UNIVERSIDAD NACIONAL

AGRARIA LA MOLINA

FACULTAD DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

LABORATORIO 3 DETERMINACION DE LA
DIGESTIBILIDAAD IN VITRO DE LA PROTEINA
Curso:

Alimentacin y Nutricin Humana

Profesor:

Ana Aguilar

Integrantes:
Gmez Castillo, Miguel Alejandro
Cussianovich Aguirre, Karlos
Carrillo Ravichagua, Jos

I.

INTRODUCCION
La digestibilidad de las protenas se considera como un indicador de su calidad.
Se sabe que los alimentos de origen animal presentan mayor digestibilidad que
los de origen vegetal. Esto se ha atribuido al menor contenido de fibra cruda de
los alimentos de origen animal, lo que hace que la velocidad de trnsito intestinal sea
menor y en consecuencia, se obtenga una mayor absorcin de nutrientes
(Hernndez; et al, 1984).
Existen tcnicas in vitro estandarizadas para determinar la digestibilidad
proteica que poseen correlacin con los mtodos in vivo. Algunos se basan en
el anlisis de productos obtenidos despus de la hidrlisis de las protenas por
enzimas digestivas (Gauthier, 1986).
Un mtodo aceptado y utilizado en la industria alimenticia es la electroforesis
engel de poliacrilamida SDS-PAGE. Es aplicada en el control de calidad de
productos e ingredientes proteicos, estima el peso molecular de las protenas y
se utiliza en la deteccin de pptidos de bajo peso molecular (Yeoung, 1991).
En el presente informe se describe el mtodo utilizado para determinar la
digestibilidad in vitro de las protenas presentes en la harina de soya y de trigo.
El mtodo consiste en hacer un medio que simule las enzimas digestivas del
organismo humano y degrade las protenas. Los resultados obtenidos han sido
comparados con los reportados en literatura.

II.

REVISIN DE LITERATURA
2.1. Digestin de protenas
Mataix, (2005) afirma que la digestin Comienza en el estomago por la accin
de la pepsina. Posteriormente, la propia pepsina contina la protelisis parcial
sobre el pespsingeno en un proceso autocataltico. Algunos de los
aminocidos que se originan en esta etapa, estimulan la secrecin acida a
travs de la liberacin de gastrina.
La digestin proteica en el intestino se inicia intraluminalmente, gracias a las
enzimas liberadas por el pncreas, y contina a nivel de las clulas de la
mucosa intestinal, que contienen tambin enzimas proteolticas. Las protenas
que van a sufrir digestin incluyen no solamente las de origen exgeno sino
tambin las procedentes de las diferentes secreciones digestivas y las de la
descamacin de las clulas de la mucosa.
Mataix,( 2005) tambin afirma que la secrecin pancretica comienza con la
hidrlisis del tripsingeno por la enteroquinasa intestinal. La tripsina que se va
formando contina su accin proteoltica parcial, tanto sobre el tripsingeno
como sobre los otros zimgenos.

La accin concentrada de las enzimas

proteolticas conduce a la formacin de oligopeptidos y aminocidos libres, las

clulas de la mucosa solo dejan pasar ciertos productos de la digestin de
protenas (aminocidos, dipptidos y tripeptidos), no siendo suficiente la accin
de las proteasas luminales para degradar toda la protena hasta esos
compuestos. Para lograr esto existen en el borde en cepillo del eritrocito una
serie de peptidasas (aminopeptidasas, depeptidasas, tripeptidasas y dipeptidil
aminopeptidasas) que degradan los oligopptidos de mayor a menor tamao a
aminocidos y dipptidos y tripeptidos.

