EFECTO ANTIBACTERIANO DE LOS EXTRACTOS ETANÓLICOS DE Piper

Aduncum "Matico" y Thymus Vulgaris "Tomillo" SOBRE Staphylococcus

Aureus ATCC 25923

1. AUTORES:
Sandra Jacqueline Rodriguez Cubas.
Karina Milagros Galán Fiestas.

1.1. RESUMEN
El objetivo del trabajo fue determinar el efecto antibacteriano el extracto
etanólico de Piper aduncum “matico” y Thymus vulgaris "tomillo" sobre
Staphylococcus aureus
Metodología: Se planteó un estudio de tipo cuantitativo, transversal con
diseño experimental de dos variables independientes y una dependiente; la
población de estudio estuvo conformada por Piper aduncum "matico" y
Thymus vulgaris "tomillo" y como muestra microbiológica se consideró
Staphylococcus aureus, se emplearon 4 kg de cada planta para la
preparación del extracto por medio de maceración y empleo el método de
difusión en pozo para la determinación del efecto antibacteriano.
Resultados: El extracto etanólico de matico al 50% y 100% sobre
Staphylococcus aureus fue de 20,53 + 0,29mm y 22,66 + 0,24mm
respectivamente, por otro lado, el extracto etanólico de tomillo al 50% y 100%
tuvo halos de inhibición promedio de 21,39 + 0,35mm y 25,33 + 0,27mm, así
mimo, el control negativo (etanol) obtuvo halo de inhibición de 6,01 + 0,28mm
y el control positivo de 32,50 + 0,33mm.
Conclusión: Los extractos etanólicos de Piper aduncum “matico” y Thymus
vulgaris "tomillo" a las concentraciones del 50% y 100% presentan efecto
antibacteriano sobre Staphylococcus aureus

1.1.1. OBJETIVO
Determinar el efecto antibacteriano el extracto etanólico de Piper
aduncum “matico” y Thymus vulgaris "tomillo" sobre Staphylococcus
aureus
1.1.2. METODOLOGÍA
Se planteó un estudio de tipo cuantitativo, transversal con diseño
experimental de dos variables independientes y una dependiente; la
población de estudio estuvo conformada por Piper aduncum "matico" y
Thymus vulgaris "tomillo" y como muestra microbiológica se consideró
Staphylococcus aureus, se emplearon 4 kg de cada planta para la
preparación del extracto por medio de maceración y empleo el método
de difusión en pozo para la determinación del efecto antibacteriano.

1.1.3. RESULTADOS
El extracto etanólico de matico al 50% y 100% sobre Staphylococcus
aureus fue de 20,53 + 0,29mm y 22,66 + 0,24mm respectivamente, por
otro lado, el extracto etanólico de tomillo al 50% y 100% tuvo halos de
inhibición promedio de 21,39 + 0,35mm y 25,33 + 0,27mm.

1.1.4. CONCLUSIONES
✓ Se determinó el efecto antibacteriano del extracto etanólico de Piper
aduncum “matico” sobre Staphylococcus aureus mediante la
formación del halo de inhibición a las concentraciones del 50%
(20,53 + 0,29mm) y al 100% (22,66 + 0,24mm)
✓ Se determinó el efecto antibacteriano del extracto etanólico de
Thymus vulgaris "tomillo" sobre Staphylococcus aureus y mediante
la formación del halo de inhibición a las concentraciones del 50%
(21,39 + 0,35mm) y al 100% (25,33 + 0,27mm).
✓ El efecto antibacteriano de los extractos etanólicos de Piper
aduncum “matico” y Thymus vulgaris "tomillo" no superó el efecto
antibacteriano del ciprofloxacino sobre Staphylococcus aureus.

