Manual de Bioquímica Metabólica

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

QUÍMICO FARMACÉUTICO BIÓLOGO
Laboratorio de Efectividad
No. de Revisión: 7
Bioquímica Metabólica 2021-2025
MANUAL DE PRÁCTICAS DE
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
METABÓLICA
Elaborado por:
Dra. Ma. de la Soledad Lagunes Castro
Dr. Adolfo Sánchez Flores
Programa Educativo:
Químico Farmacéutico Biólogo (Acreditado)
Experiencia Educativa:
Laboratorio de Bioquímica Metabólica
Academia:
Biomédicas
Período de Aplicación:
Agosto-Enero
Grupo o Nivel:
Quinto Período
Horas por semana:
3 horas
Horas totales al semestre:
45 horas
COL-QFB-F-01
www.uv.mx/orizaba/cq
Universidad Veracruzana
Dirección General del Área Académica Técnica
Licenciatura en Químico Farmacéutico Biólogo
Programa de estudio de experiencia educativa
1. Área académica
Área Académica Técnica
2.-Programa educativo
Químico Farmacéutico Biólogo
3.- Campus
Xalapa y Orizaba-Córdoba
4.-Dependencia/Entidad
Facultad de Química Farmacéutica Biológica/Ciencias Químicas
6.-Nombre de la experiencia 7.- Área de formación

5.- Código
educativa Principal Secundaria
QFBI 18007 Bioquímica metabólica D No aplica
8.-Valores de la experiencia educativa

Créditos Teoría Práctica Total horas Equivalencia (s)
9 3 3 90 Bioquímica Metabólica
9.-Modalidad 10.-Oportunidades de evaluación

Curso- Laboratorio ABGHJK= Todas
11.-Requisitos
Pre-requisitos Co-requisitos
Bioquímica Ninguno
12.-Características del proceso de enseñanza aprendizaje

Individual / Grupal Máximo Mínimo
Grupal 40 10
1
13.-Agrupación natural
de la Experiencia
educativa 14.-Proyecto integrador
LGAC: caracterización química y estudio de actividad
biológica in vitro e in vivo de productos naturales; LGAC:
biotecnología para el aprovechamiento de residuos
agroindustriales; LGAC: evaluación farmacológica y
Academia de Biomédicas toxicológica de principios activos, plantas medicinales y
compuestos de nueva síntesis.
LGAC: Inmunología y Biología Molecular; LGAC: Síntesis,
extracción y caracterización de nuevos productos
químicos y sus aplicaciones.
15.-Fecha
Elaboración Modificación Aprobación
Enero 2020 --- Junio 2020
16.-Nombre de los académicos que participaron

Academia de Biomédicas de la región Xalapa y Orizaba- Córdoba
17.-Perfil del docente

Licenciatura en QFB, Biólogo o afines a la Química, preferentemente con posgrado en
el área.
18.-Espacio 19.-Relación disciplinaria

Intraprograma educativo Interdisciplinario
20.-Descripción
Esta experiencia educativa se localiza en el AFD, cuenta con 3 horas teóricas, 3 horas
prácticas y 9 créditos y tiene equivalencia con la(s) experiencia(s) educativa(s)
Bioquímica Metabólica, que integran el plan de estudios 2012.
Su propósito es adquirir los conocimientos de las vías metabólicas de la biogénesis y
degradación de los recursos bióticos para lograr la comprensión de la relación
estructura-actividad de las biomoléculas con el funcionamiento celular en las diferentes
vías y ciclos metabólicos. Es indispensable para el alumno relacionar la estructura y la
actividad de las biomoléculas con el funcionamiento celular a través de las diferentes
vías y ciclos metabólicos aplicando los conocimientos teóricos y los métodos
bioquímicos cualitativos y cuantitativos de las biomoléculas. Para su desarrollo se
proponen las estrategias metodológicas de lectura e interpretación de textos,
exposición con apoyo tecnológico variado e investigación documental para que
2
interprete y organice la información en la toma de decisiones, con un alto grado de

responsabilidad y compromiso que le permitan insertarse en el ámbito laboral. Por lo
tanto, el desempeño de la unidad de competencia se evidencia mediante tareas y
participación, desarrollo y exposición del proyecto integrador, mediante la evaluación
escrita, investigación documental, seminarios, participación asertiva, trabajo en equipo,
análisis de lecturas y desarrollo de las prácticas.
21.-Justificación
La bioquímica metabólica describe las vías de la biogénesis y degradación de los recursos
bióticos, involucrados en el funcionamiento celular. El conocimiento del metabolismo
de los sistemas biológicos es necesario para la aplicación de métodos analíticos en los
campos de la investigación científica, el diagnóstico clínico y molecular, el control de
calidad de procesos y para el diseño y desarrollo de productos farmacéuticos, químicos
y biotecnológicos. En el contexto del quehacer del Químico Farmacéutico Biólogo, la
bioquímica metabólica aporta los conocimientos fundamentales para la comprensión de
las funciones biológicas y del metabolismo; así mismo, permite formar profesionales
responsables que apoyen la generación de conocimiento científico y tecnológico para
brindar bienes y/o servicios que contribuyan al desarrollo sustentable, adquiriendo un
alto grado de compromiso y responsabilidad, cualidades que se requieren para
desempeñarse en el ámbito laboral.
22.-Unidad de competencia
El alumno relaciona la estructura-actividad de las biomoléculas con el funcionamiento
celular a través de las diferentes vías y ciclos metabólicos y desarrolla métodos
bioquímicos cualitativos y cuantitativos de las biomoléculas relacionadas con el
funcionamiento celular referente a las diferentes rutas y ciclos metabólicos, mediante
un aprendizaje autónomo, comprensión de un pensamiento lógico y crítico;
comunicando ideas oralmente, reportes académicos por escrito basados en la
metodología de la investigación en un marco de responsabilidad, disciplina y autocritica;
con una actitud participativa de compromiso, responsabilidad, respeto y tolerancia;
fomentando el trabajo individual y en equipo, para la solución de problemas y un
desempeño profesional en las diversas áreas de operación, control, diseño e innovación
tecnológica del campo profesional del QFB.
23.-Articulación de los ejes

Los alumnos reflexionan en grupo en un marco de orden y respeto mutuo, sobre la
compresión y manejo de los elementos conceptuales de actualidad acerca de los
principales conceptos asociados a la experimentación en Bioquímica Metabólica; que le
permitan el desarrollo de habilidades para el manejo de la información adquirida, así
como su análisis y propuestas de solución a los problemas que se presentan en relación
con esta disciplina, y que promueve en el alumno una actitud positiva hacia el trabajo
grupal, que le permitan actuar con responsabilidad, compromiso, tolerancia, respeto y
3
ética, manejar los conceptos teóricos y las habilidades prácticas para el manejo de la
bioquímica metabólica. Finalmente, discuten en grupo su propuesta que les permite
asumir su papel profesional como futuros Q.F.B ante la sociedad.
24.-Saberes
Teóricos Heurísticos Axiológicos
• Aspectos generales del • Introducción al trabajo • Apertura para la
metabolismo intermediario práctico en laboratorio autocrítica
*Catabolismo y anabolismo de Bioquímica • Autonomía para la
*Vías anabólicas metabólica búsqueda y
*Vías catabólicas • Metabolismo de actualización de
*Vías anfibólicas carbohidratos: información
*Bioenergética catabolismo • Colaboración y
*Vías de señalización celular * Velocidad de trabajo en equipo
• Metabolismo de absorción de glucosa para el desarrollo
carbohidratos por el intestino de la de experimentos
*Glucólisis. Vía de Embden- rata y determinación • Compromiso,
Meyerhof de alfa-glucosidasa Honestidad y
*Destinos metabólicos del * Fermentación Responsabilidad
piruvato alcohólica. para cumplir con
*Regulación de la vía * Glucólisis en las evidencias de
glucolítica extracto de hígado y desempeño.
*Entrada de otros azúcares músculo. • Creatividad y
en la ruta glucolítica. • Procesos oxidativos: habilidades en el
*Catabolismo de ciclo de Krebs uso de las TICs y
polisacáridos. * Determinación de la TACs aplicables al
*Glucogenólisis actividad de succinato desarrollo de un
• Procesos oxidativos: ciclo de deshidrogenasa. proyecto
Krebs y vía de las pentosas • Oxidaciones biológicas integrador
fosfato * Estudio del bombeo • Responsabilidad
*Generación y características de protones por ambiental para
del Acetil CoA. levaduras: efecto de los fomentar la
*Ciclo de Krebs. inhibidores de la sustentabilidad,
*Regulación del ciclo de cadena de transporte sostenibilidad y el
Krebs. de electrones y manejo adecuado
*Naturaleza anfibólica del desacoplantes. de residuos
ciclo de Krebs. * Reducción de un químicos y
*Ciclo del glioxilato colorante por medio biológicos.
*Vía de las pentosas-fosfato de cloroplastos
(Warburg –Dickens) iluminados.
*Regulación de la vía de las • Metabolismo de
pentosas fosfato carbohidratos:
anabolismo
4
• Oxidaciones biologicas * Almidón, producto

*Cadena de transporte de de la fotosíntesis.
electrones: ubicación celular * Cuantificación de la
*Foforilación oxidativa respiración aerobia por
*Inhibidores y desacoplantes el método
de la respiración. colorimétrico
• Metabolismo de los * Efecto de la dieta y
carbohidratos: biosíntesis las hormonas sobre el
*Gluconeogénesis. contenido de
*Regulación de la glucógeno en hígado de
gluconeogénesis. ratas
*Biosíntesis deglucógeno. • Metabolismo de lípidos
*Regulación de la síntesis de *Conversión de lípidos
glucógeno. en carbohidratos
*Biosíntesis de otros • Metabolismo de
carbohidratos. compuestos
*Fotosíntesis nitrogenados
*El cloroplasto * Absorción intestinal
*Reacciones luminosas de aminoácidos.
*Reacciones oscuras: ciclo de • Proyecto integrador:
Calvin (C3) determinación de
*Fotorespiración metabolitos y/o
*Regulación de la Fotosíntesis demostración de
*Vía de Hatch -Slack(C4) procesos metabólicos.
*Metabolismo ácido de las
crasuláceas (CAM)
• Metabolismo de lípidos:
catabolismo y anabolismo de
ácidos grasos y
triacilgliceroles
*Utilización y transporte de
lípidos.
*Oxidación de ácidos grasos.
*Betaoxidación.
*Alfaoxidación.
*Omegaoxidación.
*Biosíntesis de ácidos grasos.
*Biosíntesis de
triacilgliceroles.
• Metabolismo de lípidos:
lípidos de membrana,
esteroides, isoprenoides y
eicosanoides.
*Biosíntesis de
5
fosfoacilgliceroles.
*Biosíntesis de esfingolípidos.
*Biosíntesis de colesterol.
*Biosíntesis de ácidos biliares.
*Biosíntesis de hormonas
esteroides.
*Vitaminas liposolubles.
*Biosíntesis de
prostaglandinas.
• Metabolismo de compuestos
nitrogenados: catabolismo y
anabolismo de los
aminoácidos
*Ciclo del Nitrógeno.
*Catabolismo de los
aminoácidos.
*Transaminación.
*Ciclo de la urea
*Destino final de los
esqueletos carbonados de los
aminoácidos
*Biosíntesis de aminoácidos.
*Biogénesis del nitrógeno
orgánico: Nitrogenasa, GS,
GDH, GOGAT.
*Intermediarios metabólicos
que llevan a la síntesis de los
esqueletos carbonados de los
aminoácidos.
*Regulación de la biosíntesis
de aminoácidos.
*Biosíntesis de algunos
derivados importantes de los
aminoácidos.
• Metabolismo de los
nucleótidos: rutas catabólicas
y anabólicas
*Biosíntesis de nucleótidos de
purina: rutas de novo y de
salvamento.
*Biosíntesis de nucleótidos de
pirimidina.
*Regulación.
6
*Catabolismo de nucleótidos
de purina y pirimidina.
• Integración del metabolismo
*Interrelación de las vías
metabólicas.
25.-Estrategias metodológicas
De aprendizaje De enseñanza
• Exposición con apoyo tecnológico • Atención a dudas y comentarios
variado • Planteamiento de preguntas guía
• Investigación documental • Preguntas detonadoras
• Reportes de lectura • Preguntas metacognitivas
• Resumen • Explicación de procedimientos
• Síntesis • Recuperación de saberes previos
• Discusión de problemas • Lectura comentada
• Investigación documental • Asesorías grupales
• Aprendizaje basado en TIC • Dirección de prácticas
• Problemario • Encuadre
• Experimentos • Asignación de tareas
• Guión de prácticas • Discusión dirigida
• Cuestionarios • Organización de grupos
• Estudios de caso • Supervisión de trabajos
• Aprendizaje autónomo • Tutorías individuales
• Aprendizaje cooperativo
26.-Apoyos educativos
Materiales didácticos Recursos didácticos
• Libros • Proyector/cañón
• Fotocopias • Pantalla
• Videos • Pizarrón
• Páginas web • Computadoras
• Presentaciones • Bocinas
• Manual
7
27.-Evaluación del desempeño

Evidencia (s) de Criterios de Ámbito(s) de
Porcentaje
desempeño desempeño aplicación
Tareas (Análisis de • Pertinencia Aula 10%
lecturas, videos, • Coherencia EMINUS
monografía y foros) • Claridad
• Dominio del
tema
Exámenes • Coherencia Aula 30%
teórica EMINUS
• Claridad
• Racionalidad
• Siuficiencia
• Dominio del
tema
Exposición/Herramienta • Dominio del Aula 10%
de contenido tema EMINUS
• Dominio de
la
metodología
• Racionalidad
• Presentación
• Diseño
Proyecto Integrador • Coherencia Aula 10%
(Revista Digital, teórica EMINUS
Publicación ó • Claridad Plataforma online
Congreso, Blog, • Racionalidad
Campaña) • Suficiencia
• Dominio del
tema
Manual • Coherencia Laboratorio 10%
teórico- Plataforma
metodológica EMINUS
• Claridad
• Limpieza
• Orden
8
Bitácora • Coherencia Laboratorio 10%

teórico-
metodológica
• Claridad
• Limpieza
• Orden
Desempeño práctico • Colaboración Laboratorio 10%
grupal
• Orden
• Limpieza
Actividades • Claridad Laboratorio 10%

complementarias • Digital e Plataforma
impreso EMINUS
• Limpieza Centro de
cómputo
Total 100%
28.-Acreditación
Para acreditar esta EE el estudiante deberá haber presentado con idoneidad y
pertinencia cada evidencia de desempeño, es decir, que en cada una de ellas haya
obtenido cuando menos el 60%, además de cumplir el porcentaje de asistencia
establecido en el estatuto de alumnos 2008.
29.-Fuentes de información
Básicas
• Devlin, T. M. (2019). Bioquímica con aplicaciones clínicas. Reverté.
• Harper, H. A., Murray, R. K., Granner, D. K., & Rodwell, V. W. (2007).
Bioquímica ilustrada [de] Harper. El Manual Moderno.
• Melo, V., & Cuamatzi, O. (2020). Bioquímica de los procesos metabólicos.
Reverte.
• Nelson, D. L., & Cox, M. M. (2015). Lehninger: principios de bioquímica.
• Stryer, L. L., Berg, J. M., & Tymoczko, J. L. (2020). Bioquímica. Reverté.
• Teijón, J., Garrido, A., Blanco, D., Villaverde, C., Mendoza, C., & Ramírez, J.
(2006). Fundamentos de bioquímica metabólica. Madrid, España: Editorial Tebar,
130-5.
• Voet, D., Voet, J.G. y Pratt, C.W. (2014). Fundamentos de bioquímica: la vida a
nivel molecular. Editorial Artmed.
9
Complementarias
• Bohinski, R. C. (2000). Bioquímica. Pearson Addison Wesley.
• Díaz, A. P., & Pena, A. (2002). Bioquímica. Editorial Limusa.
• Laguna, J. (2013). Bioquímica de Laguna.
• Bases de datos de la Universidad Veracruzana disponibles en la Biblioteca virtual.
10
Bioquímica No. de Revisión: 7
Metabólica
2021-2025
ÍNDICE
ÍNDICE ii
PRESENTACIÓN iii
REGLAMENTO
INDICACIONES GENERALES
NORMAS DE TRABAJO
PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA

Práctica No. 1
Regulación del equilibrio ácido-base después del ejercicio muscular intenso. 8
Práctica No. 2
Obtención de piruvato por fermentación de glucosa. 14
Práctica No. 3
Fermentación alcohólica. 19
Práctica No. 4
Determinación de la actividad de la enzima succinato deshidrogenasa 25
Práctica No. 5
Estudio del bombeo de protones por levaduras; efecto de los inhibidores de la cadena de
transporte y de los desacoplantes. 30
Práctica No. 6
Identificación de Glucógeno en tejido animal. 35
Práctica No. 7
Respiración aerobia en plantas. 40
Práctica No. 8
Papel de la luz en la fotosíntesis, formación de almidón en los vegetales. 44
Práctica No. 9
Hidrólisis enzimática de los lípidos de la leche. 49
Práctica No. 10
Extracción de ADN de tejido vegetal. 54
Práctica No. 11
Caracterización de nucleótidos por métodos colorimétricos. 57
ANEXOS
Anexo 1 NOM-087-ECOL-SSA1-2002. 62
COL-QFB-F-02 i
Metabólica
2021-2025
PRESENTACIÓN
El laboratorio de Bioquímica Metabólica forma parte de la Experiencia Educativa Bioquímica
Metabólica que se encuentra en el AFD del plan 2020, se imparte en sesiones semanales de
3 horas y tiene equivalencia con Bioquímica Metabólica del plan 2012 del PE de QFB.
La Bioquímica Metabólica es un área de la bioquímica que pretende conocer los diferentes

tipos de rutas metabólicas a nivel celular, y su contexto orgánico. De esta forma son
esenciales conocimientos de enzimología y biología celular. Estudia todas las reacciones
bioquímicas celulares que posibilitan la vida, y así como los índices bioquímicos orgánicos
saludables, las bases moleculares de las enfermedades metabólicas o los flujos de
intermediarios metabólicos a nivel global. De aquí surgen disciplinas académicas como la
Bioenergética (estudio del flujo de energía en los organismos vivos), la Bioquímica
nutricional (estudio de los procesos de nutrición asociados a rutas metabólicas), la
bioquímica clínica (estudio de las alteraciones bioquímicas en estado de enfermedad o
traumatismo) y la metabolómica es el conjunto de ciencias y técnicas dedicadas al estudio
completo del sistema constituido por el conjunto de moléculas que constituyen los
intermediarios metabólicos, metabolitos primarios y secundarios, que se pueden encontrar
en un sistema biológico.
Este manual tiene la finalidad de presentar al alumno prácticas de laboratorio que le permitan
aplicar sus conocimientos teóricos del programa de Bioquímica Metabólica y así encontrar
posibles aplicaciones en su desempeño profesional, permitiendo adquirir y reforzar las
competencias en el ámbito heurístico reforzando la indagación y la obtención de
conocimiento a través de la experimentación realizando prácticas que permiten extrapolar
las reacciones bioquímicas enzimáticas a sus aplicaciones en los sistemas vivos,
fortalenciendo su capacidad de crear algo, con la finalidad de proporcionar estrategias que
ayuden a la resolución de un problema. Los estudiantes podrán a través de su
creatividad, pensamiento divergente y en algunos casos de experiencias propias, ser capaces
de encontrar la solución más viable para resolver algún conflicto, caso clínico y generar
conocimiento con responsabilidad, ética y respeto al entorno social.
Al finalizar este curso el estudiante habrá adquirido las siguientes competencias:
• Practicar y aplicar correctamente las técnicas abordadas en el laboratorio para la

identificación de metabolitos intermediarios.
• Comprender las aplicaciones de las reacciones enzimáticas y sus productos en áreas

como la Biomedicina, Diagnóstico Clínico y Química de Alimentos.
• Interesarse en el desarrollo de investigación y generación del conocimiento en las

