Perfil

Trombofilia
1ero noviembre 2022

01
Productos HemosIL

Screening Rutina Antitrombina

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D-Dimer
Proteína C (crom/coag)
Factores
Proteína S (libre/coag)
Trombofilia

APCR V
Sínd. Antifosfolípido

Enf. von Willebrand

Homocisteína

Anticoagulantes Anticoagulante lúpico

Fibrinolisis
CML ACA IgG/IgM 2

Trombocitopenia
CML β2GPI IgG/IgM
Presentation title
 Antitrombina

Perfil Trombofilia
03

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HemosIL Antitrombina
Todos los kits de AT líquida tienen la misma formulación.

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El ACT TOP y el ACL Elite utilizan distintos vol. de reactivos.
El ACL TOP no reconoce los viales de la ref. 00020002500.

Cuantitativa/
Funcional

Estabilidad FXa +
5 semanas Sustrato
a 2-8ºC Cromog

Reactivos
líquidos
4

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Principio del método
Presentación Estabilidad ACL

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Antitrombina Líquida 4 x 4 mL FXa 1 mes 4-8ºC Elite/Pro
Líquida 2 x 2 mL Su crom 1 mes 4-8ºC
00020002500

Antitrombina Líquida 4 x 4.5 mL FXa 1 mes 4-8ºC TOP

Líquida 4 x 4.5 mL Su crom 1 mes 4-8ºC
00020030100

Antitrombina Líquida 2 x 2 mL FXa 1 mes 4-8ºC TOP

Líquida 2 x 2 mL Su crom 1 mes 4-8ºC
000200300400

Perfil Trombofilia
¿Por qué es funcional?
La AT se une a la heparina.

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El complejo AT-heparina inhibe al FXa.

Perfil Trombofilia
Principio del método
FXa en exceso [AT-Heparina +
Plasma
+ heparina FXa en exceso]

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[AT-Hep-
S-2765 + FXa FIIa + Cof II H
Peptido + PNA FXa]+FXa
Residual
residual

Reacción inversamente proporcional

Color AT Color

AT Color

Comité de estandarización internacional recomienda usar el FXa para el

diagnóstico de la actividad de AT ya que el Cofactor II de la Heparina tiene 7

interferencia con la Trombina (aumentando el valor de la AT, enmascarando def.)

Perfil Trombofilia
 Proteína C

Perfil Trombofilia
03

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HemosIL Proteína C (Crom.)
Sin
interferencias

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Estabilidad Tampón +
: 3 meses 2 Activ.
– 8ºC PC+S.Crom

HemosIL Proclot (Coag.)

Interferencias

Activ PC +
Tests P.Def. PC +
funcional posible
congelación
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HemosIL Proteína C Cromogénica: ¿Por qué es
funcional?
La Prot. C de la muestra se debe activar.

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La PCa debe inhibir al Sustrato Cromogénico que es parecido molecularmente al
FVa y al FVIIIa.

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Principio del método

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Activador Prot
Diluyente
Plasma C ( V.
1/10
Serpiente )

Incubación

El color es directamente
proporcional a la actividad Sustrato
Color
cromogénico
de la proteína C de la
muestra

PC Color
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Perfil Trombofilia
HemosIL Proclot: ¿Por qué es funcional?
La Prot. C de la muestra se debe activar.

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La PCa inhibe al FVa y al FVIIIa, SIEMPRE en presencia de un cofactor, la Proteína
S Libre y uniéndose a fosfolípidos.
PC y PClot podrían dar diferentes resultados

¿Tiene interferencias?

Las propias del TTPA (heparina, anticoagulante lúpico, Resistencia APC)

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Principio del método (Coagulométrica)
Diluyente + Plasma
Plasma Activador Prot deficiente en
C PC

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Incubación

El alargamiento de TTPA es
proporcional a la actividad
funcional de la proteína C del CaCl2 cefalina
muestra

Inhibición Incubación
FVa y FVIIIa
Interferencias

Requiere del
APTT-SP
APCR ( Leiden
ALúpico FVIII > 250%
homocigotos ) 13

Perfil Trombofilia
 Proteína S

Perfil Trombofilia
03

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HemosIL Proteína S Coag.
PS
Reagent

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Control Plasma
Bajo Def. PS

HemosIL Proteína S libre C4BP

Buffer

Anti PS C4BP
Mab Látex

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HemosIL Proteína S Actividad
¿Por qué es funcional?
La Prot. S libre de la muestra se debe unir a la PC Activada y a fosfolípidos.

