C,
logrando la viabilidad de estos apro ximadamente
de 24 a 48 hrs ., como mnimo.
Antes de reali zar la IA el e yaculado debe alca
nzar la tempe ratura ambiente
lentame nte.
Debido a que mediante los diluyentes los esper
mato zoides se ma ntienen en
buenas co ndiciones es factible reali zar una IA
vagina l.
De esta manera se ampla la posibilidad de uso de
un reproductor, permitiendo la
comercializacin de seme n y facilitando e l
intercambio gentico e ntre defere ntes
establecimientos.
(http://www.fo yel.com/ca rtillas/20/citologiavagina
lca nina.html,2008). [consultado el
19
20 de marzo del 2010].
4. TOMA, CONSERVACIN Y ENVO DE MUESTRAS EN PIEL

4.1 RASPADOS
Son adecuados para las lesiones e xter nas, en biopsias, cirug as y e n necropsias.
Cualq uier perro o gato con pr urito o escamoso puede estar infestado con
Cheyletiella spp., Otodectes cynotis, Scabies scabiei, o

Notoedres cati y debe
hacrse le raspado. [Consultado el 7 de abril del 2010].
(http//:www.ivis.org/advances/mueller /part1chap3-es/chap
ter.asp?LA=2).
Si se sospecha de sarna, las reas preferidas para el

raspado son los hombros,
corvejones y vie ntre . El borde de las orejas debe
rasparse minuciosamente si se
observa algn pr urito o descamaci n e n esta rea .
Alguna veces, la descamacin
es ligera y so lo se hace e vidente dura nte un examen
4.1.1.
R ASPADO. SUPERFICIAL DE PIEL
detallado
4.1.1.1. MATERIAL
Debe hacrsele raspado a cualq uier perro o gato co n

unaPortaobjetos
posible demodicosis.
DeCubreobjetos
esta ma nera, todo paciente alopcico y todo paciente
de inmersin
conAceite
ppulas,
pstulas,
Hoja de bistur
costras
y particula rme nte co n pododermatitis
20
interdigital, debe ser raspado en
busca de demodicosis. Para un raspado profundo eficaz
de la piel de las patas
puede necesitarse sedacin o a nestesia general.
Figura 19. Material, para raspado de piel
4.1.1.2. TCNICA
Un p rimer ayuda nte debe sujeta r al perro q ue deber estar en
cuadripedestacin sobre la mesa de exp loracin . El ayuda nte sujetar el
cuello y la cabeza de l a nimal co n una ma no y con la otra mano sujeta r la
parte caudal del per ro, abra zando el abdomen del mismo, para e vitar que el
perro se mue va durante el procedimiento. ( Tachika, 2008).
Se deben identificar las zonas de la piel que prese ntan lesiones primarias.
Los sitios son rasurados suavemente con nava jas #40. Los caros son
difciles de encontrar (especialme nte los caros de la sar na demodcica), de
tal mane ra q ue entre ms gra nde sea el rea raspada, se tendr ma yor
oportunidad de ob tener un raspado de piel positi vo.
Se aplican va rias gotas de aceite mineral directamente sobre la piel rasurada

o sobre la hoja de bistur y se distrib uye uniformemente en el rea. Como se
muestra a continuaci n. [Consultado el 8 de abril de l 2010].
(http//:www.ivis.org /ad vances/m ueller /part1chap3-es/chap ter.asp?LA=2) .
21
Figura 20. Aceite para i nmersi n

El aceite es raspado co n una hoja de bistur # 11 en direccin del
crecimiento del pelo, la muestra reco lectada se coloca sobre una lami nilla y
se extiende con la ho ja con un mo vimiento de untar mantequi lla al pan . Se
raspa de 10 a 15 veces especialmente cuando se sospecha sarna
demodcica, como se m uestra en las figuras 21 y 22.
Figura 21. Raspado superficial en gato

Portaobjetos
Figura 22.
Se recomienda realizar de 3 a 5 lami nillas por cada sitio de m uestreo.

Se utiliza un cubreobjetos para permitir una e valuacin rpida y completa
de los restos recolectados y se examina n la(s)

lmina (s) sistemticame nte
con ba jo aumento (x10 x40) del ngulo superi or izq
uierdo a l ng ulo infe rior
derecho, como se m uestra en las figuras 23 22y 24 .
Figura 24. Observacin al microscopio
4.1.2. R ASPADOS PROFUNDOS DE PIEL

4.1.2 .1. M ATERIAL
Portaobjetos
Cubreobjetos
Aceite de inmersin
Hoja de bistur
Mqui na para rasurar
4.1.2 .2. TCNICA

Puesto que los caros de Demdex canis y felis vive n e n el folculo piloso, es til
presionar la piel tan fuerte como lo tolere el paciente a ntes del raspado con el fin
de sacar a los caros de la profundidad de los folculos. Como se muestra e n la
figura 25 . [Consultado e l 8 de abril de l 2010].
(http//:www.ivis.org/advances/mueller /part1chap3-es/chap ter.asp?LA=2).
23
Figura 25. Presin de la piel

Se utili za una hoja recubierta co n aceite mine ral e n direccin del
crecimiento del pelo hasta que se observe sa ngrado capilar.
Figura 26. Raspado profundo

Para evalua r un paciente con demodicosis, el raspado debe ser profundo,
hasta que se observe sa ngrado capilar. La piel debe ser presionada al
mximo pa ra maximi zar la recoleccin de caros.
Los miembros y la cara son raspados fuertemente, de ta l ma nera que

pueda ser til el raspar las reas eritema tosas adyace ntes a las ppulas y
costras interdigitales para ma ximizar el material recolectado y minimizar el
sangrado asociado co n el raspado.
24
La muestra recolectada se coloca sobre una lami nilla y se extiende con la

hoja con un movimiento de untar ma ntequilla al pan. Y se le co loca un
cubreobje tos para obser var al microscopio en e l objeti vo 10x y 40x.
Figura 27. Exte ndido de la m uestra
Figura 28. Cub reobjetos
Los raspados negativos o el depilado de pelos de las reas interdigitales no

descartan la pododemodicosis; puede ser necesaria una biopsia para
confirma r o descarta el diagnstico.
El hallazgo de ms de un caro debe co nsiderarse como diagnstico .
25
5. TOMA DE MUESTRA DE CULTIVO PARA DERMATOFITOS
Est indicado un culti vo de hongos e n cualq uier perro o gato co n

posible infeccin
por hongos y po r ello en cualq uier paciente con a lopecia,
ppulas, pstulas y/o
costras. [Consultado el 8 de abril del 2010].
(http//:www.ivis.org /adva nces/m ueller /part1chap3-es/chap
ter.asp?LA=2) .
Portaobjetos
Hoja de bistur
CintaM
adhesiva
5.1.
ATERIAL
Papel higinico
5 .2. TCNICA
Deben tomarse pelos y escamas del borde de la lesin (preferiblemente
aquellos q ue fl uorescan bajo la lmpara de Wood).
Si las lesiones no estn bien circunscritas o si se sospecha de un portador
asintomtico, se recomienda el m todo McKenzie del cepillo de dientes.
En sta tcnica, e l pelo es cepillado co n un cepillo de dientes estril
(cualquier cepillo de dientes nue vo en una caja sellada

est lo
suficienteme nte estril micolgicamente). Las escamas y
los pelos
desprendidos recolectados en el cepillo de dientes son co
26
locados
sua veme nte en agar. Figura 29.
Figura 29. Un cepillo denta l estril p uede ser empleado para recolecta r pelos.
Figuras 30 y 31. La superficie del agar es tocada delicadamente con las cerdas del
cepillo, inocula ndo e l medio cultura l. Tomado de:
(http://www.ivis.org/adva nces/m ueller /part1chap3-es/chap ter.asp?LA=2) .
El medio agar Sabouraud es el medio para culti vo de ho ngos ms com n.
En la prctica se usa frecuenteme nte el medio de prueba para dermatofito
(DTM) . El DTM es esencialmente un agar Sabouraud con indicador de color
e ingredientes adicionados que inhiben el sobrecrecimie nto de saprfitos y
bacterias.
27
5.3 CONSERVACIN
Despus de ser inoculado, la caja de cultivo debe ser i ncubada e ntre 25C
y 30C con 30% de humedad, o en un rincn oscuro y calientito, sin cerrar
la tapa de rosca completamente hasta abajo.
Los cultivos deben ser i ncubados durante 2 a 3 semanas y ser e valuados

diariamente. [Consultado el 8 de abril del 2010].
( http://www.ivis.org/adva nces/m ueller /part1chap3-es/chap ter.asp?LA=2).
28
5. 4. TRICOGRAM A
Los tricogramas pueden ser tiles en cualquier animal alopcico as
como tambin
en animales sospechosos de dermatofitosis ppulas, pstulas o
costras
5.4.1 . MATERIAL
asociadas.
(Ackerman, 2008).
Pinzas si n diente
Portaobjetos
cubreobje tos
Aceite mineral
5.4.2. TCNICA
Se utili za n unas pinzas para ar ra ncar fuertemente los pelos de la piel
afectada. Ver figuras 32 y 33.
Los pelos son colocados sobre una lmi na y se evala co n ba jo aumento.
Se coloca aceite mineral y cubre obje to para

preve nir que la m uestra de
pelo se vuele sobre la mesa e n vez de permanecer
bajo el microscopio.
Figura 34.
Fig ura 32 y 33 Toma de m uestra
Figura 34 Muestra e n por taobjetos

