1.09843.

5000
1.09843.9025 Preparación de las muestras
La toma de muestra debe ser realizada por personal especializado.
Microscopía Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la tecnología.
Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente.
Deben usarse instrumentos adecuados para la toma de muestras y en la
Neo-Clear® (sustituto de xileno) preparación, y deben seguirse las instrucciones del fabricante para la apli-
cación / el empleo.
para microscopía
Histoprocesamiento
Las muestras se fijan en Formaldehído en solución al 4 % o al 10 % (p. ej.
art. 100496) durante unas 8 horas, en función del tamaño de la muestra y
Solamente para uso profesional de las características, y se lavan a fondo en agua del grifo.

Preparación del reactivo

Neo-Clear® (sustituto de xileno) - para microscopía utilizado está listo para
Producto sanitario para diagnóstico in vitro el uso, la dilución de la solución no es necesaria.
Es posible que las soluciones de tinción, los colorantes sólidos y los kits
de ensayo utilizados para la tinción tengan que ser preparados. Esto viene
Finalidad prevista mencionado en las correspondientes instrucciones de empleo.
El presente “Neo-Clear® (sustituto de xileno) - para microscopía” es una
mezcla alifática de hidrocarburos C10-C12, que se puede usar para las
mismas aplicaciones que el xileno para el examen histológico, citológico y
bacteriológico de muestras de origen humano. Se emplea en el laboratorio
Historocesamiento
médico como intermedio para el histoprocesamiento (proceso de deshidra- Técnica
tación del tejido), la desparafinación de los cortes de parafina antes de la Las muestras se deshidratan cuidadosamente, el alcohol se elimina por tra-
tinción y la deshidratación de los cortes después de la tinción. tamiento con productos intermedios (p. ej. Neo-Clear®) solubles en alcohol
Si se usa Neo-Clear® en lugar de xileno, no son necesarios cambios de mé- y parafina. Esto asegura que el tejido quede completamente impregnado
todo, se puede trabajar también con los mismos tiempos para las distintas con parafina, y, después de la inclusión en bloque, se pueda cortar mejor.
etapas de trabajo. Si se utiliza Neo-Clear®, se debera aplicar después de
la tinción el medio de montaje Neo-Mount®, art. 109016, conveniente para Etanol 50 % 1 hora
este caso. Etanol 70 % 1 hora
Mediante reactivos auxiliares tomados de nuestra gama de productos se Etanol 70 % 1 hora
establecen las condiciones previas para que examinadores autorizados y
cualificados puedan realizar un diagnóstico correcto al final del proceso de Etanol 80 % 1 hora
obtención de un diagnóstico. En esto se emplean reactivos auxiliares IVD Etanol 90 % 1 hora
entre otras cosas para procesar material humano (p. ej. fijación, descal-
cificación, deshidratación, clarificación, parafinación / inclusión, monta- Etanol 100 % (desnaturalizado) 1 hora
je, microscopiado, archivado). En combinación con las correspondientes
soluciones de tinción se representan estructuras celulares que normalmente Etanol 100 % (desnaturalizado) 1 hora
disponen de poco contraste, posibilitándose de esta manera que puedan ser Etanol 100 % (desnaturalizado) 1 hora
valoradas mediante la microscopía de luz. Tal vez se requieren exámenes
más complejos para un diagnóstico final. Neo-Clear® 1 hora
Neo-Clear® 1 hora
Principio
Para la producción de cortes muy finos para la microscopía de luz transmiti- Parafina, Histosec o Histosec (sin DMSO)
® ®
2 horas
da, el tejido humano ha de ser llevado a un estado lo suficientemente sólido a 60 °C
y con el correspondiente entorno. Por regla general (en la mayoría de los Parafina, Histosec® o Histosec® (sin DMSO) 3 horas
casos), esto se consigue a través de la llamada parafinación (penetración a 60 °C
del tejido con parafina líquida) y la inclusión en un bloque de parafina.
Para este fin, primero se hace necesaria la deshidratación del tejido en la Si las muestras están impregnadas de parafina, se vierten e incluyen en
serie ascendente de alcohol hasta el 100 %. Después del último paso de moldes adecuados.
alcohol y antes de la introducción en parafina líquida, hay que emplear un
disolvente que sea disoluble tanto en alcohol como en parafina, el llamado
Resultado
“intermedio”. Neo-Clear® es un intermedio de este tipo.
Las muestras incluidas en parafina (bloquecitos de parafina) se almacenan
Neo-Clear® también es necesario para volver a desincorporar de cortes de
en lugar refrigerado, ya que esto mejora la capacidad de corte.
parafina la parafina antes de proceder a la tinción con soluciones acuosas
De las muestras incluidas en parafina, se preparan con el micrótomo cortes
de colorantes y preparar de esta manera los cortes para la serie descenden-
delgados, llamados “cortes parafínicos” (en el sector de µm).
te de alcohol.
Por fin, hay que volver a deshidratar los cortes de tinción acuosa antes del
montaje (vitrificación) en la serie ascendente de alcohol, en cuya termina-
ción se emplea de nuevo Neo-Clear®. Tinción
Importante es que Neo-Clear® reacciona más sensiblemente con turbidez
Técnica
que el xileno al agua o a las trazas de agua, esto está relacionado con la Tinción de cortes de parafina en la cubeta de tinción
estructura de Neo-Clear®. Por esto hay que poner atención en que no se Los cortes de parafina son desparafinados y rehidratados, así como teñidos
usen disolventes de calidades de grado técnico juntamente con Neo-Clear®. y procesados con otros materiales de diagnóstico in vitro pertenecientes a
Neo-Clear® tiene una pequeña tasa de evaporación y solamente huele un nuestra cartera después de las usuales prescripciones de tinción histológi-
poco, de manera que la molestia por olores en el laboratorio queda conside- cas y de acuerdo con las descripciones contenidas en las correspondientes
rablemente reducida. instrucciones de empleo.
Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los
Material de las muestras diferentes pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario
Como material de partida se emplean tejido fijado en formalina e incluido arrastre de soluciones.
en parafina (bloques de parafina) y cortes de parafina (con un espesor de Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los
3 - 5 µm) así como material de frotis citológico y bacteriológico. períodos indicados.
Después de la tinción los cortes se deshidratan en alcohol y se aclaran en
Reactivos Neo-Clear® para a continuación ser conservados con adecuados medios de
montaje para fines de diagnóstico y almacenamiento.
Art. 109843
Neo-Clear® (sustituto de xileno) 5 l, 25 l
para microscopía

