Corpoica Cienc. Tecnol. Agropecu.

(2013) 14(1) 67-75 enero - junio / 2013 67

SANIDAD VEGETAL Y PROTECCIÓN DE CULTIVOS

ARTÍCULO CIENTÍFICO

Evaluación in vitro de fungicidas comerciales para el control

de Colletotrichum spp., en mora de castilla

In vitro evaluation of commercial fungicides for control

of Colletotrichum spp., in blackberry
Viviana Gaviria-Hernández1, Luis Fernando Patiño-Hoyos2, Alegría Saldarriaga-Cardona3

1
Ing. Agropecuaria. Medellín, Colombia. vivigaviria_87@hotmail.com
I.A. MSc. Docente-investigador. Politécnico Jaime Isaza Cadavid. Medellín, Colombia. luisferph@gmail.com
2

3
I.A. MSc. Fitopatología. Investigadora Agrícola. Corpoica C.I. La Selva, Rionegro, Colombia. asaldarriaga@corpoica.gov.co

Fecha de recepción: 19-02-2013

Fecha de aceptación: 08-04-2013

ABSTRACT RESUMEN

Efficiency in vitro of five chemical fungicides, three Se evaluó la eficiencia in vitro de cinco fungicidas de
plant extracts and three biocontrol products were síntesis química, tres extractos vegetales y tres produc-
evaluated by their inhibition of mycelial growth tos a base de biocontroladores, mediante las variables
percentage and inhibition of fungal biomass porcentaje de inhibición del crecimiento micelial y por-
percentage, for Colletotrichum gloeosporioides strain 52 centaje de inhibición de la biomasa de Colletotrichum
and Colletotrichum acutatum strain 168. In the group gloeosporioides cepa 52 y Colletotrichum acutatum cepa
of chemical fungicides, the best results for inhibition 168. En el grupo de los productos de síntesis química,
of mycelial growth of both pathogens were obtained los mejores resultados en la inhibición del crecimiento
with Copper Hydroxide and Difenoconazole, showing micelial en ambas cepas, se obtuvo con hidróxido de cobre
100% of inhibition. Regarding biomass inhibition, y difenoconazol, con 100% de inhibición. En cuanto
the products with higher inhibitory effect in C. a inhibición de la biomasa, los productos con mayor
gloeosporioides were Difenoconazole showing 100% of porcentaje de efecto inhibitorio en C. gloeosporioides
inhibition, and Benomyl, which inhibition was between fueron: difenoconazol (100%) y benomil (93% a 99%);
93% and 99%, and in C. acutatum was Difenoconazol en C. acutatum fueron: difenoconazol (100%) y azoxys-
with 100% inhibition and Azoxystrobin with an trobin (91% a 97%). Respecto a los extractos vegetales,
inhibition between 91% and 97%. Regarding the plant el extracto a base de Citrus sinensis y C. grandis presentó
extracts group, Citrus sinensis and C. grandis composed 100% de inhibición tanto del crecimiento micelial
extract, showed 100% inhibition of mycelial growth and como de la biomasa, siendo el más efectivo en el control
fungal biomass, it was the most effective for controlling de ambas cepas del hongo. En el grupo de los biocontro-
both strains of fungi. In the biocontrol products group, ladores, el porcentaje de inhibición del crecimiento mi-
the inhibition of mycelial growth percentage of the based celial de los productos a base de Trichoderma lignorum
products on Trichoderma lignorum and T. harzianum y T. harzianum osciló entre 61% y 65% para C.
was between 61% and 65% for C. gloeosporioides, and gloeosporioides, y entre 77% y 79% para C. acutatum,
between 77% and 79% in C. acutatum, considered in the considerados dentro del grupo de los biocontroladores
group of biocontrol products as the most efficient in the in como los más eficientes en el control in vitro de las cepas
vitro control of 52 and 168 strains of Colletotrichum spp. 52 y 168 de Colletotrichum spp.

Key words: chemical control, plant diseases, plant Palabras claves: control químico, enfermedades de
extracts, Rubus glaucus Benth, Trichoderma spp. las plantas, extractos vegetales, Rubus glaucus Benth,
Trichoderma spp.