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El complejo PCa-PS libre inhiben al FVa y al FVIIIa.
Prot S libre y Prot S Activity podrían dar diferentes resultados

¿Tiene interferencias?
FVIIa y Resistencia APC

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Principio del método Proteína S Actividad

Plasma

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Plasma
deficiente PS

Se determina la actividad funcional de la Proteína S libre,

midiendo el grado de prolongación del Tiempo de
Protrombina (TP) en presencia de factor tisular,
fosfolípidos, iones calcio y Proteína C activada.
La actividad de la Proteína S es proporcional a la Tromboplastina
prolongación del tiempo de coagulación. recombinante
cálcica + PC a
Interferencias

APCR ( Leiden 17
FVIIa
Homocigotos )

Perfil Trombofilia
Principio del método

Plasma C4BP

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Ca2+

Aglutinación Anti PS Mab

El grado de aglutinación será directamente proporcional a la

concentración de Proteína S libre en el plasma problema.
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Perfil Trombofilia
 APCR V

Perfil Trombofilia
03

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HemosIL APCR
100 %
correlación

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/genético

Reactivo FV
Dos niveles
deficiente.
de control
Patente

Pacientes TAO
/heparina

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Perfil Trombofilia
Principio del método

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Reactivo
Plasma 1 Cefalina PCa + CaCl2 Tiempo 1
Plasma def V

Ratio 2,6 P.Normales

Ratio 1,7 P. Heterocigotos Ratio APCR FV =
Ratio 1,2 P. Homocigotos

Reactivo
Plasma 1 Cefalina CaCl2 Tiempo 2
Plasma def V

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Perfil Trombofilia
Perfil Trombofilia
Determinación del Cut off

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Perfil Trombofilia
Homocisteína

03

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HemosIL Hemocisteína

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Muestra citrato

Único
Gran
estabilidad:
Coagulómetro
2 meses a 2 –
8ºC

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Perfil Trombofilia
Principio del Método
1. Reducción
2. Transformación

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3. Inmunoensayo competitivo

Todos los pasos se desarrollan en el instrumento automáticamente

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 HemosIL
Homocysteine
Competitive immunoassay

C L

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 HemosIL
Homocysteine

negative sample

C L

Abs

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Time
 HemosIL
Homocysteine

Hcy  positive sample

(SAH)

28
 HemosIL
Homocysteine

positive sample

Abs

29
Time
Principio del Método

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Agente Enzima
Muestra
reductor ( SAHH )
Incub
Reacción inmunológica Hcy Incub
competitiva : SAH
El conjugado aglutinará las
partículas de latex y el SAH Α-SAH
inhibirá dicha aglutinación. El Conjugado
grado de inhibición de la Latex
aglutinación será proporcional
a la concentración de SAH y
por lo tanto a la concentración 30
de Hcy.

Perfil Trombofilia
 Anticuerpos

Perfil Trombofilia
Antifosfolípidos

03

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Productos HemosIL

Screening Rutina

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D-Dimer

Factores
dRVVT Screen/Confirm

Trombofilia SCT Screen/Confirm

Sínd. Antifosfolípido
CML ACA IgG & IgM
Enf. von Willebrand
CML B2GPI IgG & IgM
Anticoagulantes

Fibrinolisis 32

Trombocitopenia
Përfil Trombofilia
HemosIL dRVVT Screen / Confirm No alterados
F.Contacto,
VII,VIII,IX e
inhibidores

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No alterado
Estabilidad 15
por heparina
D 2 – 8ºC
hasta 1U/ml

HemosIL SCT Screen / Confirm

El reactivo SCT Screen se debe preparar:
Sensible β2GLP1
- Añadir 50 uL de SCT Confirm a un vial de SCT Screen
Agitar vigorosamente durante 15 segundos o 5 seg en vortex.
Si no se prepara así el SCT Screen dará tiempos muy largos en los
Controles. Basado en
TTPA En pacientes
fosfolípido TAO/Heparina
dependiente
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Perfil Trombofilia
Principio del Método

R=Tiempo de
dRVVT Screen

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coagulación /
Plasma libre ( baja
Tiempo
de plaquetas concent.
plasma
Fosfolípidos )
normal

= RN

R=Tiempo de
dRVVT
coagulación/
Plasma libre Confirm
Tiempo
de plaquetas ( alta concent.
plasma
fosfolípidos )
normal

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Principio del Método

R=Tiempo de

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SCT Screen ( coagulación /
Plasma libre baja concent. Tiempo
de plaquetas Fosfolípidos ) plasma
normal

= RN

R=Tiempo de
SCT Confirm coagulación/
Plasma libre
( alta concent. Tiempo
de plaquetas
fosfolípidos ) plasma
normal

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Principio del Método QAPM + Pkalicreina

Factor Tisular SCT XIIa XII

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Ca + fosfolípidos
XIa XI
Ca
VII VIIa
Ca IXa IX
Ca + fosfolípidos
VIIIa

dRVVT X Xa
Ca + fosfolípidos
Va
Protrombina (II) Trombina (IIa)
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Perfil Trombofilia
 Screen
Principio del Método

Perfil Trombofilia
Confirm

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 Screen
Principio del Método

Perfil Trombofilia
Confirm

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Síndrome Antifosfolípido

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dRVVT Silica dRVVT
ACA ß2G
Silica
I
LAC SCT ACA
LAC ß2GI
SCT
Screen Screen IgG
Screen IgG
Screen

LAC SCT ACA

LAC ß2GI
SCT
Confirm Confirm IgM
Confirm IgM
Confirm

According to SSC/ISTH
2009 Guidelines

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 Competencia

Perfil Trombofilia
03

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Perfil Trombofilia
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Conclusiones
Perfil completo

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Reactivos líquidos listos para uso: Antitrombina y SCT

Calibraciones estables lote a lote

Alta estabilidad a bordo del equipo

Alta estabilidad en condiciones de 2 a 8 °C

Anticoagulante lúpico alineado a actualización ISTH 2020

Competencia vs Siemens: SCT

Competencia vs Stago: Homocisteína

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