Necesario además:
Art. 109016 Neo-Mount® frasco gotero de
medio de montaje anhidro 100 ml, 500 ml
para microscopía 500 ml
Ejemplo de desparafinación, rehidratación y posterior tinción de H y Notas sobre el empleo
E con hematoxilina y eosina Solamente para uso profesional.
Para evitar errores, la aplicación debería ser realizada por personal especia-
Portaobjetos con corte de parafina lizado.
Neo-Clear® 5 minutos Deben cumplirse las directivas nacionales sobre seguridad en el trabajo y
aseguramiento de la calidad.
Neo-Clear ®
5 minutos
Etanol 100 % 30 segundos Protección contra infecciones
Debe observarse a toda costa una protección eficaz contra infecciones de
Etanol 100 % 30 segundos acuerdo con las directivas de laboratorio.
Etanol 96 % 30 segundos
Indicaciones para la eliminación de residuos
Etanol 96 % 30 segundos
El envase debe ser eliminado de acuerdo con las directivas válidas de elimi-
Etanol 70 % 30 segundos nación de residuos.
Las soluciones usadas y las soluciones caducadas deben eliminarse como
Etanol 70 % 30 segundos desecho peligroso, debiéndose cumplir las directivas locales de eliminación
Agua destilada 1 minuto de residuos. Podrá pedirse información sobre los procedimientos de elimina-
ción bajo el Quick Link “Hints for Disposal of Microscopy Products” en
Hemalumbre en solución según Mayer www.microscopy-products.com. Dentro de la UE tiene validez el REGLA-
o 3 minutos MENTO (CE) Nº 1272/2008 sobre la clasificación, el etiquetado y el
envasado de sustancias y mezclas, por el que se modifican y derogan las
Solución de hematoxilina modificada según Gill III
Directivas 67/548/CEE y 1999/45/CE y se modifica el Reglamento (CE) Nº
Ácido clorhídrico al 0,1 %, acuoso 2 segundos 1907/2006.

