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MEDICIÓN DE NIVEL DE CORTISOL EN SUDOR

MANUELA ARBOLEDA URIBE


MARÍA DEL MAR ARIAS GÓMEZ

Trabajo de grado para optar al título de Ingenieras Biomédicas

Elisa Mejía Mejía


MSc en Ingeniería Biomédica

UNIVERSIDAD EIA
INGENIERÍA BIOMÉDICA
ENVIGADO
2019

La información presentada en este documento es de exclusiva responsabilidad de los autores y no


compromete a la EIA.
AGRADECIMIENTOS

Los autores quieren agradecer a la Universidad EIA y a todo el personal de la Unidad Académica de
Ingeniería Biomédica por su vocación para la formación de profesionales íntegros.

Un agradecimiento especial a los profesores Yesid Montoya, Claudia Echeverri, Róbinson Torres y
Sergio López por su dedicación a su labor y por el amor con que la realizan.

También, desean enviar un agradecimiento a las ingenieras María Clara Mejía y Valentina Gallego,
y a todo el personal de apoyo de los laboratorios en la sede de Zuñiga y Palmas, por el apoyo
incondicional y el acompañamiento durante todo el proceso de implementación del proyecto.

Un agradecimiento especial también a Elisa Mejía, directora del proyecto y quien sugirió la
problemática que se trata en este trabajo.

Finalmente, se agradece a las familias de Manuela Arboleda Uribe y María del Mar Arias Gómez por
el apoyo incondicional en todo el desarrollo de la carrera profesional y por permitirles cumplir su
sueño de ser ingenieros.

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CONTENIDO
pág.

INTRODUCCIÓN ............................................................................................................. 10

1 PRELIMINARES ....................................................................................................... 11

1.1 Planteamiento del problema .............................................................................. 11

1.2 Objetivos del proyecto ....................................................................................... 12

1.2.1 Objetivos Específicos ................................................................................. 12

1.3 Marco de referencia ........................................................................................... 13

1.3.1 Antecedentes ............................................................................................. 13

1.3.2 Marco teórico .............................................................................................. 16

2 METODOLOGÍA ....................................................................................................... 20

2.1 Etapa 1: Conocer fuentes del cuerpo donde se puede medir el nivel de cortisol.20

2.2 Etapa 2: Porponer el método a implementar para la medición del nivel de cortisol
en la fuente seleccionada ............................................................................................. 20

2.2.1 Calibración: ................................................................................................ 20

2.3 Etapa 3: Realizar mediciones del nivel de cortisol en un medio simulado .......... 22

3 PRESENTACIÓN Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS ............................................... 23

3.1 Resultados ........................................................................................................ 23

3.1.1 Revisión bibliográfica .................................................................................. 23

3.1.2 Diseño de concepto .................................................................................... 28

3.1.3 Diseño de detalle ........................................................................................ 33

3.2 Discusión de Resultado ..................................................................................... 44

3.2.1 Diseño de concepto .................................................................................... 44

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3.2.2 Circuito ....................................................................................................... 45

3.2.3 Calibración ................................................................................................. 45

4 CONCLUSIONES Y CONSIDERACIONES FINALES .............................................. 47

REFERENCIAS ............................................................................................................... 48

ANEXOS ......................................................................................................................... 53

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LISTA DE FIGURAS
pág.

Figura 1: Indicadores del estrés académico ..................................................................... 17

Figura 2: Descripción de ley de Beer-Lambert. (Bourgeois, 1997) ................................... 19

Figura 3: Diagrama de bloques del instrumento virtual .................................................... 21

Figura 4: Proceso de recolección de muestra de saliva con el método Salivette.............. 26

Figura 5: Lista de necesidades ........................................................................................ 29

Figura 6: Lista de especificaciones formuladas a partir de la lista de necesidades. ......... 29

Figura 7: Matriz comparativa de medidas y necesidades. ................................................ 30

Figura 8: Diagrama de caja negra de funciones. .............................................................. 31

Figura 9: Caja Transparente de Funciones ...................................................................... 31

Figura 10: Lista de Funciones .......................................................................................... 32

Figura 11: Lista de evaluación de conceptos y sus calificaciones. ................................... 32

Figura 12: Propuestas de diseño de conducto ................................................................. 33

Figura 13: Estructura química Hidrocortisona (National Library of Medicine, 2008) ......... 34

Figura 14: Estructura química Cortisol (National Library of Medicine, 2008) .................... 34

Figura 15: Espectro de absorción Hidrocortisona............................................................. 35

Figura 16: Grafica de concentración vs. absorbancia de Hidrocortisona .......................... 36

Figura 17: Diagrama de bloques circuito.......................................................................... 36

Figura 18: Diseño del circuito del led. .............................................................................. 37

Figura 19: Circuito de adquisición y procesamiento de la señal. ...................................... 38

Figura 20: Circuito reguladores. ....................................................................................... 38

Figura 21: PCB circuito del led......................................................................................... 39

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Figura 22: PCB circuito de adquisición y procesamiento.................................................. 39

Figura 23: Interfaz de comunicación con el usuario del Main ........................................... 40

Figura 24: Código para la calibración en el diagrama de bloques del Host ...................... 40

Figura 25: Concentración vs. voltaje ................................................................................ 41

Figura 26: Diseño caja ..................................................................................................... 42

Figura 27: Vista superior de caja ..................................................................................... 43

Figura 28: Vista lateral de caja......................................................................................... 43

Figura 29: Vista superior de caja sin tapa ........................................................................ 44

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LISTA DE ANEXOS

pág.

Anexo A: Matriz de conceptos ......................................................................................... 53

Anexo B: Matriz morfológica de imágenes ....................................................................... 54

Anexo C: Datasheet Led .................................................................................................. 55

Anexo D: Datasheet Fototransistor .................................................................................. 57

Anexo E: Diagrama de Bloques y Panel Frontal de Main y Host ...................................... 58

Anexo F: Planos Caja ...................................................................................................... 63

Anexo G: Diseño del conducto......................................................................................... 64

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RESUMEN

El cortisol es una hormona que se libera cuando el cuerpo se somete a diferentes niveles
de estrés. Actualmente, el nivel de éste se mide de manera discreta, por medio de pruebas
de orina, sangre y saliva. Estas pruebas solo informan acerca del nivel de cortisol que había
en el cuerpo en el momento en que se extrajo la muestra, no permitiendo realizar estudios
de manera continua, método que sería útil para la identificación de efectores del estrés, y
que serviría como “gold standard” para otros estudios que realicen mediciones de niveles
de estrés.

Consecuencia de lo anterior, este trabajo planteó realizar un método para la medición de


cortisol de manera continua. Para esto, se desarrolló un dispositivo que incluya un circuito
analógico y digital en el cual se puede estimar la concentración de cortisol de manera
continua, basado en el principio de Beer-Lambert.

El primer paso para este desarrollo consistió en realizar el diseño del prototipo, luego de
haber elegido la fuente del cuerpo en la cual se va a medir el nivel de cortisol, según la
información disponible en la literatura. Seguido a esto, se procedió a implementar el diseño
y realizar el circuito del prototipo propuesto. Por último, se realizaron pruebas en un medio
simulado para obtener diferentes datos del nivel de cortisol y relacionar la concentración de
esta hormona con los niveles de voltaje entregados por el sistema diseñado. Se obtuvo
entonces un prototipo funcional para la medición del cortisol de manera continua, no
invasivo y mínimamente intrusivo.

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ABSTRACT
Cortisol is a hormone that is released when the body is subjected to different levels of stress.
Currently, its level is measured discreetly through tests of urine, blood and saliva. These
tests only inform about the level of cortisol that was in the body at the time the sample was
extracted, not allowing continuous studies, which would be useful for the identification of
stress effectors, and that would serve as "gold standard" for other studies that measure
stress levels.

Consequence of the above, this work proposed to perform a method for measuring cortisol
continuously. For this, a device that includes an analog and digital circuit in which the
concentration of cortisol can be measured by means of Beer Lamber's law was developed.

For this project, the first step was to choose the source of the body in which the cortisol level
was going to be measured, according to literature, in order to design the prototype. Following
this, the design and the circuit of the proposed prototype was implemented. Finally, tests
were performed in a simulated medium to obtain different data of the cortisol level and th
obtained results were analyzed.

So as to accomplished the main objectives of this project, It was expected to obtain a


functional prototype for the measurement of cortisol in a continuous and minimally invasive
way.

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INTRODUCCIÓN

El cortisol es un glucocorticoide de la corteza adrenal con efectos en el metabolismo de proteínas,


carbohidratos y lípidos (Juárez García, Landero Hernández, González Ramírez, & Jaime Bernal,
2016), por lo que son múltiples sus funciones en el organismo. De esta manera, la medición del nivel
de cortisol en el cuerpo puede ayudar a entender algunos aspectos fisiológicos del organismo, como
la respuesta de este ante diferentes estímulos. Específicamente, el cortisol se ha relacionado con la
respuesta del organismo humano ante el estrés, que a pesar de que es una respuesta natural y
necesaria en el cuerpo, produce sobrecarga de tensión que repercute en el organismo a corto y largo
plazo, provocando la aparición de enfermedades y anomalías patológicas que impiden el desarrollo
normal y funcionamiento del cuerpo humano (Rengueiro, n.d.).

El objetivo principal de este proyecto fue desarrollar un método para la medición del nivel del cortisol
en el cuerpo de manera continua. Para esto, se realizó inicialmente una exhaustiva búsqueda
bibliográfica sobre las principales fuentes del cuerpo en las cuales se hace la medición de esta
hormona, tanto de forma continua como discreta, para que de esta manera fuera posible seleccionar
la forma más viable para recolectarla y realizar su respectiva medición. Así mismo, se revisaron los
procedimientos de extracción y medición del cortisol de las principales fuentes encontradas, para
que de esta manera se pueda tener un acercamiento sobre los posibles métodos a utilizar.

A su vez, para la implementación del dispositivo para la medición de cortisol, se realizó un diseño de
concepto profundo para diseñar y desarrollar un dispositivo que cumpla con las condiciones
acordadas a partir de la búsqueda bibliográfica, como la fuente y la manera de medir la concentración
del cortisol.

Finalmente, se construyó un prototipo funcional en el que se realizaron mediciones de prueba de la


concentración de cortisol y se evaluó la viabilidad de la técnica propuesta.

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1 PRELIMINARES

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA


El concepto estrés denota la relación que existe entre estímulos aversivos que perturban gravemente
la homeostasis del organismo, y las respuestas fisiológicas y conductuales de este (Gómez &
Escobar, 2006), es decir, el conjunto de experiencias o factores que amenazan la estabilidad
emocional y/o física de un individuo (Cortes, 2011).

El organismo genera una respuesta ante el estrés, la cual está determinada total y completamente
por el sistema nervioso central y la coordinación que este ejerce sobre los tres sistemas corporales
encargados de mantener la homeostasis: los sistemas nervioso autónomo, endocrino e inmune
(Escobar & Gómez González, 2002). En el desarrollo de este trabajo se tratará los niveles de cortisol
que son regulados por eje hipotalámico-pituitario-adrenal (Eje HPA) que es el principal efector de la
respuesta al estrés (Gómez & Escobar, 2006).

El eje hipotalámico-pituitario-adrenal (Eje HPA) es un conjunto complejo de influencias directas e


interacciones retroalimentadas entre el hipotálamo, la glándula pituitaria, y la glándula adrenal o
suprarrenal. Las interacciones homeostáticas finas entre estos tres órganos constituyen el eje HPA,
una parte esencial del sistema neuroendocrino que controla las reacciones al estrés (Aguilar Cordero
et al., 2014). Este es un sistema de señales químicas que regulan la secreción de una amplia
variedad de hormonas a través de bucles de retroalimentación positiva y/o negativa (Cortes, 2011).
En la respuesta fisiológica al estrés, el eje neuroendocrino hace que se liberan glucocorticoides en
el torrente sanguíneo a través del eje HPA, especialmente cortisol, el glucocorticoide más activo.

El cortisol es un glucocorticoide de la corteza adrenal con efectos en el metabolismo de proteínas,


carbohidratos y lípidos (Juárez García et al., 2016), por lo que son múltiples sus funciones en el
organismo. La liberación de este es pulsátil, su regulación es genética y ambiental, e influyen en ella
el ciclo sueño/vigilia y la percepción del propio estrés (Dressl, y otros, 2018). La secreción de cortisol
sigue un ritmo circadiano diurno; bajo condiciones normales, la producción más elevada de cortisol
ocurre en la segunda mitad de la noche con un pico en las horas de la madrugada (Gómez, F.,
Curcio, C., y Benjumea, 2016), con un incremento que oscila entre el 50 y el 75% durante los 30
minutos siguientes al despertar, seguido de un descenso abrupto inmediato, que se hace luego
gradual a lo largo del resto del día, hasta alcanzar un mínimo por la noche (Pérez-Lancho, Ruiz-
Prieto, Bolaños-Ríos, & Jáuregui-Lobera, 2013). El aumento al despertar tiene carácter genético,
mientras que la variabilidad en el descenso a lo largo del día se relaciona con las influencias
ambientales. En condiciones fisiológicas estables, este ritmo se presenta con una significativa
regularidad, pues no se ve afectado por la edad, el género, la etapa de desarrollo o la composición
corporal (Dressl, y otros, 2018).

Sin embargo, como se mencionó anteriormente, cuando se presenta un desafío o se percibe una
amenaza, el eje HPA se activa y se produce un aumento de cortisol, por lo que se llega a que el
estrés puede aumentar tanto la frecuencia como la cantidad liberada de este glucocorticoide (Gómez,
F., Curcio, C., y Benjumea, 2016), de modo que una situación de estrés crónico puede llegar a inhibir
sus ritmos circadianos (Pérez-Lancho et al., 2013), después que el desafío ha sido resuelto, los
niveles de cortisol regresan a su estado basal (Gómez & Escobar, 2006).

Debido a lo anterior se ha sugerido que la variación del ciclo diurno del cortisol puede ofrecer
información valiosa en las influencias fisiológicas y medioambientales en el eje HPA y en
consecuencias de salud relacionadas. Por esto en las últimas dos décadas, el cortisol ha llegado a

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ser uno de los marcadores fisiológicos más empleados para analizar las diferencias de la respuesta
al estrés (Gómez, F., Curcio, C., y Benjumea, 2016).

Diferentes métodos se han empleado para conocer el nivel de cortisol en el cuerpo, se ha encontrado
que el cortisol salival es un indicador fiable de estrés fisiológico, y que además se asocia con
problemas de ansiedad, con trastornos psicológicos y con algunas enfermedades como la obesidad
(Aguilar Cordero et al., 2014). El cortisol en la saliva se correlaciona con el cortisol plasmático y
refleja el cortisol libre plasmático. La muestra de saliva es relativamente fácil para recolectar con una
técnica no invasiva (Figueroa et al., 2017) y para su medición se utiliza el método ELISA (Aguilar
Cordero et al., 2014), el RIA o el HPLC, entre otros (Hernández-Quiceno, Uribe-Bojanini, Alfaro-
Velásquez, Campuzano-Maya, & Salazar-Peláez, 2016).

