T.1.

BIOFÍSICA DE LA AUDICIÓN HUMANA (pdf tema 1)

1. ¿Cuáles son las tres partes del oído humano y cuál es su función?

La función del oído es recibir las ondas sonaras y conducirlas y convertirlas en impulsos nerviosos para
que lleguen al cerebro y allí se interpreten como sonido. Sus partes son el oído externo, el oído medio
y el oído interno.

2. ¿Qué modelo físico explica la amplificación del sonido que ocurre en el canal auditivo?
Explique cómo funciona esta amplificación y haga una relación entre la longitud (media)
del canal y máxima sensibilidad del oído humano que se da para frecuencia de 3.5 kHz.

El oído se modela cómo un tubo de aire cerrado en un extremo.

Se sabe que la sensibilidad del oído es 3.5 kHz, porque el primer armónico equivale a una longitud
del tubo igual a λ/4, y asumiendo que la velocidad del sonido es de 353.4 m/s y T° = 36.5 C, se
encuentra que la longitud de onda de un sonido de 3.5 kHz es de 10.1 cm. Al dividir este valor entre
cuatro se obtiene aproximadamente 2.53 cm, lo que corresponde a la longitud promedio del canal
auditivo.

3. ¿Cuáles son las tres partes del oído medio y cuál es su función?

Transmite el mensaje sonoro desde un medio a otro, siendo el primero el aire y el segundo el medio
liquido del oído interno.

Partes:

1 - La membrana del tímpano, o solamente tímpano.

 separa oído externo del oído medio e interno.
 Es una membrana elástica, parcialmente transparente y de forma semicónica.
 Recibe las oscilaciones del aire y las transfiere a los huesecillos.
 Su forma de vibrar está en la función de la frecuencia incidente: para bajas frecuencias vibra
como un solo cuerpo rígido, mientras para frecuencias >2.4 kHz, diferentes segmentos vibran
de diferentes formas.
 Compensa la energía perdida por la amplificación que proporciona el sistema de huesillos.
 Su coeficiente de transmisión es T=1.13×10 -3

2- Los huesecillos.
 son parte del mecanismo que transfiere las vibraciones sonoras al oído interno.
 Son tres: el martillo, el yunque y el estribo. Están sostenidos en su posición por un conjunto de
los músculos y ligamentos
 funcionan como un amplificador de presión.

3- La trompa de Eustaquio.
 cumple la función de eliminar el efecto de la presión atmosférica.
 Es un conducto pequeño que sirve para conectar la caja del tímpano con la laringe e igualar la
presión del oído medio con la atmosférica.
 Se abre por reflejo en los momentos de tragar o bostezar

4. Si en tímpano se refleja 95% de la energía sonora incidente, ¿cuál es la atenuación del

sonido entre el oído externo y medio?
EJERCICIO
La atenuación serÍa de 40 dB.
 5. ¿Por qué es imposible una transmisión directa (sin sistemas de huesecillos) del sonido
recibido en el tímpano al oído interno? Para justificar la respuesta, utilice el coeficiente de
transmisión y las impedancias correspondientes al aire y a la perilinfa del oído interno, 425
rayl y 1.5×106 rayl, respectivamente.

Por las diferencias en las impedancias.

It 425 −4
T= = =2.8 x 10
I i 1.5 x 106
Lt −Li=10 log ( T )¿ 10 log(¿ 2.8 x 10−4 )=−35.5 dB ¿

6. ¿Cuál sería la atenuación en la transmisión directa (sin huesecillos) del mensaje sonoro
entre oído medio e interno?
Lt- Li = 10 log (T)
= 10 log (2.83E-4) = -35.5

40dB

7. Explique los dos mecanismos de amplificación de la caja timpánica. ¿Cuál sería la ventaja
mecánica total de un oído con las áreas del tímpano y de la ventana oval iguales a 38 mm2
y
2.12 mm2? Asuma que la ventaja que proporcionan los huesecillos (trabajando
como palanca) es igual a 1.3.

El coeficiente de transmisión del oído es T=1.13×10 -3. Lo que significa que casi 99.9%
de la energía sonora seria reflejada, amplificada.

Se pueden considerar un sistema mecánico de palancas que proporciona una

ventaja mecánica de aproximadamente 1.3. Eso significa que la fuerza que ejerce el
estribo sobre la ventana oval es 1.3 veces mayor que la que ejerce el tímpano sobre
el martillo.

