Reporte Microscopio Óptico y Estructura Celular

Universidad Nacional Autónoma de México
Facultad de Estudios Superiores - Zaragoza
Laboratorio de Bioquímica Celular y de los Tejidos I.
“Microscopio óptico y estructura celular”
Por: Bautista Matínez Andrea N.
Grupo: 1453
Objetivos.
Observar las principales diferencias entre células eucariotas y procariotas.
Utilizar el método de tinción celular para poder observar mejor las bacterias.
Describir la estructura de la célula y sus organelos.
Desarrollo.
1.- Elodea.
Es un género de planta acuática.
Su célula, corresponde a la célula eucariota vegetal.
Observar al microscopio con los objetivos 10X y 40X.
Identificar las estructuras: pared celular, membrana plasmática,
cloroplastos.
No se utiliza colorante.
2.- Levadura.
Célula del tipo eucariota.
Realizar la observación al microscopio con objetivos 10X y 40X.
Usar colorante: azul de metileno.
3.- Hongos filamentosos.

Observación al microscopio con los objetivos 10X y 40X.
4.- Protozoarios (Paramecium ó Vorticella)

Observar la muestra al microscopio, objetivos 10X y 40X.
No se utiliza colorante.
5.- Células epiteliales.
Observar la muestra al microscopio objetivos 10X y 40X.
Realización de un frotis bacteriano.
Lavar muy bien los portaobjetos, secar con papel absorbente y rotularlos. El rótulo debe señalar el
contenido de la preparación, encender el mechero y esterilizar el asa de inoculación en la llama hasta rojo
vivo, posteriormente dejar enfriar el asa. Tomar el tubo del cultivo bacteriano, retirar el tapón y
rápidamente pasar la boca del tubo cerca de la llama del mechero (flamear); se introduce el asa de
inoculación dentro del tubo que contiene el cultivo bacteriano y tomar la muestra.
Si el cultivo está en medio líquido, colocar la muestra tomada con el asa en el centro del portaobjetos y
extenderla con cuidado en un círculo de aproximadamente 2 cm de diámetro, esterilizar de nuevo el asa
de inoculación, permitir el secado del frotis al aire. Repetir tres veces.
Si el cultivo está en medio sólido, se debe colocar previamente en el portaobjetos una gota de agua
destilada. Esto se hace para mezclar una pequeña muestra del cultivo tomada con el asa de inoculación,
según las indicaciones de los pasos 2 a 5 (condiciones de asepsia).
¿Cuál es el fundamento de la tinción de Gram y para qué sirve cada uno de los colorantes y
reactivos que se utilizan?
Se basa en las características de la pared celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades
determinadas a cada microorganismo.
1.- Cristal violeta: Tiene afinidad por el peptidoglicano. (1 min.)
2.- Lugol (I₂/KI): El ingrediente activo es el I₂, el KI sólo

hace soluble al I₂ en agua. El I₂ entra a las células y forma un
complejo insoluble en agua con el cristal violeta, saturando los
espacios del peptidoglicano de la pared bacteriana. (1 min.)
3.- Alcohol-acetona: Deshidrata la pared bacteriana y cierra

los poros de la misma y destruye la membrana externa de las
bacterias Gram negativas, debido a que es soluble en solventes
orgánicos. (20 seg.)
4.- Safranina: Colorante de contraste, tiñe a las células que

no pudieron retener el complejo cristal violeta-yodo. (1 min.)
Bacteria Imagen Morfologia Aumentos Resultado

reportados Tinción
(+/-) color
Bacillus Forma de barra con bordes Positiva.

subtilis redondeados. Violeta.
Miden aproximadamente 1 micra de
ancho por 2- 3 micras de largo. Se
encuentran de forma individual o
formando pequeñas cadenas. La
célula bacteriana presenta una pared
celular gruesa, constituida por un
peptidoglicano, conocido como
mureína.
En lo referente a su genoma, la
bacteria posee un único cromosoma
circular, en el que están contenidos
4100 genes que codifican la expresión
de ciertas proteínas.
Escherichia -Bacilo corto, no porulado. -Móviles, Negativo.
coli se mueve. por flagelos peritricos.
-No forma esporas.
-Catalasa positivo.
-Oxidasa negativo.
-Miden 0.5 µ de ancho por 3 µ de
largo.
Micrococcus Es una bacteria que tiene forma Positiva.

luteus esférica, con un diámetro Violeta.
aproximado de 0,5 – 3,5 micras.
Generalmente se observa que las
bacterias se agrupan en tétradas
(grupos de 4). En su superficie no
presentan ni cilios ni flagelos.
Las colonias que se observan en los

cultivos son circulares, lisas y
convexas. Pueden tener una
superficie reluciente u opaca. Así
mismo, manifiestan una coloración
amarilla o amarillenta verdosa.
Proteus Se caracterizan por la presencia de Negativa.

vulgaris una cubierta compuesta por dos
membranas lipídicas entre las cuales
está una delgada red de
peptidoglucano.
La membrana externa de estas
bacterias contiene una bicapa lipídica
rica en lipoproteínas, polisacáridos y
lipopolisacáridos característicos.
Están recubiertas por fimbrias que
les permiten adherirse a los tejidos
del hospedador.
¿Qué es un colorante de tipo Romanowsky?
Son mezclas que constan de un colorante ácido (eosina) y de colorantes básicos (tiacinas).
Recordar que:
Colorantes ácidos: tienen una especial afinidad por las estructuras alcalinas de las células.
Colorantes básicos: tienen una especial afinidad por las estructuras ácidas de las células.
¿Qué estructuras celulares se tiñen con el azul de metileno?
Estructuras basófilas: son aquellas que fijan colorantes de naturaleza alcalina, adquieren un color
azulado. Tiñen el núcleo de un color y el citoplasma de otro. Si tiñen de lila o púrpura con colorantes de
tipo azul, se llaman azurófilas.
¿Cómo se diferencian los distintos tipos de células sanguíneas en un frotis sanguíneo?
Las células de la sangre que podemos distinguir en un frotis son los eritrocitos (glóbulos rojos), los
leucocitos (glóbulos blancos) y los trombocitos (plaquetas).
Se examina el tamaño, la forma y el número de los diferentes tipos de células de la sangre, entre ellas:
● Glóbulos rojos: Transportan oxígeno de los pulmones al resto del cuerpo.

