Explorando el fascinante mundo de las bacterias: siembra,

tinción y antibiograma
AGRESIÓN Y DEFENSA HUMANA
Arreola Córdoba Mariana, Gonzales Oviedo Sergio Gael , Mastache Adame Yedid Alexandra,
Uribe Velazquez Jessica Marlene, Villa Montoya Ariadna Lucía
Universidad del Valle de México

Palabras clave: tinción, antibiograma, bacterias, siembra, resultados, células,

microorganismos.

Resumen
En el presente ensayo reconocemos a las bacterias como organismos microscópicos
que se encuentran en todas partes del mundo, desde el suelo hasta el agua, pasando
por el cuerpo humano. Se realizaron tres técnicas comunes utilizadas para estudiar
las bacterias; siembra, tinción y antibiograma, cada una un su metodología
específica. En primer lugar la técnica de siembra es una técnica utilizada para
cultivar bacterias en medios de cultivo estériles, como resultado obtuvimos una
colonia pura de una sola especie bacteriana, la siembra se realizò mediante una
muestra de bacterias que se extiendiò sobre la superficie de un medio de cultivo con
un asa estéril, luego, se incubó a la temperatura y condiciones adecuadas para el
crecimiento de la bacteria, en la cual observamos microorganismos de las muestras
en las cuales se observaron colonias aisladas de estos microorganismos. La tècnica
de tinción fue utilizada para visualizar las bacterias al microscopio, obtuvimos que
las bacterias Gram-positivas retienen el cristal violeta, mientras que las
Gram-negativas no lo hacen y se tiñeron de rojo con safranina, finalmente se realizó
un antibiograma para determinar la sensibilidad de una bacteria a diferentes
antibióticos.

INTRODUCCIÓN

Las células requieren de una variedad de nutrientes orgánicos e inorgánicos; estos

requerimientos se demuestran fácilmente en órganos y tejidos extirpados de plantas
superiores e inferiores. Los nutrientes orgánicos, al igual que los inorgánicos,
requieren de dos niveles; uno macro y otro micro. Generalmente, las células en
crecimiento pueden fabricar sus proteínas a partir de fuentes adecuadas de
nitrógeno y carbohidratos suministradas por el medio de cultivo; sin embargo existe
además una cantidad de sustancias orgánicas adicionales que se requieren en
cantidades mínimas y que son muy activas en el crecimiento (Krikorian, 1991).

Todos los medios parecen beneficiarse en cierto grado con los suplementos
vitamínicos, a menos que las células se vuelvan verdes o hasta que ello ocurra; los
aditivos mínimos son la tiamina, ácido nicotínico y la piridoxina. Las principales
diferencias entre los medios de cultivo se relacionan con los diferentes compuestos
utilizados para estimular la división celular (Krikorian, 1991).
La identificación de una bacteria consiste en determinar la especie a la que
pertenece y en algunos casos el serogrupo e incluso la cepa. Durante la primera fase
que puede llegar a ser la más importante para la identificación de la bacteria es la
obtención de un cultivo puro utilizando las técnicas de aislamiento. Una vez que se
obtiene un medio puro normalmente se determina la morfología y agregación
efectuando una tinción Gram. Un cultivo puro es el cultivo que se obtiene de una
multiplicación de una sola bacteria y se incrementa en un medio de cultivo
apropiado (Romero, s.f).

La preparación de los medios de cultivo microbiológico es el proceso de mezcla de

nutrientes, agentes amortiguadores y agentes destinados al mantenimiento del
equilibrio osmótico, además de inhibidores o indicadores selectivos para crear un
agar o caldo que sustente el crecimiento y la diferenciación de los microorganismos
(Access Denied, s. f.).

Los medios de cultivo microbiológicos deben proporcionar condiciones de

crecimiento óptimas para todos los microorganismos o para tipos específicos de
microorganismos. Los medios de cultivo microbiológicos se clasifican según su
funcionalidad en varias fronteras, como elementos químicos, sus propiedades físicas
y su funcionalidad. A continuación, se describen los tipos de medios definidos por
estos límites (Access Denied, s. f.).

La preparación de medios de cultivo y las técnicas de siembra son fundamentales en

el campo de la microbiología para el crecimiento y estudio de microorganismos. En
esta práctica, se aprenderán los procedimientos para preparar medios de cultivo
sólidos y líquidos, así como las técnicas de siembra en superficie y en profundidad.

