Evaluación de medios de cultivo sintéticos y cereales para

la producción de semilla de setas comestibles

Evaluation of cereals and artificial cultivation methods in the
production of spawn of edible mushrooms

CAROLINA SUÁREZ A.1,3

MARTHA STELLA HOLGUÍN H.2

Carpóforos de shiitake
(Lentinula edodes) utilizados
en el aislamiento
Plantulas de micelio por
de tomate.
diferentes técnicas.
Foto: Álvarez-Herrera.
Foto: M.S. Holguín H.

RESUMEN
Los macromicetos, en especial las setas comestibles, han sido parte de la cultura humana desde hace miles de
años como alimento en las más importantes civilizaciones de la historia. Se han descrito muchas propieda-
des nutracéuticas de estos hongos; tienen un elevado contenido de proteína, poseen todos los aminoácidos
esenciales para las funciones humanas, así como un alto contenido de vitaminas y minerales, también poseen
propiedades anticancerígenas y antitumorales, hipocolesterolémicas, antivirales, antibacterianas, inmunomo-
duladoras, entre otras. Pleurotus sp. (orellanas) y Lentinula edodes (Shiitake) se encuentran entre las setas con
un mayor índice de producción a nivel mundial. En Colombia, el cultivo de este tipo de hongos es poco genera-
lizado por lo que las fuentes de información para llevar a cabo este tipo de cultivos son reducidas. Se evaluaron
diferentes medios de cultivo artificiales y diferentes tipos de semillas de cereales para la producción de micelio
y semilla (spawn). Los aislamientos de hongos fueron sembrados en cajas de Petri que contenían los diferentes
medios de cultivo y su crecimiento fue medido cada dos días; las semillas de cereal fueron inoculadas con las
cepas y su crecimiento se determinó cualitativamente. El mejor medio para la producción de micelio fue PDA
(papa, dextrosa y agar) con una tasa de crecimiento específica de 0,80 mm día-1 para L. edodes, 0,81 para P.
pulmonarius y 0,65 para P. ostreatus. El mejor cereal para la producción de semilla fue el trigo, de acuerdo con
la escala realizada para este trabajo.

Palabras clave adicionales: Shiitake, orellanas, producción de micelio, medios sintéticos, producción de semilla.

1 Programa de Maestría en Ciencia y Tecnología de Alimentos, Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos (ICTA),
Universidad Nacional de Colombia, Bogotá (Colombia).
2 Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos (ICTA), Universidad Nacional de Colombia, Bogotá (Colombia).
3 Autor para correspondencia. csuareza@unal.edu.co

REVISTA COLOMBIANA DE CIENCIAS HORTÍCOLAS - Vol. 5 - No.1 - pp. 130-140, 2011

 M edios de cultivo para la producción de semilla de setas comestibles 131

ABSTRACT
Macromycetes, especially edible mushrooms, have been part of human culture for thousands of years as a
food in the most important civilizations throughout history. Many nutraceutical properties of mushrooms
have been described, they have a high protein content, equal to or higher than some vegetables, they have
all the essential amino acids for human functions and a high content of vitamins and minerals; they also
have medicinal properties such as anticancer, antitumor, hypocholesterolemic, antiviral, antibacterial, and
immunomodulatory effects, among others. Pleurotus sp. (oyster mushrooms) and Lentinula edodes (Shiitake)
are among the mushrooms with the highest rate of production worldwide. In Colombia, cultivation of
these fungi is not widespread due to a lack of information on local production. Several artificial cultivation
methods and cereal seeds were evaluated for the production of mycelium and seed (spawn). Isolated strains
were grown in Petri dishes with different media and their growth was measured every two days, cereals
seeds were inoculated and their infection level was measured qualitatively. The best media was PDA (potato,
dextrose, agar) with a specific growth rate (mm day-1) of 0.80 for L. edodes, 0.81 for P. pulmonarius and 0.65 for
P. ostreatus. The best grain for spawn production on the scale of this study was wheat.