áreas involucradas con la Bioquímica Metabólica.
COL-QFB-F-02 ii
Metabólica
2021-2025
REGLAMENTO
PARA LOS LABORATORIOS DE LAS EE DEL ÁREA DE BIOMÉDICAS
1Al inicio del curso, el maestro titular proporcionará el Programa de la EE, así mismo establecerá las
normas que regirán la manera de trabajar y la evaluación.
1Asistencia y puntualidad. Si el maestro lo considera conveniente, se dará un margen de diez minutos

al término del cual se pasará lista de asistencia o cualquier otro sistema de control.
1El alumno deberá presentarse al laboratorio con bata, la cual deberá ser blanca, manga larga y de largo
a la rodilla, de preferencia deberá personalizarse.
1En el caso que el laboratorio así lo requiera, el alumno deberá usar guantes, cubre boca, mascarilla,
zapato cerrado y ropa adecuada.
1Estrictamente prohibido fumar o comer dentro de los laboratorios así como realizar actividades
ajenas a las que está destinado dicho reciento.
1El alumno deberá guardar disciplina. Recordar que la realización de las prácticas es trabajo de equipo,
salvo en los casos particulares, en que la práctica así lo requiera, la responsabilidad es de los integrantes
del equipo y forma parte de la evaluación.
1Los alumnos deberán tener preparado el material necesario solicitado para el desarrollo de la práctica,
así, como haber leído previamente la técnica. Cualquier duda deberá ser aclarada por el maestro titular.
1El alumno deberá estar bien informado sobre el manejo de reactivos y material peligroso, a lo cual
tanto el maestro titular como el técnico académico, deberán responsabilizarse de dicha información.
1Al término de la sesión, los alumnos deberán dejar limpia su área de trabajo, además, checar que las
llaves de gas, agua, etc. Estén debidamente cerradas.
1El material y el y/o equipo que se les preste por parte del cuarto de preparadores, se hará mediante
vales debidamente requisitazos con nombre, matrícula, fecha, firma, etc. El cual deberá regresarse al
término de la sesión, en el caso de sufrir algún desperfecto, deberá ser restituido en especie.
1En los casos de inasistencia, éstos deberán ser debidamente justificados por la Secretaría de la Facultad
y apegarse a las reglas establecidas por la Universidad y el Estatuto de Alumnos. Los casos particulares
serán resueltos por los maestros titulares de la EE. Apoyándose en la reglamentación.
1El alumno está obligado a llevar una Bitácora de trabajo personal. El reporte de sus prácticas se hará
de acuerdo a los lineamientos del maestro titular.
1Al finalizar el curso, el alumno deberá haber acreditado el 100% de las prácticas así como las
evaluaciones realizadas por el maestro titular.
COL-QFB-F-02 1
Metabólica
2021-2025
INDICACIONES GENERALES
Horario:
1. Se impartirá una sesión por semana, con duración de 3 horas.
2. Cada sesión comenzará y terminará a la hora indicada.
3. Se pasará lista cada día al empezar la práctica.
4. Se anotarán las faltas y asistencias con todo rigor y por ningún motivo se pondrán
retardos.
5. Cuando el alumno abandone el laboratorio antes de terminar la práctica y sin el
consentimiento del maestro, se considerará que no asistió a dicha práctica.
Comportamiento:
1. Todos los alumnos deberán presentarse en el laboratorio con bata blanca limpia (manga
larga) y con el material necesario para la práctica.
2. Queda prohibido que los alumnos utilicen sandalias, short, falda o cualquier vestimenta
que deje expuesta la piel a posible contaminación o daño con reactivos en las horas de
práctica.
3. Queda prohibido dentro del laboratorio fumar, comer o beber.
4. El material proporcionado en cada práctica deberá quedar limpio y en su sitio, al final de
la misma.
5. Si se solicita material en el laboratorio, se deberá entregar al técnico un vale debidamente
requisitado y firmado.
6. La basura deberá tirarse en los cestos colocados para ello.
7. Todo material infeccioso utilizado durante la práctica deberá colocarse en recipientes
adecuados, indicados por el maestro.
8. Al final de la práctica deberán limpiar con cuidado y perfectamente las mesas de trabajo.
9. Cada alumno deberá trabajar en la mesa que se le haya asignado al principio del curso.
10. Todos los alumnos deberán guardar el orden y compostura que merece el laboratorio.
11. Cada alumno entregará al maestro un reporte escrito de lo efectuado en la práctica. El
reporte se presentará en la sesión de laboratorio siguiente o cuando lo señale el maestro.
12. Cada alumno entregará las observaciones realizadas durante la práctica (bitácora) al
final de cada sesión.
13. En caso de presentarse algún accidente, se notificará de inmediato al maestro.
Material por alumno:

Bata blanca y limpia
Cuaderno forma francesa de cuadros grandes (bitácora)
Lápiz, goma y lápices de colores
Trapo limpio
Un bulbo para pipeta Pasteur
Un par de guantes de látex
COL-QFB-F-02 2
Metabólica
2021-2025
Material por equipo:

Algodón
Servitoallas
Gasas
3 frascos de vidrio de boca ancha con tapa para residuos
Perlas de vidrio
Fibra esponja para lavar maerial
Escobillones de diferentes tamaños
2 pisetas
Agua destilada
Jabón lavatrastes
Cloro
2 Pinzas de disección
2 bisturís
1 Tina galvanizada para baño María
5 Pipetas Pasteur
7 Frascos de vidrio de boca ancha (jugo Jumex o Del Valle)
Papel aluminio
Material por grupo

25 bolsas plásticas
1 Jabón líquido para manos
Material por equipo para solicitar en el almacén

1 Gradilla para tubos de ensayo
3 Cajas de Petri
15 Tubos de ensayo de 15 x 125 mm
10 Tubos de Ensaye de 13 x 100
1 Vidrio de Reloj
1 Mortero con pistilo
1 Embudo
1 Vaso de precipitado de 250 ml
1 Vaso de precipitado de 100 ml
1 Probeta de 100 ml
2 Pipetas graduadas de 10 ml
1 Bureta de 25 ml
4 Vasos de precipitados de 200 ml
3 Matraz Erlenmeyer de 200 ml
1 Termómetro de 0oC a 100oC
COL-QFB-F-02 3
Metabólica
2021-2025
Evaluación:
1. La evaluación estará basada en:
2. El comportamiento, interés y trabajo efectivo durante la práctica.
3. El reporte que cada alumno haga sobre la práctica efectuada (entrega de bitácora) y la
entrega del manual.
4. Las respuestas a las preguntas hechas en el laboratorio durante la práctica.
5. Las calificaciones obtenidas en exámenes parciales.
6. El alumno que repruebe el Laboratorio tendrá que repetir el curso.
7. Si se acredita el laboratorio se tendrá derecho a presentar el examen ordinario de la
teoría siempre y cuando se tenga el 80% de asistencia en teoría.
Evaluación
Manual 20%
Bitácora 20%
Trabajo en Equipo 30%
Proyecto Educativo Innovador 20%
Exámenes Parciales 10%
Total 100%
COL-QFB-F-02 4
Metabólica
2021-2025
NORMAS DE TRABAJO
OBJETIVO
El objetivo primordial es el de establecer normas de comportamiento dentro del laboratorio
evitando riesgos innecesarios que en algún momento puedan poner en peligro la salud.
El personal que labora en un laboratorio está sujeto a diversos riesgos ocupacionales según
el tipo de trabajo específico que desarrolle. Los profesionales que manejan agentes
infecciosos pueden infectarse y enfermar de manera más o menos grave, pudiendo quedar
afectados a largo plazo o aún sobrevenirles la muerte. Es por ello que cada laboratorio
donde se maneje material biológico debe implementar medidas de bioseguridad
correspondientes a la peligrosidad de los agentes que maneja y tener un control estricto
para que estas medidas se lleven a cabo.
Es necesario tener en cuenta que se utilizan reactivos peligrosos y se procesan muestras
biológicas de alto riesgo que pueden estar contaminadas con diferentes agentes infecciosos.
Medidas generales de precaución:

1. No se permitirá fumar, ingerir alimentos o maquillarse dentro del laboratorio.
2. No se permitirá la entrada a personas ajenas al laboratorio, particularmente niños.
3. Al iniciar cada sesión práctica, el área de trabajo deberá estar despejada de objetos
innecesarios que puedan estorbar y contaminarse.
4. Al finalizar cada sesión práctica, los alumnos con guantes puestos, deberán limpiar la mesa
de trabajo con un papel absorbente, esponja o gasa humedecida con un desinfectante (fenol,
benzal o cloro), así como desechar el material biológico utilizado según las indicaciones del
maestro.
5. Por ningún motivo se deberá pipetear con la boca.
6. El personal debe de lavarse las manos después de manipular agentes infecciosos,
material contaminado, animales y cuando abandone el laboratorio.
7. Todo residuo contaminado, líquido y sólido será sometido a un proceso de
descontaminación por esterilización o incineración, antes de ser desechado.
8. Debe utilizarse guantes durante aquellos procedimientos que impliquen contacto
directo con material infeccioso.
9. Al manejar sangre de animales o personas, siempre deberán usar guantes; si llegará a
caer sangre o algún tipo de muestra biológica sobre la piel, lávese inmediatamente con
agua abundante y jabón, aplíquese desinfectante. Si la muestra biológica o el reactivo caen
en los ojos, éstos se deberán lavar exhaustivamente con agua y avisar inmediatamente al
maestro.
10. Al derramar alguna muestra biológica sobre la superficie de la mesa de trabajo o en el
piso, deberá agregarse hipoclorito de sodio o fenol al 5 %, y limpiarse posteriormente con
un trapo humedecido con la misma solución
11. No se deberán dejar navajas, bisturís, agujas hipodérmicas u objetos cortantes sobre
las mesas de trabajo, siempre deberán guardar o desechar en el lugar adecuado.
COL-QFB-F-02 5
Metabólica
2021-2025
Agentes desinfectantes útiles en el laboratorio:

Piel: Se recomienda usar alcohol etílico al 70%, agua oxigenada o benzal al 5%.
Superficies: Solución de fenol al 5% (solución corrosiva y caústica, el uso en la piel no se

recomienda, ya que el fenol se absorbe a través de ésta y se acumula en los riñones).
Uso de guantes en el laboratorio: En el laboratorio de Parasitología es frecuente el uso de

guantes, por lo que se debe tener precaución de no acercar las manos a la flama del
mechero. Es indispensable remarcar que el uso de guantes debe ser restringido al área
donde se está trabajando y no tocarse con ellos la cara, el pelo u objetos que están a
nuestro alcance como lápices, cuadernos, microscopios, la perilla de la puerta, entre
otros, ya que todas estas actitudes invalidan su función, propagando la contaminación
dentro y fuera del área y exponiendo a otras personas.
Manejo y desecho de muestras biológicas: De acuerdo con la NOM-087-ECOL-SSA1-2002.
COL-QFB-F-02 6
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICAS DE
LABORATORIO DE
BIOQUÍMICA METABÓLICA
COL-QFB-F-02 7
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 1
REGULACIÓN DEL EQUILIBRIO ÁCIDO-BASE DESPUÉS DEL
EJERCICIO MUSCULAR INTENSO
OBJETIVO
El alumno constatará las actividades reguladoras del pulmón y el riñón para mantener el
equilibrio ácido-base en condiciones que tienden a romperlo. Mediante la determinación del
pH observará la variación de la concentración de hidrogeniones en la orina de un individuo
que ha realizado ejercicio muscular intenso y relacionará los resultados obtenidos con los
cambios metabólicos originados por el ejercicio muscular intenso.
FUNDAMENTO
Dentro de los mecanismos de regulación de que dispone el organismo para mantener la
integridad fisiológica, aquellos involucrados en la homeostasis del pH en los fluidos
extracelulares desempeñan un papel crucial para la supervivencia del individuo. En este
sentido cabe señalar.
Como resultado de la oxidación de los alimentos, un humano adulto promedio produce

alrededor de 20 moles de CO2 al día, Al difundir a la sangre, gran parte de dicho gas se
combina con al agua en el interior de los eritrocitos, produciendo ácido carbónico (H2CO3),
reacción que es seguida por la disociación del H2CO3 para producir el anión
bicarbonato HCO3- y un ión hidrógeno (H+). Dado el carácter de ácido débil del H2CO3, la
fracción disociada del mismo es pequeña; sin embargo, considerando la gran cantidad de
CO2 que produce el organismo, la acidificación de los fluidos extracelulares sería importante
en ausencia de mecanismos reguladores. En el hombre, la intervención de los pulmones y
los riñones evita que ocurra tal acidificación manteniendo en un nivel constante la
concentración de H+ y, por consiguiente, del pH.
Para entender el papel que juegan ambos órganos en la homeostasis del equilibrio ácido-
base, debe tenerse presente que el sistema del ácido carbónico implica la participación de
un componente gaseoso o volátil (el CO2) y dos componentes no volátiles (el HCO3 - y el
H+). En la sangre, el equilibrio entre dichos componentes determina el valor del pH
sanguíneo, que puede evaluarse mediante la bien conocida ecuación de Henderson-
Hasselbach. En el individuo normal, dicho valor fluctua en un promedio 7.4, siendo la sangre
venosa –enriquecida en CO2 ligeramente más ácida en relación con la sangre arterial. Ahora
bien, ya que a temperatura ambiente el CO2 existe en estado gaseoso, la cantidad de CO2
disuelto en la sangre dependerá de la presión parcial (PCO2) ejercida por el mismo a nivel
de los alvéolos pulmonares. En el humano, la magnitud de dicha PCO2 es de
aproximadamente 40 mmHg lo que se traduce en una concentración de CO2 sanguíneo de
aproximadamente 25 mM; este último valor incluye no solo el CO2 como tal, sino también
el bicarbonato y el ácido carbónico. Considerando el pH sanguíneo normal y el pKa del
sistema bicarbonato-ácido carbónico, la relación [HCO3-] / [H2CO3 + CO2] es de
COL-QFB-F-02 8
Metabólica
2021-2025
aproximadamente 20. Es precisamente la PCO2 la que es controlada por los pulmones, ya

que durante el proceso de la exhalación se elimina CO2, manteniendo constante la PCO2
en los alvéolos y evitando así que que aumente el nivel de CO2, disuelto en la sangre. Todo
proceso o patología que se manifieste en una alteración en la frecuencia y/o profundidad del
proceso de inhalación-exhalación, dará como resultado una alteración de la PCO2 alveolar
–aumentandola o disminuyéndola, -con la siguiente modificación del nivel de CO2 disuelto
en sangre y, por consiguiente, del pH. Por lo que respecta a los riñones, su participación en
el mantenimiento de un pH extracelular constante se da a través de dos mecanismos: la
excreción de equivalentes ácidos (H+) hacia la orina y la regulación de la cantidad de HCO3-
reabsorbido hacia la sangre desde el filtrado glomerular.
A diferencia del intercambio gaseoso en los pulmones, los mecanismos de regulación renal
son de largo plazo, por lo que su efecto será manifiesto en cuestión de horas. Su importancia
se enfatiza en situaciones patológicas donde se altera el intercambio de gases pulmonar (es
decir, en la acidosis y alcalosis respiratorias), en cuyo caso es necesario aumentar o
disminuir la tasa de reabsorción del HCO3- , o bien en estados fisiológicos que producen
cantidades importantes de ácidos orgánicos (por ejemplo, en la diabetes no controlada o
durante el ejercicio intenso) donde se incrementa la excreción de H+ Granparte de este
último aparece en la orina acomplejado con el amoniaco en forma de ión amonio (NH4+) o
asociado con el fosfato en forma de fosfato monobásico de sodio (NaH2PO4), representando
este último la llamada acidez titulable. En general, el pH de la orina será un reflejo de la
producción de ácidos no volátiles por el organismo. El resultado final de los mecanismos
fisiológicos que participan en el mantenimiento del equilibrio ácido-base es el de mantener
el pH extracelular en un rango compatible con el funcionamiento adecuado del organismo.
GENERALIDADES
El equilibrio ácido-base es mantenido por
• Amortiguadores químicos
• Actividad pulmonar
• Actividad renal
Amortiguadores químicos
Los amortiguadores químicos son soluciones que resisten los cambios del pH. Los
amortiguadores intracelulares y extracelulares responden de inmediato a los desequilibrios
del estado ácido base. El hueso también cumple una función amortiguadora importante,
especialmente de las cargas ácidas. Un amortiguador está compuesto por un ácido débil y
su base conjugada. La base conjugada puede aceptar H+ y el ácido débil puede liberarlo, de
manera que permite reducir al mínimo los cambios en la concentración de H+ libres. El
sistema amortiguador sirve sobre todo para minimizar los cambios en el pH cerca de su
constante de equilibrio (pKa); así, aunque potencialmente hay muchos pares de
amortiguadores en el cuerpo, sólo algunos son fisiológicamente relevantes.
COL-QFB-F-02 9
Metabólica
2021-2025
Regulación pulmonar del pH

La concentración de CO2 está estrechamente regulada por las modificaciones en el
volumen corriente y la frecuencia respiratoria (ventilación minuto). Los
quimiorreceptores arteriales registran la disminución del pH y, en respuesta, aumentan el
volumen corriente o la frecuencia respiratoria, con incremento de la espiración de CO2 y
del pH de la sangre. A diferencia de la amortigación química, que es inmediata, la regulación
pulmonar tarda varios minutos u horas. Este sistema tiene una eficacia de entre 50 y 75%
y no normaliza completamente el pH.
Regulación renal del pH

