INSTITUTO 

DE EDUCACIÓN SUPERIOR TECNOLÓGICO

PÚBLICO NARANJILLO

"Año del Bicentenario del Perú: 200 años de Independencia"

ANALISIS HEMATOLOGICOS

CURSO : EXTRACION DE MUESTRAS BIOLOGICAS

DOCENTE: GUNDER LAFFOSSE GRIJALVA

CICLO : I-Laboratorio Clínico

ALUMNO : Andrade Palomino Andrea.

TINGO MARÍA – PERÚ

Abril, 2021
 INTRODUCCION
El presente trabajo ha sido elaborado en forma simple, para
que su contenido sea fácil de entender mediante la lectura,
dándonos a conocer que la hematología se centra en el
estudio, en la prevención y en el tratamiento de enfermedades
de la sangre que afectan a la producción de la sangre y de sus
componentes.
Para así dar a conocer cuáles son los procedimientos
hematológicos que empiezan con la toma de muestra, hasta el
procesamiento de ésta en la determinación correspondiente, y,
por último, en la emisión de los resultados. Debemos recalcar
que cuando se realizan pruebas de hemostasia debe tenerse
en consideración los cuidados comunes a toda prueba de
laboratorio, es decir, las muestras deben obtenerse en
condiciones apropiadas y rotularse debidamente.
ÍNDICE

I. OBJETIVOS............................................................................................4

1.1. OBJETIVO ESPECIFICO...............................................................4

II. MARCO TEORICO..................................................................................4

1. ¿Qué es la hematología?..............................................................4

2. Alcance de la hematología...........................................................4
3. ¿Cómo sucede el análisis hematológico?......................................6
4. Obtención de Muestras Sanguíneas...............................................6

4.1. OBTENCIÓN DE SANGRE VENOSA CON JERINGA.................6

5. Realización Y Tinción del Frotis Sanguíneo...................................8
6. Método de los dos Portaobjetos......................................................8
7. Hemograma-Hemoglobina-Hematocrito.........................................9
III. CONCLUSIONES..................................................................................12
IV. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.....................................................12
V. ANEXO..................................................................................................13
 I. OBJETIVOS

 Aprender de qué manera sacar sangre.

 Muestra del análisis de realización y tinción del frotis sanguíneo

I.1. OBJETIVO ESPECIFICO

Establecer y estandarizar los procedimientos básicos de un examen de
hemograma, hemoglobina, hematocrito, recuento de plaquetas, velocidad
de sedimentación y recuento de reticulocitos que sirvan de ayuda
diagnóstica al clínico.
II. MARCO TEORICO

1. ¿Qué es la hematología?
La hematología es una rama de la medicina relacionada con el estudio de la
sangre, los órganos que forman la sangre y las enfermedades de la sangre;
es el brazo del remedio referente al estudio de la sangre, de los órganos de
sangre-formación, y de las enfermedades de sangre. Las pruebas de la
hematología incluyen evaluaciones del laboratorio de la formación de la
sangre y de los desórdenes de sangre.
2. Alcance de la hematología

La hematología es practicada por especialistas en el campo que se

ocupan del diagnóstico, tratamiento y manejo general de personas con
trastornos sanguíneos que van desde la anemia hasta el cáncer de la
sangre.

Algunas de las enfermedades tratadas por hematólogos incluyen:

 Anemia por deficiencia de hierro y otros tipos de anemia como anemia de

células falciformes o anemia relacionada con traumatismos
 Policitemia o producción excesiva de glóbulos rojos
 Mielofibrosis
 Leucemia
 Trastornos plaquetarios y hemorrágicos como hemofilia, púrpura
trombocitopénica idiopática y enfermedad de Von Willebrand
 Los síndromes mielodisplásicos
  Hemoglobinopatías como talasemia y anemia de células falciformes
 Mieloma múltiple
 Linfomas malignos
 Transfusión de sangre
 Trasplante de células madre de médula ósea