Additional key words: Shiitake, oyster mushroom, mycelia production, synthetic media, spawn production.

Fecha de recepción: 24-03-2011 Aprobado para publicación: 27-05-2011

IntroduCCIÓN

El reino fungi comprende un inmenso grupo de con esto son divididos en micromicetos y ma-
organismos muy versátiles, con diferentes mor- cromicetos. Los macromicetos han sido parte de
fologías, fisiologías, ciclos de vida, entre otros; la humanidad desde hace miles de años y se han
son descritos como organismos unicelulares o descrito como alimento humano en las más im-
pluricelulares, eucarióticos, productores de es- portantes civilizaciones de la historia (Smith et
poras, que carecen de clorofila, heterótrofos, al., 2002). Desde la década de los setenta se han
que se reproducen tanto sexual como asexual- incrementado las investigaciones científicas en
mente y que usualmente son filamentosos, ra- este tipo de organismos debido a sus propiedades
mificados con estructuras somáticas llamadas medicinales y al legado cultural que se tienen de
hifas y típicamente rodeados de paredes celu- ellos, en especial en el Lejano Oriente. Debido
lares (Alexopolus et al., 1996). En este reino se a esto, se han descrito muchas propiedades nu-
incluyen los phylum Chytridiomycota, Zygomyco- tracéuticas de los macrohongos (macromicetos),
ta, Glomeromycota, Ascomycota y Basidiomycota como son: anticancerígenas y antitumorales, hi-
como los principales, así como el grupo de fungi pocolesterolémicas, antivirales, antibacterianas,
imperfecti u hongos amorfos (Ainsworth et al., inmunomoduladoras, entre otras (Mattila et al.,
2001). Aparte de la clasificación taxonómica ofi- 2000; Smith et al., 2002). Igualmente, han sido
cial de los hongos, existen otras, en las que se descritas sus propiedades nutricionales; tienen
incluye la que los diferencia por el tamaño de un elevado contenido de proteína (casi igual o
sus órganos de reproducción sexual, es decir si superior al de algunas legumbres) lo que los hace
estos pueden ser observados a simple vista y un gran sustituto de la carne cuando la dieta no
pueden ser colectados con la mano; de acuerdo incluye mucha proteína animal; además, poseen

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132 SUÁREZ A./HOLGUIN H.

