PRACTICA 01 - Potencial en Reposo y Potencial de Accion
PRACTICA 01 - Potencial en Reposo y Potencial de Accion
PRACTICA 01 - Potencial en Reposo y Potencial de Accion
PRÁCTICA 1
POTENCIAL DE REPOSO DE MEMBRANA Y POTENCIAL DE ACCIÓN
1. OBJETIVOS
Comprender los conceptos de potencial eléctrico de membrana en reposo y potencial de acción .
Determinar los valores de potencial de reposo de membrana calculados mediante la ecuación de
Goldman, para tres tipos de célula.
Identificar los diferentes parámetros involucrados en el potencial de acción y describir la
secuencia de los eventos que generan un potencial de acción.
2. CONOCIMIENTOS PREVIOS
Gradiente de concentración, Membrana celular, Canales iónicos, Ecuación de Goldman.
3.3 PRECAUCIONES:
Dado que la práctica incluye aplicación de una corriente eléctrica para muscular del sujeto en quien se
hace el registro, las personas con marcapasos cardiacos o con alguna disfunción neurológica o cardiaca
no deben ser voluntarias. Si el voluntario experimenta alguna molestia durante el registro, suspenda el
procedimiento y avise al profesor
4. INTRODUCCIÓN TEÓRICA
Potencial de reposo
El potencial eléctrico de membrana en reposo es el potencial que se establece como resultado de la
difusión de un ion a través de una membrana semipermeable a dicho ion, y con diferente
concentración en los lados opuestos de dicha membrana (Figura 1A). El potencial de membrana de
una célula real que no está produciendo impulsos se conoce como el potencial de membrana en
reposo. Si la membrana plasmática solo fuera permeable al Na+, su potencial de reposo sería igual al
[]
ENa de +66 mV como lo predice la ecuación de Nerst ( ). Si solo fuera permeable al K+, su potencial de membrana en reposo sería igual al E K de −90 mV realizando la medición del
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interior celular respecto al exterior (Figura 1B). Una célula en reposo real es más permeable al K+
que al Na+, pero no es por completo impermeable a este último. Como resultado, su potencial de
membrana en reposo está cerca al E K pero es un poco menos negativo debido a la leve difusión de
Na+ hacia adentro. Dado que el potencial de membrana en reposo es menos negativo que el E K,
también habrá una leve difusión hacia afuera del K+. Estos escapes se contrarrestan por la actividad
constante de las bombas de Na+/K+ elementos importantes en el mantenimiento de este potencial
de membrana en reposo. El valor real del potencial de membrana en reposo depende de dos
factores:
1. La proporción de las concentraciones (Xo/Xi) de cada ion en los dos lados de la membrana
plasmática.
2. La permeabilidad específica de la membrana a cada ion diferente.
Muchos iones —entre ellos K+, Na+, Ca2+ y Cl—contribuyen al potencial de membrana en reposo.
Sus contribuciones individuales están determinadas por las diferencias de sus concentraciones a
través de la membrana (figura 1), y por sus permeabilidades de membrana. Esto tiene dos
implicaciones importantes:
A) B)
Figura 1. Potencial de membrana en reposo. A) modelo de membrana con los canales y los iones. B) Medicion
del potencial de membrana en reposo
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Potencial de acción
El potencial de acción es in impulso eléctrico transitorio y regenerativo en el cual el potencial de
membrana Vm rápidamente alcanza un pico que es aproximadamente 100 mV más positivo que el
voltaje normal y negativo del potencial de membrana en reposo. Éste puede propagarse por largas
distancias a través de las fibras nerviosas o musculares.
El potencial de acción es una respuesta de todo o nada que consiste en una rápida despolarización
seguida por una repolarización lenta. Para que se produzca esta respuesta, se debe aplicar un
estímulo que dependiendo de su intensidad o periodo, después de un periodo de latencia, produce un
aumento del potencial de membrana que deba superar un valor umbral. Superado el valor umbral, se
produce un aumento en la permeabilidad al Na+ produciendo la fase de despolarización. Cerca al
valor de potencial de Nerst de equilibrio de sodio, en el cual se alcanza el pico, esta permeabilidad
decae rápidamente, seguida por un aumento en la permeabilidad del K + iniciando la fase de
repolarización. Cuando el voltaje de membrana disminuye por debajo del potencial de membrana en
reposo, se produce otra fase llamada de hiperpolarización en el que la permeabilidad al Na+ es cero
y la permeabilidad al K+ aun está disminuyendo (figura 2).