Según Tortora et al. (2017), el éxito del crecimiento de microorganismos en medios de

cultivo depende de una serie de factores, como la composición del medio, el pH, la
temperatura, la presencia de oxígeno y la técnica de siembra utilizada. Por lo tanto, es
importante seguir los procedimientos de preparación de medios y técnicas de
siembra de manera cuidadosa y precisa para obtener resultados confiables.

Además, según Madigan et al. (2018), la elección del medio de cultivo adecuado es
crucial para el aislamiento y la identificación de microorganismos. Algunos medios de
cultivo se utilizan para seleccionar organismos específicos, mientras que otros son
generales y permiten el crecimiento de una amplia gama de microorganismos. Es
importante tener en cuenta estas diferencias al seleccionar y preparar medios de
cultivo.

En cuanto a las técnicas de siembra, según Pelczar et al. (2010), la siembra en

superficie se utiliza para el aislamiento de microorganismos en muestras sólidas,
mientras que la siembra en profundidad se utiliza para muestras líquidas. También es
importante tener en cuenta la técnica de siembra utilizada al interpretar los
resultados de un cultivo.

La resistencia bacteriana a los antibióticos es un grave problema de salud que

actualmente ocupa a médicos de asistencia y de laboratorios de microbiología. Dicha
resistencia obliga a cambiar conceptos establecidos en cuanto a la interpretación de
los resultados de las pruebas de susceptibilidad, por lo que se impone conocer y
aplicar una lectura interpretada del antibiograma (Hernández, 2013).

El antibiograma tiene como objetivo evaluar en el laboratorio la respuesta de un

microorganismo a uno o a varios antimicrobianos para lograr el éxito terapéutico.
Con un antibiograma se pueden obtener resultados cualitativos que indican si la
bacteria es sensible o resistente a un antibiótico, o cuantitativos que determinan la
concentración mínima inhibitoria (CMI, expresada en μg/ml o mg/l) de antimicrobiano
para impedir el crecimiento bacteriano (Polgar, 2021).

La interpretación del antibiograma presenta las características siguientes según

Hernández, 2013:

- Establecer la probabilidad de éxito o de fracaso terapéutico que se deriva de la

utilización de los antimicrobianos frente a los microorganismos causantes de
infección y estudiados en el antibiograma.
- Utilizar los criterios se establecen por comités de expertos y generar en función del
conocimiento microbiológico, los datos farmacológicos y la respuesta terapéutica, o
sea, la correlación entre el antibiograma y el éxito terapéutico.
- Realizar un análisis fenotípico de los resultados de las pruebas de sensibilidad
fundamentadas en el conocimiento de los mecanismos de resistencia y en su
expresión.
- Tiene como principal objetivo la detección de la resistencia y la predicción del
fracaso terapéutico.

OBJETIVO PRINCIPAL Y ESPECÍFICOS

OBJETIVO GENERAL
Nuestro objetivo principal es poder llevar al conocimiento y aplicación clínica todos
estos conocimientos sobre la bacteria desde el hecho de ser capaces de identificar
los puntos críticos en la preparación de medios de cultivos bacterianos,
antibiogramas, y técnicas de tinción.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1. Desarrollar habilidades para la toma, siembra y cultivo de diferentes muestras
para la interpretación y conocimiento de las estructuras asociadas a las
bacterias.
2. Identificar las diferentes estructuras de las bacterias por medio de la tinción
Gram.
3. Lograr identificar las diferencias estructurales entre bacterias gram positivas y
gram negativas
4. Comprender la funcionalidad del antibiograma, así como su aplicación a la
clínica.

METODOLOGÍA
3.1 PREPARACIÓN DE MEDIOS
3.2 INOCULACIÓN
Durante esta práctica se preparan medios de cultivos los cuales son un conjunto de
nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones
necesarias para el desarrollo de los microorganismos. Los medios de cultivo pueden
ser sólidos o líquidos.