todos los aminoácidos esenciales para las funcio- El objetivo de esta investigación fue evaluar in
nes humanas, así como un alto contenido de vi- vitro medios de cultivo artificiales comerciales
taminas y minerales (Caglarirmak, 2007; Mush- y de semillas de cereal comunes para la produc-
World, 2004). Los géneros Pleurotus y Lentinula ción de micelio y, posteriormente, de la semilla
se encuentran entre los primeros en producción (spawn) para que productores de este tipo de ali-
mundial, los principales productores de estos mentos puedan producir sus propios insumos y
hongos se encuentran en el lejano oriente y Esta- así disminuir los costos de producción; llevando
dos Unidos; en Latinoamérica, Chile es el mayor a un gran impulso en la producción de este tipo
productor de setas mientras que Colombia ocu- de macromicetos lo que generaría muchas más
pa el tercer lugar, después de Argentina (Díaz y fuentes de empleo, mayores ingresos de los pro-
Ortiz, 2001; Guarín y Ramírez, 2004). ductores y por consiguiente una mayor oferta
al consumidor, que se beneficiaría de un menor
En Colombia, el cultivo de este tipo de hongos precio por un producto que además de nutrirle,
está destinado a estratos socioeconómicos altos, le llevaría grandes beneficios en su salud.
debido a que la oferta en el país es muy baja y
sus precios son muy elevados. Los agricultores
colombianos no poseen las herramientas básicas MATERIALES Y MÉTODOS
para producirlos debido a que las fuentes de in-
formación acerca de este tipo de cultivos son en Materiales
idiomas diferentes al castellano y además, la in-
vestigación en el país sobre este tipo de organis- Los cuerpos fructíferos maduros y no esporula-
mos es reducida. Uno de los mayores problemas dos de Pleurotus ostreatus, Pleurotus pulmonarius y
que tienen los productores de este tipo de hongos Lentinula edodes, se obtuvieron de un proveedor
es su procedencia asiática y por consiguiente se local. Se determinó con este proveedor el estado
debe importar la cepa para producirla; lo que aca- de maduración, tamaño y fechas destinadas para
rrea costos elevados y por consiguiente, el costo el análisis y desarrollo del proyecto, para esto,
de producción se aumenta, llevando también ese se hizo un cronograma de siembras que permi-
costo a los consumidores (Villegas et al., 2007). tieron la obtención de carpóforos de primera o
segunda oleada (cosecha) ya que hay menos pe-
El uso de cepas no foráneas, es decir, cepas acli- ligro de contaminación y las cepas no han tenido
matadas a condiciones locales, hace que los pro- el tiempo de perder sus propiedades característi-
ductores tengan una ventaja, la producción de las cas, como ocurre cuando los cultivos son muy
setas se da en un menor tiempo que si se usa una viejos (Scrase, 1995; Stamets y Chilton, 1983).
cepa recién traída del exterior (Torres y Hurtado,
2003). El tener la capacidad de reproducir este Los medios de cultivo específicos para evaluar
tipo de organismos por los cultivadores colom- el crecimiento del micelio fueron: PDA (papa,
bianos y en ambientes autóctonos hace que la dextrosa y agar) Oxoid®, OGY (oxytetraciclina,
rentabilidad del negocio sea mucho mayor y que extracto de levadura y glucosa) Oxoid® y Sabou-
muchos más cultivos se instalen a lo largo del raud Difco®. Para la prueba de confirmación de
país; lo que conllevaría a más puestos de trabajo la viabilidad del micelio que se obtuvo, se eva-
y mejoras en las capacidades socioeconómicas de luaron diferentes tipos de cereales (maíz ama-
un tipo de población muy especial en el país, la rillo, cebada, trigo, millo y sorgo) para producir
de desplazados, que es uno de los tipos de pobla- semilla, las semillas utilizadas fueron adquiridas
ción objetivo para que desarrollen este tipo de en un mercado local, todas pertenecientes a un
cultivos (Arias et al., 2008; MushWorld, 2005). mismo lote.

REV. COLOMB. CIENC. HORTIC.

