Biofísca de Membranas

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Membranas Biológicas

 Las membranas biológicas son estructuras celulares


que definen y controlan la composición del espacio
intracelular.

 Las células adquieren las moléculas y iones que


necesitan del fluido extracelular que las rodea

 Ello condiciona que exista un tráfico importante de


iones y moléculas a través de la membrana.
Membranas Biológicas

 Son estructuras dinámicas cuya composición cambia


durante la vida celular.

 En su composición intervienen los lípidos las proteínas


y los hidratos de carbono.
Membranas Biológicas
Componente Lipídico

 Los componentes lipídicos de las membranas incluyen


fosfolípidos (constituyen el mayor porcentaje de los
lípidos de la membrana) y colesterol.

 Los fosfolípidos incluyen la fosfatidilcolina, la esfingo-


mielina que predominan en la mitad externa y la
fosfatidilserina y la fosfatidiletanolamina que predominan
en la mitad interna.
Distribución asimétrica de los lípidos

 Adoptan la conformación
Fosfatidiletanolamina Fosfatidilcolina de una doble capa con los
grupos hidrofílicos
orientados hacia los
espacios intra y
extracelular y el hidrofóbico
Fosfatidilserina Esfingomielina hacia el interior de la
membrana
Membranas Biológicas
Componente Proteico
 Las membranas biológicas también contienen proteínas (glucoproteínas
y lipoproteínas). Representan el 50% de los componentes de la membrana.

 Las proteínas de membrana pueden ser integrales o periféricas.

 Las proteínas integrales o


intrínsecas se insertan y
atraviesan la membrana.
 Se unen estrechamente
a las membranas a través
de uniones hidrofóbicas

 Las proteínas
periféricas o extrínsecas
están débilmente unidas
a los grupos polares
hidrofílicos.
Membranas Biológicas
Componente Proteico

Las proteinas cumplen un rol fundamental en los


mecanismos de transporte a través de la membrana.

Dos grandes grupos de proteinas las denominadas


transportadoras o carriers y las proteínas canal.

Las proteinas transportadoras se unen al soluto


específico y luego mediante una serie de cambios
conformacionales logran la transferencia del
soluto a través de la membrana.
Membranas Biológicas
Componente de Hidratos de Carbono

 Los hidratos de carbono se unen tanto a lípidos


formando los glucolípidos como a las proteínas
formando las glucoproteínas.

 Los glucolípidos se distribuyen preferentemente


en la superficie externa de la membrana.

 Representan el 5% de las moléculas lipídicas


de la mitad externa de la membrana.
Membranas Biológicas
Resolviendo problemas
1. Impermeabilidad de las bicapas lipídicas para iones y moléculas.
La bicapa lipídica es permeable al agua, y algunas moléculas no
cargadas como O2 y CO2 que difunden libremente desde y hacia la
célula. La difusión del agua a través de la membrana es importante para
regular la presión osmótica.
Las bicapas lipídicas son impermeables a cationes como K+, Na+, Ca2+
y aniones como Cl-, HCO3-, moléculas hidrofílicas pequeñas como la
glucosa, y macromoléculas como las proteinas y el ARN.

2. Concentraciones relativas
Los iones y moléculas se mueven espontaneamente en función de sus
gradientes de concentración a través del mecanismo de Difusión ( a
favor de su gradiente de concentración y sin consumo de energía).
También pueden hacerlo en contra de su gradiente de concentración a
través del Transporte Activo pero con consumo de energía.
Membranas Biológicas
Existen dos tipos de mecanismo de transporte a
través de la membrana:

 El denominado transporte activo

 El denominado transporte pasivo


o difusión facilitada
Membranas Biológicas
Transporte Activo

ATP

Bombas Cotransportadores
Membranas Biológicas
Difusión Facilitada
Tipos de Canales Iónicos

Activados por Activados por Activados por


Voltaje Ligando Estiramiento
Membranas Biológicas
No Activables o Abiertos permanentemente
Gap Junctions
Membranas Biológicas
Gap Junctions

Intersticio

Citoplasma
N C
Membranas Biológicas
Gap Junctions

Célula A

Célula B
Conexon Homomerico Heteromerico Homomerico Heteromerico
Canal Homotipico Homotipico Heterotipico Heterotipico
Membranas Biológicas
Canales Ligando dependientes

Activados por ligandos presentes en


el exterior celular.
Son, en realidad, receptores de
membrana.
Son poros no selectivos.
El ejemplo paradigmático es el
receptor de Acetilcolina, mediador de
los efectos de los neurotransmisores.
 consiste en un pentámero de subunidades
proteicas con dos sitios de acoplamiento
para la acetilcolina.
 Cuando el ligando se une, altera la
conformación del receptor y causa la
apertura del poro.
 Este poro permite el flujo de ionesNa+ a
favor de su gradiente electroquímico.

b
ACh

g (or e)

ACh d
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Estructura Molecular

Voltage Selectivity &


Sensing Permeation Slow
Inactivation

P loop

Gating

Fast
Selective Inactivation
Oligomerization
• Contienen 4 subunidades, cada una de ellas con 6
segmentos transmembrana
• El canal de K+ es un tetrámero

• Los canales de Na+ y Ca2+ tienen las 4 subunidades


conectadas en una sola cadena.
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Membranas Biológicas
Ecuación de Nernst
R  T ln Cout
E =
zF Cin
E: Potencial de Equilibrio
R: Constante de los Gases (8.31 J  K-1mol-1)
T: Temperatura Absoluta (K)
F: Constante de Faraday (96500 Coulomb/mole)
z: Número de cargas (valencia) de un ión

ln: Base de los logaritmos naturales


(base: e = 2.71828)
Cin, Cout Concentraciones intra y extracelulares del ión
difusible.
Membranas Biológicas
Ecuación de Nernst

Ln Log
Membranas Biológicas
Ecuación de Nernst
Concentraciones intra y extracelulares
de Na+ y K+

Interior Exterior Potencial de Equilibrio

Na+ 15 mM 150 mM +60 mV


K+ 150 mM 6 mM -90 mV

RT Cout 1 RT Cout
E(mV)= * ln = ln
* *
z F Cin z F Cin

RT/F = 25.26mV si se trabaja a 20°C y 26.73 mV si se trabaja a 37°C con Ln.