Figura 2. Fases del potencial de acción con los periodos refractarios. En la imagen derecha se observa las
permeabilidades al sodio y potasio durante este evento
Desde que se inicia la despolarización hasta que se alcanza de nuevo el potencial de membrana en
reposo, se presenta el periodo refractario que se divide en dos: periodo refractario absoluto en el cual
es imposible producir un segundo potencial de acción y comprende desde que se produce la
despolarización hasta que en la repolarización se está cerca al potencial de membrana en reposo; el
periodo refractario relativo comprende básicamente la fase de hiperpolarizacion en el cual es posible
producir un potencial de acción pero con un estímulo de mayor intensidad o mayor (figura 2).
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5. MATERIALES Y EQUIPOS
6. PROCEDIMIENTO
La presente práctica se realizará en dos partes.
1. La primera consistirá en trabajo con los PowerLab disponibles, por lo que se realizará práctica
en cada una de las estaciones dispuestas para esto. Para esto formarán 4 grupos.
2. La segunda parte será simulada en el computador y se realizará en la sala de computo de la
facultad. Pueden instalar y/o ejecutar los programas en sus computadoras portátiles.
PARTE 1
Estimulación nervio cubital (potencial de acción compuesto produciendo
contracción muscular)
EMG evocado
En la ventana inicial del LabTutor seleccione la actividad “Electromiografía (EMG)” y seleccione el
ejercicio 3 “EMG provocado”. Conecte el electrodo de estimulación en el módulo “Isolated
Stimulator” del PowerLab. Con el estimulador apagado, poner los electrodos de estimulación sobre
el nervio cubital y sujetar con una cinta ancha y conecte los electrodos de registro como se
muestra en la figura 4.
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Una vez ubicado el sitio, se busca el valor de corriente de estímulo mínimo que no produzca
respuesta. Posteriormente aumente el estímulo en pasos de 1 mA hasta un máximo de 20 mA.
Escriba los datos obtenidos en la tabla 1.
0 11
1 12
2 13
3 14
4 15
5 16
6 17
7 18
8 19
9 20
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Realice el grafico de Amplitud del EMG respecto al estímulo (mA) aplicado. (Recuerde que el valor
medido de EMG sería una medida indirecta del potencial de acción compuesto generado.)
¿Cuál es el valor de estímulo mínimo en el que se alcanza el 90% de la máxima respuesta en el
EMG? Si aumento el valor del estímulo un más, que cree que sucede en la respuesta? Explique.
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Realice la medición de tiempos de latencias, o sea el tiempo tomado desde la aplicación del
estímulo hasta el inicio de la respuesta y regístrelos en la tabla 2.
Mida la distancia entre las dos posiciones utilizadas para colocar los electrodos y regístrelos en
la tabla 2. Calcule la velocidad de conducción usando la siguiente ecuación
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PARTE 2
Simulación del potencial de membrana en reposo en diferentes células
Entre a la página http://www.nernstgoldman.physiology.arizona.edu/ y ejecute la aplicación
1. Calcular el potencial de reposo para tres tipos de células corporales en condiciones normales de
concentración intra y extracelular normal de Na+, K+ y Cl- para personas con temperatura normal
(37°C), en condición de fiebre (40°C) y en hipotermia (35°C) (tabla 3). Tenga en cuenta la siguiente
formula.
[ ] [ ] [ ]
[ ] [ ] [ ]
Tipo de célula ion intra Extra P E (T=normal) E (T=40 °C) E (T=35 °C)
Son los potenciales de membrana en reposo igual para las células anteriores? Por qué sucede esto?
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Para cada una de las células, cual es el efecto de la temperatura sobre el potencial de membrana
en reposo? A mayor temperatura que sucede? A menor temperatura que sucede?
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1. ¿Cuáles son los valores de concentración intra y extraceluar para Na + y K+ antes del potencial
de acción? ¿Cuáles son los valores de los mismos parámetros cuando el voltaje de membrana se
encuentra en el punto más alto de la despolarización? ¿Cuáles son los valores de dichas
concentraciones después de que sucedió la despolarización y la repolarizacion (cuando en la
repolarización se alcanza de nuevo de forma inmediata el potencial de membrana en reposo)?.