Tras la digestin combinada de las proteasas luminales y del borde en cepillo,

los productos que entran en el eritrocito son

aminocidos y dipptidos,

tripeptidos y tetrapeptidos. Todos ellos son degradados por peptidasas

citoplasmticas hasta aminocidos, que son los productos de degradacin
proteica que aparecen en sangre porta.
2.2. Digestibilidad
Fennema, et al (2000) afirma que la digestibilidad de un alimento se define
como la proporcin de nitrgeno del mismo que es absorbida tras su ingestin.
Aunque el contenido en aminocidos sea el principal indicador de la calidad de
la protena, su verdadera calidad depende tambin de la extensin en que
estos aminocidos sean utilizados por el organismo. Por ello, la digestibilidad
puede afectar la calidad proteica
2.2.1.

Factores que modifican la digestibilidad:

Fennema, (2000) tambin menciona que algunos factores como:

1) Conformacin proteica:
La estructura de una protena influye su hidrlisis por las
proteasas. Las protenas nativas suelen ser menos hidrolizadas que
las parcialmente desnaturalizadas. Por regla general, las protenas
fibrosas insolubles y las globulares muy desnaturalizadas son difciles
de hidrolizar.
2) Factores antinutricionales:
La mayor parte de los refinados de protena vegetal y de los
concentrados de las mismas contienen inhibidores de la tripsina y de
la quimotripsina y lectinas. Estos inhibidores dificultan la hidrlisis total
de las protenas de las leguminosas y de las semillas oleaginosas por
las proteasas pancreticas. Las protenas de leguminosas y de las
semillas de oleaginosas tratadas por el calor suelen ser ms
digestibles que los refinados proteicos nativos.
3) Unin a otros componentes:

La interaccin de las protenas con los polisacridos y la fibra

diettica reduce tambin la velocidad de hidrlisis y profundidad y la
magnitud de sta.

4) Procesado:
Las protenas sufren varias alteraciones qumicas, en las protenas
participan los restos lisilo, sise exponen a temperaturas elevadas y
pHs alcalinos. Se reduce as su digestibilidad. La reaccin de los
azcares reductores con los grupos amino tambin disminuye la
digestibilidad de la lisina.
2.3. Digestibilidad de las protenas in vivo:
Fennema O. (2000) afirma que el procedimiento usado tradicionalmente para
determinar la digestibilidad ha sido el mtodo del ndice fecal, tcnica in vivo
en la que el nitrgeno secretado en las heces se sustrae de la cantidad
ingerida para expresar el valor obtenido como

porcentaje

del nitrgeno

consumido. Se obtiene as la digestibilidad aparente, y hay que mencionar

aqu que las cifras de digestibilidad de Atwater obtenidas a finales del siglo
pasado y a principios del actual se referan a la digestibilidad aparente. Para
hallar la digestibilidad real es preciso tener en cuenta la cantidad de nitrgeno
fecal excretado cuando el sujeto consume, ya sea una dieta sin protena ya
sea una dieta con la cantidad estrictamente necesaria de una protena
altamente

digerible para prevenir una prdida excesiva de protenas

corporales. As pues, la digestibilidad real (DR) se calcula del siguiente modo:

DR=

(I ( FFk ))
100
I

Donde:
I:

Consumo de nitrgeno

F:

Nitrgeno fecal

Fk:

Nitrgeno metablico fecal

Al tenerse en cuenta el nitrgeno metablico fecal, de origen no diettico, la

DR de un alimento

es siempre mayor que la digestibilidad aparente. La

digestibilidad aparente de las protenas es mayor cuanto sea su consumo,

mientras que la DR es independiente del consumo de protena.
La digestibilidad individual de los distintos aminocidos se suele determinar
mediante el mtodo de los aminocidos ingerida con la dieta, la cantidad
excretada por las heces y las llamadas prdidas metablicas en heces y hacer
los mismos clculos que en el caso de la DR. Otra prueba que tambin se ha
empleado para determinar la biodisponibilidad de los aminocidos es la del
control del crecimiento en animales. Aunque limitados aun solo aminocido
cada