1.1.5. PALABRAS CLAVES

➢ Extracto etanólico
➢ Piper aduncum
➢ Thymus vulgaris
➢ Staphylococcus aureus
ABSTRAC

OBJECTIVE: Determine the antibacterial effect of Piper aduncum "spiked

pepper" and Thymus vulgaris "german thyme" ethanolic extract on
Staphylococcus aureus.
METHODOLOGY: A quantitative, cross-sectional study with experimental design
of two independent variables and one dependent variable was proposed; the
study population consisted of Piper aduncum "spiked pepper" and Thymus
vulgaris "german thyme" and Staphylococcus aureus was considered as
microbiological sample, 4 kg of each plant were used for the preparation of the
extract by maceration and the Agar well diffusion method was used to determine
the antibacterial effect.
RESULTS: The spiked pepper (matico) ethanolic extract at 50% and 100% on
Staphylococcus aureus was 20.53 + 0.29mm and 22.66 + 0.24mm respectively,
on the other hand, the ethanolic extract of german thyme at 50% and 100% had
average inhibition halos of 21.39 + 0.35mm and 25.33 + 0.27mm, likewise, the
negative control (ethanol) obtained an inhibition halo of 6.01 + 0.28mm and the
positive control of 32.50 + 0.33mm.
CONCLUSION: The ethanolic extracts of Piper aduncum "spiked pepper" and
Thymus vulgaris "german thyme" at concentrations of 50% and 100% present
antibacterial effect on Staphylococcus aureus.
KEY WORDS: Ethanolic extract, Piper aduncum, Thymus vulgaris,
Staphylococcus aureus.

1.2. INTRODUCCIÓN
La especie Piper aduncum. se conoce popularmente como “matico” crece en
sitios parcialmente cubiertos de maleza y tiene diversas aplicaciones
terapéuticas como diurético, antipirético y como agente antiinflamatorio de
uso interno y externo en algunas regiones de la Amazonía peruana y
boliviana. De esta especie se ha aislado y caracterizado un gran número de
compuestos químicos como amidas, lignanos, neolignanos, hidroquinonas,
alcaloides, terpenos, compuestos oxigenados, y derivados del ácido
benzoico.1
Por otro lado, Thymus vulgaris L. es una planta distribuida ampliamente en
el mediterráneo y Asia, pertenece a la familia Lamiaceae, presentan diversas
actividades biológicas con acción antiséptica, expectorante, carminativa y
antiespasmódica relacionadas con el contenido en timol y carvacrol, que
constituyen 40 a 50 % del aceite esencial utilizado como antiséptico,
saborizante y antioxidante, el timol y el carvacrol presentan mayor actividad
antibacteriana y fungicida.2

Actualmente existe una problemática que ha surgido con la resistencia

bacteriana producida por microorganismos que se hacen insensibles al
ataque de los antibióticos, aumentado los casos de morbi-mortalidad, hasta
cifras tales que se ha considerado la resistencia bacteriana en estado de
alerta a nivel mundial, implementándose programas para combatirla esta
problemática en casi todos los países del mundo3.

Los antibióticos son fármacos que se utilizan para el tratamiento de

infecciones bacterianas. Algunas bacterias tienen la capacidad de mutar
frente al uso de estos medicamentos, produciéndose lo que se le conoce
como fármaco-resistencia, haciendo que las infecciones sean más difíciles
de controlar, provocando un aumento de los costos de medicamentos y
prolongando la estancia hospitalaria e incrementando el riesgo de muerte 4.
Staphylococcus aureus es uno de los microorganismos que más reportes
de resistencia bacteriana a reportado a los antimicrobianos según datos de
la OMS5.

Muchas infecciones como la neumonía, la tuberculosis, la septicemia, la

gonorrea o enfermedades de transmisión alimentaria, son cada vez más
difíciles de tratar, debido a que los medicamentos van perdiendo su eficacia,
teniendo que recurrir a medicamentos más caros, aumentando de esta
manera los costos de atención sanitaria y perjudicando la economía en las
familias y la sociedad4.