 M edios de cultivo para la producción de semilla de setas comestibles 133

Metodología cereal y se lavaron con abundante agua, elimi-

nando los granos infectados o rotos, además de
Para el aislamiento del micelio se tomó el car- los desechos vegetales que quedan después de la
póforo y se cortaron con un escalpelo estéril y recolección de los cereales (ramas, hojas, tallos,
en un ambiente estéril, pequeños cuadrados de etc). Se dejaron en agua por una noche para que
4 mm de lado. Los trozos se dispusieron en una los granos se hidrataran y luego, se escurrieron.
caja de Petri estéril y se desinfectaron así: tres Se adicionó un 1% (en base húmeda) de carbo-
lavados con hipoclorito de sodio al 3%, por un nato de calcio a los granos de cereal y posterior-
minuto con un enjuague entre cada lavado con mente, se esterilizaron a 121°C y 15 lb de presión
agua destilada estéril un minuto, posteriormen- por 1 h, debe cumplirse el tiempo de esteriliza-
te, se hizo un lavado con alcohol al 70% durante ción ya que si esto no se da, el porcentaje de con-
un minuto y posterior lavado con agua destilada taminación por mohos, especialmente Trichoder-
estéril por otro minuto. ma spp., se incrementa. Se midió el porcentaje
de humedad y el pH de los granos después de la
Luego de tener los trozos desinfectados, se sem- esterilización. El promedio de pH fue 5,96 y el de
braron en superficie en agar PDA, cinco o seis humedad 46,3%.
trozos fueron puestos de forma radial en las pla-
cas con una separación tal que las hifas tuvieran Después de que los frascos con los granos estu-
suficiente espacio para crecer. Las cajas fueron vieron a temperatura ambiente, se inocularon.
incubadas a 22±2°C, por 5 d o hasta que las Se tomaron cuadrados de agar de 1 cm de lado
mismas fueron cubiertas completamente por el y se distribuyeron en el frasco que contiene los
micelio. granos, entre tres y cuatro cuadrados de agar son
suficientes para que haya una rápida y efectiva
Después de tener micelio completamente puro, infección de los granos. Se incubaron en oscuri-
se procedió a la evaluación de los diferentes me- dad a 22±2°C por el tiempo que fuera necesario
dios de cultivos para determinar cuál de ellos es hasta que se observara una infección completa
mejor para el aislamiento y producción de mi- de los granos, a la semana de incubación, los
celio. Los medios de cultivo fueron reconstitui- frascos se agitaron para que hubiera una distri-
dos de acuerdo con el fabricante y esterilizados bución homogénea del micelio y de humedad.
a 121°C durante 15 min; después se sirvieron en
cajas de Petri de vidrio y se dejaron solidificar. El crecimiento del micelio fue medido cualitati-
Con escalpelo estéril se cortaron trozos de agar vamente en el tiempo, se observaba la distribu-
con micelio de 4 mm de lado y se sembraron ción y abundancia de micelio en los granos de
centralmente para poder medir el radio de creci- cereal. Se determinó el final de la incubación
miento del micelio en el tiempo. Las cajas se in- cuando el frasco tenía un color blanco debido al
cubaron a 22±2 °C hasta que el micelio cubriera crecimiento abundante del micelio.
toda la superficie del agar. El radio de crecimien-
to fue medido con un calibrador (Mitutoyo®) Diseño experimental
cada dos días y reportado en milímetros. Se rea-
lizaron cinco réplicas para cada medio de cultivo Se utilizó un arreglo de 3x3, con un diseño de
y especie de hongo. bloques al azar, con tres tipos de aislamiento y
en tres tipos de medios de cultivo; se hicieron
Después de tener el micelio puro en las cajas de cinco repeticiones por tratamiento (135 mues-
Petri, se evaluaron los granos de cereal. El pro- tras analizadas), de manera que se pudieron eva-
cedimiento para producir la semilla, es descrito luar las diferencias entre tratamientos y especies
por Saldarriaga (2001). Se tomaron los granos de mediante un análisis de varianza (Anova); rea-

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134 SUÁREZ A./HOLGUIN H.

lizando la prueba de Fischer (5%). El análisis de con el análisis estadístico de los datos, la prueba
los datos se llevó a cabo empleando el software el de Fischer indicó con un porcentaje de confian-
SPSS 17® para Windows ®. za del 95% (P<0,05) que hubo diferencias signi-
ficativas entre los diferentes medios de cultivo y
diferencias entre las cepas empleadas. Los pro-
RESULTADOS Y DISCUSIÓN medios de los resultados de crecimiento del mi-
celio de acuerdo a la cepa y al agar se presentan
Evaluación de medios de cultivo para produc- en la tabla 1.
ción de micelio
Ningún medio de cultivo tuvo un comporta-
Para todas las cepas, se observó que el medio miento diferente para una cepa determinada,
de cultivo más rápidamente invadido fue PDA, los tres medios de cultivo tuvieron un compor-
L. edodes y P. pulmonarius fueron las cepas que tamiento similar para los tres hongos estudia-
tuvieron un crecimiento más rápido en este me- dos, lo que indica que esto podría extrapolarse
dio, invadiendo la caja en 8 d, mientras que P. a la totalidad de hongos de este tipo, es decir,
ostreatus tuvo un crecimiento más lento en este los hongos de la pudrición blanca de la madera,
tipo de agar. El segundo medio de cultivo más ya que se estudiaron dos géneros que compar-
rápido fue OGY, mientras que Saboureaud tuvo ten esta característica (ligninolíticos y celulolí-
un pobre crecimiento, a tal punto que el creci- ticos) pero que no tienen la misma clasificación
miento micelial se detuvo en un momento de- taxonómica. El micelio obtenido es característi-
terminado. co de cada especie, mientras que para L. edodes
(Shiitake) el micelio es poco denso, simétrico y
Al realizar un análisis cualitativo de los resulta- podría describirse “débil”; para las orellanas (P.
dos se pudo observar que hay diferencias entre pulmonarius y P. ostreatus) se observó un micelio
los medios y las cepas empleadas. Cada cepa denso, de crecimiento irregular, abundante y
tuvo un comportamiento distinto entre los di- “fuerte”; sin que los adjetivos “débil” y “fuerte”
ferentes medios de cultivos y como era de su- tengan que ver con su índice de infección en los
ponerse, el comportamiento de cada cepa fue medios de cultivo o los granos de cereal. La tabla
diferente comparado con otra. Esto se corrobora 1 demuestra que a pesar de que el Shiitake tuvo