● Glóbulos blancos: Combaten las infecciones.
● Plaquetas: Ayudan a que la sangre se coagule.
¿Por qué es importante realizar una buena técnica de frotis sanguíneo evitando errores como
los siguientes?
Es importante realizar una buena técnica de frotis sanguíneo ya que

como se observa en los frotis C y D la muestra va a ser insuficiente al
observar en el microscopio en el momento que estemos buscando las
células al mover los ejes de x y y de la platina. Así como en el frotis B se
va a observar que el barrido está mal hecho y por lo tanto en las partes
“cortadas” no se va a observar nada en el microscopio y en las partes
más oscuras las células sanguíneas van a estar encimadas y va a ser
difícil realizar un conteo de células.
En el barrido A, a pesar de observarse un buen barrido al inicio se comete el error al final de dejarlo
totalmente irregular lo cual también va a influir al momento de observar las células en el microscopio.
Los bordes irregulares no nos van a arrojar buenos resultados.
Es importante no poner de más la muestra en el portaobjetos, así como realizar perfectamente el barrido
para poder observar las células sin que estén encimadas o muy acumuladas en alguna zona en específica.
Como resultado de la Tinción de Giemsa solo se tiñeron los núcleos de las células, ¿que
argumento podrías dar para explicar esto?
Al ser una tinción de tipo Romanowsky, entonces su fundamento se basa en la diferencia de contrastes de
la utilización de colorantes ácidos y básicos, es por eso que se colorea diferentes partes de la célula.
¿Qué tipo de patologías pueden referirse a un análisis de frotis sanguíneo? ¿Por qué es
importante conocer los valores normales de leucocitos en sangre?
Si los resultados de los glóbulos rojos no son normales, esto podría indicar: Anemia, anemia falciforme.
Anemia hemolítica: Tipo de anemia en el que los glóbulos rojos son destruidos antes de poder
reemplazarse. Esto hace que el cuerpo se quede sin suficientes glóbulos rojos sanos
Talasemia, enfermedades de la médula ósea
Si los resultados de los glóbulos blancos no son normales, esto podría indicar: Infección, alergias,
leucemia.
Si los resultados de las plaquetas no son normales, esto podría indicar trombocitopenia, un problema
médico en el que la sangre tiene un número anormalmente bajo de plaquetas.
Conclusiones.
Existen distintos tipos de células, cada una con características y funciones diferentes, y gracias a
métodos de tinción e instrumentos como el microscopio óptico podemos observarlas de una
manera más sencilla, así es como vemos sus características, tales como su estructura, forma o
color, y de acuerdo a ello poder clasificarlas en subgrupos dependiendo de su función. Aunque
muchas de estas resultan de gran peligro para los seres vivos, también hay otras que nos ayudan
con nuestra vida diaria. Además de poder observarlas y clasificarlas, se pueden estudiar más a
fondo ya que al igual que nosotros las células van cambiando y evolucionando.
Bibliografía.
1. Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Morgan, D., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P. (2015). Molecular
Biology of the Cell (6th ed.). New York: Garland Science.
2. Aguilar Santelises L, García del Valle A, Corona Ortega M. Manual de Prácticas de Bioquímica
Celular y de los Tejidos I [Internet]. 2017 [citado el 25 September 2020]. Disponible en:
https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/Licenciaturas/qfb/manuales/5Manual_
Bioquimica_Celular_Tejidos1.pdf
3. Bacillus subtilis. Obtenido de microbewiki.kenyon.edu.
4. Cappucino, J.G. and Welch, C.T. (2017). Microbiology: A Laboratory Manual. Pearson.
5. Myrvik, Q., Pearsall, N., & Weiser, R. (1977). Bacteriología y Micología Médicas (1era ed.). Mexico
D.F.: Interamericana.
6. Realpe, M., Hernández, C. y Agudelo C. Especies del género Bacillus: morfología macroscópica y
microscópica. Recuperado de: revistabiomedica.org

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Describir la estructura de la célula y sus organelos.

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4.- Protozoarios (Paramecium ó Vorticella)

Realización de un frotis bacteriano.

2.- Lugol (I₂/KI): El ingrediente activo es el I₂, el KI sólo

3.- Alcohol-acetona: Deshidrata la pared bacteriana y cierra

4.- Safranina: Colorante de contraste, tiñe a las células que

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Bacillus Forma de barra con bordes Positiva.

Micrococcus Es una bacteria que tiene forma Positiva.

Las colonias que se observan en los

Proteus Se caracterizan por la presencia de Negativa.

¿Qué estructuras celulares se tiñen con el azul de metileno?

¿Cómo se diferencian los distintos tipos de células sanguíneas en un frotis sanguíneo?

● Glóbulos rojos: Transportan oxígeno de los pulmones al resto del cuerpo.

Es importante realizar una buena técnica de frotis sanguíneo ya que

Talasemia, enfermedades de la médula ósea

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