UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE QUÍMICA. LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA I.

GUILLERMO HERNANDEZ ANA KAREN GRUPO: 24 Fecha: 08 de abril 2020

Práctica No 6. CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

Resumen: En esta práctica se tiene como donde interaccionan electrostáticamente los

propósito conocer y aplicar la técnica de solutos con el adsorbente de acuerdo con su
cromatografía en capa fina, sus características y polaridad la interacción es fuerte o débil.
los factores que intervienen en ella como la
polaridad de las sustancias (eluyente y Absorbente
adsorbente) y aplicar esta técnica como criterio La acción del absorbente se basa en la
de pureza e identificación de las sustancias. atracción intermolecular o electrostática tal como
atracción dipolo-dipolo o de puentes de
Introducción: Un método de separación de hidrógeno. Diferentes tipos de absorbente atraen
mezclas que la química orgánica tiene disponible distintos tipos de moléculas. Un absorbente
es la cromatografía, la cual se define como la altamente polar atrae moléculas fuertemente
separación de una mezcla de dos o más polares, pero no presenta gran atracción por
compuestos por distribución entre dos fases, una moléculas no polares, como hidrocarburos.
de las cuales es estacionaria y la otra móvil.
Varios tipos de cromatografías son posibles Eluyente
dependiendo de la naturaleza de las dos fases El eluyente corresponde a la fase móvil de la
involucradas: sólido-líquido (capa fina, papel o cromatografía, siendo por general, disolventes de
columna), líquido-líquido y gases-líquido (fase o mezclas de estos, dependiendo de la muestra
vapor). separar. Dentro de los eluyentes más utilizados
podemos mencionar: éter de petróleo,
Adsorción ciclohexano tetracloruro de carbono, benceno,
La adsorción es un fenómeno de superficie, por cloroformo, cloruro de metileno, dietiléter acetato
lo tanto, es físico, en el cual diversas sustancias de etilo acetona piridina, etanol, metanol agua y
son atrapadas en la superficie de un material, es ácido acético estos van en el orden de
decir, se acumulan en una determinada superficie incrementar la polaridad y poder disolver hacia
interfacial, formándose una película del material grupos funcionales polares siendo el más fuerte
retenido en la superficie del cuerpo adsorbente. el ácido acético.
Así pues, en la cromatografía de adsorción, se
aprovecha esta propiedad del analito que Cromatografía en capa fina
queremos separar, lo cual origina que el analito La cromatografía en capa fina es una técnica
se retenga en la fase estacionaria, es decir, se para la reparación rápida y análisis cualitativo de
adsorba, y los demás componentes se eliminen. pequeñas cantidades de muestra. Este tipo de
También se conoce como separación solido- cromatografía se fundamente en la absorción que
liquido. es una técnica de separación por porción sólido-
líquido, fase móvil (eluyente) y fase solida
Básicamente, el método depende de la (absorbente), llevándose a cabo la elución en
adsorción este es un fenómeno de superficie en forma ascendente (por capilaridad).
 Reveladores
El adsorbente se encuentra adherido a una Una vez que se llevó a cabo la separación por
superficie lisa formando una capa delgada cromatografía en capa fina para identificar cada
aproximadamente de 100 μm de espesor en la uno de los compuestos, se requiere revelar las
cual una pequeña cantidad de mezcla es placas.
adsorbida para su separación.
La muestra se separa y se aplica con una El método más utilizado de revelado es a base
micropipeta cerca de la base de la placa. del uso de yodo, éste forma complejos coloridos
que van de café a amarillos, llevándose a cabo en
una cámara de revelado, en la cual están
contenidos los cristales de yodo; una vez eludida
la placa se deja secar y se introduce en esta
cámara hasta que aparecen las manchas
definidas, donde se encuentra cada compuesto
separado.

El segundo método más utilizado es con luz

ultravioleta aprovechando que muchos
compuestos presentan fluorescencia bajo luz UV.
Figura 1. a) aplicación de la muestra en la cromatoplaca, b)
número de aplicaciones. Frente de referencia (R f)
A la relación de la distancia que recorre la
sustancia en la placa y la distancia que recorre el
Una vez aplicada la muestra se introduce en eluyente a partir del punto de aplicación se le
una cámara de elusión, la cual contiene el conoce como frente de referencia, R f, y se
eluyente seleccionado para llevar a cabo la expresar como una fracción decimal.
separación en una cantidad tal que no rebase el
punto de aplicación de la muestra. Cuando la - Este valor se puede usar para seleccionar
muestra ha terminado de eluir, la placa se retira el eluyente o la mezcla de eluyentes
de la cámara de elusión y se deja secar ideales para la separación.
procediéndose a revelar la placa.

𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑞𝑢𝑒 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒 𝑙𝑎 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎

𝑅𝑓=
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑞𝑢𝑒 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑒 𝑒𝑙 𝑒𝑙𝑢𝑦𝑒𝑛𝑡𝑒

El valor de frente de referencia es de gran

utilidad cuando se desea seleccionar el eluyente
adecuado en una separación de compuestos, por
lo que podemos decir que para los siguientes
valores de R f la información que obtendremos
es:

• Si el R f < 0.5 el eluyente es de muy baja

polaridad para la separación.
• Si el R f = 0.5 es el ideal para la separación. a. Aplicación de disolución muy concentrada
• Si el R f > 0.5 el eluyente es de muy alta polaridad al tratar de identificar una sustancia de una
para la separación. mezcla.
Puede ocurrir que no se distingan las
Aplicaciones fases.
Entre las principales aplicaciones de la
cromatografía en capa fina podemos mencionar b. Emplear gran cantidad de eluyente en la
que: es una técnica eficiente para establecer si cámara de cromatografía.
dos compuestos son idénticos, determinar el Puede que las sustancias se disuelvan en
número de componentes de una mezcla, el eluyente y no se lleve a cabo la fase
determinar el eluyente adecuado para una estacionaria.
separación de cromatografía en columna, seguir
el proceso de una reacción y como criterio de c. Aplicar una disolución muy diluida al
pureza. determinar la pureza de una sustancia. Puede
ocurrir que casi no desplace a las sustancias
desde el punto de aplicación.
CUESTIONARIO
4. ¿Qué te indicaría una mancha alargada en una
1. ¿Por qué se separan los componentes de una cromatoplaca?
mezcla en cromatografía en capa fina usando
sílica gel como adsorbente? Que uno o varios de los componentes de la
mezcla tiene afinidad respecto al eluyente.
Porque el gel tiene las características de ser
poroso y absorbente, así que puede diferenciar la 5. ¿Cuáles son los factores de los que depende
adsorción de diferentes moléculas, actuando el valor del Rf?
como un adsorbente selectivo en procesos de
cromatografía. Del eluyente utilizado ya que de este dependerá
la distancia que se recorra durante la
2. ¿Por qué se dice que la cromatografía en capa cromatografía.
fina es un criterio parcial y no total de
identificación?
Bibliografía:
Porque en algunas ocasiones los componentes
de la mezcla presentan una polaridad parecida, I. Zárraga, G,. et, al., 2ª edición (2009).
por lo que es complicado notar la diferencia entre Química Orgánica. Experimentos con un
éstos para su identificación. enfoque ecológico. UNAM. pp:100-104.

3. ¿Qué esperarías de las siguientes acciones al II. s.a. (2007). Técnicas Cromatográficas.
realizar cromatoplacas? Facultad de Química. Química Analítica
Instrumental II. México: Universidad
Nacional Autónoma de México.