BIOQUIMICA

Laboratorio De Bioquímica

Monica Alejandra Aguilar Ibague

Código: 1097994722

Bac. Rolando Diaz Diaz

Universidad Nacional Abierta Y A Distancia

Escuela De Ciencias De La Salud
Administración En Salud
Octubre 2019
 INTRODUCCION
La bioquímica es la ciencia que estudia los componentes químicos de los seres vivos,
especialmente las proteínas, carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos, además de otras
pequeñas moléculas presentes en las células. La bioquímica se basa en el concepto de que
todo ser vivo contiene carbono y en general las moléculas biológicas están compuestas
principalmente de carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, fósforo y azufre.
De acuerdo con lo establecido en la Guía Integrada de Actividades y el Syllabus del curso
de Bioquímica, este informe de laboratorio, permite visualizar el trabajo realizado, los
logros y conocimientos adquiridos durante el desarrollo de las jornadas del componente
práctico inscrito.
Temáticas que aborda componente práctico Practica 1. Seguridad y normas de laboratorio
Practica 2: Propiedades bioquímicas de los aminoácidos Practica 3. Bioquímicas de las
proteínas Práctica 4: Identificación de carbohidratos Practica 5. Características de los
ácidos grasos
Todas las técnicas, procedimientos y actividades efectuadas, se adelantaron atendiendo las
sugerencias y recomendaciones teóricas y presenciales para el manejo de equipos e
instrumentos de laboratorio. De igual manera, se prestó especial atención a las medidas de
seguridad y los instructivos “paso a paso” que contenía la guía del laboratorio para conocer
el tema de biomoléculas.
 OBJETIVOS
 Leer las guías del laboratorio para entender los procedimientos a realizar.

 Cumplir con las normas de bioseguridad dentro del laboratorio.

 Desarrollar los procedimientos referidos en las guías de laboratorio de Bioquímica.

 Comprender cada uno de los temas referidos por la guía para el correcto desarrollo
del laboratorio
 1. Seguridad y normas de laboratorio Practica
Bioseguridad en el Laboratorio de biología es el conjunto de normas y procedimientos que
debe seguirse, para conservar la salud y seguridad del personal que labora en el laboratorio
y de la comunidad frente a los riesgos de infección para evitar contaminarse y contaminar a
los demás con agentes potencialmente patógenos.
 Utilizar la "bata de Laboratorio" debidamente abotonada y limpia y retirarla antes
de salir del laboratorio.
 Usar guantes para manipular muestras, evitar contaminar el área de trabajo y los
implementos personales (esfero, libros, apuntes); descartarlos cuidadosamente en la
caneca roja.
 Utilizar anteojos de protección
 Utilizar mascarillas de respiración.
 No comer, beber, fumar ni colocar otros objetos en la boca, mientras esté en el
Laboratorio.
 Mantener el Laboratorio limpio y aseado.
 Lavarse las manos luego de manipular cultivos, muestras, animales y, antes de
abandonar el Laboratorio.
 Conocer las reglas del uso y cuidado de todos los equipos.
2. PROPIEDADES BIOQUÍMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS

Los aminoácidos se denominan así por tener un grupo amino (-NH2) y un grupo
carboxilo (-COOH). Es posible agrupar los aminoácidos en clases principales
basadas en las propiedades de sus grupos R, en especial de su polaridad, o
tendencia a interaccionar como el agua a pH biológico (cerca del pH 7.0). La
polaridad de los grupos R varía enormemente desde totalmente apolar o
hidrofóbico (insoluble en agua) hasta altamente polar o hidrofílico (soluble en
agua).

2.1 Reacción de ninhidrina:

El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la
ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es
primario, amarillo para la prolina e hidroxiprolina y café para la asparagina que
tiene un grupo amido en la cadena lateral. Esta reacción también identifica los
grupos alfa-amino libres presentes en péptidos y proteínas. Precauciones la
ninhidrina es toxica. Permite identificar la presencia de proteínas y aminoácidos
libres
Se preparará 4 soluciones en tubos de ensayo, a cada tubo se le agrega 5 gotas de
ninhidrina y se pone al baño maría durante 5 min, para observar los cambios.