También puede medirse el cortisol basal en suero o plasma, lo cual permite diagnosticar con mayor
facilidad la insuficiencia adrenal o el hipercortisolismo; el cortisol libre en plasma o suero no se suele
medir en la práctica clínica debido a que las técnicas de laboratorio para hacerlo resultan muy
costosas y dispendiosas. El método de medición del cortisol salival representa una ventaja sobre los
otros porque el cortisol no unido a proteínas difunde libremente a la saliva y, por lo tanto, la medición
del nivel del cortisol salival va a reflejar de manera más exacta los niveles de cortisol libre en
(Hernández-Quiceno et al., 2016).

Por otra parte, además de los anteriores métodos descritos, también se puede medir el cortisol libre
en orina de 24 horas, pues el cortisol es excretado en la orina en su forma de fracción libre o no
unida a proteínas, lo cual proporciona un índice de la producción diaria de la hormona y no como
una medida única que depende del ritmo circadiano del cortisol; la desventaja es que la exactitud de
los resultados va a depender de una adecuada función renal, así como de una minuciosa toma de la
muestra (Hernández-Quiceno et al., 2016).

Los métodos mencionados, realizan una medición del cortisol de manera discreta, lo que implica que
no se puede saber el cambio del nivel del cortisol durante un periodo de tiempo, sino que solo se
conoce el valor que este tenía en determinada muestra que se extrajo, ya sea de saliva, sangre u
orina. No existe actualmente un método que permita conocer el nivel del cortisol de manera continua,
es decir, que mientras se tome la medida de este, se pueda obtener información en tiempo real
(Hogan, Lisle, Johnston, & Robertson, 2012).

Por lo anterior, en este trabajo se pretende responder a la pregunta: ¿Cuáles son las características
de un método para la medición del nivel de cortisol en el cuerpo de forma continua?

1.2 OBJETIVOS DEL PROYECTO


Desarrollar un método para la medición del nivel del cortisol en el cuerpo de manera continua.

1.2.1 Objetivos Específicos


1.2.1.1 Identificar las diferentes fuentes del cuerpo en donde se pueda medir el nivel de cortisol.

1.2.1.2 Proponer un método de medición del nivel de cortisol de forma continua en la fuente
encontrada.

1.2.1.3 Realizar las mediciones de cortisol en un medio simulado.

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1.3 MARCO DE REFERENCIA

1.3.1 Antecedentes
El propósito de este proyecto surgió principalmente por la necesidad de corroborar el nivel de estrés
en el cuerpo con la información obtenida a partir de la variabilidad de la frecuencia cardíaca y el
pulso, con el fin de apoyar y brindar continuidad al trabajo de maestría realizado por Elisa Mejía
(Investigadora de la Universidad EIA). En su trabajo se plantea la hipótesis de que los niveles de
coherencia fisiológica disminuían en las situaciones de estrés, para lo cual se desarrollaron dos
experimentos que se explican más adelante en el texto.

La coherencia fisiológica se utiliza para “describir la medida del orden, la estabilidad y la armonía en
las salidas oscilatorias de los sistemas reguladores durante cualquier período de tiempo, como el
sistema respiratorio o el ritmo cardiaco” (McCraty & Zayas, 2014). También se conoce como la
coherencia cardiaca porque la señal fisiológica que más información contiene acerca de la
coherencia proviene del corazón, y la información que arroja es la variabilidad cardiaca (González &
Mejía, 2014), que “se define como la variación de la frecuencia del latido cardiaco durante un intervalo
de tiempo definido con anterioridad” (Rodas, Pedret, Ramos, & Capdevila, 2008), es decir, “la
variabilidad cardiaca son las variaciones en el intervalo de tiempo entre latido y latido consecutivos
(los intervalos RR)” (Sotelo, 2016).

En el trabajo de Elisa se utilizaron las señales emitidas por el cuerpo humano de respiración,
variabilidad cardiaca y presión arterial para evaluar los efectos del estrés en los estados de
coherencia fisiológica (Mejía, 2017). Para cumplir con lo planteado, como se mencionó
anteriormente, se realizaron dos experimentos, que se describen en su trabajo como etapas del
proyecto, en las cuales la primera etapa (primer experimento), consistía en analizar los efectos del
estrés agudo en la coherencia fisiológica a partir de señales obtenidas utilizando un sistema de
adquisición de señales comercial, y la tercera etapa (segundo experimento), consistía en analizar los
efectos en la coherencia fisiológica del estrés crónico (específicamente, el laboral) y una técnica
terapéutica conocida como Mindfulness (Mejía, 2017).

Para el primer experimento, que se realizó en empleados sanos de la Universidad EIA y la


Universidad CES, se propusieron tres actividades esenciales: el diseño del experimento, la obtención
de los datos y el análisis de los mismos; en ese estudió se pretendió analizar la diferencia en la
coherencia fisiológica en tres estados de cada participante: antes de sufrir un estrés agudo, durante
la generación de este, y después de sufrir el estrés mientras se realizaba una rutina de relajación,
para lo cual se debía escoger diferentes tipos de pruebas psicológicas para la generación del estrés
agudo. Las señales fisiológicas que se tomaron fueron: electrocardiografía (ECG), electromiografía
(EMG), saturación de oxígeno (SpO2), frecuencia cardíaca (FC), fotopletismografía (PPG), respuesta
galvánica de la piel (GSR) y la respiración (RES) (Mejía, 2017).

El análisis de los datos obtenidos en el primer experimento se dividió en tres: estimación de la


coherencia fisiológica a partir de la variabilidad cardíaca, estimación de la coherencia fisiológica a
partir del tiempo de tránsito de pulso (PTT) y la estimación de la coherencia fisiológica a partir de la
respiración. Para el primer análisis se utilizaron las señales de ECG, para el segundo se utilizaron
las señales de EMG y PPG, y para el tercero la señal de respiración. Se concluyó a partir de estos
análisis que la coherencia fisiológica medida a partir de la señal de respiración es un potencial
estimador de estrés agudo (Mejía, 2017).

Para la tercera etapa, es decir, el segundo experimento, también se utilizaron empleados de la


Universidad EIA y la Universidad CES, y se utilizaron las mismas señales fisiológicas para la

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medición de la coherencia fisiológica, pero esta vez en estrés crónico (estrés laboral). De este
segundo experimento los resultados obtenidos no validaron la hipótesis de que, en personas con
altos niveles de fatiga laboral, determinados por el cuestionario Maslach, la medición de coherencia
fisiológica se vería afectada luego de una intervención de Mindfulness, puesto que las mediciones
tomadas dan a entender todo lo contrario a lo planteado (Mejía, 2017).

Entendiendo el trabajo de maestría de Elisa (Mejía, 2017), se hace evidente la necesidad de


desarrollar o proponer un método que permita la medición del nivel de estrés de forma continua,
pues así, en trabajos como el mencionado se podría corroborar los datos obtenidos sobre la variación
de la coherencia fisiológica a partir del nivel de estrés en el cuerpo, porque se podría conocer el valor
real del nivel de estrés en el momento en el que se hace la medición de las señales fisiológicas.

Como se sabe, el estrés se mide actualmente en el laboratorio de forma versátil y precisa, pero estas
mediciones no permiten interpretar los cambios de los niveles de estrés en nuestra vida cotidiana y
tanto los investigadores como los mismos individuos precisan de herramientas para la medición del
estrés a largo plazo y de manera continua (Venho, 2018). Estos métodos que utilizan en el laboratorio
no pueden dar una imagen completa del nivel de estrés de la persona pues, por ejemplo, el estrés
crónico se desarrolla durante un largo período de tiempo y la recuperación puede llevar semanas y
meses, por lo que se necesitan métodos fáciles de usar que se ajusten a la vida diaria para medir el
estrés a largo plazo (Venho, 2018).

En este momento, se puede realizar una medición del estrés de forma continua y a largo plazo
midiendo la variabilidad de la frecuencia cardíaca o la actividad electrodérmica (EDA), también
conocida como “respuesta galvánica de la piel” (GSR) o “respuesta de conductancia de la piel”
(SCR), por ejemplo. La actividad electrodérmica, es un tipo de medida psicobiológica, que está
presente en el campo de la psicología utilizada como indicador de estados de estrés incluida la
neurosis. Muestra la sensibilidad en la medición y las variaciones que tienen que ver con el estado
cognitivo emocional del sujeto (Mojica, 2017), y funciona en la medida que la piel se convierte en un
mejor conductor de la electricidad cuando las glándulas sudoríparas ecrinas procesan el sudor a la
superficie de la piel. Las glándulas ecrinas están inervadas por el sistema nervioso simpático y son
parte del sistema de respuesta de lucha o huida. Esto hace que la actividad electrodérmica (EDA)
sea importante desde el punto de vista de la medición del estrés. La razón principal de su importancia
radica en el hecho de que la EDA está mediada únicamente por la rama simpática del sistema
nervioso autónomo, por lo que no está sujeta a influencias parasimpáticas como la mayoría de las
otras medidas autonómicas. La medición de la EDA se realiza con un equipo especial que consta de
electrodos que están conectados a las palmas o los dedos; su desventaja es que es muy sensible al
movimiento, por lo que se requiere que el sujeto permanezca quieto, limitando que se use
únicamente en laboratorios (Venho, 2018).

Además de las anteriores formas de medir el nivel de estrés de forma continua, en la búsqueda
bibliográfica se encontró que Yoon y compañía, inventaron un parche de control del estrés humano,
que consistía en un parche con una pequeña área de contacto con la piel y con gran flexibilidad,
que integra tres sensores de temperatura de la piel, conductancia de la piel y onda de pulso
(Yoon, Sim, & Cho, 2016).

El área de contacto con la piel se minimiza mediante la invención de una estructura de múltiples
capas integrada y el proceso de microfabricación asociado; reduciéndose así a 1/125 de los sensores
múltiples convencionales de una sola capa. La flexibilidad del parche se incrementa principalmente
por el desarrollo de un sensor de onda de pulso flexible. Este parche, capaz de detectar señales
biológicas multimodales muestra el potencial para la aplicación del monitoreo emocional (Yoon et
al., 2016).

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Continuando con los parches, se encontró que en la Universidad de Stanford en Estados Unidos,
aprovecharon la información que se tiene acerca de qué uno de los mejores indicadores acerca del
nivel de estrés de una persona es el cambio en la cantidad de cortisol producida por el cuerpo, que
como se mencionó con anterioridad puede medirse en sangre, saliva, orina o cabello, pero ninguna
de estas pruebas proporcionan resultados rápidos, por lo que no son útiles para la detección de
factores estresantes a largo plazo. Por lo que un grupo de investigadores de esta Universidad
propusieron un parche que puede proporcionar mediciones instantáneas, precisas y continuas de
los niveles de cortisol. El grupo liderado por Alberto Salleo, anunció en Sciene Advances el desarrollo
del parche portátil capaz de determinar la cantidad de cortisol que produce alguien en segundos,
utilizando el sudor extraído de la piel (Perry, 2018).

Este parche funciona en la medida que lleva el sudor a través de una perforación que tiene hacia un
reservorio, en donde una membrana que se encuentra en la parte superior de este permite que iones
cargados como el sodio y el potasio, la atraviesen, mientras que el cortisol, como no tiene carga, se
queda allí bloqueando los iones cargados. Unas señales enviadas desde un sensor eléctrico en el
parche se usan para detectar copias de seguridad y determinar la cantidad de cortisol en el sudor
(Perry, 2018).

Se probó el prototipo en varios atletas y se llegó a que los niveles de cortisol detectados por el parche
de sensor portátil coincidían con los obtenidos al analizar pruebas de sudor por medio de la prueba
ELISA, que es una prueba que se demora varias horas en dar resultados (Perry, 2018).

A pesar de ser un gran avance el anterior prototipo expuesto, se necesitan más sujetos, más puntos
de datos y pruebas continuamente en el cuerpo humano durante al menos horas, para saber la
validez de este prototipo; además de que el grupo de investigadores que lo están desarrollando
pretenden miniaturizar el parche aún más, evaluar más datos, desarrollar una interfaz de usuario y
adaptarlo para que funcione con la recolección de energía en lugar de una batería, y sugieren que
también este parche podría adaptarse para detectar otros biomarcadores y hormonas no cargadas
en el sudor (Perry, 2018).

En la bibliografía también se encontró un trabajo que se está realizando para desarrollar un modelo
de estrés bien validado que pueda usarse para manejar clínicamente el estrés diario en el entorno
natural, para lo cual se presentan diferentes desafíos como: la carencia de una definición
universalmente aceptada de estrés, o que no hay estándar para evaluar el nivel de estrés ni en un
laboratorio ni en el campo, o que los datos fisiológicos recopilados en el campo están sujetos a
numerosas fuentes de ruido y pérdidas, o la dificultad para la identificación y cálculo de
características discriminatorias, que pueden identificar y distinguir una respuesta de estrés de otras
respuestas fisiológicas similares, además el desarrollo de un modelo computacional a partir de estar
características y validarlo para un uso en el campo es otro desafío (Hovsepian et al., 2015).

Un modelo se considera un estándar de otro para la evaluación continua de estrés si cumple con
dos criterios: el primero es la reproducibilidad, es decir, validez; y el segundo es la alta precisión
(Hovsepian et al., 2015). Para este trabajo, los autores abordaron cada uno de los desafíos y
presentaron el modelo “cStress”, que es un paso sólido para el establecimiento de un “Gold
Standard” para la evaluación del estrés de forma continua. Este modelo consiste en el análisis del
valor de un minuto de ECG y los datos de respiración, y si este minuto no se confunde con la actividad
física, genera una probabilidad de estrés (Hovsepian et al., 2015).

Se encontró en esta investigación realizada por Hovsepia y colaboradores, que el modelo propuesto
obtiene una buena precisión en conjuntos de datos independientes tanto en el laboratorio como en
el campo, y es un paso significativo hacia un “Gold Standard” para la evaluación continua del estrés

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de los sensores inalámbricos portátiles, aunque es importante reconocer que necesita de mejoras
adicionales en la precisión y reproducción en otros conjuntos de datos independientes (Hovsepian
et al., 2015).