Durante el desarrollo de esta práctica en el laboratorio para poder realizar la

preparación de medios antes debimos de haber realizado pasos siguientes, así como
cálculos para preparar en este caso se pretende la realización de métodos de cultivos
como lo es uno de ellos el cultivo de Agar se utiliza como agente gelificante para dar
solidez a los medios de cultivo y otro tipo de cultivo que se realizó fue el caldo
nutritivo ambos los cuales fueron mezclados con agua destilada posterior a ello tanto
el agar y el caldo nutritivo necesitan diversas formas de preparación, en el caso del
caldo se vació en tubos de ensaye los cuales como veremos en el desarrollo de esta
práctica y para su preparación de los medios de cultivo, los microorganismos son
seres ubicuos que han colonizado todos los tipos de ecosistemas: el agua, el suelo, el
aire, el resto de organismos. Por ello todas las manipulaciones para conseguir cultivos
puros se deben realizar en un ambiente estéril que impida el acceso al medio de otros
microorganismos diferentes a los que deseamos aislar, posterior a que esterilizamos el
caldo y después de ello los dejamos en inoculación, por el otro lado el cultivo de agar
de igual forma lo esterilizamos y despues que salio ambos debemos de ponerlos
cerca de fuego por parte de esterilización , el agar nos esperamos a que pusiera
como una gelatina y a su vez lo mismo con el caldo, después colocamos con ayuda de
los hisopos recolectamos diferentes microorganismos como mucosas, plantas,
inodoro entre otros y los pusimos posteriormente a la incubación de los cultivos los
cuales la mayoría de los microorganismos que causan bacteriemia se recomienda
incubar los distintos hemocultivo utilizados con un periodo de 5 a 7 días con una
temperatura óptima de incubación de 35-37 C°, posterior que hayan pasado estos
días de incubación se proseguirá a la observación bajo el microscopio con distintas
tinciones y amplificaciones para lograr su observación .
En los laboratorios de Microbiología Clínica, la identificación microbiana y la
determinación de la sensibilidad de los microorganismos a los antibióticos son tareas
con un gran impacto en el manejo del paciente infectado. Los métodos utilizados
para la determinación de la sensibilidad se basan en un estudio fenotípico,
observando el crecimiento bacteriano de la cepa incubada en presencia del
antibiótico a estudiar, en este caso posterior a la observación bajo el microscopio se
pasa a la metodología de antibiograma en el cual el método realizado en está
práctica se basará en el antibiograma de disco el cual consiste en depositar, en la
superficie de agar de una placa de petri previamente inoculada con el
microorganismo, discos de papel secante impregnados con los diferentes antibióticos,
los cuales contienen una concentración predeterminada que permite la correlación
más o menos precisa con la concentración inhibidora. Dicho antibiótico alcanza “in
vivo” y regula los resultados de resistencia o susceptibilidad. La conservación de
nuestro discos es crítica ya que de ella va a depender la confiabilidad de los
resultados por lo que se deben mantener incubados en 20-37 C°.
3.3DIAGRAMA DE PROCESO

FIGURA 1: Diagrama de metodología de preparación de medios e inoculación

FIGURA 2: Diagrama de metodología de preparación de medios e inoculación

3.4 Tinción Gram

Se realiza primero una preparación del frotis encendiendo el mechero de Bunsen y en

un portaobjetos limpio se coloca una pequeña gota de agua en el centro del
portaobjetos con la pipeta Pasteur, pasamos el asa bacteriológica por la llama del
mechero hasta que se torne de un color rojo, dejamos enfriar unos segundos y
tomamos una muestra de uno de los cultivos para luego colocar la muestra en la gota
del agua, repetimos este proceso con todas las muestras que se hayan tomado y por
último fijamos la muestra tomando el portaobjetos y pasándolo por la llama del fuego.

Para la tinción se coloca en el portaobjetos con los frotis preparados previamente

sobre el puente de tinción, cubrimos la muestra con cristal violeta y esperamos 1
minuto, escurrimos y enjuagamos, luego cubrimos la muestra con solución de lugol y
esperamos 1 minuto, escurrimos y enjuagamos, después se repite el procedimiento
con el alcohol cetona esperando únicamente 5 segundos, escurrimos y enjuagamos,
por último cubrimos la muestra con safranina y esperamos a que pase 1 minuto,
escurrimos y enjuagamos. Dejamos secar la muestra y colocamos el cubreobjetos y
observamos al microscopio.

