FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

ESCUELA PROFESIONAL DE NUTRICIÓN

“Evaluación de la capacidad antioxidante de la semilla de

Persea americana Miller var. Hass fuerte (palta)”

TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE:

LICENCIADO EN NUTRICIÓN

AUTORA:

Díaz Veas Mary Karina

ASESOR:

Mosquera Figueroa Zoila Rita

LÍNEA DE INVESTIGACIÓN:

Alimentación y nutrición

LIMA- PERÚ

2018
 iii

PÁGINAS PRELIMINARES
 iii

Página del Jurado

 iv

Dedicatoria
A Dios porque estuvo a mi lado en todo
momento y me dio fuerza para poder
culminar mi etapa universitaria. A mis
hermanos quienes me apoyaron para
poder cumplir esta meta. A mi madre
,Mary Veas, por su apoyo incondicional,
preocupación, dedicación y, sobre todo,
amor.
 v

Agradecimiento
Al culminar este arduo trabajo quiero
agradecer a la Universidad Cesar
Vallejo Lima Este por proporcionarme
los conocimientos que se requieren
durante esta etapa universitaria, al Mg
Oscar Gustavo Huamán por su
orientación y conocimiento impartido en
procedimientos de laboratorio y a mi
madre especialmente por apoyarme
siempre .
 vi

Declaratoria de Autenticidad

Yo, Mary Karina Díaz Veas con DNI Nº 47160725, a efecto de cumplir con las
disposiciones vigentes consideradas en el Reglamento de Grados y Títulos de la
Universidad César Vallejo, Facultad de Ciencias Médicas, Escuela de Nutrición, declaro
bajo juramento que toda la documentación que acompaño es veraz y auténtica.

Así mismo, declaro también bajo juramento que todos los datos e información que se
presenta en la presente tesis son auténticos y veraces.

En tal sentido asumo la responsabilidad que corresponda ante cualquier falsedad,

ocultamiento u omisión tanto de los documentos como de información aportada por lo
cual me someto a lo dispuesto en las normas académicas de la Universidad César
Vallejo.

Lima, 11 de junio del 2018

 vii

Presentación

Señores miembros del jurado:

En cumplimiento del Reglamento de Grados y Títulos de la Universidad César

Vallejo presento ante ustedes la Tesis Titulada “Evaluación de la capacidad
antioxidante de la semilla de Persea americana Miller var. Hass fuerte
(palta)” y comprende los capítulos de Introducción, metodología, resultados,
conclusiones y recomendaciones. El objetivo de la referida tesis fue Evaluar la
capacidad antioxidante en la semilla de Persea americana Mill. Var. Hass fuerte
(palta) en la localidad de Cañete, provincia de Cañete y Departamento de Lima,
del Perú, la misma que someto a vuestra consideración y espero que cumpla con
los requisitos de aprobación para obtener el Título Profesional de Licenciado en
Nutrición.

Atte,
 viii

Índice

Página

PÁGINAS PRELIMINARES iii

Página del Jurado iii
Dedicatoria iv
Agradecimiento v
Declaratoria de Autenticidad vi
Presentación vii
Índice viii
RESUMEN x
ABSTRACT xi
I. INTRODUCCIÓN xii
1.1. Realidad Problemática 13
1.2. Trabajos previos 14
1.3. Teorías relacionadas al tema 16
1.4 Formulación al Problema 24
1.5 Justificación del estudio 25
1.6. Objetivos 26
II. MÉTODO 27
2.1 Diseño de investigación 27
2.2. Variables, Operacionalización 28
2.3. Población y muestra 32
2.5 Método de análisis de datos 35
III. RESULTADOS 36
IV. DISCUSIÓN 39
V. CONCLUSIONES 43
VI. RECOMENDACIONES 45
VII. REFERENCIAS 47
ANEXOS 61
 ix

Anexo1: Certificación Botanica 62

Anexo 2: Curva de reducción del DPPH por el extracto etanólico de semilla de
Persea americana Mill 63
Anexo 3: Curva de reducción del DPPH por el la Vitamina C 64
Anexo 4: Matriz de consistencia 65
Anexo 5: Ficha de recolección de datos 66
Anexo 7: Autorización de publicación de tesis para repositorio institucional 68
Anexo 8: Evaluación de la similitud del instrumento con Turnitin 69
 x

RESUMEN

Objetivo: Evaluar la capacidad antioxidante del extracto etanolico de la semilla de

Persea americana Miller var. Hass (palta). Metodología: Se extrajo 500gr de semillas
de paltas de la variedad Hass, las que se lavaron, cortaron e hirvieron en agua destilada
por 15 min, se pasó por papel filtro Whatman Nº1 y luego se secó en estufa a 40ºC, para
así obtener el extracto de semilla de palta a partir de esta muestra se elaboró un extracto
etanolico de semillas. Se empleó DPPH al 50mg % en metanol absoluto y 12 µg/mL de
Vitamina C en agua destilada. Resultados: el extracto registro un IC50 de 7.088±0.36
µg/ml y la Vitamina C, de 6.361±0.36 µg/ml; el Porcentaje de captación de DPPH es
64.04% en el extracto y 87.36% en el estándar. Conclusión: el extracto etanolico de la
semilla de Persea americana Miller var. Hass (palta) tiene alta capacidad antioxidante
evaluándose por el método DPPH.

Palabras Clave: Radicales libres, Persea americana, Antioxidante.

 xi

ABSTRACT

Objective: To evaluate the antioxidant capacity of the ethanol extract of Persea

americana Miller var. Hass seed (avocado). Methodology: 500gr of avocado seeds of
the Hass variety were extracted, washed, cut and boiled in distilled water for 15 minutes,
passed through Whatman filter paper No. 1 and then dried in an oven at 40ºC, to obtain
the extract of the avocado seed from this sample, an ethanol extract of seeds was
elaborated. DPPH was used at 50mg% in absolute methanol and 12 μg / mL of Vitamin
C in distilled water. Results: the extract registered an IC 50 of 7,088±0.36 μg / ml and
Vitamin C of 6,361±0.36 μg / ml; The the percentage of DPPH is 64.04% in the extract
and 87.36% in the standard. Conclusion: the ethanol extract of Persea americana Miller
var. Hass seed (avocado).has a high antioxidant capacity and is evaluated by the DPPH
method.

Keywords: Free radicals, Persea americana, Antioxidant.

 xii

I. INTRODUCCIÓN
 13

1.1. Realidad Problemática

Los radicales libres son sintetizados en el cuerpo y desempeñan muchas funciones

como la regularización de la tonicidad vascular y mantener estable el sistema oxido-
reducción. Sin embargo son elementos químicos con un alto nivel de reactividad [1].
Entre los compuestos químicos que se conocen, la carga negativa de los electrones
permite que se muevan, al estar apareados dan la forma de un orbital y cuando viajan
de modo impar hacen que se pierda la estabilidad molecular lo que finalmente daña
células y tejidos sanos. [2]

Al sobrepasar los recursos antioxidantes del cuerpo no es posible que se desactive la

reacción química de las especies reactivas de oxígeno y especies reactivas de
nitrógeno, dándose dentro del metabolismo, el estrés oxidante, que origina la
descompensación entre la síntesis de especies reactivas de oxigeno que pueden
generar enfermedad y facilitar su deterioro [2]

Se ha relacionado a los radicales libres con una gran cantidad de enfermedades entre
estas el infarto del miocardio, diabetes mellitus, hipertensión arterial, mal de Parkinson,
Alzheimer, polineuropatía alcohólica, intoxicación por oxígeno, isquemia cerebral,
cataratas, retinopatía, síndrome de dificultad respiratoria, enfisema, cáncer de pulmón,
cáncer de colon, artritis reumatoide, enfermedades autoinmunes, toxicidad en riñones,
etc. [3]

Los antioxidantes neutralizan los radicales libres del organismo, evitando que la
reactividad de estas moléculas cause el daño en células y tejidos. Los antioxidantes
protegen al ser humano contra este tipo de enfermedades. A raíz de esto han
aumentado los estudios referentes al uso de antioxidantes en forma natural dentro de la
alimentación. [3]

La semilla de palta es una de las partes comúnmente no usadas para el consumo.

Actualmente el empleo de partes no comestibles de frutos como el antes mencionado,
sirve para elaborar productos medicinales y está en aumento, especialmente debido a
que disminuye la acumulación excesiva de desechos y porque la parte no comestible es
la que contiene más cantidad de principios activos, entre estos antioxidantes naturales.
[4]
 14

En la actualidad se ha encontrado una gran capacidad antioxidante en estas semillas y

otros alimentos, sin embargo pese a su bajo costo y altas propiedades favorables para
la salud, el escaso conocimiento de las mismas no permite su utilizacion médica y que
se aprovechen sus beneficios.

1.2. Trabajos previos

Internacionales

Urra (2015) presenta un estudio con el objetivo de establecer la capacidad antioxidante

en residuos (semilla y cascara) de plantaciones Persea americana en chile, de la
variedad Hass. La investigación de enfoque cuantitativo en su metodología emplea
semillas y cascara de palta que fueron liofilizadas, molidas y almacenadas al vacío a
temperatura ambiente: los extractos se analizaron para compuestos fenólicos totales,
usando acido gálico como patrón. Para la medición de antioxidantes se utilizaron los
métodos de captación del radical libre DPPH y ORAC. Se concluyó que la semilla y la
cascara de la palta tienen altas capacidads antioxidantes. [5].

Chávez (2012) en su tesis tiene el objetivo de dar a conocer las propiedades

antioxidante y antiomicrobianas de la cascara y semillas de palta. Según la metodología
presentada se hicieron extractos metanolicos y con acetona empleando la semilla y
cascara de palta molidas frescas, con concentración de 20% para cada uno, haciendo
uso de rotavapor y baño María, se conservaron congelados a espera de su utilización
en la que se estudió la capacidad antioxidante y el contenido de otras sustancias. El
resultado de la medición de la capacidad antioxidante en extracto es 4.921±4.099 y
5.392±1.475 en metanolico, 11.778±0.082 y 12.718±0.067 en acetonico y 13.562±0.31
y 13.914±0.168 en polifenolico, µm ET/g. Concluyo que se consiguió información
sustancial respecto a la composición de semilla y cascara de palta y se determinó un
efecto mayor de capacidad antioxidante en semilla de palta [6].

Adamarola y colaboradores (2016) publican un artículo de investigación con la finalidad

de describir las propiedades fisicoquímicas y el potencial antioxidante analizados en el
aceite extraído de la hueso de Persea americana. El estudio de enfoque cuantitativo
según su metodologia evalúa espectrofotométricamente diversas concentraciones de la
muestra de aceite a través del efecto de barrido de radicales libres sobre el radical 2, 2-
difenil-2-picrilhidrazilo (DPPH) tomando como estándar el ácido gálico. Los resultados
muestran que el aceite de semilla tiene 51.54 ± 0.25% de inhibición de DPPH en
 15

promedio y IC50 de 4.68 ± 0.02mg / ml de IC50 cantidades mas bajas que en el acido
galico que presento 73.60 ± 0.03% de inhibición de DPPH y 0.00382 ± 0.01mg / ml de
IC50. Se concluyó que existe una alta actividad antioxidante en el aceite de semilla
estudiado [4].

Gómez (2014) en su tesis tiene un objetivo específico de hacer una evaluación al poder
de protección contra la oxidación que provee el extracto de hueso de paltal en sistemas
alimentarios. Uso el Método de superficie de respuesta (RSM), las variables utilizadas
son: temperatura, tiempo y concentración de etanol. el contenido total de polifenoles
(TPC) y la potencia antirradical medida por la Capacidad antioxidante de oxígeno y
radicales (ORAC). Los resultados obtenidos del RSM son de un R2 de 94.69 para TPC
y 96.7 para ORAC. En emulsiones la inhibición de la oxidación es de 30% para extractos
puros y 60% para la mescla con albumina de huevo. Se concluye que el extracto
liofilizado se usó como protección contra la oxidación de aceites y grasas con excelentes
resultados, especialmente en la carne, en la que la durabilidad de la carne aumenta
significativamente en relación con la oxidación [7].