Los riñones controlan el pH mediante el ajuste de la cantidad de HCO3− que se excreta
o es reabsorbido. La reabsorción de HCO3− es equivalente a la excreción de H+ libre. Las
respuestas para manejar los trastornos del equilibrio ácido base se desarrollan entre horas
y días después de que sucedieron los cambios en este equilibrio.
Toda el HCO3− en el suero se filtra a medida que pasa a través del glomérulo. La
reabsorción de HCO3− se produce sobre todo en el túbulo proximal y, en menor medida,
en el túbulo colector. El H2O dentro de la célula tubular distal se disocia en H+ e hidroxilo
(OH−); en presencia de anhidrasa carbónica, el OH− se combina con CO2 formando
HCO3−, que regresa al capilar peritubular, mientras que el H+ se secreta hacia la luz
tubular y se une con el HCO3− filtrado libremente formando CO2 y H2O, que también se
reabsorben. En consecuencia, los iones de HCO3− reabsorbidos distalmente vuelven a
sintetizarse y no son los mismos que se filtraron.
La disminución del volumen circulante efectivo (como durante la terapia con diuréticos)
aumenta la reabsorción de HCO3−, mientras que la elevación de la concentración
de hormona paratiroidea en respuesta a una carga de ácido disminuye la reabsorción de
HCO3−. Asimismo, el aumento de la PCO2 incrementa la reabsorción de HCO3−, mientras
que la depleción de ion cloruro (Cl−) (típicamente, debido a la depleción de volumen)
estimula la reabsorción de ion de sodio (Na+) y la generación de HCO3− en el túbulo
proximal.
En los túbulos proximales y distales se secretan ácidos activamente, donde se combinan

con amortiguadores urinarios, en particular fosfato (HPO4−2) (que se filtra libremente),
creatinina, ácido úrico y amoníaco, para de esta manera excretarse del organismo. La
mayor importancia del sistema amortiguador de amoníaco es que los demás
amortiguadores se filtran en concentraciones fijas y pueden agotarse frente a cargas
elevadas de ácido, mientras que las células tubulares regulan activamente la producción de
amoníaco en respuesta a los cambios en la carga de ácido. El pH arterial es el principal
factor determinante de la secreción de ácido, pero la excreción también depende de las
concentraciones de potasio (K+), Cl− y aldosterona. La concentración intracelular de K+ y
COL-QFB-F-02 10
Metabólica
2021-2025
la secreción de H+ están relacionadas en forma recíproca: la depleción de K+ aumenta la

secreción de H+ y, en consecuencia, agrava la alcalosis metabólica (Figura 2).
Figura 2. Mecanismos renales de la regulación ácido-base
MATERIAL
10 vasos de precipitado de 100 ml
EQUIPO
Potenciómetro
REACTIVOS
Solución de bicarbonato de sodio al 3%
MATERIAL BIOLÓGICO
Orina
PROCEDIMIENTO
Sujeto 1
1. Tomar 250 ml de agua una hora antes de la clase práctica. Vaciar la vejiga y descartar
esa orina.
2. Tomar 250 ml de agua inmediatamente antes de la clase práctica.
3. Orinar en un vaso de precipitado de 100 ml.
4. Ingerir 250 ml de agua.
5. Realizar ejercicio muscular intenso, como subir y bajar varias veces las escaleras de
tres o cuatro pisos u otro ejercicio sugerido por el profesor.
6. Obtener muestras de orina cada 15 minutos, como en el inciso 3, hasta completar
por lo menos cinco muestras.
COL-QFB-F-02 11
Metabólica
2021-2025
7. A cada muestra se le determinará el pH inmediatamente después de haber sido

obtenida ya que con el tiempo el pH tiende a aumentar debido a la pérdida de
dióxido de carbono y a que el crecimiento bacteriano produce amoniaco a partir de
la urea.
Sujeto 2
1. Tomar 250 ml de agua una hora antes de la clase práctica. Vaciar la vejiga y descartar
esa orina.
2. Tomar 250 ml de agua inmediatamente antes de la clase práctica.
3. Orinar en un vaso de precipitado de 100 ml.
4. Ingerir 250 ml de solución de Bicarbonato de sodio al 3%.
5. Realizar ejercicio muscular intenso, como subir y bajar varias veces las escaleras de
tres o cuatro pisos u otro ejercicio sugerido por el profesor.
6. Obtener muestras de orina cada 15 minutos, como en el inciso 3, hasta completar
por lo menos cinco muestras.
7. A cada muestra se le determinará el pH inmediatamente después de haber sido
obtenida ya que con el tiempo el pH tiende a aumentar debido a la pérdida de
dióxido de carbono y a que el crecimiento bacteriano produce amoniaco a partir de
la urea.
OBSERVACIONES
COL-QFB-F-02 12
Metabólica
2021-2025
CONCLUSIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
• David, N. L. (2009). Lehninger principios de bioquímica. In Lehninger principios de
bioquímica (pp. 1158-1158).
Fecha de Realización Realizó: Autorizó:
COL-QFB-F-02 13
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 2
OBTENCIÓN DE PIRUVATO POR FERMENTACIÓN DE LA GLUCOSA
OBJETIVO
El alumno comprenderá y demostrará la producción del piruvato como intermediario
metabólico.
FUNDAMENTO
La glucólisis es la primera etapa de la fermentación, lo mismo que en la respiración celular,
y al igual que ésta necesita de enzimas para su completo funcionamiento. A pesar de la
complejidad de los procesos bioquímicos, una forma esquemática de la reacción química de
la fermentación alcohólica puede describirse como una glicólisis (en la denominada vía
Embden-Meyerhof-Parnes) de tal forma que puede verse como participa inicialmente una
molécula de hexosa.
C6H12O6 + 2 Pi + 2 ADP + 2 NAD → 2 CH3-CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP + 2 NAD
La reacción química se describe como la reducción de dos moléculas de Nicotinamida

Adenina Dinucleótido (NAD+) a NADH con un balance final de dos moléculas de ADP que
finalmente por la reacción general mostrada anteriormente se convierten en ATP (adenosín
trifosfato). En más detalle durante la fermentación etílica en el interior de las levaduras, la
vía de la glucólisis es idéntica a la producida en el eritrocito (con la excepción del piruvato
que se convierte finalmente en etanol). En primer lugar el piruvato se descarboxila mediante
la acción de la piruvato descarboxilasa para dar como producto final acetaldehído liberando
por ello dióxido de carbono (CO2) a partir de iones del hidrógeno (H+) y electrones del
NADH. Tras esta reacción el NADH sintetizado en la reacción bioquímica se vuelve a oxidar
por la enzima alcohol deshidrogenasa, regenerando NAD+ para la continuación de la
glucólisis y sintetizando al mismo tiempo etanol.
Si bien el proceso descrito anteriormente explica los productos resultantes de la
fermentación etílica de una hexosa, cabe destacar que el proceso se puede detallar en una
glicólisis previa catalizada por un conjunto de enzimas en la que se obtienen 2 moléculas de
piruvato, como lo describe la siguiente reacción:
C6H12O6 → 2 CH3COCOO− + 2 H2O + 2H+
GENERALIDADES
La glucólisis es un ciclo metabólico formado por una serie de reacciones químicas que usan
las células para obtener energía a partir de la degradación de la glucosa. También recibe el
nombre de via de Embden-Meyerhof, en honor a los científicos que la descubrieron.
COL-QFB-F-02 14
Metabólica
2021-2025
La glucosa entra a la célula atravesando la membrana celular, y en el citoplasma se lleva a

cabo la glucólisis, tanto en las células procariotas como en las células eucariotas. Es una vía
catabólica, porque se rompe la molécula de glucosa para producir energía en forma de ATP
(adenosintrifosfato).
En el proceso glicolítico, se produce la oxidación de la glucosa sin la participación del

oxígeno. La glucólisis consta de 10 reacciones químicas, que transforman un compuesto de
seis carbonos, la glucosa, en dos moléculas de tres carbonos, el piruvato (Figura 3).
Figura. 3 Esquema representativo de la glucólisis.
MATERIAL
10 tubos de ensayo
2 matraces Erlenmeyer de 250mL
2 matraces volumétricos de 250mL
2 pipetas graduadas de 10 y 5mL
Tina galvanizada
Gradilla metálica
Tapones de hule
EQUIPO
Termómetro
Parrilla eléctrica con agitador magnético
Balanza
Centrifuga
REACTIVOS
Fosfato dibásico de sodio 0.5 M (solución A)
Fosfato monobásico de potasio 0.5 M (solución B)
COL-QFB-F-02 15
Metabólica
2021-2025
Suspensión de levadura al 5% en la solución A

Suspensión de levadura al 5% en la solución B
Solución de nitroprusiato de sodio al 5%
Hidróxido de amonio concentrado
Sulfato de amonio sólido
Solución de glucosa al 10%
Hidróxido de sodio al 10%
Solución de 2,4-dinitrofenilhidrazina al 0.1% en HCl 2N
Ácido tricloroacético al 10% (TCA)
Agua destilada
MATERIAL BIOLÓGICO
20 g de levadura para pan (Sacharomyces cereviseae) *
PROCEDIMIENTO
1. En dos tubos de ensaye pipetear 5 ml de solución de glucosa al 10% y marcarlos
como A y B.
2. Al tubo A agregar 5 ml de suspensión de levadura en fosfato dibásico de sodio 0.5
M (ligeramente alcalina) y al tubo B añadir 5 ml de suspensión de levadura en
fosfato monobásico de potasio 0.5 M (ligeramente ácida).
3. Colocar los tubos en baño de agua a 37°C por una hora.
4. Añadir a cada tubo 2 ml de ácido tricloroacético al 10% y mezclar vigorosamente,
utilizando tapones de hule (realizar con cuidado).
5. Centrifugar por 10 minutos a 300 rpm, separar el sobrenadante y usarlo para la
determinación del piruvato.
Determinación de piruvato usando nitroprusiato de sodio.

1. Hervir los sobrenadantes por 3 minutos en baño maría
2. En un tubo de ensayo agregar 2 ml del sobrenadante sobre 1g de sulfato de
amonio sólido.
3. Agregar 2 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 5% y mezclar
vigorosamente.
4. Dejar deslizar con cuidado por las paredes del tubo hidróxido de amonio
concentrado, hasta que se formen dos capas.
COL-QFB-F-02 16
Metabólica
2021-2025
Determinación de piruvato con 2,4-dinitrofenilhidrazina como prueba

cuantitativa.
1. Agregar 1ml de solución saturada de 2,4-dinitrofenilhidrazina a 2 ml de
sobrenadante.
2. Mezclar fuertemente y colocar 2 o 3 gotas de esta mezcla en otro tubo de ensayo.
3. Agregar 1ml de solución de hidróxido de sodio al 10% y diluir hasta 5 ml con agua
destilada. La formación de un color rojo indica la presencia de piruvato.
OBSERVACIONES
CONCLUSIONES
COL-QFB-F-02 17
Metabólica
2021-2025
• Cody, G. D., Boctor, N. Z., Filley, T. R., Hazen, R. M., Scott, J. H., Sharma, A., &
Yoder Jr, H. S. (2000). Primordial carbonylated iron-sulfur compounds and the
synthesis of pyruvate. Science, 289(5483), 1337-1340.
• Li Y., Chen J., Lun S. Y. (2001). Biotechnological production of pyruvic acid. Appl.
Microbiol. Biotechnol. 57, 451–459. 10.1007/s002530100804.
• Murillo-Figuiras, M. y Velázquez -Flores, M. Manual de Prácticas de Bioquímica
Metabólica del PE de QFB de la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad
Veracruzana.
COL-QFB-F-02 18
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 3
FERMENTACIÓN ALCOHÓLICA.
OBJETIVO
El alumno observará el grado de fermentación alcohólica a través de la producción de
CO2 demostrando la importancia de la concentración de un sustrato y comprenderé la
glucólisis como primer paso para la fermentación y primera etapa de la respiración
anaeróbica.
FUNDAMENTO
Existe una ruta de metabolismo del piruvato que conduce al etanol. En algunos tejidos
vegetales y en ciertos invertebrados, protistas y microorganismos, tales como la levadura
de la cerveza, el piruvato se convierte, en condiciones anaerobias o de hipoxia, en etanol y
CO2, proceso denominado fermentación alcohólica (o etanólica).
La fermentación alcohólica al igual que la láctica tiene como propósito obtener energía. El
ácido pirúvico se oxida. La glucosa (en la glucólisis) forma dos moléculas de ácido pirúvico
(piruvato) que se oxidan nuevamente para obtener un acetaldehído y como producto
residual alcohol etílico y CO2 (Figura 4).
Figura 4. Reacción general de la fermentación alcohólica.
GENERALIDADES
Toda célula viva debe extraer de alguna manera energía libre de los nutrientes que obtiene
del medio. Los mecanismos enzimáticos utilizados para extraer la energía libre de
compuestos como la glucosa y para conservar una parte de ella en una forma biológicamente
COL-QFB-F-02 19
Metabólica
2021-2025
útil, como ATP, son muy parecidas en todas las células. Algunas bacterias efectúan el
proceso denominado respiración anaerobia; es decir, una respiración que ocurre en
ausencia de oxígeno. En la fermentación, que también es anaerobia, se genera ATP mediante
un proceso en el que utilizan compuestos orgánicos como donadores y aceptores de
electrones.
Ciertos tipos de bacterias viven exclusivamente de la fermentación; otras recurren a ese

proceso cuando se agota el oxígeno en su medio. La producción de alcohol a partir del
azúcar es un ejemplo de fermentación. Cuando se agota el oxígeno, las levaduras convierten
el piruvato en etanol. Ciertas bacterias y algunas células animales, principalmente las
musculares, son capaces de obtener energía por la vía anaerobia (como en la fermentación)
durante un tiempo, a través de la producción de lactato. La ineficiencia del proceso
anaerobio (fermentación) demanda el consumo de gran cantidad de combustible. La
levadura Saccharomyces cerevisiae es capaz de metabolizar la glucosa hasta etanol en
condiciones anaerobias y hasta dióxido de carbono en condiciones de aerobiosis.
La fabricación del vino sigue siendo un arte más que una ciencia. Aunque las uvas son en
gran medida las frutas más frecuentemente usadas para su elaboración, otras tales como los
duraznos también se pueden utilizar para hacer los vinos. El procedimiento para hacer vino
de uva en casa es simple. El jugo de uva se inocula con un cultivo iniciador de levaduras
compradas en un supermercado.
La fermentación primaria dura aproximadamente una semana; durante este tiempo la

sacarosa originalmente presente en el jugo se convierte en etanol y células de levadura con
el desarrollo de dióxido de carbono. El exceso de células de la levadura se quita del jugo
junto con otros sedimentos, y se procede a una fermentación secundaria más lenta para
desarrollar el sabor final.
Uso del alcoholímetro.

Un alcoholímetro es un dispositivo de flotación usado para medir la densidad de un líquido.
Debido a que el líquido ejerce una fuerza de flotabilidad igual al peso del volumen desplazado
por el alcoholímetro, el contador flotará más arriba en un líquido más denso que en un
líquido más ligero, en general, una solución más densa tiene más sólidos disueltos. Un
alcoholímetro convencional puede medir fácilmente la gravedad específica de un líquido con
una exactitud de 0.001.
Muchas escalas están disponibles en un alcoholímetro. Uno típico empleado en la industria

de las bebidas alcohólicas permite lecturas en la escala de Balling/Brix y la del potencial de
alcohol (PA), así como la escala de gravedad específica. La escala de Balling, o Brix, cuya
calibración está basada en los porcentajes en peso del azúcar en la solución; mientras que,
la escala de PA es una indicación del porcentaje potencial (de volumen) de alcohol que
COL-QFB-F-02 20
Metabólica
2021-2025
puede ser producido con la fermentación básica en la conversión completa del azúcar
originalmente presente en la solución.
Generalmente, el azúcar residual está presente y es a veces deseable para el sabor. Observe
que, por razones históricas, el contenido en alcohol está medido comúnmente en unidades
de porcentaje de volumen o de prueba, mientras que el contenido del azúcar se expresa en
porcentaje de peso. Ambas unidades se utilizan extensamente en la industria del vino.
La manera apropiada de usar un alcoholímetro es hacerlo girar suavemente en el jugo de

uva, mosto, o el vino para el cual la gravedad específica debe ser medida. El torcer del
alcoholímetro quita la mayoría de las burbujas de aire de su superficie que pueda invalidar
la medida. Una probeta graduada se utiliza generalmente para este propósito. Se requiere
de dos lecturas para estimar el contenido en alcohol en un vino fermentado. La primera
lectura se toma al principio de la fermentación. La segunda lectura al final de la misma. Así,
el contenido en alcohol actual es simplemente el valor final menos el valor inicial. Debido a
que la densidad de un líquido es una función de la temperatura, las lecturas de la gravedad
específica se deben corregir para obtener los valores correspondientes en 15.5° C, la
temperatura en la cual el contador está calibrado (Tabla 1).
Temperatura ºC Corrección
10 0
15.5 0
20 + 0.0001
25 + 0.0002
30 + 0.0003
35 + 0.0005
40 + 0.0007
MATERIAL
Probeta graduada de 250 mL
Tubos de ensaye de 13 X 100
6 frascos o botellas de boca ancha con tapa plástica perforada
Alcoholímetro (hidrómetro)
Manguera de venoclisis
EQUIPO
Balanza granataria
REACTIVOS:
Jugo de uva natural
COL-QFB-F-02 21
Metabólica
2021-2025
Sacarosa
MATERIAL BIOLÓGICO
Cultivo activo de levadura Saccharomyces ellipsoideus
PROCEDIMIENTO
Cultivo iniciador de levadura
1. Adicionar 1 g del cultivo de levadura de vino seco en 100 mL de jugo recién

preparado de frutas. Vea la nota 1. Dejar la levadura crecer en un envase tapado sin
apretar, a temperatura por 24 h.
2. Lavar y desinfectar perfectamente los frascos y las uvas. Extraer con todas las
medidas de higiene el jugo y colocar 100 ml de este en 4 frascos.
Fermentación primaria:
1. Agregar sacarosa al jugo de uva para preparar los 4 sustratos como se muestra en
la Tabla 2.
Sustrato Sacarosa (g/100 ml)

A 0
B 10
C 20
D 30
2. Medir la gravedad específica y el valor de PA para cada uno de los sustratos

iniciales con un alcoholímetro. Este es el valor inicial de PA que será utilizado más
adelante para estimar el contenido en alcohol.
3. Inocular cada frasco o botella con 20 mL del cultivo iniciador de levadura
preparado en el paso previo.
4. Tapar la botella del jugo con un tapón perforado al cual se incorpora una pieza de
manguera de venoclisis extendida del tapón para proporcionar un respiradero para
el dióxido de carbono desarrollado. El extremo del tubo se sumerge en agua en un
pequeño tubo de prueba tapado para la botella, así se previene la entrada del
oxígeno, que altera el metabolismo de la levadura y estropea el vino. Al mismo
tiempo, el dióxido de carbono puede escaparse de la botella.
5. Fermente a temperatura ambiente por una semana.
COL-QFB-F-02 22
Metabólica
2021-2025
Fermentación secundaria
1. Al término de una semana, decante el jugo de la botella para limpiar los envases
temporales individuales.
2. Medir los valores de PA para cada uno de los sobrenadantes con un alcoholímetro.
Estimar el contenido en alcohol restando el valor final del PA del valor inicial del
PA.
3. Desechar el sedimento y lavar cada botella con agua.
4. Verter el jugo nuevamente dentro de la botella limpia. Poner detrás el ensamblaje
limpio del tapón de goma y el tubo Tygon o de venoclisis.
5. Fermentar lentamente por 5 semanas
6. Medir los valores de PA para cada vino
RESULTADOS
Sustrato Contenido de Contenido de