En otro trabajo donde se habla sobre las diferentes mediciones actuales del nivel de cortisol en el
cuerpo, que reflejan los niveles de cortisol en el momento de la recolección o por un período máximo
de 24 horas, también se habla sobre otros métodos que permiten conocer el nivel del cortisol durante
períodos más prolongados, estos métodos consisten en la medición del cortisol en cabello y uñas,
en donde el primero se basa en el concepto de que el cortisol pasa al pelo mediante la difusión de
la sangre durante la formación del tallo del mismo, pero para que esto sea verdaderamente útil y
válido, se requiere un mayor entendimiento de los mecanismos de difusión de dicha hormona al
cuero cabelludo; y el segundo método, la bibliografía no aporta información suficiente para conocer
su aplicabilidad clínica (Maidana, Bruno, & Mesch, 2013).

Por último, para finalizar la exposición de la información bibliográfica acerca de lo que se ha trabajado
y desarrollado en torno a la medición del nivel de estrés en el cuerpo, se hablará sobre una patente
desarrollada en Estado Unidos, que para el diagnóstico del estado de una herida, es decir, si
cicatrizará a corto plazo o es crónica o está exacerbada y no cicatriza, emplean la medición del nivel
de cortisol para esto (Swaniker et al., 1999), que como se ha mencionado durante todo el trabajo
actual, es un importante indicador del nivel de estrés, por lo que hace esta patente un trabajo de
interés para el proyecto que se quiere desarrollar.

En la patente proponen medir el nivel del cortisol, poniendo en contacto el fluido de la herida con un
anticuerpo reactivo con el cortisol durante un tiempo y en condiciones suficientes para formar un
complejo antígeno-anticuerpo, y dependiendo de este complejo se puede saber el nivel del cortisol
(Swaniker et al., 1999).

Toda la información que se encontró permite hacer de este proyecto posible de realizar por la
cantidad de trabajos que se han desarrollado que permiten conocer el nivel de estrés en el cuerpo
de una manera continua, por lo cual, hay muchas bases e ideas que se pueden tomar para cumplir
el objetivo del trabajo actual.

1.3.2 Marco teórico

1.3.2.1 El estrés:

El estrés, según la Real Academia de la Lengua, es la “tensión provocada por situaciones agobiantes
que originan reacciones psicosomáticas o trastornos psicológicos a veces graves” (“estrés |
Definición de estrés - Diccionario de la lengua española - Edición del Tricentenario,” n.d.). Realizando
un paralelo del significado con la parte bilógica, el estrés es una reacción fisiológica natural y
necesaria para la supervivencia, donde el organismo se enfrenta a una situación de amenaza o de
demanda incrementada. Cuando hay un exceso de estrés, se pueden producir enfermedades y
anomalías patológicas que impide el desarrollo y funcionamiento normal del cuerpo (Rengueiro, n.d.).

Los tipos de estrés suelen ser clasificados según la fuente, de esta manera, es posible hablar de
estrés amoroso y marital, sexual, familiar, por duelo, médico, ocupacional, académico, militar y por
tortura y encarcelamiento (Barraza, 2008). Gracias a que el ámbito en el cual se desenvuelven la
mayoría de los jóvenes actualmente es el educativo, es importante resaltar que el estrés académico
se define como una reacción de activación fisiológica, emocional, cognitiva y conductual ante
estímulos y eventos académicos (García Berrío & Zea Mazo, 2011).

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La teoría de perspectiva psicosocial del estrés aclara que el ambiente y las situaciones sociales
tienen gran importancia en el nivel de estrés del individuo, ya que hay situaciones generadoras de
estrés; como lo son el procesar información rápidamente, los estímulos ambientales nocivos, la
percepción de amenaza, las funciones fisiológicas alteradas, el aislamiento y encierro, los bloqueos
y obstáculos para llegar a una meta, la presión grupal y la frustración; que hacen que se genere en
el organismo un desequilibro en la homeostasis (García Berrío & Zea Mazo, 2011).

Como se ve, por todo lo mencionado anteriormente, el estrés está presente en todos los medios y
ambientes, incluido el académico, sitio de interés para este trabajo (García Berrío & Zea Mazo, 2011).
Cuando hay una respuesta al estrés de manera aguda o crónica, gracias a características del
ambiente educativo, el estudiante presenta una serie de reacciones fisiológicas (ver Figura 1), que
se articulan de manera idiosincrática en las personas, habiendo que le desequilibrio sistemático se
manifieste de manera diferente, en cantidad y variedad, por cada persona (Barraza, 2008).

Figura 1: Indicadores del estrés académico

1.3.2.2 Respuesta fisiológica ante el estrés:

La regulación sistemática cuando hay una respuesta al estrés, se realiza por medio de tres sistemas:
el sistema nervioso central, el sistema endocrino y el sistema inmunológico. La activación del eje
hipotálamo-pituitaria-adrenal (HPA) con la secreción de cortisol se considera la “piedra angular” de
la respuesta al estrés (Bonilla de Franceschini). El cortisol es una hormona secretada por la corteza
adrenal que ayuda al organismo al control del estrés, a la reducción de la inflamación, en el
metabolismo de proteínas, grasas y carbohidratos, contribuye al buen funcionamiento del sistema
inmune y mantiene los niveles de azúcar en sangre constante, así como a la presión arterial. Los
niveles de cortisol basal en sangre son mayores durante la mañana, con unos valores de 5 y 23
µg/dL y a medida que avanza el día, tiene niveles normales de 3 a 16 µg/dL (“Entienda lo que es el
Cortisol y para qué sirve - Tua Saúde,” n.d.).

Cuando hay una respuesta al estrés, el hipotálamo secreta la hormona liberadora de corticotropina
(CRH), que estimula la formación de corticotropina (ACTH), que posteriormente es secretada por la
pituitaria para estimular la síntesis de cortisol en la corteza adrenal (Bonilla de Franceschini). El
cortisol es una molécula lipídica, por lo que su paso por la vía sanguínea requiere de una proteína
trasportadora, la globulina transportador o transcortina (Guerrero, 2017). Una vez en la sangre, el
cortisol puede pasar a diferentes vías para ser secretado. Gracias a esto, es posible medir los niveles
de cortisol de maneras no invasivas, como por medio de la orina, la saliva, el sudor o la sangre. Sin
embargo, la liberación de esta hormona es regulada genética y ambientalmente, e influye en ella el

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ciclo sueño vigilia. En condiciones normales, el cortisol muestra notoriamente un ciclo circadiano,
con un incremento entre el 50 y el 75% durante los primeros treinta minutos después de despertar,
seguido de un descenso abrupto inmediato, que se hace gradual a lo largo del día y termina con
alcanzar un mínimo en la noche. El aumento al despertar tiene carácter genético, mientras que los
cambios del nivel durante el día se deben netamente a condiciones ambientales (Aguilar Cordero et
al., 2014).

Cuando se da un aumento o una disminución en los niveles de cortisol, se dan unas respuestas
fisiológicas en el cuerpo. Viendo la respuesta fisiológica como la reacción que se produce en el
organismo ante los estímulos estresores, se sabe que esta activa el eje hipofisosuprarrenal
(compuesto por el hipotálamo, la hipófisis y las glándulas suprarrenales) y el sistema nervioso
vegetativo (conjunto de estructuras nerviosas que se encarga de regular el funcionamiento de los
órganos internos y controlar algunas de sus funciones de manera involuntaria e inconsciente, es
decir, mantiene la homeostasis) (Nogareda, 2000).

La respuesta fisiológica evidente del sistema nervioso vegetativo es liberar hormonas que ponen al
cuerpo en estado de alerta, preparándolo para luchar o huir. Estas hormonas permiten enlazar el
fenómeno del estrés con los fenómenos psicofisicológicos de la emoción. Dichos fenómenos son:
dilatación de las pupilas, dilatación bronquial, movilización de los ácidos grasos aumentando los
lípidos en sangre (posible arterioesclerosis), aumento de la coagulación, incremento del rendimiento
cardiaco (provocando una hipertensión arterial), vasodilatación muscular y vasoconstricción cutánea,
reducción de los niveles de estrógeno y testosterona, inhibición de la secreción de prolactina e
incremento de la producción de tiroxina (Nogareda, 2000).

1.3.2.3 Etapas y fases del estrés:

En las situaciones estresantes, se reconocen tres etapas significativas del estrés: fase de alarma,
de adaptación y de agotamiento. El conjunto de dichas fases constituye el proceso de adaptación.
En la fase de alarma se activa el eje hipofisosuprarrenal que desencadena una serie de respuestas
en el organismo como lo son la movilización de defensas del organismo, un aumento de la frecuencia
cardiaca, contracción del bazo (que permite un mayor paso de glóbulos rojos por el aumento de
este), redistribución de la sangre (que abandona los puntos menos importantes para acudir a las
zonas de acción como los músculos y el cerebro, generando palidez en la piel), aumento de la
capacidad respiratoria, dilatación de pupilas, aumento de coagulación de la sangre y aumento del
número de linfocitos (Nogareda, 2000).

En la fase de resistencia el organismo intenta superar, adaptarse o afrontar la presencia de los


factores estresantes, haciendo que se normalicen los niveles de corticoesteroides y se desaparezca
la sintomatología. La fase de agotamiento ocurre cuando se repite con frecuencia la agresión o es
de larga duración y cuando los recursos del organismo para conseguir la homeostasis no son
suficientes. Esta fase lleva a que se produzca una alteración tisular y a la aparición de la patología
psicosomática (Nogareda, 2000).

1.3.2.4 Medición del nivel de cortisol:

Como se mencionó anteriormente en este trabajo, se percibe la medición de cortisol en cabello y


uñas como potenciales marcadores de este, en periodos más prolongados. El cortisol se almacena
en el pelo por difusión desde la sangre durante la formación del tallo, dado que el pelo crece a razón
de centímetros por mes, la determinación del cortisol representaría la exposición de los tejidos a esta
hormona durante semanas y meses. A pesar de los resultados prominentes sobre el uso de la medida

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de cortisol en el pelo, se requiere un mayor entendimiento de los mecanismos de difusión del cortisol
al cuero cabelludo (Maidana et al., 2013).

En cuanto a la determinación de cortisol en uñas, no hay un estudio bibliográfico amplio que aporte
datos contundentes en relación con la aplicación clínica. De esta manera, a pesar de que los
inmunoensayos sean los métodos más comúnmente usados, se evidencia una necesidad de
determinación constante de los niveles de cortisol (Maidana et al., 2013).

1.3.2.5 Ley de Beer Lambert:

La ley de Beer Lambert es el conjunto de la ley de Beer, que es la relación entre la absorción de luz
por una solución diluida o por un gas y la concentración de la fase absorbente; y la ley de Lambert,
que es la relación entre la absorción de la luz y el camino recorrido por este. Para hallar la ecuación,
se postulan dos cosas (Herrera, 2010):

• Cada cuanto de luz que penetra en la solución tiene igual oportunidad de ser absorbido, lo
que implica que la luz es monocromática.

• Cada molécula de la sustancia que absorbe tiene igual oportunidad de interceptar y absorber
un cuanto de luz, cualquiera que sea su situación dentro de la cubeta. Es decir, la solución
está lo suficientemente diluida como para que ninguna partícula quede oculta en la sombra
de otra.

La ecuación (1) describe la atenuación de luz, viajando por un medio uniforme y una sustancia
absorbente. La siguiente ecuación describe cómo es la intensidad (I) que penetra en la cubeta con
respecto a la longitud de onda de absorbancia de una sustancia (λ), la concentración de la solución
en la cubeta (c), la intensidad inicial del haz de luz (I) y la distancia que la luz atraviesa de la sustancia
(d) (Bourgeois, 1997). En la figura 1 se muestra gráficamente cómo se debe realizar la medición
involucrando todas las variables mencionadas.

𝐼 = 𝐼𝑜𝑒 −ɛ(𝜆)𝑐𝑑 (1)

Figura 2: Descripción de ley de Beer-Lambert. (Bourgeois, 1997)

De esta manera, y despejando la ecuación debidamente, es posible saber la concentración de una


sustancia cuando se tienen las demás incógnitas. Se sabe que la longitud de onda de absorbancia
del cortisol es de 245 nm (Izquierdo-Hornillos, Gonzalo-Lumbreras, & Santos-Montes, 2005). Así, se
hace posible identificar la concentración de esta hormona. Sin embargo, es necesario identificar cuál
sería el mecanismo por aplicar para realizar esa medición de concentración de manera continua.

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2 METODOLOGÍA

2.1 ETAPA 1: CONOCER FUENTES DEL CUERPO DONDE SE PUEDE


MEDIR EL NIVEL DE CORTISOL.
Para el desarrollo del primer objetivo específico se propuso como metodología realizar una revisión
bibliográfica exhaustiva en diferentes bases de datos. Para ello, se realizó una búsqueda electrónica
en la plataforma Scopus utilizando las palabras claves “cortisol”, “measurement” y “stress”, sin
lenguaje como restricción, pero con una restricción de fecha (2014 a presente). La plataforma
entregó 192 artículos disponibles en la literatura, los cuales fueron luego filtrados según las
necesidades y la problemática del proyecto. El filtro se realizó analizando los títulos y los resúmenes
de los artículos encontrados en bases de datos digitales como ScienceDirect, Google Scholar,
PubMed y Scielo. Los artículos disponibles en las bases de datos fueron descargados y leídos.

Una vez realizado el filtrado, se obtuvieron 43 artículos que fueron leídos y analizados. Después, se
determinaron las principales fuentes de medición del cortisol y se seleccionó la más apropiada para
el enfoque del proyecto, priorizando las mediciones no invasivas y de menor dificultad para la
realización de la medición por personal no entrenado en este fin.

2.2 ETAPA 2: PORPONER EL MÉTODO A IMPLEMENTAR PARA LA


MEDICIÓN DEL NIVEL DE CORTISOL EN LA FUENTE SELECCIONADA
Luego de realizar la búsqueda bibliográfica pertinente, para el objetivo del método de medición del
nivel de cortisol de forma continua en la fuente encontrada, se procedió a desarrollar un diseño de
concepto basada en la metodología de Ulrich y Eppinger, con el fin de realizar un prototipo que
cumpliera con las necesidades y especificaciones del proyecto.

Siguiendo con la metodología de Ulrich y Eppinger, se procedió a desarrollar un diseño de detalle de


cada una de las partes del prototipo. Tanto para el circuito como para el conducto de recolección se
realizó un diseño de este tipo para mostrar más a fondo cómo era el funcionamiento de cada parte.
En el circuito se tuvo en cuenta no solo los componentes que hacían parte de este, sino también la
calibración que se hizo al fototransistor para saber cuál era el voltaje de salida, que a su vez era el
de entrada al circuito de filtrado y amplificación. Para el conducto se desarrolló una serie de pruebas
con diferentes diseños para establecer cuál era el que mejor se acomodaba a lo que se necesitaba.