Rosero J. (2017) en su tesis sostuvo que uno de sus objetivos es hacer una evaluación
de 2 métodos de extracción empleando metanol 80% y acetona 70%como disolvente
para determinar en ambos la actividad antioxidante in-vitro por los ensayos ABTS y
DPPH. En la metodología de esta investigación de enfoque cuantitativo, para el ensayo
ABTS se hizo una interpolación de curva estándar usando 5 diluciones de trolox y se
prepararon 8 soluciones de concentración de DPPH. Los resultados del método DPPH
refleja que para muestras puras se tiene una mayor capacidad antioxidante. Por otro
lado los residuos de la palta son elementos promisorios de aporte de compuestos
bioactivos que pueden ser importantes en industrias alimentaria y farmacéutica, dando
mayor interés los compuestos de más peso molecular [8].

Nacionales

Cabrera Dilas, Minchan (2015) desarrollaron una tesis con el propósito de conocer tanto
actividad antioxidante como antimicrobiana que contiene el extracto etanolico de hueso
de aguacate, esta metodología se hizo con la evaluación del extracto etanólico
(1mg/mL) a concentraciones de 20 - 100 µL, siguiendo el método del DPPH, obteniendo
como resultados parecidos al Trolox que se usó como patron dando resultados
significativos. Al determinar la cantidad de polifenoles por el ensayo Folin ciocalteau se
observó dicho extracto tiene una concentración elevada de los mismos. Se concluyó
 16

que el extracto tiene una capacidad antioxidante muy significativa, que a más polifenoles
más poder reductor y más capacidad atrapadora de radicales libres [9].

Rengifo (2014) presento una tesis con el objetivo de realizar la caracterización del aceite
de cotiledones de la semilla palta y cuantificar tanto la capacidad antioxidante total de
la parte saponificable como de la parte insaponificable. Utilizo el estudio de enfoque
cuantitativo. Se hizo diversos estudios al mismo, entre estos se evaluó la capacidad
antioxidante por el ensayo DPPH (α,α-difenil-β-picrilhidrazilo) y por ABTS (2,2 Azinobis
(3 etilbenzotiazolinaácido sulfónico). El resultado de la actividad antioxidante por método
DPPH fue 9,676±0,260 μmol TE/kg; por ABTS, 5,313±0,039 μmol TE/kg; la fracción
saponificable registró 8,700±0,26 μmol TE/kg; mientras que la insaponificable,
7,37±0,169 μmol TE/kg. Se concluyó que la actividad antioxidante propia del fruto se
debe a la presencia de polifenoles y esteroides [10].

Huamán (2014) el objetivo de su investigación es esclarecer como influyen los solventes

como acetona, alcohol metílico y agua en distintos momentos de la extracción en el
rendimiento de polifenoles totales que contiene el hueso de palta. Se sometio a un
procedimiento de selección, maduración y extracción del hueso de la muestra del que
se obtuvo la harina de semilla; se siguió el método de Folin Ciocalteu. La acetona mostro
mas cantidad de polifenoles totales a un 75% siendo de 24,402± 0,291 mg, Ácido
gálico/g a un tiempo de 12h de extracción. Se concluyó que la acetona influye mas en
el proceso de extración de polifenoles totales de harina de semilla de palta. [11]

1.3. Teorías relacionadas al tema

Radicales libres y antioxidantes

En el organismo naturalmente hay una síntesis de radicales libres en los procesos del
metabolismo. Son creados por el sistema inmunológico para eliminar virus y bacterias.
Así mismo los factores ambientales tales como la contaminación de aire, agua difusión
de humo y gases, la radiación ultravioleta y los productos químicos crean radicales
libres. [12]

Cuando hay un desbalance entre radicales libres y producción de antioxidantes ya sea

por exceso de los primeros o por disminución de los segundos, se da el estrés oxidativo
esta descompensación da lugar a patologías celulares en las que hay cambios en
proteínas, lípidos, ADN, lipoperoxidación, oxidación de grupos de proteínas, enlaces
covalentes en las ribonucleoproteinas, etc. Lo que da una consecuencia común
 17

vinculada al daño oxidativo de las células. El cuerpo responde a estos daños mediante
procesos naturales como la regulación de proteínas antioxidantes, producción de ROS
en condiciones diabéticas, producción de enzimas reparadoras de daños oxidativos,
biomoléculas de bajo peso molecular, defensa enzimática, y glutatión peroxidasa. [13]

Esta acción de los radicales libres ocurre comúnmente en el organismo debiendo ser
regulado por el sistema de defensa antioxidante. Un antioxidante hace que la oxidación
causada por radicales libres se neutralice enviando electrones a la sangre que se captan
por las radicales libres. Las consecuencias negativas para la salud se dan cuando el
exceso de los radicales libres se prolonga por largo tiempo, lo que ocurre en mayoría de
casos por contaminación externa, originada por contaminación de la atmosfera y humo
de cigarro, que crean diversos tipos de radicales libres en el cuerpo. La margarina, las
grasa trans de la leche y de la carne ayudan a incrementar los radicales libres [12]. Los
antioxidantes se clasifican de acuerdo con su función, los primarios evitan la formación
del oxidante; secundarios, capturan especies reactivas de oxígeno y terciarios, reparan
a las moléculas modificadas [14]

La enzima Superóxido dismutasa (SOD) actúa en organismos aeróbicos, en ciertos

anaeróbicos, y en todos los compartimientos subcelulares expuestos al estrés
oxidativo. Se dio a conocer que incluir SOD beneficiaba y disminuía la oxidación de
lípidos y el daño a la membrana [15],

La Superoxido dismutasa (SOD) es la primera enzima de desintoxicación y el

antioxidante más potente de la célula. Es una notable enzima endógena que combate
la oxidación, es parte del primer sistema de defensa antioxidante contra ROS.
Transforma la disimulación de 2 moléculas de anión superoxido (O2-), a H2O2 y O2, por
lo que representa el anión superoxido menos perjudicial. SOD es una proteína
enzimática con un fuerte vínculo entre su parte de proteína y un metal, con el metal se
encuentra dentro de la molécula razón por la cual necesita un metal cofactor para actuar.
[16] [17]

Los iones metálicos que comúnmente se unen por SOD son Fe, Zn, Cu y Mn. los SOD
se clasifican en tres tipos y estos son Fe-SOD ubicado frecuentemente en procariotas y
cloroplastos de ciertas plantas, Mn-SOD se encuentra en procariotas y mitocondrias de
eucariotas y Cu/Zn-SOD que abundan en eucariotas y se distribuyen más, ubicados en
el citosol y también se pueden encontrar en cloroplastos y peroxisomas. [18]

La Catalasa se conoce como una enzima antioxidante que tiene por función la
descomposición de H2O2 con la obtención de 2 moléculas H2O y O2 protegiendo así a
las células del estrés oxidativo generado por H2O2 [19]. Se pueden clasificar a las
 18

Catalasas en tres agrupaciones: las Catalasas monofuncionales y las bifuncionales

tienen un grupo hemo y se encuentran en organismos eucariontes y procariontes. Las
pseudocatalasas poseen manganeso (Mg) en el centro conocido como sitio activo
localizándose únicamente en bacterias [20] [21]

Para finalizar la desintoxicación de radicales libres de oxigeno (ROS) se emplean

Catalasas, se dio a conocer que el Nicl2 inducido aumenta la generación de radicales
hidroxilo, y era prevenido significativamente por Catalasa, a su vez, atenuó la formación
de 8-OH-dG, [16]. La actividad de la Catalasa disminuye notablemente en tumores de
hígado [22] y otros órganos. [18]

La vitamina E se conoce como el antioxidante primordial en romper cadenas de

membranas, debido a su muy fuerte capacidad antioxidante que rompe la cadena de
liperoxidación de membrana [23].La vitamina E engloba diversos componentes, entre
estos están incluidos los tocoferoles y los tocotrienoles. El más primordial en el ser
humano es el RRR-a-tocoferol. La acción antioxidante es la función más notable que se
le atribuye [24]. La vitamina E se describe como el captador de radicales libres para
evitar la aparición de las enfermedades crónicas [25]

La vitamina C conocida como ácido ascórbico, es soluble en agua y se genera de del

proceso de metabolismo de la glucosa. Actua cediendo electrones a agentes oxidantes
y se requiere su acción para formar fibras de colágeno mediante la hidroxilacion de
prolalina y lisina. Así mismo se encarga de proteger contra los daños ocasionados por
radicales libres. El organismo no es capaz llevar a cabo la síntesis de la vitamina C
porque no posee la enzima llamada gulonolactonaoxidasa [26]

Se describe al ácido ascórbico como un cofactor de enzimas, radical carroñero y

donador-aceptor que mueve los electrones en la membrana plasmática. Puede captar
radicales superoxido e hidroxilo y regenerar a α-tocoferol [27]

Los carotenoides han demostrado que reducen la prevalencia de determinadas

enfermedades. A su vez proveen de provitamina A, muestran una función antioxidante
al contrarrestar RNS [28]. La función de los carotenoides en diversas enfermedades a
llamado mucho la atención, en la ateroesclerosis evita que se formen las placas
ateromatosas. Se ha verificado que personas que contenían altas cantidades de
licopeno, un tipo de carotenoide, en los tejidos, reducían en 60% el riesgo de sufrir un
infarto, a diferencia de personas con menores cantidades del mismo en el nivel sérico y
en tejidos. También se observó con menor riesgo de complicaciones en quienes
consumían más alimentos ricos en betacaroteno y demás carotenoides. [29]
 19

La vitamina A integra las líneas de defensa del cuerpo a radicales libres tales como
thiol, superoxido, hidroxilo, peróxido de hidrogeno y oxigeno atómico, que están
implicados en diversas enfermedades. La defensa antioxidante de esta vitamina abarca
la acción de barrido de radicales simples de oxígeno y radicales thiol, y posiblemente
está vinculada con mecanismos que interviene en la expresión genética y diferenciación
celular. Ciertas investigaciones han expuesto la relación inversa entre el estado de
vitamina a y cáncer, así como la propensión a padecer una enfermedad isquémica
coronaria. Por eso se sugirió que la concentración segura en sangre para disminuir
riesgos de enfermedad isquémica y cáncer es 80 µg/dL. [30] [31]

Compuestos fenólicos conocidos como polifenoles comprenden el vasto conjunto de

sustancias químicas, en el que se encuentran diferentes estructuras, características asi
como funciones biológicas, del que forman parte más de 8.000 compuestos diferentes.
La estructura molecular contiene 1 o más grupos hidroxidos unidos a un anillo aromático
[32]. Estas sustancias tienen el poder de proteger a la célula de la oxidación, reduciendo
el riesgo de contraer distintas enfermedades degenerativas relacionadas con el estrés
oxidativo que resulta de los radicales libre [33].

Enfermedades relacionadas con radicales libres

Los ROS pueden ser producidos al reducirse parcialmente el oxígeno molecular, el que
gana electrones donados erróneamente durante la oxidoreducción, obteniendo
solamente la reducción parcial [34] [35] [36] [37]. Cuando hay un exceso de estas en el
cuerpo, producen estrés oxidativo, y a su vez daño celular directamente [38]. Se
estableció que el estrés oxidativo está fuertemente vinculado con el aumento de
morbilidad de patologías entre estas la arterioesclerosis, cáncer, enfermedades del
sistema nervioso central, daño renal, etc [34]. El estrés oxidativo es la conducción
insuficiente de ROS y RNS por un sistema de defensa antioxidante. Eso explica el
vínculo entre radicales libres y enfermedad [39]

Los lípidos que dan soporte a la membrana pasan por una peroxidación por el efecto de
los radicales libres. Cuando se da la peroxidación lipídica se generan así mismo
bastantes productos tóxicos que son como segundos mensajeros. La lipoperoxidación
perjudica gravemente el estado de las células. Ciertos productos de la lipoperoxidación
tales como el malondialdehído, 4-hidroxinonenal, 2-alquenales e isoprostanos tienen
mayor atención de la toxicología [40].