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 INTRODUCCIÓN sionado el rechazo de pulpas para exportación, debido
a los altos contenidos de trazas encontrados en éstas.
En Colombia, la antracnosis de la mora de castilla era Por otro lado, organismos internacionales han venido
una enfermedad considerada de escasa o ninguna impor- replanteando el uso de moléculas como el clorotalonil,
tancia económica, ya que entre 1992 y 1996, su incidencia carbendazim y macozeb por altos riesgos de carcinoge-
y severidad en los cultivos variaba según el año y la loca- nicidad (Naranjo, 2011).
lidad (Tamayo, 2003). Posteriormente, a mediados del
2001, estudios realizados acerca de la identificación de Actualmente se han explorado alternativas de control
enfermedades asociadas al cultivo de la mora, reporta- con productos a base de biocontroladores y extractos ve-
ron que la antracnosis fue la enfermedad que presentó getales, que generalmente poseen compuestos biodegra-
mayor incidencia (52,90%) en cultivos de Caldas, dables, de baja toxicidad y no son específicos en su modo
Quindío y Risaralda (Botero et al., 2002). Hoy en día de acción, lo que implica baja probabilidad de desarrollo
la antracnosis en mora se considera de importancia de resistencia (Tripathi y Dubey, 2004). Reportes
económica, debido a que puede causar pérdidas que documentan el buen funcionamiento de productos
oscilan entre 50% y 70% de los tallos (Tamayo, 2003; biológicos en el control de la antracnosis, como por
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Afanador et al., 2009). En el país, Colletotrichum ejemplo extractos de chirimoya (Annona cherimola),
gloeosporioides y C. acutatum han sido identificados papaya (Carica papaya), lima (Citrus aurantifolia),
como principales causantes de antracnosis en la mora de eucalipto blanco (Eucalyptus globulus), ajo (Allium
castilla (Saldarriaga et al., 2002), sin embargo nuevos sativum), ají (Capsicum sp.) y de biocontroladores como
reportes reconocen a C. boninense como un nuevo Trichoderma sp., Bacillus subtilis, Pseudomonas cepacia
agente causal de la enfermedad (Marulanda et al., 2007; (PC 9701 BHI), P. flurescens (98B-27) y P. maltophilia
Saldarriaga et al., 2008; Afanador et al., 2009). (Bravo, 1996; Botero, 2001; Montoya et al., 2004;
Hernández et al., 2007).
En mora, la antracnosis causa principalmente secamiento,
y muerte progresiva y descendente de ramas y tallos. Los El uso de fungicidas químicos sigue ocupando el primer
síntomas presentes en estos órganos se caracterizan por lugar en el control de enfermedades, seguido por la ro-
la presencia de lesiones que inician en la porción basal tación de estos con productos biológicos, los cuales han
de las espinas, en los pecíolos, pedúnculos y en los sitios dado buenos resultados en el control de antracnosis
de inserción de las ramas; los tejidos afectados suelen y otras enfermedades en el cultivo de mora (Hincapié
ser de color castaño claro y presentan pequeños puntos y Saldarriaga, 2009). En la presente investigación se
oscuros denominados acérvulos, los cuales pueden tor- exploró la eficiencia in vitro de diferentes productos
narse de color salmón en condiciones de alta humedad. comerciales tanto de uso convencional (fungicidas quí-
Alrededor de las lesiones se puede observar un borde micos) como no convencional (extractos vegetales y
definido de color azul-violeta intenso, la lesión puede biocontroladores), con el propósito de contribuir al co-
avanzar hasta cubrir y secar parcial o totalmente el tallo nocimiento de nuevas alternativas para el control de la
(Saldarriaga y Bernal, 2000; Tamayo, 2003; Saldarriaga antracnosis en mora.
p. 67-75 et al., 2008). Los síntomas en brotes tiernos se manifiestan
por ennegrecimiento y marchitamiento de hojas jóvenes
mientras que en frutos, principalmente maduros, MATERIALES Y MÉTODOS
68 los síntomas son esporádicos observándose necrosis,
pudrición húmeda y deshidratación (Saldarriaga y Las evaluaciones in vitro fueron realizadas en condi-
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Bernal, 2000; Tamayo y Peláez, 2000). ciones del laboratorio de fitopatología de Corpoica,
centro de investigación La Selva, ubicado en Rionegro,
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En diferentes cultivos, el manejo de esta enfermedad se Antioquia, con humedad relativa promedio de 71%
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ha fundamentado en prácticas de control cultural y uso y temperatura promedio de 21 +/- 1 ºC, durante la
de fungicidas químicos a base de oxicloruro de cobre, fase de experimentación. Del cepario de Colletotrichum
hidróxido cúprico, mancozeb, clorothalonil, captan, sp., existente en el laboratorio de fitopatología de este
propiconazol, procloraz, benomil, thiabendazol y car- centro de investigación, se seleccionaron las cepas
bendazim (Arauz, 2000; Agrios, 2005). En Colombia, 52 de C. gloeosporioides y 168 de Colletotrichum
el uso de algunas de estas moléculas químicas ha oca- acutatum, aisladas de cultivos de mora del oriente
antioqueño.

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Para cada cepa del hongo se determinó la eficiencia PICM = ((crecimiento testigo – crecimiento
de once tratamientos, distribuidos en tres grupos: 1) tratamientos) / crecimiento testigo)) * 100
Fungicidas químicos: Amistar® 50 WG (azoxystrobin),
Benoagro® 50 WP (benomil), Derosal® 500 SC (carben- La metodología de caja dual se aplicó reactivando las
dazim), Score® 250 EC (difenoconazol) y Kocide® 101 esporas de los Trichoderma de los productos Agroguard®
(hidróxido de cobre). 2) Extractos vegetales: Desfan® y Mycobac®, para lo cual se diluyó 1 g del producto co-
100 agrícola (Citrus sinensis y C. grandis), Ecoswing® mercial en 1 litro de agua destilada, luego se adicionaron
(Swinglea glutinosa) y BfunK® (Eucalyptus globulus, 3 ml de la dilución sobre el medio de cultivo PDA-acidi-
Allium sativum y Urtica urens); este producto también ficado previamente servido en cajas de Petri. Estas cajas
contiene otros elementos y microorganismos destinados de Petri fueron incubadas en condiciones de laborato-
a la nutrición de la planta). 3) Grupo de los biocontro- rio durante 8 días. Pasado el período de crecimiento de
ladores: Mycobac® (Trichoderma lignorum), Agroguard® los antagonistas (Trichoderma spp.), se tomó una nueva
(Trichoderma harzianum) y Rhapsody® (Bacillus subtilis). caja de Petri servida con PDA-acidificado y sobre el me-
dio de cultivo se colocaron las muestras de 0,5 mm de
Para cada tratamiento se evaluaron tres concentraciones: los patógenos (C. gloeosporioides o C. acutatum) a una