2.2.1 Calibración:
Es necesario realizar una calibración del método propuesto en el trabajo actual, para comprobar el
funcionamiento de éste y obtener una relación entre el voltaje medido por el sistema y la
concentración de cortisol. La calibración se debe realizar con las mismas concentraciones que se
utilizaron para la caracterización de la hidrocortisona succinato sódico, pues como se mencionó
durante la descripción de ese procedimiento, a partir de la comparación de los resultados obtenidos
allí se puede determinar el funcionamiento del método propuesto.

Para la calibración, se utilizó una tarjeta NI-myRIO, dispositivo de hardware embebido que tiene un
procesador dual-core ARM Cortex-A9 completamente programable que permite ejecutar los
programas realizados en el software NI LabVIEW™ en tiempo real (“Software Requerido y Opcional
para Programar NI myRIO - National Instruments,” n.d.).

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El software y el hardware de se integraron por medio de un código en NI LabVIEW™ que permite la
comunicación entre el computador y la NI-myRIO, para lo cual se crean dos instrumentos virtuales
(VI, por sus siglas en inglés). Al VI que se ejecuta en el computador, llamado Main IU, se le
denominará Main; y al VI que se ejecuta en la NI-myRIO, llamado MainIdent RT, se le denominará
Host, con el propósito de diferenciarlos fácilmente en este escrito. Los códigos, tanto del Host como
del Main, diseñados en NI LabVIEW™ se encuentran en el Anexo E.

Cada uno de los VI está compuesto por un panel frontal, donde se diseña la interfaz de comunicación
con el usuario; y por un diagrama de bloques, que es donde se hace la programación de lo que se
quiere ejecutar con el software. Para el diagrama de bloques del Main, se realizaron dos estructuras
de códigos, en donde la primera se encarga de enviar mensajes o comandos al Host; y la segunda,
se encarga de recibir los mensajes que el Host le envíe. Y para el diagrama de bloques del Host, se
realizaron tres estructuras de códigos: la primera envía datos del Host al Main; la segunda, recibe
datos enviados por el Main; y la tercera contiene el código con el que se realizó la calibración del
método propuesto.

Entendiendo la estructura del software, lo que se plantea para la calibración es llevar la salida del
sistema diseñado a un puerto de entrada de la NI myRIO, que realiza la conversión analógica a digital
del voltaje medido. Esta información se muestra en la interfaz de comunicación con el usuario del
Main y se almacena en una tabla con los valores de: la concentración que se está midiendo en el
momento, que es ingresada por el usuario en la interfaz de comunicación del computador. El
diagrama de flujo de este proceso se muestra en la Figura 3.

Para poder almacenar dichos valores en una tabla, desde el código se realiza una configuración que
permite grabar los datos leídos y almacenarlos en un archivo creado por el usuario, que una vez
termine de grabar, podrá abrir el archivo creado desde diferentes programas para su visualización.
En el proyecto actual, se propone almacenar los datos durante cinco segundos y llevarlos
posteriormente a una tabla de Microsoft Excel, con el fin de obtener un promedio de los valores de
voltaje correspondientes a la concentración ingresada para, una vez obtenidos los seis promedios,
construir la curva que relaciona voltaje con concentración y así, poder analizar si su comportamiento
es similar al obtenido en el espectrofotómetro. Se esperaba que el comportamiento fuera similar,
donde se representara un cambio en el voltaje de acuerdo con el cambio de concentración.

Figura 3: Diagrama de bloques del instrumento virtual

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2.3 ETAPA 3: REALIZAR MEDICIONES DEL NIVEL DE CORTISOL EN UN
MEDIO SIMULADO
Para cumplir con el último objetivo específico, se realizaron diferentes muestras con concentraciones
conocidas de un medio simulado, con el fin de realizar la calibración del fototransistor, comparando
los valores obtenidos de este, con los entregados por el elespectrofotómetro UV/Vis de doble haz,
tomado como “Gold Standard” para esta etapa. El medio simulado utilizado fue hidrocortisona
succinato sódico, que tiene la misma longitud de onda del cortisol y una estructura química muy
similar.

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3 PRESENTACIÓN Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

3.1 RESULTADOS

3.1.1 Revisión bibliográfica


El cortisol es un esteroide lipofílico con bajo peso molecular que luego de ser sintetizado, pasa al
torrente sanguíneo para ser transportado. El 95% del cortisol secretado se unirá a proteínas grandes
y se transportará por todo el cuerpo en la sangre, sin embargo, gracias a su bajo peso molecular y
su naturaleza lipofílica, el cortisol no unido a proteínas ingresa a las células por difusión pasiva, lo
que hace posible medir la fracción de cortisol libre en todos los fluidos corporales (Kirschbaum, n.d.).
Revisando más a fondo la bibliografía encontrada, fue evidente que las fuentes de fluidos corporales
usados para la medición del cortisol diferentes a la sangre son igual de confiables que esta. Estas
diferentes fuentes corporales se usan para realizar la medición del cortisol de forma no invasiva y
pueden ser: la saliva, el sudor, las uñas, la orina y el cabello.

Después de la lectura de cada uno de los procedimientos no invasivos, se encontraron que los tres
que mejor se acomodan a la propuesta de este proyecto, son los que utilizan el cabello, la saliva o
el sudor, por lo cual se hizo una búsqueda bibliográfica mas exhaustiva sobre estos, donde se
utilizaron las mismas bases de datos electrónicas. Para la investigación sobre el cortisol en saliva,
se leyó un total de 13 artículos, de los cuales 10 se encontraron en la última búsqueda; para la
información sobre cortisol en cabello, se leyó un total de 16 artículos. Y, por último, para la
recolección de la información sobre la medición de cortisol en el sudor, se leyó un total de 10
artículos.

3.1.1.1 Medición de nivel de cortisol en el cabello

De la revisión bibliográfica que se realizó se encontró como factor común de todos los artículos leídos
que la medición de la concentración de cortisol en el cabello, es una metodología prometedora para
estudiar los niveles crónicos de estrés (Herane Vives et al., 2015); la palabra crónico quiere decir
que se mantiene en el tiempo, ya sean meses o años (“crónico, ca | Definición de crónico, ca -
«Diccionario de la lengua española» - Edición del Tricentenario,” n.d.), por lo que se hace necesario
para su medición tener muestras en diferentes puntos de tiempo.

Herane Vives y otros ( 2015) hacen una revisión que sintetiza todos los estudios publicados, desde
1978 hasta 2015, que relacionan la concentración de cortisol en el cabello con el estrés, y presenta
como uno de sus hallazgos más valiosos el aumento en los estudios replicables que se han realizado
sobre el nivel de cortisol en el cabello asociado con eventos estresantes de la vida (Herane Vives et
al., 2015). Además, presenta otros estudios realizados por otros autores que han demostrado la alta
correlación que tienen los resultados del análisis de la concentración de cortisol en el cabello, con la
concentración en muestras de saliva, sangre y orina, y que la concentración del cortisol
efectivamente aumenta cuando la persona estaba sometida a condiciones de estrés.

Comprendiendo que es un método confiable y que la medición de la concentración de cortisol en el


cabello es una solución para la medición de niveles de estrés a largo plazo, debido a que se conoce
la relación del crecimiento del cabello en el tiempo, que es en promedio 1 cm por mes (Groeneveld
et al., 2013), se dice que el análisis de un centímetro de cabello es el análisis del nivel de cortisol de
un mes, por lo que Karlén y otros ( 2011), en su estudio para saber si el cortisol podía considerarse
como un biomarcador de los principales estresores de la vida, analizan muestras de cabello

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obtenidas de 99 estudiantes; el análisis se hace en los primeros 3 cm de cabello que están en la
sección donde se realizó el corte, correspondientes a los 3 meses anteriores al momento de la
recolección de la muestra. Los resultados los compararon con las respuestas de los estudiantes
frente a un cuestionario que preguntaba sobre su estado de salud, el nivel de estrés percibido y la
ocurrencia de un suceso grave, todo en los últimos tres meses. De este estudio encontraron que los
niveles de cortisol se relacionaban con eventos graves en los últimos tres meses y se
correlacionaban negativamente de forma débil con el estrés percibido; además se encontró que los
resultados no se veían afectados por el sexo, tinturas o tratamientos en el cabello o ingesta de
productores farmacéuticos o el estado de salud informado. Finalmente, Karlén y otros (2011),
afirmaron que el cortisol puede ser un biomarcador de sucesos graves que han pasado a lo largo de
un periodo, mas no al estrés percibido en un momento determinado.

Así mismo, Groeneveld y otros (2013) realizaron un estudio similar al anterior para determinar los
niveles de cortisol a largo plazo midiendo el cortisol en el cabello. El estudio se hizo en niños
pequeños antes y después de una transición relacionada con el estrés, en este caso se tomó el inicio
de la escuela primaria como esa transición. Para el estudio se tomaron muestras de cabello que
permitían analizar el nivel de cortisol dos meses antes del suceso y dos meses después; se encontró
que efectivamente el nivel de cortisol aumentaba en la sección de la muestra que correspondía al
tiempo posterior al ingreso a la escuela primaria.

Otros autores evaluaron si el análisis de cortisol en el cabello es útil en la investigación de un trauma


o en un trastorno de estrés postraumático (Steudte-Schmiedgen, Kirschbaum, Alexander, & Stalder,
2016). En su trabajo exponen que toman la muestra del cabello y no de la saliva, plasma u orina,
porque estas son fuentes adecuadas para reflejar los niveles de cortisol circulantes en el momento
de muestro, pero proporcionan estimaciones poco fiables de la producción a largo plazo, mientras
que en una muestra de cabello se sabe que se puede recolectar información a largo plazo, además
que es una muestra fácil de recolectar y almacenar, y que es un método no invasivo que requiere de
pocos participantes.

Entendiendo que la aplicación de la medición de concentración de cortisol en el cabello tiene una


aplicación limitada debido a que solo es fiable para medir niveles de estrés a largo plazo y no en el
momento de muestreo, es momento de hablar de la metodología utilizada para la extracción de
cortisol en la muestra de cabello, la cual además de variar un poco entre los diferentes artículos
leídos, no se describe en detalle, por lo que Poll y otros (2007) realizaron un estudio puramente
metodológico para identificar y optimizar los pasos para la extracción de cortisol en el cabello
basándose en la metodología de Xiang y otros (2016). La metodología propuesta por estos autores,
después de las debidas modificaciones que realizaron, consiste en los siguientes pasos:

1. Tomar una muestra de pelo para la extracción de cortisol, realizando el corte desde el área
del vértice superior, lo más cerca posible al cuero cabelludo.

2. Lavar la muestra de cabello 3 veces con alícuotas de 5 ml de alcohol isopropílico (Serva,


Alemania) durante 2 minutos

3. Secar durante toda la noche y se pulverizar con un tubo de tracción ULTRA-TURRAX Tube
Drive (IKA® Works, Inc., Wilmington, NC) a 4000 ciclos por minuto (rpm) durante 6 minutos. Los
tubos BMT-20 contenían 40 bolas de acero.

4. Eluir el polvo de cabello con 2,0 ml de metanol (Sigma-Aldrich, EE. UU.) en un agitador
rotatorio a temperatura ambiente durante la noche.

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5. Centrifugar a 2000 rpm durante 10 minutos y se transferir 1.5 ml de sobrenadante a un tubo
Eppendorf y centrifugar nuevamente a 10 000 rpm durante 10 minutos.

6. Transferir 1,0 ml de metanol a un tubo de vidrio.

7. Evaporar a 50 ° C (baño de agua) con aire ambiente durante la noche y diluir con 250 μl de
solución salina tamponada con fosfato 0,01 M (pH 7,4).

8. Medir la muestra lista con el kit de inmunoensayo enzimático de cortisol salival (ELISA) (IBL
International, Hamburgo, Alemania).

Los principales pasos modificados de la metodología propuesta por Xiang et al. (2016) fueron la
pulverización, los aumentos en el volumen de metanol y el aumento en la velocidad y duración de la
centrifugación. Los resultados mostraron que se obtenía una variabilidad menor y unas
concentraciones de cortisol mayores con sus modificaciones.

3.1.1.2 Medición de nivel de cortisol en la saliva

La medición de cortisol en la saliva ha tomado mayor importancia porque representa una cantidad
considerable de cortisol libre que es biológicamente activo (Poll et al., 2007); a su vez, el cortisol que
está presente en la saliva representa un 10% del que se encuentra en plasma (Dulce Ma.; Galindo
Maldonado, Francisco; Valdez Pérez, Ricardo A.; Romano Pardo, Marta; Schuneman de Aluja,
2005). A pesar de que la medición no se hace en plasma, se garantiza que los valores que se
obtienen al medir la concentración de cortisol en saliva son iguales en comparación con los niveles
que arroja el método de plasma (Kirschbaum, n.d.). Este tipo de medición también ha tomado fuerza
por el fácil método de extracción con el que cuenta, que no es del todo invasivo y el paciente puede
realizar el proceso de recolección en casa con unas indicaciones informadas previamente
(Kirschbaum, n.d.).

Para obtener la muestra de saliva para realizar el análisis de cortisol existe un método llamado
Salivette, que es un producto fabricado y vendido por Sarstedt (Kirschbaum, n.d.). Permite una
recolección fácil y autónoma de la saliva, que sólo necesita de una volumen de 0.5-1 ml de saliva
depositado en la torunda, que es un trozo de algodón de fibras sintéticas con ácido cítrico para
estimular la salivación. Mediante este proceso de recolección se pueden obtener niveles de
concentración de cortisol con análisis exactos incluso con pequeñas cantidades de saliva (Poll et al.,
2007). En la Figura 4 se ve el procedimiento que el paciente, en casa y con las previas indicaciones
del médico tratante, debe seguir para recolectar la muestra de saliva.

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Figura 4: Proceso de recolección de muestra de saliva con el método Salivette.

Luego de la recolección, las muestras son llevadas al laboratorio para medir la concentración de
cortisol. Estas concentraciones se analizan mediante un ensayo de inmunoabsorción ligado a
enzimas (ELISA) (Poll et al., 2007). En este método, se pone una cantidad desconocida de un
antígeno presente en la muestra y una cantidad fija de antígenos marcados enzimáticamente; ambos
antígenos compiten por los sitios de unión de los anticuerpos que recubren los pozos donde es
depositada la muestra. Una vez ocurra la reacción del sustrato, se debe notar un cambio en el color
que es inversamente proporcional a la cantidad de antígeno de la muestra. El procedimiento que se
sigue para evaluar la concentración de cortisol por este método consiste en pipetear, incubar, agitar,
lavar y medir la densidad óptica; en este último paso se mide una absorbancia de 450 nm, que es la
longitud de onda referencia para la concentración de cortisol (IBL International GMB, 2015).