El daño de los radicales libres a los carbohidratos, se conocen poco, sin embargo se
determinó que los polisacáridos del grupo de los glucosaminoglucanos, el ácido
hialurónico, el condroitín sulfato, condrotín sulfato B, etc; son algunos de estos,
 20

propensos a degradarse al hacer contacto con ROS, principalmente a radicales

superoxido e hidroxilo, lo que posiblemente modifique la acción de los proteoglucanos
implicándose de esta forma en la inflamación [41].

Los aminoácidos, tanto los monómeros libres como las cadenas polipeptidicas son
susceptibles a la oxidación por radicales libres dando como resultado peróxidos,
cetoácidos y muchos derivados. Las proteínas se pueden oxidar en el grupo amino, el
grupo carboxilo o distintas cadenas laterales que dan a cada aminoácidos sus
propiedades específicas. Con respecto a causar enfermedad, estos cambios generan la
inactivación de enzimas, degradación de proteínas, propiedades de unión alteradas, el
paso defectuoso de las moléculas pequeñas por la membrana (lo que es común en
lípidos oxidados) y la oxidación de residuos de cisteína a dimeros de cisteína [42].

También se planteó que la acumulación de proteínas oxidadas puede favorecer el

envejecimiento, pero no hay una demostración directa de esto. Evidentemente la
degradación de proteínas, el mal plegamiento y oxidación pueden causar enfermedades
crónicas, tales como el Alzheimer y la esclerosis lateral amiotrófica, sin embargo no se
tiene conocimiento de que las anomalías proteicas sean desencadenantes de
enfermedades agudas [43].

Los radicales libres alteran grandemente el ADN, pueden lograr que se despedace, que
se active la enzima poli sintetasa. El nicotin adenin dinucleótido en forma oxidada
(NAD+) repara el daño al ADN. Si el daño es mucho el NAD+ se acabaría y se daría la
muerte de la célula, ya sea por necrosis o apoptosis, dependiendo del daño que se
ocasiono. Si se daña un orgánulo o la membrana celular por los radicales libres lo hace
vulnerable pudiendo perjudicar a toda la célula. El impacto negativo que tiene los
radicales libres en los componentes celulares, lípidos, hidratos de carbono proteínas y
ADN se vincula con múltiples enfermedades como cáncer, enfermedades del sistema
nervioso central y periférico, diabetes mellitus, isquemia, entre otras. [44] [45].

Estas dolencias se dividen en dos grupos, el primero comprende enfermedades

causadas por proxidantes que disminuyen la tolerancia a la glucosa, lo que se conoce
como estrés oxidativo mitocondrial y lleva al cáncer y diabetes mellitus; el segundo
grupo incluye enfermedades causadas por condiciones inflamatorias oxidativas y acción
aumentada de NAD PH oxidasa generando ateroesclerosis e inflamación crónica; o
síntesis de especies reactivas de oxigeno influenciada por xantina oxidasa que se
vincula con isquemia y lesión por reperfusion. El curso del envejecimiento se da en
mayormente como daño de la acción de los radicales libres. [44] [46]
 21

Fue en 1956 cuando Denham Harman, profesor de la universidad de Nebraska, explico

el vínculo entre los radicales libres y la vejez. Refirió que la esperanza de vida sería
mayor si se disminuyera el efecto de curso de la oxidación. De esta forma los radicales
y o demás especies reactivas de oxigeno son capaces de deteriorar la membrana
interna así como el ADN mitocondrial, lo que implica mayor cantidad de especies
reactivas de oxigeno (ROS), generando más daño e incremento de estrés oxidativo, al
hacerse más oxidantes para las células y romperse el balance necesario. [47]

Las especies reactivas de oxigeno (ROS) controlan un conjunto de procedimientos

desarrollados en el sistema cardiovascular favoreciendo notablemente en la continuidad
de la homeostasis cardiovascular [48] Se expuso que los radicales libres de oxigeno
muestran una función importante en el origen y evolución de muchas enfermedades
cardiovasculares (ECV) entre estas la aterosclerosis, la isquemia,
la hipertensión arterial, cardiomiopatía, hipertrofia cardíaca, insuficiencia cardiaca, en
ensayos in vitro así como in vivo [49]. Se dieron a conocer orígenes posibles de radicales
libres en la isquemia y la repercusión en mocitos, endotelio vascular y leucocitos. Los
daños a los procesos vinculados con el control de nivel de Ca2+ dentro de la célula
podría ser una herramienta empleada en trastornos inducidos por radicales libres y en
la reperfusion [50].

Las bases nitrogenadas de ADN y ARN al hacer interacción con el radical .OH podría
modificar la información genética de la célula o potenciar la peroxidación de lípidos,
durante la cual este ataca ácidos grasos convirtiéndolos así en oxidantes [51]. El
electrón hidratado y el átomo de hidrogeno se incorpora a las bases heterocíclicas. Esto
lleva a radicales de aducto, demás reacciones de las que se sintetizan muchos
productos como la base de ADN y productos de azúcar, que pueden ser de cadena
simple o doble. Roturas, 8,5 '-ciclopurina-2' –desoxinucleósidos, lesiones en el ADN o
en tándem, sitios agrupados y enlaces cruzados ADN-proteína. Hay evidencias de la
importancia del daño al ADN por los radicales libres en el origen de múltiples
enfermedades, incluyendo el cáncer [52].

Origen del aguacate

Se considera a Mesoamérica como centro originario y de diversificación del fruto Persea

americana Miller. porque la mayor parte de las poblaciones conocidas como primitivas
se cultivan principalmente en dicha región, abarcando desde Sierra Madre Oriental en
el estado de Nuevo León, México; hasta Costa Rica en Centroamérica [53] [54]. La palta
incluso se doméstico en Mesoamérica, de repente con los intercambios comerciales de
 22

sus civilizaciones originarias, luego se dio la distribución y adaptación a america central

y se diversifico por Colombia, Venezuela, Ecuador y Perú, donde se encontró y describió
por exploradores de España que conquistaron América e historiadores [55]

En Perú se escribió una obra titulada Comentarios Reales de los Incas (1605), en la que
se cuenta que Túpac Inca Yupanqui fue a la provincia de Cahari y conquisto otra
provincia ubicada en su camino que tenia por nombre Palta, de esta trajeron la fruta
llamada palta al valle calido cerca de Cuzco [56].

Bernabé Cobo, sacerdote y cronista quien redacto “Historias del Nuevo Mundo”. Sostuvo
que la palta tiene ese nombre en Perú y en otras partes de América que en ese entonces
se conocía como la india, recibe el nombre de aguacate llamada así por la población
india de la isla española. Las plantaciones de aguacate en tierra peruana en forma
masiva empiezan a mitad de los 90. Elementos esenciales como la anulación de la
reforma agraria, favorecieron el incremento que tuvo el Perú en cuanto a la agricultura.
Cerca de 1995 se originó la variedad hass. [57]

Composición química de la semilla

No se halló algún uso del hueso de palta para combatir el cáncer en la creencia popular
a lo largo de la historia, sin embargo en una investigación realizada el año 2013 se
concluyó que los extractos de etanol de la palta y su semilla pueden estimular la muerte
de las células que tienen cáncer de sangre sin afectar las células sanas. Se propuso la
utilización de este fruto para tratar de manera alterna la dolencia mencionada. [58]

Se utilizó el hueso de aguacate en los países de los que es originaria como remedio
natural para tratar parásitos y hongos. La investigación científica explica su eficacia por
los principios activos con potencial para combatir los hongos como fitoesteroles,
triterpenos, ácidos grasos, ácidos furanoicos y dímeros de flavonol. [59]

Se describieron los compuestos por los que está conformada la semilla de palta en
varios estudios. Bora y col. Indicaron 56.4% humedad, 1.87% lípidos, 1.95% proteína,
1.87% cenizas, 5.10% fibra y por diferencia hidratos de carbono de 33.17%.asi mismo
informaron la presencia de ácidos grasos tales como ácido pentadecanoico, hexa
decanoico, octa decanoico, eico sonoico, docosanoico y tetracosanoico [60].

Un compuesto orgánico encontrado en la semilla de palta es el tocoferol, también

llamado vitamina E, es un antioxidante que se encarga de la eliminación de radicales
libres que agravan la acumulación de grasa en las arterias, causando a su vez
hipertensión arterial entra otros problemas con el corazón y los vasos sanguíneos. [61]
 23

Se han encontrado antioxidantes que actúan como reductores de la glucosa estos son:
saponinas, flavonoides, esteroides, taninos y alcaloides. Además por su contenido de
Ca, Mg, K, Na, Zn, Cr puede contribuir al tratamiento de la misma. Ya que dichos
elementos ayudan en el control de producción de enzimas que participan en la síntesis
de glucosa y favorecen un mejor consumo de la glucosa ya sintetizada. [62]

Los ácidos grasos monoinsaturados están los aceites vegetales que contiene la palta.
Las Lipoproteínas de baja densidad se oxidan menos debido a la presencia de este
fruto, sustituyendo los ácidos grasos saturados, esté baja sin que varíen las
lipoproteínas de alta densidad [63]

Los taninos presentes en la semilla son los responsables del color rojo que toma esta al
ser cortada. Según Undurraga y colaboradores (2008) los taninos puede alcanzar una
representación del 13,6%. Se investigó la cantidad de polifenoles totales y taninos en la
palta has y se calculó 602,5 ± 278,51mg Catecol/100 g y 332,82 ±61.49 mg Acido
Tanino /100 g respectivamente. (Bressani et al., 2009). [64]

Los compuestos fenólicos abundan más en la semilla que en la pulpa y se determinaron

sus bondades para la salud (Tesfay y otros 2010, Wang y otros 2010). Aporte de fenoles
de la semilla cambia con la variedad, las condiciones en las que crece y la madurez
(Tesfay y otros 2010) [65].

Mejía (2017) sostiene los aminoácidos presentes en la palta se localizan en un 70% en

la semilla, su aceite disminuye los niveles de colesterol reduciendo los riesgos de sufrir
cardiopatias [66] esta semilla aporta cantidades optimas de estos cada 100 g de proteína
provee de los siguientes 8 aminoácidos esenciales: 5.41 g Valina, 3.97 g Isoleucina,
3.83 g Treonina, 0.60 g Triptófano, 5.33 g Fenilalanina, 7.27 g Leucina, 6.22 g Lisina y
1.90 g Metionina. Los aminoácidos no esenciales hallados fueron 1.99 g Histidina, 9.72
g Acido Aspártico 5.88 g Serina 12.93 g Acido Glutámico 4.70 g Prolina 5.00 g Glicina
5.61g Alanina 1.32 g Cisteína 2.85 g Tirosina y 7.567.56 g Arginina [64]

Los minerales que se encuentran en las plantas toman importancia al beneficiar la salud
del ser humano. Arukwe en su investigación determino el aporte de minerales de Persea
americana (palta) de la semilla del fruto en mg por cada 100 gr: Sodio, 0.30±0.02 mg;
Calcio, 14.15±3.01 mg; Magnesio, 26.16±5.90 mg; Fósforo, 31.33±6.11 mg; Potasio,
100.83±5.64 mg; Zinc, 0. 09±0.01 mg y Hierro, 0.31±0.03 mg [67].

Soong y barlow hicieron la medición de fenoles en semilla y pulpa del fruto encontrando
88,2 mg por gramo de GAE en la semilla y 1,3 mg por gramo de GAE en la pulpa [68].
La misma investigación determinó que el extracto etanolico y acuoso de semilla muestra
 24

una capacidad de eliminar radicales libres y potencial reductor ferricode de 55 y 155

veces mayor respectivamente que el encontrado en la pulpa. Entre los compuestos
fenólicos que más abundan en la semilla se encontraron la Catequina, epicatequina y
sus oligomeros; otros como protocatechuicacid, ácido vanílico y kaempferide también
fueron detectados [69].