Evaluación in vitro de fungicidas comerciales para el control de Colletotrichum spp., en mora de castilla
dosis comercial del producto, mitad de la dosis comer- distancia de tres centímetros del borde de la caja de Pe-
cial, y dosis comercial más la mitad de ésta, expresadas tri. Transcurridas 72 horas de la siembra del patógeno
en ppm de ingrediente activo para los fungicidas quími- (Colletotrichum sp.), se tomó una muestra de 0,5 mm
cos y los extractos, y en ml/l para el producto comercial del biocontrolador (Trichoderma sp.) y se depositó al
Rhapsody®. Para los productos a base de Trichoderma lado opuesto a tres centímetros del patógeno. El testigo
(Mycobac® y Agroguard®) no se determinaron concen- de la prueba consistió en la siembra del patógeno en el
traciones, ya que se observó la capacidad antagónica de medio de cultivo (PDA-acidificado) sin el antagonista
los hongos empleando la metodología de placa dual de (Hoyos-Carvajal et al., 2008). Las mediciones del creci-
Hoyos-Carvajal et al. (2008) adaptada para el presente miento micelial se realizaron de la misma forma descrita
estudio. La eficiencia de los tratamientos se evaluó me- en la metodología de dilución en plato con agar.
diante las variables de porcentaje de inhibición del cre-
cimiento micelial (PICM) y porcentaje de inhibición de Porcentaje de inhibición de la biomasa
la biomasa (PIB) que se describen a continuación. Para
los productos a base de Trichoderma solo se estimó el En recipientes de vidrio no graduados con capacidad de
PICM. 300 ml previamente esterilizados, se adicionó caldo lí-
quido Sabouraud al 2% marca Merck (150 ml/recipien-
Porcentaje de inhibición del crecimiento micelial te), mezclado con las respectivas concentraciones de los
productos a evaluar; luego, en cada frasco, se realizó la
La metodología de dilución en plato con agar consistió siembra de un disco de 0,5 mm de las respectivas cepas
en mezclar cada concentración del fungicida con el me- del patógeno a evaluar. El testigo consistió en la siembra
dio de cultivo agar papa dextrosa PDA de Merck, el cual de las cepas (52 o 168) en el medio de cultivo líquido
fue previamente acidificado con ácido láctico al 50% (caldo Sabouraud) sin suplementar con productos. Se p. 67-75
hasta ajustar el pH del medio a 5,6. Posteriormente se incubó en condiciones de laboratorio durante nueve
realizó la siembra de muestras de 0,5 mm de cada cepa de días tanto los testigos como los tratamientos, con un
Colletotrichum, en el centro de las cajas de Petri. El tes- fotoperíodo de 12 horas luz y 12 horas de oscuridad, sin
tigo experimental correspondió a la siembra del hongo agitación y con una relación de aireación de crecimien- 69
en medio de cultivo (PDA-acidificado) sin suplementar to de 1:1. Posteriormente, se realizó la cosecha pasando
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con fungicidas. La medición del crecimiento micelial el hongo por un tul de organza previamente pesado, a
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se realizó a partir del tercer día de la siembra del pató- través del cual se eliminó el líquido. El micelio filtrado
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geno hasta el día 12 para la cepa 52 (C. gloeosporioides) se secó en una estufa a 50 ºC durante 24 horas y pos-
y el día 18 para la cepa 168 (C. acutatum); tiempo du- teriormente pesado. Una vez obtenidos estos datos, se
rante el cual el testigo de cada prueba ocupó más del estimó el porcentaje de inhibición de la biomasa (PIB)
70% de la caja de Petri. Los datos obtenidos al final de para cada uno de los tratamientos utilizando la fórmula:
la medición fueron utilizados para calcular el porcentaje
de inhibición del crecimiento micelial (PICM) del hon- PIB = ((peso micelio testigo – peso micelio
go, de la siguiente manera: tratamiento) / (peso micelio testigo)) * 100

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 Cada grupo de productos se evaluó independientemen- En las variables porcentaje de inhibición de crecimien-
te, bajo un diseño completamente al azar (DCA), con to micelial y porcentaje de inhibición de la biomasa, las
cuatro repeticiones de cada concentración de los trata- dosis 50, 100 y 150 ppm del fungicida Score 250® EC
mientos. El análisis estadístico de los datos se realizó con (difenoconazol) inhibieron el 100% del crecimiento
el programa R (versión 2.12.2), y se estimaron las dife- micelial y la producción de la biomasa para ambas cepas;
rencias entre los tratamientos mediante una prueba de tanto la dosis recomendada como las dosis por encima y
comparación múltiple de Tukey (a nivel de 5%). por debajo de la comercial fueron efectivas en el control
in vitro (tabla 1).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN En los tratamientos evaluados con el fungicida comer-