a. 1.5ml de glicina : ( positivo ) cambio de color morado es proteína, polipéptido o

aminoácido
b. 1.5 ml de albumina : (positivo) cambio de color es proteína, polipéptido o
aminoácido
c. 1.5 ml de gelatina : (negativo no paso nada) No es proteína ni aminoácido
d. 1.5 ml de Clara de huevo: (positivo )cambio de color es proteína, polipéptido o
aminoácido

ANTES DE LA NINHIDRINA
DESPUES DE LA NINHIDRINA
 2.2 Reacción de biuret

Esta reacción la producen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se
debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los
aminoácidos. El reactivo de Biuret lleva sulfato de Cobre (II) y sosa. El Cu, en un medio
fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptídicos formando un complejo de color
violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración de proteínas
vamos a preparar 3 tubos de ensayo con 1; 1.5ml de glicina 2; 1.5ml de
albumina
3; 1.5ml gelatina 4; clara de huevo Agregue a cada tubo de ensayo agregue 1 ml
de NaOH 2,5N de la solución correspondiente. Agregue 3 gotas de solución de
sulfato cúprico al 1% a cada tubo de ensayo. Agite cada tubo de ensayo. Observar
los cambios.

1.5ml de glicina+ NaOH 2,5N (negativo no hubo cambio) no es proteina

1.5 albumina+ NaOH 2,5N : (positivo ) se puso morado claro es Proteínas y
polipéptidos
1.5ml gelatina+ NaOH 2,5N: ( positiva) se puso morado es insoluble Proteínas y
polipéptidos
1.5ml de huevo+ NaOH 2,5N : ( positiva hubo color pero no se mezclo con la
clara) Proteínas y polipéptidos

Antes del reactivo despues del reactivo

3. Reacción xantoproteica
Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con ácido
nítrico concentrado formando nitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo
cual esta reacción permite reconocer la presencia de Tirosina, Fenilalanina y
Triptófano.

Se preparan 4 tubos de ensayo y se le agrega el reactivo acido nitrico 1ml y se

calienta los tubos al baño maría e identificar y describir cada reacción

a. Albumina; cambio de densidad amarillo es Tirosina, fenilalanina o triptófano

b. Gelatina; positiva amarilla clara Tirosina, fenilalanina o triptófano
c. Clara de huevo; positivo cambio de densidad y de color amarillo es Tirosina,
fenilalanina o triptófano

Antes del ácido nítrico

Después del ácido nítrico

4. Reacción de millón
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de
Mercurio a pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico
de la tirosina y las proteínas que la contienen

Se prepara 3 tubos de ensayo con las sustancias y se le agrega 5 gotas de reactivo

de millón y se calienta al baño maría por 5 min y se identifica los cambios

Gelatina: positivo cambio de color naranja es Tirosina

Albumina: cambio de color blanco y se puso espumoso es Fenilalanina
Huevo : cambio de densidad blanco es Fenilalanina

Si la albumina y el huevo reaccionan igual es por que el huevo es albumina.

Antes del reactivo de millón

Después del reactivo de millón

 5. Reacción de aminoácidos azufrados, grupos SH

Se preparan 3 tubos ensayo con las 3 sustancias(clar de huevo,leche, cisteina) y se le

agrega 2ml de hidróxido sodico al 20%+ 10 gotas de acetato de plomo se pone a calentar al
baño maría por 2 minutos y se describen las reacciones y los cambios.
a. 3 ml de clara de huevo : se evidencia dos sustancias abajo blanco denso y arriba
negro liquido.
b. 3ml de cisteina: no hubo cambios (Otros aminoácidos)
c. 3ml leche: y se dividio en 3 colores cambio d densidad y se puso amarilla, cafecito,
blanco ( es Arginina)
Antes del reactivo

Después del reactivo

6. IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS

Los hidratos de carbono constituyen el grupo de biomoléculas más abundante sobre la

superficie terrestre, representando aproximadamente el 75 % de la materia orgánica
existente. En ocasiones, se denominan también carbohidratos, azúcares, sacáridos o
glúcidos. Todos son términos que hacen referencia a su sabor dulce, o a que poseen la
composición Cn (H2O)n. Estas moléculas usualmente contienen carbono, hidrógeno y
oxígeno en una proporción de 1:2:1. Los carbohidratos se clasifican como
monosacáridos, disacáridos o polisacáridos, dependiendo del tamaño y la complejidad
de la molécula. Los monosacáridos se componen de una sola molécula de azúcar.
Cuando dos monosacáridos se unen se produce un disacárido, y cuando dos o más se
unen se produce un polisacárido.