Tabla 1. Crecimiento radial (mm) de Pleurotus ostreatus, Pleurotus pulmonarius y Lentinula edodes en diferentes
tipos de medio de cultivo.

Tiempo (días)
Aislamientos Medios de cultivo 2 4 6 8 10 12 14

PDA 3,0 11,8 31,0 44,4

L. edodes OGY 0,4 10,8 17,2 25,6 38,8 45,0
Sabouraud 0,3 7,0 13,4 19,2 29,6 39,6
PDA 3,0 10,4 36,8 45,0
P. pulmonarius OGY 3,0 11,6 20,6 31,6 45,0
Sabouraud 1,2 6,2 11,2 17,8 27,2
PDA 2,6 7,2 23,4 37,4 45,0
P. ostreatus OGY 2,8 14,2 23,6 34,4 41,6 45,0
Sabouraud 1,2 4,6 7,6 11,8 16,6 24,8 33,8

REV. COLOMB. CIENC. HORTIC.

 M edios de cultivo para la producción de semilla de setas comestibles 135

un crecimiento micelial poco denso, su velocidad to específico no es una función de la concen-

de crecimiento fue prácticamente igual que para tración del sustrato (Viniegra-González et al.,
las otras dos especies. 2003). La tabla 2 muestra las ecuaciones obteni-
das con los datos experimentales y el respectivo
Con los datos obtenidos del crecimiento se de- ajuste (R2).
terminó hallar la velocidad de crecimiento de las
diferentes especies de hongos en los diferentes ti- Como se describió anteriormente, el medio de
pos de agar. Como primera medida se graficaron cultivo sintético que mejor resultado arrojó para
los datos obtenidos, representados en la tabla 1. el aislamiento y producción de micelio fue PDA.
Las figuras 1, 2 y 3, representan el crecimiento No existen estudios científicos que determinen
de los diferentes hongos en los medios de cultivo el porqué de este comportamiento por parte de
sintéticos evaluados. Las gráficas muestran que los hongos, sin embargo este es uno de los me-
el crecimiento en PDA fue más rápido para todas dios de cultivo mayormente utilizados para la
las cepas, que el segundo mejor medio artificial manutención y preservación de los hongos. En
fue OGY y por último el Sabouraud. la mayoría de estudios realizados con este tipo
de macromicetos, el PDA es el medio de cultivo
El tipo de crecimiento filamentoso o algodonoso mayormente utilizado para iniciar la activación
indica cualitativamente la producción de bioma- de la cepa y su posterior uso, tanto para fermen-
sa de las cepas, sin embargo, para determinar taciones en estado líquido (FEL), como en traba-
cuantitativamente dicha producción se procedió jos realizados con cultivo tradicional y fermen-
a realizar diferentes cálculos matemáticos con tación en estado sólido (FES) (Feng et al., 2010;
base en la ecuación logística de Velhurst-Pearl, Turlo et al., 2010; Osman et al., 2009; Tepwong
originalmente desarrollada para el crecimien- y Ohshima, 2009). Este medio de cultivo tiene
to de una población (Viniegra-González et al., todos los componentes nutritivos para que los
2003); esta ecuación asume que los cultivos mi- hongos se desarrollen, el extracto de papa pro-
crobianos están prácticamente saturados por el porciona almidón, algo de lignina y otros mine-
sustrato y por consiguiente, la tasa de crecimien- rales que ayudan a que los hongos se desarrollen