Agua corriente del grifo 3 - 5 minutos

Reactivos auxiliares
Eosina A al 0,5% en solución acuosa, solución de 3 minutos Art. 100316 Ácido clorhídrico 25% 1 l, 2,5 l
trabajo acidificada para análisis EMSURE®
Agua corriente del grifo 30 segundos Art. 100496 Formaldehído en solución 4%, 350 ml y 700 ml
tamponado, pH 6,9 (aprox. 10% de (en frasco de
Etanol 70 % 1 minuto formalina en solución) cuello ancho),
para histología 5 l, 10 l,
Etanol 70 % 1 minuto
10 l Titripac®
Etanol 96 % 1 minuto Art. 100983 Etanol absoluto 1 l, 2,5 l, 5 l
para análisis EMSURE®
Etanol 96 % 1 minuto ACS,ISO,Reag. Ph Eur
Etanol 100 % 1 minuto Art. 103699 Aceite de inmersión Type N según ISO 8036 frasco gotero de
para microscopía 100 ml
Etanol 100 % 1 minuto
Art. 103999 Formaldehído en solución mín. 37% 1l, 2,5 l, 25 l
Neo-Clear® 5 minutos exento de ácido
estabilizado con aprox. 10% de metanol y
Neo-Clear ®
5 minutos carbonato cálcio
Montar con Neo-Mount® los preparados humedecidos con Neo-Clear® y para histología
cubre-objetos. Art. 104699 Aceite de inmersión frasco gotero de
para microscopía 100 ml, 100 ml,
500 ml
Para el análisis de preparados teñidos con un aumento microscópico >40x
se recomienda el uso de aceite de inmersión. Art. 105174 Hematoxilina en solución modificada 500 ml, 1 l,
según Gill III 2,5 l
para microscopía
Resultado Art. 109016 Neo-Mount® frasco gotero de
Núcleos celulares azul oscuro hasta violeta oscuro medio de montaje anhidro 100 ml, 500 ml
Citoplasma, sustancias intercelulares rosa a rojo para microscopía
Eritrocitos amarillo a naranja Art. 109249 Hemalumbre en solución según Mayer 500 ml, 1 l,
para microscopía 2,5 l
Notas técnicas Art. 109844 Eosina A al 0,5% en solución acuosa 1 l, 2,5 l
para microscopía
Los aparatos usados deberían corresponder a los requisitos de un laborato-
rio de diagnóstico médico. Art. 111609 Histosec® pastillas 1 kg, 10 kg (4x
Deben observarse las observaciones de los modos de empleo de los punto de solidificación 56-58°C 2,5 kg), 25 kg
aparatos, de las instrucciones de mantenimiento y las SOPs internas del medio de inclusión para histología
laboratorio para cada cambio de baño. Art. 115161 Histosec® pastillas (sin DMSO) 10 kg (4x
punto de solidificación 56-58°C, 2,5 kg), 25 kg
Controlar regularmente los baños de parafina, cambiar regularmente la pa- medio de inclusión para histología
rafina, poner atención a que se mantenga la temperatura de trabajo óptima
de los baños de parafina (4 °C sobre el punto de solidificación).
Clasificación de substancias peligrosas
No sobrellenar con material las cassettes de parafina, llenar suficientemen-
te con parafina. Art. 109843
Han de observarse las instrucciones de empleo del fabricante del micrótomo Tener en cuenta la clasificación de substancias peligrosas en la etiqueta y
y del procesador histológico. las indicaciones en la ficha de datos de seguridad.
Afilar o cambiar la cuchilla del micrótomo a su debido tiempo. La ficha de seguridad está disponible en el sitio web y a solicitud.

Diagnóstico Componentes principales del producto

Los diagnósticos deberán ser establecidos solamente por personas autoriza- Art. 109843
das y cualificadas. Mezcla de hidrocarburos alifáticos C10-C12
Deberán emplearse terminologías vigentes. CAS 64742-49-0
Se trata de un reactivo auxiliar que permite la evaluación de material hu-
mano a nivel de diagnóstico junto con otros medios de diagnóstico in vitro,
como p. ej. soluciones de tinción. Otros productos de IVD
Deberán elegirse y realizarse ensayos ulteriores según métodos reconoci- Art. 101646 Kit de tinción PAS 2x 500 ml
dos. para detección de aldehídos y
Cada aplicación debería implicar controles adecuados para descartar resulta- mucosustancias
dos erróneos. Art. 102439 Eosina A al 0,5% en solución alcohólica 500 ml, 2,5 l
para microscopía
Almacenamiento Art. 102560 ISOSLIDE® AFB Preparados de control 25 tests
Guardar el Neo-Clear® (sustituto de xileno) - para microscopía para histolo- con tejido de referencia para la detección
gía de +15 °C a +25 °C. de bacilos acidorresistentes en tejido
histológico
Estabilidad Art. 105175 Hematoxilina en solución modificada 500 ml, 2,5 l
según Gill II
El Neo-Clear® (sustituto de xileno) - para microscopía se puede utilizar has-
para microscopía
ta la fecha de caducidad indicada.
Art. 107164 Parafina pastillas 10 kg (4x
Después de abrir el envase por primera vez, el contenido almacenado entre
punto de solidificación aprox. 56-58°C 2,5 kg)
+15 °C y +25 °C es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada.
para histología
Los envases deben mantenerse siempre bien cerrados.
Art. 108298 Xileno (mezcla de isómeros) 4l
para histología
Art. 117081 Eosina A - Solución al 1%, alcohólica 1l
para microscopía
Aviso general
Si se produce un incidente grave durante el uso o a causa del mismo, sírva-
se informar al fabricante y / o a su apoderado y a su autoridad nacional.

Literatura
1. R omeis - Mikroskopische Technik, Editors: Mulisch, Maria, Welsch, Ulrich,
2015, Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 19. Auflage
2. Histotechnik, Gudrun Lang, 2013 Springer Verlag, 2. Auflage
3. Routine Cytological Staining Techniques: Theoretical Background and
Practice, Mathilde E. Boon, Johanna S. Drijver, 1986, Elsevier Science
Publishing Company

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