Método DPPH

La molécula de 1,1-difenil-2-picrilhidracilo es un radical libre estable que se debe a la

separación de un electrón despejado de esta, por lo que no dimerizan, a diferencia del
resto de radicales libres. Esta deslocalización a su vez genera el color violeta oscuro,
se caracteriza por la absorción banda en solución etanolica que se centra
aproximadamente en 520 nm [70]. Kedare, SB, y Singh, RP sostienen que el método
DPPH brinda la primera forma de valorar la capacidad antioxidante de compuestos,
extractos o muestras biológicas; es el método más fácil de mezclar la muestra con el
reactivo en el que la absorbancia se mide luego de un tiempo establecido [71].

1,1-difenil-2-picrilhidracilo 1,1-difenil-2-picrilhidrazina

Figura 1. Reduccion del DPPH. Fuente. Hydroxycinnamic acid antioxidants: an

electrochemical overview. OPENI.

1.4 Formulación al Problema

Problema General
 25

¿Cuál es la capacidad antioxidante del extracto etanolico de semilla de Persea

americana Miller var. Hass (palta)?

Problema Específico

¿Cuál es la capacidad antioxidante del extracto etanolico de semilla de Persea

americana Miller var. Hass (palta) por el método DPPH?

¿Cuál es la capacidad antioxidante equivalente a la vitamina C presente en el extracto

de Persea americana Miller var. Hass (palta)?

1.5 Justificación del estudio

Justificación del estudio

Los antioxidantes presentes en los alimentos se estudiaron por mucho tiempo y han
tenido un gran efecto en el bienestar de las personas. El consumo de antioxidantes
dentro de los hábitos alimenticios permite prevenir el daño que ocasionan los radicales
libres en el cuerpo y las enfermedades.

Al incrementar la incidencia de enfermedades crónico degenerativas que están

vinculadas con el exceso de radicales libres, su estudio ha cobrado mayor interés en el
ámbitos tales como el científico, medico, etc. A esto se le agrega el uso de alternativas
naturales que reemplacen productos que provee de antioxidantes sintetizados en
laboratorio los que generan efectos adversos tanto en la salud como en la naturaleza.
Ese es el motivo por el que la actividad antioxidante es evaluada en esta investigación.

El estudio de alimentos que contiene una capacidad antioxidante importante, pueden

emplearse como una opción natural que prevenga enfermedades causadas por exceso
de radicales libres, además se consideraría como parte de las bondades propias de la
flora peruana.

Determinar la capacidad antioxidante de la semilla de palta es un punto de partida para

utilizar la producción masiva de esta como alternativa en la prevención de enfermedades
en lugar de que sea desechada. Por eso se viene investigando los principios y
componentes de este extracto. A sí mismo dar a conocer las bondades para la salud
que aporta este alimento que puede beneficiar a la población.

Justificación Teórica
 26

El estudio de la capacidad antioxidante que se encuentra en la semilla de Persea

americana nos permite conocer el alto valor antioxidante de este producto. Por eso se
trabajó arduamente a nivel de laboratorio para describir las propiedades antioxidantes
del extracto. Conocer la capacidad antioxidante del extracto etanolico de palta (Persea
americana) muestra la función preventiva contra múltiples enfermedades crónico
degenerativas y de esta forma una posibilita el tratamiento terapéutico de manera
natural o científico.

Justificación Práctica

La semilla de palta puede encontrarse de manera natural y en diversos lugares y puede

ser aprovechada en vez de que se deseche, en los diferentes estratos de la población,
desde los pueblos mas alejados hasta en la propia capital. Esta investigación aporta a
la sociedad y al sector salud información sobre un alimento que prevenga diversas
enfermedades. Conocer la composición de esta semilla y principalmente la descripción
de la capacidad antioxidante posibilita su uso y su extracto etanolico como principio
activo en suplementos nutricionales, cosméticos, fármacos y alimentos nutraceuticos
que promuevan el óptimo estado nutricional.

1.6. Objetivos
Objetivo General

Evaluar la capacidad antioxidante del extracto etanolico de la semilla de Persea

americana Miller var. Hass (palta)

Objetivos Específicos

Evaluar la capacidad antioxidante del extracto etanolico de la semilla de Persea

americana Miller var. Hass (palta) por método DPPH.

Evaluar la capacidad antioxidante equivalente a la vitamina C presente en el extracto de

Persea americana Miller var. Hass (palta).
 27

II. MÉTODO

2.1 Diseño de investigación

Diseño
 28

La presente investigación es no experimental, ya que no se manipula la

variable independiente ni hay formación de grupos [72] .

Nivel:
La investigación es descriptiva porque está destinada a brindar luz en
problemas mediante una investigación que recabe información [73].

Tipo de estudio
la investigación es básica, viene a ser una labor realizada para conseguir
conocimientos de los hechos de estudio, sin el objetivo de hacer alguna
aplicación [74].

Enfoque
el enfoque es cuantitativo emplea datos numéricos que pueden analizarse a través de
métodos estadísticos porque estos son susceptibles de medición [75].

Método
En esta investigación se emplea el método deductivo que se caracteriza por ser lógico
y emplear el razonamiento deductivo [75].

2.2. Variables, Operacionalización

Variable: Capacidad antioxidante total

Definición conceptual
Es la medición analítica de la cantidad de radicales libres de distinta naturaleza dentro
de una prueba química que mida la oxidación por métodos que pueden ser AAPH,
ABTS•+, DMPD, DPPH, etc. Cada ensayo de capacidad antioxidante total hace
referencia a sustancias de bajo peso molecular, pero sin contar con el aporte de enzimas
y de proteínas que enlazan metales. En general la capacidad antioxidante total aminora
los daños relacionados con el estrés oxidativo, aquellos antioxidantes que lo combaten
aumentan la capacidad antioxidante total [76].

Definición operacional
 29

La Capacidad antioxidante total es de naturaleza cuantitativa, se evalúa con los

siguientes indicadores: % de captación de DPPH, cantidad del sustancia antioxidante
que disminuya al 50% la concentración del DPPH (IC50) y actividad antioxidante
equivalente a vitamina C (VCEAC); que serán evaluados para hallar dicho valor.
 30

MATRIZ DE OPERACIONALIZACION DE LA VARIABLE : CAPACIDAD ANTIOXIDANTE

Definición Definición operacional Dimensión Indicadores

Conceptual
Young (2001) sostiene La Capacidad
que la capacidad antioxidante total se
% de captación de
antioxidante total (CAT) operativiza en 3
DPPH
o actividad antioxidante dimenciones: % de
total (AAT) es la medición captación de DPPH,
analítica de la cantidad cantidad del sustancia cantidad del sustancia
de radicales libres de antioxidante que Capacidad antioxidante que
distinta naturaleza dentro disminuya al 50% la antioxidante total disminuya al 50% la
de una prueba química concentración del DPPH concentración del
que mida la oxidación por (IC50), y actividad DPPH (IC50)
métodos que pueden ser antioxidante equivalente
AAPH, ABTS•+, DMPD, a vitamina C (VCEAC) actividad antioxidante
DPPH, etc [76]. equivalente a vitamina
C (VCEAC)
 31

A continuación se aprecia el diagrama de flujo de esta variable:

Recolección de muestras
(500 gr /semilla)

Elaboración de 2, 6 µg/ml de
extracto etanolico

5 diluciones: 105, 120,140, 168, 210 y 280

µl de extracto, mas agua bidestilada con
volumen final de 4.2 ml cada una.

Determinación del IC50 de Persea

americana y estándar.

Porcentaje de IC50
captación de DPPH VCEAC
 32

2.3. Población y muestra

Población

Frutas de Persea americana Mill. Var. Hass en punto de maduración adecuado para el
consumo, libres de enfermedades y magulladuras fueron recolectadas de un sembrado
artesanal en la localidad de Cañete, distrito de Cañete y Región Lima. Ubicada a 150
m.s.n.m., se llevaron al Laboratorio de Química de la Universidad Cesar Vallejo Lima
Este.

Criterio de inclusión

-Semillas procedentes de 6 muestras recolectadas de la localidad de Cañete.

-Semillas de frutos saludables, sin larvas o microrganismos recolectadas de la localidad

de Cañete.

-Semillas de frutos libres de traumas o magulladuras recolectadas de la localidad de

Cañete.

Criterios de exclusión

-Semillas pertenecientes a frutos de otro cultivo

-Semillas pertenecientes a frutos de otras variedades de Persea americana Mill. (Palta).

Muestra

En el presente estudio la muestra consistió en Semillas de Persea americana Mill. Var.

Hass extraídas en el laboratorio de Química de la Universidad Cesar Vallejo Lima Este
que en conjunto tiene un peso de 500 gramos.

Técnica

Observación.

Instrumento
 33

La ficha de recolección de datos esta elaborada para facilitar el recojo de datos de la

variable estudiada en la investigación, teniendo los espacios para registrar la
concentración de las diluciones las cantidades con las que se ejecutaron los
procedimientos asi como las lecturas del espectrofotómetro. (Anexo Nº 4)

Selección de la muestra

se recolectaron frutos de Persea americana Miller var. Hass en el distrito de Cañete

ubicado a 150 msnm de altura, provincia de Cañete. Departamento de lima, en enero
de 2018.

Se seleccionó, lavó y despulpó las paltas de la variedad Hass obteniendo 500 gr de

semillas las que se lavaron, cortaron e hirvieron en agua destilada por 15 min, se pasó
por papel filtro Whatman Nº1 y luego se secó en estufa a 45ºC por 72 horas, para así
obtener el extracto de semilla de palta, se almaceno en un frasco color ambar con
rotulado hermeticamente.

Clasificación de la muestra

Los frutos fueron clasificados taxonómicamente, por la bióloga La Torre Acuy Maria
Isabel, de acuerdo con Sistema de Clasificación de Arthur Cronquist et al.,1988. (Anexo
1).

Obtención del extracto etanolico

El extracto de semillas fue diluido y de acuerdo con el protocolo se le añadió a cada

solución 1ml de etanol absoluto al 100% lo cual reacciono por 30 minutos antes de darse
la lectura del espectrofotometro.

Materiales de laboratorio
Vidrio:
Vaso de precipitado, matraz aforado, probeta, ependorf, placas de vidrio tubos de
ensayo, embudos.
Metal:
Matraz de lavado, Pipetas, bagueta.
Plástico:
Puntas para micropipeta, gradillas, guantes.
Equipos e Instrumentos
-Centrífuga refrigerada Sorvall
- Micropipeta
-Estufa Unics
 34

-Computadora
-Espectrofotómetro Spectro UV – VIS Labomed Inc 23
-Balanza analítica Sartorius BP 2
-Agitador
Reactivos
-1,1-difenil-2-picril-hidrazil (DPPH)
-Metanol absoluto
-Ácido ascórbico D-6100 Darmstadt pro-analysis.
-Alcohol puro
-En todos los ensayos se usó agua bidestilada

Evaluación de Capacidad Antioxidante

La tecnica empleada con el radical DPPH es la planteada por Jojeux (1995).

Reactivos: Solución de DPPH 0,5mg/ml en metanol, Vitamina C 0,12mg/mL en agua

bidestilada.

Procedimiento:

1. De una concentración de 2.6 µg/ml de extracto etanolico de Persea americana

var. Hass, se prepararon 5 diluciones con 105, 120, 140, 168, 210 y 280 µl de
extracto, se les a agrego agua bidestilada obteniendo un volumen final de 4.2 ml
cada una.
2. Las diluciones de la muestra a evaluar así como los estándares siguieron el
procedimiento plasmado en el cuadro Nº 1.
Determinación del IC50 de Persea americana var. Hass fuerte y estándares

Tubos Blanco Control MP Blanco MP

Ml Agua 0,5 0,5 - -
Ml Etanol 1,0 - - 1,0
Ml DPPH - 1,0 1,0 -
Ml MP - - 0,5 0,5

Realizado el procedimiento las diluciones se protegieron de la luz un tiempo de 30

minutos, después se leyó en el espectrofotómetro a 517 nm.