29
6. EXAMEN CON LMPARA DE WOOD
Cualq uier perro o ga to co n posible infeccin co n M

icrosporum canis debe ser
examinado con la l mpara de Wood.
Cualq uier paciente co n a lopecia, ppulas, pstulas y/o
costras p ueden
6.1.
MATERIAL
beneficiarse
de este procedimiento. (Acker ma n, 2008).
Lmpara de wood
6.2. TCNICA
La lmpara de Wood debe entibiarse por 5 minutos a ntes de utili zarse pues
la estabilidad de la longitud de o nda de la luz y la intensi dad dependen de la
temperatura .
El anima l se e xamina bajo la lmpara en cuarto oscuro.
Figura 35. Lmpara de wood

30
Los pelos invadidos por M . canis pueden mostrar una fluorescencia amarilla
verdosa. Esta fluorescencia se prese nta lo la rgo del tallo del pelo, a
diferencia de la fluorescencia discreta de escamas i ndividuales ocasionales
que puede verse e n animales y humanos nor males.
Algunos medicamentos, jabones y bacterias tales como la Pseudom onas

aeruginosa pueden tambin producir fluorescencia pero usualmente no est
asociada con los ta llos del pe lo.
La fluorescencia positiva es diagnstico de dermatofitosis y el M. canis es

por mucho el derma tofito fluorescente ms comn en medicina veterinaria.
Figura 36.
Otros dermatofitos pueden mostrar fluorescencia, pero estos no son

relevantes en dermatolog a veterinaria.
La ausencia de fluorescencia no debe descartar la dermatofitosis. Los
siguientes pasos so n el cultivo de ho ngos y/o la biopsia.
Figura 36. Fluorescencia de los metabo litos der matofticos sobre la cola de un
paciente fe lino, uti liza ndo la lmpara de Wood.
Tomado de: Atlas de dermatolog a en peque os a nimales, 1 ed. B uenos aires:
Inter-Mdica, Ackerman, Lowell 2008.
31
7. CULTIVO BACTERIANO
Los culti vos bacterianos se emplean con poca frecuencia en dermatolog a

vete rinaria. La ma yor a de las afecciones bacterianas de la piel son causadas por
Staphylococcus intermedius. Si los cocos se identifican

citolgicamente, la terapia
antibacteriana emprica es suficiente en la mayor a de los
pacientes.
[Consultado el 20 de abril del 2010].
(http://www.ivis.org/advances/mueller /part1chap3-es/chap ter.asp?
La terapia emprica en dosis apropiadas por un tiempo
LA=2).
apropiado no ha lo grado
resolver la pioderma (las lesiones est n an
presentes y la citolog a an re vela
cocos). Numerosas bacterias en forma de bastn son
ide ntificadas e n las
muestras cito lgicas de los ca nales auditivos. Estos
7.1.
Ma terial juegan rara vez
organismos
un papel importante en las infecciones cutneas de los
Gasas
pacientes
que clnicamente
Solucin sali na
est ril
noRecipiente
responde
n a la terapia emp rica.
32
7.2. TCNICA
Los frotis son tomados de los canales auditi vos como se describe en las
muestras para citolog a . [consultado el 25 de abril del 2010].
( http://www.ivis.org/adva nces/m ueller /part1chap3-es/chap

ter.asp?LA=2).
Los aspirados de pstulas intactas son tiles en pacientes con pioderma
superficial.
Los frotis de la supe rficie de la piel para el cultivo de organismos de
pacientes con pioderma profundo no son conve nientes. Las m uestras son
tomadas de manera similar a la que se utili za en biopsias bajo condiciones
aspticas (lavado de la superficie de la piel y la utili zacin de instr umentos y
guantes estriles). La mitad superior de la m uestra de tejido con la
epidermis y el pelo se cor ta y la mitad inferior se introduce en un recipiente
estril colocado sobre una compresa de gasa estril empapada e n solucin
salina estril para cultivo de macerado. Esto previene el sobrecrecimiento
en el culti vo de bacte rias superficiales no releva ntes a la infeccin p rofunda .
Cada muestra para cultivo y sensibilidad debe estar acompaada por un

examen citolgico y los resultados del cultivo deben ser i nterpretados en
relacin a los halla zgos citolgicos.
33
8. TCNICAS DE COLECCIN CON HISOPOS DE ALGODN
Se usan en sitios donde no ha y fcil acceso para las otras

tcnicas de coleccin,
como en el ca nal de l odo, en la vagina, prep ucio, a
no, mucosa conjunti val,
mucosa o ral o e n lesiones fistulosas. (Fe ldman y Ne lson,
8.1. MATERIAL
2000).
Hisopos estriles
Portaobjetos
Solucin sali na
Figura 37. Material para

hisopados
34
8.2. TCNICA
Se introduce el hisopo dentro del canal le ntame nte , en los pacientes con
piel seca, (Figuras 38, 39, 40, 41 y 42), e l hisopo de

algod n p uede
humedecerse con solucin salina y fro tarlo sobre la
superficie de la piel
Seafectada
hace girar rotndolo
con ser
los dedos
ndicesobre
y pulgar,
se retira con(Ag uilar et al,
antes de
rotada
la y lmina.
cuidado
2005).para no contaminar lo con otros tejidos.
Estar bien tomada si observamos un ligero color caf en el hisopo. Una
ve z tomada la m uestra se introd uce el hisopo hasta el fo ndo en un tubo con
medio de transporte Cary-Blair que debe estar bien tapado (tapn de
rosca).
Despus, se rueda el hisopo sobre una laminilla, ejerciendo una ligera

presin con el dedo sobre la varilla para hacer impresiones linea les. Y se
deja secar al aire. Figuras 43, 44 y 45.
Se recomienda rea liza r dos o tres impresiones en cada laminilla.
directamente la impresin sobre la piel

afectada .
En pacientes co n piel hmeda o grasosa, se p uede frotar la lmina o tomar
35
Figura 38. Citologa vagina l

39. Hisopado conjunti val
Figura
Figura 40. Hisopado en m ucosa oral

Figura 41. Hisopado de odo
36
Figura 42. Hisopado en a no
Figura 43. Muestra de m ucosa conjuntival

Muestra de heces
Figura 44.
Figura 45. M uestra de cito loga vagina l

37
8.3 ENVO
Para estudios bacteriolgicos se enva inmediatame nte despus de haberse
tomado. No hay que refrigerar la m uestra. [consultado el 2 de mayo del
2010].( http://www.ce navece.salud.gob.m x/.../procedimientos_basicos_en_la
_toma_de_muestras_finales.pdf).
En caso de ser para estudios virales ma ndarlo en refrigeracin, aunq ue no
se recomienda usar hisopo para el caso de virus, en sta

tcnica s se
recomienda re frigerar la muestra.
38
9. TCNICA PARA MUESTRAS EN CINTA ADHESIVA
9.1. MATERIAL
Cinta adhesiva
Portaobjetos
Azul de metileno
Cubreobjetos
Aceite de inmersin
9.2. TCNICA
La tcnica de impresin directa uti liza ci nta adhesi va tra nsparente
para recolectar
desechos de la superficie de la piel. Aunque rpido, este mtodo
necesita prctica
cinta se presionaque
con es
el lado
adhesi vo hacia
abajo sobre la piel.
paraLaestablecer
"normal."
(Ackerman,
2008).
La cinta se presiona por el lado pegante sobre la piel afectada.
Luego, se presiona (de nue vo con el lado adhesi vo hacia abajo) sobre una
gota de azul de metile no o tincin azul de DiffQuick sobre una laminilla.
Se presiona luego con el lado pegante hacia abajo sobre una gota de azul
de metile no sobre una lmina.
39
La cinta sirve como cubreob jeto: La lmina puede ser evaluada an bajo
aceite de inmersin (co n una peq uea go ta de aceite colocada
directamente e ncima de la ci nta) .
Esta tcnica es especialmente til para la evaluacin de Malassezia. Otros
elementos de inters que puede n ser identificados incluyen