Alcohol en alcohol en
fermentación fermentación
primaria secundaria
A
B
C
D
OBSERVACIONES
COL-QFB-F-02 23
Metabólica
2021-2025
CONCLUSIONES
• Casados Vázquez L.E. (2004). Manual de Prácticas de Bioquímica. Trabajo Práctico
Educativo para obtener el título de Químico Farmacéutico Biólogo. Universidad
Veracruzana. Xalapa, Ver.
COL-QFB-F-02 24
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 4
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA SUCCINATO
DESHIDROGENASA
OBJETIVO
El estudiante comprenderá el funcionamiento del Ciclo de Krebs por medio de la actividad
de una de las enzimas involucradas en dicho ciclo.
FUNDAMENTO
La conversión de succinato a fumarato, la tercera oxidación del ciclo del ácido cítrico, es
catalizada por la succinato deshidrogenasa, una flavoproteína y oxidoreductasa que contiene
FAD (Figura 5). Dicha enzima exhibe una estricta especificidad estereoquímica, eliminando
hidrógeno en forma exclusiva por eliminación trans. No se conocen características
regulatorias in vivo significativas para este paso. La enzima está sujeta a una poderosa
inhibición competitiva por el malonato, lo que constituye una manera de inhibir la actividad
del ciclo del ácido cítrico en sistemas de laboratorio. Mientras que las otras enzimas del
ciclo del ácido cítrico son proteínas solubles presentes en la matriz mitocondrial, la
succinato deshidrogenasa es única porque está asociada a la membrana y se localiza de
modo específico en la membrana mitocondrial interna, permitiendo la entrada de electrones
en la cadena respiratoria formando parte del complejo II. En este experimento se utiliza el
Azul de Metileno como el aceptor final de electrones.
Figura 5. Conversión de succinato a fumarato.
GENERALIDADES
La oxidación de la Acetil-CoA derivada de la glucosa, los ácidos grasos y los aminoácidos es
la función primaria del ciclo de Krebs, el cual la procesa en una serie de reacciones que se
inician y terminan con el oxaloacetato; en cada vuelta del ciclo de Krebs se produce un ATP
por fosforilación a nivel del sustrato y se liberan cuatro pares de hidrógeno que alimentan
la cadena respiratoria con la producción de 12 ATP en la fosforilación oxidativa. El ciclo de
COL-QFB-F-02 25
Metabólica
2021-2025
Krebs se lleva a cabo por enzimas solubles (a excepción de la succinato deshidrogenasa que
es parte integral de la membrana interna) de la matriz mitocondrial. Además de su papel
central en la oxidación de la acetil-CoA, el ciclo de Krebs participa en los siguientes
procesos metabólicos (Figura 6):
Figura 6. Utilización de intermediarios del Ciclo de Krebs en la síntesis de biomoléculas.
Gluconeogénesis: Reúne numerosos sustratos que se convierten en oxaloacetato. Este

compuesto sale de la mitocondria en forma de malato, citrato o aspartato y se transforma
en el citosol, primero en fosfoenol piruvato y después en glucosa.
Biosíntesis de los Ácidos Grasos: Aporta la molécula de citrato que, al salir de la mitocondria,
es transformada con gasto de un ATP por la citratoliasa en oxaloacetato y acetil-CoA, que
es el alimentador inicial de la biosíntesis de los ácidos grasos. El oxaloacetato se reduce a
malato, el cual es oxidado por la enzima málica para la producción de NADPH, coenzima
indispensable en la biosíntesis de los ácidos grasos.
Interconversión de Aminoácidos: Numerosos aminoácidos entregan sus carbonos al ciclo de
Krebs al transformarse por reacciones sucesivas en alguno de los metabolitos clave del ciclo:
α-cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato y oxaloacetato; una vez ahí, mediante las reacciones
del ciclo de Krebs, pueden transformarse en algún otro aminoácido que se derive de otro
intermediario del ciclo.
Biosíntesis de Purinas y Pirimidinas: El ciclo de Krebs alimenta la síntesis de bases púricas y
pirimídicas aportando aspartato y glutamina.
Biosíntesis de Porfirinas: El ciclo de Krebs aporta el sustrato inicial: la succinil-CoA.
COL-QFB-F-02 26
Metabólica
2021-2025
Regulación del ciclo de Krebs. Por el hecho de que entrega NADH y FADH2 a la cadena
respiratoria y recibe de ella las mismas coenzimas oxidadas, el ciclo de Krebs funciona bajo
el control de la cadena respiratoria y depende en última instancia de la fosforilación
oxidativa. Sin embargo, el ciclo de Krebs responde a moduladores alostéricos generados en
el propio ciclo y también en otras vías del metabolismo; son moduladores negativos NADH,
ATP, citrato, succinil-CoA y oxaloacetato y modulador positivo ADP.
MATERIAL
1 Mortero
1 Gradilla
2 Tubos de ensaye de 15 x 125
2 Pipetas de 5 ml
1 Pipeta de 1 ml
1 Termómetro de 0 a 100°C
Arena de vidrio o perlas de ebullición
EQUIPO
Baño María
Refrigerador
Balanza granataria
REACTIVOS
10 ml de Aceite de vaselina o vegetal
50 ml de Ácido succínico al 3 % neutralizado con hidróxido de sodio al 10 % hasta pH 7.4
25 ml de Azul de metileno al 0.001 %
10 ml de Ácido tricloroacético al 20 %
MATERIAL BIOLÓGICO
1g de músculo e hígado frescos de diferentes animales (pollo, res, cerdo).
PROCEDIMIENTO
1. Triture cuidadosamente con arena de vidrio 1 g del tejido en un mortero,
añadiendo de 3 a 4 mL de la disolución de ácido succínico y filtre esa mezcla a través de una
gasa.
2. El líquido homogeneizado se reparte en dos porciones iguales, las cuales se colocarán en
tubos de ensaye.
3. En el tubo control se añade 1 mL de disolución de ácido tricloroacético para destruir la
enzima.
4. Añada a ambos tubos, 2 gotas de azul de metileno y agítelos.
5. Sobre la superficie del líquido de cada tubo se vierten de 0.5 a 1 mL de aceite con el fin
de aislar el oxígeno del aire.
COL-QFB-F-02 27
Metabólica
2021-2025
6. Los tubos se incuban en baño maría a 50° C durante 10 minutos.

7. Una vez transcurrido este tiempo, en el tubo de ensaye experimental se observa
la decoloración del azul de metileno.
8. Procesar para el desecho, todos los tejidos utilizados de acuerdo a los lineamientos de
la NOM-087-ECOL-SSA1-2002 y se disponen los residuos químicos de acuerdo a la
NOM-
052-SEMARNAT-2005.
OBSERVACIONES
CONCLUSIONES
COL-QFB-F-02 28
Metabólica
2021-2025
• Casados Vázquez L.E. (2004). Manual de Prácticas de Bioquímica. Trabajo Práctico
Educativo para obtener el título de Químico Farmacéutico Biólogo. Universidad
Veracruzana. Xalapa, Ver.
• Melo Ruiz, V., Cuamatzi Tapia, O. (2007). Bioquímica de los procesos metabólicos.
2ª ed. Editorial Reverté.
• Méndez, JD. (2001). Experimentos Básicos de Bioquímica. Editorial Prado. México.
• NOM-052-SEMARNAT-2005, Que establece las características, el procedimiento de
identificación, clasificación y los listados de los residuos peligrosos.
http://www.dof.gob.mx/normasOficiales/1055/SEMARNA/SEMARNA.htm
COL-QFB-F-02 29
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 5
ESTUDIO DEL BOMBEO DE PROTONES POR LEVADURAS;
EFECTO DE LOS INHIBIDORES DE LA CADENA DE TRANSPORTE Y
DE LOS DESACOPLANTES.
OBJETIVO
El estudiante relacionará el consumo de glucosa con los cambios de pH producidos por las
levaduras e interpretará el efecto de los inhibidores y los desacoplantes sobre la salida de
protones.
FUNDAMENTO
Las levaduras (Saccharomyces cerevisiae) son organismos unicelulares que se dividen por
gemación. En común con otras células eucariontes, las levaduras tienen un núcleo en donde
reside la información genética de la célula, mitocondrias endonde se lleva a cabo la síntesis
de ATP y un retículo endoplásmico y aparato de Golgi que se encargan de la síntesis de
proteínas cuya localización final es la membrana plasmática o el exterior.
A nivel de la membrana plasmática, las levaduras tienen una ATPasa de H+ que acopla la
hidrólisis del ATP con el bombeo de protones hacia afuera de la célula. Esta proteína es
semejante desde un punto de vista estructural y funcional a la ATPasa de Na+/K+ de las
células animales y, aligual que la bomba de sodio/potasio, se inhibe con concentraciones
micromolares de vanadato. Como resultado de la actividad de la ATPasa de H+ en la
levadura, se genera un gradiente electroquímico de protones que se utiliza para impulsar
eltransporte de nutrientes al interior de la célula, proceso catalizado por sistemas de
transporte llamados simportadores o uniportadores.
Para darse una idea de la importancia de esta enzima en la economía celular y en la

energización de la membrana celular, basta decir que la ATPasa de H+ consume hasta un
25 % delATP que se sintetiza en la célula. Además de esta ATPasa de H+ de la
membranaplasmática, las levaduras tienen otra bomba de protones en la membrana interna
de las mitocondrias,la ATP sintasa, que se encarga de la síntesis del ATP. En contraste con
la enzima de membrana plasmática, el flujo de protones a través de la ATP sintasa induce la
síntesis de ATP. Uno de los inhibidores más efectivos de esta enzima es la oligomicina. Así,
se puede proponer uno de los muchos ciclos en los que interviene el ATP en la levadura:
por un lado, el ATP se sintetiza en la mitocondria por medio de la ATP sintasa, y a nivel de
la membrana plasmática, la ATPasa de H+ lo hidroliza para bombear protones al exterior de
la célula. El factor común en ambos casos es un flujo de protones a través de la membrana.
COL-QFB-F-02 30
Metabólica
2021-2025
GENERALIDADES
En los organismos aerobios es esencial que las enzimas del ciclo de Krebs estén asociadas
con las del sistema de transporte de electrones. Es a través de esta oxidación que los
nucleótidos de la piridina (NADP y NAD) y el FAD, reducidos en el ciclo de Krebs, son
devueltos a su forma oxidada. La energía cedida en estas oxidaciones es utilizada en la
síntesis de ATP.
El sistema transportador de electrones está constituido por una serie secuencial de enzimas
del grupo de los citocromos, capaces de pasarse electrones de uno a otro. Los electrones,
tomados por aceptores de hidrógeno (NADP, NAD, FAD) a partir de los pasos oxidativos
de la respiración, acaban pasando al sistema trasportador de electrones, en donde van
“descendiendo” a lo largo de la cadena de los citocromos. Es especialmente importante para
la célula viva el hecho de que en cada paso de este sistema, el nivel de energía del electrón
disminuye, de manera que la diferencia de energía pueda ser trasformada en energía de
enlace fosfato por conversión de ADP en ATP.
Durante la reoxidación de ubiquinona reducida (UQ) los iones hidrógeno pasan al

citoplasma; solo los electrones circulan a lo largo de una serie de las enzimas citocrómicas.
Para cada par de electrones que pasan por este sistema, se forman 3 moléculas de ATP. La
síntesis de ATP tiene lugar en la oxidación del NADH, en la oxidación de dos citocromos
b y en la oxidación de dos citocromos a. Cuando alcanzan su nivel de energía más bajo, los
electrones son pasados al oxígeno desde el citocromo a3 reducido, activando así el oxígeno.
En este estado, el oxígeno puede aceptar iones libres de hidrógeno para formar agua (Figura
7).
Fig. 7 Cadena transportadora de electrones.
COL-QFB-F-02 31
Metabólica
2021-2025
MATERIAL
3 vasos de precipitado de 100 ml
2 pipetas graduadas de 5 ml
2 pipetas gradudas de 10 ml
Piseta con agua destilada
EQUIPO
Potenciómetro
REACTIVOS
15 ml de solución de glucosa al 10%
1 ml de solución de dinitrofenol 40 mmol/l en etanol
1 ml de solución de azida de sodio 400 mmol/l
Agua destilada
MATERIAL BIOLÓGICO
Saccharomyces cerevisiae 200 mg/ml en agua destilada
PROCEDIMIENTO
Experimento 1 (Control)
1. Diluir 5 ml de la levadura con 40 ml de agua destilada.
2. Determinar el pH de la solución y repetir la medición dos veces más con intervalos de 3
minutos para obtener la línea basal.
3. Adicionar 5 ml de glucosa a 10 %, agitar y medir el pH.
4. Determinar el pH de la solución cada 5 minutos 2 veces, y luego cada 10 minutos 2 veces
más.
Experimento 2 (Dinitrofenol)
2. Añadir por decantación (no pipetear) 0.2 ml de la solución de dinitrofenol 40 mmol/l,
concentración final de 200 µmol/l.
4. Esperar 5 minutos.
más.
Experimento 3 (Azida)
COL-QFB-F-02 32
Metabólica
2021-2025
2. Añadir por decantación (no pipetear) 0.5 ml de la solución de azida de sodio 400 mmol/l,
concentración final de 5 mmol/l. Agitar con cuidado.
4. Esperar 5 minutos.
más.
Registrar sus datos en la siguiente tabla.
Registrar los resultados en una tabla y graficar los cambios de pH para cada experimento.
pH
0 5 min 10 min 20 min 30 min
Control
Dinitrofenol
Azida
OBSERVACIONES
CONCLUSIONES
COL-QFB-F-02 33
Metabólica
2021-2025
• FES Zaragoza (2017). Manual de Prácticas de Laboratorio de Bioquímica. Facultad
de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de México.
COL-QFB-F-02 34
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 6
IDENTIFICACIÓN DE GLUCÓGENO EN TEJIDO ANIMAL.
OBJETIVO
El estudiante identificará la presencia de glucógeno en músculo animal mediante
reacciones específicas para carbohidratos y lo relacionará con el metabolismo del
glucógeno.
FUNDAMENTO
El glucógeno es la forma de almacenamiento de la glucosa en los tejidos animales. Se
encuentra principalmente en el hígado y en el músculo representando hasta un 10% y un 1-
2% de su peso húmedo, respectivamente. Las propiedades físicas y químicas de muchos
polisacáridos neutros difieren lo bastante de las de otras biomoléculas, para permitir su fácil
aislamiento. El glucógeno se puede liberar del hígado por calentamiento con una base fuerte,
hasta la destrucción total del tejido. Al añadir ácido tricloroacético al homogeneizado
anterior, precipitan numerosas sustancias de peso molecular elevado, como las proteínas y
los ácidos nucleicos, en tanto que el glucógeno continua disuelto. El glucógeno puede
separarse de los monosacáridos y otros compuestos hidrosolubles por precipitación con
alcohol, porque los polisacáridos son mucho menos solubles en alcohol acuoso que los
monosacáridos.
GENERALIDADES
El glucógeno, reserva de glucosa en los animales, se almacena principalmente en hígado y
músculo. Aproximadamente 1 o 2% del peso húmedo del músculo en reposo de un adulto
bien alimentado nos daría unos 400g de glucógeno; en cambio en el hígado entre el 6 y 8%
de su peso húmedo, unos 100g corresponden a este polisacárido.
La misión del glucógeno es la de proveer la fuente para que la célula muscular sintetice el
ATP necesario para la contracción muscular y en el hígado el glucógeno degradado sirve
para mantener los niveles normales de glucosa en la sangre, en cambio la síntesis de
glucógeno tiene lugar durante la fase posprandial de absorción, cuando la concentración de
glucosa en la vena porta es superior a 150 mg/100ml. Las moléculas de glucógeno se
encuentran almacenadas en gránulos citoplasmáticos, acompañadas de las enzimas
necesarias para su síntesis y para su degradación. Es decir si la célula o el organismo
requieren un aporte energético de emergencia como en los casos de estrés o alerta, el
glucógeno se degrada para dar glucosa y por degradación de ésta obtener energía. Gracias
a la capacidad de almacenamiento de glucógeno, se reducen al máximo los cambios de
presión osmótica que la glucosa libre podría ocasionar tanto en el interior de la célula como
en el medio extracelular.
El glucógeno muscular proporciona una fuente fácilmente disponible de glucosa-1-fosfato

para glucólisis dentro del músculo en sí. El glucógeno hepático funciona para almacenar
COL-QFB-F-02 35
Metabólica
2021-2025
glucosa y exportarla para mantener la concentración de glucosa en sangre durante el estado

de ayuno. La concentración de glucógeno en el hígado es de alrededor de 450 mol/L
equivalentes de glucosa después de una comida; disminuye a alrededor de 200 mmol/L tras
ayuno de toda la noche; luego de 12 a 18 horas de ayuno, el glucógeno hepático está agotado
casi en su totalidad. Si bien el glucógeno hepático no produce de manera directa glucosa
libre (porque el músculo carece de glucosa 6fosfatasa), el piruvato formado mediante
glucólisis en el músculo puede pasar por transaminación hacia alanina, que se exporta desde
el músculo y se usa para gluconeogénesis en el hígado (Figura 8). Las enfermedades por
depósito de glucógeno son un grupo de trastornos hereditarios que se caracterizan por
movilización deficiente de glucógeno o depósito de formas anormales del mismo, lo que
lleva a daño hepático y debilidad muscular; algunas de estas enfermedades dan por resultado.
La estructura muy ramificada del glucógeno proporciona un gran número de sitios para
glucogenolisis, lo que permite liberación rápida de glucosa 1fosfato para actividad muscular.
Los atletas de resistencia requieren liberación más lenta y más sostenida de glucosa-1-
fosfato.
La formación de puntos de ramificación en el glucógeno es más lenta que la adición de

unidades de glucosa a una cadena lineal, y algunos atletas de resistencia practican carga de
carbohidratos: hacer ejercicio hasta quedar exhausto (cuando el glucógeno muscular está
agotado en su mayor parte), seguido por una comida con alto contenido de carbohidratos,
lo que da por resultado síntesis rápida de glucógeno, con menos puntos de ramificación que
lo normal.
Figura 8. Metabolismo del glucógeno
COL-QFB-F-02 36
Metabólica
2021-2025
MATERIAL
2 Tubos de ensaye de 15 X 150 mm
11 Tubos de ensaye de 13 X 100 mm
1 Vidrio de reloj (refrigerado 24 hrs antes)
1 Mortero con pistilo (refrigerado 24 hrs antes)
1 Pipeta de 1 ml
3 Pipeta de 2 ml
1 Pipeta de 10 ml
2 Probetas de 20 ml
2 Pipetas Pasteur con bulbo
1 Vaso de precipitados de 50 ml
1 Gradilla
2 Trozos de parafilm
Bisturí
Pinzas de disección
Charola de disección
EQUIPO
Centríguga clínica
REACTIVOS
Acido tricloroacético al 10% frio. Alcohol al 95% frio.
Reactivo de Glucosa-oxidasa Spinreact 1001192
Arena de cuarzo
MATERIAL BIOLÓGICO
Hígados de pollo
PROCEDIMIENTO
Obtención del glucógeno