vez, los resultados obtenidos mediante el mtodo de control de

crecimiento son considerados por algunos ms exactos que los obtenidos

por el mtodo del balance.
La digestibilidad de una protena se determina la mayora de las veces en la
rata. El mtodo es bien conocido, y el procedimiento, normalizado mediante un
estudio coordinado.
2.4. Digestibilidad de las protenas in vivo e in vitro:
Fennema O. (2000) reporta que el mtodo enzimtico de determinacin de
digestibilidad in vitro, consiste en utilizar un complejo enzimtico que contiene
tripsina, quimotripsina y pepsina. Se encontr que el pH de una suspensin
proteica inmediatamente despus de 10 minutos de digestin con la solucin
multienzimtica es altamente semejante a los ensayos in vivo de digestibilidad
aparente en ratas.
Un anlisis regresivo de 23 muestras arroj que el coeficiente de correlacin
entre el pH a los 10 minutos en el ensayo in vivo fue de 0.9 con una desviacin
estndar estimada de 2.23. La ecuacin de regresin fue Y = 210.464
18.103X, donde X es el pH de la suspensin proteica inmediatamente despus
de 10 minutos de digestin. La ventaja ms significativa de este mtodo in vitro
es que puede ser completado en menos de una hora y con un alto grado de
sensibilidad.

Este mtodo puede detectar el efecto de inhibidores de tripsina, cido

clorognico y tratamientos en el trigo para favorecer la digestibilidad proteica.
Fuertes sales usadas como tampn, pueden afectar la medida de la
digestibilidad proteica, pero los efectos de buffer encontrados en alimentos
proteicos en general y productos estudiados no crean ningn problema al
procedimiento. La digestibilidad de la protena es el principal determinante de la
disponibilidad de sus aminocidos, adems de conocer mediante un
aminograma los aminocidos de dicha protena.
La digestibilidad puede ser obtenida usando ratas, pero este procedimiento es
muy caro y lento. El rango inicial de la hidrlisis por tripsina era buen indicador
de la digestibilidad de la protena. Se investig la correlacin de la digestibilidad
in vitro. Rhinenart examin muchos sistemas enzimticos que incluyen: tripsina,
pepsina-tripsina, tripsina-quimotripsina y tripsina-quimotripsina-pepsina.
Digestibilidad de las protenas de varios alimentos, en la especie humana
Fuente de protena

Digestibilidad (%)

Huevos

97

Pescado, carne

94

Maz

85

Trigo (entero)

86

Harina de trigo (blanca)

96

Gluten de trigo

99

Harina de avena

86

Harina de soja

86

Refinado de protena de
soja

95

Maz, cereal

70

Trigo, cereal

77

Fuente: Fennema O. (2000)

2.5. Digestibilidad ideal de las protenas y aminocidos:

FENNEMA, O. (2000) reporta que la determinacin de la biodisponibilidad de
las protenas y los aminocidos el mtodo del balance ha sido objeto de crticas
relacionadas con la posible transformacin microbiana de los restos
nitrogenados no digeridos y no absorbidos en el intestino grueso. Es sabido
que la excrecin de nitrgeno se ve modificada por la microflora del intestino
grueso. Ese hecho puede llevar a sobrevalorar la digestibilidad de la protena y
la disponibilidad de los aminocidos, sobre todo cuando se trata de productos
daados durante la elaboracin. Por lo tanto, la medicin de la desaparicin de
los aminocidos del intestino delgado (recuperacin ideal) debera permitir
determinar con precisin su biodisponibilidad.
Sin embargo, hay que tener presente lo que ocurre cuando una protena no
digerida, bien de la dieta o bien endgena (incluidos pptidos y aminocidos no
absorbidos en la porcin final del intestino delgado), penetra en el intestino
grueso. Una cierta proporcin de la protena de la dieta circula por el intestino
grueso y es excretada por las heces, pero el resto es fermentado por la
microflora. El nitrgeno, o bien se absorbe, principalmente en forma de
amonaco, o bien se incorpora a las protenas microbianas. Parte de las
protenas