clulas
infla matorias tales co mo neutrfilos (los cuales p uede n
haber pasado a
travs de la epidermis en resp uesta a una infeccin
superficial) , clulas
epiteliales nucleadas (lo cual no es nor mal y refleja n una
anomala de
9.3. Tincin
nizacin), cocos (bacte rias esfricas), bacilos
Se querati
puede
utili zar una coloraci n de Wright
(bastones rectos),
modificada
ejemplo,
Diff Quick)
macrfagos,(por
caros
de Demdex
de cue rpo peque o,
paraCheyletiella
colorear ylas lami nillas secadas al aire. Es m
nte caros
de Sarcoptes.
uchoocasionalme
ms rpida
y ms
fcil que
la coloracin de Gram y suficiente para evaluar casi

todas las muestras citolgicas
de piel. Sin embargo, la colo racin de Gram es ig
ualme nte adecuada. (Ackerma n,
2008).
40
10. OBTENCIN DE MUESTRAS PARA CITOLOGIA
La tcnica para la co leccin de m uestras en citolog a depende de

la localizacin y
de las caracter sticas del te jido. (De b uen et al, 2001) .
Para las diferentes muestras e l envo es el mismo:
Los portaobjetos que han de enviarse a un labora torio deben secarse al aire
y colocarse en co ntenedores adecuados para el transporte de portaob jetos,
los cuales por lo ge nera l son provistos por e l laboratorio.
Los portaobjetos deben transportarse a tempera tura ambiente para e vitar

que el ag ua se co nde nse en la superficie y produzca la lisis de las c lulas.
Lo ideal sera que las m uestras citolgicas se enven al labora torio en forma
separada de los tejidos fijados en forma lina para evi tar el contacto con los
vapores de for mali na, los cuales p uede n inhibir la ptima tincin de los frotis
secados al aire.
Las muestras citolgicas deben entregarse al laboratorio junto con la
siguiente info rmacin:
a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)
Descripcin detallada
Breve historia clnica
Hallazgos re leva ntes del examen fsico,
Terapia pre via,
Resumen de los resultados de los exmenes
Diagnsticos pertine ntes,
Diagnstico tentati vo, y sitio donde se tom la muestra.
Esta info rmacin es til para que patlogo realice la interpre tacin.
41
10.1. ASPIRACIN CON AGUJA FINA

10.1.1. ASPIRACIN DE NDULOS
Esta tcnica a yuda a obtener m uestras de masas, lq uidos y

lesiones cut neas.
Mientras ms blando sea el te jido a muestrear , menor ser el ca
libre de la aguja y
menor , tambin, la presin negativa que se ejer za al mome
10.1 .1.1 MATERIAL
nto
de la aspiracin.
Jeringas de 10, 12 ml y ag uja calibre 21 a 25.
(ElMqui
mbolo
retrae hasta la marca de 3 a 7m l). (Aguilar et al ,
na parase
rasurar
Alcoho l al 70%
2005).
Torundas de algodn o gasas estriles.
10.1 .1.2 TCNICA

El sitio de la aspiracin, se rasura y se limpia bien co n a lcohol, se agarra
firmeme nte e l nd ulo y ento nces se inser ta la ag uja , aspira ndo varias
veces, en varias direcciones en e l centro y e n la periferia de la masa (hasta
la marca de 10 ml si es posible), se libera la presin y se saca la jeringa con
la aguja an adherida. (Aguilar e t al, 2005).
Figura 47. Aspirado

42
Es importante liberar la presin antes de re tirar la aguja, si no el aspirado

puede ser succiona ndo dentro del tubo de la jeri nga, de la cual este p uede
no ser recuperado. (Davidson et al, 2000) .
Se desconecta la aguja, el mbolo se jala hacia atrs y la aguja se vue lve a

reconecta r, como se muestra e n las figuras 48 y 49.
Figura 48. Liberacin de presin

presin
Figura 49 Aspirado para
Las clulas son vertidas sobre un portaobjetos. Figura 50.

Y se reali za un frotis lineal o e n cr uz, posteriorme nte se tie , se deja secar
al aire y se observa al microscopio. En un ob jetivo de 10x,

40x, 100 x. Ver
figura 51 .
Figura 50. Por taobjetos
Figura 51. Frotis
e n cr uz
43
10.2 AGUJA FINA SIMPLE SIN ASPIRACIN
10.2.1 MATERIAL
Jeringas de 3m l, 5m l y aguja calibre 21 a 25.
Alcoho l al 70%
Torundas de algodn
10 .2.2. TCNICA
ste mtodo se ha co nvertido en una prctica muy comn hoy en d a.
(Aguilar et al, 2005).
Se inicia rasurando la zo na donde se va a puncionar, se desinfecta e l rea
con isodine espuma y se retira con alco hol al 70%, con tor undas de
algodn, como se muestra e n las figuras, 52 y 53.
Figura 52 . Rasurado
Embrocado
Figura 53.
44
Se realiza e n for ma similar al aspirado, co n la diferencia de que la aguja no

est conectada a una jeringa no se ejerce una presin negativa.
Solamente se introduce la aguja al te jido de inters y se imprime un
movimiento de vaivn para obtener una muestra limpia y sin co ntaminacin
sangunea, como se m uestra en la fig ura 54.
Se punciona en va rias direcciones y poste riormente se retira y se coloca el

contenido en un por taobjetos co nectando la jeringa a la aguja par a exp ulsar
el co ntenido obte nido, como se m uestra en la figura 55 y 56 .
Se realiza un frotis lineal en cruz, se tie y se observa al microscopio en

10x, 40 x.100x (co n aceite de i nmersi n), como se m uestra en la figura 57.
Figura 54. Puncin de masa
Figura 56. Expulsi n del conte nido
Figura 55. Punci n en varias direcciones
Figura 57. Frotis en cr uz

45
10.3. PREPARACIN DE LOS FROTIS

10.3.1 FROTIS EN CRUZ
Las dos lami nillas se ma ntiene n en forma de cruz y si n e jercer presin.
La laminilla supe rior se desliza hacia donde marca la flecha, para efectuar
el extendido de las clulas, y el frotis se obtiene en la laminilla inferior,
como se m uestra en la figura 57.
Se debe secar al aire para la fijacin de los fro tis.

Se recomienda realizar siempre un m nimo de tres a cinco frotis de cada
muestra obtenida. Los frotis no se refrigeran.
Si el material es de viscosidad moderada, como la sangre, se puede hacer
un frotis est ndar, cuya fuer za de separacin celular es lig eramente infe rior
a la de las laminillas e n cruz. (Ag uilar et al, 2005).
10.3.2 FROTIS ESTNDAR
Se coloca una pequea gota de material sobre una lami nilla portaobjetos.
Con otra la minilla se forma un ng ulo de apro ximadamente 45.
La laminilla superior se desliza hacia atrs, hasta tocar la muestra, y
despus hacia dela nte, para efectuar el extendido de las clulas.
46
El resultado es un frotis en fo rma de pluma que muestra tres diferentes

densidades, como el frotis sanguneo. Vase figura 58. (Davidson e t al,
2000).
Figura 58. Frotis est ndar

Tomado de: Manual de pato loga clnica en peque os ani males, Davidson e t al,
2000.
10.3.3 FROTIS LINEALES

Se mantiene la lamini lla superior e n un ng ulo cerca no a los 80.
El extendido sobre la laminilla i nferior se suspe nde a la mitad del camino .
Con este procedimiento se obtiene un frotis que, e n su eje horizonta l,
contiene pocas clulas, mientras que en su eje vertical (e l frotis li neal,
propiamente dicho) ha y ms clulas. En la mayo ra de los casos, se
recomienda ce ntrifugar previamente la m uestra , con lo cual se obtienen
mejores resultados.
Se recomienda realizar rutinas de tres a cinco frotis por cada m uestra

obtenida.
47
Este mtodo se recomienda si la muestra es un lquido no viscoso y casi

transparente, ya q ue no hay fuerza de separacin de las clulas o es
m nima. Ver figura 59.
Figura 59. Frotis lineal

Tomado de: Manual de patolog a clnica en peque os ani males, Davidson
et al, 2000.
5.3.4. IMPRESIONES
Son las huellas q ue quedan en una laminilla cuando se pone en co ntacto con un
tejido. Resulta n adecuadas para las lesio nes externas o dura nte cir ugas, biopsias
o necropsias. (Agui lar et al, 2005) .
Cuando
la lesin cut nea esta ulcerada, hay que tomar tres i mpresiones
antes de limpiar la lcera y tres desp us de limpiarla.