cial Kocide® 101(hidróxido de cobre) se presentaron
El análisis de varianza para las variables porcentaje in- grandes diferencias entre los resultados de las variables
hibición del crecimiento micelial e inhibición de la porcentaje de inhibición del crecimiento micelial y por-
biomasa presentó diferencias significativas entre los centaje de inhibición de la biomasa. En la inhibición del
tratamientos, a un nivel de confianza del 95% para las crecimiento micelial, las tres dosis de este producto fue-
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cepas C. gloeosporioides cepa 52 y C. acutatum cepa 168, ron 100% efectivas para ambas cepas; sin embargo, en
a excepción de los tratamientos realizados con el pro- la variable inhibición de la biomasa ningún tratamiento
ducto comercial Rhapsody® (Bacillus subtilis), en el cual fue totalmente eficiente. El porcentaje de inhibición de
no hubo diferencias significativas para la variable por- la biomasa en la cepa C. gloeosporioides 52 osciló entre
centaje de inhibición de la biomasa en la cepa 168 (C. 69% y 96%, cuyo tratamiento más efectivo correspondió
acutatum). a la dosis por encima de la recomendada (3690 ppm);

Tabla 1. Porcentajes de inhibición del crecimiento micelial (PICM) y porcentajes de inhibición de la biomasa (PIB) del grupo de los fungicidas químicos

C. gloeosporioides (52) C. acutatum (168)

Químicos Concentración PICM (%) PIB (%) PICM (%) PIB (%)
32 ppm 46,00 d* 32,50 h 62,50 c 96,00 ab
Amistar® 50WG 63 ppm 45,25 d 42,25 g 64,00 bc 97,00 ab
95 ppm 38,75 d 31,25 h 70,00 b 91,00 ab
125 ppm 74,50 c 93,00 cd 7,25 g 31,50 f
Benoagro® 50
250 ppm 78,75 bc 95,50 bc 8,25 g 38,75 ef
WP
375 ppm 83,75 b 99,00 ab 16,75 f 47,25 de
p. 67-75 300 ppm 85,75 b 98,00 ab 33,75 e 47,00 de
Derosal® 500 SC 600 ppm 85,50 b 96,00 bc 46,50 d 54,00 d

70 900 ppm 85,25 b 82,50 e 47,75 d 75,25 c

50 ppm 100,00 a 100,00 a 100,00 a 100,00 a
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Score® 250 EC 100 ppm 100,00 a 100,00 a 100,00 a 100,00 a

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150 ppm 100,00 a 100,00 a 100,00 a 100,00 a

1230 ppm 100,00 a 69,00 f 100,00 a 31,00 f
Kocide® 101 2460 ppm 100,00 a 90,00 d 100,00 a 95,30 ab
3690 ppm 100,00 a 96,00 bc 100,00 a 86,30 bc
Porcentajes seguidos de letras diferentes denotan diferencias significativas según la prueba de Tukey, p = 0,05.

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y en C. acutatum, osciló entre 31% y 95% y mostró ma- El área bajo la curva del crecimiento del patógeno C.
yor eficiencia la dosis recomendada (2460 ppm) (tabla acutatum en presencia de Benoagro® 50 WP (benomil)
1). La menor efectividad del Kocide® 101 en el medio de fue similar a la del testigo (figura 1). Los anteriores re-
cultivo líquido Sabouraud posiblemente esté asociada a sultados concuerdan con lo citado por diferentes autores
las características físicas propias del producto, mas no a acerca del benomil. Aunque este es un fungicida utiliza-
la eficiencia del ingrediente activo en el control de los do para control de la antracnosis en diferentes cultivos,
patógenos, ya que según Mendoza (2010) los fungicidas durante muchos años se ha reportado la resistencia de
cúpricos a base de cobre metálico poseen baja solubili- C. acutatum a este compuesto (Baily y Jeger, 1991; De
dad en agua. Lo anterior es una propiedad física que en los Santos y Romero, 2002; Peres et al., 2002; Peres et
condiciones de campo puede ser útil, ya que reportes de al., 2005). Según Peres et al. (2005), niveles de 0,1 a 1,0
Echeverri et al. (2007) sobre ensayos realizados con dife- μl/ml de benomil inhiben totalmente el crecimiento de
rentes productos cúpricos mencionan que Kocide® 101 algunas especies de Colletotrichum, mientras que en C.
(hidróxido de cobre) presentó mayor adherencia a los acutatum la inhibición es sólo de 20% a 50%.
frutos de tomate de árbol durante las épocas de lluvia, lo
cual conllevó a reducir en 70% la aparición de síntomas Por otro lado, en pruebas de sensibilidad a benomil,

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de antracnosis. realizadas a cepas de C. gloeosporioides y C. acutatum
colectadas de tallos e inflorescencias de mora proceden-
Respecto a los fungicidas Benoagro® 50 WP (benomil) tes de cultivos del oriente antioqueño, Rueda (2010)
y Derosal® 500 SC (carbendazim), las tres concentracio- reportó que de 36 aislamientos evaluados de C. acutatum,
nes de ambos productos presentaron altos porcentajes 19 fueron clasificados como moderadamente resisten-
de inhibición de C. gloeosporioides, obteniéndose con el tes, 15 altamente resistentes, y ninguno de ellos fue
Benomil un PICM que osciló de 74% a 83% y un PIB de sensible al fungicida. También existen otras especies de
93% a 99%; y con el carbendazim un PICM que osciló Colletotrichum que son resistentes a este compuesto,
de 82% a 98% y un PIB de 85,25% a 85,75% (tabla 1). por ejemplo Smith y Black (1991) en De los Santos y
Para la cepa 168 (C. acutatum), estos mismos fungici- Romero (2002) reportaron la resistencia al benomil en
das mostraron un bajo efecto inhibitorio tanto del cre- algunas cepas de C. fragarie. El grupo de los benzcimi-
cimiento micelial como de la biomasa, el Benoagro® 50 dazoles dentro del cual se encuentran el benomil y el
WP (benomil) fue el fungicida con los menores PICM carbendazim es considerado de alto riesgo de resistencia
(entre 7% y 16%), y PIB (entre 31% y 47%) para C.
(FRAC, 2007).
acutatum (tabla 1).