50
45
PDA
40 OGY
Sabouraud
35
Crecimiento (mm)

30
25
20
15
10
5
0
2 4 6 8 10 12 14

Tiempo (días)

Figura 1. Crecimiento de Lentinula edodes según los medios de cultivo evaluados.

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50
45
PDA
40 OGY
Sabouraud
Crecimiento (mm) 35
30
25
20
15
10
5
0
2 4 6 8 10 12 14

Tiempo (días)

Figura 2. Crecimiento de P. pulmonarius según los medios de cultivo evaluados.

50
45
PDA
40 OGY
Sabouraud
35
Crecimiento (mm)

30
25
20
15
10
5
0
2 4 6 8 10 12 14

Tiempo (días)

Figura 3. Crecimiento de P. ostreatuss según los medios de cultivo evaluados.

e inhiban el crecimiento de bacterias, la dextrosa en su composición también la glucosa como su

(glucosa) es la fuente de carbono principal para principal fuente de carbono, pero contiene ade-
los hongos y el agar es adicionado como agente más extracto de levadura y como agente antibac-
gelificante, su pH (5,6 ±2) es ideal para el creci- teriano la oxitetraciclina, aunque el medio con-
miento de hongos y la inhibición de bacterias de- tenga la glucosa, es evidente que el extracto de
bido a su ligera acidez. El medio OGY (extracto levadura, que en su mayoría es un componente
de levadura, glucosa y extracto de levadura) tiene proteico no brinda las mejores condiciones nutri-

REV. COLOMB. CIENC. HORTIC.

 M edios de cultivo para la producción de semilla de setas comestibles 137

Tabla 2. Ecuaciones de crecimiento obtenidas del tratamiento matemático de los datos arrojados por la
experimentación.

Medio
PDA R2 OGY R2 Sabouraud R2
Hongo

Lentinula edodes y=0,9879e0,8051x 0,98 y=1,3985e0,5456x 0,92 y=1,2616e0,5332x 0,96

Pleurotus
y=0,9659e0,817x 0,97 y=1,4258e0,6145x 0,95 y=1,4339e0,4896x 0,97
pulmonarius
Pleurotus
y=1,233e0,648x 0,96 y=1,9369e0,5136x 0,88 y=1,5982e0,3982x 0,98
ostreatus