En el caso de las biopsias o de material de necropsias, se cortan cubos de
tejido de 0.5 a 1.0 cm de dimetro. Cua ndo hay lesiones co n e xceso de
lq uido o de sangre que impiden la adhesin adecuada de las clulas a la
laminilla, se sugiere hacer impresiones suaves sobre papel absorbente
(toallas de papel para secar las ma nos).
48
Las impresiones se e fecta n hasta q ue el papel absorba poco lq uido, esto

indica que la muestra esta lista para realizar las impresiones sobre las
laminillas.
Una vez q ue e l tejido esta seco, se recomie nda rea lizar varias impresiones
sobre la misma laminilla para te ner mayor supe rficie de evaluacin.
una mejo r idea del tipo de poblacin celular que

se encuentra en el tejido, y
para efectuar
coloraciones especiales en los
casos que lo req uiera n.
Se sugiere hacer de tres a ci nco laminillas de difere ntes cor tes, para tener
49
La biopsia para exame n histopato lgico

(evaluacin microscpica de los tejidos)
es de especial importancia en dermatolog a, p uesto
BIOPSIA DE PIEL (tcnica de sacabocados).
q ue e 11.
l tejido
de inte rs ( la piel)
es de acceso inmediato. Si bien es una her ramienta
valiosa, no se debe aguardar
que la biopsia defina todo el cuadro. Revela cambios
en una regin diminuta de la
superficie cutnea en un momento temporal par
ticular.
Las biopsias pueden ser obtenidas mediante escisin

de toda la patologa, incisin
lesional y remocin de una par te represe ntativa
o, con mayor frecuencia, con
sacabocados.
Cuando
se
reali za
el
procedimiento , es importante brindar
preferencias a lesiones primarias o secundarias
tempranas.
Los cambios ms pro fundos, como ulceracin,
fibrosis y alopecia completa,
tienden a resultar menos diagnsticos. Por este
moti vo, es mejor remitir varias
secciones para e valuacin, a par tir de una
variedad de diferentes lesione s y
50
estadios de desarrollo. Junto a la m uestra , el
pat logo debe recibir el historial
clnico con los posibles diagnsticos diferenciales.
No deben hacerse biopsias de lceras ni erosiones.
No hay que esperar que un
11.1. Preparacin del sitio

Con excepcin de la biopsia incisional de los nd ulos, no se emplea la
preparacin quirrgica del sitio. An la aplicacin tpica de alcoho l y el
secado al aire p uede a lterar la epidermis.
Si hay prese ncia de costras, estas deben dejarse sobre la piel. Si stas son
desalojadas accidentalme nte stas debe n ser colocadas en for malina y se
debe aadir una nota "por favo r corte en la costra" en el form ulario de
solicitud.
Las costras pueden conte ner microorga nismos o clulas aca ntolticas que
pueden a yudar a obte ner el diagnstico. La i nfeccin como resultado de
una ausencia de preparacin quirrgica no parece ser un prob lema.
(Ackerman, 2008).
11.2. Biopsia excis ional o incisional vs. Biopsia de perforacin
Hay dos tcnicas de biopsia utili zadas com nmente en medicina veteri naria
1. Biopsia incisional
2. Biopsia de perforacin
La segunda se emplea corrientemente como una tcnica de extirpacin cua ndo se
quitan nd ulos solitarios. Tambin est i ndicada para vesculas (las cuales son
tpicamente ms frgiles para sobrevivir a la biopsia de perforacin sin que se
rompan), e n casos sospechosos de paniculitis (en la cua l la suficiente profundidad
de la biopsia no puede lograrse con la puncin) y cuando se biopsia el extremo de
una lesin en forma de huso ( lo cua l permite la orientacin correcta de la lesin en
51
el laboratorio do nde las lesio nes e n forma

huso se corta n siemp re
longitudi nalmente).
de
La biopsia de perforacin es rpida, relati vamente

atraum tica y ge nera lmente se
emplea cua ndo se sospecha de dermatosis
infecciosa, inflamatoria y endocrina.
Los instr umentos desechab les para la biopsia de
perforacin estn disponibles en
varios tama os. Estos pueden se r esteri lizados al
fro y utili zados nue vame nte.
11.3. M ATERIAL
Con excepcin de la biopsia de cara y patas, se debe
utilizar
i nstr umento de 8
Mqui naun
para rasurar
Marcador de agua
mm.
Sede 3m
emplean
los instr ume ntos de perforacin ms
Jeringas
l
Gasas
peque
os con un dimetro
Sacabocados
de Formalina
4 o al610%mm para biopsias de cara y pie. Los instr
umentos de perforacin muy
pequeos (por eje mplo 2 a 3 mm) no son tiles en
la prctica de pequeos
11.4. TCNICA
animales con excepcin de biopsias de prpado.
Se rasura la capa
pe lo re tirando sua veme nte y el sitio donde se har la
(Ackerma
n,de2008).
biopsia se delimita con un marcador a prueba de agua . Si hay p resencia de
costras, p uede se r me nos traumtico usar tijeras. (Ackerman, 2008) .
52
Figura 60. Se traza un cuadrado alrededor de la muestra para biopsia.
Figura 61. El anestsico local se inyecta subcut neame nte.

Se debe aplicar anestesia local, inyectar como m nimo 0.5 cc o ms de
lidocana en el espacio subcutneo .
Utili zar sacabocados del tamao adecuado (4 a 8 mm) para muestrear la
lesin, mante niendo el rea de i nters en el centro de l instr umento, como
se muestra en la figura 53 .
Aplicar presin mientras se gira el instrumento , a los efectos de ava nzar co n

m nimo retorcimiento del tejido. Para evitar el dao del tejido sub yacente,
es mejor le vantar un p liegue de piel para alejarse de aque l.
Alcanzar el espacio subcutneo con pinza, soca var e l subcutis por debajo
de la muestra y recor tar co n tijera de cir uga . No asir el tejido de i nters.
53
Sacar la muestra y colocar en un recipiente con formo l. El volume n

requerido de formalina es de por lo menos 10 veces el volumen de la
muestra.
El defecto que queda se puede curar con suturas o grapas.

Los ndulos deben ser seccio nados en pedazos de 1 cm de grosor para
permitir la adecuada pene tracin de la for mali na al centro de la lesin.
Figura 62
El instr umento de perforacin se coloca verticalmente sobre la superficie y se hace
rotacin en una sola direccin.
Tomado de: Atlas de der matologa e n peq ueos animales, Ackerma n 2008.
Figura 63
La muestra es quitada sujetando su base co n una pinza y cort ndo la.
54
Figura 64
Si la m uestra de la biopsia es delgada, sta se coloca sobre un car

tn o abate
11.5. ENVO
Para aumentar las posibilidades de recibir un reporte q ue sea diagnstico,
es importante el comp letar cuidadosamente los formularios apropiados para
solicitar el e xame n de la biopsia de la piel, incluyendo la historia clnica y el
examen fsico.
Es importante una lista de diagnsticos diferenciales e n cualq uier caso

clnico pero es esencial e n pacie ntes dermatolgicos. La seborrea o tractos
de drenaje pueden ser el resultado de un amp lio rango de procesos de
enfermedad. Esta lista es importa nte para q ue el clnico este seguro que l
o ella ha considerado todas las opciones y ha obtenido tanta informacin
como sea posible tanto de la mascota como del propietario ya antes de
tomar la biopsia. Es igualmente importante para el patlogo y p uede ayudar
en la eleccin de la tincin especial para descartar o co nfirmar afecciones
inusuales. (Ackerma n, 2008).
55
12. OBTENCIN DE MUESTRAS PARA BIOPSIA

Obtenidas a partir de pacientes vivos para establecer la naturaleza de un tejido
anorma l que puede observarse macroscpicamente, detectarse clnicamente o
mediante el uso de tcnicas de image n (radiografa, to mografa o ecografa) .
El e xamen histolgico puede ayudar a estab lecer la naturale za de una
enfermedad, es decir, puede ayudar a diferenciar una neoplasia de una
infla macin o de un cambio degenerati vo. (Da vidson e t al, 2000).
La recogida de muestras y e l examen citolgico implican la ob tencin y la
preparacin de clulas indi vidualizadas o de pequeos grupos de clulas. Estas
clulas se obtienen in vivo a travs de distintas vas.
Estas incluyen: desprendimie nto o exfoliacin natural (por

ejemplo , de scamacin a
partir de la piel o de las mucosas ora l, vaginal, anal e tc.);
elimi nacin natural a
travs de la orina , esputos u o tras secreciones (por ejemplo,
ocula res, nasales,
12.1. TCNICA
auriculares); o aspiracin mediante agujas de varios calibres,
cnulas o catte res
Las m uestras celulares se depositan sobre portaobjetos i nmediatamente
(por despus
eje mplo,
a par tir de cavidades corpora les o de rganos
de recogerlas. (Davidson et al, 2000).
macizos).
Se e xtienden y se seca n rpidamente al aire o se fijan en alcohol al 95%,
antes de teir las y examinarlas co n el microscopio.
Cua ndo las m uestras son predominanteme nte liquidas suelen
centrifuga rse sua veme nte para conce ntrar las clulas o se
procesan
mediante el uso de una citoce ntrfuga.
56
CUADRO 2. Sistemas orgnicos y sus correspondientes tcnicas de biopsia

rgano o locali zacin Tipo de biopsia Comentarios
Piel
Escisional
Incisional
Exfo liacin (impro ntas)
Ndulos linfticos
perifricos
Incisiona l (aguja)
Escisional (impronta)
-Consideraciones de lugar y
tamao .
-Lesiones solita rias, m ltiples
o generalizadas
-Agujas normalme nte no tiles.
-Perforador de ke yes.
-til e n ulceraciones o
neoplasias.
-Las agujas so n tiles
Escisional
Aparato reproductor :
Macho: Testculos
Incisiona l (aguja fina)