3.1.1.3 Medición de nivel de cortisol en el sudor

El sudor humano es un fluido corporal importante y de fácil acceso que contiene una gran cantidad
de productos químicos que pueden reflejar el estado fisiológico de un individuo (Gao, Ota, Kiriya,
Takei, & Javey, 2019), por lo que en los últimos años se ha considerado como una fuente confiable
que puede reemplazar las muestras de sangre para diferentes exámenes médicos, debido a que
contiene biomarcadores similares como el sodio, el potasio y la glucosa (Perry, 2018).

En los últimos años gran parte de la investigación en torno al área de la salud se ha concentrado en
los dispositivos médicos portátiles, pues desempeñan un papel crucial en la realización de la
medicina personalizada, ya que pueden recopilar continuamente datos del cuerpo humano para
capturar cambios significativos en el estado de salud a tiempo para la intervención preventiva.

Por lo anterior, alrededor del mundo se han desarrollado dispositivos portátiles, vestibles y no
invasivos, que permiten la medición de diferentes variables en el cuerpo a través de la recolección
de una muestra de sudor: Perry (Perry, 2018) publicó un trabajo de investigación en el que desarrolló
un sensor portátil no invasivo capaz de reemplazar los análisis de sangre para enfermedades
crónicas como la diabetes. El dispositivo que propone consiste en un sensor de pH, una placa de
circuito impreso (PCB) y una antena estirable, que inicialmente tiene un tamaño de 1 cm, pero puede
estirarse hasta un 53 por ciento de su longitud sin perjudicar su rendimiento. El dispositivo es capaz

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de proporcionar resultados en 8 segundos, y una vez mide el sudor, transmite los datos de forma
inalámbrica y sin alimentación externa a una computadora receptora, lo que permite al paciente
controlar sus niveles de pH en tiempo real.

Siguiendo con esta idea, Heikenfeld y otros (“Sweat-Based Wearable Sensor May Soon Replace
Blood Tests | Wearable Technologies,” n.d.) construyeron un dispositivo que consistía en un sensor
de sodio, un medidor de voltaje, una antena de comunicaciones y un chip controlador en un parche
que recibía alimentación externa con un teléfono inteligente. Su parche funcionó tan bien como los
sistemas de detección de electrolitos de mesa utilizados por los médicos para detectar la fibrosis
quística, el problema era que este parche funcionaba muy bien para atletas que podría bombear
mucho sudor, pero para su objetivo, que era medir esta variable en personas sedentarias con fibrosis
quística (que en general no sudan mucho) no era viable, por lo que la solución es utilizar un proceso
eléctrico, llamado iontoforesis, que estimula la piel para producir sudor.

La iontoforesis funciona colocando un medicamento cargado eléctricamente en la piel y utilizando


un electrodo y una corriente baja, menos de 1 miliamperio por centímetro cuadrado, para atraer el
medicamento hacia la piel; el medicamento que se ha infundido por medio de este método para
estimular las glándulas sudoríparas y generar sudor, es la pilocarpina. Heikenfeld y otros (“Sweat-
Based Wearable Sensor May Soon Replace Blood Tests | Wearable Technologies,” n.d.).
implementaron esto en sus dispositivos y tuvieron éxito midiendo electrolitos, pero en el momento
de su investigación se les presento un gran desafío a la hora de medir metabolitos, como el lactato,
la creatinina y la glucosa. Gao y otros (Gao, Ota, Kiriya, Takei, & Javey, 2019) tres años después,
presentaron un conjunto de sensores mecánicamente flexibles y totalmente integrados (es decir, que
no requieren análisis externos) para el análisis multiplexado de transpiración in situ, que mide
simultánea y selectivamente los metabolitos del sudor (como la glucosa y el lactato) y los electrolitos
(como el sodio y el potasio), así como la temperatura de la piel (para calibrar la respuesta de los
sensores).

Gao y otros (Gao, Ota, Kiriya, Takei, & Javey, 2019) utilizaron, para la medición de la glucosa y
lactato, sensores amperométricos (con salida de corriente) basados en la glucosa oxidasa y el lactato
oxidasa, y un electrodo de Ag /AgCl como el electrodo de referencia compartido y contraelectrodo
para ambos sensores, ninguno de los sensores necesitaba alimentación externa (Gao et al., 2019).
Estos sensores enzimáticos generaban de forma autónoma señales de corriente proporcionales a la
abundancia de los metabolitos. Para la medición de los niveles de Na + y K, utilizó electrodos
selectivos de iones (ISE), junto con un electro de referencia revestido de polivinilbutiral (PVB). Al
usar poli (3,4-etilendioxitiofeno) poliestireno sulfonato (PEDOT: PSS) como un transductor de ion a
electrón en los ISE y nanotubos de carbono en la membrana de referencia de PVB25, se pueden
obtener sensores potenciométricos robustos (con salida de voltaje) para mediciones continuas a
largo plazo con una desviación de voltaje despreciable. Por último, el sensor de temperatura basado
en resistencia se realizó fabricando microhilos de metal Cr / Au.

Ya habiendo medido tanto electrolitos como metabolitos, Perry (Perry, 2018) publica en su artículo
un sensor capaz de medir un glucocorticoide, el cortisol. Un grupo de investigación en la Universidad
de Standford estaba particularmente interesado en medir en el sudor debido a que ofrece una forma
no invasiva de monitoreo continuo de varios biomarcadores, como se había comprobado en estudios
anteriores, y su particular interés en el cortisol se debía a que como se conoce es un indicador de
los niveles de estrés de una persona y los métodos actuales no proporcionan resultados rápidos, por
lo que no son particularmente útiles para detectar factores estresantes. El grupo de investigación
liderado por Alberto Salleo, profesor asociado de ciencia e ingeniería de materiales y el investigador
postdoctoral Onur Parlak, anunció en Science Advances que desarrollaron un parche portátil que
puede determinar la cantidad de cortisol que produce alguien en segundos, utilizando el sudor
extraído de la piel debajo del parche (Parlak, Keene, Marais, Curto, & Salleo, 2018). El parche

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elástico empuja el sudor a través de las perforaciones hacia un reservorio. Una membrana en la
parte superior del reservorio permite que los iones cargados, como el sodio y el potasio, pasen a
través. El cortisol, que no tiene carga, no puede pasar, y en su lugar bloquea los iones cargados.
Las señales enviadas desde un sensor eléctrico en el parche pueden usarse para detectar estas
copias de seguridad y determinar la cantidad de cortisol en el sudor. Parlak probó el prototipo en
varios corredores e informó que los niveles de cortisol detectados por el parche de sensor portátil
coincidieron con los obtenidos mediante la ejecución de muestras del sudor de los corredores a
través de una prueba ELISA que toma varias horas (“Sweat-Based Wearable Sensor May Soon
Replace Blood Tests | Wearable Technologies,” n.d.). Sin embargo, para Heikenfeld para poder
aprobar este parche se necesitaban más sujetos, puntos de datos y pruebas continuamente en el
cuerpo durante al menos una hora (“Sweat-Based Wearable Sensor May Soon Replace Blood Tests
| Wearable Technologies,” n.d.). Además este sigue siente un estudio concentrado en atletas que
para las pruebas era necesario que hicieran ejercicio hasta sudar, para la recolección de las
muestras, aunque como se mencionó en (“Sweat-Based Wearable Sensor May Soon Replace Blood
Tests | Wearable Technologies,” n.d.), una solución es el método de la iontoforesis, que debe
probarse su implementación en este parche y verificar si los resultados con los esperados.

Después de esta búsqueda, se descartó el cabello y la saliva como posibles fuentes corporales para
extraer el cortisol de ellas, debido a que el primero no permite conocer el nivel de cortisol en tiempo
continuo, sino que brinda información sobre su concentración a largo plazo, y además requiere de
procedimientos de larga duración en laboratorio para su análisis, razón por la cual también se
descartó el segundo. De esta manera, se selecciona el sudor como la fuente para extraer el cortisol
porque es la más versátil para el propósito de este proyecto y brinda la información que se quiere
encontrar, que es la concentración del cortisol de forma continua. Además, permite realizar el
funcionamiento del método que se propone a partir de la ley de Beer-Lambert.

3.1.2 Diseño de concepto


Se realizó un estudio de diseño de concepto basado en la teoría planteada por Ulrich y Eppinger
(Ulrich & Eppinger, 2012), para encontrar la mejor solución al problema planteado en el proyecto: la
medición no invasiva y continua de la concentración de cortisol.

Esta técnica sugiere realizar una lista de necesidades y especificaciones antes de realizar más a
fondo las diferentes soluciones del concepto. Para esta lista se enumeran los rasgos que hacen que
el producto a desarrollar sea diferencial del resto de productos del mercado que miden el nivel de
cortisol de manera continua, se enumeran las características que deben tener prioridad para que el
producto cumpla con los factores diferenciadores. Esta lista de necesidades se observa en la Figura
5 a partir de la cual se construyó la lista de especificaciones (Figura 6) y una tabla comparativa entre
las medidas y las especificaciones a utilizar (Figura 7).

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3.1.2.1 Lista de Necesidades

Necesidades
Dispositivo no invasivo
Dispositivo vestible
Fácil manejo
Reproducibilidad
Confiabilidad
Bajo costo
Medición continua
Reutilizable
Bajo riesgo de infección
Fácil limpieza

Figura 5: Lista de necesidades

Especificaciones
Dispositivo externo
Dipositivo que interacúa de forma continua con el usuario y
otros dispositivos
Dispositivo que se adapta al cuerpo
Dispositivo que pueda ser manipulado por cualquier persona
Los materiales del dispositivo tienen un precio menor a 500
USD
Dispositivo con un tirmpo de respuesta menor a 15 segundos
Dispositivo que puede limpiarse fácilmente

Figura 6: Lista de especificaciones formuladas a partir de la lista de necesidades.

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Figura 7: Matriz comparativa de medidas y necesidades.

3.1.2.2 Descomposición funcional

Luego de realizar la lista de necesidades y de especificaciones, según la metodología utilizada, se


debe realizar una descomposición funcional del producto, por medio de la cual se da a entender a
groso modo el funcionamiento del prototipo identificando las entradas y salidas, al igual que los
procesos internos que va a realizar (Ulrich & Eppinger, 2012).

3.1.2.2.1 Caja Negra

Primero, como se observa en la Figura 8, se realiza un diagrama de caja negra, por medio del cual
se dan a conocer las entradas y salidas del sistema y se da a entender que hay una serie de procesos
internos que transforman los valores iniciales en los finales. El diagrama de caja negra de funciones
representa el flujo de material, energía y señales del producto (Ulrich & Eppinger, 2012).

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Figura 8: Diagrama de caja negra de funciones.

3.1.2.2.2 Caja Transparente

Luego de realizar el diagrama de caja negra de funciones, se plasman los diferentes procesos
internos que realiza el producto por medio del diagrama de caja transparente de funciones (Figura
9). Esta caja transparente es la división de la caja negra por subfunciones del sistema, de esta
manera se crea una descripción más específica de lo que los elementos del producto harán para
implementar la función general del producto (Ulrich & Eppinger, 2012).

Figura 9: Caja Transparente de Funciones


Para la parte de la medición de la absorbancia, se utilizó la ley de Beer-Lambert con el fin de medir
la concentración de la sustancia que hay en el recipiente por medio de la absorbancia. Como se
muestra en la ecuación (1), hay una relación directa entre la intensidad (I) que penetra en la cubeta
con respecto a la longitud de onda de absorbancia de una sustancia (λ) (Bourgeois, 1997), así, es
importante saber cuál será esta última para poder relacionarlo con la concentración de muestra que
hay en el recipiente involucrado en la medición.

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3.1.2.3 Generación y evaluación de conceptos

Se realizaron tres opciones de conceptos diferentes, en los que se tuvo en cuenta diferentes
materiales que solucionaban lo propuesto en la lista de funciones (Figura 10). Con los conceptos que
se seleccionaron se realizó una tabla con las diferentes características de cada concepto. Los
conceptos con sus respectivas descripciones se encuentran en el Anexo A y los conceptos por medio
de imágenes se encuentran en el Anexo B. Posterior a la generación de los conceptos, se procedió
a llenar la tabla de evaluación (Figura 11) en la cual, teniendo en cuenta los criterios descritos en la
lista de necesidades y unos porcentajes establecidos según el peso de la necesidad, se le dio una
valoración a cada uno de los conceptos con los componentes que tenían.

FUNCIÓN 1 Alimentar Circuito


FUNCIÓN 2 Visualizar Concentración
FUNCIÓN 3 Recolección del sudor
FUNCIÓN 4 Medición de la absorbancia
FUNCIÓN 5 Estimación del nivel de cortisol
FUNCIÓN 6 Posicionar Paciente
FUNCIÓN 7 Ubicar Sensor
FUNCIÓN 8 Liberar Paciente

Figura 10: Lista de Funciones

Necesidades Concepto 1 Concepto 2 Concepto 3


Dispositivo no invasivo 12% 5 0.6 5 0.6 5 0.6
Dispositivo vestible 10% 5 0.5 3 0.3 4 0.4
Fácil manejo 8% 5 0.4 3 0.24 4 0.32
Reproductibilidad 10% 4 0.4 4 0.4 3 0.3
Confiabilidad 12% 4 0.48 4 0.48 3 0.36
Bajo costo 8% 3 0.24 3 0.24 4 0.32
Medición continua 14% 5 0.7 5 0.7 5 0.7
Reutilizable 10% 2 0.2 3 0.3 3 0.3
Bajo riesgo de infección 8% 4 0.32 3 0.24 3 0.24
Fácil desinfección 8% 3 0.24 4 0.32 3 0.24
TOTAL 100% 4 4.08 3.7 3.82 3.7 3.78

Figura 11: Lista de evaluación de conceptos y sus calificaciones.

Como se evidencia en los resultados totales de la tabla, el concepto ganador es el número uno. Esta
solución consiste en implementar un conducto específico que lleve el sudor de alguna parte del
cuerpo a un recipiente por medio de diferencia de presiones. Luego de la recolección del sudor se
evalúa por medio del circuito adecuado controlado por un Arduino UNO y que, con un fototransistor,
mide la cantidad de luz que pasa por medio de la solución. Este circuito es alimentado por una batería
de litio, luego de que se hace la medición la información viaja al celular vía Bluetooth y se visualiza
en la pantalla del teléfono celular. Al paciente se le posiciona en una silla de manera que quede

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cómodo y no tenga que moverse por ningún motivo, a este se le pone el conducto en el antebrazo y
luego de la medición se libera el paciente.

3.1.3 Diseño de detalle

3.1.3.1 Diseño del conducto

Al ser el sudor el fluido corporal propuesto para extraer el cortisol, en el desarrollo del objetivo tres
se propone un método para la recolección de este. Este es un punto importante para la continuación
de este proyecto en un futuro.