p. 67-75

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Figura 1. Comportamiento de Colletotrichum acutatum (cepa 168) respecto a las dosis evaluadas de los fungicidas químicos
Convenciones: testigo de la cepa 168 (T168). Amistar: (A1) 32 ppm, (A2) 63 ppm y (A3) 95 ppm. Benoagro: (B1) 125 ppm, (B2) 250 ppm y (B3) 375 ppm. Derosal: (D1) 300 ppm, (D2) 600 ppm
y (D3) 900 ppm. Score: (S1) 50 ppm, (S2)100 ppm y (S3) 150 ppm. Kocide: (K1) 1230 ppm, (K2) 2460 ppm y (K3) 3690 ppm
Letras diferentes indican diferencias significativas según la prueba de Tukey = 0,05.

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 Tabla 2. Porcentajes de inhibición del crecimiento micelial (PICM) y porcentajes de inhibición de la biomasa (PIB) del grupo de los extractos vegetales

C. gloeosporioides (52) C. acutatum (168)

Químicos Concentración PICM (%) PIB (%) PICM (%) PIB (%)

750 ppm 1,75 d * 15,75 d 16,25 e 25,00 c

BfunK® 1500 ppm 16,25 c 29,50 c 15,50 e 24,75 c
2250 ppm 17,25 cd 37,25 c 40,50 c 24,50 c
725 ppm 44,00 b 35,00 c 51,50 b 71,50 b
Ecoswing® 1450 ppm 19,50 c 37,00 c 29,25 d 71,50 b
2175 ppm 85,25 a 49,25 b 33,25 cd 58,75 b
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172 ppm 100,00 a 100,00 a 100,00 a 100,00 a

Desfan® 100
344 ppm 100,00 a 100,00 a 100,00 a 100,00 a
agrícola
516 ppm 100,00 a 100,00 a 100,00 a 100,00 a
Porcentajes seguidos de letras diferentes denotan diferencias significativas según la prueba de Tukey, p = 0,05.

Con relación a los extractos vegetales, los resultados ob- principalmente a la inducción de resistencia en la planta,
tenidos en las tres dosis del Desfan® 100 agrícola (Citrus más que a la actividad antifúngica directa sobre el pa-
sinensis y C. grandis) mostraron una inhibición total tógeno. Zuluaga et al. (2007) evaluaron la efectividad
del crecimiento micelial y de la producción de biomasa del Biofun® (registrado por el ICA como BfunK®) en
de ambas cepas. Según reportes de Manthey (2004), el rotación con fungicidas químicos utilizados en banano,
éxito de los extractos cítricos a base de C. sinensis se debe y observaron que este producto presentó buenos resulta-
a la presencia de altas concentraciones de compuestos dos en el control de Mycosphaerella fijiensis, al registrarse
fenólicos o flavonoides como flavonas y glicósidos de un control de la enfermedad estadísticamente igual al
flavona, los cuales según Tripathi y Dubey (2004) son control obtenido con los productos convencionales, lo
metabolitos secundarios que poseen la capacidad de for- que redujo en 46% el uso de fungicidas químicos.
mar alcoholes y esteres que inhiben el crecimiento de las
hifas e impiden la germinación de esporas, además de En los tratamientos que incluyeron el uso de los bio-
ser inhibidores enzimáticos que afectan la respiración controladores Agroguard® (Trichoderma harzianum)
celular de los hongos. El biofungicida Ecoswing® (Swinglea y Mycobac® (T. lignorum), para ambas cepas de
p. 67-75 glutinosa) presentó un mediano efecto inhibitorio de las Colletotrichum se obtuvieron valores de PICM entre
variables evaluadas para C. gloeosporioides y C. acutatum, 61% y 79%, y presentaron mayor porcentaje de inhibi-
sin embargo, los resultados obtenidos para ambas ce- ción respecto a los tratamientos realizados con el pro-
pas (52 y 168) fueron variables y no se pudo establecer ducto a base de B. subtilis (Rhapsody) cuyos valores osci-
72 claramente su efectividad (tabla 2). laron entre 26% y 44% (tabla 3). No obstante, el área de
crecimiento micelial de la cepa 52 de C. gloeosporioides
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Las tres dosis evaluadas del producto B-funk® (Eucalyptus fue mayor para T. harzianum y T. lignorum que para las
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globulus, Urtica urens y Allium sativum) presentaron dosis evaluadas del Rhapsody® (figura 2a); diferente a lo
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poco efecto inhibitorio en el crecimiento micelial y en ocurrido con la cepa 168 (figura 2b). Estas diferencias
la producción de biomasa de C. gloeosporioides y C. se deben al comportamiento del patógeno en cuanto a
acutatum (tabla 2). Considerando las especificaciones su crecimiento, y al mecanismo de acción y el tiempo en
de la ficha técnica del producto, posiblemente el BfunK® el cual los Trichodermas parasitaron y detuvieron total-
tenga mejores efectos como fertilizante que como fun- mente el crecimiento micelial de ambas cepas, que para
gicida; probablemente los extractos vegetales que con- C. gloeosporioides y C. acutatum ocurrió luego del déci-
tiene este producto poseen sustancias que contribuyen mo y sexto día de la siembra, respectivamente.