RT/F = 58.17mV si se trabaja a 20°C y 61.54 mV si se trabaja a 37°C con Log

Para transformar ln en log tenemos que log X = lnX/ln10 = 2.30 * lnX = log X
Membranas Biológicas
Potencial de Membrana
 El potencial de membrana tiene
dos funciones básicas. Le permite
a la célula funcionar como una
batería, otorgándole la energía
necesaria para que operen una
variedad de estructuras
moleculares que se hallan
embebidas en la membrana.
 En las células excitables, además,
su modificación por acción de la
circulación de corrientes iónicas, es
usada para la transmisión de
señales.
 La apertura y cierre de canales
iónicos en un punto de la
membrana provoca un cambio local
de potencial que determina el flujo
de corriente eléctrica hacia otros
puntos en la membrana.
Membranas Biológicas
Potencial de Reposo
 El potencial de membrana es dependiente de dos factores: la fuerza eléctrica de
atracción o repulsión de los iones en función de la carga y la difusión de los iones
en función de su graiente de concentración.
 Desde el punto de vista biofísico, el Potencial de Membrana de Reposo es
simplemente el potencial de membrana que resulta de las permeabilidades de
los diferentes iones cuando la célula esta en reposo. Las interacciones iónicas
que generan el potencial de reposo están representadas en la ecuación de
Goldman, que expresa al potencial de membrana como un promedio ponderado
de los potenciales de equilibrio de los diferentes iones. La ponderación es
función de las permeabilidades respectivas. Como el Cl- no es bombeado
activamente su potencial de equilibrio es muy cercano al potencial de reposo.
Membranas Biológicas
Potencial de Membrana
En un momento determinado, dos son los factores que modulan la influencia
que un ión ejercerá sobre el potencial de membrana

 Gradiente de potencial

 Permeabilidad de la membrana para el ión

Gradiente de potencial: es la carga eléctrica neta disponible para mover el ión


a través de la membrana. Se calcula como la diferencia entre el voltaje en el
que el ión quiere estar (potencial de equilibrio) y el potencial de membrana. De
modo que Gradiente de Potencial = Em - Eion

Permeabilidad de la membrana: en la membrana en reposo mientras que el


Gradiente de Potencial para el K+ es muy bajo, su permeabilidad es muy alta.
Por el contrario en la membrana en reposo el Na+ tiene un Gradiente de
potencial muy alto pero su permeabilidad es casi nula. Es por ello que el K+ es
mucho mas importante que el Na+ en la modulación del potencial de reposo de
la membrabna.
Membranas Biológicas
Potencial de reposo
Membranas Biológicas
Potencial de reposo
Membranas Biológicas
Potencial de reposo
Membranas Biológicas
Potencial de reposo

RT PK  [K+]out + PNa  [Na+]out


E =  ln
F PK  [K+]in + PNa  [Na+]in

Cambian

No Cambian
Membranas Biológicas
Componente Lipídico

 Adoptan la conformación de una doble


capa con los grupos hidrofílicos orientados
hacia los espacios intra y extracelular y el
hidrofóbico hacia el interior de la membrana
ATP
http://www.nernstgoldman.physiology.arizona.edu/launch/
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
ion peso atómico radio ion radio ion hidratado mobilidad en
campo eléctrico

Na+ 23.0 0.95Å 3.4Å 5.2

K+ 39.0 1.33 2.2 7.6

K+ Na+
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Fosfatidil-
colina Fosfatidil-
serina
Fosfatidil-
etanolamina Fosfatidil-
Esquema inositol
Membranas Biológicas
Transportadores ATP-Dependientes

Na+

ATP ADP + Pi K+

Bomba Na+ / K+
J1-2 = k * C1

J2-1= k * C2

Jneto = k * (C1-C2)
Membranas Biológicas
Transportadores ATP-Dependientes
Na+

K+
ATP ADP + Pi
Na+

ATP ADP + Pi K+
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Configuración «cell-attached»
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Configuración «whole cell»
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Configuración «outside-out»
Membranas Biológicas
Canales Voltaje dependientes
Configuración «inside-out»
Membranas Biológicas
Potencial de Reposo

- + negative positive
-+
-+ -+ -+
-+ -+ -
-+ + +
-+ -+
-+ - -+
-+ -
-+ -+ +
-+
-+
-+
Concentraciones iónicas intra y extracelulares

Interior Exterior Potencial de Equilibrio


Na+ 15 mM 150 mM +60 mV
K+ 150 mM 6 mM -90 mV
Cl- 9 mM 125 mM -70 mV
Ca2+ 100 nM 1.3 mM +130 mV

 La apertura de canales de Na+ o de Ca2+ disminuye la negatividad


intracelular (despolarización).

 La apertura de canales de K+ aumenta la negatividad


intracelular (repolarización).
El tamaño del poro guarda estrecha correlación con el número
de subunidades transmembrana que conforman la macromolécula
proteica (proteina canal)

Canales activados Canales activados Gap junctions


por voltaje (Na+, por ligandos o por (conexinas)
K+, Ca2+) Estiramiento (receptor
de acetilcolina)

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