Exfoliacin
Incisional (aguja)
Prstata
Hembra: Vagina
Mamas
Exfoliacin
Escisional/incisional
Escisional; incisiona l
Escisional
Incisional
Exfo liacin (secrecio nes)
Aparato urinario:
Ri n
Incisional
Escisional
Vejiga
Exfoliacin
-Se acostumbra a reali zar una

orquidectoma bilateral.
-Dificultad para i nterpretar la
aspiracin con aguja fina.
Masaje prosttico a tra vs de l
recto
Las tcnicas con aguja so n
difciles; evitar va recto.
-Consideraciones de lugar y
tamao .
-Incluir nd ulos linf ticos
cuando sea necesario.
-Problemas de cicatrizaci n.
-Agujas tiles si el paciente es
de ava nzada edad o est
debilitado.
-til en mastitis o neoplasias.
-Norma lmente con ag ujas Vimsilver man; posible hemorragia.
-Si todo el rgano es
clarame nte anormal.
-Centrifuga r o sedime ntar la
muestra completa; rpido
57
Incisional
Hgado
Incisional
Tracto digestivo:
Cavidad oral

Tracto superior:
Esfago
Estmago
Tracto intermedio:
Intestino delgado
Tracto inferior:
Colon
Recto
Exfoliacin
Escisional
Escisional
Pocas veces i ncisional
Escisional
Pocas veces i ncisional
deterioro.
-Consideraciones de tama o y
luga r
-La reseccin en forma de
cua req uiere laparotom a.
-til ag uja de gra n ca libre
(Menghi ni)
-Dificultad para i nterpretar la
aspiracin con aguja fina.
til si hay abrasin de la

superficie.
Consideraciones de luga r y
tamao .
Endoscopia y fibra ptica co n
recogida de muestras co n
cepillo de citolog a o con
pinzas de biopsia.
Consideraciones de tamao;
endoscopia con pinzas de
biopsia si es pequea.
Normalme nte requiere
laparotoma.
No es posible usa r la
endoscopia; req uiere
laparotoma o capsulas de
biopsia.
Puede alcanzar el leon distal.
Consideraciones de tamao;
endoscopia con pinzas de
biopsia si es pequea.
Ano
Consideraciones de luga r y
tamao .
til si es accesible o mediante
legrado de la lesin.
Tracto respiratorio:
Cavidad nasal
Exfoliacin
Secreciones nasa les o

58
Vas a reas
Exfoliacin
Pulmones
Escisional
Incisional
irrigacin con solucin

isotnica.
Consideraciones de tamao y
grado de invasin.
Esputos o irrigacin media nte
broncoscopio.
Muestreo co n pi nzas de
biopsia mediante
broncoscopio.
Lobectom a va to racotoma
Agujas (de gra n calibre o
finas) mediante la tcnica
abierta o percutnea.
Reseccin va to racotoma
Tomado de: Manual de patologa clnica ve terinaria en peque os a nimales,

Davidson et al, 2000.
59
12.2. TIPOS DE BIOPSIA

CUADRO 3. Diferentes tipos de biopsia
Tipos de biopsia Breve descripcin y caracters ticas
Escisional
Incisiona l
Con trocar
Con aguja
Endoscpica
Exfoliativa
-Extirpacin q uir rgica

-A me nudo req uiere a nestesia general
-Son importantes las consideraciones de lugar y
tamao.
-Eliminacin nicamente de una par te representativa de
la lesin.
-Problemas de cicatrizacin si es una neoplasia
-Permite la planificacin de abordajes teraputicos
adicionales.
-Eliminacin de un cili ndro de tejido
-Normalme nte uso limitado a la piel
-Eliminacin de un peque o ncleo cilndrico de tejido o
nicamente de c lulas.
-Es importante la precisin; es til guiarlas mediante
ecografa
-Poco invasiva
-Eliminacin de peque as muestras por avulsin o por
escisin mediante pinzas de biopsia de los tractos
digestivo y respirato rio y de los orificios corporales.
-Peque as m uestras de tejido
-Poco invasiva
-Req uiere sedacin o anestesia general en funci n del
lugar de m uestreo.
Recogida de clulas descamadas (de forma natura l o
por legrado) procedentes de superficies externas o
inter nas.
Norma lmente se realiza un estudio citolgico.
Simple y fcil, e n funcin de la loca lizacin.
Poco invasi va, en funcin de la locali zacin.
Tomado de: Manual de patologa clnica veterinaria e n pequeos anima les,

A conti nuacin se e xplica de forma general co mo se obtiene n

las m uestras por
biopsia.
60
12.3. BIOPSIAS ESCISIONALES E INCISIONALES

La biopsia escisional permite extirpar la lesin entera en una sola operacin. En
cambio la biopsia incisional elimina de forma deliberada solo una parte
(idealmente representativa) de la lesin. Por lo general basta con este te jido para
los propsitos diagnsticos o de planificacin, ya que es posible que la lesin
est situada cerca de un tejido u rgano vita l y la e xtirpacin comprometa la
integridad del rgano, que la lesin sea infiltrativa o que sea necesario
determinar su na turale za ( neoplsica, maligna o be nigna) antes de ir ms all.
No se necesitan i nstr umentos especiales para las biopsias escisionales o
incisionales; es suficiente con el instrumental quir rgico estnda r, es decir,
bistur, pinzas con dientes, tijeras, mosquitos e instrume ntal de sutura . Ha y q ue
tener cuidado con la biopsia escisional cua ndo existe alguna d uda sobre la
capacidad de coagulacin sang unea del paciente .
Cuando se obtiene una biopsia por incisin para realizar un estudio
histopato lgico antes de pla nificar una cirug a ms radical, se recomienda que el
tejido incluya un ma rgen de tejido normal siempre que sea posible. (Da vidson et
al, 2000).
12.4. BIOPSIA CON AGUJA Y CON TROCAR
El trocar de ke yes, q ue es ampliamente utili zado para obtener

ncleos circulares
de epidermis y de rmis de 5 mm de dimetro o menores. Estos
instr umentos so n
adecuados para la obtencin de mltiples m uestras cut neas de
perros y gatos y
tambin cuando la lesin es peque a, focal y puede ser abarcada
por el trocar de
biopsia. Las biopsias elpticas pueden rea liza rse bajo61sedacin y
anestesia loca l,
al igual que se hacen normalmente las biopsias de sacabocados.
(Davidson et al,
2000).
12.4.1. MATERIAL
Las agujas para realizar biopsias son de dos tipos: las de gra n ca libre y las de
pequeo calibre, y su longitud var a entre los 12 mm y los 15 cm.
CUADRO 4. Tipos de aguja de biopsia

Denominacin Nombre G
Muestra
Vim-silverman
modificada
Tr u-cut
Gra n calibre
14
Cilindro de te jido (ri n).
14
Cilindro de tejido (todos los

rganos y te jidos).
Medula sea (tejido
medular + sangre) .
Trepano seo (hueso +
medula).
Cilindro de te jido (hgado)
Osgood
15/16
Jamshidi
15
Menghini
15
Aguja fina Hipodrmica 21-25 Clulas (aspiracin de
cualquier rgano ).
Tomado de: Manual de patologa clnica veterinaria e n pequeos anima les,

Davidson e t al, 2000.
CUADRO 5. Ventajas y desventajas de las tcnicas con aguja
Ventajas
-Poco invasivas pero depende de la
localizacin.
Desventajas
-Tama o de m uestra peque o; puede
estar fragme ntada.
-Rpidas, citologa por aguja fina e n menos -Es posible que no sea represe ntativa de
de una ho ra.
toda la lesin.
-Repetibles; depende del ta mao ,
-Es posible que no se muestree la lesin
localizacin y naturaleza de la lesin.
focal, a menos q ue sea guiada mediante
ecografa.
-Anestesia; sedacin co n anestesia local
-puede dar falsos nega tivos.
ms que a nestesia general.
-Adecuadas para pacientes debilitados o
geritricos.
-La inte rpretacin requiere un e xperto

(especialmente la aspiracin co n ag uja
62
fina) .
-Relaci n coste-eficacia, ya que e l
instrumental de m uestreo no es caro.
-diseminacin de las clulas de una

neoplasia ma ligna (raro ).
Tomado de: Manual de patologa clnica veterinaria e n pequeos a nimales,