3.5 ANTIBIOGRAMA

Posterior a la realización de nuestros cultivos así como la observación de estos

mismos bajo el microscopio para el logro de su identificación del tipo de bacterias
que eran, es decir, si eran gram+ o gram- para la semana siguiente proseguir con el
antibiograma o prueba de sensibilidad la cual nos ayudan a determinar la
susceptibilidad de un microorganismo frente a los medicamentos antimicrobianos, a
partir de la exposición de una concentración estandarizada del germen a estos
fármacos.
En está práctica se pondrá en uso una de las técnicas más comunes que se usan
para la realización de un antibiograma la cual es una técnicas de difusión emplean
discos de papel impregnados con una solución estandarizada de antibiótico que se
disponen sobre la superficie de un medio sólido previamente inoculado en su
superficie con una suspensión bacteriana. Después de colocar los discos en nuestros
cultivos con procedimientos estériles, se procede a incubar por 18 horas para
posteriormente observación de resultados donde veremos que el diámetro del halo
formado está en relación con el grado de sensibilidad del microorganismo
permitiéndonos diferenciar los microorganismos sensibles de los resistentes y pueda
establecerse una correlación con los valores de concentración mínima: a los
pequeños se relacionan con valores altos de concentración mínima (CMI) (resistentes)
y halos grandes con concentración mínima bajas (sensibles).

RESULTADOS:

Para la observación de las diferentes mientras, algunos de los campos de cultivos

fueron sometidos a diferentes procesos, para poder observarlos en el microscopio.
Estos diferentes compuestos que añadimos era con el fin de hace, de ue las paredes
de la bacteriaras se lograrn teñir en este caso las gram negativas se teñian de un
color morado y las grampositivas se teñian de color rojo .
A continuación podemos observar una tabla en donde del lado izquierdo se muestra;
el nombre del objeto / parte del cuerpo del cual se tomó la muestra, junto con la
imagen del campo que se logró observar y del lado derecho una pequeña
descripción de la imagen

1. Crecimiento de medio de cultivo

El cultivo que nosotros creamos para el desarrollo de agentes microbianos fueron el
agar nutritivo y el caldo nutritivo, para cada uno de ellos se realizaron diferentes
procedimientos, esto con el fin de proporcionar un ambiente diferente, con las aptas
condiciones para que los microorganismos puedan sobrevivir. Los microorganismos
los obtuvimos de diferentes muestras que realizamos en los objetos y en algunas
partes del cuerpo. El resultado fue favorable ya que fue el esperado porque los
microorganismos “bacterias” crecieron y se multiplicaron en las muestras. En las
muestras de los diferentes medio de cultivos en comparación una con otra mostraba
algunas diferencias; es decir en los cultivos del agar nutritivo se lograban observar
más los campos bacterianos, mientras que en el caldo nutritivo era un poco más
complejo de observar a simple vista. Algunos microorganismo en el caldo nutritivo no
lograron “multiplicarse” y viceversa en el agar nutritivo en efecto se puede resumir, que
los medio de cultivo en el caldo nutritivo (cultivo universal); son para aquellos
microorganismo en los cuales su dieta o están exigente, sin embargo en el caldo agar
nutritivos para aquellas bacterias las cuales son un poco más compleja su
reproducción.
Es importante mencionar que en el crecimiento de cada uno de las diferentes
muestras que realizamos intervinieron diferentes factores como por ejemplo la
temperatura, ya que esto es favorable para la mayoría de los microorganismos para
que puedan reproducirse. De acuerdo a esto podemos decir que en ambos medios se
lograron resultados similares en cuanto al crecimiento de los microorganismos, lo que
conlleva a que los medios se utilicen para la conservación de los microorganismos.

En la tabla 2 podemos observar los resultados obtenidos de la muestras en la cual se

logran apreciar diferentes grupos de cepas; por ende las bacterias muestran
diferentes estructuras y morfología por ejemplo: se puede visualizar en la imagen
morfologías como estreptococos, cocos bacilos entre otras, al igual que se realizaron
diferentes muestras en donde se realizó la preparación para tinción de cada una de
las muestras, al finalizar obtuvimos muestras de bacterias gram-positivos y
gram-negativas.

2. Análisis de resultados (tabla 2)

IMAGEN DESCRIPCIÓN

Baño hombres Está muestras fue tomada de los baños

de hombres, en la cual se logró observar
a un objetivo de 100x, un campo el cual
muestra una colonización de bacterias,
en la cual se pueden observar bacterias
con una estructura de espiral mediante
 la tinción gram negativa

IMAGEN 1: muestra de toma de baño de hombres en el cual se

pueden observar diferentes cepas , donde cada una de las
bacterias presenta una morfología de espiral

Baños mujeres Esta muestra fue tomada de los

sanitarios femeninos, en el cual logramos
observan, mediante el objetivo de 100X,
podemos ver unos microorganismo
(bacterias) en colonización especial
bacterias con la forma de estrao bacilos,
con estructuras alargadas, bordes bien
definidos, te tiñeron de color morodado
por latante son grampositivas