Para la recolección del sudor se propusieron y desarrollaron cinco ideas, las cuales se probaron con
un sujeto durante la práctica de actividad física y se evaluaron de acuerdo con la cantidad de sudor
que permitía recolectar. En la Figura 12 se muestran cada una de las opciones.

Propuesta Resultado
Recolección del sudor directamente desde el cuerpo, Fue el método que entregó el mejor resultado, dado que la
deslizando un tubo "Eppendorf " por la superficie de la piel del cantidad de sudor recolectada por las autoras, por medio de
Diseño 1
sujeto, al finalizar la práctica de una actividad física de alto este fue mucho mayor a la cantidad recolectada por los otros
rendimiento. métodos.
Se propone un resorte que tiene integradas unas pequeñas
bolsas ziploc, con unos agujeros en la superficie de la bolsa
que estaría en contacto con la piel, y un algodón en su interior
que absorbe el sudor durante la práctica. La persona debe ir
presionando suavemente el resorte contra su piel, en las
partes donde están las bolsas, para ir escurriendo el sudor
El algodón ubicado dentro de las bolsas ziploc, absorbía
absorbido por el algodón hacia unos tubos de PVC que están
mucho sudor pero se quedaba con él, por lo quel al ejercer
Diseño 2 conectados a cada bolsa y van a un resorvorio común. Se
presión sobre las bolsas, la cantidad de sudor que salía hacia
tomaron muestras de sudor de tres sujetos de la forma
los conductos de PVC, era mínima.
propuesta en el diseño 1, y se sacaron valores de tensión
superficial y viscosidad que fueron utilizados para la ecuación
de balance de fuerzas de fluidos, para encontrar el mínimo
diametro que debía tener los conductos de PVC, para que la
resistencia fuera mínima, y el sudor descendiera hasta el
reservorio con fluidez.
Se propone ubicar directamente los contuctos de PVC en el Debido a que la diferencia de presiones afuera y dentro de los
cuerpo, realizando un corte en el extremo del conducto que va conductos no era suficiente para empujar el sudor, este se
Diseño 3
a estar en contacto con la piel, con el fin de mejorarlo y lograr quedaba en la boquilla del conducto, impidiendo recolectar una
una mayor captación de sudor. cantidad suficiente de sudor.
Se basa en el principio de funcionamiento de una toalla
higiénica femenina, donde la primera capa permite el paso de
fluidos del exterior al interior de la toalla, pero no en sentido
La primera capa de toalla higiénica absorbía mucho sudor y
contrario. Se dispuso de esta capa, para ubicarla en el cuello
Diseño 4 después, al tratar de escurrirla, se podía concluir que la toalla
sel sujeto durante la práctica de la actividad física, con el fin de
absorbía más de lo que permitía extraer de esta.
que permitiera el paso del sudor hacia su interior, donde se iba
a recolectar en un papel film, que también servía como medio
para sujetarla al cuello del sujeto.
A pesar de que si había una mayor sudoración, en la parte del
Se envolvió el tronco y cuello del sujeto durante la práctica de
Diseño 5 cuerpo que estaba cubrida por el papel transparente, este se
la actividad física, en papel film.
quedaba con todo el sudor, y no era posible escurrirlo.

Figura 12: Propuestas de diseño de conducto

De acuerdo con lo anterior, la mejor propuesta para la recolección del sudor según los experimentos
realizados para este trabajo es la propuesta de diseño 1, donde el sudor se debe recoger después
de la práctica de la actividad física de la persona que va a donar el sudor, por medio de tubos

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“Eppendorf” que se deben deslizar por el cuerpo con el fin de captar la mayor cantidad de sudor
posible.

3.1.3.2 Caracterización (Espectro de absorción)

El tercer objetivo de este proyecto propone la medición del nivel de cortisol en un medio simulado.
Inicialmente se pensó utilizar el mismo cortisol como dicho medio, mezclándolo con un medio base
y cambiando sus concentraciones para hacer la calibración del método que se propone. Sin
embargo, por falta de recursos económicos, se descartó esta idea. Además, que, al ser considerado
como un reactivo, sólo se permite la venta del cortisol a instituciones que estén autorizadas para
adquirir este tipo de sustancias, y el tiempo de espera, en caso de conseguir una institución que
hiciera la compra, era de 3 meses.

Por lo anterior, se realizó una búsqueda sobre sustancias que se pudieran utilizar como medios
simulados, y se encontró la Hidrocortisona de Succinato Sódico, sustancia que tiene la misma
estructura del cortisol con una sal agregada en un extremo, como se evidencia en las estructuras
mostradas en las Figura 13 y Figura 14 (Zhang, Bai, & Li, n.d.), y la misma longitud de onda que el
cortisol, 245 nm (“Accelerated Stability Studies of Widely Used Pharmaceutical Substances Under
Simulated Tropical Conditions: 4. Stability experiments on degradable substances: Hydrocortisone
sodium succinate,” n.d.) lo que hace que se pueda utilizar como medio simulado, pues el método
que se propone consiste en la medición de concentración de cortisol a partir de la absorción a esa
longitud de onda.

Figura 13: Estructura química Hidrocortisona (National Library of Medicine, 2008)

Figura 14: Estructura química Cortisol (National Library of Medicine, 2008)

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Se consiguió entonces la hidrocortisona de succinato sódico marca Pfizer, que contiene 100mg/2ml
de polvo estéril para solución inyectable, es decir, que cada 2 ml al mezclarse contienen
hidrocortisona 100 mg (como succinato sódico de hidrocortisona) (Del & Farmacéutico, n.d.).

Después se prosiguió con la caracterización de la sustancia adquirida para comprobar el valor de


longitud de onda al que absorbía ,y además ver su comportamiento según la Ley de Beer-Lambert,
que expresa que la absorbancia de una solución es directamente proporcional a su concentración: a
mayor número de moléculas, mayor interacción de la luz con ellas (Córdoba, n.d.).

En primer lugar se preparó una concentración de 1 mg/ml, que se dispuso en el espectrofotómetro


UV/Vis de doble haz de marca Perkin Elmer, que tiene un rango de longitud de onda de 190-1100
nm y un rango de ancho de banda variable de 0.5 a 4 nm (PerkinElmer & Inc, n.d.),con el fin de hacer
un barrido en la escala de longitudes de onda de 200 nm – 400 nm, para obtener el pico máximo de
absorción de la hidrocortisona de succinato sódico. El pico máximo se dio a una longitud de onda de
247.5 nm (Figura 15) valor cercano al esperado (242nm), cuyo desplazamiento es común en este
tipo de dispositivos.

Una vez conocido el valor de absorbancia de esta sustancia, se prepararon seis concentraciones
diferentes que se extrajeron donde cada una se dispuso en un volumen final de 10 mL, para lo cual
fue necesario ajustar con agua desionizada el volumen inicial. Cada concentración se dispuso, y se
realizaron tres lecturas de absorbancia para cada una, para obtener posteriormente un promedio de
esta y poder realizar la gráfica de la curva que relaciona absorbancia con concentración (Figura 15),
donde se puede apreciar el comportamiento lineal de dicha relación.

Figura 15: Espectro de absorción Hidrocortisona

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Figura 16: Grafica de concentración vs. absorbancia de Hidrocortisona

De la curva que se ve en la Figura 16 se obtuvo la ecuación (2), que relaciona la concentración de


cortisol con el nivel de absorbancia.

𝑦 = 29.598 𝑥 − 0.0009 (2)

Y también se obtuvo el coeficiente de Pearson R 2, que muestra la relación lineal casi perfecta entre
los valores de concentración y absorbancia, al ser aproximadamente 1: (ecuación (3))

𝑅 2 = 0.9997 (3)

Todo el proceso realizado para la caracterización, también se realizó para obtener la relación entre
la absorbancia y concentración en un método que se puede considerar como “Gold Standard”, con
el objetivo de poder tener una referencia para probar el método que se propone en el trabajo actual.

3.1.3.3 Circuito de medición

Figura 17: Diagrama de bloques circuito

Para el circuito de medición de hidrocortisona, que relaciona la concentración con el voltaje de salida
de este, se realizó un montaje con dos partes: una para el diodo emisor de luz (LED, por sus siglas
en inglés), y otra para la adquisición y el procesamiento de la señal. El montaje se basó en el
diagrama de bloques que se encuentra en la Figura 17.

Para el circuito del LED, se diseñó un esquemático en Altium, como se evidencia en la Figura 18, en
el cual se tiene la alimentación, la resistencia de control de corriente y el LED. El diodo que se utilizó
para el montaje es de referencia VLMU35CL00-280-120, cuya hoja de datos se encuentra en el
Anexo C. Este LED tiene un espectro de emisión de luz a una longitud de onda entre 265 y 285 nm,

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teniendo su pico máximo en 278 nm (“VLMU35CL00-280-120 Vishay Semiconductors | Mouser
Colombia,” n.d.). Este fue el LED comercial que se encontró con el espectro de emisión más cercano
a la longitud de onda a la que absorbe el cortisol (Izquierdo-Hornillos et al., 2005).

Figura 18: Diseño del circuito del led.

Paralelo a esto, se realizó el diseño del circuito de adquisición y procesamiento de la señal en la


plataforma Altium, como se ve en la Figura 19. Para el diseño de este circuito se tuvo en cuenta el
fotodiodo adquirido con referencia UV GUVA-S12SD-Grove, capaz de detectar la incidencia de la
radiación ultravioleta en un espectro de longitud de onda de 200 a 400 nm (“Luz : Sensor UV GUVA-
S12SD - Grove,” n.d.), coincidiendo así, dentro del rango de emisión del LED seleccionado. La hoja
de datos de este componente se encuentra en el Anexo D. Seguido del fotodiodo se debe incluir un
amplificador de transimpedancia, con el fin de amplificar la señal y convertirla en tensión para ser
procesada por los otros componentes del circuito. El sensor adquirido para el montaje tiene incluido
este amplificador, por lo que no se incluyó dentro del diseño.

El LED se alimentó directamente con 5 voltios, mientras que el fototransistor necesita un voltaje de
3.3 V para un correcto funcionamiento, por lo que se alimentó por medio de un regulador de voltaje
MIC2920-3.3V. La salida de este regulador se conectó también a un regulador de 1.8 V (MIC5239-
1.8V) para obtener el voltaje de referencia necesario para el funcionamiento en fuente sencilla del
circuito diseñado, el cual permite disminuir el costo y el tamaño del dispositivo final. Se diseñó con
un filtro pasa bajas con frecuencia de corte de 10 Hz y dos amplificadores inversores con ganancia
15 y 2 respectivamente.

La frecuencia de corte del filtro pasa bajas se seleccionó dadas las variaciones lentas en la
concentración del cortisol. En trabajos futuros se podría investigar el comportamiento del sistema si
la frecuencia de corte se hace menor, atenuando ruidos de frecuencias mayores como el artefacto
por movimiento. Finalmente, dado que la amplitud de la salida del filtro es del orden de milivoltios,
se decidió realizar el diseño de la amplificación con dos amplificadores inversores con ganancia de
15 y 2 respectivamente, para obtener una señal de mayor amplitud, en la que los cambios sean más
evidentes. El diseño del filtro y las etapas de amplificación se muestran en las ecuaciones X y Y.

Para el filtro pasa bajas se utilizaron dos resistencias de 225 KΩ (R4 y R5), un capacitor que estaba
conectado a referencia con un valor de 50 nF (C2) y otro capacitor C1 con un valor de 0.1μF. La
amplificación de 15 se diseñó con una resistencia 10 KΩ (R2) y otra de 667Ω (R6), y para la última
amplificación con ganancia de 2 se diseñó con una resistencia 1 KΩ (R3) y una de 500 Ω (R5).

Para el diseño del circuito se utilizaron amplificadores OPA4336EA/250G4 (Figura 19). Estos
amplificadores son pequeños, tienen una alta impedancia de entrada, buena respuesta ante el ruido,
son de bajo consumo de corriente y de alimentación sencilla, haciéndolos ideales para el desarrollo
de sistemas vestibles (referencia de la hoja de datos). Como se mencionó previamente, se utilizaron

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dos reguladores de tensión en serie para la obtención de los voltajes necesarios para el
funcionamiento correcto del sistema. El diagrama esquemático de la conexión de estos reguladores
se muestra en la Figura 20.

Luego de diseñados los circuitos de control del LED y de procesamiento de la señal, se desarrollaron
las tarjetas de circuito impreso (PCB, por sus siglas en inglés), para la construcción del dispositivo,
que se muestran en las Figura 21 y Figura 22. Estas PCB fueron luego fabricadas por la empresa
Colcircuitos, y ensambladas en el Laboratorio de Bioinstrumentación y Procesamiento de Señales
de la Universidad EIA.

Figura 19: Circuito de adquisición y procesamiento de la señal.

Figura 20: Circuito reguladores.

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Figura 21: PCB circuito del led.

Figura 22: PCB circuito de adquisición y procesamiento.

3.1.3.4 Calibración

Para realizar la calibración del dispositivo propuesto, se realizó nuevamente una preparación de una
solución madre de 1 mg/ml, de donde se extrajeron las mismas seis concentraciones que se
utilizaron para la caracterización de la hidrocortisona de succinato sódico.

Una vez se obtuvieron las seis concentraciones, se dispusieron en la caja que se construyó con el
LED y el fototransistor, como se muestra en la Figura 23. El montaje se realizó alimentando el LED
y el fototransistor como se explicó en el numeral 3.1.3.3, ubicando la probeta de cuarzo en el molde
ubicado entre ambos componentes. La salida de la señal del fototransistor se llevó directamente al
puerto de entrada de la NI-myRIO, configurado como la entrada analógica.

En NI LabVIEW™ se desarrolló la interfaz para el usuario en el panel frontal del Main (Figura 23), y
la programación del código para almacenar los valores leídos en el diagrama de bloques del Host
(Figura 24).Es importante aclarar que la señal medida con la NI-myRIO estaba referenciada a 1.8 V,
dada la naturaleza de fuente sencilla de la señal. Por tanto, es necesario eliminar el offset de 1.8 V
para obtener la información referenciada a 0 voltios.

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Figura 23: Interfaz de comunicación con el usuario del Main

Figura 24: Código para la calibración en el diagrama de bloques del Host

Se realizaron las medidas de voltaje ejecutando el programa desarrollado en NI LabVIEW™ para las
seis concentraciones y se encontró que para 0.004, 0.008 y 0.01 (todas en mg/ml), el
comportamiento era diferente que, para las otras, pues mientras que desde la concentración de 0.015
mg/ml los valores de voltaje aumentaban, el voltaje decrecía para estas primeras tres. Esto se puede
explicar con base en el espectro de longitudes de onda del LED, que, al ser de 265 a 285 nm, no
corresponde al pico máximo de absorción de la hidrocortisona succinato sódico, lo cual puede
presentarse en el error de la lectura de concentraciones muy pequeñas por factores de sensibilidad.
Por esto, fue necesario preparar otra solución madre, pues se necesitaban más puntos entre las
concentraciones extraídas la primera vez para estudiar mejor el comportamiento y poder confirmar
la hipótesis anterior acerca de la sensibilidad. La solución madre se preparó con la misma

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concentración que la primera: 1 mg/ml, y se extrajeron las mismas seis concentraciones planteadas
inicialmente, además de obtener tres soluciones con concentraciones de 0.025, 0.035 y 0.04 (todas
en mg/ml).