El otro mecanismo de amplificación tiene que ver con la disminución de la superficie

a la cual se concentra el movimiento. El hecho es que las superficies efectivas del
tímpano y de la ventana oval son aproximadamente iguales a 42 mm2 y a 2.5 mm 2,
respectivamente. La relación entre áreas agrega una ventaja de alrededor de 16.8,
lo que en totalidad genera una ventaja de 21.84 que parcialmente compensa la
perdida provocada por el cambio de medio de propagación.

EJERCICIO
F1
∗F 2
P2 A 1
=
P1 A2

P 2 1.3∗38
= =23.30
P1 2.12
 8. ¿Cuáles son las tres partes del oído interno y cuál es su función?

El OÍDO INTERNO tiene la función de transformar las señales sonoras en las señales eléctricas (i.e.,
potenciales de acción) que se transmiten vía el nervio auditivo al cerebro.
 consiste en el laberinto óseo, dentro del cual se encuentra el laberinto membranoso.
 El laberinto óseo consiste en conductos semicirculares y el vestíbulo, responsables de
mantener el equilibrio y la percepción de aceleración, y la cóclea o caracol que funciona como
un transductor auditivo

9. Explique cómo cóclea cumple con su función de discriminación de sonidos según su

frecuencia.
Esta discriminación es gracias a las propiedades particulares de la membrana basilar.

La membrana basilar tiene una longitud de aproximadamente 33 mm con un ancho y un

grosor variable: aproximadamente 0.04 mm en el extremo basal (próximo a la base del
caracol), y 0.40 mm en la zona próxima a ápex. La elasticidad varia con el grosor, por lo que
hay una gran variación de elasticidad que aumenta desde el extremo angosto (basal) hacia
la zona del ápex. Este cambio en la elasticidad es la propiedad particular que determina su
capacidad de realizar el análisis espectral (de frecuencias) del sonido.

Cuando vieja una onda a través de la perilinfa, se desforma la membrana basilar. Debido a
sus propiedades elásticas, la membrana basilar responde en la forma específica con la
máxima deformación localizada en función de la frecuencia del sonido.

Mientras la frecuencia disminuye, el punto máximo de la onda envolvente se mueve a lo

largo de la membrana basilar: las frecuencias más altas ejercen la acción máxima en los
puntos cercanos a la base, mientras las bajas excitan intensamente puntos cercanos al ápex

En la respuesta a la deformación de la membrana basilar se produce un movimiento relativo

entra las células ciliares y la membrana tectoria con la consecuente apertura de los canales
iónicos y generación de un potencial de acción. De esta forma el oído completa su función
de recepción, conducción y de análisis espectral del sonido.

10. Explique el proceso básico de formación de los potenciales microfónicos en la cóclea.

La membrana basilar se encuentra recubierta por las células ciliadas. Éstas están divididas por el túnel
de Corti en dos secciones: las externas (12,000 a 19,000 por oído distribuidas de 3 a 5 filas) y las
internas (3050 por oído, distribuidas en una sola fila). Cada célula tiene de 60 a 70 cilios en la parte
superior; de ahí el nombre células ciliadas. Cualquier movimiento de la membrana basilar resulta en el
movimiento de las células. Este movimiento, mediante la acción de los mediadores químicos, resulta
en el cambio de la permeabilidad de la membrana y la alteración de la diferencia de potencial que
originalmente existe entre las células ciliadas internas y externas (150 mV aproximadamente). De esta
forma se genera una señal eléctrica, denominada potencial microfónico, que se registra en la ventana
redonda. Justo después de la aparición de este potencial se forman potenciales de acción que
empiezan a propagarse a lo largo del nervio auditivo, en el que alrededor de 30 000 fibras llevan estas
señales sensoriales a las áreas corticales especializadas en su interpretación.

11. ¿Cómo depende la altura de un sonido de su frecuencia? ¿Cómo depende la percepción

de la altura de dos sonidos de misma frecuencia, pero de diferentes intensidades?

La percepción de la altura de un sonido depende de su frecuencia, pero también de su intensidad.

Por ejemplo, entre dos sonidos de la misma frecuencia, el que tenga mayor intensidad se percibe
como más grave.

Para que dos ondas sonoras de la misma intensidad sean percibidas como sonidos de diferentes
alturas, sus frecuencias deben tener una diferencia mayor que un umbral especifico, Δf. Si la
frecuencia varia dentro de un intervalo inferior al umbral, no se percibe ninguna diferencia en la
altura de los sonidos.

Los sonidos de diferentes frecuencias generalmente se clasifican como graves, medianos o agudos.
Asumiendo una clasificación muy relativa, se podría decir que los sonidos graves (i.e., tonos bajos)
son las que tienen frecuencias menores que 400 Hz. Entre 400 Hz y 1 600 Hz se ubican los sonidos
medianos y por encima de 1.6 kHz se encuentran los sonidos agudos (i.e., tonos altos).