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Tabla 3. Porcentajes de inhibición del crecimiento micelial (PICM) y porcentajes de inhibición de la biomasa (PIB), del grupo de los biocontroladores

C. gloeosporioides (52) C. acutatum (168)

Químicos Concentración PICM (%) PIB (%) PICM (%) PIB (%)
2,5 ml/l 41,75 b * 38,45 b 26,75 c 57,50
Rhapsody® 5,0 ml/l 44,00 b 63,22 a 37,50 b 38,75
7,5 ml/l 44,50 b 55,52 a 35,00 b 39,25
Agroguard® 61,5 a 77,00 a
Mycobac® 61,5 a 79,25 a
* Porcentajes seguidos de letras diferentes denotan diferencias significativas según la prueba de Tukey, p = 0,05.
** No se presentaron diferencias significativas entre los resultados de la prueba.

Evaluación in vitro de fungicidas comerciales para el control de Colletotrichum spp., en mora de castilla
Estudios in vitro e in vivo mencionan la efectividad lado, Montoya et al. (2004) demuestran la eficiencia
antagónica de Trichoderma sp., y Bacillus subtilis para tanto in vitro como in vivo de B. subtilis en el control
el control de Colletotrichum sp. Martins et al. (2007) de C. gloeosporioides en frutos de aguacate. Sin embargo,
reportaron que de 20 cepas evaluadas de Trichoderma aunque Kupper et al. (2003) obtuvieron resultados efi-
sp., (de las cuales 10 correspondían a la especie T. cientes in vitro con B. subtilis en la inhibición del creci-
harzianum) todas inhibieron el crecimiento in vitro de miento micelial de C. acutatum en cítricos, en campo
C. gloeosporioides, y observaron un fuerte parasitismo el control de síntomas en flores y frutos fue ineficiente.
sobre el patógeno. Así mismo, estudios in vivo realiza- Esto concuerda con lo sugerido por Bravo (1996), quien
dos por Freeman et al. (2004) demuestran la eficiencia menciona que la efectividad de inhibición in vitro de
de distintas especies de Trichoderma, utilizadas de manera B. subtilis sobre hongos fitopatógenos depende de la can-
tanto individual como conjunta, en la reducción de la tidad y de la velocidad de difusión de los metabolitos pro-
incidencia de C. acutatum en plantas de fresa. Por otro ducidos por la bacteria, sobre el medio de cultivo.

p. 67-75

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PROTECCIÓN DE CULTIVOS
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Figura 2. Comportamiento de Colletotrichum gloeosporioides con respecto a los biocontroladores. a. Área bajo la curva del crecimiento micelial de C. gloeosporioides (cepa 52)
b. Área bajo la curva del crecimiento micelial de C. acutatum (cepa 168) Convenciones: testigo C. gloeosporioides (T52); testigo C. acutatum (T168); Rhapsody (B. subtilis): (R1)
2,5 ml/l, (R2) 5 ml/l y (R3) 7,5 ml/l; Mycobac (T. lignorum) (M), Agroguard (T. harzianum) (Ag).
Letras diferentes indican diferencias significativas según la prueba de Tukey = 0,05.

© 2013 Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria

 CONCLUSIONES resistencia debido a su modo de acción específico o uni-
sitio (FRAC, 2007).
El Score 250® EC (difenoconazol) y el Kocide® 101
(hidróxido de cobre) fueron los fungicidas químicos Los fungicidas cúpricos como el hidróxido de cobre, por
con mayor eficiencia in vitro en el control de C. su mecanismo de acción multisitio no específico poseen
gloeosporioides y de C. acutatum. Se observó la baja efec- bajo riesgo para el desarrollo de resistencia (Kumar et
tividad del Benoagro® 50 WP (benomil) en el control de al., 2007).
C. acutatum, concordando con reportes realizados por
Bailey y Jeger (1992), De los Santos y Romero (2002), Los productos a base de extractos vegetales como
Peres et al. (2002) y Rueda (2010). Desfan® 100 agrícola (Citrus sinensis y C. grandis), y
de biocontroladores como Mycobac® (Trichoderma
De los extractos vegetales, el Desfan® 100 agrícola lignorum) y Agroguard® (T. harzianum) pueden contri-
(Citrus sinensis y C. grandis) demostró ser el pro- buir a disminuir los niveles de trazas de agroquímicos en
ducto más eficiente en el control de ambas cepas de los frutos, los cuales además de su efecto tóxico consti-
Colletotrichum, sin embargo, se recomienda determinar tuyen una barrera a la comercialización, y un riesgo en la
Evaluación in vitro de fungicidas comerciales para el control de Colletotrichum spp., en mora de castilla

su eficiencia en campo. aparición de biotipos fitopatógenos resistentes.