1. Pesar 20 g de hígado en un vidrio de reloj frio.
2. Cortar el hígado en trozos pequeños.
3. Colocar los trozos en un mortero frio con un poco de arena de cuarzo y moler
perfectamente, añadir poco a poco, 20 ml de ácido tricloroacetico al 10%, mezclar
con el pistilo.
4. Por decantación colocar el contenido del mortero en 4 tubos de 13 X 100 mm y
centrifugarlos a 3000 rpm durante 5 min.
5. Con ayuda de la pipeta Pasteur, recuperar el sobrenadante en una probeta de para
medir el volumen y traspasarlo a dos tubos de 15 X 150 ml.
COL-QFB-F-02 37
Metabólica
2021-2025
6. Añadir dos volúmenes de alcohol al 95% frío por volumen de sobrenadante a cada
tubo.
7. Tapar cada uno de los tubos con Parafilm y agitar los tubos lentamente y de
manera constante hasta que el glucógeno flocule.
8. Pasar el contenido y repartir en 4 tubos de 13 X 100 mm para centrifugar a 3000
rpm durante 5 min.
9. Con la pipeta Pasteur, desechar el sobrenadante y resuspender el precipitado de
cada tubo en 1.0 ml de agua destilada.
10. Juntar el contenido de todos los tubos en uno solo.
Identificación del glucógeno

1. En dos tubos de ensaye de 13 X 100 mm, coloque 2 ml de la suspensión obtenida.
Marcar los tubos como A y B.
2. En otro tubo de ensaye de 13 X 100 mm, coloque 2ml de agua destilada y
márquelo como C.
3. Al tubo A, agregar 2 ml del reactivo de glucosa-oxidasa, incubar a 37°C durante 5
minutos.
4. A los tubos B y C agregarle 1 ml de lugol a cada uno, agitar y comparar el cambio
de coloración.
OBSERVACIONES
COL-QFB-F-02 38
Metabólica
2021-2025
CONCLUSIONES
• Murray, R. (2013). Harper, Bioquímica Ilustrada. 30 Ed. McGraw-Hill. México.
•
COL-QFB-F-02 39
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 7
RESPIRACIÓN AEROBIA EN PLANTAS
OBJETIVO
El estudiante comprenderá el proceso de respiración aeróbica mediante cambios de
volumen y pH utilizando la solución indicadora de Rojo de Fenol.
FUNDAMENTO
La glucólisis, que es el primer paso en todos los tipos de respiración celular, es anaeróbica
y no requiere oxígeno. Si el oxígeno está presente, la vía continuará hacia el ciclo de Krebs
y la fosforilación oxidativa. Sin embargo, si no hay oxígeno, algunos organismos pueden
experimentar fermentación para producir ATP continuamente. La respiración aeróbica, o
respiración celular en presencia de oxígeno, utiliza el producto final de la glicólisis, el
piruvato, en el ciclo TCA, para producir mucha más moneda de energía en forma de ATP,
que la que se puede obtener por cualquier vía anaeróbica. La respiración aeróbica es
característica de las células eucariotas cuando tienen suficiente oxígeno, y la mayor parte
tiene lugar en las mitocondrias.
La respiración celular puede ocurrir tanto aeróbicamente (utilizando oxígeno) como

aneróbicamente (sin oxígeno). Durante la respiración celular aeróbica, la glucosa reacciona
con el oxígeno, formando ATP que puede ser utilizado por la célula. Se crea dióxido de
carbono y agua como subproductos. La respiración aeróbica se realizan la inmensa mayoría
de células, incluidos los humanos. Los organismos que llevan a cabo este tipo de respiración
reciben el nombre de organismos aeróbicos porque utilizan el oxígeno para realizar el
proceso respiración celular, es el metabolismo energético en el que los seres vivos extraen
energía de moléculas orgánicas, oxidando el carbono con oxígeno (el O2 es el aceptor final
de electrones). En otras variantes de la respiración, el oxidante es distinto del oxígeno
(respiración anaeróbica).
Los seres vivos que llevan a cabo la respiración aeróbica son llamados aerobios. La
respiración aeróbica está en todos los organismos eucariontes y en algunos tipos de bacteria
y arquea. En eucariontes, el oxígeno atraviesa la membrana plasmática y luego las
membranas mitocondriales, siendo en la matriz de la mitocondria donde se une a electrón
electrones y protón protones (que sumados constituyen átomos de hidrógeno) formando
agua. En esa oxidación final y en procesos anteriores se obtiene la energía necesaria para la
fosforilación del ATP. En presencia de oxígeno, el ácido pirúvico, obtenido durante la fase
primera anaerobia o glucólisis, es oxidado para proporcionar energía, dióxido de carbono
y agua. A esta serie de reacciones se le conoce con catabolismoLa ecuación general para la
respiración celular aeróbica es:
COL-QFB-F-02 40
Metabólica
2021-2025
GENERALIDADES
La respiración aeróbica , que se lleva a cabo en presencia de oxígeno, evolucionó después
de que oxígeno fuera parte de la atmósfera terrestre. Este tipo de respiración es útil hoy
en día porque el ambiente es ahora 21% de oxígeno. Sin embargo, algunos organismos
anaeróbicos que se desarrollaron antes de la atmósfera tuviera oxígeno han sobrevivido
hasta la actualidad. Una ventaja importante de la respiración aeróbica es la cantidad de
energía que se libera. Sin oxígeno, los organismos pueden dividir la glucosa en sólo dos
moléculas de piruvato. Esto libera energía solamente para producir dos moléculas de ATP.
Con oxígeno, los organismos pueden descomponer la glucosa hasta que se transforma en
dióxido de carbono. Esto libera la energía suficiente para producir hasta 36 moléculas de
ATP (Figura 9). Por lo tanto, la respiración aeróbica libera mucha más energía que la
respiración anaeróbica.
Figura 9. Rendimiento energético derivado de la respiración aerobia
La cantidad de energía producida por la respiración aeróbica puede explicar por qué los
organismos aeróbicos llegaron a dominar la vida en la Tierra. También puede explicar cómo
los organismos eran capaces de convertirse en organismos multicelulares y aumentar de
tamaño.
COL-QFB-F-02 41
Metabólica
2021-2025
MATERIAL
1 Matraz Erlenmeyer
1 Tapón para matraz erlenmeyer
1 Manguera de látex
1 Pipeta pasteur
1 Pinza para manguera
1 Tubo cónico con tapa oradada
REACTIVOS
Agua destilada
10 ml de solución de rojo de fenol
MATERIAL BIOLÓGICO
20 Semillas germinadas (linaza, frijol, lenteja, garbanzo y alpiste)
PROCEDIMIENTO
1. Adaptar a la manguera, en una punta una pipeta Pasteur.
2. Conectar el otro extremo de la manguera al matraz Erelenmeyer.
3. Colocar a la mitad de la manguera una pinza que evite el paso de gases (Cámara de
germinación).
4. Colocar dentro del matraz Erlenmeyer una gasa húmeda con las 20 semillas
previamente germinadas (Figura 10).
5. Colocar en el tubo cónico 5 ml de solución de rojo de fenol e introducir ahí el
axtremo de la manguera que tiene adaptada la pipeta Pasteur.
6. Cerrar la cámara de germinación con el tapón y liberar la pinza que aprieta la
manguera.
7. Esperar 45 minutos, cerrar la manguera y tapar la cámara de germinación.
8. Observar los cambios de coloración de la solución indicadora de Rojo de Fenol.
Figura10. Esquema de la cámara de germinación
COL-QFB-F-02 42
Metabólica
2021-2025
OBSERVACIONES
CONCLUSIONES
• Murray, R. (2013). Harper, Bioquímica Ilustrada. 30 Ed. McGraw-Hill. México.
COL-QFB-F-02 43
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 8
PAPEL DE LALUZ EN LA FOTOSÍNTESIS, FORMACIÓN DE ALMIDÓN EN
LOS VEGETALES.
OBJETIVO
El estudiante observará y determinará la formación de almidón como parte del proceso de
la fotosíntesis en condiciones de luz y oscuridad, utilizando un método colorimétrico.
FUNDAMENTO
La fotosíntesis oxigénica (productora de oxígeno) se produce en dos conjuntos de
reacciones: las reacciones a la luz y las independientes de la luz. En los cloroplastos (Figura
11), las reacciones a la luz ocurren dentro de la membrana tilacoide y las reacciones
independientes de la luz (ciclo de Calvin), dentro del estroma. Las reacciones a la luz utilizan
energía lumínica para impulsar la síntesis de NADPH y ATP. Las moléculas de agua son la
fuente de los electrones y protones usados en la síntesis de estas moléculas. El oxígeno se
libera como producto de desecho. Las reacciones independientes de la luz emplean NADPH
y ATP para convertir el CO2 en moléculas de azúcar.
El almidón es el producto resultante del proceso fotosintético que realizan las plantas en
sus partes verdes y, de forma especial, en sus hojas. En concreto, la fotosíntesis se realiza
en los cloroplastos de las células del parénquima clorofílico. El almidón se colorea de azul-
violáceo cuando se pone en contacto con el lugol, hecho que pone de manifiesto a este
polisacárido.
Figura 11. Proceso de la fotosíntesis
COL-QFB-F-02 44
Metabólica
2021-2025
GENERALIDADES
En la fotosíntesis, las reacciones a la luz son un mecanismo por el cual se energizan los
electrones para usarlos luego en la síntesis de ATP y NADPH. Las especies que generan O2
requieren los dos fotosistemas, I y II. Las especies que viven sin oxígeno pueden usar
complejos semejantes a PSI o PSII. Al funcionar en serie, los dos fotosistemas acoplan la
oxidación de las moléculas de agua inducida por la luz con la reducción de NADP+. La
reacción general es
2 NADP+ + 2H2O ⇌ 2 NADPH + O2 + 2H+
Los potenciales de reducción estándar para las semirreacciones son
O2 + 4e– + 4H+ ⇌ 2H2O E°′ = +0.816 V
NADP+ + H+ + 2e– ⇌ NADPH E°′ = −0.320 V
Por lo tanto, el proceso acoplado tiene un potencial redox estándar de −1.136 V. El cambio
mínimo energético para este proceso (calculado a partir de ΔG°′ = −nF ΔE°′; sección 9.1)
es cercano a 438 kJ (104.7 kcal) por mol de O2 generado. En comparación, un mol de
fotones de luz de 700 nm proporciona cerca de 170 kJ (40.6 kcal). Las observaciones
experimentales revelaron que se requiere la absorción de 8 o más fotones (es decir, 2
fotones por electrón) para generar cada molécula de O2. Por consiguiente, se absorben 1
360 kJ (325 kcal) en total (es decir, 8 veces 170 kJ) por cada mol de O2 producido. Esta
energía es más que suficiente para cubrir la reducción de NADP+ y establecer el gradiente
protónico para la síntesis de ATP.
El proceso de fotosíntesis inicia con la estimulación del PSII con la energía de la luz. Se
transfiere un electrón a la vez a una cadena de portadores de electrones que conecta los
dos fotosistemas. Conforme los electrones se transfieren del PSII a PSI, los protones se
bombean a través de la membrana tilacoide desde el estroma al espacio tilacoidal. El ATP
se sintetiza conforme los protones fluyen de regreso al estroma mediante la ATP sintasa.
Cuando P700 absorbe un fotón adicional, se libera como electrón energizado. Este electrón
se sustituye de inmediato por un electrón aportado por PSII. El electrón de PSO recién
energizado se transfiere por una serie de proteínas con hierro-azufre y una flavoproteína a
NADP+, el aceptor final de electrones Esta secuencia completa se ilustra en el esquema Z
(Figura 12).
COL-QFB-F-02 45
Metabólica
2021-2025
Figura 12. Esquema Z.
El flujo de electrones del fotosistema II al fotosistema I impulsa el transporte de protones

hacia la luz tilacoidal. Aún no se comprende la transferencia electrónica mediante las
proteínas hierro-azufre FeA y FeB. Los valores de E°′ son aproximados. (MC, cúmulo de
manganeso; tir (Yz), tir161 en D1; PC, plastocianina; A0, clorofila A; A1, filoquinona; Fx, FA
y FB, una serie de cúmulos de hierro-azufre; FD, ferredoxina; FNR, ferredoxina-NADP
oxidorreductasa.)
El almidón es una molécula compuesta por dos tipos de polímeros: la amilosa y la

amilopectina. La amilopectina está formada por unidades de glucosyl unidas por enlaces α-
1,4 y altamente ramificadas en la posición α- 1,6 en intervalos de 10nm a lo largo del eje de
la molécula y constituye entre el 85-70% del almidón. La amilosa es una cadena
fundamentalmente linear de glucanos α-1,4 con limitados puntos de ramificación en la
posición α- 1,6 y constituye entre 15-30 % del almidón. La amilopectina es más estable que
la amilosa debido a los limitados enlaces de hidrógeno, que le confieren fluidez, alta
viscosidad y elasticidad a las pastas y espesantes. Las proteínas, lípidos y minerales son
componentes cuantitativamente menores del almidón.
La distribución polimodal de cadenas de glucanos de diferentes longitudes, el agrupamiento

de puntos de ramificación dentro de la amilopectina permiten la formación de cadenas en
doble hélice, que pueden empaquetarse en arreglos organizados para formar la estructura
semicristalina de la matriz del gránulo en el que se alternan regiones de material amorfo
(amilosa) y semicristalino (amilopectina) que se conocen como anillos de crecimiento
presentes en el almidón de las plantas superiores. La longitud de las cadenas de glucano,
proporción de amilosa-amilopectina y el grado de ramificación de esta última definen
drásticamente el tamaño, estructura del gránulo y utilidad del almidón particular de cada
especie. Una característica determinante del almidón es la cristalinidad que puede medirse
COL-QFB-F-02 46
Metabólica
2021-2025
por la amplitud de la dispersión del ángulo de difracción de los rayos X y hace referencia a
los almidones tipo A (encontrado en la mayoría de los cereales), tipo B (encontrado en la
mayoría de los tubérculos) y tipo C (mezcla de ambas formas encontrada en las legumbres).
Otras características asociadas al gránulo como la forma, tipo de superficie y cantidad de
grupos fosfatos también influyen en sus propiedades y usos.
MATERIAL
3 Cajas petri
1 Vaso de precipitados de 200 ml
Papel aluminio
EQUIPO
Parrilla de calentamiento
REACTIVOS
20 ml de Solución de lugol
100 ml de Etanol al 90%
Agua destilada
MATERIAL BIOLÓGICO
1 planta de geranio (cualquier especie del género Geranium)
PROCEDIMIENTO
1. Tapar una parte de la hoja de un geranio con un trozo de papel aluminio de unos 2 cm
de ancho
2. Mantener iluminada la planta de geranio durante 4 días.
3. Arrancar una hoja que haya estado cubierta, una hoja sin cubrir y una parcialmente
cubierta, hervirlas en un vaso de precipitado con 200 ml de agua durante 10-15 minutos.
4. Introducir cada hoja en una placa de Petri con alcohol hasta su total decoloración.
5. Lavar cada hoja con agua sin sacarla de la placa.
6. Cubrir la hoja decolorada con tintura de yodo o lugol, durante 6 minutos.
7. Decantar el lugol y lavar la hoja con agua.
OBSERVACIONES
COL-QFB-F-02 47
Metabólica
2021-2025
CONCLUSIONES
• CAPÍTULO 13 Fotosíntesis, McKee T, McKee JR. Bioquímica. Las bases moleculares
de la vida, 5e; 2016.
COL-QFB-F-02 48
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 9
HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA DE LOS LÍPIDOS DE LA LECHE
OBJETIVO
El alumno comprenderá el efecto catalítico de las enzimas hidrolasas sobre los lípidos de la
leche.
FUNDAMENTO
Los lípidos sufren varios cambios ya que al aumentar su temperatura se aceleran los
procesos químicos. Es por eso que el aceite se degrada con rapidez y si en él hay residuos
de algún tipo de alimento gana sabores u olores desagradables. Uno de los principales
cambios y alteraciones químicas de los lípidos de la leche expuestos a alta temperatura es
la hidrólisis.
La hidrólisis es la reacción química entre el aceite y el agua produciendo ácidos grasos libres
que favorecen a la oxidación del producto y por tal oxidación este se deteriora más rápido.
Los motivos por los cuales el aceite y el agua entren en contacto es por la humedad que
posea el aceite durante el calentamiento, enfriamiento o almacenamiento.
Las lipasas y las estearasas son enzimas que catalizan la hidrólisis de los enlaces éster que se
encuentran en un gran número de lípidos saponificables (Figura 13). Estas enzimas están
ampliamente distribuidas en la naturaleza y son especialmente importantes en el intestino
delgado donde tiene lugar la digestión y la absorción de las grasas, debido a que los
triacilgliceroles son insolubles en agua y las enzimas digestivas son solubles en ella. La
digestión de los triacilgliceroles transcurre en las interfaces lípido-agua; consecuentemente
los agentes emulsificantes tales como las sales biliares producen a menudo una estimulación
marcada de la hidrólisis enzimática de los lípidos. En la leche homogenizada, los glóbulos de
grasa se encuentran muy finamente divididos y este material sirve como un sustrato
excelente para las lipasas. La identificación de la actividad de estas enzimas se realiza a través
de una titulación ácido-base, ya que la acción de las lipasas sobre los lípidos saponificables
libera ácidos grasos que pueden ser cuantificados por la valoración del grupo funcional ácido
carboxílico que los caracteriza.
Figura 13. Acción de las lipasas en los lípidos saponificables
COL-QFB-F-02 49
Metabólica
2021-2025
GENERALIDADES
Además de ser una fuente de combustible energético para nuestro organismo (9 calorías
por gramo), los lípidos desempeñan otras funciones fundamentales para el buen
funcionamiento de nuestro cuerpo: constituyen una reserva muy importante de energía
(tejido adiposo o graso), colaboran en la regulación de la temperatura corporal (grasa
subcutánea), envuelven y protegen órganos vitales como el corazón y riñones (grasa
perivisceral), son el vehículo de transporte de las vitaminas liposolubles (A, D, E, K)
facilitando así su absorción; resulta imprescindible para la formación de determinadas
hormonas, suministran ácidos grasos esenciales (linoleico y linolénico) para nuestro
organismo e interviene en la buena palatabilidad de los alimentos (sensación agradable que
producen los alimentos en la boca). Así mismo impiden que las proteínas sean empleadas
como fuente de energía y cumplen una función estructural, estando presente en las
membranas celulares (fosfolípidos de membrana y colesterol).
La digestión de las grasas se inicia en la boca. Las partículas de alimento se separan en otras
más pequeñas mediante la masticación y actúa una enzima, la lipasa lingual, que comienza la
ruptura de los triglicéridos en otras sustancias más sencillas (diglicéridos; molécula de
glicerol unida a dos ácidos grasos). En el estómago actúa la lipasa gástrica y en él se absorben
algunos ácidos grasos de cadena corta y media (con relación al número de carbonos de los
ácidos grasos; 4-6 y 8-10 respectivamente). A nivel de duodeno y yeyuno, porciones del
intestino delgado, gracias a la colecistoquinina, que hace que la vesícula biliar se contraiga y
libere bilis, se produce la emulsión de las grasas facilitada por los movimientos peristálticos.
También actúa la enzima lipasa pancreática y se obtienen finalmente monoglicéridos (una
molécula de glicerol unida a un ácido graso) y ácidos grasos, así como glicerol libre y
colesterol. Los ácidos grasos de cadena corta y media y el glicerol, se absorben y pasan hacia
la sangre y son transportados hacia el hígado. Los ácidos grasos de cadena larga (de más de
12 carbonos) se absorben y se resintetizan en triglicéridos en el enterocito (células del
epitelio o revestimiento del intestino delgado), formándose los quilomicrones, que también
transportan una parte de fosfolípidos y colesterol. A través del sistema linfático los
quilomicrones pasan al torrente sanguíneo.
El 97% del total de los lípidos de la dieta son absorbidos y el resto se expulsan junto con las
heces. Los lípidos absorbidos serán transportados en sangre en forma de lipoproteínas.
Después de comer, es decir, en situación postprandial, los lípidos se emplean como
combustible energético o se almacenan en el tejido adiposo o graso o bien pasan a formar
parte de membranas celulares. En situación interdigestiva o de ayuno, se produce la
movilización de las grasas desde el tejido adiposo, dando lugar a ácidos grasos, los cuales
puede tener distintos destinos metabólicos: ser empleados como fuente de energía en los
tejidos en general, en presencia de oxígeno dan lugar a los cuerpos cetónicos (en situación
de ayuno y falta de glucosa como sustrato energético) o bien forman parte de membranas
de celulares.
COL-QFB-F-02 50
Metabólica
2021-2025
MATERIAL
7 frascos de vidrio de boca ancha (de jugo)
1 bureta de 25 ml
Pinzas para bureta
Sales biliares al 1%
Soporte universal
2 pipetas de 1ml, 5 ml y 10 ml
6 pipetas volumétricas de 10 ml
Tina galvanizada para baño María
Termómetro
EQUIPO
Parrilla de calentamiento
REACTIVOS
Etanol al 95 %
Fenolftaleína
Pancreatina al 1 % en agua
Hidróxido de Potasio 0.05N
MATERIAL BIOLÓGICO
Leche
PROCEDIMIENTO
1. Identificar los frascos de vidrio colocándoles los números del uno al cinco y uno
con el número tres prima (3').
2. Medir cuidadosamente con una pipeta volumétrica 5 ml de leche homogenizada y
verterlos en cada uno de los seis frascos de vidrio
3. Adicionar a cada matraz 1.5 mL de extracto neutro de Pancreatina al 1%.
4. Pipetear en el frasco marcado tres prima (3') 1.0 ml de la solución de sales biliares
al 1%.
5. Colocar todos los frascos en un baño María a 37oC.
6. Después de 15 minutos, retirar del baño María el matraz identificado con el
numero 1 y adicionarle 12.5 ml de Etanol titulando enseguida con la solución de
KOH 0.05N usando Fenolftaleína como indicador. Agitar el matraz durante la
titilación, tan vigorosamente como sea posible ya que la proteína precipitada puede
enmascarar los ácidos grasos libres.
7. Titular tan rápido como sea posible debido a que la digestión realizada por la
enzima continúa durante la titulación.
8. Repetir el procedimiento anterior, sacando el frasco 2 a los 30 minutos, el 3 y 3' a
los 45 min, el 4 a los 60 min y el 5 a los 75 minutos.
COL-QFB-F-02 51
Metabólica
2021-2025
9. Preparar un testigo de la siguiente manera: Añadir en un matraz de 125 ml 5 ml de

la leche homogenizada y 1.5 ml de la solución de Pancreatina hervida previamente
durante tres minutos. Agregar enseguida 12.5 ml de Etanol, la Fenolftaleína y titular
inmediatamente con KOH 0.5N restar este valor a los problemas.
10. Construir una gráfica usando tiempo de hidrólisis en el eje de las abscisas y los
mililitros de Hidróxido de Potasio (KOH) gastados en el eje de las ordenadas,
restando el volumen obtenido en el matraz que contiene el testigo al volumen
obtenido en todos los matraces. Concluya de manera fundamentada los resultados
obtenidos en la gráfica.
OBSERVACIONES
COL-QFB-F-02 52
Metabólica
2021-2025
CONCLUSIONES
• CAPÍTULO 12 Metabolismo de lípidos, McKee T, McKee JR. Bioquímica. Las bases
moleculares de la vida, 5e; 2016.
COL-QFB-F-02 53
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 10
EXTRACCIÓN DE ADN DE TEJIDO VEGETAL
OBJETIVO
El estudiante extraerá ADN a partir de distintos tejidos vegetales.
FUNDAMENTO
El genoma se encuentra organizado en forma diferente en las células procarióticas y
eucarióticas; en estas últimas presenta un mayor grado de complejidad. El genoma de las
células procarióticas está integrado dentro de una sola molécula de DNA circular, dispuesta
de modo compacto en una zona nuclear denominada nucleoide. El tamaño del genoma
bacteriano se puede ejemplificar con el de Escherichia coli; tiene 1 360 nm y se encuentra
constituido por 4 700 kilopares de bases (kpb).
El genoma de las células eucarióticas se encuentra organizado en cromosomas, que son

estructuras de DNA relacionadas con proteínas básicas, a las que se les denomina histonas,
y proteínas no histonas; las histonas tienen carga positiva a pH fisiológico y neutralizan las
cargas negativas del fosfato de los nucleótidos, lo que confiere estabilidad y permite que el
DNA que mide casi 2 metros de longitud se empaquete en un núcleo de 10 µm de diámetro.
El genoma humano está constituido por 46 cromosomas y contiene 5 × 106 kpb en su
totalidad.
De acuerdo con el tipo de célula en estudio, para aislar los ácidos nucleicos es necesario
romper la membrana y la pared celular mediante métodos físicos, químicos o enzimáticos,
para liberar las moléculas de DNA al medio extracelular. A partir de esto, la purificación de
los ácidos nucleicos se realiza mediante la extracción de las proteínas y los lípidos con
solventes orgánicos, y su recuperación, en un paso posterior, al precipitarlos con alcohol
(isopropanol o etanol).
GENERALIDADES
Los ácidos nucleicos son polímeros de nucleótidos unidos por enlaces fosfodiéster. Por su
composición química, se han clasificado en dos tipos: ácido desoxirribonucleico (DNA) y
ácido ribonucleico (RNA). Los nucleótidos que forman al DNA están constituido por el
azúcar 2′-desoxirribosa unido mediante enlace éster a ácido fosfórico y mediante enlace N-
glucosídico a una de las cuatro bases nitrogenadas (adenina, guanina, timina o citosina).
Los nucleótidos del DNA forman una hélice constituida por dos hebras antiparalelas que se
mantienen unidas mediante puentes de hidrógeno. Para empaquetarse, el DNA se une a
nucleoproteínas, denominadas histonas; y cuando se quieren separar estos componentes,
se aplica tratamiento con ácidos o con concentraciones altas de sales.
COL-QFB-F-02 54
Metabólica
2021-2025
Los nucleótidos del RNA se encuentran formados por el azúcar ribosa, unida mediante
enlace glucosídico a una de cuatro bases nitrogenadas (adenina, guanina, uracilo o citocina),
formando moléculas de una sola cadena.
La función del DNA es la de almacenar y transferir la información genética que conforma a

un organismo y a su descendencia. El genoma de un individuo comprende la totalidad de la
información genética contenida en el DNA. El DNA junto con los tres tipos de RNA (rRNA,
tRNA y mRNA) participa en la biosíntesis ordenada de los componentes de la célula,
codificando la expresión espacio temporal de las proteínas y respondiendo a los estímulos
del medio ambiente.
MATERIAL
1 vaso de precipitados de 200 ml
1 Probeta de 50 ml
2 pipetas de 10 ml
10 tubos de ensayo de 15x 125 o tubos cónicos de 15 ml
1 pipeta Pasteur
1 tina galvanizada para baño María
1 Termómetro
REACTIVOS
25 ml de Solución de lisis: 0.1 % de SDS en 25 mM EDTA pH 8.0
10 ml Alcohol etilico 95%
MATERIAL BIOLÓGICO
20 g de jitomate, cebolla, espinacas, alfalfa, soya, granos de elote, chícharos.
PROCEDIMIENTO
1. Pelar y rallar una cebolla mediana con rallador o procesador hasta picarla finamente.
2. Pesar 10 g de cebolla rallada en un vaso de precipitados y adicionar 25 ml de solución
de lisis
3. Dejar 20 min. a temperatura ambiente
4. Filtrar en gasa y recoger en probeta.
5. Transferir 4 ml de filtrado a un tubo de ensayo.
6. Adicionar 2 volúmenes de etanol 95% procurando no mezclar las dos soluciones.
7. En la interfase observar la formación de una fina hebra.
8. Aspirar la interfase con pipeta Pasteur y separarla en un tubo.
9. Precipitar el DNA por calentamiento suave.
10. No desechar el ADN, resuspenderlo en agua destilada y guardar a -20ºC hasta la
siguiente sesión.
OBSERVACIONES
COL-QFB-F-02 55
Metabólica
2021-2025
CONCLUSIONES
COL-QFB-F-02 56
Metabólica
2021-2025
PRÁCTICA No. 11
CARACTERIZACIÓN DE NUCLEÓTIDOS POR MÉTODOS
COLORIMÉTRICOS
OBJETIVO
El estudiante caracterizará la desoxipentosa, desoxirribosa y el grupo fosfato, como
componentes del ADN.
FUNDAMENTO
Para evidenciar la presencia de ácidos nucleicos en extractos celulares vegetales se requiere
células en cantidad suficiente y en medio libre de interferencias que puedan causar lisis
celular o hidrólisis de los ácidos nucleicos por nucleasas. Una completa extracción de ácidos
nucleicos es fundamental para la determinación indirecta.
Una hidrólisis ácida remueve todas las bases púricas (hidrólisis de uniones N-glicosídicas
entre pentosa y las bases púricas) sin afectar las uniones fosfodiester del esqueleto
nucleotídico, por lo tanto obtenemos como producto ácidos nucleicos sin bases púricas.
Las desoxipentosas debido a la hidrólisis ácida sufren deshidratación dando aldehídos δ-
hidroxilevulínicos. Estos reaccionan con difenilamina dando un producto de color azul. Así,
la reacción de difenilamina servirá para caracterizar, indirectamente, la presencia de DNA
en células vegetales.
La pentosa del DNA y RNA puede evidenciarse por la reacción con orcinol. El ácido
sulfúrico hidroliza las uniones fosfodiester y N-glicosídicas, liberando ribosa, bases púricas,
pirimidínicas y acido fosfórico. La pentosa en medio ácido se deshidrata originando furfural
que reacciona con el orcinol dando un producto verde que demuestra la presencia de DNA
y RNA.
El grupo fosfato se identifica por la reacción para fósforo inorgánico, en medio ácido, con
el molibdato (reactivo 1) da fosfomolibdato, color amarillo, que es reducido luego por el
ácido ascórbico (reactivo 2) a azul de molibdeno, color azul verdoso. El reactivo 3
(arsenito/citrato) se combina con el exceso de molibdato impidiendo su reacción posterior
con otros fosfatos.
Cuando se trata el ADN con difenilamina en condiciones ácidas, se forma un compuesto

azul con una absorción definida máxima a 595 nm. Esta reacción la dan en general las 2-
desoxipentosas y no es específica para el ADN. En solución ácida, la estructura lineal de una
desoxipentosa se convierte a la forma b- hidroxilevulinoaldehído altamente reactiva y que
reacciona con difenilamina para dar un complejo azul.
COL-QFB-F-02 57
Metabólica
2021-2025
La reacción de Bial es una reacción general para las pentosas y se debe a la formación de
furfural cuando se calienta la pentosa con ácido clorhídrico concentrado. El orcinol
reacciona con furfural en presencia de cloruro férrico como catalizador, dando una
coloración verde. Solamente los nucleótidos de purina dan una reacción considerable.
La presencia del grupo fosfato se determina indirectamente por la presencia de fósforo

inorgánico con formación de azul de fosfomolibdeno.
GENERALIDADES
Todo organismo vivo está formado por la ampliamente estudiada y conocida molécula de
DNA. Sabemos que los organismos vivos provienen de una única célula ancestral llamada
LUCA. Este hecho nos indica que entre organismos vivos compartimos mucho más de lo
que a veces nos podríamos llegar a imaginar. Por ejemplo, los humanos compartimos el 50%
del DNA con el plátano. Sin embargo, el porcentaje de DNA que compartimos depende de
cómo se mida. Si medimos secuencias idénticas de pares de bases, entonces es bastante
bajo, pero si nos fijamos en los genes con funciones idénticas o similares entonces es de
hecho el 50 %. Algunas de las cosas para las que estos genes codifican son de bioquímica
básica: la replicación del DNA, la transcripción, la traducción, el metabolismo del DNA
(recombinación, reparación), el metabolimso de la célula (catabolismo y anabolismo) y la
regulación del ciclo celular (mitosis). Este tipo de genes se llaman “secuencias conservadas”.
El ADN está formado por unos componentes químicos básicos denominados nucleótidos.
Estos componentes básicos incluyen un grupo fosfato, un grupo de azúcar y una de cuatro
tipos de bases nitrogenadas alternativas. Para formar una hebra de ADN, los nucleótidos se
unen formando cadenas, alternando con los grupos de fosfato y azúcar (Figura 14).
Los cuatro tipos de bases nitrogenadas encontradas en los nucleótidos son: adenina (A),
timina (T), guanina (G) y citosina (C). El orden, o secuencia, de estas bases determina qué
instrucciones biológicas están contenidas en una hebra de ADN. Por ejemplo, la secuencia
ATCGTT pudiera dar instrucciones para ojos azules, mientras que ATCGCT pudiera indicar
ojos de color café. En el caso de los seres humanos , la colección completa de ADN, o el
genoma humano, consta de 3 mil millones de bases organizados en 23 pares de cromosomas,
y conteniendo alrededor de 20,000 genes. Para identificar esta molécula con detalle se
precisa generalmente su aislamiento de la célula, y para ello es necesario un conjunto de
material e instrumentos de laboratorio complejos, sin embargo, sus componentes se pueden
identificar por reacciones coloreadas como la difenilamina y el orcinol.
COL-QFB-F-02 58
Metabólica
2021-2025
Figura 14. Nucleótidos que forman al ADN
MATERIAL
10 tubos de ensaye de 15 x 125 o tubos cónicos de 15 ml
2 pipetas de 10 ml
2 pipetas de 5 ml
2 pipetas de 1 ml
REACTIVOS
2 ml de reactivo difenilamina: 0.2 g en 20 ml de ácido acético glacial y adicionar 0.5 ml de
ácido sulfúrico. (Preparar en el momento)
2 ml de reactivo Bial: 1.5 g de orcinol en 500 ml de HCl concentrado y 20 gotas de cloruro
férrico 100 g/l
1 ml de Molibdato de amonio al 0.4%
1 ml de Ácido ascórbico al 5%
Agua destilada
MATERIAL BIOLÓGICO
ADN de la práctica anterior
PROCEDIMIENTO
Reacción para la caracterización de la desoxipentosa
1. Preparar los tubos de la siguiente forma:
COL-QFB-F-02 59
Metabólica
2021-2025
Tubo A Tubo B
Agua destilada 1 ml -
Extracto de ADN - 1 ml
Reactivo 2 ml 2 ml
difenilamina
2. Hervir 10 minutos, enfriar y observar
Reacción de Bial para la caracterización de la pentosa (ribosa o desoxirribosa)

Tubo A Tubo B
Agua destilada 1 ml -
Extracto de ADN - 1 ml
Reactivo orcinol 2 ml 2 ml
2. Hervir 10 minutos, enfriar y observar
Reacción para la caracterización de los fosfatos

Blanco Problema
Agua destilada 0.1 ml
Extracto 0.1 ml
Molibdato de amonio 0.5 ml 0.5 ml
Mezclar y esperar 30 segundos
Ácido ascórbico 0.5 ml 0.5 ml
Mezclar y esperar 30 segundos
2. Mezclar e incubar 15 minutos a 37ºC
3. Observar
OBSERVACIONES
COL-QFB-F-02 60
Metabólica
2021-2025
CONCLUSIONES
COL-QFB-F-02 61
Metabólica
2021-2025
ANEXOS
COL-QFB-F-02 62
Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Protección
ambiental - Salud ambiental - Residuos peligrosos biológico-
Marco normativo infecciosos - Clasificación y especificaciones de manejo
CNDH Fecha de publicación: 17 de febrero de 2003
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-087-ECOL-SSA1-2002, PROTECCIÓN

AMBIENTAL - SALUD AMBIENTAL - RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICO-
INFECCIOSOS - CLASIFICACIÓN Y ESPECIFICACIONES DE MANEJO
Al margen un sello con el Escudo Nacional, que dice: Estados Unidos Mexicanos.-
Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales.
CASSIO LUISELLI FERNANDEZ, Presidente del Comité Consultivo Nacional de

Normalización de Medio Ambiente y Recursos Naturales, y ERNESTO ENRIQUEZ
RUBIO, Presidente del Comité Consultivo Nacional de Normalización, de
Regulación y Fomento Sanitario, con fundamento en lo dispuesto en los artículos
32 bis fracciones I, II, IV, V y 39 fracciones I, VIII y XXI de la Ley Orgánica de la
Administración Pública Federal; 4 de la Ley Federal de Procedimiento
Administrativo; 5 fracciones V, VI y XIX, 15, 36, 37, 37 Bis, 150, 151, 151 Bis, 160
y 171 de la Ley General del Equilibrio Ecológico y la Protección al Ambiente; 3
fracciones XIII y XIV, 13, apartado A) fracción I, 45, 116, 117, 118, 128, 129 y 393
de la Ley General de Salud; 38 fracción II, 40, fracciones I, III, V, IV, X y XI, 41, 43,
44 y 47 de la Ley Federal sobre Metrología y Normalización; 1o., 2o. y 4o.
fracciones II, III y IV, 5o., 6o. y 58 del Reglamento de la Ley General del Equilibrio
Ecológico y la Protección al Ambiente en materia de Residuos Peligrosos; 2
fracción I incisos a) y c), y 7o. y 66 del Reglamento de la Ley General de Salud en
materia de Control Sanitario de Actividades, Establecimientos, Productos y
Servicios; 10 del Reglamento de la Ley General de Salud en materia de Prestación
de Servicios de Atención Médica; 28, 31 fracción II, 33 y 34 del Reglamento de la
Ley Federal sobre Metrología y Normalización; 8 fracción V del Reglamento
Interior de la Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales; 2 literal C
fracción II del Reglamento Interior de la Secretaría de Salud y 2, fracciones I, II, III,
VII, VIII y IX, 7 fracción XVI, y 12 fracción VI del Decreto por el que se crea la
Comisión Federal para la Protección contra Riesgos Sanitarios, ordenan la
publicación en el Diario Oficial de la Federación de la Norma Oficial Mexicana
NOM-087-ECOL-SSA1-2002, Protección ambiental-Salud ambiental-Residuos
peligrosos biológico-infecciosos-Clasificación y especificaciones de manejo, y
CONSIDERANDO
Que en cumplimiento a lo establecido en la fracción I del artículo 47 de la Ley

Federal sobre Metrología y Normalización, con fecha 1 de noviembre de 2001 se
publicó en el Diario Oficial de la Federación, con carácter de proyecto la Norma
Oficial Mexicana PROY-NOM-087-ECOL-SSA1-2000, Protección ambiental- Salud
ambiental-Residuos peligrosos biológico-Infecciosos-Clasificación y
especificaciones de manejo, mismo que fue elaborado de manera conjunta con la
Secretaría de Salud, con el fin de que dentro de los 60 días naturales siguientes a
Integrado por: Subdirección de Informática Jurídica Página 1 de 20
Dirección General de Tecnologías de Información y Comunicaciones
Comisión Nacional de los Derechos Humanos
su publicación, los interesados presenten sus comentarios ante el Comité

Consultivo Nacional de Normalización para la Protección Ambiental, sito en
bulevar Adolfo Ruiz Cortines número 4209, piso 5o., colonia Jardines en la
Montaña, código postal 14210, Delegación Tlalpan, Distrito Federal o se enviaron
al correo electrónico o al fax que se señalaron. Durante el citado plazo, la
Manifestación de Impacto Regulatorio correspondiente estuvo a disposición del
público en general para su consulta en el citado domicilio, de conformidad con el
artículo 45 del citado ordenamiento.
Que en el plazo de los 60 días antes señalado, los interesados presentaron sus
comentarios al proyecto en cuestión, los cuales fueron analizados por el citado
Comité, realizándose las modificaciones procedentes al mismo. La Secretaría de
Medio Ambiente y Recursos Naturales publicó las respuestas a los comentarios
recibidos en el Diario Oficial de la Federación el día 20 de enero de 2003.
Que habiéndose cumplido con el procedimiento establecido en la Ley Federal

sobre Metrología y Normalización, el Comité Consultivo Nacional de Normalización
para la Protección Ambiental aprobó la Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-
SSA1-2002, Protección ambiental-Salud ambiental-Residuos peligrosos biológico-
infecciosos-Clasificación y especificaciones de manejo, misma que abroga a su
similar NOM-087-ECOL-1995 y su aclaración publicada en el citado órgano
informativo el 12 de junio de 1996, Que establece los requisitos para la
separación, envasado, almacenamiento, recolección, transporte, tratamiento y
disposición final de los residuos peligrosos biológico-infecciosos que se generan
en establecimientos que presten atención médica, actualizando el año de su
expedición. Por lo expuesto y fundado se expide la siguiente:
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-087-ECOL-SSA1-2002, PROTECCION

AMBIENTAL-SALUD AMBIENTAL-RESIDUOS PELIGROSOS BIOLOGICO-
INFECCIOSOS- CLASIFICACION Y ESPECIFICACIONES DE MANEJO
INDICE
0. Introducción
1. Objetivo y campo de aplicación
2. Referencias
3. Definiciones y terminología
4. Clasificación de los residuos peligrosos biológico-infecciosos

5. Clasificación de los establecimientos generadores de residuos

peligrosos biológico-infecciosos
6. Manejo de residuos peligrosos biológico-infecciosos
7. Grado de concordancia con normas y lineamientos internacionales y con

las normas mexicanas tomadas como base para su elaboración
8. Bibliografía
9. Observancia de esta Norma
Apéndice normativo
0. Introducción
La Ley General del Equilibrio Ecológico y la Protección al Ambiente, define como

residuos peligrosos a todos aquellos residuos que por sus características
corrosivas, reactivas, explosivas, tóxicas, inflamables y biológico-infecciosas, que
representan un peligro para el equilibrio ecológico o el ambiente; mismos que
serán manejados en términos de la propia ley, su Reglamento y normas oficiales
mexicanas que expida la Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales
previa opinión de diversas dependencias que tengan alguna injerencia en la
materia, correspondiéndole a la citada SEMARNAT su regulación y control.
Con fecha de 7 de noviembre de 1995, se publicó en el Diario Oficial de la

Federación la Norma Oficial Mexicana NOM-087-ECOL-1995, Que establece los
requisitos para la separación, envasado, almacenamiento, recolección, transporte,
tratamiento y disposición final de los residuos peligrosos biológico-infecciosos que
se generan en establecimientos que presten servicios de atención médica.
Los establecimientos de atención médica son regulados por la Secretaría de

Salud por lo que en la revisión de la norma mencionada, se incluye a los
representantes del sector.
Esta revisión consideró las características de los diferentes tipos de unidades

médicas que prestan atención a poblaciones rurales.
Los residuos peligrosos biológico-infecciosos se han venido manejando en

términos de las regulaciones ambientales antes señaladas, sin embargo fue
necesario actualizar la NOM-087-ECOL-1995, tomándose en consideración las
experiencias y competencias de los sectores involucrados en su cumplimiento, con

el fin de que sus disposiciones sean operativas y adecuadas para proteger el

medio ambiente y la salud de la población en general.
1. Objetivo y campo de aplicación
La presente Norma Oficial Mexicana establece la clasificación de los residuos

peligrosos biológico-infecciosos así como las especificaciones para su manejo.
Esta Norma Oficial Mexicana es de observancia obligatoria para los

establecimientos que generen residuos peligrosos biológico-infecciosos y los
prestadores de servicios a terceros que tengan relación directa con los mismos.
2. Referencias
Norma Oficial Mexicana NOM-052-ECOL-1993, Que establece las características

de los residuos peligrosos, el listado de los mismos y los límites que hacen a un
residuo peligroso por su toxicidad al ambiente, publicada en el Diario Oficial de la
Federación el 22 de octubre de 1993. Esta Norma contiene la nomenclatura en
términos del Acuerdo Secretarial publicado el 29 de noviembre de 1994, por el
cual se actualiza la nomenclatura de 58 normas oficiales mexicanas.
3. Definiciones y terminología
Para efectos de esta Norma Oficial Mexicana, se consideran las definiciones

contenidas en la Ley General del Equilibrio Ecológico y la Protección al Ambiente,
su Reglamento en materia de Residuos Peligrosos, la Ley General de Salud, sus
Reglamentos, y las siguientes:
3.1 Agente biológico-infeccioso
Cualquier microorganismo capaz de producir enfermedades cuando está presente

en concentraciones suficientes (inóculo), en un ambiente propicio (supervivencia),
en un hospedero susceptible y en presencia de una vía de entrada.
3.2 Agente enteropatógeno
Microorganismo que bajo ciertas circunstancias puede producir enfermedad en el

ser humano a nivel del sistema digestivo, se transmite vía oral-fecal.
3.3 Bioterio
Es un área o departamento especializado en la reproducción, mantenimiento y

control de diversas especies de animales de laboratorio en óptimas condiciones,
los cuales son utilizados para la experimentación, investigación científica y

desarrollo tecnológico.
3.4 Carga útil
Es el resultado de la sustracción del peso vehicular al peso bruto vehicular.
3.5 Centro de acopio
Instalación de servicio que tiene por objeto resguardar temporalmente y bajo

ciertas condiciones a los residuos peligrosos biológico-infecciosos para su envío a
instalaciones autorizadas para su tratamiento o disposición final.
3.6 Cepa
Cultivo de microorganismos procedente de un aislamiento.
3.7 Establecimientos generadores
Son los lugares públicos, sociales o privados, fijos o móviles cualquiera que sea
su denominación, que estén relacionados con servicios de salud y que presten
servicios de atención médica ya sea ambulatoria o para internamiento de seres
humanos y utilización de animales de bioterio, de acuerdo con la tabla 1 del
presente instrumento.
3.8 Irreconocible
Pérdida de las características físicas y biológico-infecciosas del objeto para no ser

reutilizado.
3.9 Manejo
Conjunto de operaciones que incluyen la identificación, separación, envasado,

almacenamiento, acopio, recolección, transporte, tratamiento y disposición final de
los residuos peligrosos biológico-infecciosos.
3.10 Muestra biológica
Parte anatómica o fracción de órganos o tejido, excreciones o secreciones

obtenidas de un ser humano o animal vivo o muerto para su análisis.
3.11 Organo

Entidad morfológica compuesta por la agrupación de tejidos diferentes que

concurren al desempeño de un trabajo fisiológico.
3.12 Prestador de servicios
Empresa autorizada para realizar una o varias de las siguientes actividades:

recolección, transporte, acopio, tratamiento y disposición final de residuos
peligrosos biológico-infecciosos.
3.13 Residuos Peligrosos Biológico-Infecciosos (RPBI)
Son aquellos materiales generados durante los servicios de atención médica que
contengan agentes biológico-infecciosos según son definidos en esta Norma, y
que puedan causar efectos nocivos a la salud y al ambiente.
3.14 Sangre
El tejido hemático con todos sus elementos.
3.15 SEMARNAT
Secretaría de Medio Ambiente y Recursos Naturales.
3.16 SSA
Secretaría de Salud.
3.17 Separación
Segregación de las sustancias, materiales y residuos peligrosos de iguales

características cuando presentan un riesgo.
3.18 Tejido
Entidad morfológica compuesta por la agrupación de células de la misma

naturaleza, ordenadas con regularidad y que desempeñan una misma función.
3.19 Tratamiento
El método físico o químico que elimina las características infecciosas y hace

irreconocibles a los residuos peligrosos biológico-infecciosos.

4. Clasificación de los residuos peligrosos biológico-infecciosos
Para efectos de esta Norma Oficial Mexicana se consideran residuos peligrosos

biológico-infecciosos los siguientes:
4.1 La sangre
4.1.1 La sangre y los componentes de ésta, sólo en su forma líquida, así como los
derivados no comerciales, incluyendo las células progenitoras, hematopoyéticas y
las fracciones celulares o acelulares de la sangre resultante (hemoderivados).
4.2 Los cultivos y cepas de agentes biológico-infecciosos
4.2.1 Los cultivos generados en los procedimientos de diagnóstico e

investigación, así como los generados en la producción y control de agentes
biológico-infecciosos.
4.2.2 Utensilios desechables usados para contener, transferir, inocular y mezclar

cultivos de agentes biológico-infecciosos.
4.3 Los patológicos
4.3.1 Los tejidos, órganos y partes que se extirpan o remueven durante las
necropsias, la cirugía o algún otro tipo de intervención quirúrgica, que no se
encuentren en formol.
4.3.2 Las muestras biológicas para análisis químico, microbiológico, citológico e

histológico, excluyendo orina y excremento.
4.3.3 Los cadáveres y partes de animales que fueron inoculados con agentes
enteropatógenos en centros de investigación y bioterios.
4.4 Los residuos no anatómicos
Son residuos no anatómicos los siguientes:
4.4.1 Los recipientes desechables que contengan sangre líquida.
4.4.2 Los materiales de curación, empapados, saturados, o goteando sangre o

cualquiera de los siguientes fluidos corporales: líquido sinovial, líquido pericárdico,
líquido pleural, líquido Céfalo-Raquídeo o líquido peritoneal.

4.4.3 Los materiales desechables que contengan esputo, secreciones pulmonares

y cualquier material usado para contener éstos, de pacientes con sospecha o
diagnóstico de tuberculosis o de otra enfermedad infecciosa según sea
determinado por la SSA mediante memorándum interno o el Boletín
Epidemiológico.
4.4.4 Los materiales desechables que estén empapados, saturados o goteando

sangre, o secreciones de pacientes con sospecha o diagnóstico de fiebres
hemorrágicas, así como otras enfermedades infecciosas emergentes según sea
determinado por la SSA mediante memorándum interno o el Boletín
Epidemiológico.
4.4.5 Materiales absorbentes utilizados en las jaulas de animales que hayan sido
expuestos a agentes enteropatógenos.
4.5 Los objetos punzocortantes
4.5.1 Los que han estado en contacto con humanos o animales o sus muestras
biológicas durante el diagnóstico y tratamiento, únicamente: tubos capilares,
navajas, lancetas, agujas de jeringas desechables, agujas hipodérmicas, de
sutura, de acupuntura y para tatuaje, bisturís y estiletes de catéter, excepto todo
material de vidrio roto utilizado en el laboratorio, el cual deberá desinfectar o
esterilizar antes de ser dispuesto como residuo municipal.
5. Clasificación de los establecimientos generadores de residuos peligrosos

biológico-infecciosos
5.1 Para efectos de esta Norma Oficial Mexicana, los establecimientos

generadores se clasifican como se establece en la tabla 1.
TABLA 1
NIVEL I NIVEL II NIVEL III

• Unidades hospitalarias de 1 a 5 • Unidades hospitalarias de 6 • Unidades hospitalarias de más
camas e instituciones de hasta 60 camas; de 60 camas;
investigación con excepción • Laboratorios clínicos y • Centros de producción e
de los señalados en el bancos de sangre que investigación experimental
Nivel III. realicen análisis de 51 a 200 en enfermedades
• Laboratorios clínicos y muestras al día; infecciosas;
bancos de sangre que • Bioterios que se dediquen • Laboratorios clínicos y
realicen análisis de 1 a 50 a la investigación con bancos de sangre que
muestras al día. agentes biológico- realicen análisis a más de
infecciosos, o 200 muestras al día, o
• Unidades hospitalarias • Establecimientos que • Establecimientos que
psiquiátricas. generen de 25 a 100 generen más de 100
• Centros de toma de kilogramos al mes de RPBI. kilogramos al mes de RPBI.

muestras para análisis

clínicos.
5.2 Los establecimientos generadores independientes del Nivel I que se

encuentren ubicados en un mismo inmueble, podrán contratar los servicios de un
prestador de servicios común, quien será el responsable del manejo de los
residuos peligrosos biológico-infecciosos.
6. Manejo de residuos peligrosos biológico-infecciosos
6.1 Los generadores y prestadores de servicios, además de cumplir con las

disposiciones legales aplicables, deben:
6.1.1 Cumplir con las disposiciones correspondientes a las siguientes fases de

manejo, según el caso:
a) Identificación de los residuos.
b) Envasado de los residuos generados.
c) Almacenamiento temporal.
d) Recolección y transporte externo.
e) Tratamiento.
f) Disposición final.
6.2 Identificación y envasado
6.2.1 En las áreas de generación de los establecimientos generadores, se

deberán separar y envasar todos los residuos peligrosos biológico-infecciosos, de
acuerdo con sus características físicas y biológicas infecciosas, conforme a la
tabla 2 de esta Norma Oficial Mexicana. Durante el envasado, los residuos
peligrosos biológico-infecciosos no deberán mezclarse con ningún otro tipo de
residuos municipales o peligrosos.
TABLA 2
TIPO DE RESIDUOS ESTADO FISICO ENVASADO COLOR

4.1 Sangre Líquidos Recipientes herméticos Rojo
4.2 Cultivos y cepas de agentes Sólidos Bolsas de polietileno Rojo
infecciosos
4.3 Patológicos Sólidos Bolsas de polietileno Amarillo

Líquidos Recipientes herméticos Amarillo

4.4 Residuos no anatómicos Sólidos Bolsas de polietileno Rojo
Líquidos Recipientes herméticos Rojo
4.5 Objetos punzocortantes Sólidos Recipientes rígidos Rojo
polipropileno
a) Las bolsas deberán ser de polietileno de color rojo traslúcido de calibre

mínimo 200 y de color amarillo traslúcido de calibre mínimo 300, impermeables y
con un contenido de metales pesados de no más de una parte por millón y libres
de cloro, además deberán estar marcadas con el símbolo universal de riesgo
biológico y la leyenda Residuos Peligrosos Biológico-Infecciosos (Apéndice
Normativo), deberán cumplir los valores mínimos de los parámetros indicados en
la tabla 3 de esta Norma Oficial Mexicana.
Las bolsas se llenarán al 80 por ciento (80%) de su capacidad, cerrándose antes

de ser transportadas al sitio de almacenamiento temporal y no podrán ser abiertas
o vaciadas.
TABLA 3
PARAMETRO UNIDADES ESPECIFICACIONES

Resistencia a la tensión Kg/cm2 SL: 140
ST: 120
Elongación % SL: 150
ST: 400
Resistencia al rasgado G SL: 90
ST: 150
SL: Sistema longitudinal.
ST: Sistema transversal.
6.2.2 Los recipientes de los residuos peligrosos punzocortantes deberán ser

rígidos, de polipropileno color rojo, con un contenido de metales pesados de no
más de una parte por millón y libres de cloro, que permitan verificar el volumen
ocupado en el mismo, resistentes a fracturas y pérdidas de contenido al caerse,
destructibles por métodos físicos, tener separador de agujas y abertura para
depósito, con tapa(s) de ensamble seguro y cierre permanente, deberán contar
con la leyenda que indique “RESIDUOS PELIGROSOS PUNZOCORTANTES
BIOLOGICO-INFECCIOSOS” y marcados con el símbolo universal de riesgo
biológico (Apéndice Normativo).
a) La resistencia mínima de penetración para los recipientes tanto para

punzocortantes como para líquidos, debe ser de 12.5 N (doce punto cinco

Newtons) en todas sus partes y será determinada por la medición de la fuerza

requerida para penetrar los lados y la base con una aguja hipodérmica calibre 21 x
32 mm mediante calibrador de fuerza o tensiómetro.
b) Los recipientes para los residuos peligrosos punzocortantes y líquidos se

llenarán hasta el 80% (ochenta por ciento) de su capacidad, asegurándose los
dispositivos de cierre y no deberán ser abiertos o vaciados.
c) Las unidades médicas que presten atención a poblaciones rurales, con

menos de 2,500 habitantes y ubicadas en zonas geográficas de difícil accceso,
podrán utilizar latas con tapa removible o botes de plástico con tapa de rosca, con
capacidad mínima de uno hasta dos litros, que deberán marcar previamente con la
leyenda de “RESIDUOS PELIGROSOS PUNZOCORTANTES BIOLOGICO-
INFECCIOSOS;.
6.2.3 Los recipientes de los residuos peligrosos líquidos deben ser rígidos, con
tapa hermética de polipropileno color rojo o amarillo, con un contenido de metales
pesados de no más de una parte por millón y libres de cloro, resistente a fracturas
y pérdidas de contenido al caerse, destructible por métodos físicos, deberá contar
con la leyenda que indique “RESIDUOS PELIGROSOS LIQUIDOS BIOLOGICO-
INFECCIOSOS” y marcados con el símbolo universal de riesgo biológico
(Apéndice Normativo)
En caso de que los residuos líquidos no sean tratados dentro de las instalaciones
del establecimiento generador, deberán ser envasados como se indica en la tabla
2 de esta Norma Oficial Mexicana.
6.3 Almacenamiento
6.3.1 Se deberá destinar un área para el almacenamiento temporal de los

residuos peligrosos biológico-infecciosos.
Los establecimientos generadores incluidos en el Nivel I de la tabla 1 de esta

Norma Oficial Mexicana, quedan exentos del cumplimiento del punto 6.3.5 y
podrán ubicar los contenedores a que se refiere el punto 6.3.2 en el lugar más
apropiado dentro de sus instalaciones, de manera tal que no obstruyan las vías de
acceso.
6.3.2 Los residuos peligrosos biológico-infecciosos envasados deberán

almacenarse en contenedores metálicos o de plástico con tapa y ser rotulados con
el símbolo universal de riesgo biológico, con la leyenda “RESIDUOS
PELIGROSOS BIOLOGICO-INFECCIOSOS”.