12. Si para un sonido de 10 dB y de 500 Hz de frecuencia, umbral diferencial de frecuencia

es igual a 0.015, ¿Cuál es la próxima frecuencia que se va a percibir como un sonido
más agudo/alto (grave/bajo)?
Ejercicio

∆ f =500∗0.015=7.5 Hz
500+7.5=507.5 Hz próxima máxima frecuencia 500−7.5=492.5 Hz Próxima mínima
frecuencia

Sonidos graves menores que 400 Hz

Agudos (altos) por encima de 1.6 kHz.
Medianos entre 400 y 1 600 Hz

La próxima frecuencia se percibirá como sonido mediano.

13. ¿Cuál es la diferencia entre medidas físicas (i.e., objetivas) y subjetivas (i.e., de
percepción) del sonido?
Las físicas están relacionadas con la naturaleza del sonido (que es una onda), y las subjetivas están
relacionadas con la percepción, cómo el cuerpo responde a las ondas y las razones de cómo las
percibimos como lo hacemos.

14. ¿Cuáles son las características físicas del sonido que corresponden a sonoridad y nivel
de sonoridad? ¿Cuáles son las unidades del sonido y de la sonoridad?

La energía transferida por una onda sonora es el factor determinante para que un sonido sea
percibido como más fuerte, o como más débil. En este caso estamos hablando de las sensaciones
fisiológicas denominadas volumen del sonido o sonoridad (S) y del nivel de sonoridad o nivel
sonoro (LS).

La sonoridad es análoga a la intensidad y el nivel de sonoridad al nivel de intensidad L I.

Para escuchar dos sonidos de misma frecuencia como sonidos de diferente volumen, estos
obviamente deben tener diferentes intensidades.

El cambio en la sonoridad (característica subjetiva/fisiológica) de una onda sonora es la causa del

cambio en su intensidad (característica objetiva/física).

Fon o fonio: unidad del nivel de sonoridad

Son o sonio: unidad sonoridad

Para los sonidos de 1 kHz, el nivel de intensidad y de sonoridad coinciden, 1 dB = 1 fonio

Un sonido de 1 kHz y 40 dB de nivel de intensidad tiene sonoridad igual a 1 son

15. ¿Qué nivel de intensidad tiene un sonido de 200 Hz que se percibe con mismo
volumen como un sonido de 60 dB y 60 Hz? ¿Cuántos fonios tienen estos dos
sonidos?
EJERCICIO
Ls =sensación de la intensidad

W
Para 60 dB , nivel de intensidad es 10−6 I min =10−10 W /m²
m2

I
Ls =10∗lo g
I min
10−6
Ls =10∗log −10 =40 fon
10

T.2. BIOFÍSICA DE LA VISIÓN HUMANA (PDF tema 3)

1. ¿Cuál es la función de la retina, y cuál es su estructura (las capas, las regiones)?

Es la capa más interna del ojo. Es la superficie sobre la cual la córnea y el cristalino proyectan las
imágenes, o sea se forman allí. La retina es un elemento de la cadena visual que anatómicamente
pertenece al ojo, pero al mismo tiempo es una extensión del sistema nervioso central.

Está cubierta por tres capas de células que desde el centro hacia la periferia del ojo se encuentran en el
siguiente orden:

 las células ganglionares o neuronas secundarias que constituyen el nervio óptico

 la célula bipolar o neurona primaria

 Los fotoreceptores, que son los conos y los bastones.

Las tres capas de células permiten a la retina cumplir con su doble función: transducción y codificación.
 2. ¿En qué consiste el proceso de acomodación del ojo? ¿Qué es la presbicia y con qué tipo
de lente se corrige?
La acomodación de ojo es para enfocar correctamente objetos lejanos y cercanos.

Cuando los músculos ciliares se relajan, el cristalino adopta la forma apara enfocar los objetos
lejanos, disminuyendo su diámetro (grosor), y tensándose las fibras ciliares y relajándose los
músculos ciliares. Los rayos de luz correspondiente a los objetos distantes alcanzan el ojo casi de
forma paralela sin necesitar mucha refracción para un buen enfoque.

Para la visión nítida de objetos cercanos, se requiere mayor refracción, pues los rayos son más
divergentes y requieren mayor refracción. Entonces el cristalino procede a acomodarse para poder
ver: músculos ciliares se contraen - las fibras ciliares se relajan - grosor del cristalino aumenta -
distancia focal disminuye.