Imagen 2: Muestra obtenida en los baños femeninos en el cual

se pueden observar diferentes grupos de cepas teñidas de un
color violeta, se aprecia que las bacterias presentan una
morfología de estreno de bacilos

Nariz Esta muestra fue obtenido de la nariz de

una compañera, en el cual se logró
observar mediante un objetivo de 100x,
un campo el cual muestra una
colonización de bacterias en forma de
espirales, aunque en algunas partes se
olaran observar bacterias, en forma de
cocos en colonias en forma de racimo, se
tiñerón de color morado por o tanto son
bacterias gram positivas
Imagen 3: toma de muestra de la nariz en la cual podemos
observar varias cepas en la muestra, se logran apreciar
bacterias con diferentes morfologías, algunas con forma de
bacilos y otras con cocos

Boca Esta muestra fue tomada de la boca de

una de nuestra compañera, en la cual
con un objetivo de 40x se logró observar
un campo de colonización de bacterias,
se identificaron las estructuras de
bacterias estafilococos, se tiñeron de un
color morado por lo tanto son
grampositivas

Imagen 4: Muestra obtenida de la boca, en la cual se logra

apreciar diferentes grupos de cepas, en donde la morfología
de estas bacterias presentan estafilococos, por la tinción son
gram positivas

Axila Esta muestra fue tomado en la axila de

una compañero, en el cual se observó
con un objetivo de 100x, se observó un
campo en el cual se pueden ver
bacterias diplococos y cocobacilos, se
tiñeron de un color rojo, por lo tanto
estas bacterias son gram negativas
Imagen 5: Esta imagen se visualiza la muestra obtenida de
una axila, en donde se logra apreciar diferentes grupos de
cepas las cuales fueron teñidas de un color rojo , donde las
bacterias presentan una morfología diplococos y cocobacilos

arete Esta muestra fue tomada de un arete de

alguna compañera la cual se observo
con un objetivo de 100x, en a cual
podemos ver un campo de colonización
de bacterias, donde se observan
bacterias de tipo estrabacilos, se tiñeron
de color por lo anto nos hace enterder
que son bacterias grampositivas

Imagen 6: es esta imagen se puede visualizar la muestra

obtenida de un areta la cual se realizó la tinción con un color
rojo , donde se logra observar un grupo de cepas, donde las
bacterias presentan una estructura estrato bacilos

Zapat Esta muestra fue tomado de un zapato

de nuestros compañero, en la cual
podemos ver un campo de colonización
de bacterias en las cuales al paces
tienen de coco ramificados
estreptococos y en algunas partes se
dan a mostrar bacterias en forma de
bacilos se tiñeron de un color morado,
por lo que son bacterias grampositivos
 o
Imagen 7: se visualiza la imagen de la muestra obtenuda de la
suela de un zapatos, mediante la cual se realizo la tinción de
color morado , en donde se logra aprecipar diferentes grups
de cepas, se logra visualizar que algunas bacterias presentan
forma de bacilos

3. RESISTENCIAS A LOS ANTIBIÓTICOS

La resistencia a los antibióticos se realizó el día 28 de marzo colocando a cada cultivo

el antibiótico correspondiente, posterior a eso dejamos esperar un lapzo de
aproximadamente 48 hrs para después observarlos, es importante mencionar que
trabajos con diferentes antibióticos (tabla 2.2 ) aquí podemos observar los diferente
antibióticos con los cuales se trabajaron mientras que por otro lado en la tabla 2.3
podemos observar los resultados de los antibióticos, en los cuales alguno mostraron
inhibición completa, mientras que en otro caso las bacterias mostraron resistencia a
cierto antibióticos

Imagen Descripción de antibióticos que

contiene

Amikacina AK 30Mcg
Ampicilina AM 30Mcg
Carbenicilina CB 100Mcg
Céfalotina CF 30Mcg
Cefotaxima CFX 30Mcg
Ciprofloxacina CPF 5Mcg
Cloranfenicol CL. 30Mcg
Gentamicina GE 10Mcg
Netilmicina NET 30Mcg
Nitrófurantoina NF 300Mcg
Norfloxacina NOF 10Mcg
Trimetroprim SXT 25Mcg
 Ampicilina AM 10ug
Céfalotina. CF 30ug
Cefotaxima CFX. 30ug
Ciprofloxacina CPF 5ug
Cindamicina CLM 30ug
Dicloxacilina DC 1ug
Eritromicina E 15ug
Getamicina GE 10ug
Penicilina PE 10U
Tetraciclina TE. 30ug
Trimetroprim SXT 25ug
Vancomicina VA 30ug

