Cuestionario Bioseparaciones (4to)

Bioseparaciones (Tejeda)
1.- ¿Cómo suele llamarse a las operaciones que comprenden los procesos
biotecnológicos?
Procesos "downstream"  operaciones previas y procesos "upstream" 

operaciones posteriores
2.- Menciona 3 operaciones “previas” a la fermentación
Preparación del medio, esterilización y funcionamiento del biorreactor.
3.-¿Qué involucran los procesos de bioseparación?
Involucran la recuperación y purificación de productos provenientes del

biorreactor. Las bioseparaciones comprenden todos los tratamientos que requiere
el caldo fermentado de cultivo para obtener un producto biotecnológico en las
condiciones de pureza y actividad requeridas.
4.- Según Kalk 1986, las bioseparaciones pueden representar hasta qué
porcentaje del costo total de producción, sin considerar las materias primas
60 % del costo total de producción sin considerar las materias primas.
5.- ¿Qué tipo de relación proporcional existe entre el precio de venta de un

producto biotecnológico y la concentración de éste en el caldo del
biorreactor?
Debido a que el costo total de producción sin considerar las materias primas es del
60%, existe una relación inversa entre el precio de venta de un producto
biotecnológico y la concentración de este en el caldo fermentado.
6.- Actualmente, se consideran de manera general tres generaciones de
procesos biotecnológicos. Defínalos, caracterizándolos, ejemplifique.
☺ Primera generación: Comprende el conjunto de procesos desarrollados

mediante cultivos de organismos no recombinantes, cuyos productos se
obtienen en forma activa tanto si son intracelulares o si son secretados al
medio de cultivo. Ejemplos: etanol, enzimas, ácido cítrico y antiobióticos. Se
presentan en concentraciones altas al inicio de la etapa de separación y no
requieren de una extremada pureza para su venta.
☺ Segunda generación: Se caracterizan por encontrarse en bajas
concentraciones dentro de la célula, son de elevado peso molecular, tienen
propiedades similares a los contaminantes y requieren un alto grado de
pureza. Ejemplos: insulina humana, hormona del crecimiento y alfa
interferón, entre otros. Son producidos intracelularmente utilizando células
recombinantes de E. coli.
☺ Tercera generación: Se puede caracterizar por procesos mediante los
cuales se obtienen productos extracelulares en células recombinantes, la
mayoría de las cuales con eucarióticas. En estos sistemas se ha observado
la capacidad no sólo de producir exógenamente el producto deseado, sino
que éste se obtiene en forma activa. Ejemplos: factor VIII de la sangre y
trombalítico, plasminogeno, tisular. Debido a su empleo con fines
terapéuticos, estos productos deben ser obtenidos con un alto grado de
pureza.
7.- Siguiendo el ejemplo de “estimación de la pureza y rendimiento de una

enzima en un proceso de purificación”, desarrolle los problemas 1.2 y 1.3
1.2.- Un proceso para la recuperacion de hidroxibutirato deshidrogenasa
conta de 3 pasos: un rompimiento de las celulas para liberar la enzima
intracelular, seguido de dos pasos de adsorcion/ desorcion por afinidad.
En la siguiente tabla se presentan los datos obtenidos de actividad de

enzimas y proteina total al final de cada paso.
Calcular la actividad específicam el índice de purificación y el % de

recuperación.
Paso Actividad Proteína Fracción Factor o Actividad

total total de la índice de específica
(unidades) (mg) enzima purificación
Rompimiento 6,860 76,200 0.090 1 1.181 x 10-
6
Adsorción/de 6,800 2,200 3.090 34.333 1.4045 x

sorción (1) 10-3
Adsorción/de 5,380 267 20.149 223.877 0.075
sorción (2)
Paso Recuperación-rendimiento
% por etapa % global
Rompimiento 100 100
Adsorción/desorción (1) 99 99
Adsorción/desorción (2) 79.11 78.92
Calculos:
Formulas utilizadas:
c enzima total actual

rendimiento =
paso enzima total anterior ( paso anterior )
enzima total actual

rendimiento global=
enzima total inicial
Nota: Suponiendo que el % de rendimiento es = al % de recuperacion.
enzima total
Fraccion enzima=
proteinatotal
Fraccion de cada paso

Factor o índice de purificacion=
Fraccion inicial
Unidaddes totalesde la fracción i
Actitud específica=
Total de proteinas en la fracción i
Con la formula anterior nos damos cuenta que es exactamente igual a la formula
de “fraccion enzima” (a como se asignaron los valores) se hiso un cambio en la
formula quedando de la siguiente manera:
Fraccion de enzima
Actitud específica=
Proteína total
NOTA: EL EJERCICIO FUE RESUELTO CON CONJETURAS A LO LEIDO Y

APRENDIDO, SE ANOTA CADA UNO DE LOS PASOS, FORMULAS, Y
SUPOSICIONES.
1.3.- Completar la siguiente tabla relacionada con la purificación de una

enzima
Cons. Prot. Act. Act. Act. Rend.

Vol. Frac.
Material Prot. Total Enzim. Total Esp. Tota
ml Purif.
Mg/ml mg U/ml U U/mg Etapa l
Extract
500 14 7
o
1er.
50 10 60
paso
A. Tejeda. Bioseparaciones

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Bioseparaciones (Tejeda)

Procesos "downstream"  operaciones previas y procesos "upstream" 

2.- Menciona 3 operaciones “previas” a la fermentación

Preparación del medio, esterilización y funcionamiento del biorreactor.

3.-¿Qué involucran los procesos de bioseparación?

Involucran la recuperación y purificación de productos provenientes del

60 % del costo total de producción sin considerar las materias primas.

5.- ¿Qué tipo de relación proporcional existe entre el precio de venta de un

☺ Primera generación: Comprende el conjunto de procesos desarrollados

7.- Siguiendo el ejemplo de “estimación de la pureza y rendimiento de una

En la siguiente tabla se presentan los datos obtenidos de actividad de

Calcular la actividad específicam el índice de purificación y el % de

Paso Actividad Proteína Fracción Factor o Actividad

Adsorción/de 6,800 2,200 3.090 34.333 1.4045 x

c enzima total actual

enzima total actual

Fraccion de cada paso

NOTA: EL EJERCICIO FUE RESUELTO CON CONJETURAS A LO LEIDO Y

1.3.- Completar la siguiente tabla relacionada con la purificación de una

Cons. Prot. Act. Act. Act. Rend.

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