cionales para el desarrollo de este tipo de hongos nismo bajo un nuevo medio de cultivo, debe
(éste es un medio utilizado para el conteo de mo- ser comparado obligatoriamente con un medio
hos y levaduras en el control de calidad micro- de cultivo ampliamente estudiado y conocido
biológico de alimentos), aunque se podría contar para determinar si este nuevo medio de culti-
como una opción al no tener PDA, ya que el cre- vo es mejor que el utilizado comúnmente. No
cimiento es más lento sólo por unos pocos días se han realizado muchos estudios de la ciné-
(2 a 4). El medio Sabouraud fue el que tuvo un tica de crecimiento de este tipo de hongos en
resultado menos favorecedor, en todos los casos, medios sólidos, las investigaciones se han en-
el crecimiento micelial de las especies de hongos focado a la cinética de crecimiento de hongos
se detuvo, las cajas se tuvieron en incubación en fermentaciones líquidas, ya que son en este
días después que las placas de otros medios fue- tipo de fermentaciones en las que se puede
ron retiradas pero en vez de haber crecimiento, el determinar con mejor precisión el agotamien-
medio se deshidrató, es por eso que los tiempos to de un nutriente, o la producción de algún
se detuvieron hasta cuando se sacaron las últi- metabolito secundario de interés. Sin embargo,
mas cajas de los otros agares. Se puede concluir es bueno aclarar que la cinética se debe hacer
que este medio no es una buena opción para el para cada experimento, ya que las condiciones
crecimiento de estos hongos macromicetos, aun- ambientales, especialmente, cambian de un la-
que el medio de cultivo contiene también dex- boratorio a otro, pero podrían ser comparables
trosa, el complemento, que es un concentrado en un momento determinado y los datos se-
enzimático de caseína, no es el adecuado para la rían de gran utilidad e importancia.
producción de micelio, debido a que es un con-
centrado proteico y de origen animal, este es un La cinética de crecimiento estudiada en este
medio que aunque es utilizado para el conteo de trabajo hace pensar que el comportamien-
hongos en el laboratorio, no es el indicado para to de las cepas in vitro es similar en cuanto a
hongos de la pudrición de la madera. los medios de cultivo utilizados. Se hallaron
las ecuaciones de crecimiento que permitieran
El realizar un estudio de la cinética de creci- describir el crecimiento de las diferentes espe-
miento de las especies estudiadas, es impor- cies de hongos. El coeficiente de determinación
tante para el investigador porque se puede (R2) indicó que los datos obtenidos no tienen
entender con mayor profundidad el compor- una gran variación entre sí y que se ajustan en
tamiento de los microorganismos estudiados gran medida a la ecuación propuesta. El hongo
y tener una mejor explicación a un cambio de con una tasa de crecimiento específica menor
las condiciones de crecimiento de las especies. fue P. ostreatus para todos los medios de culti-
El punto de partida para estudiar por ejemplo, vo, mientras que para PDA, P. pulmonarius y L.
el crecimiento de un cierto tipo de microorga- edodes este índice fue similar, para OGY y Sa-

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138 SUÁREZ A./HOLGUIN H.

bouraud se ven diferencias y P. pulmonarius tuvo para ver una infección total del cereal se debió
una tasa mayor para estos medios que L. edodes. esperar más de 6 semanas. La tabla 3, describe
el comportamiento de los diferentes granos de
Evaluación de cereales cereal, en cuanto a la infección del micelio de
los hongos.
El crecimiento del micelio fue medido cua-
litativamente en el tiempo, se observaba la Para la preparación de la semilla es primordial
distribución y abundancia de micelio en los los pasos anteriores a la inoculación de los gra-
granos de cereal. Se determinó el final de la nos. El grano debe estar sumergido en agua
incubación cuando el frasco tenía un color entre 16 y 24 h para que absorba toda el agua
blanco debido al crecimiento abundante del posible y pueda haber una buena infección del
micelio. grano (cuanto más húmedo, más susceptible
a la infección) y además, para que existan las
Según los resultados obtenidos se puede con- condiciones de humedad propias para el desa-
cluir que el trigo es el mejor cereal para la pro- rrollo del hongo. Debe existir la proporción per-
ducción de semilla (spawn) en todos los géne- fecta de carbonato de calcio y el peso en base
ros de hongos. Se dio una rápida y homogénea húmeda de los granos, ya que si se adiciona
infección de los granos. En dos semanas, los más carbonato el pH puede aumentar más de
frascos fueron completamente infectados y el lo recomendable (5,5) (Stamets, 1993) o si no
micelio era denso. La cebada fue el segundo se agrega la cantidad suficiente el pH permitiría
mejor cereal, aunque el crecimiento fue mu- la aparición de bacterias que inhibirían el creci-
cho más lento que para el trigo (3 semanas), se miento del hongo si el proceso de esterilización
dio de manera uniforme en los granos y para no es el adecuado. Es necesario asegurarse que
las tres cepas de hongos. Hubo diferencias en- la temperatura en el centro térmico de los gra-
tre ciertos tipos de cereal, mientras que el trigo nos sea superior a los 121 °C (temperatura de
fue una excelente semilla para la producción de esterilización) ya que se puede dar el caso de
spawn para todas las cepas, el sorgo fue mejor que los granos ubicados en el centro del frasco
para L. edodes, que para las dos cepas de Pleuro- tengan focos de contaminación, en especial de
tus; este resultado concuerda con lo reportado mohos, que compitan con el hongo a producir
por García (2003), quien usó esta misma semi- y sea inhibido. Si se presenta un foco de conta-
lla de cereal para desarrollar su investigación minación visible ya que por lo general este tipo
sobre el crecimiento de L. edodes en diferentes de mohos poseen un color verde, pardo, gris, o
sustratos. El millo y el maíz amarillo no tuvie- negro, el frasco debe ser esterilizado nuevamen-
ron una buena infección por parte del micelio te y el proceso de limpieza y desinfección debe
de los hongos, para que se viera la infección de darse nuevamente, o simplemente los granos
los granos se debió esperar más de 4 semanas y son eliminados.

