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    Agar Dextrosa y Patata EP USP BAM - 1022 - Es - 5

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    Este documento describe un medio de cultivo llamado Agar Dextrosa y Patata que se usa para identificar, cultivar y contar hongos y levaduras. El medio contiene agar bacteriológico, dextrosa y almidón de patata como fuente de carbono y nutrientes para favorecer el crecimiento de hongos y levaduras. Se recomienda incubar diferentes microorganismos a diferentes temperaturas y tiempos para identificarlos.

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    5.- Agar Dextrosa y Patata EP USP BAM - 1022_es_5

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    Agar Dextrosa y Patata EP/USP/BAM Cat.

    1022
    Para la identificación, cultivo y enumeración de hongos y levaduras.

    Información práctica
    Aplicaciones Categorias
    Recuento selectivo Hongos y levaduras

    Industria: Farmacéutica/Veterinaria / Clínica / Alimentación / Control de Producto Final

    Regulaciones: USP / Farmacopea Europea / BAM

    Principios y usos
    El Agar Dextrosa y Patata está recomendado por APHA y FDA para cultivar levaduras y mohos. También se puede usar en la identificación de hongos y
    levaduras en paralelo con su morfología celular, o en métodos de microcultivo en portaobjetos.

    Este medio de uso general se puede complementar con ácido o antibióticos para inhibir el crecimiento bacteriano. La base nutricionalmente rica
    (infusión de patata) fomenta un crecimiento de hongos y mohos muy abundante. La dextrosa es el carbohidrato fermentable como fuente de carbono y
    energía. Agar bacteriológico es el agente solidificante.

    La Farmacopea Europea, USP recomienda este medio en el párrafo 2.6.12: “Microbiological examination of non – sterile products: Microbial
    enumeration test” para la preparación cepas de ensayo para el examen de TYMC.
     

    Fórmula en g/L
    Agar bacteriológico 15 Dextrosa 20
    Almidón de patata (equivalente a 200 g de Infusión de patatas) 4
    Fórmula típica g / L * Ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.
     

    Preparación
    Suspender 39 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta la
    disolución completa. Esterilizar en autoclave a 118-121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 ºC, mezclar bien y distribuir en placas.
     

    Instrucciones de uso
    » Para el diagnóstico clínico, el tipo de muestra son todas muestras clínicas (cabello, piel, uñas, etc.).

    - Inocular la superficie rayando en paralelo con el mango o el hisopo. Si las muestras están formadas por rasguños de piel, cabello o uñas, coloque el
    material en el centro de la superficie del medio.
    - Incubar a 25-30 °C o 20-25 º durante 18-48 horas y hasta 7 días, en función del microorganismo a examinar.
    - Lectura e interpretación de los resultados.

    » Para otros usos no amparados por el marcado CE:


    Identificación, cultivo y enumeración de levaduras y mohos:
    - Inocular las placas de Agata Dextrosa Patata para obtener colonias aisladas.
    - Cuando el medio se va a utilizar para la enumeración de levaduras y mohos, el pH debe reducirse para inhibir el crecimiento bacteriológico. Añadir al
    medio esterilizado enfriado a 45-50 °C, aproximadamente 14 ml de una solución esterilizada de ácido tartárico al 10% para obtener un pH de 3,5. No
    volver a calentar el medio ajustado después de agregar el ácido, ya que el agar puede hidrolizarse y no solidificarse.
    - Incubar las placas a 25-30 ºC durante 5-7 días para Trichophyton mentagrophytes, a 20-25 ºC durante 5-7 días, o hasta que se alcance una buena

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    esporulación para Aspergillus brasiliensis y a 25-30 ºC durante 18-48 h para Candida albicans y Saccharomyces cereviseae .
    - Las levaduras crecerán como colonias de color crema blanco. Los mohos crecerán como colonias difusas de varios colores.
    - Para diferenciar y aislar géneros y especies, realizar más pruebas microscópicas y bioquímicas.
     

    Control de calidad
    Solubilidad Apariencia Color del medio deshidratado Color del medio preparado Final pH (25ºC)
    Sin restos Polvo fino Beige Ámbar claro, ligeramente opalescente 5,6±0,2
     

    Test microbiológico
    Condiciones de incubación: Aspergillus brasiliensis (20-25 ºC / 5-7 días o hasta que se alcance una buena esporulación); Candida albicans y
    Saccharomyces cereviseae (25-30 ºC / 18-48 h).

    Microrganismos Especificación
    Candida albicans ATCC 10231 Buen crecimiento
    Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 Buen crecimiento
    Trichophyton mentagrophytes ATCC 24957 Buen crecimiento
    Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763 Buen crecimiento
     

    Almacenamiento
    Temp. Min.:2 ºC
    Temp. Max.:25 ºC
     

    Bibliografía
    American Public Health Association. Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 13th Ed. APHA, Inc. New York, 1960.
    American Public Health Association. Recommended Methods for the Microbiological Examination of Foods. APHA, New York, 1958.
    Association of Official Analytical Chemists. 1995. Bacteriological analytical manual, 8th ed. AOAC International. Gaithersburg, MD.
    European Pharmacopoeia 9.3

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