12.5. M ANIPULACIN DE LOS TEJIDOS Y DE LAS BIOPSIAS
El mane jo correcto de las m uestras liquidas y tisulares desp

us de reali zar la
biopsia o la extraccin es una fase importante a la que a menudo no
se le presta la
suficiente ate ncin.
El manejo inicial tras su obtencin, la fijacin y el transporte de la
muestra pueden
influir en el xito del diagnostico; las m uestras mal fijadas o
12.5.1.
LQUIDAS
mal MUESTRAS
manipuladas,
especialmente si son peque as (por ejemplo, biopsia
endoscpica),
pueden
La
clave del xito est
e n que sean p rocesadas rpidamente, idealmente en el
mismo
d
a.
C
uando
las
m uestras pueden
llevarse al laboratorio
para ser
impedir
que
se
realice
un
diagnostico
lgico.
(Davidso n et al,
examinadas el mismo da de su obte ncin, debe disponerse un volumen
2000). vo, no ms de 20 m l, en un conte nedor estril sin fugas.
representati
Si el lq uido tiende a coagularse, debe emplearse EDTA o un anticoagula nte
similar.
Cuando no sea posible procesar un lq uido fresco sin fijar, debe n rea lizarse
exte nsiones sobre portaobjetos. Si el lquido tiene una de gran densidad celular,
63
puede exte nderse una peq uea gota de la suspe nsin utilizando la tcnica
hemato lgica conve ncional. Es un mtodo similar a la tcnica est ndar utili zada
para hacer extensiones sang uneas, las clulas ms grandes y los agregados
celulares tie nden a distribuirse en el rea con forma de pluma de la e xtensin. Por
consiguiente, el extremo con forma de pluma debe terminar dentro del
portaobjetos. Si se coloca demasiado mate rial se perdern estas c lulas,
especialmente si la viscosidad es baja o se aplica un ng ulo o una velocidad
incorrectos a la hora de hacer a vanzar el portaobje tos superior.
Cuando la densidad celular sea baja, el contenido celular debe concentrarse, si es
posible, mediante centrifugacin a 1.500 rp m durante 3-5 mi nutos o, si no ha y una
centrifuga disponible, mediante la sedimentacin por gravedad de la muestra
durante unos 30 minutos. Las m uestras de lq uido cefalorraq udeo req uiere n un
manejo especial (Jannison y L umsden, 1988) y debe n estar listas para su exa men
antes de pasada una hora desde su extraccin para evita r las a lteracio nes
morfolgicas.
Las extensiones deben secarse lo ms rpido posible al aire agitndolas

vigorosamente o utili za ndo un pequeo secador de manos a baja temperatura.
Ento nces p ueden ser e nviadas al laboratorio en un contenedor apropiado. No es
recomendab le realiza r la fijacin y el transporte en alco hol al 95%. (Da vidson et al,
2000).
12.5.2. MUESTRAS HISTOLGICAS
El tama o de las muestras histolgicas var a desde unos

pocos milmetros de
dimetro, e n el caso de las biopsias endoscpicas y de los
fragmentos exfo liados,
hasta grandes masas neop lsicas de 15-20 cm de dimetro o ms.
64
Las muestras histolgicas peq ueas debe n co locarse en una placa de Petri sobre
un soporte de esp uma no ve llosa o una base similar y deben humedecerse con
suero sali no isotnico estril o con medio de cultivo para tejidos hasta el mome nto
de su fijacin, alte rnati vame nte, y si es posible, se fijan dentro de los 5-20 minutos
posteriores a su obtencin.
Las muestras gra ndes se coloca n sobre p lacas o ba ndejas limpias y estriles (por
ejemplo, placas de petri o bandejas de acero inoxidable) antes de seleccionar las
reas que va n a ser fijadas para el e xame n histopatolgico o utili zadas para otros
exmenes (por ejemplo, bacteriolgico o bioqumico).
Las muestras gra ndes siempre p lantea n un proble ma para los clnicos remite ntes,
ya que el dogma tradicional de la fijacin de las muestras de tejido con fo rmali na a
raz n de un volumen de tejido por 10 volme nes de formalina, dejado de lado

por los anato mopatologos, a me nudo queda a nulado por el ta mao y comp lejidad
de estas muestras. En el caso de masas bien defi nidas o encapsuladas, como las
neoplasias de la superficie cutnea de unos 3-4 cm de dimetro, la fi jacin con
formali na a ra z n 1:10 todava es factible, pero pe rma nece el prob lema de la
penetracin adecuada de l fi jador e n la muestra. Si no se prod uce una correcta
penetracin, la m uestra de tejido sufre una auto lisis, lo que dificulta o imposibilita
la interpretacin histopatolgica.
El problema tiene una solucin lgica que puede aportar una informacin til
adicional para el diagnostico. En e l caso de masas pequeas o de lesiones bien
definidas, nicamente co n una biseccin es suficiente y la m uestra p uede fija rse
en forma de dos mitades (pre feriblemente seccionadas de for ma longitudi nal). Si la
lesin debe ser dividida e n dos, hay q ue hacerlo completa y uniformemente.
Muy a me nudo e l anatomopatolgico recibe m uestras deformadas, que son
difciles de orientar y de co nver tir en bloq ues porque la m uestra fresca fue
seccionada de forma incor recta. Es posible que las lesiones de mayor tamao y
65
las lesiones irregulares tengan que ser sometidas a ms

de una seccin o
seccionadas en ms de un plano. En estos casos es
importa nte que e l clnico
remitente informe a l a natomopat logo sobre lo que se
ha hecho y de que par tes
de la lesin, si no es completa, se ha n e nviado. Esto puede
hacerse mediante una
descripcin escrita, pero probable mente la mejor for ma y
la ms fcil de hacerlo es
enviando un diagrama comentado.
La fijacin es el proceso por el cual se evitan o se
12.5.3. FIJACIN DE LA MUESTRA
previenen
los colocarse
cambios en un mismo conte nedor las dife
Nunca deben
autolticos
que tisulares
se producen e n los tejidos, a menudo
rentes m uestras
fa
agentes
de vorecidos
un mismopor
animal
(por ejemplo , una verr uga cutnea,
infecciosos,
un pulis oral inflamacio
y un tumornes y por un ma l ma nejo
fsico
obtener lajuntos). La colocacin de m
anal nodespus
deben de
depositarse
muestra.
El objetivo
ltiples muestras
sin es utili zar un producto para fijar
yidentificar
conser var
arq uitectura
y plarocedentes
de disti ntos lugares en un mismo
celular
para
la una
interpretacin y la valoraci n
conte nedor
provoca
histopatolgica.
gran i nq uietud a los a natomopatlogos. (Da vidson e t al,
El
mejor fi jador para la mayor a de propsitos
2000).
diagnsticos es aun la so lucin de
formali na, re lati vame nte barata, fcil de usar y, si se
maneja prudentemente, no es
toxica ni irrita nte para sus usuarios. Una gra n ve ntaja
66
es que la formalina es tan
buen conser vante como fijador, por lo que los tejidos
fijados con esta susta ncia
pueden guardarse durante meses si es necesario. (Davidson
et al, 2000).
13. TOMA, CONSERVACIN Y ENVO DE MUESTRAS DE ORINA
La orina es una sustancia potencialme nte peligrosa porque p

ueden haber en ella
organismos ca usantes de zoonosis como, por e jemplo , los del g
nero Leptospira;
por lo tanto hay que llevar g uantes desechables dura nte la
obtencin y el ma nejo
de las muestras de orina. (Davidson et al, 2000).
13.1.
M ICCIN ESPONTNEA
Es importante
emp lear e l mtodo adecuado para la obtenci n de
orinaMATERIAL
.
13.1.1.
Los principales son:
la vejiga de la orina . La p rimera fraccin de

13.1.2. Tcnica
o rina es la mejor muestra
cua ndo se sospecha que la lesin se encue ntra
La orina se recoge durante la miccin o mientras se exprime manua lmente
en la parte ms distal del
tracto urinario, por lo que sirve para obtener e
ide ntificar tapones uretrales,
cristales, urolitos, bacterias, infecciones vricas
o hemorragias. Sin
embargo, tambin es la m uestra con ms
probabilidad de estar
contami nada co n clulas, bacterias y restos
celulares/ espermato zoides del
67
tracto ge nital y pelo circundante. Figura 65.
(Davidso n et al, 2000).
Figura 65. Miccin espo ntnea

La fraccin intermedia es la mejor m uestra para la mayor a de pruebas, y la
fraccin fina l de orina resulta optima para evaluar la existencia de una
enfermedad prosttica y, e n alg unos casos para obtener e l sedimento o la
hemor ragia que puede estar depositada en el sue lo de la vejiga.
Hay q ue recoger la ma yor ca ntidad de ori na posible e n un recipiente iner te y

estril de plstico, acero o cermica y luego tra nsferido a un recipiente
estril.
La orina obtenida por miccin espontanea esta casi siempre contaminada

por bacterias; sin embargo es un mtodo aceptable para reali zar e l exame n
fsico, exame n qumico, medir e l pH y evaluar el aspecto microscpico.
Este mtodo no es adecuado para realizar un cultivo uri nario. (Davidson et
al 2000).
68
13.2. CISTOCENTSIS
13.2 .1. M ATERIAL
Jeringas de 5m l 10ml
Torundas de algodn
Alcoho l al 70%
Yodo
Recipiente est ril de p lstico
Figura 66. Mate rial para cistocentsis

