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    Guia de Practica Sesion 03

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    Leonardo Ramos Blas
    La práctica de laboratorio evalúa el metabolismo de la glucosa mediante una prueba de tolerancia oral a la glucosa en dos estudiantes voluntarios. También demuestra la acción de la lipasa pancreática en la digestión de los triglicéridos y el efecto de las sales biliares a través de la titulación de muestras tratadas con enzimas pancreáticas y sales biliares. El objetivo es comprender mejor estos procesos bioquímicos a través de la interpretación y discusión de los resultados obtenidos.

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    La práctica de laboratorio evalúa el metabolismo de la glucosa mediante una prueba de tolerancia oral a la glucosa en dos estudiantes voluntarios. También demuestra la acción de la lipasa pancreática en la digestión de los triglicéridos y el efecto de las sales biliares a través de la titulación de muestras tratadas con enzimas pancreáticas y sales biliares. El objetivo es comprender mejor estos procesos bioquímicos a través de la interpretación y discusión de los resultados obtenidos.

    Título original

    GUIA DE PRACTICA SESION 03

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    La práctica de laboratorio evalúa el metabolismo de la glucosa mediante una prueba de tolerancia oral a la glucosa en dos estudiantes voluntarios. También demuestra la acción de la lipasa pancreática en la digestión de los triglicéridos y el efecto de las sales biliares a través de la titulación de muestras tratadas con enzimas pancreáticas y sales biliares. El objetivo es comprender mejor estos procesos bioquímicos a través de la interpretación y discusión de los resultados obtenidos.

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    La práctica de laboratorio evalúa el metabolismo de la glucosa mediante una prueba de tolerancia oral a la glucosa en dos estudiantes voluntarios. También demuestra la acción de la lipasa pancreática en la digestión de los triglicéridos y el efecto de las sales biliares a través de la titulación de muestras tratadas con enzimas pancreáticas y sales biliares. El objetivo es comprender mejor estos procesos bioquímicos a través de la interpretación y discusión de los resultados obtenidos.

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      FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
    PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA 

     
    MATERIAL INFORMATIVO 
    Programa de 
    MEDICINA  Sesión N°3 
    Estudios/Programa 
    Experiencia Curricular:  BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR  Semestre 2022‐1 
    Contenido temático:  PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA Y ACCIÓN DE LA LIPASA PANCREÁTICA Y SALES 
    BILIARES 
    Docente:   
    Tipo de Material 
    GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO 
    Informativo 
     
    PRÁCTICA N° 3. PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA Y ACCIÓN DE LA LIPASA PANCREÁTICA Y 
    SALES BILIARES 
     
    I. OBJETIVOS 
    Evaluar el metabolismo de la glucosa para descartar resistencia a la insulina o diagnosticar 
    diabetes. 
    Demostrar la acción de la lipasa pancreática sobre los triglicéridos y el efecto de las sales 
    biliares. 
     
    II. MATERIALES 
    Cronómetro, Lanzetas, Torundas de algodón, Glucómetro, Tiras reactivas de glucosa, 250 
    ml de solución de glucosa al 30%, Vaso, Hoja de papel milimétrico y Regla. 
    Aceite de oliva extra virgen, tubos de ensayo, gradillas, agua destilada, Buffer fosfato 0.1 
    M pH 8.0, Solución de sales biliares 1%, Solución de extracto pancreático 1%, baño María, 
    fenolftaleína, solución de NaOH 0.1N 
     
    III. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA 
    Prueba de Tolerancia a la Glucosa 
     Previamente, 2 estudiantes voluntarios vienen en ayunas de por lo menos 8 horas, tres días 
    antes debe de haber ingerido una dieta rica en carbohidratos. 
     A cada uno de los estudiantes, se le toma una muestra basal. 

    1 
     
       FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
    PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA 

     Inmediatamente, se les administra, vía oral, 75 gr de glucosa en 250 ml de agua (con o sin 
    limón). Deben beberlo en un máximo de 5 minutos. 
     Luego  se  toma  una  muestra  a  los  30,  60,  90  y  120  minutos  y  se  determina  la  glicemia 
    utilizando glucómetro, haciendo la lectura correspondiente. 
     Trabajar en grupo y hacer una gráfica de glicemia vs tiempo con los resultados de la práctica. 
     Interpretar los resultados, considerando los valores de referencia: 
    ‐ Normal: Basal: de 70 a 99 mg/dl; 1 Hora: < 200 mg/dl; 2 horas: < 140 mg/dl  
    ‐ Intolerancia a la glucosa: a las 2 horas 140 a 199 mg/dl  
    ‐ Diabetes: a las 2 horas >= 200 mg/dl 
    El docente realiza preguntas para conocer la interpretación de cada grupo: 
    ¿Cómo se está metabolizando la glucosa en los estudiantes analizados? 
    ¿Porqué se regula la glicemia? 
    ¿Qué es el índice glicémico? 
    (Otras preguntas que considere conveniente) 
     
    Acción de la lipasa pancreática sobre los triglicéridos y efecto de las sales biliares 
    1) Preparar el siguiente sistema, empleando tubos de ensayo de 25 x 150 mm. 
    COMPONENTES  Tubo 1  Tubo 2  Tubo 3  Tubo 4 
    (ml)  (ml)  (ml)  (ml) 
    Emulsificación de aceite vegetal (ml)  ‐‐  3  3  3 
    Buffer fosfato 0.1 M pH 8.0  2  2  2  2 
    Solución de sales biliares 1%   2  2  ‐‐  2 
    Solución de extracto pancreático 1%  2  ‐‐  2  2 
    Agua destilada  3  2  2  ‐‐ 
    Mezclar cada uno de los tubos por inversión. Llevar a baño maría a 37 °C por 30 minutos, 
    agitando de vez en cuando. 
    Al  finalizar  el  tiempo  de  incubación  retirar  los  tubos  y  agregar  a  cada  uno  3  gotas  de 
    fenolftaleína. Mezclar bien por inversión y realizar la titulación. 
    Titulación: empleando una pipeta dejar caer gota a gota, hidróxido de sodio (NaOH 0.1N) 
    en el fondo de cada tubo, mezclar bien por inversión hasta la aparición de un color rosado 
    tenue persistente.  

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       FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD 
    PROGRAMA ACADÉMICO DE MEDICINA 

    2) Anotar la cantidad de gotas de NaOH empleado en cada tubo. 
     
    Trabajar en grupo para analizar los resultados obtenidos. 
    El docente realiza preguntas para conocer la interpretación de cada grupo: 
    ¿Cómo actúa la lipasa pancreática en la digestión de los lípidos? 
    ¿En qué tubos se observa la acción de las sales biliares en la digestión de los lípidos? 
    ¿Por qué existe diferencia en la cantidad de gotas de NaOH en los tubos? 
    (Otras preguntas que considere conveniente) 
     
    IV. CONCLUSIONES 
    El estudiante debe plantear las conclusiones, en base al análisis de los resultados 
    obtenidos en el desarrollo de la práctica de laboratorio. 
    La conclusión es una afirmación en respuesta a los objetivos. 
     
    V. EVALUACIÓN 
    Según rubrica de evaluación (Anexos) 
     
    VI. BIBLIOGRAFÍA 
    1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.  
    2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición, Editorial Omega, 
    España, 2011  
     
     
     

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