Imagen muestra resultado a las 48 hrs posteriores

Mucosa vaginal Está muestras la realizamos el día 28 de

marzo, para lo que posteriormente el día
30 fue la realización, observación y
medición de las muestras. Como se
muestra en ,la imagen usamos un
antibiograma positivo en el cual mostró
inhibición completa, aunque es
importante recalcar que en esta prueba
empezaron a surgir hongos

Imagen 1: muestra la imagen de los resultados del

antibiograma de gram positivo en el cual se aprecia la
inhibición completa, también se logran visualizar cepas de
hongos en los bordes de la muestras

Boca Marlene Está muestras la realizamos el día 28 de

marzo, para lo que posteriormente el día
30 fue la realización, observación y
medición de las muestras, como se
puede observar en la imagen algunos
antibióticos mostraron inhibición
completa mientras que otros, las
bacterias tomaron ciertas resistencias
sobre algunos antibióticos, los
 resultados obtenidos fueron los
siguientes;
CLMG: E: P:, T 1 milímetro, en alguno
muestran resistencia en 4 V, CLM, AM, TE,
mientras que 5 se ve visualización
completa G, GESTX, CPF, SFX

Imagen 2: se visualiza los resultado del antibiograma positivo

realiza, como se llevo acabo la inhibición de bacterias
estafilococo, se aprecia que algunos mostraron inhibición
completa mientras que otras presentaron poca inhibición y
otras o presentan inhibición

Boca Jess Está muestras la realizamos el día 28 de

marzo, para lo que posteriormente el día
30 fue la realización, observación y
medición de las muestras, en esta
prueba como podemos ver en la imagen
de la izquierda, utilizamos un
antibiograma para bacterias
gramnegativas, en el cual al momento de
realizar la observación, logramos
observar que se llevó a cabo una
inhibición completa

imagen 3: muestras los resultados obtenidos de la bacterias

en la cual se observa una inhibición completa

Moco Está muestras la realizamos el día 28 de

marzo, para lo que posteriormente el día
30 fue la realización, observación y
medición de las muestras, como se logra
observar en la imagen de la izquierda
utilizamos un antibiograma para
bacterias grampositivas, en el cual los
resultado obtenidos fueron los
siguientes.
CFX: 0.2 mm AM: resistencia TE: inhibición
PE: resistencia E: inhibición CLM:
inhibición CPF: inhibición CF: 0.6 mm DC:
resistencia GE, STX, VA muestran
inhibición

imagen 4: imagen en la cual se visualiza los resultados

obtenidos del antibiograma positivo, en el cual se puede
apreciar que la mayor parte mostró una inhibición completa,
mientras que otra de conjunto de cepas bacterias monstruo
resistencia a los diferentes antibióticos

CUESTIONARIO 1
¿Cuál es el punto crítico para preparar un medio de cultivo sólido?
el agar a una temperatura de 200 º

¿Por qué se utiliza agua destilada y no agua purificada o de llave?

Por qué el agua destilada permite aumentar el número de microorganismos .
Usualmente el agua de la llave no provee las mismas condiciones que el agua
destilada además de que el agua de la llave contienen una o más sustancias
inhibidoras del crecimiento esto también sucede en agua destilada con excepción en
algunos microorganismos . ( Lozano, & Ramírez, & Corrales, & Suárez, & Trujillo, 2021).

Medios de cultivos utilizarías para

Escherichia coli : MacConkey
Staphylococcus aureus: agar-sangre 6,7, donde el microorganismo se somete a
identificación definitiva realizando tinción de Gram, catalasa y coagulasa
Vibrio cholerae: EN agar con tiosulfato, citrato, sales biliares y sacarosa
Penicillium notatum pagar estricto de manta al 2%
Aspergillus niger: agar papa dextrosa (APD) durante cinco días hasta la esporulación
(Lozano, & Ramírez, & Corrales, & Suárez, & Trujillo, 2021).

¿Para qué aislamiento utilizarías el agar sangre?