En Uruguay, en el año 2004 se notificó la presencia de una cepa de

Staphylococcus aureus meticilino-resistente, que infecto a 417 personas, al
menos un 80% fue por infecciones a nivel de piel, estas se trataron
ambulatoriamente y se reportó 4 fallecimientos6.
En los últimos años este microorganismo que se encuentra diseminado por
todo el medio ambiente es causante de muchas enfermedades en especial
intra o extra hospitalarias es causante de muchas muertes alrededor del
mundo en especial países subdesarrollados donde no existe un lineamiento
o una política de salud pública que nos pueda ayudar a revertir estos datos.
Su gran capacidad para adaptarse en sistemas u órganos hacen que este
microorganismo pueda ser muy mortal, tanto la OMS como otras
organizaciones tratan de proporcionar esquemas y tratamientos para poder
dar frente a estas enfermedades. Otro problema para estas organizaciones
es la resistencia del microorganismo hacia ciertos antibióticos esto se debe
al uso irracional de los antibióticos.7

En América, con mayor implicancia en cuanto a la resistencia de las cepas

de S. aureus en infecciones, llegando a presentarse hasta un 90% de
resistencia a la metilicina, lo que indica que el tratamiento habitual con los
antibióticos no funciona.8

En países como Estados Unidos y Canadá Staphylococcus aureus es el

responsable principal del 43% y hasta el 46% de todas las infecciones
producidas en la piel y partes blandas, además, en pacientes hospitalizados
es causante del 25 a 30% de los abscesos en los pacientes.9

En el Perú, García presentó un artículo donde encontró que el 50% de los S.

aureus aislados de hemocultivos de varios hospitales presentaban
resistencia a la meticilina, y que este tipo de infecciones tiene como factor
común relación con los servicios de salud.8

Además, se ha reportado en nuestro país que Staphylococcus aureus está

fuertemente involucrado en la infección bacteriana cutánea aguda, llamada
erisipela y probablemente actúa en sinergia con el estreptococo β hemolítico
produciendo ampollas, edema y descamaciones en la piel, dolor local y
fiebre.12

Con respecto a las bases teóricas del estudio tenemos que Piper aduncum
(matico), presenta en su aceite asarona y coneol. También, es usado para
matar mosquitos y moluscos. Contiene safrol, que se viene utilizando con
éxito en la fabricación de poderosos insecticidas, fragancias, jabones y
productos detergentes.18

P. aduncum se caracteriza por presenta amidas, fenilpropanoides, terpenos,

chalconas y dihidrochalconas, flavonas y compuestos adicionales que
abarcan derivados del ácido benzoico y sustancias cromógenas. 19

Por otro lado, Thymus vulgaris L. es un subarbusto de la familia Lamiaceae,

que es perenne y aromática, rica en aceite esencial, cuyo principal
componente es el timol. Es una planta introducida de Europa y en la medicina
tradicional peruana se conoce como 'tomillo' y se utiliza el aceite esencial
como antiséptico. Se ha demostrado que el extracto de esta planta tiene
efecto antiviral contra HSV-l, HSV- 2 y HSV-l resistente a aciclovir y efecto
relajante sobre anillos traqueales de cobayo comparable a teofilina; mientras
que el aceite esencial de Thymus vulgaris ha mostrado actividad
antibacteriana contra Staphylococcus aureus, Escherichia colí, Bacillus
cereus, Proteus vulgaris, Vibrio spp, Listeria monocytogenes,
Propionibacterium acnes; además, actividad citotóxica contra 3 líneas
celulares de cáncer humano -células de carcinoma de próstata humano (PC-
3), carcinoma pulmonar humano (A549) y cáncer de mama humano (MCF-
7) (11), y significativa actividad antioxidante.14

El aceite esencial de tomillo está compuesto principalmente por

monoterpenos oxigenados (timol, carvacrol y linalol) y monoterpenos
hidrocarbonados (y-terpineno, p-cimeno, -Pineno y -Tujueno) también
puede contener ésteres acéticos, cetonas y aldheídos. El tomillo ha sido muy
utilizado y recomendado desde la antigüedad. Comúnmente se usa como té
de hierbas, condimento y para diversos fines medicinales, esta propiedad se
atribuye a el AE de sus hojas; se usa como tónico, carminativo, digestivo,
antiespasmódico, antimicrobiano, antioxidante, antiviral, antiinflamatorio,
sedante y expectorante. El AE de tomillo presenta actividad antitumoral,
antibacteriana (frente a gram positivas y gram negativas), posee
propiedades antifúngicas y antioxidantes.15

Con respecto, a Staphylococcus aureus es una especie bacteriana

perteneciente a la familia Staphylococcaceae. son cocos grampositivos que
 miden de 0.5 a 1.5 micras de diámetro. En el microscopio se les encuentra
agrupadas en pares, tétradas, cadenas cortas o en forma de racimos de
uvas. Staphylococcus aureus coloniza mucosas, como los orificios nasales,
la boca, tracto gastrointestinal y la piel.20,21

1.3. MATERIAL Y MÉTODOS

Se planteó un estudio de tipo cuantitativo, transversal con diseño

experimental.