La distancia de 25 cm se conoce como punto cercano o próximo; es la mínima distancia que permite
a un adulto sin problemas de visión enfocar los objetos claramente con un acomodamiento máximo.

 La presbicia, presbiopía o vista cansada es cuando el cristalino va perdieron su elasticidad

por la vejez y va perdiendo la capacidad de acomodarse.

3. ¿Cuál es la función de los conos y de los bastones en la visión humana?

Los conos: baja sensibilidad, alta resolución, para visión diurna, distinguen tonos y matices de colores,
los conos rojos: eritropsia, los conos verdes: cloropsina, y los conos azules: cianopsina.

Los bastones: visión nocturna, necesitan poca luz, proporcionan visión en blanco negro, son altamente
sensibles, se adaptan rápido

4. Comente las diferencias en la distribución de los conos y de los bastones sobre la retina y
sus consecuencias sobre la visión.
Se estima que hay entre 6 y 7 millones de conos, que están en su mayoría concentrados en la macula,
zona central de la retina.

Cada uno de los ojos dispone de aproximadamente 120 millones de bastones, distribuidos
principalmente en la periferia de la retina.

Debido a la distribución específica de los fotoreceptores y de su sensibilidad, en la visión nocturna

(escotópica) predomina la visión periférica mientras que, en la diurna, predomina la visión central.
 5. ¿Cuáles son las propiedades del modelo del ojo reducido?

Según este modelo, el ojo consiste en un solo dioptrio de R=5.55 m, D=60 d y n=1.33. Los puntos F y F’,
son puntos focales situados de modo que los rayos provenientes del infinito, paralelos al eje óptico
determinados por los focos, incide en el punto focal imagen, F’. Los puntos principales y los puntos
nodales coinciden uno con otro y con el punto N, centro óptico del sistema; los rayos que pasan a
través del punto nodal se propagan hasta la retina sin refractarse

6. ¿En qué consiste miopía y con qué tipo de lente se puede corregir?

Es un defecto de la visión en que se dificulta enfocar objetos lejanos pues las imágenes se forman
delante de la retina. Con los objetos cercanos no ocurre esto.
La miopía puede ser causada por el aumento del tamaño del globo ocular, aumento en la curvatura de
la córnea y/o cristalino o cambios en la capacidad del cristalino para refractar.
Un ojo miope tiene dificultades de enfocar los objetos lejanos debido al poder excesivo de refracción.

Se corrige con una lente divergente (negativa).

Un ojo miope tiene dificultades de enfocar los objetos lejanos debido al poder excesivo de refracción.

7. ¿En qué consiste hipermetropía y con qué tipo de lente se puede corregir?

Es un defecto en la recepción de la señal luminosa que puede ser causado por una reducción del
diámetro del globo ocular, justamente lo contrario que en el caso de la miopía. El defecto en la
convergencia de los rayos luminosos en este caso resulta en la vista borrosa de los objetos cercanos,
debido al enfoque incorrecto su imagen aparece justamente detrás de la retina.

Se corrige con una lente convexa positiva o con lentes de contacto.

8. ¿En qué consiste y por que se presenta el astigmatismo?

Es un defecto producido por las imperfecciones de los elementos transparentes del ojo, principalmente
la córnea, cuando la superficie de ésta no es perfectamente esférica, sino que tiene un radio de
curvatura variable. la curvatura de la córnea astigmática es variable y más parecida a la de la pelota de
futbol americano.

El astigmatismo se manifiesta como una vista borrosa que puede afectar tanto la visión de objetos
cercanos como lejanos. El resultado de esta distorsión es aparición de múltiples puntos focales, ya que
los rayos luminosos que inciden sobre diferentes puntos de estos dos dioptrios se refractan de manera
diferente

9. ¿Cuál es la diferencia entre radiometría y fotometría?

La radiometría y la fotometría son ramas de la ciencia que se encargan de estudiar nuestra respuesta
fisiológica y psicología al mensaje luminoso.

La radiométrica se enfoca en estudiar la luz en sí, y la fotometría estudia cómo la percibimos nosotros.

La radiometría tiene como meta una cuantificación objetiva del transporte de energía vía radiación
electromagnética. De forma puramente física se abarcan las propiedades del flujo luminoso emitido
por una fuente. En la fotometría, el enfoque está en el análisis y la descripción de las sensaciones
producidas por la captación de la energía luminosa.

10. ¿Cuál es la idea básica del modelo de trivariancia visual?

Empíricamente se ha demostrado que la descripción de las sensaciones producidas por la luz requiere
por lo menos tres variables independientes entre sí, el hecho conocido como trivariancia visual.