Los productos Mycobac® (Trichoderma lignorum) y Finalmente, se plantea una posible integración de al-
Agroguard® (T. harzianum) demostraron ser eficaces ternativas de control de diferente naturaleza (química
en el control de C. gloeosporioides y C. acutatum, consi- o biológica) en programas de manejo integrado de la
derando el fuerte grado de micoparasitismo y la rápida antracnosis de la mora.
colonización que presentaron las cepas de Trichoderma.

En este estudio, los fungicidas químicos presenta- AGRADECIMIENTOS

ron una alta eficiencia en el control de ambas cepas de
Colletotrichum (C. gloeosporioides y C. acutatum); sin Los autores expresan su agradecimiento a la Corpo-
embargo, es de considerar que los productos utilizados ración Colombiana de Investigación Agropecuaria
en la investigación pertenecen a grupos químicos como (Corpoica), a la Asociación Hortifrutícola de Colombia
los bencimidazoles, estrobilurinas y triazoles, los cuales (Asohofrucol) y al Ministerio de Agricultura y Desarrollo
son considerados con alta probabilidad de desarrollar Rural.

REFERENCIAS Botero M, Ríos G, Franco G, Romero M, Pérez J, Morales E, Gallego

J, Echeverri I. 2002. Identificación y espacialización de enferme-
Agrios G. 2005. Plant Pathology. 5th edition. New York. Academic dades asociadas a los cultivos de mora (Rubus glaucus Benth) en
Press, 922 p. el eje cafetero. En: Memorias del Cuarto Seminario Nacional de
Afanador L, Álvarez E, Mejía J. 2009. Especies de Colletotrichum Frutales de Clima Frío Moderado. Medellín, Corpoica y Univer-
p. 67-75 sidad Pontificia Bolivariana, p. 87-99.
causantes de la antracnosis de mora de castilla (Rubus glaucus
Benth) en Colombia. Memorias del XXIX Congreso Nacional Bravo N. 1996. Efecto in vitro de Bacillus sp., sobre el crecimiento,
Fitopatología y Ciencias Afines –ASCOLFI-. Medellín, Editorial esporulación y germinación de conidias y esporas de nueve
ASCOLFI, p. 107–108. hongos. Fitopatología Colombiana 17 (2): 62-72.
74 Arauz L. 2000. Mango Anthracnose: Economic impact and cu- De Los Santos B, Romero F. 2002. Effect of different fungicides
rrent options for integrated management. En: Plant Disease 86 in the control of Colletotrichum acutatum, causal agent of
PROTECCIÓN DE CULTIVOS

(6):600–611. Consulta: agosto de 2010. ttp://apsjournals.aps- anthracnose crown rot in strawberry plants. Crop Protection.
SANIDAD VEGETAL Y

net.org/doi/pdf/10.1094/PDIS.2000.84.6.600; 21:11–15.
Echeverri L, Echeverri C, Navarro R, Gaviria B. 2007. Evalua-
enero - junio / 2013

Bailey JA, Jeger MJ. 1992. Colletrotrichum: Biology, Pathology and

control. United Kingdom, British Society for Plant Pathology, ción de fungicidas cúpricos para el control de antracnosis
388 p. (Colletotrichum gloeosporioides) del tomate de árbol en el munici-
Botero M. 2001. Interacción biológica de microorganismos relacio- pio de Rionegro. Revista Universidad Católica de Oriente (24):99-
nados con Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz y Sacc., 108.
agente causal de la antracnosis en tomate de árbol (Solanum Freeman S, Minz D, Kolesnik I, Barbul O, Zveibil A, Maymon M,
betaceae (Cav.) Sendt). Trabajo de grado para optar al título de Nitzani Y, Kirshner B, Rav-David D, Bilu A, Dag A, Shafir S,
Magister en Fitopatología. Manizales, Universidad de Caldas, Elad Y. 2004. European Journal of Plant Pathology 110:361–
183 p. 370.

Revista Corpoica Ciencia y Tecnología Agropecuaria

Fungicide Resistance Action Committee (FRAC). 2007. FRAC Naranjo J. 2011. Propuesta de un perfil de riesgo químico estable-
Code list ©*: Fungicides sorted by mode action. En: http://www. cido para la mora de castilla (Rubus glaucus Benth.) producida
frac.info/frac/publication/anhang/FRAC_Code_List_2007_ en Colombia. Trabajo de grado para optar al título de Master en
web.pdf, consulta: marzo de 2011. Gerencia de Programas Sanitarios en Inocuidad de Alimentos.
Hernández R, Barrera L, Bautista S, Bravo L. 2007. Antifungal San José, Costa Rica, Universidad para la Cooperación Interna-
potential of crude plant extracts on conidial germination of cional, 76 p.
two isolates of Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz. and Peres N, Souza N, Zitko S, Timmer L. 2002. Activity of benomyl
Sacc. En: Revista Mexicana de Fitopatología 25(002):180-185, for control of postbloom fruit of citrus caused by Colletotrichum
http://redalyc.uaemex.mx/redalyc/pdf/612/61225213.pdf; acutatum. En: Plant Disease 86(6):620-624, http://apsjournals.
consulta: diciembre de 2010. apsnet.org/doi/pdf/10.1094/PDIS.2002.86.6.620; consulta:
Hincapié O, Saldarriaga A. 2009. Avances de investigación en la septiembre de 2010.
exploración de alternativas para el manejo integrado de las prin- Peres N, Timmer L, Adaskaveg J, Correl J. Lifestyles of Colletotrichum
cipales enfermedades de la mora. En: Memorias publicadas en acutatum. 2005. Plant Disease 89(8).
CD Seminario de actualización tecnológica: Cultivo, agroindus- Rueda K. 2010. Caracterización molecular de especies de
tria y comercialización de la mora de castilla. Rionegro, Corpoica Colletotrichum prevalentes en las zonas productoras de mora de
C.I La Selva, Antioquia, Colombia. castilla (Rubus glaucus Benth) en Antioquia. Trabajo de grado
Hoyos-Carvajal L, Duque G, Orduz S. 2008. Antagonismo in vitro para optar al título de Magister en Biotecnología. Medellín, Uni-
de Trichoderma spp., sobre aislamientos de Sclerotinia spp. y versidad Nacional de Colombia sede Medellín, 143 p.