13.2.2. TCNICA
Se debe sujetar al perro en posicin decbito lateral sobre la mesa de
explo racin. Es necesario que el perro o gato cuente con la vejiga plto ra o
lo suficienteme nte llena como para palparse con facilidad a travs de la
pared abdominal. (Tachika, 2008).
Se prepara de ma nera antisptica la regin del abdomen caudal y ventral
(rasurado, la vado y e mbrocado).
69
Para reali zar la cistocentsis, se debe ubicar perfectamente bien la ve jiga

uri naria, a travs de palpacin abdominal exter na , la ve jiga llena de orina se
identifica por palpacin y se encuentra apoyada sobre la pared abdominal
ve ntral ca udal.
Una ve z q ue se ha locali zado la vejiga urinaria, se procede a rea lizar la

puncin tra ns-abdomina l co n la je ringa de 5 o 10ml, en un ngulo de 45
grados, con un mo vimiento firme, pero cuidadoso y de licado. Ver figura 67.
Se succiona un poco el mbolo de la jeringa, pa ra verificar si se obtiene

lq uido (orina) y en caso de una m uestra positiva, se termina de llenar la
jeringa, para despus retirar la del pacie nte rpidamente . Posteriorme nte se
coloca por unos segundos una torunda de algodn mojada con alco hol en
el sitio de p uncin abdominal
La orina se recoge con una jeringa o en un recipiente estril, de tal modo

que p ueda emp learse para el a nlisis y/o para el cultivo microbiolgico y el
antibiograma. Ver figuras 68 y 69. (Davidson e t al, 2000).
La cistocentsis se considera el mtodo de eleccin para la obtencin de

orina debido a que proporciona muestras no co ntaminadas por bacterias y
clulas procede ntes de la uretra distal, lo que permite interpre tar de forma
ms exacta los resultados de los cultivos y de los antibiogramas. (Elliot,
1996; Scott- Moncrieff, 1996).
70
Figura 67. Se introduce la ag uja

Obtencin de m uestra
Figura 68.
Figura 69. Frasco estri l de boca ancha
13.3. CATETERIZACIN
Es un mtodo til para identificar la localizacin de las obstr ucciones parciales o
totales de la uretra, especialme nte cua ndo son debidas a uro litos, este nosis o
cuerpos e xtra os. (Davidson et al, 2000).
La cateteri zacin tambin se e mplea en los estudios diseados para controlar el

volumen de orina y la tasa de producci n en estudios sobre insuficiencia re nal,
71
para administrar el medio de contraste radiogrfico y para dete rmina r el volumen

de orina que q ueda en la vejiga tras la miccin.
La cateteri zacin es un procedimiento poco invasi vo y bien tolerado por muchos
perros adultos, pero las perras, gatas y los gatos ente ros requieren con frecue ncia
la admi nistracin de sedantes o de a nestsicos generales. (Sma rick et al, 2004).
Aunq ue es un procedimiento m uy utilizado , tiene sus i nconvenientes, pueden
transportarse los organismos presentes e n la par te distal de la uretra y de l tracto
genital a la vejiga y p ro vocar co n ello una infeccin de l tracto urina rio.
(Biertuemp fel et al, 1981).
13.3.1. MATERIAL
Sondas flexibles rgidas
Ri n de plstico o metal
Gasas estriles
Solucin sali na
13.3.2. TCNICA
Un ayudante debe sujetar a l perro e n posicin decbito la teral sobre la
mesa de exploracin. ( Tachika, 2008).
Un segundo ayudante debe limpiar con una gasa que conte nga un poco de
soluci n salina isotnica la punta del prepucio del perro. Con otra gasa, se
realiza el mismo procedimiento sobre la punta del pene.
72
El ayudante , quien previame nte se ha p uesto g uantes est riles, recibe el

catter uretral estril y si n tocar al paciente, ca lcula la lo ngitud q ue va a
introducir del mismo. Esto se realiza tra zando de manera imaginaria el
trayecto q ue seg uir el ca tter a travs de la ure tra peneana, la uretra
prosttica hasta llegar finalme nte a la vejiga uri naria.
Se retrae la piel del p repucio de manera que quede e xpuesta la p unta del
pene y se visualice el orificio uretral, por donde se introducir gentilmente el
catter urinario, previamente lubricado con gel estril. Ver figura 70
Figura 70. Se retrae la piel y se introduce la sonda pre viame nte lubricada.
Una ve z que se ha introducido el cat ter y comienza a salir la orina a tra vs

del mismo, se obtie ne la m uestra en un recipiente estril. Figuras 71 y 72.
73
Figura 71. Obtenci n de muestra
Figura 72. Ob tencin de m uestra
13.4. CONSERVACIN
El mtodo de co nservaci n es igual en las tres tcnicas me ncionadas
anterior mente. (Agui lar et al, 2005) .
Una ve z que se ha obte nido, la muestra de orina deb e ser ana lizada lo ms
pronto posible.
Existen difere ncias de criterio e ntre a utores, pero en ning n caso se
recomienda que se ana lice despus de dos horas cuando se dispone a
temperatura ambiente; si no se va a cumplir esta condicin, es necesario
refrigerarla y realizar el an lisis antes de cuatro horas. Si se requiere
mantene r la muestra por ms tiempo, se deber dividir e n dos porcio nes, y
conservar cada una de la sig uiente forma:
74
-Formalina amortig uada al 40%. Se agrega 1

gota por cada 20 ml de orina. Se
utili za pa ra el exame n del sedimento, con el fi n
de co nser var las c lulas y otros
compone ntes del sedimento; produce cambios
peque os en el pH, si n embargo,
interfiere con alg unas determi naciones q umicas.
-Congelacin: se emplea para lle var a cabo los e
xmenes fsico y qumico. Este
mtodo es til cuando se van a hacer
determinaciones fotomtricas o
colorimtricas como urea, creati nina y mi nerales.
Es muy importa nte que cuando se vaya a ana lizar
una m uestra q ue ha estado en
refrigeracin, se permita que esta alcance
nuevame nte la tempera tura ambiente
(15-25C) para q ue se disuelvan los so lutos q
ue se precipitaron con la ba ja
temperatura . Antes de impleme ntar cualq uier tipo
de terapia, es necesario rea lizar
un uria nlisis o cua lquier otra prueba de laboratorio.
75
14. OBTENCIN DE MUESTRAS DE CAVIDADES CORPORALES
El lugar y el modo de eleccin para recoger la

muestra var an en funcin de la
especie, del lugar donde se sospecha que se encue ntra la
lesin y del operador.
Hay q ue utili zar tcnicas aspticas, incluyendo la
preparacin
q uirrgica de la
14.1.
TORACOCENTSIS
superficie cut nea. Pueden usarse seda ntes y
anestsicos locales, pero sue len
14.1.1.
MATERIAL
ser muy
necesarios. (Davidson et al, 2000).
Torundas de algodn
Alcoho l al 70 %
yodo
Agujas de calibre 20-22 G
14.1.2. TCNICA
La toracocentsis se lle va a cabo con el animal de pie o en decbito
esterna l. Suele reali zarse e n el tercio ve ntral del sptimo o el octavo
espacio intercosta l. Se rasura y se embroca al paciente con isodine espuma
y a lco hol al 70%. Ver figura 73 .
76
Figura 73. Embrocado del paciente

Se introduce una aguja de 20-22 G de calibre cerca del borde ante rior de la
costilla para reducir la probabilidad de lesi onar los vasos sanguneos y los
nervios locali zados en el borde ca udal de cada costilla. Ver figuras 74 y 75.
Figura 74. Puncin e n per ro
Figura 75. Puncin e n gato

77
Para disminuir el riesgo de lacerar los p ulmo nes se uti liza una granula. Si
ha y que drenar mucho liquido, se emplea una

vlvula de tres vas para
evitar en lo posible un ne umo tra x. Ver figuras 76,
77, 78, 79.
Figura 76. Toracocentsis en perro

Toracocentsis e n ga to
Figura 78. Obtencin de m uestra
Figura
Figura 79. Vlvula de tres vas
78
77.
14.2. ABDOMINOCENTSIS
14.2.1. MATERIAL
Torundas de algodn
Alcoho l al 70%
yodo
Aguja de 20-22 G catter negro
Ri n de plstico o metal
14.2.2. TCNICA
La abdominocentsis se lleva a cabo con el anima l de pie o en decbito
lateral. (Davidson et al, 2000).
Se rasura toda el rea abdominal de l paciente, y posteriormente con
torundas de algod n se embroca con isodine espuma y alcoho l al 70%.