Pruebas de la hematología

 Hemograma completo - una cuenta del número total de glóbulos rojos, los
glóbulos blancos y las plaquetas presentan en sangre.
 Película de sangre - la sangre se mancha sobre una diapositiva de cristal
que se manche con los tintes específicos y se vea bajo un microscopio. El
número, la forma y la talla de glóbulos y la presencia de cualquier célula
anormal o de células no maduras se observan.  La coloración puede
también descubrir parásitos de la sangre tales como malaria,
toxoplasmosis, y microfiliariasis.
 La evaluación y la coloración de plaquetas o de megakaryocytes no
maduros pueden también ser realizadas.
 Evaluación del granulocitosis.
 El régimen de sedimentación de eritrocito (ESR) puede ser probado.
 La médula puede ser examinada.
 El estado y las anemias del hierro se fijan usando pruebas tales como
ferritina del suero, vitamina B12 y niveles del folato.
 La prueba del Coombs o la prueba del antiglobulin se puede utilizar para
pulsar de sangre y la sangre que igualan antes de la transfusión de sangre,
por ejemplo.
 La función de la plaqueta en la extracción de aire y la coagulación se puede
verificar usando una prueba llamada tiempo de la protrombina.
 La diascopia es una técnica usada para determinar si una lesión es
vascular, no vascular o hemorrágica.

3. ¿Cómo sucede el análisis hematológico?

 Con observación que se da en el microscopio de las células de la sangre y
de las que las originan, localizadas en el interior de los huesos (en la
médula ósea) son el pilar fundamental de la hematología, ya que permite
detectar de forma rápida y fácil un enorme número de enfermedades. Para
ello, es fundamental la correcta extracción, el procesado y la tinción de las
muestras, así como el conocimiento del aspecto de las células normales.
Junto con el examen morfológico de las células, y con una importancia no
muy alejada, el diagnóstico de las enfermedades de la sangre se apoya en
una técnica que permite conocer datos de miles de células, una a una, en
un tiempo muy breve: es la citometría de flujo. Finalmente, un tercer pilar
necesario, y de importancia creciente para estudiar las enfermedades de las
células de la sangre, es la genética, tanto en su vertiente morfológica
(citogenética), como molecular.
4. Obtención de Muestras Sanguíneas

4.1. OBTENCIÓN DE SANGRE VENOSA CON JERINGA

Materiales y equipos requeridos
 Algodón.
 Alcohol al 70%.
 Ligadura o torniquete de 25 a 30 cm de largo.
 Jeringas de 5 mL.
 Viales con anticoagulante EDTA.
Obtención de la muestra
 Verificar que los elementos por utilizar estén listos, y que el paciente se
sienta cómodo.
 Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro dedos por encima de la
flexión del codo o a 10 cm del codo, sujetar con un medio nudo (Fig. 1).
 Limpiar la zona con alcohol al 70% o alcohol yodado, en un área de 2
pulgadas (Fig. 2).
 El paciente deberá abrir y cerrar la mano durante unos segundos y
después la mantendrá cerrada, esto ayudará a visualizar las venas
superficiales (Fig. 3).
 Se retira el estuche protector de la aguja y se coge la jeringa de tal
manera que el bisel se encuentre hacia arriba (Fig. 4).
 Se coloca la aguja en dirección paralela a la vena, se perfora la piel
haciendo avanzar la aguja 0,5-1 cm en el tejido subcutáneo, luego se
perfora la vena (Fig. 5).
 Se aspira la jeringa hasta el volumen requerido.
 Retirar el torniquete e indicar al paciente que deje de hacer puño. Se
coloca el algodón seco encima de la punción y se retira la aguja (Fig. 6).
  Retirar la aguja de la jeringa. Verter la muestra lentamente por las
paredes del vial con anticoagulante. No olvidar colocar una gota en la
lámina portaobjeto para realizar el frotis (Fig. 7).
 Agitar el vial en círculos sobre la mesa para homogeneizar la muestra
con el anticoagulante.

PUNTOS PARA LA EXTRACCIÓN DE SANGRE

(Toma de muestra)
Se obtiene de las venas de la fosa cubital

PROCEDIMIENTO

Ventajas de una extracción

Fig.4 de sangre venosa Fig.5 Fig.6

 Pueden hacerse repetidos exámenes con la misma muestra.

 Parte de la muestra (plasma o suero) puede congelarse para referencia
futura.
Desventajas de una extracción de sangre venosa
 La punción venosa, por su largo procedimiento, requiere mayor preparación
que el método capilar.
 El método es técnicamente difícil en niños, individuos obesos y pacientes
en shock.
 La hemólisis debe ser evitada, pues se puede obtener una disminución en
el recuento de eritrocitos.