Evaluación in vitro de fungicidas comerciales para el control de Colletotrichum spp., en mora de castilla
Rhizoctonia spp. Revista Colombiana de Ciencias Hortícolas Saldarriaga A, Bernal J. 2000. Enfermedades asociadas al cultivo de
2(1):76-86. mora (Rubus glaucus Benth) en el departamento de Antioquia.
Kumar A, Reddy N, Reddy K, Devi M. 2007. Evaluation of fungici- En: Memorias del Tercer Seminario de Frutales de Clima Frío
dal resistance among Colletotrichum gloeosporioides isolates cau- Moderado. Manizales, Colombia, Corpoica. p. 132-135.
sing mango anthracnose in Agri export zone of Andhra Pradesh, Saldarriaga A, Rodríguez E, Arango R. 2002. Estudios biológicos de
India. Plant Pathology Bulletin 16:157-160. aislamientos de Colletotrichum sp., a partir de frutos de tomate de
Kupper K, Gimenes-Fernandez N, De Goes F. 2003. Controle bio- árbol, manzano y tallos de mora. En: Memorias VIII Congreso
lógico de Colletotrichum acutatum, agente causal da queda pre- Corporación para Investigaciones Biológicas –CIB-. Medellín,
matura dos frutos cítricos. En: Fitopatologia Brasileira 28(3): CIB, p. 21.
251-257, http://www.scielo.br/pdf/fb/v28n3/a05v28n3.pdf. Saldarriaga A, Castaño-Zapata J, Arango R. 2008. Caracterización
Consulta: junio de 2011. del agente causal de la antracnosis en tomate de árbol, manzano
Manthey J A. 2004. Fractionation of orange peel phenols in ultra- y mora. Revista Academia Colombiana de Ciencias Exactas, Físi-
filtered molasses and mass balance studies of their antioxidant cas y Naturales 32(123):145-156.
levels. J. Agric. Food Chem. 52(25):7586–7592. Tamayo P. 2003. Principales enfermedades del tomate de árbol, la
Marulanda M, Isaza L, Ramírez A. 2007. Identificación de la mora y el lulo en Colombia. Boletín técnico 20. 2a edición. Rio-
especie de Colletotrichum responsable de la antracnosis en la negro, Colombia, Corpoica, Centro de Investigación La Selva,
mora de castilla en la región cafetera. En: Scientia et Technica 40 p.
Año XIII. (37):585-590, http://redalyc.uaemex.mx/redalyc/ Tamayo P, Peláez A. 2000. Caracterización de daños y pérdidas cau-
html/849/84937101/84937101_1.html. Consulta: agosto de sadas por enfermedades del fruto de la mora de castilla (Rubus
2010. glaucus Benth) en Antioquia. En: Memorias del Tercer Semina-
Martins I, Peixoto J, Menêzes J, Mello, S. Avaliação in vitro do rio de Frutales de Clima Frío Moderado. Manizales, Colombia.
antagonismo de Trichoderma spp. sobre Colletotrichum Corpoica. p 174-179.
gloeosporioides. 2007. En: Boletim de pesquisa e desenvolvimento Tripathi P, Dubey N. 2004. Exploitation of natural products as an
Embrapa (193) http://www.cenargen.embrapa.br/clp/publica- alternative strategy to control postharvest fungal rotting of fruit
coes/2007/bpd/bpd193.pdf. Consulta: noviembre de 2012. and vegetables. Postharvest Biology and Technology 32(3):325-
Mendoza G. 2010. Utilización del cobre en la agricultura intensiva. 245. p. 67-75
En: Actualidad del campo agropecuario (110):30-32, http://is- Zuluaga C, Patiño L, Collazos J. 2007. Integración de inducción de
suu.com/adca/docs/agosto2010. Consulta: marzo de 2011. resistencia con bacterias quitinolíticas en el control de la sigatoka
Montoya C, Vargas E, Villegas L. 2004. Evaluación de bacterias negra (Mycosphaerella fijiensis Morelet) en banano. Revista de la
con potencial de biocontrol sobre Colletotrichum gloeosporioides, Facultad Nacional de Agronomía 60(2):3891-3905. 75
agente causal de la antracnosis en frutos de aguacate (Persea
PROTECCIÓN DE CULTIVOS

americana). Revista ASIAVA 64:13-18.

SANIDAD VEGETAL Y

enero - junio / 2013

© 2013 Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria