Reporte Precipitacion

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

QUIMICO BACTERIOLOGO PARASITOLOGO
PRÁCTICA. PRECIPITACIÓN, SEPARACIÓN Y PUNTO
ISOELÉCTRICO DE PROTEÍNAS
GRUPO: 4QV1
INTEGRANTES: Esquivel Torres Gerardo
Sánchez Pérez Ximena
INTRODUCCIÓN OBJETIVO
Las proteínas son cadenas de o Analizar el efecto que produce la

aminoácidos que se pliegan adquiriendo modificación de factores
una estructura tridimensional que les fisicoquímicos sobre la solubilidad de
permite llevar a cabo miles de funciones. las proteínas.
Se han descrito 4 niveles en la estructura o Determinar el punto isoeléctrico de la
de las proteínas. insulina, basándose en sus
propiedades de solubilidad a
1. Primaria. diferentes valores de pH.
2. Secundaria.
3. Terciaria. RESULTADOS
4. Cuaternaria.
De las estructuras de las proteínas, se

derivan algunas propiedades de interes
como la solubilidad; en general las
proteínas son más solubles en agua si
presentan más aminoácidos polares (con
carga o sin ella) que aminoácidos
apolares, pues en este segundo caso las
cadenas laterales interaccionan entre
ellas con más fuerza que el agua
circundante. La mayor parte de las
proteínas estructurales fibrilares son
insolubles en agua.
Fig 1. Resultados de experimiento en
casa.
La solubilidad de las proteínas se ve
afectada por diferentes factores; ya sea
por el pH del medio ó la concentración Tubo Ácido Acetato Insuli pH Observaciones
salina del medio. No. Acético de sodio na
0.2 M 0.2 M
Por otro lado la desnaturalización de las
proteínas puede ser causada por: 1 230 μL 20μL 60μL 4.7 Transparente
● El aumento de la temperatura.
● El cambio extremo de pH. 2 150μL 100μL 60μL 4.9 Transparente
● La disminución de la polaridad del 3 50μL 200μL 60μL 5.4 Turbidez en el tubo lo
disolvente. que indica
● El aumento de la fuerza iónica del precipitación
medio.
4 10μL 240μL 60μL 6.1 Transparente
GRUPO: 4QV1
5 0.00 250μL 60μL 7 Transparente iones provocando su precipitación.

Para la constante dieléctrica se
Tabla 1. Preparación del ensayo de
observó la precipitación debido a que
determinación del punto isoeléctrico de la
insulina al agregar una substancia que
redujera la conducción eléctrica
ANÁLISIS DE RESULTADOS provocando que las cargas de la
proteína se fuesen aproximando entre
Con base en lo observado en el proceso sí hasta que se formara un
de salting out, al tener una proteína conglomerado de la misma
(albúmina) inmersa en agua se forma una provocando su sedimentación.
esfera de hidratación y al introducir sales Cuando el punto isoeléctrico de las
al sistema, estas se disocian en forma de proteínas es igual a cero, no tiene con
iones generando esferas de solvatación quien interactuar debido a que no hay
(gracias a que el agua es una molécula afinidad con las cargas del agua
polar) provocando la precipitación de la provocando su precipitación.
proteína y se corrobora como positivo con La precipitación de metales pesados
la prueba de Biuret debido a que se torna se efectúa porque estos reaccionan
morado cuando hay presencia de una con los grupos sulfidrilo de las
proteína con más de dos enlaces proteínas.
peptídicos. • Se determinó el punto isoeléctrico de
Al añadirse el etanol se comprobó que la la insulina, basándose en sus
precipitación de la proteína debido a su propiedades de solubilidad a
constante dieléctrica, la cual hace que las diferentes valores de pH.
cargas de la proteína se atraigan cada vez
más hasta llegar al punto de que esta se PREGUNTA EXTRA
aglomere y provoque su sedimentación.
Cuando el punto isoeléctrico de las 1. ¿Qué es el efecto de salting in?
proteínas o péptidos es igual a cero, estas Se utiliza para describir el
no tienen con quien interactuar (no hay aumento de solubilidad que
afinidad con las cargas del agua) resulta de la adición de una sal o
provocando su precipitación. electrolito a un sistema soluto-
disolvente.
CONCLUSIÓN Implica un aumento en la
solubilidad de la proteína a medida
• Se analizó el efecto que la que se agrega el electrolito a la
modificación de factores físico solución.
químicos sobre la solubilidad de las Es el efecto cuando la adición de
proteínas. una sal a un solvente que contiene
Debido a una sobresaturación con una un soluto orgánico aumenta la
sal (NaCl) en medio acuoso, se formó solubilidad de ese soluto.
una esfera de solvatación para dichos
GRUPO: 4QV1
2. ¿Cuál es el punto isoeléctrico

teórico de la insulina humana?
¿Es semejante al valor
experimental?
El punto isoeléctrico de la insulina
humana es de pH 5.4. En el valor
experimental obtuvimos un valor
de pH de 5.5 asi que si es
semejante.
BIBLIOGRAFÍAS
• O'Neill, M. and Summers, E.,

(2015). Collins English Dictionary. 7ta • Menédez Valderrey, J. Propiedades
ed. HarperCollins. Disponible en: de las proteínas. Asturnatura.com (en
https://www.collinsdictionary.com/es/d línea). Num. 130. Disponible en:
iccionario/ingles/salting-in Consultado https://www.asturnatura.com/articulos
Octubre 2020 /proteinas/propiedades-de-las-
proteinas.php. Consultado: Octubre
2020
• González Mañas Juan, M..

Desnaturalización de proteínas.
(2010).
Disponible en:
http://www.ehu.eus/biomoleculas/prot
einas/desnaturalizacion.htm
Consultado: Octubre 2020

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Las proteínas son cadenas de o Analizar el efecto que produce la

De las estructuras de las proteínas, se

5 0.00 250μL 60μL 7 Transparente iones provocando su precipitación.

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