5. Realización Y Tinción del Frotis Sanguíneo

La práctica del frotis sanguíneo, también llamado extendido, es de

gran importancia en hematología ya que el diagnóstico de muchas
enfermedades hematológicas puede realizarse con sólo observar
las características morfológicas de las células sanguíneas, de
manera que éste no debe ser excesivamente grueso ni
excesivamente fino. Todas las láminas por usar, sobre todo
nuevas, deben ser limpiadas con algodón y alcohol al 70% para
eliminar la grasa que viene adherida.

6. Método de los dos Portaobjetos

Materiales
 Alcohol al 70%.
 Algodón.
 Lanceta descartable.
 Portaobjetos de vidrios limpios y desgrasados (25 x 75 mm).
Procedimiento
 Una vez extraída la sangre con cualquiera de las metodologías, se coloca
una pequeña gota de sangre (5mL) (aprox. 3 mm de diámetro) sobre un
portaobjeto a 2 cm aproximadamente de uno de los extremos.
 Colocar el canto de otro portaobjeto esmerilado sobre la superficie del
primer portaobjeto (en la que se encuentra la gota de sangre) formando un
ángulo de 45º.
 Deslizar suavemente y a velocidad moderada el portaobjeto sobre el otro en
sentido longitudinal, hasta que la gota de sangre quede bien extendida
sobre la superficie del primer portaobjeto. El grosor del frotis sanguíneo
puede variar según sea el ángulo que formen entre sí ambos portaobjetos.
Así, si es superior a 45º, la extensión obtenida será gruesa y corta, si es
inferior a 45º será larga y fina. El secado del frotis es a temperatura
ambiente y en posición horizontal.
 EXTENDIDO DE SANGRE

Fig. 8

 Zona excesivamente gruesa: Se halla en la región inmediata al punto de

partida de la extensión (cabeza). En ella se aprecia siempre un aumento de
linfocitos.
 Zona excesivamente fina: Corresponde al final de la extensión y termina
en un área donde las células adoptan una posición acartonada (barbas). En
esta región existe un exceso de granulocitos y monocitos.
 Zona ideal: Corresponde a la región intermedia del frotis y en ella existe un
reparto equilibrado de células.

7. Hemograma-Hemoglobina-Hematocrito
El hemograma de Schilling constituye uno de los exámenes de laboratorio
más usados en el campo de la hematología. Comprende las siguientes
pruebas:
RECUENTO LEUCOCITARIO
La sangre anticoagulada se deposita en un líquido que permite evidenciar
los leucocitos, manteniéndolos visibles, mientras que los eritrocitos son
hemolizados. El recuento del número de leucocitos o glóbulos blancos se
ex- presa por mm3 (milímetro cúbico).
Equipos
 Microscopio.
 Hemocitómetro (Cámara de Neubauer).
- Consta de los siguientes elementos:
 Una lámina portaobjeto gruesa, en el centro se hallan dos superficies
cuadriculadas iguales separadas del resto de la lámina por surcos y dos
barras transversales algo más elevadas.
 Una laminilla cubreobjetos ópticamente plana, que, al colocarse sobre las
barras elevadas de la lámina forma una cámara entre el cubreobjetos y la
superficie cuadriculada.
 La altura entre el cubreobjetos y la lámina portaobjetos es de 0,1 mm.
 Cada cuadrícula mide 3 mm de lado y se divide en 9 cuadrados grandes.
Cada uno de los cuales mide 1 mm2 de superficie, que se subdivide a su
vez en 16 cuadrados medianos. El cuadrado grande central se divide en 25
cuadrados pequeños y cada uno de ellos en 16 cuadraditos. Cada
cuadrado pequeño mide 0,2 mm de lado (0,04 mm2 de superficie), y cada
cuadradito mide 0,05 mm de lado (0,0025 mm2 de superficie).
Materiales y reactivos requeridos
 Pipeta de glóbulos blancos (De Thoma) o pipeta automática (de 0 a 100
mL). Presenta cerca del extremo superior una marca de 11,
inmediatamente continúa una dilatación (bulbo) que contiene una perla que
funciona como mezcladora, luego sigue el extremo más largo de la pipeta
(tallo) que está dividida en 10 partes, con 2 marcas: 1 (parte final del bulbo)
y 0,5 (a la mitad del tallo). Se le acopla a su extremo superior 1 tubo de
goma y una bombilla para aspirar.
 Diluyente de glóbulos blancos: Solución de Turk al 1%.
 Contador manual (Sólo si fuera necesario).
 Papel filtro.
Procedimiento
 Una vez obtenida la sangre con anticoagulante o sangre capilar del dedo,
se procede a aspirar la sangre con la pipeta de glóbulos blan- cos hasta la
marca de 0,5 y a limpiar la punta con papel absorbente.
 Introducir la pipeta en el tubo que contenga solución de Turk y absor- ber
hasta la marca de 11 (no debe haber burbujas).
 Tapar ambos extremos y proceder a mezclar manualmente o en un rotador
automático por 2 ó 3 minutos.
 Monte la laminilla de vidrio en la cámara para recuento que debe estar
limpia y seca.
 Agitar la pipeta y descartar las cuatro primeras gotas para luego colo- car
una gota pequeña de esta solución en la cámara.
 Deje reposar por espacio de 3 minutos para que las células se sedi-
menten.
 Enfocar con objetivo de 10x y contar en 4 cuadrados grandes angula- res.
Cuando se usa la pipeta automática, se toma 20 mL (0,02 mL) de sangre
total con anticoagulante o sangre capilar con anticoagulante y se diluye en
un tubo que contenga 380 mL de solución de Turk (aquí tenemos una
dilución 1:20).
 LECTURA