Esto se realizo por triplicado las muestras problema y los estándares para hallar un
promedio de absorbancia de cada dilución.
 35

Los promedios hallados se usaron para crear curvas de calibración.

Se arrojaron los siguientes resultados:

Porcentaje de captación de DPPH

hace referencia a un % capaz de disminuir los radicales libres que tiene la muestra de
acuerdo con la dilución utilizada.

% de captación de DPPH=ABS(DPPH-MP) X100

ABSDPPH

IC50

Es la medida de la efectividad del extracto antioxidante para inhibir la función inicial del
DPPH. Lo que se describe en una ecuación de recta que resulta del gráfico de curva
de calibrado.

VCEAC

Resulta de la relación entre el valor de IC50 que se observa en la Vitamina C con

respecto al IC50 presente en Persea americana Miller var. Has .

V CEAC = IC50 Vitamina C

IC50 P. americana

2.5 Método de análisis de datos

El ensayo de capacidad antioxidante se llevó a cabo por triplicado para las diluciones
de la muestra de estudio y para la vitamina C usada como patrón de referencia. Los
resultados se expresan con error típico de media, calculado por análisis de desviación
estándar. El análisis fue realizado mediante el análisis de varianza (ANOVA) con el
programa Microsoft Excel 2013, se interpretó que hay diferencia significativa cuando p
< 0,05.
 36

III. RESULTADOS

Las cantidades resultantes siguiendo el método de DPPH en el extracto etanolico de

semilla Persea americana Miller Variedad Hass (palta) generan una curva
evidentemente descendente y un coeficiente de determinación (R2) próximo a la unidad,
 37

(figura 1). Estas cantidades son próximas a las registradas empleando la sustancia
estándar, vitamina C (Anexo nº 3).

Concentración Absorbancia
Promedio
µg/ml Grupo A grupo B Grupo C
0 0.350 0.369 0.350 0.356
0.065 0.281 0.276 0.280 0.279
0.074 0.261 0.258 0.261 0.260
0.086 0.246 0.242 0.244 0.244
0.104 0.215 0.217 0.215 0.216
0.13 0.183 0.185 0.181 0.183
0.17 0.130 0.131 0.128 0.130

Figura 1.- Curva de reducción del DPPH por el extracto etanólico de semilla de
Persea americana Mill.

Red u c c i ó n d e DPPH y = -1.3511x + 0.3596

R² = 0.9976
0.400
0.350
0.300
Absorbancia

0.250
0.200
0.150
0.100
0.050
0.000
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18
Concentración

Se obtuvo a una concentración de 64.4% de captación de radicales libres del DPPH

frente al extracto de Persea americana mil que es variable según la concentración la
vitamina C registró 87.36% de la captación al reaccionar con el radical DPPH.

Cuadro 1.- IC50 y captación de DPPH de Persea americana mil y Vitamina C.

 38

IC50 µg/mL % Captación

Extracto de semilla 7.088±0.36 64.04
Vitamina C 6.361±0.36 87.36

VCEAC

Resulta de la relación entre el valor de IC50 que se observa en la Vitamina C con

respecto al IC50 presente en Persea americana Miller var. Has .

V CEAC = IC50 Vitamina C

IC50 P. americana

V CEAC =6.361/7.088=0.897
 39

IV. DISCUSIÓN

La presente investigación de diseño no experimental se realizó para Evaluar la

capacidad antioxidante del extracto etanolico de la semilla de palta para lo cual se siguió
el método DPPH. Este consiste en la disminución del color púrpura de la solución DPPH
a 517 nm de longitud de onda, frente a eliminadores de radicales libres en las muestras
a evaluar. La capacidad antioxidante por el método DPPH se manifestó por medio del
valor de IC50, valor del extracto sobre fracciones que pueden disminuir un 50% la
absorbancia de DPPH del inicio [77].
 40

El Etanol Absoluto empleado como disolvente en la preparación de este extracto, se

utilizó también en el estudio de Cabrera en Cajamarca [9], a diferencia de otros estudios
como el de Urraque preparo tres grupos de metanol 100%, metanol/agua 75/25 y agua
100% [5], otros como el de Chávez en México que preparo extracto metanolico,
acetonico y polifenolico [6]. El etanol se considera un disolvente bueno en la extracción
de polifenoles y seguro para ser consumido. Se ha dado a conocer que el metanol es
mejor para la extracción de polifenoles de bajo peso molecular y que la acetona acuosa
es buena en la extracción de flavonoles de bajo peso molecular [78]. Esto puede influir
en los resultados obtenidos por las diferentes investigaciones de la literatura. Con
respecto a los aceites de semilla de palta Adamarola y col. emplearon el hexano en
Nigeria [4] y Rengifo uso el etanol en Perú [10]

Hasta la actualidad la mayor parte de investigaciones que estudian la actividad

antioxidante del aguacate se enfocan primordialmente en evaluar compuestos
hidrofilicos, tales como son los compuestos fenólicos y ácido ascórbico, ya que
comúnmente se vinculan con la actividad antioxidante presente en frutas y hortalizas.
Se conoció una menor capacidad antioxidante en extractos lipofilicos que en hidrofilicos
pertenecientes a diversas frutas tropicales entre estas el mango, la papaya y la palta
evaluados por el ensayo DPPH y se expresaron como TEAC [79] [80].

El ensayo de capacidad antioxidante del extracto etanolico de semilla de Persea

americana mil muestra respecto a la captura de radicales libres DPPH una IC50 de
7.088±0.36 µg/mL (Cuadro 1) cantidad considerada de elevada capacidad antioxidante
si se hace una comparación con la IC50 de la vitamina C 6.361±0.36 µg/mL, teniendo
presente que el estándar es un compuesto puro y la muestra es un extracto etanolico,
compuesta por distintas sustancias no solo por las que contiene capacidad antioxidante.
La misma que puede encontrarse en los fenoles, polifenoles flavonoides, vitamina C,
Vitamina E, encontrados en anteriores investigaciones realizadas.

Estudios de capacidad antioxidante en la semilla de Persea americana, descritos en

estudios previos por el método de DPPH mostraron resultados más elevados que por
ABTS, como el realizado por Chávez en extractos metanolico, acetonico y polifenolico
presento resultados de 5.392 ± 1.475 µM ET/g, 12.718 ± 0.067 µM ET/g y 13.914 ±
0.168 µM ET/g respectivamente, frente a los resultados registrados en el método ABTS
7.948 ± 1.392, 11.059 ± 0.117 y 11.902 ± 0.045 µM ET/g [6] . Por su parte Rengifo que
evaluó el aceite de semilla también siguió ambos ensayos con el resultado 9,676±0,260
μmol TE/kg por método DPPH Y 5,313±0,039 μmol TE/kg por ABTS [10].
 41

En la evaluación de aceites vegetales comúnmente se registran cantidades bajas

siguiendo distintas técnicas porque en el procedimiento en el que se da la extracción
principalmente hay pérdida de sustancias con potencial antioxidante, es posible que se
deba a la exposición a temperaturas que degradan el extracto, la luz y el oxígeno. Así
mismo es de importancia que la obtención sea de extractos hidrofílicos y lipofílicos ya
sea de la fruta como del aceite para calcular la capacidad antioxidante de ambos
extractos porque los compuestos se distribuyen dependiendo de la afinidad con el medio
[81].

La actividad antioxidante de aceite de semilla de esta planta por Rengifo fue

9,676±0,260 μmol TE/kg [10], mientras que en la investigación de Adamarola y col., se
halló un 51.54 ± 0.25% de inhibición de DPPH [4] . En ambas investigaciones, el método
en el que ambos coincidieron fue el DPPH. En el estudio de Adamarola se mostraron
resultados bajos comparados con el ácido gálico usado como estándar sin embargo se
demostró un potencial antioxidante significativo. Los resultados obtenidos por Rengifo
mostraron una capacidad antioxidante muy alta además se demostró que tiene valores
equivalentes a la Vitamina E usada como estándar. Solvente en la tesis de Rengifo [10]
es el etanol y en la de Adamarola [4], el metanol.

El IC50 se halló para establecer la concentración de la muestra que se requiere para

lograr la inhibición del 50% del radical [82]. Según Phongpaichit et al. Se conoce que los
extractos que obtiene un valor de IC50 en un rango de 50 a 100 mg / ml poseen una
actividad antioxidante intermedia. Mientras que los extractos con un IC50 que oscila
entre 10 y 50 mg / ml se les considera con una fuerte actividad antioxidante [83]. E l
IC50 estudiado en presencia del DPPH, se describió en la literatura como en la
investigación de Adamarola y col. [4] sobre el aceite extraído de semilla que mostró un
IC50 de 4.68 ± 0.02 mg / mL frente al IC50 del ácido gálico 0.00382± 0.01 mg/ml. Este
valor calculado referente al IC50 en comparación con el IC50 del extracto de Persea
americana hace posible considerar una mayor cantidad de sustancias antioxidantes en
este último con una mayor actividad antioxidante que los ya mencionados, al ser
evaluadas por el método DPPH.

La actividad antioxidante de diversos componentes es medida dependiendo del grado

de decoloración que produzca en el radical DPPH. El método de decoloración consiste
en el potencial que tiene la muestra a evaluar en la captura del electrón desapareado
del radical en la liberación de un protón [4]. El porcentaje de captación de radicales libres
del extracto de Persea americana cultivado en la región lima es de 64.04 % a una
concentración de 0.17 µg/mL, Cabrera y col., determinaron la actividad antioxidante del
 42

extracto etanolico de semilla de Persea americana por medio del ensayo DPPH y
describieron el porcentaje de captación de radicales libres de 94.16% a concentración
de 100 µl [9]; así mismo Adamarola y col., encontraron en el antes mencionado aceite
de semilla, 51.54 ± 0.25% [4].

VCEAC es la capacidad antioxidante que equivale a la vitamina C en concentración de

mg/L. la capacidad antioxidante de la vitamina C se denominó a una cantidad de
100mg/L. Una concentración de VCEAC mayor a 100 o significa que el valor
corresponde a una muestra con más capacidad antioxidante que la vitamina C [84]

Huamán (2014) presento una tesis que evalúa el rendimiento de polifenoles totales de
la harina de semilla de palta que se determinó por el método Folin Ciocalteu los
polifenoles ampliamente relacionados con la capacidad antioxidante en este trabajo se
obtuvo como resultado que las más altas concentraciones de polifenoles totales se
encontraron la acetona al 75% 24,402± 0,291 mg Ácido gálico/g muestra (b.s) seguida
por metanol al 70% con 15,787± 0,125 mg Ácido gálico/g muestra (b.s) y finalmente
con agua 11,045 mg Ácido gálico/g. Los que muestran que hay diferencias signficativas
con respecto al rendimiento de polifenoles toales extraidos por los diferentes solventes,
tomando en cuenta una significancia de 5%. Quedo evidenciado el mas alto rendimiento
en la acetona [11].

El extracto etanolico de semilla de aguacate cultivado en la región de Lima presentó

una alta capacidad antioxidante, lo que posibilita considerar a la semilla de Persea
americana como una potencial alternativa para prevenir diferentes enfermedades
causadas por el exceso de radicales libres lo que es probable por la presencia de
sustancias antioxidantes tales como los polifenoles, flavonoides vitaminas C y vitamina
E.
 43

V. CONCLUSIONES

1. La capacidad antioxidante del extracto etanolico de semilla de presea americana

Miller var. Hass (palta) se determinó que a mayor concentración de extracto
etanolico, se obtiene menor porcentaje de absorción, demostrando la capacidad
antioxidante de la semilla.