Se realizó nuevamente la lectura de cada una de las concentraciones con la misma configuración,
se grabaron los datos de sus respectivas lecturas y estos se exportaron a Microsoft Excel para
calcular el promedio del voltaje de cada concentración. Una vez se obtuvieron los 9 puntos (cada
concentración con su voltaje), se graficaron poniendo en la abscisa el valor de las concentraciones
y en la ordenada, el valor de los voltajes. Se encontró que, nuevamente, los primeros tres valores de
0.004, 0.008 y 0.01 (mg/ml), tenían un comportamiento diferente al resto de los puntos, por lo que
se tomó la hipótesis sobre sensibilidad como cierta y se decidió no tomarlos en cuenta para realizar
la regresión lineal de la curva obtenida.

Finalmente, se obtuvo la gráfica correspondiente a las concentraciones de 0.015, 0.025, 0.030, 0.035
y 0.04 (todas en mg/ml), con sus respectivos valores de voltaje, que fue amplificado 30 veces en el
software (Figura 25).

Figura 25: Concentración vs. voltaje

De la curva que se ve en la Figura 25 se obtuvo una ecuación de la recta, mostrada en la ecuación


(4).

𝑦 = 0.4557𝑥 + 36.409 (4)

Y también se obtuvo el coeficiente de Pearson R 2, que muestra la relación lineal entre los valores de
concentración y absorbancia, que también es muy cercana a 1 (ecuación (5)).

𝑅2 = 0.9278 (5)

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3.1.3.5 Prototipo

3.1.3.5.1 Diseño

Para la integración de todos los componentes del circuito, se diseñó una caja en el software Solid
Edge que pudiese fabricarse en la máquina láser de la Universidad EIA, en acrílico. La caja contiene
dos compartimientos: un primer espacio, pintado de negro completamente para atenuar la luz
ambiente y evitar el ruido generada por ésta en la medición, que contiene el sensor, el LED y un
espacio para poner la muestra con los componentes pertinentes; y otro espacio en donde se ubica
la PCB con el circuito de procesamiento. Este diseño se muestra en la Figura 26, en donde se ven
claramente ambos espacios, y los planos de este se encuentran en el Anexo F.

En el espacio donde se ubican el LED y el fototransistor con la muestra, se tuvo en cuenta un rango
de distancias entre las que se podían mover las placas que sostenían los componentes, con el fin
de poder ajusta la distancia a la que se encontraran en el caso en que se necesitara. Dicho rango es
de 13 mm para cada placa.

Figura 26: Diseño caja

3.1.3.5.2 Construcción

Luego de realizar el diseño en Solid Edge, se procedió a organizar los planos que serían cortados
en acrílico de 3 mm de espesor por la máquina láser de la Universidad EIA. Una vez cortado, se
pegaron las partes con acetona, que es especial para el pegado de piezas con acrílico, y se pintó
con aerosol negro el espacio en donde iría la muestra con los componentes. Esta construcción se
muestra en las Figura 27,Figura 28 yFigura 29.

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compromete a la EIA.
Figura 27: Vista superior de caja

Figura 28: Vista lateral de caja

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Figura 29: Vista superior de caja sin tapa

3.2 DISCUSIÓN DE RESULTADO

3.2.1 Diseño de concepto


La opción seleccionada para realizar el diseño de concepto del prototipo fue la primera, la cual incluía
una alimentación por medio de batería de litio, mostrar la interfaz del usuario en la pantalla de un
celular, un conducto específico para la recolección del sudor y realizar la medición con un
fototransistor por medio de una programación en un Arduino UNO (Anexo A).Sin embargo, a medida
que se avanzó en el desarrollo del prototipo, se realizaron varias modificaciones a este concepto
que, aunque diferentes a las iniciales, seguían cumpliendo los requisitos expuestos en los objetivos
del proyecto.

Estas modificaciones incluían la sustitución de la alimentación por medio de la batería de litio a una
alimentación directa de una fuente de corriente. Esto se debió a que no se contaba con baterías de
3.7 voltios, que era la alimentación requerida para el circuito diseñado. Sin embargo, el prototipo
diseñado puede ser alimentado con una batería de litio sin ninguna restricción, una vez se encuentre
disponible el valor específico de esta. También se sustituyó la programación por medio de Arduino
UNO por el uso del software y hardware de NI-MyRio, debido a que este último tiene una mayor
resolución a la hora de medir valores analógicos de ordenes muy pequeños (milivoltios).

Otra modificación que se realizó fue el del conducto específico, ya que se probó el que se planteó
en el diseño de concepto y se evidenció que la recolección del sudor no era efectiva por este medio,
lo que se explica en la Figura 12, junto con las demás propuestas y sus resultados correspondientes
frente este tema. En futuros trabajos, se puede plantear el diseño y prueba de diversos conductos

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que permitan la recolección constante de sudor, con el fin de mejorar este aspecto del diseño
propuesto en este proyecto.

3.2.2 Circuito
Luego de recibir las PCB por parte de Colcircuitos, se procedió a realizar el montaje con los
componentes definidos en el diseño, probando cada etapa antes de montar la siguiente. Una vez
probado el filtro, y comprobado que su funcionamiento era como se esperaba según el diseño
establecido, se procedió a montar la primera amplificación con ganancia de 10. Previo a esto se
verificó que, efectivamente, la ganancia era de 30 por el orden en el que salía el voltaje del filtro
(milivoltios) y en lo que se quería que estuviera (voltios).

Ambas etapas de amplificación se probaron, encontrando resultados erróneos en la segunda etapa.


Sin embargo, la NI-myRIO, que cuenta con una resolución de 12 bits (National Instruments, 2018)
permite la obtención de los cambios previos a la amplificación, por lo que esta señal fue usada para
la calibración y fue amplificada por medio de software. Como trabajos futuros, se debe mejorar este
aspecto para permitir que la señal medida sea adquirida por sistemas con menor resolución y la
medición pueda realizarse sin problema.

Una vez se realizaron las mezclas de sustancias con las concentraciones que se usaron para la
calibración, se dispusieron en la cubeta de cuarzo mostrada en el diseño propuesto para su medición.
En primer lugar, se realizó conectando el fototransistor con la PCB, y se llevó la señal de salida del
filtro a un puerto de entrada analógica de la NI-myRIO para posteriormente, al ejecutar el programa,
observar los valores de voltaje leídos, que se compararon con una segunda medición que se realizó
llevando directamente la salida del fototransistor al puerto de la NI-myRIO. Se concluyó que, por el
orden del voltaje de la señal de salida y por la estabilidad de la señal, la calibración se podía hacer
directamente de esta manera. Sin embargo, el filtro es esencial para el funcionamiento del sistema
de manera continua, para eliminar ruidos no deseados en la señal obtenida. Una vez más, es
importante aclarar que en futuros trabajos se recomienda mejorar la amplificación de la señal para
permitir que el sistema sea vestible.

De esta forma, la PCB diseñada no fue usada para las pruebas que se realizaron, y se hizo la
amplificación de la señal desde el software, utilizando el mismo valor propuesto para el hardware.

3.2.3 Calibración
Los resultados que se obtuvieron se acercaron mucho al comportamiento esperado según la relación
de concentración y absorbancia, que en este caso fue la relación de concentración y voltaje, pues a
medida que se aumentaba el valor de la concentración, también lo hacía el voltaje, lo cual se
evidencia en la Figura 25. De esta manera, se cumplieron las expectativas que se tenían, en la
medida que el comportamiento casi lineal de la calibración expone el buen funcionamiento del sensor
frente a muestras con diferentes concentraciones de hidrocortisona succinato sódico.

La curva que se obtuvo (Figura 25) fue comparada con la curva obtenida en el espectrofotómetro
UV/Vis de doble haz (Figura 15), debido a que en la literatura encontrada no se evidencia información
sobre experimentos similares con los que se pueda realizar una comparación.

Para los experimentos que se realizaron, es importante resaltar que hay varias variables por las
cuales la curva no es completamente lineal como se esperaba en un inicio. Por un lado, el led
utilizado no tiene su pico máximo en la misma longitud de onda en la que lo tiene el medio simulado,
que en este caso era en 247.5 nm, lo cual puede presentar falta de precisión en las lecturas. Además,

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el fototransistor que se utilizó no tenía suficiente información en su hoja de datos, que permitiera
saber si la salida analógica en milivoltios representaba la absorbancia o la transmitancia de este. Si
se contará con un led ultravioleta con un rango de emisión más cercano al de la partícula de interés
(hidrocortisona succinato sódica), y se pudiera conocer o realizar una relación del valor de voltaje de
salida del fototransistor con variables como la absorbancia o transmitancia, se podrían obtener
mejores resultados en la calibración y en mediciones posteriores del dispositivo propuesto.

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4 CONCLUSIONES Y CONSIDERACIONES FINALES

Se desarrollaron en su totalidad las actividades planteadas en el cronograma del proyecto, con un


buen porcentaje de éxito a pesar de las complicaciones que se tuvieron en el camino. El trabajo en
equipo y la responsabilidad de las estudiantes ayudó a que se presentaran los resultados a tiempo
y de acuerdo con lo que se esperaba.

Gracias a la extensa búsqueda en diferentes fuentes bibliográficas, fue posible identificar más
características del cortisol importantes a la hora de medir su concentración. A su vez, fue posible
conocer un gran número de métodos actuales que se usan para medir variables relacionadas con
las hormonas que no son invasivos, y pueden ser realizados en el domicilio del paciente, sin la
necesidad de acudir al hospital o someterse a exámenes de sangre. Además, aunque fue necesario
cambiar el enfoque de búsqueda y centrarse en tres fuentes del cuerpo de donde fuera posible
extraer el cortisol, la búsqueda inicial sirvió para aclarar muchos aspectos que no se tenían claros,
como algunos factores del cuerpo que afectan la concentración, la manera de secreción de la
hormona en el cuerpo, el tipo de cortisol en plasma y en el resto de las fuentes encontradas, y los
diferentes resultados y análisis que se obtienen dependiendo de la fuente que se utilice para extraer
el cortisol.

De las posibles fuentes del cuerpo encontradas en la bibliografía para extraer el cortisol y medir su
concentración, se encontró que el sudor era la mejor opción, debido a que es la única fuente, de
acuerdo con lo investigado, que permite el logro del objetivo principal expuesto: la medición de la
concentración de cortisol en tiempo continuo.

El proyecto se desarrolló entonces teniendo en cuenta que, en un futuro, el método propuesto se


debe realizar directamente en muestras de sudor recolectadas de personas en tiempo real. Por el
momento, se limitó el alcance a realizar las pruebas en un medio simulado, para lo que se utilizó
hidrocortisona succinato sódico, que tiene una estructura química y una respuesta a la luz similar al
cortisol, el cual no fue posible utilizar para estas pruebas debido a su elevado costo y el tiempo de
espera que requería su importación.

Las pruebas realizadas con la hidrocortisona succinato sódico y el método que se propone se
consideran exitosas por el comportamiento lineal que muestra la relación proporcional existente entre
la concentración y el voltaje, pues a mayor concentración, mayor fue el valor del voltaje obtenido del
fototransistor.

El acompañamiento de diferentes personas especializadas ayudó a que el proyecto se presentara


de la manera más completa posible, logrando la totalidad de los objetivos planteados al inicio de
este. Se desarrolló un prototipo funcional que permitió evaluar la concentración de hidrocortisona
succinato sódico, que en un futuro podrá servir para realizar mediciones continuas en otros trabajos
que requieren este tipo de medición.

De las pruebas realizadas, se propone que en proyectos futuros se desarrollen mejoras del hardware,
específicamente de la PCB que, al realizar un filtro y una amplificación desde un circuito físico, antes
de llevar la señal de salida a un software, podría presentar una mejor respuesta, disminuyendo el
ruido y presentando una curva más lineal. Además, se recomienda realizar el análisis de más
métodos para la medición de concentraciones en líquidos diferentes al descrito por la ley de Beer
Lambert, con el fin de contar con diferentes opciones a la hora de realizar los experimentos y poder
comparar con cuál podría obtenerse una mejor respuesta.

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compromete a la EIA.
ANEXOS

Anexo A: Matriz de conceptos


Solución 1 Solución 2 Solución 3
Bateria de Litio Bateria de 9 V Batería de Óxido de Plata
Compuestas por un conjunto de células electrolíticas utilizadas
para suministrar una provisión de corriente eléctrica continua o Consta de dos recipientes que contienen el metal negativo de
Es una pila recargable con dos o más celdas donde están directa. Todas las células tienen dos electrodos sumergidos en zinc (ánodo) y el material positivo de óxiddo de plata (cátodo),
separados los iones de litio, cuando funciona en modo de un electrolíto, que es una sustancia líquida que conduce y ambos actúa como polos o electrodos. Un separador (malla
Función 1

descarga los iones de una y otra celda se combinan electricidad gracias a su disociación en elevado número de aislante) interno evita que ambos materiales entren en contacto
químicamente para formar el elemento estable. Cuando se ha iones. Cuando dos electrodos apropiados se sumergen en un pero permite el intercambio de iones entre el ánodo y el
agotado la baterpia es porque todos los iones están en su electrolito, un exceso de electrones aparece en un electrodo cátodo. El electrolito perimte la conexión eléctrica entre el
estado fundamental y no quedan más para seguir combinándose (negativo) y una deficiencia en el otro (positivo), la diferencia ánodo y el cátodo sin que exista un contacto directo entre
(“Baterías de Litio…Que es? – Baterias de litio,” n.d.). de potencial eleéctrico entre los dos electrodos origina el flujo ambos. El principio de funcionamiento es por medio de
de una corriente eléctrica en un circuito externo que vincula a electrolisis (“Como funcionan las pilas de óxido de plata,” n.d.).
los dos electrodos (“afinidad eléctrica,” n.d.).
Pantalla LCD Externa Pantalla de Celular Pantalla de Computador
Ella misma es el hardware de entrada y de salida, es decir, Se basa en el concepto del tubo de rayos catódicos, en el cual,
Pantalla plana basada en el uso de una sustancia líquida mientras que un ordenador necesita el teclado y el ratón para un haz de electrones estimula periódicamente una pantalla
Función 2

atrapada entre dos placas de vidrio, haciendo que, al aplicar una introducir la información y el monitor para visualizarla, la recubierta internamente con fósforo, de tal forma que se
corriente eléctrica a una zona específica, esta se vuelva opaca y tecnología táctil permite hacer ambas operaciones a la vez. Se iluminan los puntos que conformarán los caracteres sobre dicha
contrate con la iluminación CCFL trasera (“Pantalla LCD - pantalla produce una variación en el campo eléctrico que se encuenta pantalla. En los monitores a color, la pantalla está revestida
de cristal líquido , características y capacidades .:: sobre una pantalla táctil, se podrá detectar fácilmente en qué internamente con una capa de trifósfor rojo, verde y azul, que
www.informaticamoderna.com ::.,” n.d.). lugar se ha producido esta variación (“Pantalla táctil: cómo es estimulado por tres cañones de electrones (“Monitor de
funciona y qué tipos existen,” n.d.). computadora - EcuRed,” n.d.).
Conducto específico Algodón/Gasa Conducto Genérico

Se coloca una gasa o un algodón en el espacio en el que se


Función 3

Por medio de un conducto que va desde el cuello del paciente deposita el medicamente en los electrodos de iontoforesis y se Se usa un conducto que se encuentre en el mercado para estraer
hasta un recipiente que almacena el sudor que extrae de la piel usa de manera directa para recoectar el sudor. Luego de que el sudor de la piel y de esta manera llevarlo a un recipiente para
por medio de diferencia de presiones. entra en contacto con el sudor se lleva a un repositorio que esté su almacenamiento.
empacado al vacio para evitar la evaporación de la muestra.