microbianas

son

digeridas,

el

nitrgeno

es

absorbido,

principalmente en forma de amonaco; el resto es excretado por las heces. Y lo

mismo ocurre con las protenas endgenas. Las heces del cerdo contienen
cantidades considerables de nitrgeno bacteriano., el nitrgeno bacteriano
puede representar del 62 al 76% del nitrgeno total de las heces.
Es preciso reconocer que la digestibilidad real fecal de las protenas presenta
ciertos inconvenientes, pero hay que efectuar nuevos estudios metodolgicos
para aclarar algunos puntos dudosos, como por ejemplo la contribucin y la
variabilidad de la secrecin endgena en el leo terminal, antes de poder

recomendar una tcnica normalizada de determinacin de la digestibilidad real

ileal que pueda reemplazar a la digestibilidad fecal. La adopcin de los valores
de la digestibilidad ileal, una vez se disponga de procedimientos certificados y
de datos suficientes sobre los alimentos, podr llevarse fcilmente a la prctica.
2.6. Digestibilidad de los aminocidos:
FENNEMA, O. (2000) afirma que

Los trabajos realizados en la rata para

comparar la digestibilidad real de la

protena total

y la de los distintos

aminocidos por separado han aportado numerosos datos que demuestran

que en determinados

productos alimenticios existen diferencias

entre la

digestibilidad de la protena total y la de los distintos aminocidos. As, Sarwar

demostr que en las leguminosas de grano la digestibilidad de la protena no
era un buen indicador de la digestibilidad de los aminocidos licitantes. En el
caso de los frijoles, los guisantes y las lentejas, los valores de la digestibilidad
real de la metionina, la cistina y el triptofano fueron hasta un 43%, 44% y
25% inferiores a los de las protenas respectivas. Sin embargo, las diferencias
entre las digestibilidades de la protena y de la mayora de los aminocidos
individuales

fueron de menos

del 10% en las mezclas constituidas

por

fuentes de protenas animales, en los cereales con poca fibra y en las semillas
oleaginosas.

2.7. Muestras
2.7.1. Harina de soya
Zaldrias Vales (2007) afirma que la harina de soya (glycine max) originaria de
Asia es el resultado de moler granos enteros de soya sometida a un
tratamiento trmico para inactivar factores anti nutricionales en el grano crido
de soya.
Y se logra obtener un producto altamente energtico con una alto valor proteico
y alta disponibilidad biolgica de aminocidos.

Como se puede apreciar en el grafico la harina de soya tiene una porcentaje de

protena de 36 % que puede variar de acuerdo al a estacin del cultivo , tierra
de cultivo.
Zaldrias Vales (2007) tambin menciona que se realizaron pruebas in vivo en
15 cuyes y la digestibilidad proteica de la harina de soya fue de de un 83.70%
2.7.2. Harina de trigo
Segn collazos et al la harina de trigo contiene 10.5 gramos de protena en
100 gramos de muestra.
Wilmer De la Cruz (2010) afirma sobre la cantidad proteica de la harina de trigo
que el gluten es un complejo de protenas insolubles en agua que le confieren
a la masa de harina de trigo la cualidad de ser panificable. el gluten esta
formado por glutelina que es la encargado de dar le fuera ala masa y de
gliadina que es la responsable de darle la elasticidad .
a mas cantidad de gluten se obtiene una harina ms fuerte .
la cantidad de protena que reporta Wilmer De la Cruz (2010) es de un 7.5 %
mnimo y de un 15 % .
y segn Zaldrias Vales (2007) menciona que se realizaron pruebas in vivo en
15 cuyes y la digestibilidad proteica del gluten fue de de un 96.8%

III.