6.3.3 El periodo de almacenamiento temporal estará sujeto al tipo de

establecimiento generador, como sigue:
(a) Nivel I: Máximo 30 días.
(b) Nivel II: Máximo 15 días.
(c) Nivel III: Máximo 7 días.
6.3.4 Los residuos patológicos, humanos o de animales (que no estén en formol)

deberán conservarse a una temperatura no mayor de 4°C (cuatro grados Celsius),
en las áreas de patología, o en almacenes temporales con sistemas de
refrigeración o en refrigeradores en áreas que designe el responsable del
establecimiento generador dentro del mismo.
6.3.5 El área de almacenamiento temporal de residuos peligrosos biológico-

infecciosos debe:
a) Estar separada de las áreas de pacientes, almacén de medicamentos y

materiales para la atención de los mismos, cocinas, comedores, instalaciones
sanitarias, sitios de reunión, áreas de esparcimiento, oficinas, talleres y
lavanderías.
b) Estar techada, ser de fácil acceso, para la recolección y transporte, sin

riesgos de inundación e ingreso de animales.
c) Contar con señalamientos y letreros alusivos a la peligrosidad de los

mismos, en lugares y formas visibles, el acceso a esta área sólo se permitirá al
personal responsable de estas actividades.
d) El diseño, construcción y ubicación de las áreas de almacenamiento

temporal destinadas al manejo de residuos peligrosos biológico-infecciosos en las
empresas prestadoras de servicios, deberán ajustarse a las disposiciones
señaladas y contar con la autorización correspondiente por parte de la
SEMARNAT.
e) Los establecimientos generadores de residuos peligrosos biológico-

infecciosos que no cuenten con espacios disponibles para construir un
almacenamiento temporal, podrán utilizar contenedores plásticos o metálicos para
tal fin, siempre y cuando cumplan con los requisitos mencionados en los incisos
a), b) y c) de este numeral.

6.3.6 Los residuos peligrosos biológico-infecciosos podrán ser almacenados en

centros de acopio, previamente autorizados por la SEMARNAT. Dichos centros de
acopio deberán operar sistemas de refrigeración para mantener los residuos
peligrosos biológico-infecciosos a una temperatura máxima de 4°C (cuatro grados
Celsius) y llevar una bitácora de conformidad con el artículo 21 del Reglamento en
materia de Residuos Peligrosos de la Ley General del Equilibrio Ecológico y la
Protección al Ambiente. El tiempo de estancia de los residuos en un centro de
acopio podrá ser de hasta treinta días.
6.4 Recolección y transporte externo
6.4.1 La recolección y el transporte de los residuos peligrosos biológico-

infecciosos referidos en esta Norma Oficial Mexicana, deberá realizarse conforme
a lo dispuesto en los ordenamientos jurídicos aplicables y cumplir lo siguiente:
a) Sólo podrán recolectarse los residuos que cumplan con el envasado, embalado
y etiquetado o rotulado como se establece en el punto 6.2 de esta Norma Oficial
Mexicana.
b) Los residuos peligrosos biológico-infecciosos no deben ser compactados

durante su recolección y transporte.
c) Los contenedores referidos en el punto 6.3.2 deben ser desinfectados y

lavados después de cada ciclo de recolección.
d) Los vehículos recolectores deben ser de caja cerrada y hermética, contar con
sistemas de captación de escurrimientos, y operar con sistemas de enfriamiento
para mantener los residuos a una temperatura máxima de 4°C (cuatro grados
Celsius).
Además, los vehículos con capacidad de carga útil de 1,000 kg o más deben
operar con sistemas mecanizados de carga y descarga.
e) Durante su transporte, los residuos peligrosos biológico-infecciosos sin

tratamiento no deberán mezclarse con ningún otro tipo de residuos municipales o
de origen industrial.
6.4.2 Para la recolección y transporte de residuos peligrosos biológico-infecciosos

se requiere la autorización por parte de la SEMARNAT. Dicho transporte deberá
dar cumplimiento con los incisos a), b), d) y e) del numeral 6.4.1 de esta Norma
Oficial Mexicana.
6.5 Tratamiento
6.5.1 Los residuos peligrosos biológico-infecciosos deben ser tratados por

métodos físicos o químicos que garanticen la eliminación de microorganismos
patógenos y deben hacerse irreconocibles para su disposición final en los sitios
autorizados.
6.5.2 La operación de sistemas de tratamiento que apliquen tanto a

establecimientos generadores como prestadores de servicios dentro o fuera de la
instalación del generador, requieren autorización previa de la SEMARNAT, sin
perjuicio de los procedimientos que competan a la SSA de conformidad con las
disposiciones aplicables en la materia.
6.5.3 Los residuos patológicos deben ser incinerados o inhumados, excepto

aquellos que estén destinados a fines terapéuticos, de investigación y los que se
mencionan en el inciso 4.3.2 de esta Norma Oficial Mexicana. En caso de ser
inhumados debe realizarse en sitios autorizados por la SSA.
6.6. Disposición final
Los residuos peligrosos biológico-infecciosos tratados e irreconocibles, podrán

disponerse como residuos no peligrosos en sitios autorizados por las autoridades
competentes.
6.7 Programa de contingencias
Los establecimientos generadores de residuos peligrosos biológico-infecciosos y

los prestadores de servicios deberán contar con un programa de contingencias en
caso de derrames, fugas o accidentes relacionados con el manejo de estos
residuos.
7. Grado de concordancia con normas y lineamientos internacionales y con

las normas mexicanas tomadas como base para su elaboración
7.1 Esta Norma Oficial Mexicana no concuerda con ninguna Norma Internacional
por no existir referencia en el momento de su elaboración, ni existen normas
mexicanas que hayan servido de base para su elaboración.
8. Bibliografía
8.1 Althaus H, Sauerwald M, Schrammeck E. Hygienic aspects of waste disposal

Zbl Bakt Mikr Hyg, I Abt Orig B. 1983; 178:1-29.
8.2 Anglin AM Collmer JE. Loving TJ. Beltran KA. Coyner BJ. Adal K. Jagger J.
Sojka NJ, Farr BM. An outbreak of needlestick injuries in hospital employees due
to needles piercing infectious waste containers. Infect Control Hosp Epidemiology

1995; 16:570-6.
8.3 Belkin NL. Medical Waste a minimal Hazard. Infect Control Hosp Epidemiol
1993; 13:75-76.
8.4 Brenniman GR. Allen RJ. Impact of repackaging hazardous (infectious)

hospital waste on the indoor air quality of a hospital. Science of the Total
Environment. 1993; 128:141-9.
8.5 Birnaum D. Medical Waste Applied Epidemiology. Letters to the Editor. Infect
Control Hosp Epidemiol 1993; 14:7-8.
8.6 Cimino JA. Health and safety in the solid waste industry. Am J Public Health
1975; 65:38-46.
8.7 Collins CH. Treatment and disposal of clinical and laboratory waste. Med Lab
Sci 1991; 48:324-31.
8.8 Crow S. Infectious waste. Infect Control Hosp Epidemiology 1984; 5:149-50.
8.9 Crow S. Dissolving the problem of infectious medical waste. Infect Control
Hosp Epidemiology. 1996; 17:434-7.
8.10 Daschner FD. Chemical Disinfection of medical waste. Infect Control Hosp
Epidemiology 1993; 14:306.
8.11 Daschner FD. Disinfection of Medical Waste. Letters to the Editor authors
reply Infect Control Hosp Epidemiology 1993; 14:306.
8.12 Daschner FD. The Hospital and Pollution: Role of the Hospital Epidemiologist
in Protecting the Environment. In Wenzel R. Prevention and Control of Nosocomial
Infection. Third edition William amp; Wilkins USA 1997; pag. 595-605.
8.13 Decker MD and Schaffer W. The relationship between the Hospital and the
Community in Hospital Infection Bennnett JV and Brachman editors. Philadelphia
1998. Fourth edition Lypincott-Raven Press. pag 181-188.
8.14 Gardner JS, Favero MS. CDC Guideline for handwashing and hospital
environmental control, 1985. Infect Control Hosp Epidemiology 1986; 7:231-33.

8.15 Gerberding JL. Limiting the risks of health care workers. In Sande MA and
Volberding PA. The Medical Management of AIDS. W.B. Saunders Company.
United States. Fifth edition 1997; pag. 75-85.
8.16 Gerberding JL. Management of occupational exposures to blood-borne

viruses, N Engl J Med 1995; 332:444-51.
8.17 G.P. Youmans P. y Paterson H. Sommers. Manual de Infectología. Ed.

Interamericana McGraw-Hill 1982; pág. 15.
8.18 Henderson DK et al. Risk for occupational transmission of HIV-1 associated

with clinical exposures. Ann Intern. Med 1990; 113:740-746.
8.19 Honeycutt TW. Disinfection off Medical waste. Infect Control Hosp Epidemiol.
1993; 14:305-6.
8.20 Infective Waste in Occupational Health; section seven in Friede A, O´Carrol

PW, Nicola RM, Teustch MW. in CDC Prevention Guidelines. Williams and Wilkins
USA, 1997; pag. 1266-70.
8.21 Jager E, Xander L, Ruden H. Hospital wastesl. Communication:

microbiological investigations of hospital wastes from various ward of a big and of
smaller hospitals in comparison to household refuse Zbl Hyg. 1989; 188:343-364.
8.22 Keene JH. Medical Waste: A Minimal Hazard. Infect Control Hosp Epidemiol
1991; 12:682-5.
8.23 Ley General de Salud publicada en el Diario Oficial de la Federación el 7

de febrero de 1984 (última reforma 4 de junio de 2002).
8.24 Makosfshy D. Cone JE. Installing needle disposal boxes closer to the
bedside reduces needle-recapping rates in hospital units. Infect Control Hosp
Epidemiol. 1993; 14:140-4.
8.25 Mc Veigh P. OR nursing and environmental ethics. Medical Waste reduction,

reuse and recycling. Todays OR-Nurse. 1993; 15:13-8.
8.26 Mose JR, Reinhaler F. Microbial contamination of hospital waste and

household refuse. Zbl Bakt Mikr Hyg, I Abt Orig B. 1985:181-98-110.
8.27 Organización Panamericana de la Salud. Manual de Prevención y Control de

Infecciones Hospitalarias en la serie HSP-UNI/Manual Operativo PALTEX, 1996,
4: pág. 87-90.
8.28 Petithory JC. De Loye J. Guesnu M. Pariente P. Milgram M. Tardy M.

Provoost JP. Prevention of AIDS transmission by syringes and needles in France
and Africa. [French] Bulletin de l Academie Nationale de Medecine. 1989;
173(4):415-9.
8.29 Resnick et al. Stabillity and inactivation of HTLV III/LAV under clinical and
laboratory environments JAMA 1986; 255:1887-1891.
8.30 Rutala WA, Sarubbi FA. Management of Infectious Waste from Hospitals.
Infect Control Hosp Epidemiol 1983; 4:198-201.
8.31 Rutala WA, Weber DJ. Infectious Waste. N Engl J Med 1991; 325:58378-
582.
8.32 Rutala WC, Mayhall G. The Society for Hospital Epidemiology of America;
Medical Waste Infect Control Hosp Epidemiology. 1991; 12:38-48.
8.33 Strain BA and Groschel DHM. Laboratory Safety and Infectious Waste
management. In Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH
editors. Manual of Clinical Microbiology. ASM Press Washington D.C. Fifth edition
1995; pag. 75-85.
8.34 Streed SA. The Medical Waste Condrum Revisted. Infect Control Hosp
Epidemiol 1992; 13:385-6.
8.35 Thornton J. McCally M. Orris P. Weinberg J. Hospital and plastics. Dioxin

prevention and medical waste incinerators. Public Health Reports. 1996; 111:299-
313.
8.36 Volkow P, Jacquemin B, Vilar-Compte D, Castillo JR. Contact with blood and
body fluids of hospital syringes. Implications for regulated medical waste. Salud
Pública de México.
8.37 Volkow P. Rangel-Frausto S. Ponce de León Rosales S. Basura hospitalaria:

comentarios sobre sus riesgos y su regulación. Enf Infec y Microbiol 1999; 19:1-4.
8.38 Weber DJ, Rutala WA. Environmental Issues and Nosocomial Infection in
Wenzel R. Prevention and Control of Nosocomial Infection. Third edition William
amp; Wilkins USA 1997; pag. 492-514.
8.39 Weinstein S, Kotilainen HR, Moore D Gantz, N. Microbiologic contamination

of hospital trash from patients on isolation precautions versus standard care. Am J
Infect. Control 1988; 16:76.
8.40 Who/PEP/RUD/94.1. General. Managing Medical Wastes in Developing

Countries World Health Organization 1994.
8.41 Reglamento de la Ley General de Salud en materia de Control Sanitario de

la Disposición de Organos, Tejidos y Cadáveres de Seres Humanos publicado en
el Diario Oficial de Federación el 20 de febrero de 1985.
8.42 Censo de Universo de Trabajo 1999/INEGI/estimaciones CONAPO.
9. Observancia de esta Norma
9.1 La SEMARNAT, a través de la Procuraduría Federal de Protección al

Ambiente y la SSA, a través de la Comisión Federal para la Protección contra
Riesgos Sanitarios en el ámbito de sus respectivas atribuciones y competencias,
vigilarán del cumplimiento de la presente Norma Oficial Mexicana de conformidad
con las Bases de Colaboración que celebren entre SSA y SEMARNAT, mismas
que se publicarán en el Diario Oficial de la Federación. Las violaciones a la
misma se sancionarán en los términos de la Ley General del Equilibrio Ecológico y
la Protección al Ambiente, y su Reglamento en materia de Residuos Peligrosos, la
Ley General de Salud y sus Reglamentos, así como los demás ordenamientos
jurídicos aplicables.
9.2 Los gobiernos del Distrito Federal, de los estados y de los municipios, podrán
realizar actos de vigilancia para la verificación del cumplimiento de esta Norma
Oficial Mexicana, previa la publicación en el Diario Oficial de la Federación de
los Acuerdos de Coordinación que se celebren con la SEMARNAT.
9.3 Dentro del marco de los Acuerdos de Coordinación para la Descentralización

Integral de los Servicios de Salud, las entidades federativas verificarán el
cumplimiento de esta Norma Oficial Mexicana.
TRANSITORIOS
PRIMERO.- Provéase la publicación de esta Norma Oficial Mexicana en el Diario

Oficial de la Federación.
SEGUNDO.- La presente Norma Oficial Mexicana entrará en vigor a los 60 días

posteriores al de su publicación en el Diario Oficial de la Federación.
TERCERO.- Los establecimientos generadores de residuos peligrosos biológico-

infecciosos deben cumplir con la fase de manejo señalada en el punto 6, a los 90
días posteriores al de la entrada en vigor de la presente Norma, tiempo en el cual
seguirá surtiendo sus efectos legales en lo conducente la NOM-087-ECOL-1995.
CUARTO.- La presente Norma Oficial Mexicana abroga a su similar NOM-087-

ECOL-1995, Que establece los requisitos para la separación, envasado,
almacenamiento, recolección, transporte, tratamiento y disposición final de los
residuos peligrosos biológico-infecciosos que se generan en establecimientos que
presten atención médica, publicada en el Diario Oficial de la Federación el 7 de
noviembre de 1995 y su aclaración publicada en el citado órgano informativo el 12
de junio de 1996.
México, Distrito Federal, a los veintidós días del mes de enero de dos mil tres.- El
Presidente del Comité Consultivo Nacional de Normalización de Medio Ambiente y
Recursos Naturales, Cassio Luiselli Fernández.- Rúbrica.- El Presidente del
Comité Consultivo Nacional de Normalización, de Regulación y Fomento
Sanitario, Ernesto Enríquez Rubio.- Rúbrica.

APENDICE NORMATIVO
SIMBOLO UNIVERSAL DE RIESGO BIOLOGICO
>
imagen (dar doble click con el ratón)


Manual de Bioquímica Metabólica

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Manual de Bioquímica Metabólica

Cargado por

Información del documento

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Manual de Bioquímica Metabólica

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

Programa de estudio de experiencia educativa

Área Académica Técnica

Químico Farmacéutico Biólogo

Facultad de Química Farmacéutica Biológica/Ciencias Químicas

6.-Nombre de la experiencia 7.- Área de formación

8.-Valores de la experiencia educativa

9.-Modalidad 10.-Oportunidades de evaluación

12.-Características del proceso de enseñanza aprendizaje

16.-Nombre de los académicos que participaron

17.-Perfil del docente

18.-Espacio 19.-Relación disciplinaria

interprete y organice la información en la toma de decisiones, con un alto grado de

23.-Articulación de los ejes

• Oxidaciones biologicas * Almidón, producto

27.-Evaluación del desempeño

Bitácora • Coherencia Laboratorio 10%

Actividades • Claridad Laboratorio 10%

PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA METABÓLICA

La Bioquímica Metabólica es un área de la bioquímica que pretende conocer los diferentes

Al finalizar este curso el estudiante habrá adquirido las siguientes competencias:

• Practicar y aplicar correctamente las técnicas abordadas en el laboratorio para la

• Comprender las aplicaciones de las reacciones enzimáticas y sus productos en áreas

• Interesarse en el desarrollo de investigación y generación del conocimiento en las

PARA LOS LABORATORIOS DE LAS EE DEL ÁREA DE BIOMÉDICAS

1Asistencia y puntualidad. Si el maestro lo considera conveniente, se dará un margen de diez minutos

Material por alumno:

Material por equipo:

Material por grupo

Material por equipo para solicitar en el almacén

Medidas generales de precaución:

Agentes desinfectantes útiles en el laboratorio:

Superficies: Solución de fenol al 5% (solución corrosiva y caústica, el uso en la piel no se

Uso de guantes en el laboratorio: En el laboratorio de Parasitología es frecuente el uso de

Manejo y desecho de muestras biológicas: De acuerdo con la NOM-087-ECOL-SSA1-2002.

Como resultado de la oxidación de los alimentos, un humano adulto promedio produce

aproximadamente 20. Es precisamente la PCO2 la que es controlada por los pulmones, ya

Regulación pulmonar del pH

Regulación renal del pH

En los túbulos proximales y distales se secretan ácidos activamente, donde se combinan

la secreción de H+ están relacionadas en forma recíproca: la depleción de K+ aumenta la

Figura 2. Mecanismos renales de la regulación ácido-base

7. A cada muestra se le determinará el pH inmediatamente después de haber sido

Fecha de Realización Realizó: Autorizó:

C6H12O6 + 2 Pi + 2 ADP + 2 NAD → 2 CH3-CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP + 2 NAD

La reacción química se describe como la reducción de dos moléculas de Nicotinamida

C6H12O6 → 2 CH3COCOO− + 2 H2O + 2H+

La glucosa entra a la célula atravesando la membrana celular, y en el citoplasma se lleva a

En el proceso glicolítico, se produce la oxidación de la glucosa sin la participación del

Figura. 3 Esquema representativo de la glucólisis.

Suspensión de levadura al 5% en la solución A

Determinación de piruvato usando nitroprusiato de sodio.

Determinación de piruvato con 2,4-dinitrofenilhidrazina como prueba

Fecha de Realización Realizó: Autorizó:

Figura 4. Reacción general de la fermentación alcohólica.

Ciertos tipos de bacterias viven exclusivamente de la fermentación; otras recurren a ese

La fermentación primaria dura aproximadamente una semana; durante este tiempo la

Uso del alcoholímetro.

Muchas escalas están disponibles en un alcoholímetro. Uno típico empleado en la industria