Existen 2 modelos más conocidos el sistema rojo-verde- azul (RGB (Red-Green-Blue) y el sistema
matiz-luminosidad-saturación (HLS (Hue-Luminance-Saturation).

11. ¿Cuáles son los tres parámetros del sistema HLS de visión de colores?

La base del sistema HLS son tres sensaciones psicofísicas de la luz que se consideran suficiente para
describir de forma completa cualquier impresión fisiológica particular del mensaje luminoso

 Matiz. Cualidad no medible que nos permite distinguir diferentes colores y su tonalidad. La
percepción de tonalidad depende de la longitud de onda de luz monocromática.

 Saturación: evalúa claridad (pureza) de un matiz. Nos permite distinguir entre dos tonalidades
iguales. Por ejemplo, un rojo oscuro es más saturado que un rojo pálido. La saturación evalúa
la claridad de un matiz, que es consecuencia del porcentaje de la luz blanca que contiene.

 Luminancia o luminosidad. variable que nos permite evaluar la intensidad de la sensación

luminosa. Es una variable medible y aditiva. Luminosidad es una variable acromática, estima la
cantidad de blanco y/o negro en un color. Describe la visión nocturna. Tambien ayuda a
distinguir entre colores de la misma tonalidad.

Factor de pureza (p): Para la luz blanca p=0 y para una luz monocromática, p=1.
Resumiendo la trivariancia del sistema HLS: nuestra percepción de colores depende de tras
parámetros: la longitud de la onda denominada dominante (λ), la luminosidad de la sensación (L), y el
factor de pureza (p).

T.3. RADIACIÓN NO IONIZANTE. LASER (pdf no ionizante)

1. ¿Cuáles son los limites (en longitud de onda, en frecuencia, y en energía) de los
cuatro intervalos de la radiación no ionizante (según ICNIRP)?

Ondas de Frecuencias Bajas: incluye radiación electromagnética de frecuencias bajas de

intervalo de 1 Hz hasta 100 kHz.

Ondas de Frecuencias de Radio: le corresponden los campos electromagnéticos variables de

frecuencias comprendidas en intervalo de 100 kHz hasta 300 GHz(1) .

2. ¿Cuáles son los efectos físicos de la RNI y como se relacionan con la energía?

El nivel inicial es el micronivel marcado por las interacciones físicas entre los campos electromagnéticos
y los portadores de la carga eléctrica: cargas libres, cargas enlazadas y/o dipolos eléctricos atómicos y
moleculares. En función de la energía, los resultados principales de la acción de RNI son la polarización
de las moléculas, su rotación y reorientación espacial, y su vibración. Efecto sobre los electrones
enlazados es la excitación y consecuente desexcitación. El resultado de la alteración del movimiento y
de la redistribución de las partículas cargadas es el surgimiento de los campos locales inducidos y de las
corrientes eléctricas inducidas.

A nivel tisular, se han detectado dos efectos relevantes: calentamiento (el efecto predominante) y
efectos fotoquímicos(2) . Los dos son consecuencia del depósito de energía, y se considera que, en su
gran mayoría, en las situaciones cotidianas y de exposición moderada, los cambios que estos efectos
inducen son localizados y reversibles.
 3. ¿Cuál es la relación entre campos electromagnéticos, las corrientes inducidas, efecto Joul,
y calentamiento de los tejidos expuestos?
En la mayoría de las condiciones de exposición, los campos tanto magnéticos como eléctricos,
pueden causar la inducción de las corrientes eléctricas. Las corrientes inducidas por efecto Joule
transfieren la energía al tejido y lo calientan; si tienen suficiente intensidad y perduran suficiente
tiempo, pueden producir los aumentos significativos de la temperatura.

Para energías más elevadas, un posible resultado es la ruptura del enlace molecular con doble
consecuencias: perdida de la molécula y su función, y producción de radicales

4. Comente la profundidad de penetración de la RI en la piel humana en función de su

longitud de onda (de intervalo correspondiente: A, B y C). ¿Por qué la penetración es casi
nula para la longitud igual a 3 μm?
Algunas frecuencias y las profundidades de penetración a la piel humana son: 6 GHz y 8.1 mm,
10 GHz y 3.9 mm, 100 GHz y 0.35 mm, y, 300 GHz y 0.23 mm.

5. ¿Cuáles son los efectos adversos principales de la exposición a la luz visible e IR?
(figuras 7.1.5 y 7.2.6) IR= radiación infrarroja.

Su principal efecto sobre constituyentes de los tejidos absorbentes es la excitación atómica y

vibración de las moléculas.

Los tejidos son buenos absorbentes de la radiación IR que no penetra profundamente a la piel
humana.