MATERIALES Y MTODOS

3.1. Muestra alimenticia

Harina de soya

Harina de trigo

Casena

3.2. Materiales

Becker

Cronometro

Termmetro

Micropipeta de 20-200 l

Micropipeta de 100-1000 l

3.3. Reactivos

Tripsina de pncreas de puerco (tipo IX) con 14 190 unidades BAEE/mg

de protena.

Quimiotripsina de pncreas bovino (tipo II) 60 unidades/mg de polvo.

Peptidasa de intestino de puerco (Grado III) 40 unidades/g de polvo.

Caseina

NaOH 0.1N

HCl 0.1N

3.4. Equipo

Balanza analtica

Bao maria

pH-metro

3.5. Procedimiento

A. Preparacin de la solucin multienzimtica.

-

Solucin multienzimtica: 1.6mg de tripsina, 3.1 mg de quimiotripsina y

1.3 mg de peptidasa/ml de agua destilada. Mantener en bao de agua
helada y ajustar el pH a 8.0 con HCL y/o NaOH 0.1N.

Antes del ensayo la actividad del sistema multienzimatico deber ser

evaluada mediante la digestibilidad de la casena, cuyos valores de
digestibilidad in vitro son ampliamente conocidos en la literatura.

B. Anlisis de la muestra
-

Preparar 5ml de la suspensin proteica (6.25 mg de protena/ml) con

agua destilada y ajustar el pH a 8.0 con HCl y/o NaOH 0.1N.

Inocular en un bao mara a 37C y aadir 5 ml de la solucin

multienzimatico.

Medir la disminucin del pH durante los primeros 10 minutos. Los datos

de pH en ese periodo de tiempo sern registrados a intervalos de 1
minuto para posteriormente confeccionar un grafico de pH versus tiempo
de incubacin.

IV.

RESULTADOS Y DISCUSIN
A continuacin se exponen los porcentajes de hidrlisis determinado en las
muestras de trigo, soya y casena.
TRIGO

SOYA

T
(min)

%
HIDRLISIS
CASEINA

%
HIDROLISIS
TRIGO 1

%
HIDROLISIS
TRIGO 2

%
HIDROLISI
S TRIGO X

DS
TRIGO

CV
TRIGO

%
HIDROLI
SIS
SOYA 1

%
HIDROLISIS
SOYA 2

%
HIDROLISIS
SOYA X

DS
SOYA

0
0,5
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

75,42
79,40
78,86
80,48
85,19
85,55
87,54
88,27
89,90
90,26
90,44
90,98

64,55
80,30
83,02
85,19
86,64
87,54
86,82
88,63
90,08
90,80
90,80
90,44

65,64
80,30
83,92
85,01
86,82
89,17
90,08
90,26
91,35
91,53
92,25
92,61

69,98
79,85
80,94
82,84
85,92
86,55
87,18
88,45
89,99
90,53
90,62
90,71

0,77
0,64
0,13
0,13
1,15
2,30
1,15
0,90
0,51
1,02
1,54

0,01
0,01
0,00
0,00
0,01
0,03
0,01
0,01
0,01
0,01
0,02

67,09
75,96
76,50
79,22
80,30
80,67
81,39
81,57
81,75
82,29
83,02
83,56

69,26
72,70
73,97
74,87
75,05
75,42
75,60
75,96
76,32
77,23
77,04
77,59

68,17
74,33
75,23
77,04
77,68
78,04
78,49
78,76
79,04
79,76
80,03
80,57

1,54
2,30
1,79
3,07
3,71
3,71
4,10
3,97
3,84
3,58
4,22
4,22

Cuadro N1. Porcentaje de Hidrlisis en el trigo, soya y casena.

