Métodos de Enumeración e Identificación de Microorganismos

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR
DOCENTE: YUMAR RUIDIAZ ING. AGROINDUSTRIAL

MICROBIOLOGIA AÑO: 2022-2
MÉTODOS DE ENUMERACIÓN E IDENTIFICACIÓN DE

MICROORGANISMOS
EN LOS ALIMENTOS. MICROORGANISMOS INDICADORES
RECUENTO DE AEROBIOS MESÓFILOS.
AUTORES
CARRASCAL JUAN PABLO
CHICA CABADIAS FERNEY YESITH
PEREZ CONTRERAS KEVIN FABIAN
JAIME PAREDES JESUS DANIEL
GONZALEZ OÑATE DAYANNYS YISETH
GONZALEZ OÑATE DORAIDYS PAOLA
DOCENTE: YUMAR RUIDIAZ MENDE

MICROBIOLOGIA AGROINDUSTRIAL
GRUPO: 02
SEMESTRE: 2022 – 2
1
INTRODUCCION:
Es importante comprender el impacto de los microorganismos en la salud
humana y determinar cómo, a través de quién y qué microorganismos amenazan
la calidad e inocuidad de los alimentos. Las investigaciones actuales sobre la
identificación de microorganismos en los alimentos confirman que el consumo
de agua y alimentos contaminados sigue siendo una de las principales causas
de enfermedad en el mundo. Un estudio realizado por el Grupo de referencia
epidemiológica de la carga de enfermedades transmitidas por los alimentos
(FERG) de la Organización Mundial de la Salud (OMS) estima que las
enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA) causan 600 millones de
enfermedades, 420 000 muertes y 33 millones de años de vida anuales ajustados
por discapacidad (AVAD). , el alimento de origen animal es el alimento con mayor
incidencia y es la principal fuente de ETA a nivel mundial, como norovirus,
Especies no tifoideas de Salmonella y Campylobacter." iris.paho.org. (5 de mayo
de 2021). Obtenido de iris.paho.org:
https://iris.paho.org/bitstream/handle/10665.2/53292/9789275323250_spa.pdf?
sequence=1&isAllowed=”. Los problemas alimentarios en general
representan un gran riesgo para la salud pública por la contaminación directa de
los alimentos, la contratación pública en el mercado, ya que es una actividad muy
extensa a nivel mundial, debido a que el costo de su producto es tan alto como
la demanda de su alimento. muchas personas reaccionan directamente al
producto, por lo que se han logrado una serie de movilidades inducidas por
alimentos (ETA) a nivel mundial. El procedimiento de trabajo consiste en tomar
muestras de alimentos y preparar diluciones en serie en base 10, luego inocular
estas diluciones en placas profundas, incubar a temperatura moderada y contar
colonias en el rango de 77 a 86 colonias después de un cierto período.
OBJETIVOS:
Objetivo general:
• Analizar y determinar la presencia o ausencia de mesófilos aerobios en
diferentes muestras de alimentos
Objetivos específicos:
• Identificar y diferenciar microorganismos aerobios de facultativos
mesófilos en diferentes muestras de alimentos
2
MATERIALES:
❖ Tubos de ensayo tapa rosca ❖ Incubadoras a 37°C ±2 °C