1.4. RESULTADOS
Tabla 1. Determinación del efecto antibacteriano del extracto etanólico
de Piper aduncum “matico” sobre Staphylococcus aureus
Descriptives

Diámetro del halo de inhibición (mm)

95% Intervalo de confianza

para la Media
Desv. Error
Límite Límite
N Media Estándar Estándar inferior superior Mínimo Máximo

Extracto. etanólico 15 20,53 0,29 0,07 20,37 20,69 20,00 21,20

Matico - 50%

Extracto. etanólico 15 22,66 0,24 0,06 22,53 22,79 22,30 23,00

Matico - 100%

Control negativo 15 6,01 0,28 0,07 5,86 6,17 5,60 6,70

(etanol)

Control positivo 15 32,50 0,33 0,09 32,32 32,68 31,70 32,90

(ciprofloxacino)

Fuente: SPSS ver. 26

En la interpretación de la tabla 1 se puede apreciar el análisis realizado a

los datos del tamaño del halo de inhibición del grupo experimental de matico
y grupos control, cada grupo de análisis mediante el programa SPSS versión
26 para obtener los datos estadísticos de media, desviación estándar, los
límites de confianza y valores máximo y mínimo encontrados de los valores
promedio de los halos de inhibición con respecto al obtenido por el extracto
etanólico de matico al 50% y 100% sobre Staphylococcus aureus fue de
20,53 + 0,29mm y 22,66 + 0,24mm respectivamente, por otro lado, el control
negativo empleado (etanol) obtuvo halo de inhibición de 6,01 + 0,28mm y el
control positivo obtuvo halo 32,50 + 0,33mm.

Tabla 2. Determinación el efecto antibacteriano del extracto etanólico

de Thymus vulgaris "tomillo" sobre Staphylococcus aureus
Descriptives

Diámetro del halo de inhibición (mm)

95% Intervalo de confianza

para la Media

Desv. Error
Límite Límite
N Media Estándar Estándar inferior superior Mínimo Máximo

Extracto. etanólico 15 21,39 0,35 0,09 21,20 21,58 20,80 21,90

Tomillo - 50%

Extracto. etanólico 15 25,33 0,27 0,07 25,18 25,47 25,00 25,90

Tomillo - 100%

Control negativo 15 6,01 0,28 0,07 5,86 6,17 5,60 6,70

(etanol)

Control positivo 15 32,50 0,33 0,09 32,32 32,68 31,70 32,90

(ciprofloxacino)

Fuente: SPSS ver. 26

En la interpretación de la tabla 2 se puede apreciar el análisis realizado a

los datos del tamaño del halo de inhibición de Thymus vulgaris "tomillo" y
grupos control, cada grupo de análisis mediante el programa SPSS versión
26 para obtener los datos estadísticos de media, desviación estándar, los
límites de confianza y valores máximo y mínimo encontrados de los valores
promedio de los halos de inhibición con respecto al obtenido por el extracto
etanólico de tomillo al 50% y 100% obtuvo halos de inhibición promedio de
21,39 + 0,35mm y 25,33 + 0,27mm, por otro lado, el control negativo
empleado (etanol) obtuvo halo de inhibición de 6,01 + 0,28mm y el control
positivo obtuvo halo 32,50 + 0,33mm.
 Tabla 3. Análisis de la varianza (ANOVA)

Diámetro del halo de inhibición

Suma de cuadrados df Media al cuadrado F p-valor.