Al ser suplementado con sangre, permite el crecimiento de microorganismos
nutricionalmente exigentes y la clara visualización de reacciones de hemólisis.,
microorganismos como por ejemplo:microorganismos como Enterobacteriaceae,
Pseudomonas y otros bacilos gram-negativos no fermentados, estreptococos,
enterococos, estafilococos, corineformes, especies de Candida. ( Lozano, & Ramírez, &
Corrales, & Suárez, & Trujillo, 2021).

¿A qué se debe que se utilicen diferentes tiempos y temperaturas de incubación para

algunos grupos de microorganismos?
La capacidad de crecimiento de los microorganismos disminuye proporcionalmente a
la actividad del agua. Cuando la temperatura se acerca a la óptima, el valor de Aw
que permite el crecimiento bacteriano puede ser más restrictivo. ( Torres, 2021)

¿Qué es una técnica Aséptica?

son las prácticas que uno implementa en el laboratorio para reducir la contaminación
cuando va a trabajar con microorganismos. Es el cuidado que uno tiene para evitar
que microorganismos no deseados crezcan en los medios y soluciones que estés
manipulando. ( Harley & Prescott, 2002)

¿Qué es un medio semisólido y qué técnica de siembra se utiliza?

Este tipo de medio contiene una proporción menor de agar que los medios sólidos. El
medio queda inoculado al introducir el hilo en profundidad, pero sin tocar el fondo
del tubo, retirándose posteriormente por la misma trayectoria utilizada al realizar la
picadura. (Ortega, 2009)

¿Definición de colonia bacteriana?

Conjunto de bacterias de la misma especie que se acumulan de forma característica
cuando encuentran recursos favorables para su reproducción. Pueden distinguirse las
especies (entre otras características); por la forma, tamaño, color de estas colonias.
( Carroll & Hobden, 2016).

¿Qué tipo de microorganismos tiñe la tinción Gram?

Bacterias ( Carroll & Hobden, 2016).

¿De qué color se tiñen las bacterias Gram positivas?

Color morado, debido a que su capa de peptidoglicanos es más gruesa y hay
presencia de lipopolisacáridos. ( Carroll & Hobden, 2016).

¿De qué color se tiñen las bacterias Gram negativas?

Entre rosas y rojas debido a que su pared celular es más delgada y no cuenta con
lipopolisacáridos. ( Carroll & Hobden, 2016).

CUESTIONARIO 2
¿En qué consiste un antibiograma?
En el reconocimiento fenotípico de los mecanismos de resistencia y permite, a partir
de éste, la inferencia de fenotipo inicial (Cantón, 2010).

¿Qué diferencia la lectura interpretada del antibiograma con el proceso de

interpretación del antibiograma?
Este último consiste en la categorización clínica de los resultados, es decir, en la
traducción por medio de los puntos de corte clínicos, los halos de inhibición o los
valores de CMI en las categorías clínicas sensible, intermedio o resistente, definidas en
el apartado anterior. Por el contrario, la lectura interpretada realiza un análisis
fenotípico (Cantón, 2010).

¿Qué información proporciona un antibiograma?

Información sobre qué antibióticos son efectivos para tratar la infección causada por
el microorganismo en cuestión y cuáles son ineficaces debido a la resistencia
bacteriana (Spellberg et al, 2009).

¿Qué factores pueden afectar los resultados del antibiograma?

Calidad de la muestra, la técnica de siembra, el tipo de medio de cultivo utilizado, la
concentración y el tiempo de exposición a los antibióticos, y la interpretación de los
resultados (Spellberg et al, 2009).

¿Cómo se interpretan los resultados del antibiograma?

Se interpretan comparando el diámetro de la zona de inhibición alrededor de cada
disco de antibiótico con los puntos de corte establecidos para ese antibiótico en
particular. Si el diámetro de la zona de inhibición supera el punto de corte, se
considera que el microorganismo es sensible a ese antibiótico. Si el diámetro de la
zona de inhibición es menor que el punto de corte, se considera que el
microorganismo es resistente a ese antibiótico (Spellberg et al, 2009).

¿Cómo se utiliza la información del antibiograma para guiar el tratamiento de

infecciones?
Basándose en la sensibilidad del microorganismo a diferentes antibióticos, teniendo
en cuenta la gravedad de la infección, la edad y la condición general del paciente, y la
penetración del antibiótico en el sitio de la infección, seleccionando así el antibiótico
que sea más efectivo (Spellberg et al, 2009).

¿Cuáles son algunas limitaciones del antibiograma?