El bajo coeficiente de absorción del medio ocular permite que una alta intensidad de la luz
incidente alcance la retina, haciéndola tal vez el tejido más susceptible a lesiones por radiación.
Para longitudes de onda entre 1.3 y 1.4 μm el medio ocular es transparente, y la radiación llega
sin mayores cambios hasta la retina. Las longitudes de onda más largas (las ondas menos
energéticas) son absorbidas en los elementos anteriores a la retina, la córnea, el humor acuoso,
el cristalino, etc. donde puede producir diferentes opacidades. Los agregados de las proteínas del
cristalino, después de las exposiciones repetidas (típicas en las situaciones laborales) y
consecuentes calentamientos, pueden causar las cataratas

6. ¿Qué parte de la radiación UV es de mayor relevancia biológica? ¿Por qué?

Anqué es de energía y de profundidad de penetración moderada, biológicamente, la parte más

relevante es la radiación UVB.

Las quemaduras debidas a la excesiva exposición a la luz solar, se debe a la radiación UV.
El intervalo la radiación ultravioleta se suele dividir en UVA (400 – 315 nm), UVB (315 – 280 nm) y UVC
(280 - 100 nm). La principal fuente natural de la radiación UV es el Sol.

7. ¿Cuáles son las propiedades particulares de la luz laser?

Láser es el acrónimo de la expresión Light Amplification by Stimulated Emission of Radiation

Propiedades: monocromática, coherente, de alta intensidad y de un ángulo de divergencia muy

pequeño
 8. ¿Cuál es la diferencia entre la emisión espontánea y estimulada?

La emisión estimulada es un proceso en el que se provoca la desexcitación del átomo mediante el

bombardeo de un fotón.

Imaginamos un átomo excitado, con un electrón ocupando el nivel energético E2, que no se relaja
inmediatamente. Si sobre el átomo, mientras está excitado, incide un fotón de energía igual a ΔE=E2-
E1, el campo asociado al fotón puede estimular la desexcitación del átomo, y el electrón regresa al
estado de energía inferior, E1, en el proceso denominado emisión estimulada.

9. ¿Cómo se define el spot size y cuál es su relación con la profundidad de penetración?

El spot size es el intervalo en el que el haz de luz laser incide. El cambio del tamaño del foco.

Al disminuir el tamaño del spot, disminuye la profundidad de penetración como consecuencia de

mayor dispersión de los fotones y el efecto es más superficial.

Generalmente, si se reduce el diámetro del spot a la mitad, se necesita duplicar la energía entregada a
la superficie para conseguir el mismo efecto en la misma profundidad.

10. ¿Cuál es la relación entre TRT (tiempo de relajación térmica) y tiempo de exposición
para calentamiento selectivo?
TRT: (Tiempo de Relajación Térmica) que se define como el tiempo que dura una estructura para
disipar la mitad del calor suministrado, es decir para reducir el incremento de su temperatura en
50%.
Para lograr el calentamiento deseado y el efecto biológico consecuente, es necesario que tiempo
de entrega de cantidad de energía necesaria (tiempo de exposición) sea más corto que el TRT, es
decir, que el proceso de calentamiento sea más rápido que el enfriamiento.

Son inversamente proporcional.

11. ¿Cuáles son los cinco efectos biológicos más importantes de la luz laser?

FOTOELECTROMECÁNICOS., FOTOABLACIÓN, FOTOTÉRMICOS (Coagulación y Evaporación),

FOTOQUÍMICOS, BIOESTIMULACIÓN.

12. ¿En qué consiste el efecto de fotodisrupción?

O efectos foto electromecánicos: se requieren tiempos de exposición muy cortos, solamente unos
cuantos nanosegundos, y las irradiancias muy altas, E>1010 W/cm2. La magnitud del campo eléctrico
alcanza altos valores capaces de provocar la disrupción de las moléculas, denominada ruptura óptica,
seguida por la formación de los pequeños volúmenes de plasma, regiones de muy alta densidad de
electrones (alrededor de 1021 cm-3 ) y muy altas temperaturas que pueden superar 20 000 C. El
creado volumen de plasma se expande abruptamente y se forma una potente onda de choque, una
onda mecánica de propagación rápida. La presión de la onda de choque de plasma puede superar la
fuerza de tensión del medio; se “rompen” las moléculas y se produce un desgarre mecánico utilizado
para eliminación del tejido.

El campo medico principal de aplicación de efectos fotomecánicos es oftalmología; por ejemplo, para
iridectomía (extirpación parcial del iris) no invasiva y tratamiento de cataratas, entre otros.
 13. ¿Cuáles son los efectos fototérmicos de la luz laser y cuál es su relación con la
temperatura? (ver la tabla 7.3.2/figura 7.3.7)

Efectos fototérmicos: Coagulación y Evaporación.