Entre grupos 5665,753 5 1133,151 13065,243 0,000

Dentro de los grupos 7,285 84 0,087

Total 5673,038 89

Fuente: SPSS ver. 26

En la interpretación de la tabla 3 se observa la prueba de ANOVA o análisis

de la varianza aplicada a los grupos de los datos mediante el programa SPSS
versión 26, luego del análisis se observa un p-valor obtenido menor al nivel
de significancia del estudio; por lo tanto, la prueba nos confirma que existe
diferencia estadísticamente significativa en al menos uno de los grupos de
datos analizados.

Tabla 4. Análisis por sub grupos homogéneos mediante la prueba de

Tukey
Diámetro del halo de inhibición (mm)

Tukey HSDa

Subset for alpha = 0.05

Grupos de trabajo N 1 2 3 4 5 6

Control negativo (etanol) 15 6,0133

Extract. etanólico Matico - 50% 15 20,5333

Extract. etanólico Tomillo - 50% 15 21,3933

Extract. etanólico Matico - 100% 15 22,6600

Extract. etanólico Tomillo - 100% 15 25,3267

Control positivo (ciprofloxacino) 15 32,5000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 15,000.

Fuente: SPSS ver. 26

 La interpretación de la tabla 4, muestra un análisis complementario a la
prueba de ANOVA el cual se realizó mediante la prueba de Tukey por sub
grupos homogéneos, este análisis determinó diferencias estadísticamente
significativas entre todos los grupos de los datos mostrando en la tabla según
niveles el grado superior de estas según tamaño de halo de inhibición. Se
observa que el control positivo de ciprofloxacino obtuvo mayor efecto
inhibitorio sobre Staphylococcus aureus, seguido por las concentraciones al
100% de los extractos de tomillo seguidos por el matico.

1.5. DISCUSIÓN
Mediante el análisis de los resultados recolectados en el estudio con
respecto al tamaño del halo de inhibición formado en las placas Petri se logró
determinar el efecto antibacteriano el extracto etanólico de Piper aduncum
“matico” y Thymus vulgaris "tomillo" a las concentraciones del 50% y 100%
sobre Sthaphylococcus aureus, los resultados encontrados se discuten a
continuación.

Con respecto al objetivo determinar el efecto antibacteriano del extracto

etanólico de Piper aduncum “matico” sobre Sthaphylococcus aureus; se
obtuvo halos de inhibición de 20,53 + 0,29mm y 22,66 + 0,24mm para las
concentraciones del 50% y 100% respectivamente, estos resultados son
similares a los obtenidos por Mendoza M, (2019)14 en su estudio, el cual
evaluó el efecto antibacteriano del aceite esencial de P. aduncum “matico”
sobre S. aureus obteniendo halos de inhibición del aceite de matico a las
concentraciones de 75% (13.70mm) y 100% (16.50mm), observándose
mayor efecto en el extracto etanólico que en el aceite de esta planta.

Por otro lado, Ingaroca S, Castro A, Ramos N. (2019)15, determinar su

composición química, actividad antioxidante y efecto fungistático mediante
microdilución en caldo del aceite de matico, observando la presencia de
metileugenol, germacreno D, biciclogermacreno, β-cariofileno, δ- cadineno y
β-ocimeno y efecto fungistático; al parecer estos componentes aislados en
el estudio también inhibirían el crecimiento bacteriano sobre Staphylococcus
aureus.
En el estudio de Guayas J, Lazo P. (2020)16 evaluaron in vitro la actividad
antibacteriana de extractos etanólicos de U. tomentosa, Piper aduncum, A.
absinthium frente a E. coli. estudio realizado por Guayas J, Lazo P. (2020),
el estudio también demostró actividad antibacteriana del extracto etanólico
contra este microorganismo, lo que confirma su poder antimicrobiano al igual
que en la investigación realizada.