Fig. 9

La lectura se realiza en los campos 1, 3, 7 y 9 como está indicado en la figura.

Además de los leucocitos contados dentro de cada uno de los cuadrantes, se
deben contar todos los leucocitos que se encuentren adheridos en la línea
horizontal superior y vertical exterior, o de lo contrario, todos los leucocitos,
adheridos a la línea horizontal inferior y vertical interior.
Resultados

Nº de leucocitos x mm3 = leucocitos contados en 4 campos

altura x dilución x área

Reemplazando = leucocitos contados en 4 campos

1/10 x 1/20 x 4

= leucocitos contados en 4 campos

4/200

= X/1 = Nº leucocitos contados

x 50 4/200
Valores de referencia
5000 - 10 000 leucocitos / mm3

Corrección de valores para restar eritrocitos nucleados

Los normoblastos no se destruyen (lisis) en el líquido de dilución, por lo tanto,
pueden observarse al realizar el recuento leucocitario y confundirse con los
leucocitos, de tal manera que se debe emplear la siguiente fórmula:
Cálculo:
La concentración del número de normoblastos (por litro) es:
Número de normoblatos contados x concentración o número de leucocitos
100 + Nº de normoblastos contados
Ejemplo:
Si se cuentan 50 normoblastos y la concentración del número de leucocitos es 16
x 109/l, la concentración del número de normoblastos será: 16 = 5,3 x 109/l

50 x 16 = 5,3 x 109/l
100 + 50
y la concentración de leucocitos corregida será: 16 - 5,3 = 10,7 x 10 9/l
En unidades tradicionales las concentraciones de normoblastos y leucocitos se
expresan por milímetro cúbico. En tales unidades el cálculo correspondiente al
ejemplo que se ha dado sería:
50 x 16 000 = 5300 / mm3
100 + 50

Recuento corregido de glóbulos blancos o leucocitos = 16 000 - 5300 = 10 700 /

mm3
III. CONCLUSIONES
Se explicó en el presente trabajo sobre la hematología y de cómo se haría este
procedimiento en la forma de sacar los resultados y un pequeño ejemplo de
análisis de la hematología.
IV. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

 Ministerio de Salud del Perú- Instituto Nacional de Salud. Manual de nor-

mas de bioseguridad. Lima: MINSA - INS; 1996. Serie de Normas Técnicas
Nº 18.
 Bauer J. Análisis clínicos. Métodos clínicos e interpretación. 1ª ed. Barcelo-
na: Editorial Reverté S.A., 1986.
 Hayhoe F, Flemans R. Atlas color de citología hematológica. 2ª ed. México:
Editorial Médica Panamericana, 1999.
 Muñoz M. Guías de Práctica de hematología y trombosis. Lima: Universi-
dad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Medicina. Escuela Acadé-
mico Profesional de Tecnología Médica, 1995.
 Ministerio de Salud del Perú - Instituto Nacional de Salud. Manual de
procedimientos de laboratorio para la obtención y envío de muestras. Lima:
MINSA - INS, 1995. Serie de Normas Técnicas Nº 15.
 Pagana K, Pagana T. Guía de pruebas diagnósticas y de laboratorio. 2ª ed.
Barcelona: Mosby/Doyma Libros, 1996.
V. ANEXO