Cromatografia en Capa Fina
Cromatografia en Capa Fina
Cromatografia en Capa Fina
Primavera 2022
I. CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA
Objetivo
Aplicar la técnica cromatografía en capa fina CCF para el análisis de productos químicos.
Utilizar el equilibrio de partición y adsorción en técnicas cromatográficas para separar dos
compuestos diferentes.
Introduccion
La Cromatografía en capa fina (Thin layer chromatography, TLC) es un método muy valioso
utilizado en química y bioquímica para la separación y análisis de una amplia variedad
mezclas de moleculares. Las TLC’s se pueden utilizar para separar mezclas de iones
inorgánicos, moléculas orgánicas y compuestos biorgánicos tales como pigmentos, lípidos,
aminoácidos, nucleótidos y azúcares. La placa de la TLC consiste típicamente en una gruesa
capa de 0,1 mm de material adsorbente unido a una capa o soporte de plástico. El adsorbente
se compone de muchas placas microscópicas. Estas superficies proporcionan un área grande
para la separación cromatográfica. Después se aplica un pequeño volumen de solución de
muestra a la superficie adsorbente y se deja secar, la placa se coloca en un vaso de
precipitados que contiene el disolvente apropiado. Sólo el borde de la placa más cercano a
las muestras está en contacto con el disolvente. El disolvente se introduce en el material
adsorbente seco y se desplaza hacia arriba a través de la placa arrastrando las muestras. La
tasa de migración de los componentes de la muestra sobre el adsorbente depende de su
estructura química.
La comprensión de la TLC requiere una introducción y la exposición de los principios
generales por los que trabajan. La cromatografía de adsorción fue descubierta por el botánico
Tswett en 1903. Observó que las soluciones de éter de pigmentos vegetales, tales como las
clorofilas, podrían ser separados en diferentes zonas de color haciéndolas pasar a través de
una columna que contiene carbonato de calcio. El desarrollo significativo de la cromatografía
de adsorción se produjo a principios de los 1930 cuando fue utilizado en la química
preparativa de pigmentos. Durante este período, la separación preparativa de compuestos
orgánicos incoloros se llevó a cabo con la aparición de los métodos de detección química
apropiados. Los geles de sílice y las tiras de papel se utilizan en la década de 1940 para la
separación de sustancias solubles en agua, tales como aminoácidos y azúcares. Otros
materiales de cromatografía de adsorción común incluyen carbonato de magnesio, silicato de
magnesio, alúmina y carbón activado. La mayoría de los materiales de adsorción pueden
tener cargas superficiales. Las sustancias que se adsorben a estos materiales son moléculas
polares o polarizables. Un ejemplo de una molécula polar es agua.
Material
• 3 tubos capilares (popotes delgados)
• Cuba cromatográfica (vaso de vidrio una tapa)
• Placas de cromatografía en CCF de aprox. 2 X 5 cm (papel filtro o pellón)
• 4 vasos de 50 mL
Reactivos
• Disolución de tinta negra
• Disolución de tinta de otro color
• Etanol
• Acetona
• Vinagre
• Agua
Se dispone de tres
disoluciones, previamente
preparadas de tinta negra(N),
color 1 (C1) y una mezcla de A la misma altura, en el borde Se deja secar y se introduce el
ambos (M). Se introduce un derecho se coloca con otro papel filtro en el interior de la
popote con diámetro popote una mancha de la cuba cromatográfica
pequeño en la disolución (N), solución (C1) y en la parte conteniendo 3 mL de
tomando una pequeña central de la placa una etanol/acetona 50:50, de
cantidad de esta y por su mancha de la solución M de modo que el disolvente no
extremo se coloca en una el nuevo con un popote toque la zona en la que se
papel filtro, una mancha a diferente encuentran las manchas
unos 6 mm del borde
izquierdo de la placa y a 4
mm del borde inferior
Se tapa la cuba y
cuando el disolvente
ha migrado hasta
llegar a 4 mm del
Se miden las
borde superior se saca Se repite todo el
distancias recorridas
la placa y se marca el proceso utilizando
por el frente del
nivel del disolvente en como eluyente
disolvente y para cada
un extremo de esta. etanol/acetona 20:80;
mancha, y se calcula
Se deja secar y se etanol/acetona 80:20.
el valor de Rf
observa la separación
de los componentes,
localizando la posición
de cada mancha
III. Resultados
Tabla I: Valor de Rf
Imagen: Resultados
IV. Conclusión
Al ser una práctica casera con materiales improvisados puedo decir que tiene sus ventajas
como son que fue una práctica rápida y sencilla.
Puedo concluir ahora que, la cromatografía en capa fina permite la separación de
compuestos en función con su afinidad con el disolvente.
V. Referencias
• (S/f). Bioted.es. Recuperado el 12 de mayo de 2022, de https://www.bioted.es/wp-
content/uploads/2020/02/PRINCIPIOS-CROMATOGRAFIA-EN-CAPA-FINA-
1.pdf
• (S/f-b). Edu.co. Recuperado el 12 de mayo de 2022, de
https://bonga.unisimon.edu.co/bitstream/handle/20.500.12442/7984/Gu%C3%ADa
%20de%20Cromatograf%C3%ADa%20en%20capa%20fina%20y%20por%20colu
mna.pdf?sequence=1&isAllowed=y