Con los datos del cuadro 1, se elabor la grfica % de hidrlisis vs tiempo de

incubacin y la grfica variacin de pH vs tiempo, que se muestran a
continuacin.
Segn Fennema et al. (2010), cuando se hidroliza un enlace peptdico por
efecto de las enzimas, el nuevo grupo carboxilo formado se ioniza
completamente a pH > 7 liberando un in H +. A consecuencia de esto el pH de
la disolucin disminuye progresivamente a medida que progresa la hidrlisis.
Sin embargo, el aumento en la cantidad de moles de enlaces peptdicos
escindidos lleva una correlacin directa con el tiempo, siempre y cuando el pH
se mantenga en el rango de 7-8, ya que al bajar el pH, las enzimas se alejan de
su pH ptimo (para el caso de la prctica, las enzimas empleadas tienen un
rango ptimo de 7.5-8.5). Lo cual explica la disminucin del pH a medida que
transcurri el tiempo de accin de las enzimas y que conforme transcurra el
tiempo, sta variacin no era significativa con tendencia a convertirse en un
valor constante.
En la Figura N 2 se puede apreciar que la cada del pH es distinta para cada
muestra, lo cual podra deberse a la conformacin de aminocidos de las
diferentes protenas que posee cada una, ya que las enzimas tienen cierta
especificidad para determinados enlaces peptdicos (Fennema et al., 2010).
Por otro lado, existen factores que influyen directamente en la digestibilidad de
las protenas siendo los principales, segn Fennema et al. (2010), la
conformacin proteica, los factores antinutricionales y el proceso de digestin;
sin embargo se podra tomar como factor general a la composicin misma del
alimento, puesto que Velsquez (2006) indica que los componentes, como los
diferentes cidos presentes, influyen en la asimilacin de las protenas, as
como Rafael (2008), quien afirma que el cido lctico en ciertos productos
lcteos, genera un descenso mayor del pH.

% Hidrolisis con respecto al tiempo

92.00
87.00
82.00
TRIGO
% hidrolisis 77.00

SOYA

CASEINA

72.00
67.00
0

10

TIEMPO (min)

CASEINA

Figura N1. Porcentaje de Hidrlisis con respecto al tiempo de incubacin

Variacin de pH con respecto al tiempo de incubacin

8.3
7.8

pH

7.3
CASEINA

TRIGO 1

TRIGO 2

SOYA 1

SOYA 2

6.8
6.3
0

TIEMPO (min)

10

12

Figura N2. Variacin de pH con respecto al tiempo de incubacin.

Estudios comparativos (FAO/OMS, 1991; citada por Malca et al., 2006) usando
el mtodo de balance en ratas, clasificaron los valores de la digestibilidad
verdadera de la protena en tres rangos: alta de 93 a 100 % para los alimentos
de origen animal y la protena aislada de soya. Digestibilidad intermedia con
valores de 86 a 92 % para el arroz pulido, trigo entero, harina de avena y harina
de soya; mientras que valores bajos (70% - 85%) fueron reportados para
diferentes tipos de leguminosas incluyendo frijoles, maz y lentejas. De acuerdo
a sta clasificacin el valor obtenido para la casena, en la Figura N1, fue de
90.98%, lo cual ubicara a la casena como una protena de media
digestibilidad, as mismo, los valores promedio obtenidos para la harina de trigo
y soya, mostrados en la Figura N1, fueron de 90.71% y 80.57%, los cuales
clasificaran a la protena trigo y soya como de media y baja digestibilidad
respectivamente.

V.

CONCLUSIONES
El mtodo de digestibilidad in vitro de protena usado en la prctica es
relativamente sencillo y rpido en comparacin con el mtodo de digestibilidad
in vivo de protenas.
El pH es inversamente proporcional al grado de digestibilidad de la protena.
La protena de harina de soya y trigo tienen una digestibilidad baja y media con
valores de 80.57% y 90.71%, respectivamente y la casena, una digestiblidad
de alta con un 90.98%.
Existen diferentes factores por los cuales dentro del organismo puede ocurrir
todo lo contrario a lo que se realiza en un ensayo in Vitro, ya que todo depende
de la dieta que se consuma, los cuales unos nutrientes acten como limitantes
de otros.
El pH y temperatura favorecen la actividad enzimtica en la digestin, ya que
es ms fcil la hidrlisis por la desnaturalizacin.
La ventaja ms importante de este mtodo in Vitro para predecir la
digestibilidad aparente de protenas es que este puede ser completado en
menos de 1 hora y con un alto grado de sensibilidad.