Para las temperaturas menores a 50°C los efectos típicos son calentamiento e hipertermia, con la
presentación de la necrosis tisular. Para las temperaturas entre 50-100°C, se inducen cambios
irreversibles de biomoléculas: desnaturalización de proteínas y lípidos, coagulación de las proteínas,
etc.
Cuando la energía transferida no es suficiente para producir la ruptura de las moléculas del
absorbente, se producen efectos foto térmicos. La molécula irradiada se excita, y esta molécula
excitada, vía interacciones (i.e., colisiones) inelásticas, transfiere la energía a las moléculas
circundantes, se propaga el calor y sube la temperatura del tejido tratado.

T.4. MICROSCOPÍA (PDF métodos de análisis)

1. ¿Qué dice criterio de Rayleigh sobre limite de resolución?

“Cuando el máximo central de un punto se coloca encima del primer mínimo del otro punto, se puede
decir que los puntos están apenas resueltos.”

La resolución es la distancia mínima de separación, de modo que cuanto mayor es la capacidad de

resolución, menor es la distancia entre los puntos resueltos.

2. ¿Cuál es la relación (proporción directa, inversa, etc.) entre la resolución, la longitud

de onda, y apertura numérica? (formulas 8.2.1 y 8.2.5)

La resolución es inversamente proporcional a la longitud de onda de la luz utilizada, y

directamente proporcional la resolución y la apertura numérica.
Apertura numérica y longitud de onda inversamente proporcionales.

3. ¿Cuál es la diferencia entre el aumento vacío y útil?

Aumento útil es el que nos permite distinguir los detalles de la muestra que revelan su estructura.
Aumento vacío: la imagen se agranda pero no se distinguen detalles.

4. Explique por qué se consigue una mejor resolución con el objetivo de inmersión.
La ventaja principal de utilizar objetivos de inmersión es que la luz que llega al objetivo no
necesita atravesar el aire. Esto se traduce en un aumento en la calidad de imagen
ya que reduce la refracción de la luz incidente.

5. Identifique la técnica de microscopia de la imagen:

A: microscopia de campo brillante

B: microscopia de contraste de fase
C: microscopia de contraste por interferencia diferencial (DIC)

6. ¿Qué propiedades estructurales necesitan tener las muestras para que sean aptas
para microscopia con la luz polarizada? Explique su respuesta.
La muestra de origen biológico contiene moléculas de características cristalinas o
quasicristalinas, o fibrosas.

Estas estructuras afectan el paso de la luz de formas distintas y en función de su orientación.

Las estructuras brillosas con luz polarizada se verán brillantes sobre un fondo oscura.
En la microscopia de luz polarizada, demás estructuras que no sean fibrosas no se ven

7. ¿Cuáles son las ventajas de la microscopia de florescencia?

- permite una observación in vivo con mínima perturbación de la muestra;

- tiene un contraste excelente; se visualizan solamente estructuras de interés en un fondo oscuro;
- tiene una sensibilidad elevada; se pueden detectar las cantidades extremadamente pequeñas de la
muestra, e.g., hasta 50 moléculas/µm3 ;
- el desarrollo intensivo de los marcadores fluorescentes (hoy en día se usa más de 3,000 fluoróforos)
permite visualización de casi todos los aspectos del sistema celular. Se pueden observar diferentes
componentes celulares simultáneamente, estructuras subcelulares y macromoléculas, algunas
proteínas específicas, etc.;
- microscopia confocal, aplicación de los láseres, microscopia multi-fotón permiten observación de las
estructuras en 3D incluso cuando están profundamente dentro del tejido.

8. ¿Cuáles son los pasos básicos de fluorescencia? ¿Cómo se diferencia de fosforescencia?

Fluorescencia es casi inmediata (intervalo de nanosegundos), mientras fosforescencia puede tardar un

tiempo prolongado después de la excitación, segundos, minutos o incluso más.

En los dos casos, el proceso tiene tres etapas principales:

- (paso 1): excitación de la molécula fotoluminiscente por la absorción de un fotón de longitud
de onda λ
 - (paso 2): transferencia disipativa de una parte de energía absorbida (relajación interna)
consecuencia de los cambios conformacionales e interacción con las moléculas circundantes. El
sistema alcanza el nivel más bajo de excitación.
- (paso 3): la emisión (i.e., relajación) de un fotón de longitud de onda λ’>λ, un fotón de energía
menor que la energía absorbida, y, regreso al estado fundamental. Se emite un fotón
fluorescente. Consecuencia de la transferencia es el desplazamiento de Stokes: el fotón
emitido es de una longitud mayor (i.e., energía menor) que el absorbido. Desplazamiento de
Stokes es término que se utiliza también para indicar la diferencia entre las longitudes de onda,
Δλ, entre los máximos de emisión y de absorción.