2. Se estableció la capacidad antioxidante del extracto etanolico de semilla de

Persea americana Miller var. Hass (palta) mediante el método de DPPH,
obteniéndose una capacidad antioxidante total elevada.
 44

3. Se determinó que la capacidad antioxidante del extracto etanolico de semilla de

Persea americana Miller var. Hass (palta) es menor que la registrada por la
vitamina C que se usó como estándar en Porcentaje de captación de radicales
libres y en IC50.
 45

VI. RECOMENDACIONES

1. Realizar investigaciones sobre muestras de semillas de palta cultivadas en

distintas regiones del Perú para verificar la variacion de capaciadad
antioxidantes y concentraciones de nutrientes que inhiben la oxidación presentes
en las mismas.

2. Elaborar suplementos nutricionales con tratamiento térmico moderado que

elimine el contenido de cianuro, para aprovechar el contenido de antioxidantes y
así favorecer la prevención de enfermedades crónicas y neurodegenerativas.
 46

3. Seguir evaluando la capacidad antioxidante de diversos vegetales ya sea de la

pulpa como de la semilla de los mismos para asi aportar al conocimiento
contribuyendo a su utilización en beneficio de la salud.
 47

VII. REFERENCIAS

REFERENCIAS BIBLIOGRÀFICAS

[1] Saavedra, O. M., Vázquez, E. N. J., Vargas, M. R. B. G., Reyes, G. M. C., &
Bolaina, E. M. Radicales libres y su papel en las enfermedades crónico-
degenerativas. Rev. Médica Univ. Veracruzana. Internet. 2010 Consultado 22
Mar 2018; 10(2), Disponible en:
https://www.uv.mx/rm/num_anteriores/revmedica_vol10_num2/articulos/
radicales.pdf
 48

[2] Pupo, E. V., Robles, L. G., & Marrero, I. R. C. Estrés oxidativo. Correo
Científico Médico. Internet. 2017. Consultado 20 Feb 2018; 21(1): 171-186.
Disponible en: http://www.medigraphic.com/pdfs/correo/ccm-
2017/ccm171n.pdf

[3] Paredes González, M. E. Determinación de la actividad antioxidante de cuatro

plantas nativas del Ecuador. Internet.Universidad Central del Ecuador: Quito:
UCE. Internet. 2013. Consultado 20 Ene 2018. Disponible en:
http://www.dspace.uce.edu.ec/handle/25000/1901

[4] Adaramola, B., Onigbinde, A., & Shokunbi, O. Physiochemical properties and
antioxidant potential of Persea Americana seed oil. Chem Int. Internet. 2016.
Consultado 20 Ene 2018; 2(3): 168-175. Disponible en:
https://s3.amazonaws.com/academia.edu.documents/40821267/38.pdf?AWS
AccessKeyId=AKIAIWOWYYGZ2Y53UL3A&Expires=1525712169&Signature
=W9e07TbG81Pe9UxM74Rm4XAvTAw%3D&response-content
disposition=inline%3B%20filename%3DPhysiochemical_roperties
_and_antioxidan.pdf

[5] URRA, Catherine. Propiedades antioxidantes de residuos (semilla y cascara)

de la agroindustria de palta (persea americana. mill, avocado) en Chile”.
Internet. 2015. Consultado 20 Ene 2018. Disponible en:
https://smbb.mx/congresos%20smbb/guadalajara15/PDF/XVI/trabajos/III/IIIC-
65.pdf
[6] Chavez. P. Evaluación de actividad antioxidante y antimicrobiana en extractos
de residuos de aguacate. Instituto tecnológico sonora. Internet. 2012.
Consultado 20 Ene 2018. Disponible en:
http://www.remeri.org.mx/tesis/INDIXE-
TESIS.jsp?type=4&search2=ITSON&search=ITSON&ind=26&step=25&order
=4&asc=1

[7] Gómez FS, et al. Semillas de aguacate: optimización de extracción y posible

uso como antioxidante en los alimentos. Antioxidantes. Internet. 2014.
Consultado 10 Ene 2018; 3(2): 439-454Disponible en: doi: 10.3390 /
antiox3020439
 49

[8] Rosero, R Johanna. Extracción y caracterización de los principios activos

fenólicos con actividad antioxidante a partir de residuos de aguacate: epicarpio
y semilla (Persea americana) Internet. Universidad de Nariño; 2017
Consultado 10 May 2018. Disponible en en:
http://sired.udenar.edu.co/3884/1/TESIS%20FINAL%20I%20%20REVISI%C3
%93N%20FACULTAD%20I.pdf

[9] Cabrera J, Dilas L, Minchan P. Determinación de la actividad antioxidante y

antimicrobiana del extracto etanólico de la semilla de Persea americana Miller
var. Hass “palta”. Revista perspectiva. Internet. 2015. Consultado 12 Ene
2018; 16(1-2). Disponible en:
http://revistas.upagu.edu.pe/index.php/PE/article/view/389

[10] Rengifo, G y Pedro, G. Caracterización del aceite de la semilla de palta Persea

americana Mill. Var. Hass fuerte y medición de su actividad antioxidante.
Internet.Cibertesis UNMSM: Editor: UNMSM; 2014. Consultado 10 Ene 2018.
Disponible en:http://cybertesis.unmsm.edu.pe/handle/cybertesis/3869

[11] M. D. Huamán Pérez. Evaluación del efecto de tratamientos con solventes

orgánicos, agua y el tiempo de extracción en el rendimiento de polifenoles
totales de la harina de semilla de palta (Persea americana). Internet.
Repositorio.uncp; 2014. Consultado 12 Ene 2018. Disponible en:
http://repositorio.uncp.edu.pe/bitstream/handle/UNCP/2652/Huaman%20Pere
z.pdf?sequence=1

[12] Understanding Free Radicals and Antioxidants. Healthchecksystems Internet

2010. Consultado 10 Ene 2018. Disponible en:
http://www.healthchecksystems.com/antioxid.htm

[13] Suárez Cunza, S. Actividad captadora de radicales libres y efecto antioxidante

de metabolitos secundarios del extracto acuoso del Allium sativum var.
Huaralino (ajo) en modelos in vitro.[Internet].Cibertesis UNMSM: Editor:
UNMSM; 2014 Consultado 12 Ene 2018. Disponible en:
http://cybertesis.unmsm.edu.pe/handle/cybertesis/3963
 50

[14] Fang Y.-Z., Yang S., Wu G. Free radicals, antioxidants, and nutrition. Nutrition
Internet.2002 Consultado 12 Ene 2018.18 (10): 872-879. Disponible en:
https://doi.org/10.1016/S0899-9007(02)00916-4

[15] Epstein, F. H., M.D., & McCord, J. M., PhD. (1985). Oxygen-derived free
radicals in postischemic tissue injury. The New England Journal of Medicine,
312(3), 159-163. Disponible en:
https://search.proquest.com/docview/1877536719?accountid=37408

[16] Valko, MMHCM; Morris, H.; Cronin, M. T. D. Metals, toxicity and oxidative
stress. Current medicinal chemistry. Internet.2005 Consultado 12 Ene
2018;12(10): 1161-1208.

[17] Litwin, J. A., Beier, K., Völkl, A., Hofmann, W. J., & Fahimi, H. D.
Immunocytochemical investigation of catalase and peroxisomal lipid β-
oxidation enzymes in human hepatocellular tumors and liver cirrhosis.
Virchows Archiv [Internet].1999 Consultado 12 Ene 2018;435(5): 486-495.
Disponible en: https://doi.org/10.1007/s004280050432

[18] Lauer, C., Völkl, A., Riedl, S., Fahimi, H. D., & Beier, K. Impairment of
peroxisomal biogenesis in human colon carcinoma. Carcinogenesis
Internet.1999 Consultado 12 Ene 2018;20(6): 985-989. Disponible en:
https://doi.org/10.1093/carcin/20.6.985

[19] Weltz, S., Bhimani, A., & Powell, T. Oxidative damage induced by hydrogen
peroxide is counteracted by the antioxidant enzyme catalase. Pioneering
Neuroscience, Internet 2017 Consultado 12 Ene 2018; 16: 23-28. Disponible
en: https://ojs.grinnell.edu/index.php/pnsj/article/view/445

[20] Klotz, M. G., & Loewen, P. C. The molecular evolution of catalatic

hydroperoxidases: evidence for multiple lateral transfer of genes between
prokaryota and from bacteria into eukaryota. Molecular Biology and Evolution.
Internet.2003 Consultado 12 Ene 2018;20(7): 1098-1112. Disponible en:
https://doi.org/10.1093/molbev/msg129

[21] Zámocký, M., Regelsberger, G., Jakopitsch, C., & Obinger, C. The molecular
peculiarities of catalase‐peroxidases. Febs Letters. Internet.2001 Consultado
 51

12 Ene 2018;492(3): 177-182. Disponible en: https://doi.org/10.1016/S0014-

5793(01)02237-2

[22] Litwin, J. A., Beier, K., Völkl, A., Hofmann, W. J., & Fahimi, H. D.
Immunocytochemical investigation of catalase and peroxisomal lipid β-
oxidation enzymes in human hepatocellular tumors and liver cirrhosis.
Virchows Archiv. Internet.1999 Consultado 12 Ene 2018;435(5): 486-495.
Disponible en: https://doi.org/10.1007/s004280050432

[23] Traber, M. G., & Packer, L. Vitamin E: beyond antioxidant function. The
American journal of clinical nutrition Internet.1995 Consultado 12 Ene
2018;62(6): 1501S-1509S. Disponible en:
https://doi.org/10.1093/ajcn/62.6.1501S
[24] Febles Fernández Carmen, Soto Febles Carmen, Saldaña Bernabeu Alberto,
García Triana Bárbara E. Funciones de la vitamina E: Actualización. Rev
Cubana Estomatol Internet.2002 Abr [citado 2018 Mayo 18] ; 39( 1 ): 28-
32. Disponible en:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-
75072002000100005&lng=es

[25] Herrera, E., & Barbas, C. (2001). Vitamin E: action, metabolism and
perspectives. Journal of physiology and biochemistry Internet.2001 Consultado
12 Ene 2018;57(1): 43-56. Disponible en: https://doi.org/10.1007/BF03179812

[26] VALDÉS, F. Vitamina C. Actas dermo-sifiliográficas Internet.2006 Consultado

12 Ene 2018;97(9): 557-568. Disponible en: https://doi.org/10.1016/S0001-
7310(06)73466-4

[27] DAVEY, Mark W., et al. Plant L‐ascorbic acid: chemistry, function, metabolism,
bioavailability and effects of processing. Journal of the Science of Food and
Agriculture Internet.2000 Consultado 12 Ene 2018;80(7): 825-860. Disponible
en: https://doi.org/10.1002/(SICI)1097-0010(20000515)80:7<825::AID-
JSFA598>3.0.CO;2-6

[28] María Elena, C. J., Ma de la Concepción,Calvo Carrillo, & Fernando Pérez-Gil

Romo. Carotenoides y su función antioxidante: Revisión. Archivos
 52

Latinoamericanos De Nutrición Internet.2011 Consultado 12 Ene 2018;61(3):

233. Disponible en:
https://search.proquest.com/docview/1685931300?accountid=37408

[29] Zamora S Juan Diego. Antioxidantes: Micronutrientes en lucha por la salud.