VI.

BIBLIOGRAFA

Fennema, O. 2000. Qumica de los Alimentos. Editorial ACRIBIA, S.A.

Zaragoza, Espaa.

Fennema, O.; Parkin, K.; Damodaran, S. 2010. Qumica de los Alimentos.

Tercera Edicin. Editorial Acribia. Zaragoza-Espaa.

Gauthier, C.; Vachon, C.; Savoir, L.1986. Enzymatic Conditions of a in Vitro

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Hernndez, M.; De la Vega, A.;Sotelo.A. 1984. Determinacin de la

Digestibilidad Proteinica in vitro e in vivo en Cereales y Leguminosas Crudos y
Cocidos. Archivos Latinoamericanos de Nutricin.

Malca, S.; Lucas, O.; Arbaiza, T.; Carceln, F.; San Martn, F. 2006.
Comparacin de dos tcnicas para determinar la digestibilidad proteica de
insumos y alimentos comerciales para caninos. UNMSM. Lima-Per.

Mataix. 2005. Requerimientos e ingestas recomendadas de cidos grasos

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Rafael, J. 2008. Alternativa a los productos lcteos en las dietas de

lechones. Disponible en http://www.3tres3.com/nutricion. Consultado el 14
de Abril del 2012.

Velsquez, G. 2006.

Fundamentos de alimentacin saludable. Salud

/Nutricin y diettica. Editorial Universidad de Antioquia. Medelln,

Colombia.

Wilmer De la Cruz .2010 .Complementacin proteica de harina de trigo

(Triticum aestivum L) por harina de quinua (Chenopodium quinoa Willd) y
suero en pan de molde y tiempo de vida til

Yeoung, V.R.1991. Soy protein in relation to human protein and aminoacid

nutrition. Journal of American Diet Association.

Zaldrias Valez . 2007. Digestibilidad y energa digestible de la harina de

soya y del gluten de maz en cuyes. zootecnia

VII.

CUESTIONARIO
1. Son los ensayos in vitro mejores que los ensayos in vivo?
Los mtodos in vitro tienen el beneficio potencial de manejar un gran
nmero de muestras, costo-eficacia y economa con respecto a las
cantidades de materia prima. Tradicionalmente, los mtodos in vitro se han
basado en anlisis qumicos tales como las determinaciones de
composicin de nitrgeno Kjeldhal y la composicin de aminocidos.
Debido a que estos mtodos se llevan a cabo usando criterios
experimentales distintos del proceso natural digestivo (reacciones qumicas
fuertes), a menudo liberan una cantidad de nutrientes mayor que los que se
encuentran tpicamente disponible para el animal, lo que puede producir
resultados inexactos. Por lo que se concluye que si es mejor en muchos
aspectos.

2. Diga cuales son las ventajas y desventajas del uso del ensayo
realizado en la prctica?

Ventajas
-

Menor tiempo que in vivo.

Menor costo que in vivo

Se puede manejar un gran nmero de muestras.

Desventajas
-

La solucin multienzimtica debe ser fresca para cada prueba

Cuando se usan volmenes pequeos y sin tamponar es difcil

ajustar el pH y tomar las mediciones de peso de muestra
necesarios..

Las unidades experimentales son variables (los organismos difieren

en condiciones metablicas, estado de sistemas internos, etc.).

Sustancias con fuerte capacidad tampn pueden afectar los

resultados, resistiendo el cambio de pH.

Los equipos deben estar bien calibrados.