6.1 PRUEBA DE BENEDICT

Es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el estabilizante (citrato
sódico) utilizados hacen que este test sea más sensible y estable.
vamos a usas 3ml de glucosa+ 3 ml de sacarosa+ 3ml de almidón
vamos a dividir cada sustancia en cada tubito, se agrega 2ml de reactivo de benedict
( el reactivo es de color azul)y se flamea al baño maría por 10 min.
 2ml de sacarosa: no cambio nada: porque no es azúcar reductor
 2ml jugo de cebolla: se puso naranja( es azúcar reductor)
 2ml banano maserado (fructosa): se puso amarillo oscuro+ verde (menos azúcar
reductor)
 2ml leche: naranja claro (es azúcar reductor)
 2ml de agua: no cambio nada (no es azúcar reductor)
 2ml papa: no cambio nada no es azúcar reductor

Antes del baño maría con el reactivo después del baño maria
6.2 reacción de Fehling
Los azúcares reductores, en medio alcalino, son capaces de reducir el ión Cu2+ de color
azul a Cu+ de color rojo. Para ello el grupo carbonilo del azúcar se oxida a grupo carboxilo
vamos a usas 3ml de glucosa+ 3 ml de sacarosa+ 3ml de almidón
vamos a dividir cada sustancia en cada tubito, se agrega 2ml de reactivo de fehling
( 1ml fehling a y1ml Fehling b)y se flamea al baño maría por 10 min
a. 2ml de sacarosa: no cambio nada
b. 2ml cebolla macerada: naranja
c. 2ml banano macerado: naranja
d. 2ml leche: rojo y amarillo
e. 2ml de agua: no cambio nada
f. 2ml Papa: no cambio nada

Antes del baño maría después del baño maria

6.2 REACCIÓN DE MOLISCH
La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reacción de
Molisch, que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato. Se basa en
la acción hidrolizante y deshidratante del ácido sulfúrico sobre los hidratos de carbono. En
dicha reacción el ácido sulfúrico cataliza la hidrólisis de los enlaces glucosídicos de la
muestra y la deshidratación a furfural (en las pentosas) o hidroximetilfurfural (en las
hexosas). Estos furfurales se condensan con el alfa naftol del reactivo de Molisch (reacción
de Molisch) dando un producto coloreado.

vamos a divir cada sustancia en cada tubito, se agrega 2 gotas de reactivo de molish )
despuesd desto se agrea 1ml de acido sulfurico por la pared del tubo
 2ml de sacarosa: negativo . no reacciona
 2ml ponny malta:positivo, se observa sedimento rojo
 2ml banano maserado: positivo, se observa anillo rojo
 2ml cebolla : positivo, se observa sedimento rojo.
 2ml deleche : positivo, se observa anillo rojo
 2ml Papa: positivo se observa anillo rojo
 2ml agua :negativo no reacciona.

Antes del reactivo

Después del reactivo

6.3 REACCIÓN DE LUGOL (YODO)

La prueba de yodo se da como consecuencia de la formación de cadenas de poliyoduro a
partir de la reacción entre el almidón y el yodo presente en el reactivo de lugol.
La amilosa y la amilopectina son componentes del almidón pero la amilosa es de estructura
lineal, con enlaces α (1-4), que forma hélices en donde se juntan las moléculas de yodo
formando un color azul oscuro; mientras que la amilopectina es de estructura ramificada,
con enlaces α (1-4) (1-6), que forma hélices mucho más cortas y las moléculas de yodo son
incapaces de juntarse presentando un color intermedio entre anaranjado o amarillo.
vamos a determinar las sustancia que están compuestas de almidón.
Se preparan los tubos de ensayo y se agrega dos gota de Lugol(yoduro de potasio) si da
color negro significa que contiene almidón
 3ml de sacacorosa: negativo
 3ml cebolla: negativo
 3ml agua: negativo
 3ml glucosa: negativo
 3ml de papa: si contiene almidon
 3ml banano: positivo, contiene almidón
Antes del lugol
Después del Lugol