❖ Bolsas plásticas estériles ❖ Lo necesario para la preparación y dilución de los
❖ Agua peptonada al 0.1% estéril. homogenizados de los alimentos
❖ Agar Plate Count ❖ Muestra de alimentos: jugo hit
❖ Cajas de petri estériles
❖ Pipetas, puntas azules, micropipetas, mecheros,
Erlenmeyer,
PROCEDIMIENTOS:
Desinfectamos el área de trabajo, encendemos el mechero procedimos a desenvolver
las cajas petri estéril, rotulamos con fecha el nombre del alimento, la siembra y las
diluciones, luego utilizamos la micropipeta para asegurarnos de graduarla bien a 1ml,
sacamos las puntas azules que utilizaremos, tomamos los 90ml de agua peptonada le
adicionamos 10ml de jugo hit al gua peptonada asegurándonos de haber mezclado
mínimo 25 veces el jugo hit, mezclamos el agar plate count hasta obtener a
temperatura ambiente, procederemos a colocarnos los guantes, tomamos una
micropipeta y le pondremos las puntas azules, seguimos a tomar 1ml de jugo hit y se
lo adicionamos a las dilución 10-0, luego añadimos 10 veces 1ml de jugo hit al agua
peptonada, mezclamos en gua peptonada con el jugo hit que le adicionamos, hasta
lograr homogenización de toda la mezcla, procedimos adicionar 1 ml de la mezcla
alas disoluciones 10-1, luego sacamos 1ml de mezcla al tubo que contine 9ml para
realizar la dilución de 10-2, de esa dilución procedemos a echar 1ml a las cajas petri
10-1,mezclamos las cajas petri 5 veces cada una de varias manera hasta
homogenizar, se le añade agar plate count a todas las diluciones y se mezclan,
dejamos que se solidifiquen y procedemos a lleva el medio de cultivo estándar plate
count para realizar el conteo de colonias, en el resultado de mesófilos aerobios se
obtuvieron un total de colonias de 77(10-2) y 86 (10-2).
RESULTADOS Y DISCUSION:
Cajas de petri después de su incubación correspondiente
3
Mesófilos aerobios:
Caja de petri #1 Caja de petri #2
Datos: dilución de Datos: dilución de 𝟕𝟕 + 𝟖𝟔 𝟏𝟔𝟑
estudio 10−2 estudio 10−2 = = 𝟏𝟒𝟖𝟏𝟖, 𝟏 "𝟏, 𝟓"
𝟏𝒙𝟏, 𝟏𝒙𝟏𝟎– 𝟐 𝟎, 𝟎𝟏𝟏
Tipo de muestra: Tipo de muestra:
1,5x𝟏𝟎𝟐 UFC/gr de jugo hit
alimento solido alimento solido
Caja 1: 77 Caja 2: 86 colonias Este resultado quiere decir que nuestro
colonias (dentro cultivo de jugo hit contiene una alta cantidad
de una región) de microorganismos mesófilos.
Discusión:
Analizando los resultados obtenidos en el procedimiento anterior se obtuvieron
diferentes resultados, por ejemplo, se comprobó si la materia prima podía estar
excesivamente contaminada. Así que nosotros, como ingenieros agrícolas,
solemos pensar en él como un producto perecedero o de larga duración. Pero la
realidad es que estos alimentos contienen muchos microorganismos, los más
importantes son los hongos y las levaduras. Como ingenieros agrícolas, nos
aseguramos de que la leche en polvo pueda pasar a través de nuevos sistemas
de campo magnético para extender la vida útil de dichos productos alimenticios.
Conclusión:
El número de microorganismos aerobios mesófilos en los alimentos se puede
determinar correctamente, de acuerdo con la dilución de la suspensión de 10^(-2),
cada muestra tenía un número correspondiente de microorganismos muy paciente,
pudimos entender que cada punto blanco es una colonia, y si se juntan dos o más
manchas blancas, se considera colonia. Los recuentos microbianos fueron exitosos.
También concluimos que un alimento, aunque no sea perecedero, siempre será
Los microorganismos que se encuentran en su interior, ya sean mesófilos o no,

nuestro papel como ingenieros agroindustriales servirá además para aplicar las
tecnologías necesarias para alargar la vida de dichos productos alimenticios.
Referencias
ISO 4833 Directiva general para el recuento de microorganismos. Método por
recuento de colonias a 30º C Este método se basa en la siembra en profundidad en
un medio de cultivo definido, vertido en dos placas de Petri, con una cantidad
determinada de muestra si el producto a examinar es líquido, o con una cantidad
determinada de suspensión madre en el caso de otros productos. En las mismas
condiciones, siembra de las diluciones decimales obtenidas de la muestra o de la
4
suspensión madre. Incubación a 30º C, en aerobiosis durante 72 horas. A partir del