Rev. chil. nutr. Internet.2007 Mar [citado 2018 Mayo 18] ; 34( 1 ): 17-26.
Disponible en: http://dx.doi.org/10.4067/S0717-75182007000100002

[30] Olivieri, Oliviero, et al. Selenium status, fatty acids, vitamins A and E, and
aging: the Nove Study. The American journal of clinical nutrition. Internet.1994
Mar [citado 2018 Mayo 18]; 60(4), 510-517. Disponible en:
https://doi.org/10.1093/ajcn/60.4.510

[31] Axel, Dorothea I., et al. All-trans retinoic acid regulates proliferation, migration,
differentiation, and extracellular matrix turnover of human arterial smooth
muscle cells. Cardiovascular Research. Internet.2001 Mar [citado 2018 Mayo
18]; 49(4): 851-862. Disponible en: https://doi.org/10.1016/S0008-
6363(00)00312-6

[32] Martínez-Flórez, S., González-Gallego, J., Culebras, J. M., & Tuñón, M. Los
flavonoides: propiedades y acciones antioxidantes. Nutrición hospitalaria
Internet.2002 [citado 2018 Mayo 18]; 17(6): 271-278. Disponible en:
https://www.researchgate.net/publication/10961859
[33] Scalbert, A., Manach, C., Morand, C., Rémésy, C., & Jiménez, L. (2005).
Dietary polyphenols and the prevention of diseases. Critical reviews in food
science and nutrition Internet.2005 Consultado 12 Ene 2018;45(4): 287-306.
Disponible en: https://doi.org/10.1080/1040869059096

[34] Carlos, B., & Angelina, L. (2015). Preacondicionamiento remoto por isquemia
reperfusión en la lobectomía pulmonar. Un estudio sobre la prevención del
estrés oxidativo. RODERIC Internet.2015 Consultado 12 Ene 2018; 61(3),
461-470. Disponible en: http://roderic.uv.es/handle/10550/53196

[35] Ray, P. D., Huang, B. W., & Tsuji, Y. (2012). Reactive oxygen species (ROS)
homeostasis and redox regulation in cellular signaling. Cellular signalling
Internet.2012 Consultado 12 Ene 2018;24(5): 981-990. Disponible en:
https://doi.org/10.1016/j.cellsig.2012.01.008
 53

[36] Halliwell, B., & Gutteridge, J. M. Free radicals in biology and medicine. Oxford
University Press, USA. Internet.2015 Consultado 12 Ene 2018. Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?hl=es&lr=&id=3DlKCgAAQBAJ&oi=fnd&p
g=PP1&dq=B.+%26.+G.+J.+M.+Halliwell,+%C2%ABFree+radicals+in+biolog
y+and+medicine.,%C2%BB+Oxford+University+Press,+USA,+(2015)..+&ots=
bojI5UwwrS&sig=_juU7nNL0sjoqSaTjU2O_M80wUE#v=onepage&q&f=false

[37] Singh, R., Devi, S., & Gollen, R. (2015). Role of free radical in atherosclerosis,
diabetes and dyslipidaemia: larger‐than‐life. Diabetes/metabolism research
and reviews Internet.2015 Consultado 12 Ene 2018;31(2), 113-126.
Disponible en: https://doi.org/10.1002/dmrr.2558

[38] Becker, L. B. (2004). New concepts in reactive oxygen species and

cardiovascular reperfusion physiology. Cardiovascular research Internet.2004
Consultado 12 Ene 2018; 61(3), 461-470. Disponible en:
https://doi.org/10.1016/j.cardiores.2003.10.025

[39] Sies, H. (1997). Oxidative stress: oxidants and antioxidants. Experimental

physiology Internet.1997 Consultado 12 Ene 2018;82(2): 291-295. Disponible
en: https://doi.org/10.1113/expphysiol.1997.sp004024
[40] Devasagayam, T. P. A., Boloor, K. K., & Ramasarma, T. (2003). Methods for
estimating lipid peroxidation: an analysis of merits and demerits. NISCAIR
ONLINE Internet.2003 Consultado 12 Ene 2018;40(5): 300-308. Disponible
en: http://hdl.handle.net/123456789/3805

[41] Moseley, R., Waddington, R. J., & Embery, G. (1997). Degradation of

glycosaminoglycans by reactive oxygen species derived from stimulated
polymorphonuclear leukocytes. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-
Molecular Basis of Disease Internet.1997 Consultado 12 Ene 2018;1362(2-3):
221-231. Disponible en: https://doi.org/10.1016/S0925-4439(97)00083-5

[42] IWAI, Kazuhiro, et al. Iron-dependent oxidation, ubiquitination, and degradation

of iron regulatory protein 2: implications for degradation of oxidized proteins.
Proceedings of the National Academy of Sciences Internet.1998 Consultado
12 Ene 2018;95(9): 4924-4928. Disponible en:
https://doi.org/10.1073/pnas.95.9.4924
 54

[43] Bar-Or, D., Bar-Or, R., Rael, L. T., & Brody, E. N. (2015). Oxidative stress in
severe acute illness. Redox biology Internet.2015 Consultado 12 Ene 2018;4:
340-345. Disponible en: https://doi.org/10.1016/j.redox.2015.01.006

[44] Dalle-Donne, I., Rossi, R., Colombo, R., Giustarini, D., & Milzani, A. (2006).
Biomarkers of oxidative damage in human disease. Clinical chemistry
Internet.2006 Consultado 12 Ene 2018;52(4): 601-623. Disponible en:
http://clinchem.aaccjnls.org/content/52/4/601

[45] Sayre, L. M., Smith, M. A., & Perry, G. (2001). Chemistry and biochemistry of
oxidative stress in neurodegenerative disease. Current medicinal chemistry
Internet.2001 Consultado 12 Ene 2018;8(7), 721-738. Disponible en:
https://doi.org/10.2174/0929867013372922

[46] Dalle‐Donne, Isabella, et al. Proteins as biomarkers of oxidative/nitrosative

stress in diseases: the contribution of redox proteomics. Mass spectrometry
reviews Internet.2005 Consultado 12 Ene 2018;24(1): 55-99.Disponible en:
https://doi.org/10.1002/mas.20006

[47] Céspedes Miranda Ela, Rodríguez Capote Karina, Llópiz Janer Niurka, Cruz
Martí Niurys. Un acercamiento a la teoría de los radicales libres y el estrés
oxidativo en el envejecimiento. Rev Cubana Invest Bioméd Internet.2000
[citado 2018 Mayo 18]; 19(3): 186-190. Disponible en:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-
03002000000300007&lng=es.

[48] Bahorun, T., Soobrattee, M. A., Luximon-Ramma, V., & Aruoma, O. I. (2006).
Free radicals and antioxidants in cardiovascular health and disease. Internet
Journal of Medical Update Internet2005 Consultado 12 Ene 2018;1(2), 25-
41.Disponible en:
https://pdfs.semanticscholar.org/5ed7/f262fd6f2fe2ef1813583113512370e4ab
dd.pdf

[49] Csányi G, Miller FJ. Oxidative stress in cardiovascular disease. Int. J. Mol. Sci.
Internet2014 Consultado 12 Ene 2018;15(4): 6002-6008. Disponible en:
http://www.mdpi.com/1422-0067/15/4/6002/htm
 55

[50] Hess, M. L., Krause, S., & Kontos, H. A. (1983). Mediation of sarcoplasmic
reticulum disruption in the ischemic myocardium: proposed mechanism by the
interaction of hydrogen ions and oxygen free radicals. In Myocardial Injury.
Advances in Experimental Medicine and Biology. Springer, Boston, MA; 377-
389. Disponible en: https://doi.org/10.1007/978-1-4684-4472-8_21

[51] Paredes Salido, F., & Roca Fernández, J. J. (2002). Influencia de los radicales
libres en el envejecimiento celular. Offarm: Farmacia y Sociedad Internet2002
Consultado 12 Ene 2018;21(7), 96-100. Disponible en:
http://www.elsevier.es/es-revista-offarm-4-articulo-influencia-los-radicales-
libres-el-13034834

[52] Dizdaroglu, M., & Jaruga, P. (2012). Mechanisms of free radical-induced

damage to DNA. Free radical research Internet2012 Consultado 12 Ene
2018;46(4): 382-419.Disponible en:
https://doi.org/10.3109/10715762.2011.653969

[53] Bergh, B., & Ellstrand, N. Taxonomy of the avocado. California Avocado
Society YearbookInternet1986 Consultado 12 Ene 2018];70: 135-
145.Disponible en:
http://www.avocadosource.com/cas_yearbooks/cas_70_1986/cas_1986_pg_
135-145.pdf

[54] Ben-Ya’acov, A., Bufler, G., Barrientos-Priego, A. F., De La Cruz-Torres, E., &
López-López, L. A study of avocado germplasm resources. General description
of the international project and its findings. In Proceedings of the Second World
Avocado Congress Internet1992 Consultado 12 Ene 2018;2: 535-541.
Disponible en: http://www.avocadosource.com/WAC2/WAC2_p535.pdf

[55] Romero, C. A. & Castro, E. « Tendencias de la producción y el comercio de

palta en el mercado internacional y nacional. Ministerio de Agricultura y
Riego.,» La palta “producto estrella de exportación” internet, 2015. Consultado
12 Ene 2018. 80 p. Disponible en: http://siea.minagri.gob.pe/siea/?q=la-palta-
peruana
 56

[56] Aguacate. Asotbilbao. Internet2016 Consultado 12 Ene 2018. Disponible en:

http://www.asotbilbao.com/portal/productos/aguacate.html

[57] HISTORIA. Internet.Perúprohass; 2016 Consultado 10 Ene 2018]. . Disponible

en: http://www.prohass.com.pe/historia

[58] Bonilla-Porras Angélica R, Jiménez-Ramírez Silvia L, Nuñez-Rangel Vitelbina,

Jiménez-Del-Rio Marlene, Vélez-Pardo Carlos. Efecto inductor de apoptosis
de proteínas obtenidas de veneno de Porthidium nasutum y de extractos
etanólicos de Persea americana en líneas celulares de leucemia linfoide aguda
(Jurkat Clone E6-1) y mieloide crónica (K-562): estrategias anticancerígenas.
Actu Biol Internet.2012 June Consultado 2018 May 26] ; 34( 96 ): 155-156.
Available from:
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0304-
35842012000100040&lng=en.

[59] Leite João Jaime Giffoni, Brito Érika Helena Salles, Cordeiro Rossana Aguiar,
Brilhante Raimunda Sâmia Nogueira, Sidrim José Júlio Costa, Bertini Luciana
Medeiros et al . Chemical composition, toxicity and larvicidal and antifungal
activities of Persea americana (avocado) seed extracts. Rev. Soc. Bras. Med.
Trop. Internet.2009 Apr Consultado 2018 May 26] ; 42( 2 ): 110-113.
Available from: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0037-
86822009000200003&lng=en. http://dx.doi.org/10.1590/S0037-
86822009000200003.