7. CARACTERÍSTICAS DE LOS ÁCIDOS GRASOS (lípidos)

Los lípidos (del griego lypos, grasa) son biomoléculas orgánicas formadas básicamente por
C, H y O, aunque este último elemento se encuentra en proporciones mucho más bajas que
los dos primeros. Además, pueden contener P, N y S. Constituyen un grupo de sustancias
muy heterogéneas con características químicas diversas, pero con algunas propiedades
físicas comunes, que podrían resumirse en estas dos: _ Son mayoritariamente insolubles en
agua. _ Son solubles en disolventes orgánicos, tales como éter, cloroformo, alcanos (ej:
hexano), benceno, acetona y alcoholes.
7.1 SOLUBILIDAD EN LÍPIDOS (para determinar a que soluciones son solubles los
ácidos grasos}

Vamos a tener dos tubos de ensayo cada uno con 3ml de aceite vegetal

1. Aceite vegetal + 3ml de agua : no es soluble

2. Aceite vegetal + 3ml de hexano: el acido graso es soluble en hexano
Antes de la mezcla después de la mezcla
7.2 SAPONIFICACIÓN
Muchos lípidos, como por ejemplo: los ácidos grasos, reaccionan con bases fuertes, NaOH
o KOH, dando sales sódicas o potásicas que reciben el nombre de jabones. Esta reacción se
denomina de saponificación. Son saponificables los ácidos grasos o los lípidos que poseen
ácidos grasos en su estructura.
Vamos a tener dos tubos de ensayo cada uno con 3ml de aceite vegetal y se deja 10 min al
baño maría.

a. Aceite vegetal + 3ml de NaOH : se forma capa de jabón , los ácidos grasos al actuar
con los NaOH producen jabón.
b. Aceite vegetal + 3ml de KOH: se forma capa de jabón , los ácidos grasos al actuar
con los KOH producen jabón.
c. Aceite vegetal + 3ml de agua: no es soluble
Antes del baño maría después del baño maría

7.3 REACCIÓN CON EL SUDÁN III

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas,
porque es insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo,
cuando se disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.
Vamos a tener dos tubos de ensayo cada uno con 3ml de aceite vegetal

3. Aceite vegetal + 8 gotas de sudan: se disuelve y se mezclan queda naranja

4. Aceite vegetal + 8 gotas de tinta roja : no se disulve

Antes de la mezcla después de la mezcla

 CONCLUSIONES

Para el desarrollo de cualquier actividad en el laboratorio, es fundamental contar con

información previa sobre la manipulación de equipos, reactivos químicos y los
procedimientos de cada tarea encomendada, así como la aplicación y seguimiento riguroso
de las normas de seguridad establecidas

La dinámica y reacciones químicas propias de los ácidos nucleicos, glúcidos, lípidos y

aminoácidos constituyen etapas fundamentales para el surgimiento, permanencia y
florecimiento de la vida en nuestro planeta.
El catabolismo y la biosíntesis de moléculas, son procesos metabólicos que se rigen por una
serie de pautas o parámetros universales y que pueden ser objeto de comprobación y
estudio en el laboratorio.

LISTA DE REFERENCIAS

Brandan, N. C. (2014). METABOLISMO DE  COMPUESTOS NITROGENADOS. Universidad

Nacional del Nordeste  Facultad de medicina cátedra de bioquímica. Recuperado de
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/201103/2015-
I_BIOQUIMICA_201103/MATERIAL_BIBLIOGRAFICO_SYLLABUS_/Brandan_nora_Metabol
ismo_de_los_compuestos_nitrogenados.pdf

TORRES, G. M. (2013). In UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA (Ed.),

BIOQUIMICA  201103 [Bioquímica] (cuarta ed.). Curso virtual bioquímica: UNAD.
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/201103/2015-
II_BIOQUIMICA_201103/MATERIAL_BIBLIOGRAFICO_SYLLABUS_/201103_Modulo_bioq
uimica_II-09_final_copia.pdf

https://books.google.com.co/books/about/Qu%C3%ADmica.html?id=_FJ8ljXZD7IC&redir_esc=y
http://www.deortegas.com/aceite-de-oliva/aceite-y-salud/

http://clickmica.fundaciondescubre.es/conoce/100-preguntas-100-respuestas/7-cotidiana/158-ique-
es-el-jabon
http://biologia.laguia2000.com/bioquimica/como-se-elabora-el-jabon
http://www.alimentacionynutricion.org/es/index.php?mod=content_detail&id=49