Tabla 3. Evaluación del crecimiento micelial en granos de cereal.

Trigo Sorgo Cebada Millo Maíz amarillo

P. ostreatus +++ + ++ + +
P. pulmonarius +++ + ++ + +
L. edodes +++ ++ ++ + +
Escala: +++ Alto porcentaje de infección, crecimiento rápido; ++ Porcentaje de infección medio, crecimiento lento; + Poco porcentaje de infección,
crecimiento lento.

REV. COLOMB. CIENC. HORTIC.

 M edios de cultivo para la producción de semilla de setas comestibles 139

En cuanto a la evaluación de los granos de CONCLUSIONES

cereal, aunque no se hizo un análisis cuanti-
tativo, se puede concluir que el mejor grano Los medios de cultivo sintéticos comerciales
es el trigo, seguido por la cebada, el sorgo, son las herramientas primordiales para el es-
el millo y el maíz amarillo. Esto concuerda tudio de microorganismos, sabiendo cuál es el
con Stamets (1993) quien dice que los mejo- mejor de ellos para un tipo de microorganis-
res cereales son el trigo, la cebada y el sorgo. mo, se puede inferir su metabolismo y así, em-
Esto se da por la cantidad de agua que los pezar a realizar variaciones en este medio para
granos pueden absorber y también al con- optimizar aún más el crecimiento del microor-
tenido de almidones de fácil rompimiento, ganismo. En el caso de los hongos de la pudri-
contenido de lignina, celulosa, etc. El mi- ción blanca se pudo concluir que el medio sin-
llo y el maíz son granos muy duros que el tético PDA (papa, dextrosa y agar), fue el que
hongo no puede penetrar. Para que puedan permitió un mayor desarrollo y crecimiento
ser más fáciles de penetrar, los granos debe- rápido del micelio de P. ostreatus, P. pulmonarius
rían tener un menor grado de madurez, pero y L. edodes, esto con el fin de obtener micelio
esto implica que todos los almidones y azú- puro y rápidamente para la preparación de la
cares presentes en el grano no estén en una semilla. En cuanto a la producción de semilla
concentración óptima y entonces el hongo no (spawn), el mejor cereal para su producción fue
se desarrollaría por falta de nutrientes. Si es el trigo, seguido de la cebada, el sorgo, el millo
necesario usar este tipo de cereales se reco- y el maíz amarillo, es necesario realizar estu-
mienda sumergirlos en agua por un periodo dios cuantitativos y de cinética de crecimiento
más largo, para que las paredes del grano se de este tipo de hongos en los cereales para ob-
ablanden más y el hongo pueda penetrarlas. tener datos más precisos.

AGRADECIMIENTOS

Los autores expresan sus agradecimientos al Posgrado en Ciencia y Tecnología de Alimentos de la

Universidad Nacional de Colombia, sede Bogotá y a su director Néstor Algecira, por cofinanciar el
desarrollo de este proyecto.

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