[60] Bora, P. S., Narain, N., Rocha, R. V., & Paulo, M. Q. Characterization of the
oils from the pulp and seeds of avocado (cultivar: Fuerte) fruits. Grasas y
Aceites Internet2001 Consultado 20 Ene 2018;52(3-4): 171-174. Disponible
en: http://dx.doi.org/10.3989/gya.2001.v52.i3-4.353

[61] Imafidon, K. E., & Amaechina, F. C. Effects of aqueous seed extract of Persea
americana Mill.(avocado) on blood pressure and lipid profile in hypertensive
rats. Adv Biol Res Internet2010 Consultado ]; 4(2): 116-121. Disponible en:
https://www.researchgate.net/publication/267822450

[62] Alhassan, A. J., Sule, M. S., Atiku, M. K., Wudil, A. M., Abubakar, H., &
Mohammed, S. A. Effects of aqueous avocado pear (Persea americana) seed
 57

extract on alloxan induced diabetes rats. Greener Journal of Medical Sciences

Internet2012 Consultado 20 Ene 2018;2(1): 5-11. Disponible en:
http://gjournals.org/GJMS/archive/vol-2-1-january-2012/alhassan-et-al.html

[63] Valenzuela A, Morado N. Las grasas y aceites en la nutrición humana: algo de

su historia Internet.Revista Palmas Internet.1ene.2007 [citado
26may2018];28(3):63-1. Disponible en:
https://publicaciones.fedepalma.org/index.php/palmas/article/view/1228

[64] Bressani, R., Rodas, B., & Ruiz, A. S. La composición química, capacidad
antioxidativa y valor nutritivo de la semilla de v ariedades de aguacate Internet.
Fondo Nacional de Ciencia y T ecnología: Uni versidad del Valle de
Guatemala, Guatemala; 2009. Consultado 20 Ene 2018]. Disponible en:
http://glifos.concyt.gob.gt/digital/fodecyt/fodecyt%202006.02.pdf

[65] Tesfay, S. Z., Bertling, I., & Bower, J. P. Anti-oxidant levels in various tissues
during the maturation of ‘Hass’ avocado (Persea americana Mill.). The Journal
of Horticultural Science and Biotechnology Internet2010 Consultado 20 Ene
2018];85(2): 106-112. Disponible en:
https://doi.org/10.1080/14620316.2010.11512639

[66] Romero, M., Stefanía, J., Tauriz, P., & Stefanía, P. (2017). Plan de negocios
para producción-comercialización de té de semilla la de Aguacate (Bachelor's
thesis, Universidad de Guayaquil Facultad de Ciencias Administrativas).
internet; 2017 Consultado 10 Ene 2018.
http://repositorio.ug.edu.ec/handle/redug/23327

[67] Arukwe, U., Amadi, B. A., Duru, M. K. C., Agomuo, E. N., Adindu, E. A., Odika,
P. et al. Chemical composition of Persea americana leaf, fruit and seed.
IJRRAS Internet2012 Consultado 20 Ene 2018;11(2): 346-349. Disponible en:
https://www.semanticscholar.org/paper/Chemical-Composition-of-Persea-
Americana-Leaf%2C-
andAmadiDuru/2a234c2a8ba51b4103ed188a8a23fc51c561003e

[68] A. Tibebu, «Extraction and Characterization of antioxidant from avocado seeds

(Doctoral dissertation, Addis Ababa University)». Internet 2017 Consultado 20
Ene 2018;2017. Disponible en:
 58

http://engineeringjournals.stmjournals.in/index.php/JoCC/article/view/470

[69] Tian X. Food processing by-products as natural sources of antioxidants: a mini

review. Adv Food Technol Nutr Sci Open J. Internet2016 Consultado 20 ene
2018;SE(2): S7-S17. Disponible en: https://doi:10.17140/AFTNSOJ-SE-2-102

[70] Molyneux, P. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH)
for estimating antioxidant activity. Songklanakarin J. Sci. Technol Internet2004
Consultado 20 Ene 2018;26(2): 211-219. Disponible en:
https://s3.amazonaws.com/academia.edu.documents/44205041/07-
DPPH_1.pdf?AWSAccessKeyId=AKIAIWOWYYGZ2Y53UL3A&Expires=1527
394213&Signature=YABsq8qPySPzMctnc7OzhAIgbWg%3D&response-
content-
disposition=inline%3B%20filename%3DThe_use_of_the_stable_free_radical
_diphe.pdf

[71] Singh, R. P. Genesis and development of DPPH method of antioxidant assay.

Journal of food science and technology Internet2011Consultado 20 Ene
2018;48(4): 412-422. Disponible en: https://doi.org/10.1007/s13197-011-0251-
1
[72] Arnau, J. (1995). Metodología de la investigación psicológica. En M. T.
Anguera, J. Arnau, M. Ato, R. Martínez, J. Pascual & G. Vallejo, Métodos de
investigación en psicología (pp. 23-43). Madrid: Síntesis

[73] Fox, W., & Bayat, M. S. (2007). A Guide To Managing Research; Cape Town:
Juta and Co. Internet 2011. Consultado 20 Ene 2018. Disponible en:
https://books.google.com.pe/books?isbn=0702172677

[74] Carrasco, S. Metodología de la investigación científica. Internet. Editorial San

Marcos; 2006. Consultado 12 Ene 2018. Disponible en:
https://drive.google.com/file/d/0B_5sJ55jMLo6dzBZWm8wZ1JTOVE/view?usp=s
haring

[75] Hernández Sampieri, R., Collado, C. F., & Lucio, P. B. Capítulo 5. Definición
del alcance de la investigación a realizar: exploratoria, descriptiva,
correlacional o explicativa. Metodología de la investigación Internet.Mexico:
McGraw-Hill; 1997 Consultado 20 Ene 2018]. Disponible en:
 59

https://sites.google.com/site/metodologiadelainvestigacionb7/capitulo-5-
sampieri

[76] Young, I. (2001). Measurement of total antioxidant capacity. Journal of Clinical

Pathology, Internet 2001, Consultado 20 Ene 2018; 54(5): 339. Disponible en:
http://dx.doi.org/10.1136/jcp.54.5.339

[77] A. D. K. S. C. S. K. y. O. C. Floegel, «Comparación de ensayos ABTS / DPPH

para medir la capacidad antioxidante en alimentos estadounidenses ricos en
antioxidantes populares.,» J. Food Comp. Anal, pp. 1043-1048, 2011.

[78] Dai, J., & Mumper, R. J. (2010). Plant phenolics: extraction, analysis and their
antioxidant and anticancer properties. Molecules, Internet. 2010. Consultado
20 Ene 2018; 15(10): 7313-7352. Disponible en:
https://doi.org/10.3390/molecules15107313

[79] Corral, R., Yahia, E., Carrillo, A., & González, G. Correlation between some
nutritional components and the total antioxidant capacity measured with six
different assays in eight horticultural crops. Journal of Agricultural and Food
Chemistry. Internet. 2008. Consultado 20 Ene 2018; 56(22): 10498−10504.
Disponible en: https://pubs.acs.org/doi/abs/10.1021/jf801983r

[80] Wang, W., Bostic, T. & Gu, L. Antioxidant capacities, procyanidins and
pigments in avocados of different strains and cultivars. Food Chemistry,
internet. 2010. Consultado 20 Ene 2018; 122: 1193–1198. Disponible en:
https:// doi.org/10.1016/j.foodchem.2010.03.114

[81] Cheng, Z., Moore, J. & Yu, L. High-throughput relative DPPH radical
scavenging capacity assay. Agricultural and Food Chemistry, internet. 2006.
Consultado 20 Ene 2018; 54, 7429–7436. Disponible en:
https://doi.org/10.1021/ jf0611668

[82] Li, X., Wu, X., & Huang, L. Correlation between antioxidant activities and
phenolic contents of radix Angelicae sinensis (Danggui). Molecules, internet.
2009. Consultado 20 Ene 2018; 14(12): 5349-5361. Disponible en:
http://www.mdpi.com/1420-3049/14/12/5349
 60

[83] Phongpaichit, S., Nikom, J., Rungjindamai, N., Sakayaroj, J., Hutadilok-
Towatana, N., Rukachaisirikul, V., & Kirtikara, K. (2007). Biological activities of
extracts from endophytic fungi isolated from Garcinia plants. FEMS
Immunology & Medical Microbiology, internet. 2007. Consultado 20 Ene 2018;
51(3), 517-525. Disponible en: https://doi.org/10.1111/j.1574-
695X.2007.00331.x

[84] Markovic, Z., Jeremic, S., Filipovic, M., Milenkovic, D., & Djorovic, J. (2016).
QSAR Model for Predicting Antioxidan Capacity of Some Polyphenolic
Antioxidants. Internet. 2016. Consultado 20 Ene 2018; Disponible en:
http://arhiva.nara.ac.rs/handle/123456789/1709
 61

ANEXOS
 62

Anexo1: Certificación Botanica

 63

Anexo 2: Curva de reducción del DPPH por el extracto etanólico de semilla de

Persea americana Mill

Reducción de DPPH y = -1.3511x + 0.3596

R² = 0.9976
0.400
0.350
0.300
Absorbancia

0.250
0.200
0.150
0.100
0.050
0.000
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 0.16 0.18
Concentración

Absorbancia
Concentración µg/ml Promedio
Grupo A grupo B Grupo C
0 0.350 0.369 0.350 0.356
0.065 0.281 0.276 0.280 0.279
0.074 0.261 0.258 0.261 0.260
0.086 0.246 0.242 0.244 0.244
0.104 0.215 0.217 0.215 0.216
0.13 0.183 0.185 0.181 0.183
0.17 0.130 0.131 0.128 0.130
 64

Anexo 3: Curva de reducción del DPPH por el la Vitamina C

Reducción de Vitamina C
0.400
0.350 y = -0.0627x + 0.3773
R² = 0.9988
0.300
Absorbancia

0.250
0.200
0.150
0.100
0.050
0.000
0 1 2 3 4 5 6
Concentración

Concentración Absorbancia
Promedio
µg/ml Grupo A grupo B Grupo C

0 0.369 0.378 0.376 0.3743

1.2 0.311 0.305 0.307 0.3077

2.4 0.221 0.234 0.225 0.2267

3.6 0.141 0.146 0.154 0.1470

4.8 0.068 0.088 0.08 0.0787

 65

Anexo 4: Matriz de consistencia

PROBLEMA GENERAL OBJETIVO GENERAL VARIABLE INDICADORES MÉTODO

Enfoque:
Evaluar la capacidad
¿Cuál es la capacidad antioxidante Cuantitativo
antioxidante del extracto % de captación de
del extracto etanolico de semilla de Método:
etanolico de Persea DPPH
Persea americana Miller var. Hass deductivo
americana Miller var. Hass
(palta)? Diseño: No
(palta) por métodos DPPH
experimental
transeccional
OBJETIVOS ESPECÍFICOS (IC50)
PROBLEMAS ESPECÍFICOS descriptivo
Nivel:
Evaluar la capacidad Correlacional
¿Cuál es la capacidad antioxidante
antioxidante del extracto Capacidad antioxidante Tipo: Básica
del extracto etanolico de semilla de
etanolico de Persea total Población: 1
Persea americana Miller var. Hass
americana Miller var. Hass Hectarea
(palta) por el método DPPH? (VCEAC)
(palta) por métodos DPPH Muestra: 6
semillas aisladas
de un peso de
¿Cuál esla capacidad antioxidante Evaluar la capacidad 500 gr
equivalente a la vitamina C presente antioxidante equivalente a la
en el extracto de Persea americana vitamina C presente en el
Mill var. Hass (palta)? extracto de Persea americana
Mill var. Hass (palta).
 66

Anexo 5: Ficha de recolección de datos

“Evaluación de la capacidad antioxidante de la semilla de Persea

americana Miller var. Hass fuerte (palta)”
Díaz Veas Mary Karina

ANEXO Nº1: FICHA DE RECOLECCION DE DATOS

MUESTRA: EXTRACTO ETANOLICO DE SEMILLA DE PALTA
CANTIDAD: 1 frasco de vidrio X 250ml
Fecha de recepción: 10 de Enero de 2018

I. PREPARACION DE DILUCIONES

Nº DILUCION MP H2O VALOR

FINAL
1
2
3
4
5
6

II. PROCEDIMIENTO EN DILUCIONES Y ESTANDAR

Tubos Blanco control MP

mL Agua 0,5 0,5
mL Etanol 1
mL MP 0,5
mL DPPH 1 1

TIEMPO DE REACCIÓN: 30 minutos

AMBIENTE: PROTEGIDO DE LA LUZ

III. LECTURA DE ESPECTROFOTOMETRO

 67

LONGITUD DE ONDA: 517nm

TUBOS B C 1 2 3 4 5 6
1
2
3

IV. % de captación de DPPH

Concentración % de captación de radicales libres Promedio

µg/ml
Grupo A grupo B Grupo C

V. Cantidad del sustancia antioxidante que disminuya al 50% la concentración del

DPPH( IC50)

µg/ml Absorbancia %scv ic50

VI. Actividad antioxidante equivalente a vitamina C (VCEAC)

V CEAC = IC50 Vitamina C

IC50 P. americana
Resultado:
 68

Anexo 7: Autorización de publicación de tesis para repositorio institucional

 69

Anexo 8: Evaluación de la similitud del instrumento con Turnitin

70
71