Fototransistor Fotodiodo Tubos Catódicos


Tubos de vaío de vidrio dentro de los cuales un cañón de
electrodos emite una corriente de electrones guiada por un
Dispositivo sensible a la luz visible e inclusi a la infrarroja,
campo eléctrico hacia una pantalla cubierta de pequeños
Función 4

Transistorel cual es activado por la incidencia de la luz en la resulta ser un diodo con sensibilidad a la luz. Vienen equipados
elementos catódicos, un cañón electrónico produce y confina un
región de base, generando portadores en ella, el mismo tiene con un lente que concentra la cantidad de luz que lo incide, por
haz de electrones que envía hacia una pantalla recubierya de
una ventana que permite la entrada de luz (“Fototransistor - lo tanto su reacción a la iluminación es más evidente (“El
mateial luminiscente, de forma que cuando los electrones
EcuRed,” n.d.). fotodiodo ¿que es y para que sirve? - Ingeniería Mecafenix,”
chocan contra ella emite luz cuya intesidad o brillo, es
n.d.).
proporcional a la cantidad y velocidad de los electrones
incidentes (“Tubo de rayos catódicos - EcuRed,” n.d.).
Arduino NI myRIO Raspberry
Dispositivos Embebido para Estudiantes cuenta con E/S en
Plataforma de creación de electrónica de código abierto, la cual Placa en la que se aloja un chip Broadcom BCM2835 con
Función 5

ambos lados del dispositivo en forma de conectores MXP y SMP.


está basado en hardware y software libre, flexible y fácil de procesador ARM hasta 1 GHz de velocidad, GPU VideoCore IV y
Incluye entradas analógicas, salidas analógicas, líneas de E/S
utilizar para los creadores y desarrolladores. Permite crear hasta 512 Mbytes de memoria RAM (“¿Qué es Raspberry Pi,
digitales, LEDs, un push-button, un acelerómetro interno, un
diferentes tipos de micro ordenadores de una sola placa (“Qué dónde comprarla y cómo usarla? | Tecnología -
FPGA Xilinx y un procesador dual-core ARM Cortex-A9 (National
es Arduino, cómo funciona y qué puedes hacer con uno,” n.d.). ComputerHoy.com,” n.d.).
Instruments, n.d)
Sentar al paciente en una silla Acostar al paciente en una cama Ubicar al paciente de pie
Función 7

Se posiciona al paciente en una silla en el que el paciente quede Acostar al paciente en una cama o camilla en el que pueda Ubicar al paciente de pie de tan forma que no deba movilizarse
cómodo y no tenga que moverse mucho. quedarse quieto y quede cómodo. y quede cómodo.
Antebrazo Pierna Abdomen
Función 9 Función 8

Ubicar los electrodos con los sensores en el antebrazo del brazo Ubicar los electrodos con los sensores en la pierna izquierda del Ubicar los electrodos con los sensores en la parte superior del
derecho del paciente. paciente. abdomen del paciente.
Mantener al paciente en la posición Cambiar al paciente de posición Liberar al paciente
Retirar los electrodos del paciente y dejarlo en la posición en la Retirar los electrodos del paciente y cambiarlo de posición a una Retirar los electrodos del paciente, liberarlo de su posición y
que se encontraba. más cómoda. permitirle movimientos libres.

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Anexo B: Matriz morfológica de imágenes

Solución 1 Solución 2 Solución 3


Bateria de Litio Bateria de 9 V Batería de Óxido de Plata
https://www.tutiendaenergetica.es/baterias- https://www.amazon.com.mx/Volteck-ZI-9V-Pila- https://www.amazon.es/Varta-381101111-Oxido-
patinete-electrico-ion-litio Zinc-Carb%C3%B3n/dp/B0128XFG1E Plata-Plateada/dp/B000EGWODQ
Función 1

Pantalla de Celular Pantalla LCD Externa Pantalla de Computador


https://www.tiendasjumbo.co/celular-huawei-p20-- https://shop.master.com.mx/product/detail?id=759 https://listado.mercadolibre.cl/computacion/pantall
pantalla-5-8---128gb--rosado---audifonos---tablet/p 8 a-de-pc#
Función 2

Conducto específico Algodón/Gasa Conducto Genérico


https://www.dhmaterialmedico.com/tubo-plastico-
Diseño de conducto realizado en el Anexo G https://www.crianzanatural.com/prod/prod79.html
oxigeno
Función 3

Fototransistor Fotodiodo Tubos Catódicos


https://www.ingmecafenix.com/automatizacion/fot https://www.microsiervos.com/archivo/gadgets/rel
https://www.ecured.cu/Fototransistor
odiodo/ ojes-de-tubos-rayos-catodicos.html
Función 4

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os/tarjetas_desarrollo/microcontroladores/microco
board-retail.html model-a-plus
ntrolador-atmega328p-atmel/

Función 5

Sentar al paciente en una silla Acostar al paciente en una cama Ubicar al paciente de pie
https://es.123rf.com/photo_85277901_hombre- https://www.istockphoto.com/es/vector/mujer-
sentado-en-la-silla-en-vista-lateral-del-traje- acostada-en-la-cama-de-hospital-ilustraci%C3%B3n- https://www.shutterstock.com/es/search/persona+
hombre-en-un-trabajo-sin-fin-los-siete-d%C3%ADas- de-personajes-de-dibujos-animados-gm903440904- parada?image_type=photo
de-l.html 249172413
Función 7

Antebrazo Pierna Abdomen


https://medicablogs.diariomedico.com/laboratorio/ https://www.vix.com/es/imj/salud/4853/automasaj
https://www.shutterstock.com/es/search/antebrazo
2008/10/28/pierna/ e-para-reducir-el-abdomen
Función 8

Liberar al paciente Cambiar al paciente de posición Mantener al paciente en la posición


https://www.istockphoto.com/es/vector/mujer- https://es.123rf.com/photo_85277901_hombre-
https://www.ikea.com/es/es/p/ekedalen-silla- acostada-en-la-cama-de-hospital-ilustraci%C3%B3n- sentado-en-la-silla-en-vista-lateral-del-traje-
abedul-orrsta-gris-claro-00341023/ de-personajes-de-dibujos-animados-gm903440904- hombre-en-un-trabajo-sin-fin-los-siete-d%C3%ADas-
249172413 de-l.html
Función 9

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Anexo C: Datasheet Led

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Anexo D: Datasheet Fototransistor

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Anexo E: Diagrama de Bloques y Panel Frontal de Main y Host

- Diagrama de bloques del Main:

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- Panel Frontal del Main:

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- Diagrama de Bloques del Host:

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- Panel Frontal del Host:

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Anexo F: Planos Caja

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Anexo G: Diseño del conducto

Para el diseño del conducto se realizó en primer lugar un estudio de tensión superficial y viscosidad
de muestras de sudor de 3 sujetos diferentes. Las muestras de cada sujeto fueron recolectadas
después de una hora de actividad física de alto rendimiento en tubos “Eppendorf” de 2 ml. Para la
recolección del sudor, el sujeto deslizo el tubo de “Eppendorf” sobre su piel en aquellas regiones
donde apareció más sudor.

Una vez obtenidas las muestras, se llevaron al Laboratorio de Biomateriales, en donde se midió la
tensión superficial, la viscosidad y la densidad de cada muestra.

La medición de la tensión superficial se realizó en el equipo INSTRON 3345 usando una celda de
carga de 10  0,01 N. Cada muestra fue depositada en un beaker de 6 ml que se ubicaba en el
portaobjetos del equipo para realizar el ensayo de tensión. Se tomaron 10 ensayos para cada
muestra, donde los parámetros del software eran:

Velocidad: 10 mm/min

Fin del ensayo: fuerza <40% carga pico

Medio: agua (mayor componente del sudor).

Material: PVC

Se obtuvieron las siguientes gráficas para cada muestra:

Sujeto 1:

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Sujeto 2:

Sujeto 3:

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En estos gráficos se muestra la carga debida a la tensión superficial a medida que la manguera de
PVC asciende a velocidad constante. El registro de la tensión superficial se realiza con la carga
máxima en cada prueba.

El material con el que se realizó la prueba de tensión superficial fue con mangueras de PVC
siliconadas, porque muchos de los diseños de catéteres y mangueras utilizados para aplicaciones
médicas como la venoclisis, usan este material, lo que además facilita el diseño actual.

Después se paso a medir la masa y el volumen de cada muestra para obtener la densidad. Y por
último se midió la viscosidad por medio de un viscosímetro Marca CANNON SIZE 150 con una
constante de 0,032 mm2/s2 en el cual se tomaron tres variables de tiempo diferentes para cada
sujeto.

Todos los datos se llevaron a una tabla de Excel, en donde se calcularon promedios de tensión
superficial para las 10 mediciones de cada sujeto, que a su vez se promediaron entre si obteniendo
un promedio total, que se uso posteriormente para dividir el promedio de cada sujeto sobre este para
poder determinar si se podían tomar a los sujetos como una población y no como muestras
independientes, a lo que se llegó debido a que la diferencia entre estos valores fue menor al 10%
(valor escogido por criterio propio y experiencia). También se sacaron 3 valores para la viscosidad
(uno por cada tiempo) de la muestra de cada sujeto, para lo cual se realizó el mismo proceso que
para la tensión superficial, y se encontró que la diferencia entre los valores de viscosidad de cada
sujeto también eran menores al 10%, por lo que se pudo tomar a los sujetos como una población.

Una vez obtenidos los valores de tensión superficial y viscosidad se prosiguió con el diseño del
conducto, para lo cual se establecieron 3 problemáticas para solucionar: captación del sudor,
conducción y almacenamiento.

Captación de sudor:

Lo que se propone es un resorte que va ubicado en el cuello o el pecho del usuario al cual se le va
a tomar la muestra de sudor durante la práctica de una actividad física. El resorte tiene integradas
unas pequeñas bolsas ziploc (área), con unos agujeros en la superficie de contacto con la piel y un
algodón en su interior que va a ser el que absorbe el sudor durante la actividad. La persona debe ir
presionando suavemente el resorte contra su piel en las partes que están ubicadas las bolsas para
ir escurriendo el sudor del algodón hacia unos tubos de PVC que están conectados a cada bolsa.

Conducción:

Una vez la persona presiona las bolsas, el sudor es trasportado hasta la riñonera de almacenamiento
por medio de una serie de mangueras.

Almacenamiento:

La riñonera contiene un recipiente en el cual es almacenado el sudor hasta llevarlo a la prueba de


medición.

Para el diseño, primero se realizó un cálculo del radio que debía tener el conducto para que tanto la
tensión superficial, como la viscosidad fueran mínimas y se pudiera optimizar al máximo la
recolección del sudor, desde la elección del material del conducto y sus características. Se realizó
un balance entre las fuerzas viscosas, de tensión superficial y las de presión hidrostática, suponiendo
que el fluido desciende a velocidad constante, que se solucionó por el método de Newton, obteniendo

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valores convergentes del radio entre 0.49 y 0.5 mm, lo que permitió elegir materiales para un
conducto comercial de un radio mucho mayor a este valor.

A continuación, se muestran todos los datos que se tomaron de la muestra se sudor de cada sujeto:

1. Tabla de tensión superficial para cada sujeto:

2. Tabla con los tiempos tomados con el viscosímetro con la muestra de cada sujeto:

3. Valor de densidad de la muestra de sudor, se tomo un promedio para las 3 muestres


correspondientes a cada uno de los sujetos y se obtuvo un valor de:

4. Tabla de viscosidad para cada sujeto (son tres valores, porque se calculó una viscosidad para
cada tiempo):

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𝑉𝑖𝑠𝑐𝑜𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 (𝜎) = 𝑡 ∗  ∗ 𝜅

Donde, t es tiempo,  es densidad y 𝜅 es la constante del viscosímetro

5. Desviación de promedios de tensión superficial y viscosidad de los tres sujetos:

6. Promedios totales de tensión superficial y viscosidad:

7. Normalización de los promedios de tensión superficial para calcular el porcentaje de diferencia


entre estos:

8. Normalización de los promedios de viscosidad para calcular el porcentaje de diferencia entre


estos:

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9. Variables necesarias para la ecuación de balance de fuerzas:

L y H, fueron medidas que se tomaron de una de las autoras para el diseño.

10. Ecuaciones para utilizar en el método de Newton:

a. Ecuación resultante del balance de fuerzas:

5
𝑓(𝑟) = (𝑃 + 𝜌𝑔ℎ)𝑟 4 − 2 𝜎𝑟 3 − 4𝜇𝑙( )
27

b. Derivada de ecuación resultante del balance de fuerzas:

𝑓′(𝑟) = 4(𝑃 + 𝜌𝑔ℎ)𝑟 3 − 6𝜎𝑟 2

c. Ecuación del método de Newton:

𝑓(𝑟𝑛)
𝑟 ( 𝑛 + 1) = 𝑟𝑛 −
𝑓′(𝑟𝑛)

11. Tabla de solución del método de Newton:

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Los valores de r, convergen entre 0.5 y 0.49, por lo que se toma el valor de 0.5 mm como el mínimo
radio aceptable para un conducto óptimo para la aplicación de recolección de sudor, con el fin de
reducir la resistencia dentro de este y lograr una mayor captación de sudor.

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