Con respecto al objetivo determinar el efecto antibacteriano del extracto

etanólico de Thymus vulgaris "tomillo" sobre Sthaphylococcus aureus; se
obtuvo halos de inhibición promedio de 21,39 + 0,35mm y 25,33 + 0,27mm
para las concentraciones del 50% y 100% respectivamente, estos resultados
se validan con el estudio realizado por Montero M, Mira C, Avilés D, Pazmiño
P, Erazo R, (2018)6, quienes evaluaron la eficacia antimicrobiana in vitro del
aceite esencial de tomillo (Thymus vulgaris) sobre Staphylococcus aureus
obteniendo halos de inhibición a las concentraciones del 5% y 10% de
15,35mm y 15,9 mm, lo que en proporción se mostrarían similares a los
resultados encontrados. De manera similar el estudio de Arratea B, Mamani
Y. (2017)12, muestra halos de inhibición de 15,7mm para el aceite al 100%
de Thymus vulgaris (tomillo) sobre Staphylococcus aureus, lo que se
contrapone a los resultados encontrados, pero se debe tener en cuenta el
tipo de producto obtenido de la especie vegetal (aceite y extracto etanólico)
Rasha M, Farkad M, Bashaer M, Ali A. (2020)8 en su estudio observaron los
resultados del extracto alcohólico de Thymus vulgaris en Staphylococcus
aureus el cual obtuvo halos de inhibición promedio de 20mm, 40mm, 27mm,
7mm y 30 mm para las concentraciones de, 10, 15 mg / ml, mostrándose
similar efecto antibacteriano en relación a sus halos de inhibición.

Lengyel E, Panasitescu M. (2019)15 con su estudio “Compuestos químicos

de Thymus vulgaris y su actividad antimicrobiana”, determinaron timol, α-
terpineol y terpineno, el timol observando del mismo modo, actividad
antibacteriana contra Staphylococcus aureus,
Los diferentes estudios mencionados coinciden de distinta manera que los
extractos etanólicos de Piper aduncum “matico” y Thymus vulgaris "tomillo"
presentan actividad contra diversos microrganismos incluyendo
 Staphylococcus aureus. De manera general ambas plantas poseen
numerosas propiedades mencionadas anteriormente que actúan como
principios antibacterianos o antifúngicos.

Por otro lado, al comparar el efecto antibacteriano de los extractos etanólicos

de Piper aduncum “matico” y Thymus vulgaris "tomillo" con ciprofloxacino
sobre Staphylococcus aureus, se observó que ambos extractos presentan
efecto menor al ciprofloxacino (control positivo).

El análisis estadístico realizados a los grupos de datos se realizó teniendo

en consideración sus valores promedio de medias, desviación estándar y
límites de confianza, por otro lado, se demostró el efecto antibacteriano al
comparar los halos de inhibición de los grupos mediante pruebas
inferenciales (ANOVA y Tukey) que permitieron determinar diferencias
estadísticamente significativas y aceptar la hipótesis del investigador.

Así mismo, se evaluó la sensibilidad que presenta Staphylococcus aureus a

los extractos y grupos control, observando en la tabla 6 que esta bacteria
presenta sensibilidad nula al control negativo de etanol y es Altamente
sensible a los extractos de Piper aduncum “matico” y Thymus vulgaris
"tomillo" a las concentraciones del 50% y 100%.

1.6. CONCLUSIONES
✓ Se determinó el efecto antibacteriano del extracto etanólico de Piper
aduncum “matico” sobre Staphylococcus aureus mediante la formación
del halo de inhibición a las concentraciones del 50% (20,53 + 0,29mm) y
al 100% (22,66 + 0,24mm)
✓ Se determinó el efecto antibacteriano del extracto etanólico de Thymus
vulgaris "tomillo" sobre Staphylococcus aureus y mediante la formación
del halo de inhibición a las concentraciones del 50% (21,39 + 0,35mm) y
al 100% (25,33 + 0,27mm).
✓ El efecto antibacteriano de los extractos etanólicos de Piper aduncum
“matico” y Thymus vulgaris "tomillo" no superó el efecto antibacteriano
del ciprofloxacino sobre Staphylococcus aureus.
1.7. AGRADECIMIENTOS
A los profesionales de ciencias de la salud que nos apoyaron en sus
conocimientos e instalaciones de laboratorio para culminar este trabajo de
investigación.

A esta prestigiosa universidad Franklin Roosevelt quien nos abrió las puertas
para culminar nuestro anhelo y a nuestros asesores que nos brindaron sus
experiencias y consejos para realizar el trabajo de investigación.

1.8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

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