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    Práctica 5 Meristemas

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    Lucero Vigo Rivera
    Este documento describe un estudio sobre el cultivo de meristemos de papa con el objetivo de establecer los requerimientos nutricionales y hormonales óptimos en cada fase del proceso. Se explantaron y esterilizaron brotes de tubérculo, se disecaron los meristemos apicales y se cultivaron en diferentes medios. Los resultados mostraron que el medio MS + BAP 0,5 mg/L + AIA 0,5 mg/L produjo la mayor diferenciación de meristemos. Aunque el enraizamiento fue difícil, se concluy

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    Práctica 5 Meristemas

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    Lucero Vigo Rivera
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    Este documento describe un estudio sobre el cultivo de meristemos de papa con el objetivo de establecer los requerimientos nutricionales y hormonales óptimos en cada fase del proceso. Se explantaron y esterilizaron brotes de tubérculo, se disecaron los meristemos apicales y se cultivaron en diferentes medios. Los resultados mostraron que el medio MS + BAP 0,5 mg/L + AIA 0,5 mg/L produjo la mayor diferenciación de meristemos. Aunque el enraizamiento fue difícil, se concluy

    Descripción original:

    Biotecnología Agrícola

    Título original

    Práctica-5-meristemas

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    Este documento describe un estudio sobre el cultivo de meristemos de papa con el objetivo de establecer los requerimientos nutricionales y hormonales óptimos en cada fase del proceso. Se explantaron y esterilizaron brotes de tubérculo, se disecaron los meristemos apicales y se cultivaron en diferentes medios. Los resultados mostraron que el medio MS + BAP 0,5 mg/L + AIA 0,5 mg/L produjo la mayor diferenciación de meristemos. Aunque el enraizamiento fue difícil, se concluy

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    UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

    FACULTAD DE CIENCIAS
    ESCUELA PROFESIONAL DE BIOTECNOLOGÍA

    Práctica N° 5

    Cultivo de meristemos de Papa


    PRESENTADO POR
    VIGO RIVERA, Lucero Alicia

    DOCENTE

    CHICO RUIZ, JULIO

    Chimbote – Perú

    2018
    Introducción:

    Una forma de obtener plantas libres de patógenos es a través del cultivo in vitro
    de meristemos que se fundamenta en el hecho de que la distribución de los
    microorganismos (virus, bacterias y micoplasmas) en los tejidos de la planta no
    es uniforme y su concentración tiende a disminuir progresivamente hacia el ápice
    del tallo.
    El desarrollo de una metodología de micropropagación a partir de meristemos
    apicales es importante para conocer el comportamiento in vitro de esta variedad
    y apoyar la multiplicación de plantas élite seleccionadas en campo por sus
    características fenotípicas especiales; además se puede realizar una cuidadosa
    selección del material genético, manejar grandes volúmenes de plántulas en
    espacios reducidos y mantener un stock de plantas libres de enfermedades.

    Objetivo:
    1. Establecer los requerimientos nutricionales y hormonales en el medio de
    cultivo durante la fase de establecimiento de los meristemos.
    2. Establecer los requerimientos nutricionales y hormonales en el medio de
    cultivo durante la fase de multiplicación de las plántulas in vitro
    3. Establecer los requerimientos nutricionales y hormonales en el medio de
    cultivo durante la fase de enraizamiento de las plántulas in vitro.

    Tipo de Explante: brote de tubérculo de papa

    Metodología:
    A- Desinfección del tejido:
    1. Retirar las hojas del tallo y dejar expuestas las yemas.
    2. Remover de la planta, secciones de yemas de aproximadamente 5 cm de
    largo.
    3. Colocar en solución de etanol 70% durante 2 minutos.
    4. Colocar en solución de hipoclorito de sodio 3 % durante 3 minutos.
    5. Enjuagar tres veces con agua estéril, bajo campana de flujo laminar.

    B- Disección de ápices meristemáticos: este trabajo debe realizarse en


    forma aséptica (bajo campana de flujo laminar).
    1. Esterilizar los instrumentos a utilizar (bisturí, agujas, pinzas).
    2. Limpiar la lupa y el área de disección con una solución de etanol 70%.
    3. Sostener el tallo desinfectado con una pinza estéril y observarlo bajo la lupa.
    4. Remover las hojas externas con un bisturí hasta llegar al domo meristemático.
    5.Hacer cuatro cortes en ángulos iguales, remover el domo con dos primordios
    y depositarlo suavemente en el medio de cultivo.
    6. Incubar los meristemas en la cámara de cultivo, bajo condiciones controladas
    de luz y temperatura.

    Tratamientos (fase de establecimiento)

    TR1 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + ANA 0,3 mg.L-1


    TR2 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,5 mg.L-1
    TR3 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,3 mg.L-1
    TR4 MS + BAP 0,5 mg.L-1 + AIA 0,5 mg.L-1

    Resultados
    Tabla. Influencia de los diferentes medios de cultivo en la diferenciación de
    meristemos procedentes de la planta de papa.

    Altura De
    Nº De Meristemos Número De
    Tratamientos Plántulas
    Explantes Diferenciados (%) Brotes
    (mm)

    10 TR1 5 0,4 2
    10 TR2 3 0,6 1
    10 TR3 7 0,3 2
    10 TR4 5 0 0

    Primero se escogieron las papas que tengan ápices meristemáticos recién nacidos
    como el de la siguiente figura:

    Se dejó remojar por una semana para aumentar la cantidad de ápices meristemáticos
    del tubérculo

    Luego del remojo pasamos a esterilizar el tubérculo con el alcohol al 70% y lejía al
    2.5%. Procedemos a cortar los ápices meristemáticos para realizar la siembra en las
    placas.
    CONCLUSIONES
     Se establecieron los requerimientos nutricionales en el medio de cultivo
    durante la fase de establecimiento cumpliendo con todos los procedimientos de
    asepsia.

     Durante la fase de multiplicación se observó que la regeneración de los


    explantes es mayor cuando se aplica MS + BAP 0,5 mg. L-1 + AIA 0,5 mg.
    L-1.

     La fase de enraizamiento fue más complicada ya que no se obtuvieron


    explantes que sobrevivieran a el ambiente externo sin embargo se observó que
    es necesario un mayor tiempo de maduración de la raíz para que el explante
    sobreviva.

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