número de colonias obtenidas en las placas de Petri, calcular el número de
microorganismos por mililitro o por gramo de muestra
AF V 08-051 Método de rutina para el recuento de microorganismos. Método de
recuento de las colonias a 30º C Este método se basa en la siembra en profundidad
en un medio de cultivo definido, vertido en una placa de Petri, con una cantidad
determinada de muestra si el producto a examinar es líquido, o con una cantidad
determinada de suspensión madre en el caso de otros productos. En las mismas
condiciones, siembra de las diluciones decimales obtenidas de la muestra o de la
suspensión madre. El recuento podrá ser realizado utilizando un sembrador espiral
(NF V08-100) Incubación a 30º C, en aerobiosis durante 72 horas. A partir del número
de colonias obtenidas en las placas de Petri escogidas, calcular el número de
microorganismos por mililitro o por gramo de muestra.
Comparación Con Otros Actores
➢ Identificación de aerobios mesofilos en embutidos realizado por Cconchoy
Mosqueira, Veronica 032767F Lázaro Llacua, Marisa 070784A Pacheco
Huamán, Karin Isabel 070778A Tupia Montes María luisa 101005I Sicha
Evaristo, AngélicaLa cantidad en nuestra muestra fue de 145000 UFC/ml, la
cual era mayor al L.M.P, por ello no era apto para el consumo humano.
comparado con nuestro analisis microbiologico de mesofilo tampoco es apto
para el consumo humano ya que cuenta con una alta cantidad de l.m.p en el
liquido analizado.
➢ identificacion de aerobios mesofilos en el pollo crudo realizado por angie

zarabia. La cantidad en nuestra muestra fue de 145000 UFC/ml, la cual era
mayoralL.M.P, por ello no era apto para el consumo humano.Para nuestra
muestra que fue pollo crudo, se calculó el numero de UFC/g. El cualen
superficie nos dio 5,6x 10-4 UFC/g y en profundidad 1,28x 10-5 UFC/g.Los
parámetros nos dicen que en carne de pollo cruda, el número de
aerobiosmesófilos en un alimento apto para el consumo humano debe ser
entre 10-5 y 10-7 UFC/g.
Podemos concluir que el pollo esta en una condición de rechazo ya que uno de
losrecuentos dio mayor a 10-5
Las altas UFC de mesófilos, en el pollo puede explicarse, ya que en
cualquiermomento se pudo contaminar nuestra muestra. Ya que había gran
cantidad depersonas cerca a nuestra zona de trabajo.
Bibliografía:
iris.paho.org. (5 de mayo de 2021). Obtenido de iris.paho.org:
https://iris.paho.org/bitstream/handle/10665.2/53292/9789275323250_spa.pdf?sequence=1
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5
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25562005000100004#:~:text=El%20t%C3%A9rmino%20levadura%20se%20refiere,fase%20sex
ual%20perfecta%20o%20teleomorfa.
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ØLUNA, G. (1998). Manual Operativo de análisis microbiológico para alimentos universidad de

Pamplona 1998.
ØAnálisis microbiológico de alimentos por International Commission on Microbiological

Specifications for Foods (ICMSF)" ICMSF – 2000.
ØNTC 4132 guia general para el recuento de mohos y levaduras, tecnica de recuento de
colonia a 25°C
Anexos:
6

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❖ Tubos de ensayo tapa rosca ❖ Incubadoras a 37°C ±2 °C

Los microorganismos que se encuentran en su interior, ya sean mesófilos o no,

suspensión madre. Incubación a 30º C, en aerobiosis durante 72 horas. A partir del

➢ identificacion de aerobios mesofilos en el pollo crudo realizado por angie

latan, f. n. (15 de mayo de 2015). lacteoslatam.com. Obtenido de lacteoslatam.com:

Mendoza, M. (10 de agosto de 2005). ve.scielo.org. Obtenido de ve.scielo.org:

Pilar, M. (12 de diciembre de 2005). redalyc.org. Obtenido de redalyc.org:

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ØLUNA, G. (1998). Manual Operativo de análisis microbiológico para alimentos universidad de

ØAnálisis microbiológico de alimentos por International Commission on Microbiological

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