79
La punci n sue le reali zarse 1-2 cm por detrs del ombligo en la lnea media
ve ntral.
Se utiliza una aguja de 20-22 G, con una longitud suficiente para penetrar el
grosor de la pared abdominal, ca tter color negro.
Se introd uce la aguja y se obtiene el lq uido por gra vedad. Puede utilizarse
una bra nula y una vlvula de tres vas. Ver figuras 81 , 82.
Figura 81. Puncin

80
En las tcnicas de toracocentsis y abdominoce ntsis se utili za

el mi smo mtodo
de conser vacin y e nvo.
14.3. CONSERVACIN
El recue nto de clulas nucleadas se hace mediante mtodos

manuales o
autom ticos. Si el recue nto ce lular deter minado ya sea por recue
nto ya sea por el
grado de turbidez del lquido es elevado, es decir, superior a 10 x
109 c lulas por
litro, deben rea lizarse frotis directos para te ir y exami nar. Si
no es as, ha y q ue
concentra r las clulas ce ntrifuga ndo la muestra y realizar una
e xtensi n a par tir
del sedimento. Todo esto debe realiza rse lo antes posible para que
se co nser ve la
morfolog a celular. Si las clulas no pueden ser conce ntradas e
n la clnica ni ser
procesadas en un labora torio de refere ncia al cabo de pocas
horas, hay q ue
realizar frotis directos inmediatame nte.
La concentracin de hemoglobina y /o el va lor hematocrito se
utiliza n para estimar
la ca ntidad de sa ngre presente e n los lq uidos cavita rios.
La concentracin de pro tenas se dete rmina con un refractme
tro o hacie ndo un
anlisis qumico.
Las muestras para realizar otras pr uebas de bioqumica clni ca
deben depositarse
en tubos sin anticoagula nte.
81
Hay que a notar e l aspecto del lq uido aspirado. El color y la

turbidez i ndican la
presencia de pigmentos y de clulas respectivamente; hay que a
notar y tene r en
cue nta e l aspecto origina l para poder reali zar una
interpretacin correcta.
(Davidson et al, 2000).
14.4. ENVO
Las muestras de lquidos hay que depositarlas en tubos con acido etilendiamino tetractico (EDTA) para poder reali zar el recuento celular y el
examen cito lgico. (Da vidson et al, 2000).
Los frascos, viales, tubos, etc., deben estar tapados lo ms hermticamente

posible, colocando bien las tapas y tapones los cuales se asegurarn con
tela adhesi va. [co nsultado el 8 de mayo del 2010].
http://www.cena vece.sa lud.gob.mx/.../procedimientos_basicos_en_la_ toma
_de_muestras_finales.pdf.
Cuando se ma nden varios tubos se aseg uran co n ligas y se coloca n e n

bolsas cerradas.
Los frascos se colocan en bolsas de plstico resistentes y hermticame nte

cerradas.
Las laminillas se deben enviar secas, e nvueltas indi vidualme nte e n papel de
China y cada una estar bien identificada con un nmero o el nombre del
paciente.
Las muestras se co locan e n cajas trmicas resistentes empaq uetndolas

con relleno de papel, p lstico o made ra ( viruta ), para amortigua r los golpes.
82
No olvidar q ue las muestras deben estar acompaadas de una carta u oficio

en e l q ue se especifique clara mente que tipo de pr ueba se solicita y un
resume n clnico e nfatizando la fecha de i nicio del padecimiento y la fecha
de la toma de la muestra, edad y sexo , estos documentos (original y copia),
se colocan dentro del paquete e n una bolsa de plstico sellada para evitar
la prdida de esta informacin.
83
15. BIBLIOGR AFIAS

LIBROS
Aguilar, B. J. Arias, C. L. Ar zate, B. A. Mndez, A. R. E. Nez O. L. Padilla,
S.J. Tachika, O. Y. 2005. M todos y tcnicas de diagnstico, Mdulo 1, ed.
Graphics, 345 p.
Davidson, M . Roderick, E. Lumsden, J. 2000. Ma nua l de patolog a clnica

vete rinaria en peque os a nimales, ed. Harcourt.
Ackerman, L. 2008. Atlas de dermato loga en peque os animales, ed. Intermdica. 510 p.
Ne z, O. Bouda, J. L. 2007. Patolog a clnica veterinaria, Facultad de

Medicina Veterinaria y Zootecnia, 1era ed. 345 p .
De buen, A. N. Maldonado, H. G. Romero R. L. 2001. Citologa diag nstica
vete rinaria, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia UNAM , 1era ed. El
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Quiroz, H. 2005. Parasitolog a y enfer medades parasitarias de anima les

domsticos, ed. Limusa, S.A. de C.V. 876 p.
Feldman, C. E. Ne lson, W. R. 2000. Endocrino loga y reprod uccin e n perros y
gatos. 2 nd ed. McGraw-Hill. 856 p.
84
PGINAS
MANUALES
ELECTRONICAS / WEB SITE
Cenavece-sa lud.gob.m x. 2008. Procedimientos bsicos en la toma de
Lpez, V.biolgicas
F. J. 2007.
a serie
blanca; elprcticas
de laboratorio;
muestras
paraHematolog
diagnostico.
[consultado
18 de abril
del 2010]
Facultad de Bioanalisis.
http://www.cena
vece.sa lud.gob.mx.
Lpez, V. F. J. 2007. Ma nua l de prcticas de parasito loga clnica; Facultad de

Citologa Vete rinaria. 2010. [consultado el 7 de abril de l 2010].
Bioanalisis.
http://www.ivis.org/adva nces/m ueller/part1chap3-es/chapter.asp?LA=2
Corona, C. G. 2009. Diagnstico de la parasitosis gastrointestina l; especialista
Citologa vagina l canina. 2007. [consultado el 20 de marzo del 2010].
en medicina y cirug a y sa lud e n per ros y ga tos, Unive rsidad de Guadalajara.
http://www.fo yel.co m/car tillas/20/citologiavaginalcani na .htm l.
Tachika, O. Y. V. 2008. Manual de p rcticas de la
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Smarick SD, Haskins SC, Aldrich J, Foley JE, Kass PH, Fudge M , Ling GV.
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Scott-Moncrieff, C.R. <<Dysuria>>, Manual o f

canine and feline Nep hro logy
and Urology; ed. J. Bai n bridge y J. Elliot, B SAVA
Publications, Che ltenham,
1996, p. 18-27.
85
86

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UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

MANUAL PRCTICO DE TOMA Y MANEJO DE

TRABAJO RECEPCIONAL EN LA MODALIDAD DE:

MDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA

A mi mam Glo ria M. Cabrera Zam udio

Por siempre decirme si puedes, por ayudarme

A mi asesora Mvz. Nancy Prez Cisneros:

A Rogelio Calder n por apoyarme en todo mome nto.

1. Recoleccin, manejo y envo de muestras para hematologa en perros y gatos 4

1.2. Tcnica vena yugular

1.3. Toma de muestra vena ceflica

2. Toma, conservacin y envo de muestra de heces

2.2 Tcnica con asa rectal

3. Toma de muestra de semen

3.1. Mate rial

4. Toma, conservacin y envo de muestras en piel

4 .1.1. Raspado superficial de piel

4.1.1.1. Mater ial

4.1.1 .2. Tcnica

4 .1.2. Raspados profundos de piel

5. Toma de muestra de cultivo para dermatofitos

4.1.2 .1. Material

5.1. Mate rial

6. Examen con lmpara de Word

10.3.3 Frotis lineales

14.1.1 Mate rial

NDICE DE FIGURAS Y CUADROS

Figura 3. Sistema vacutainer

Figura 4. Vena yugular

Figura 5. Vena ceflica

Figura 6. Vena safena

Figura 8. Presin dedo pulgar

Figura 9. Puncin con sistema vacutainer

Figura 10. Conservacin y envo de la muestra

Figura 11. Material, recoleccin de heces

Figura 12. Lubricante

Figura 13. Toma de muestra

Figura 14. Portaobjetos

Figura 18. Paciente en posic in para eyacular

Figura 19. Materia l, raspado de piel

Figura 20. Aceite para inmers in

Figura 21. Raspado superficial en gato

Figura 22. Portaobjetos

Figura 23. Cubreobjetos

Figura 24. Observacin al microscopio

Figura 25. Presin de la pie l

Figura 26. Raspado profundo.

Figura 27. Extendido de la muestra

Figura 28. Cubreobjetos

Figura 31. Inoculando el medio cultural

Figura 32. Toma de muestra

Figura 33. Toma de muestra

Figura 34. muestra en portaobjetos

Figura 35. Lmpara de Wood

Figura 36. No se muestra f luorescencia en este paciente

Figura 37. Materia l para hisopados

Figura 38. Citologa vaginal

Figura 39. Hisopado conjuntival