Dificultad para identificar algunos microorganismos, la variabilidad en los resultados
debido a factores técnicos y biológicos, la falta de información sobre la penetración
del antibiótico en el sitio de la infección y la capacidad del microorganismo para
resistir el antibiótico en ese sitio, y la necesidad de tiempo y recursos para realizar el
estudio (Spellberg et al, 2009).

CONCLUSIONES
Como conclusión de la práctica de preparación de medios y técnicas de siembra, se
puede destacar que la preparación de medios de cultivo es un proceso crítico en la
microbiología, ya que la calidad del medio puede afectar directamente el crecimiento
y desarrollo de los microorganismos que se desean cultivar.

Es importante seguir cuidadosamente las instrucciones para la preparación de

medios de cultivo, ya que los ingredientes y las proporciones pueden variar según el
tipo de microorganismo que se desea cultivar. Las técnicas de siembra también son
cruciales en la microbiología, ya que permiten la transferencia controlada de los
microorganismos a los medios de cultivo. Las técnicas de siembra deben realizarse en
condiciones asépticas para evitar la contaminación cruzada entre muestras y
garantizar la pureza de los cultivos.

Existen diferentes técnicas de siembra, como la siembra en superficie cada una de las
cuales es adecuada para diferentes tipos de muestras y microorganismos, en esta
práctica se analizó cómo es la preparación correcta acerca de diversos
microorganismos como es que al recolectar muestras de diversos lugares harán un
cambio y se observa de mejor manera con diversas sustancias como lo fue el agar y el
caldo que preparamos previamente, para que fuera nuestro cultivo.Todo esto con la
finalidad de poder como es cada parte de nuestro mundo que nos rodea y nosotros
mismo está rodeado de microorganismos de diversas formas y estructuras, y tener un
panorama de cómo es que se pueden observar ante un medio de cultivo previamente
preparado.

En resumen, la preparación de medios de cultivo y las técnicas de siembra son

procesos fundamentales en la microbiología que requieren de cuidado y precisión
para obtener resultados confiables y reproducibles.

La tinción de Gram es un procedimiento utilizado en microbiología para diferenciar

las bacterias en función de sus características estructurales de la pared celular.
Al realizar la práctica de tinción gram pudimos observar diversas muestra de nuestros
cultivos previamente hechos para poder teñidas con los diversos pasos cómo colocar
el cristal violeta y dejar reposar durante 1 minuto, para después colocarle lugol e
igualmente reposamos 1 minuto, aplicamos alcohol por 10-15 segundos y finalizamos
con sacarina por 1 min y observamos a diferentes aumentos en el microscopio y ver
cada una de las estructuras de las células observadas ya sea bacilos y cocos y cada
uno de sus membranas, las bacterias que retienen el tinte violeta se conocen como
Gram positivas, mientras que las que se tiñen con la safranina se llaman Gram
negativas.

La tinción de Gram es importante porque permite a los microbiólogos identificar

diferentes tipos de bacterias y seleccionar los tratamientos adecuados para combatir
infecciones. Por ejemplo, las bacterias Gram positivas son susceptibles a los
antibióticos que atacan su pared celular, mientras que las Gram negativas son más
resistentes debido a la estructura de su membrana externa. Por lo tanto, la tinción de
Gram es una herramienta importante y esencial en el campo de la microbiología
médica y clínica.

Al realizar la prueba de antibiograma nos pudimos dar cuenta sobre cómo era la
manera correcta de poder colocar los gram tanto positivos como negativos y ver
cada una de sus reacciones, en la práctica se acaban las muestras gram negativas
así que puede que eso llegue a afectar el resultado.
El antibiograma es una prueba de laboratorio que permite determinar la sensibilidad
de una cepa bacteriana a diferentes antibióticos. Esta información es fundamental
para orientar la elección del tratamiento antibiótico más adecuado para una
determinada infección bacteriana.

En conclusión, el antibiograma proporciona información valiosa para ayudar a los

médicos a elegir el tratamiento antibiótico más eficaz para sus pacientes. Esto puede
ayudar a minimizar el uso innecesario de antibióticos y prevenir el desarrollo de
resistencia a los antibióticos. Es importante tener en cuenta cada uno de los pasos
que realizamos en dicha práctica para así con ello poderlo aplicar en nuestro ámbito
clínico, desde preparar los medios de cultivo como las tinciones de diversas
identificaciones de bacterias y poder aplicar el antibiograma para ver sus
componentes.

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