9. ¿A qué se refiere “desplazamiento de Stokes”?

Consecuencia de la transferencia es el desplazamiento de Stokes (George Gabriel Stokes): el fotón

emitido es de una longitud mayor (i.e., energía menor) que el absorbido. Desplazamiento de Stokes es
término que se utiliza también para indicar la diferencia entre las longitudes de onda, Δλ, entre los
máximos de emisión y de absorción.

10. ¿Cuál es la diferencia entre fluorocromos y cromóforos?

Fluorocromo es la sustancia, molécula, capaz de emitir fluorescencia.

Cromóforo: es la parte específica de la molécula del fluoróforo que permite emisión de un color típico
debido a las transiciones particulares.

11. Explique las diferentes fases del proceso de florescencia y de fosforescencia. (figura 8.2.17).

El fotón emitido es un fotón fosforescente y se puede observar en un corto periodo después de parar
la excitación de la muestre, segundos o incluso minutos. Debido a su estadía prolongada en el estado
triplete, y/o debido al cruzamiento entre los sistemas, la probabilidad de la relajación no radiactiva por
colisiones aumenta significativamente.

12. ¿Cuál es la diferencia entre fotoblanqueamiento y quenching?

Fotoblanqueamiento (photobleaching): es un proceso irreversible relacionado con la destrucción o una
modificación covalente de los fluorocromos debido a sus interacciones con las moléculas circundantes.

El quenching es la consecuencia de interacción entre los fluorocromos y las moléculas quencher (e.g.,
oxígeno, elementos halógenos) que resulta en la reducción del rendimiento cuántico y/o tiempo de
fluorescencia, y consecuente reducción reversible en la intensidad de la luz emitida. Se desarrollan sin
emisión de los fotones y sin cambio del espín, resultando en la disminución drástica de la emisión,
incluso su desaparición completa.

13. Explique las diferencias básicas (técnicas y de aplicación) entre TEM y SEM.

TEM funciona de forma análoga a un MO, pero en vez de luz utiliza un haz de electrones que atraviesan
la muestra

- En el TEM (Transmission Electron Microscope) se utilizan los electrones dispersados elástica e

inelásticamente, y los electrones transmitidos que atraviesan la muestra sin interactuar con sus
constituyentes. La cantidad de los electrones transmitidos sin interactuar está en la proporción
inversa con el espesor de la muestra, por tanto, las partes más gruesas dispersa más electrones
(menos electrones transmitidos) y aparece más oscura, mientras las partes más finas transmiten
más electrones y se visualizan como más claras en la imagen.
 TEM es una técnica potente pero costosa, compleja y requiere una preparación muy especial de la
muestra que fuertemente afecta los resultados del estudio. Los TEM modernos permiten una alta
resolución de solamente 0.1 nm en combinación con el voltaje de 300 kV.

La preparación de la muestra para observación en ME consiste en fijación, impregnación y corte, y

es la fase crítica ya que las más mínimas alteraciones, invisibles en MO, ahora si se hacen visibles.
Para hacer el proceso de fijación e impregnación más rápidos posible y evitar posibles
perturbaciones y artefactos, se trabaja con muestras del tejido muy pequeñas, menor de 1 mm3.
Una alternativa a la fijación e impregnación es uso de las muestras congeladas. Se utiliza la
criofijación, un congelamiento muy rápido que evita la formación de los cristales de hielo, que
permite la conservación de las estructuras biológicas.

- SEM. La movilidad de la parte óptica del microscopio electrónico de barrido permite escaneo de la
muestra (parte por parte en vez de “iluminarla” entera) durante la cual los electrones
incidentes producen distintas interacciones que resultan en la emisión de electrones y/o
fotones a través de la superficie del espécimen. Los electrones del haz incidente penetran la
muestra levemente de modo que la información obtenida está relacionada solamente con las
características de la superficie y con su topología (orificios, grietas, etc.).
las muestras que se analizan en SEM requieren una preparación especial: se secan y se le
proporciona una superficie conductora cubriendo la muestra con una capa fina metálica. El
proceso del secado es la fase crítica por las posibles perturbaciones o destrucción de la
muestra. Se utiliza secado de punto crítico que evita la destrucción producida por la tensión
superficial generada en la interfase entre los estados gaseosos y líquido.