Contaminacion Del Agua

FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL Y SISTEMAS
UNIVERSIDAD NACIONAL
ESCUELA PROFESIONAL FEDERICO
DE INGENIERIA
AGROINDUSTRIAL
VILLAREAL
MICROBIOLOGÍA APLICADA
Practica N° 2
Determinación de Coliformes totales y E. Coli de aguas
CICLO: 5
SECCION: B
TURNO: Mañana
DOCENTE: Ing. Angélica Miranda Jara
INTEGRANTES:
CODIGO NOMBRES Y APELLIDOS %PARTICIPACION
2018023081 Gutarra Ramos Yeraldin Xianela 25%
2017002098 Cinthya Lissette Asmat Tarazona 25%
2018027024 Jacobi Albertis Rosario Brigith 25%
2018010806 Liñan Bermúdez Samuel 25%
2019 - I
Cálculos y resultados
Experiencia 1
1 Tome unos 9 tubos y colocar la tapa pero sin dejarlo muy sellado y envuélvalos en papel
Kraft y colocar pabilo con la finalidad de asegurar el papel kraft con el tubo de ensayo y
Colocar un trozo de cinta indicadora de esterilidad, luego se realizara esa acción con los
demás tubos (La cinta indicadora contiene esporas de Bacillus stearothermophilus en sus
canales diagonales los cuales tienen un indicador de color que al momento de la
esterilización satisfactoria vira a negro)
2-preparar tubos: Tomar 9 tubos de ensaye y dentro de cada uno colocar un

tubo Durham.
3-Preparar caldo lactosado (para coliformes totales)
a) sacar la cuenta de cuanta solución ocuparemos
b) utilizar la muestra del agua del caño y echarlo en el matraz
d) Agitar hasta que quede todo disuelto
e) echar solución a los tubos: echar la solución de calcio lactosado en los tubos
ensayo que tienen los tubos Durham adentro hasta que los cubra a aproximadamente
1 cm arriba de los tubos Durham y sacar el aire que quede dentro de estos
f) esterilizar por 15 minutos
4-sembrar
a) tomar los 9 tubos anteriores y a 3 tubos de ensayo con una pipeta agregar 0.1ml
de la muestra de agua a cada uno
b) a Otros 3 con Otra pipeta agrégales 1 ml de la muestra de agua c/u
c) a los últimos 3 agregar 10 ml
5-lncubar por 24-48 hrs a 36•C
6- Checar positivos viendo la producción de gas (burbujitas en tubos Durham) (hubo

producción de gas en todos los tubos de ensayo)
7- resembrar en EC (para coliformes fecales) repetir el Paso l y 2 pero esta vez
no serán 9 tubas, ahora serán Ios que hayan salido positivos y además en vez de ser
Caldo lactosado ahora será EC.
8-poner muestra de agua
a) tomar los tubos con EC y ponerles una aza a cada uno

9- Re incubar los tubos de ensayo a 44'C de 24- 48 horas.
10-checar positivos viendo la producción de gas

11-utilizar la tabla para saber los coliformes.
Los 3 primeros tubos: 2 te salieron positivo
Los 2 segundos tubos: sólo 1 salió positivo

12_ Luego Transcurrido este tiempo apague el autoclave y espere a que la aguja del
manómetro llegue a cero y deje que el material se encuentre frio para que lo lleve al área de
lavado donde le debe retirar los residuos de agar y material sólido para desechar los cuales
se recogen en bolsa plástica de color rojo
ANEXOS:
INSTRUMENTOS E INSUMOS USADOS EN LA SESIÓN DEL

LABORATORIO
Probeta graduada de 100, 500 y 1000 ml.

Vasos de 100, 250, 500 ml
Incubadora
Varilla der vidrio.
Frascos para toma de muestra en vidrio autoclavables con tapa de rosca.

Pipetas de 1, 5 y 10 mL.
Micropipetas de 0.1 y 0.5. µL

Propipeta
Pipeta de 100 mL clase A

Mechero de Alcohol
Papel craft
Gradillas.
Pita
Tubos de ensayo 18x125mm

Espátula y Guantes de carnaza
REACTIVOS
E.DTA al 15 %.(Ácido etilendiamino tetracético)
Preparación: Pesar 15 gramos de EDTA 0.1 M, disolver en 100mL de agua destilada. Y

esterilizar a 121ºC por 15 min a 15 psi.
Tiosulfato de sodio al 0.025 N.
Preparación: Pesar 6.205 de Na2S2O3.5H2O y disolver en 1000 mL agua destilada
Esterilizar a 121º C por 15 minutos a 15 psi.
Alcohol industrial
Agua ultra pura
Obtenida en la pistola del (Estérilizada a 121 ºC por 20 minutos a 15 PSI.)
Medio de cultivo Colilert
Tome 1 vial (es un pequeño frasco de vidrio destinado a contener reactivos en presentación
de líquidos, polvos o cápsula) de colilert y disuélvalo en 100 mL de agua destilada donde se
ha realizado la dilución, mezcle muy bien.
Agua de Peptona (tamponada al 1%. Verificar fecha de vigente)

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DOCENTE: Ing. Angélica Miranda Jara

CODIGO NOMBRES Y APELLIDOS %PARTICIPACION

2018023081 Gutarra Ramos Yeraldin Xianela 25%

2017002098 Cinthya Lissette Asmat Tarazona 25%

2018027024 Jacobi Albertis Rosario Brigith 25%

2018010806 Liñan Bermúdez Samuel 25%

2-preparar tubos: Tomar 9 tubos de ensaye y dentro de cada uno colocar un

5-lncubar por 24-48 hrs a 36•C

6- Checar positivos viendo la producción de gas (burbujitas en tubos Durham) (hubo

8-poner muestra de agua

a) tomar los tubos con EC y ponerles una aza a cada uno

10-checar positivos viendo la producción de gas

Los 3 primeros tubos: 2 te salieron positivo

Los 2 segundos tubos: sólo 1 salió positivo

INSTRUMENTOS E INSUMOS USADOS EN LA SESIÓN DEL

Probeta graduada de 100, 500 y 1000 ml.

Frascos para toma de muestra en vidrio autoclavables con tapa de rosca.

Micropipetas de 0.1 y 0.5. µL

Pipeta de 100 mL clase A

Tubos de ensayo 18x125mm

E.DTA al 15 %.(Ácido etilendiamino tetracético)

Preparación: Pesar 15 gramos de EDTA 0.1 M, disolver en 100mL de agua destilada. Y

Preparación: Pesar 6.205 de Na2S2O3.5H2O y disolver en 1000 mL agua destilada

Esterilizar a 121º C por 15 minutos a 15 psi.

Obtenida en la pistola del (Estérilizada a 121 ºC por 20 minutos a 15 PSI.)

Medio de cultivo Colilert

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