¿Son significativos estos cambios en las concentraciones de estos iones a lado y lado de la
membrana? Justifique su respuesta. Compare contra los valores de hipernatremia, hiponatremia,
hiperpotasemia o hipopotasemia de los ejercicios anteriores.
2. Para la producción del potencial de acción en un axón, cual canal se activa primero, cual
segundo y porque? Por cuales son los estados por los que pasa los canales de Sodio y de Potasio
dependiente de voltaje?
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Polaridad Polaridad
membrana (signo membrana (signo Valor del potencial Proteína o canal
en parte en parte
de membrana implicada
intracelular de la extracelular de la
membrana) membrana)
Reposo inicial
Despolarización
repolarización
hiperpolarización
Reposo final
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4. ¿Qué sucede con las permeabilidades de los iones cuando la membrana está en reposo,
cuando se está produciendo la fase de despolarización, la repolarización, la hiperpolarización del
potencial de acción? En qué fase se encuentra cada uno de los canales implicados?
Reposo inicial
Despolarización
repolarización
hiperpolarización
Reposo final
1. UMBRAL DE VOLTAJE: Varíe el valor del pulso de excitación “PULSE 1” desde 1 uA hasta 5
uA, dejando fijos los parámetros restantes ¿Qué sucede en estas condiciones? ¿Cuál es el Voltaje de
membrana en cada valor del estímulo?
1 mA
2 mA
3 mA
4 mA
5 mA
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Duración 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8
PULSE 1 ms ms ms ms ms ms ms ms ms
(1mA)
Voltaje de
membrana
¿Se produce
potencial de
acción?
Tiempo de
latencia
PULSE 1 (1 uA): Duración del estímulo que produce el potencial de acción es de _____________
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Realice el mismo procedimiento pero variando “Amplitude” (la amplitud del estímulo) para PULSE 1
a 2, 3, 4 uA y responda cual es la duración del estímulo para la cual se produce el potencial de acción
Duración 0,2 0,4 ms 0,6 ms 0,8 ms 1,0 ms 1,2 ms 1,4 ms 1,6 ms 1,8 ms
PULSE 1 (2mA) ms
Voltaje de
membrana
¿Se produce
potencial de
acción?
Tiempo de
latencia
PULSE 1 (2 uA): Duración del estímulo que produce el potencial de acción es de _____________
Duración 0,2 0,4 ms 0,6 ms 0,8 ms 1,0 ms 1,2 ms 1,4 ms 1,6 ms 1,8 ms
PULSE 1 (3mA) ms
Voltaje de
membrana
¿Se produce
potencial de
acción?
Tiempo de
latencia
PULSE 1 (3 uA): Duración del estímulo que produce el potencial de acción es de _____________
Duración 0,2 0,4 ms 0,6 ms 0,8 ms 1,0 ms 1,2 ms 1,4 ms 1,6 ms 1,8 ms
PULSE 1 (4mA) ms
Voltaje de
membrana
¿Se produce
potencial de
acción?
Tiempo de
latencia
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PULSE 1 (4 uA): Duración del estímulo que produce el potencial de acción es de _____________
Duración
PULSE 2
(Separacion 8 ms 7 ms 6 ms 5 ms 4 ms 3 ms 2 ms 1 ms 0 ms entre Pulse1 y
Pulse3)
Voltaje de
membrana
¿Se produce
potencial de
acción?
Tiempo de
latencia
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Duración
PULSE 2 0,25 0,5 1
(Separacion 2 ms 3 ms 4 ms 5 ms 6 ms 7 ms 8 ms
ms ms ms
entre Pulse1 y
Pulse3)
Voltaje de
membrana
¿Se produce
potencial de
acción?
Tiempo de
latencia
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Duración
PULSE 2
(Separación 1 ms 2 ms 3 ms 4 ms 5 ms 6 ms 7 ms 8 ms entre Pulse1
y Pulse3)
Voltaje de
membrana
¿Se produce
potencial de
acción?
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Tiempo de
latencia
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7. PREGUNTAS ANEXAS
8. EVALUACIÓN
Se entrega un informe escrito tipo artículo científico con los resultados y su discusión, además de
las respuestas a las preguntas planteadas.
9. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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ANEXO
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