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    Metodo de Aljanabi

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    El documento describe el Método de Aljanabi, un método simple, rápido y universal para extraer ADN genómico de alta calidad de diferentes organismos. Se homogeneiza el tejido en tampón de sal, se desnaturaliza con SDS y proteasa K, y se separan las fases con NaCl para aislar el ADN de alta calidad en el sobrenadante. Este método económico y reproducible produce ADN suficiente para técnicas como PCR sin necesidad de equipos costosos ni peligrosos para el medio ambiente.

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    Metodo de Aljanabi

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    El documento describe el Método de Aljanabi, un método simple, rápido y universal para extraer ADN genómico de alta calidad de diferentes organismos. Se homogeneiza el tejido en tampón de sal, se desnaturaliza con SDS y proteasa K, y se separan las fases con NaCl para aislar el ADN de alta calidad en el sobrenadante. Este método económico y reproducible produce ADN suficiente para técnicas como PCR sin necesidad de equipos costosos ni peligrosos para el medio ambiente.

    Descripción original:

    Reseña y cuadro sinoptico del metodo de aljanabi

    Título original

    METODO DE ALJANABI

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    El documento describe el Método de Aljanabi, un método simple, rápido y universal para extraer ADN genómico de alta calidad de diferentes organismos. Se homogeneiza el tejido en tampón de sal, se desnaturaliza con SDS y proteasa K, y se separan las fases con NaCl para aislar el ADN de alta calidad en el sobrenadante. Este método económico y reproducible produce ADN suficiente para técnicas como PCR sin necesidad de equipos costosos ni peligrosos para el medio ambiente.

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    El documento describe el Método de Aljanabi, un método simple, rápido y universal para extraer ADN genómico de alta calidad de diferentes organismos. Se homogeneiza el tejido en tampón de sal, se desnaturaliza con SDS y proteasa K, y se separan las fases con NaCl para aislar el ADN de alta calidad en el sobrenadante. Este método económico y reproducible produce ADN suficiente para técnicas como PCR sin necesidad de equipos costosos ni peligrosos para el medio ambiente.

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    METODO DE ALJANABI

    Para estudiar la sistemática molecular de cualquier organismo, se requiere ADN de alta calidad. Hasta ahora, no
    existe un procedimiento común y simple para la extracción de ADN genómico que pueda utilizarse a gran escala
    para diferentes organismos eucariotas. Por lo general, los tejidos diferentes (complicados) requerían diferentes
    protocolos y diferentes pasos de preparación del tejido. La necesidad de un procedimiento universal es urgente,
    especialmente cuando es necesario analizar cientos de muestras.
    Se describe un método muy simple, rápido, universalmente aplicable y reproducible para extraer ADN genómico de
    megabase de alta calidad de diferentes organismos. Aplicamos el mismo método para extraer ADN genómico
    complejo de alta calidad de diferentes tejidos (trigo, cebada, papa, frijoles, hojas de pera y almendro, así como
    tejido fresco de hongos, insectos y camarones) sin ninguna modificación.
    El método no requiere reactivos y equipos costosos y peligrosos para el medio ambiente. Se puede realizar incluso
    en laboratorios de baja tecnología. La cantidad de tejido requerida por este método es ~ 50-100 mg. La cantidad y
    la calidad del ADN extraído por este método es lo suficientemente alta como para realizar cientos de reacciones
    basadas en PCR y también para usarse en otras técnicas de manipulación de ADN como la digestión por restricción,
    la transferencia Southern y la clonación..
    La mayoría, si no todos los protocolos de extracción de ADN genómico, como el protocolo de extracción de ADN
    vegetal de Murray y Thompson y sus muchos derivados hasta ahora, los métodos de extracción de ADN genómico
    humano y la extracción de ADN genómico animal, requieren la uso de nitrógeno líquido y / o liofilización del
    tejido para la trituración inicial que son difíciles de obtener en regiones del mundo donde la mayoría de las
    colecciones de germoplasma de muchos organismos han evolucionado o pueden ser muestreadas.

    PARTIDA ZAZUETA CAROLINA


    19322755
    3-2
    INGENIERÍA GENÉTICA
    EXTRACCIÓN DE SAL UNIVERSAL Y RÁPIDA DE ADN GENÓMICO DE ALTA CALIDAD PARA TÉCNICAS
    BASADAS EN PCR

    METODO DE ALJANABI AMPLIFICACION


    Es un método simple, económico, rápido y Se usa ADN genómico (5-15 ng) en 10 ml
    universalmente aplicable y producible para PUREZA DEL ADN de ddH2O para amplificar RAPD del ADN
    extraer ADN genómico de mega base de A260/A280 PROMEDIO genómico y se incubaron diez
    alta calidad de distintos organismos. microgramos de cada muestra de ADN
    1,77 IGUAL POR LOS
    genómico durante la noche con 5 U de
    ORGANISMOS (TODOS) BamHI, EcoRI, HindIII y ClaI, y se
    analizaron en geles de agarosa al 1,5% para
    terminar se incuba durante 16 h para
    DESNATURALIZACION detectar actividad nucleasa
    El tejido fresco se homogeneizó en 400 µl
    de tampón homogeneizador de sal estéril
    (NaCl 0,4 M Tris-HCl 10 mM pH 8,0 y SOBRENADANTE
    LAVADO DE
    EDTA 2 mM pH 8,0); Utilizamos un
    homogeneizador de tejidos Polytron, ADN El sobrenadante se mueve a tubos nuevos.
    durante 10-15 s. Se lava el sedimento Ya que se añadió un volumen igual de
    con etanol al 70%, isopropanol a cada muestra se mezcla bien,
    secar y se resuspende se incuba a -20°C durante 1 hora para
    en 300-500 ml de
    dH2O estéril. luego centrifugar las muestras durante 20
    DESPROTEINIZACION min, 4 ° C, a 10000 g

    Se añaden y se mezlan 40 µl de SDS al FASE INT.


    20% (concentración final al 2%) y 8 µl de
    proteasa K 20 mg / ml (concentraciónes
    finales 2% y 400 µg / ml), posteriormente AISLAR ADN
    se incuban las muestras a 55-65°C durante
    1 hora por la noche y se agreagan 300 µl de
    SEPARACION Las muestras se agitaron con vórtex
    NaCl 6 M (H2O saturado con NaCl) a cada durante 30 s velocidad máxima y los tubos
    DE FASES
    muestra se centrifugaron durante 30 minutos a
    10000 g.

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