Test de AMES

Test de AMES
Campos González Edith Alejandra

Hernandez Amador Juan Pablo
Mora Flores Luis Angel
Ensayo biológico utilizado en el campo de la
medicina y la investigación científica para
Desarrollado en la
evaluar la capacidad mutagénica de
década de 1970 por
diferentes sustancias químicas. el científico
Cualquier agente estadounidense y
químico que duplica Premio Nobel Bruce
el número de
mutantes que
N. Ames.
ocurren
espontáneamente.

Permite identificar compuestos que pueden

causar mutaciones genéticas y, por lo tanto,
tienen el potencial de ser carcinogénicos o
teratogénicos en seres humanos.
¿CÓMO FUNCIONA?
Se basa en la utilización de cepas
mutantes de la bacteria Salmonella
typhimurium.
Son deficientes en su capacidad para
sintetizar el aminoácido histidina debido
a genes específicos.
Estas cepas bacterianas, his-, requieren
histidina en el medio de cultivo para
poder crecer y replicarse.
¿CÓMO FUNCIONA?

En condiciones normales, estas cepas no pueden crecer

en un medio sin histidina; sin embargo, si se les expone
a un compuesto mutagénico, pueden revertir a su
fenotipo salvaje, adquiriendo la capacidad de sintetizar
histidina y crecer en un medio sin este aminoácido.

PROCEDIMIENTO DE LA
PROCEDIMIENTO GENERAL DE LA
APLICACIÓN DEL TEST
1.Una semana antes de la práctica se preparan
placas de medio mínimo sales con glucosa.
2.El día anterior a la práctica se reparten 150 µl de la
solución de biotina y 2 µl de la solución de histidina
a un subconjunto de placas.
3.Se parte de un cultivo fresco de la cepa TA100 de
S. typhimurium.
4.Se hace una suspensión de esta cepa en suero
fisiológico estéril.
5.Se embebe un hisopo estéril en esta suspensión.
Se escurre el exceso de líquido contra los bordes del
tubo.
6. Se utiliza el hisopo para distribuir la suspensión sobre la placa, cubriendo
toda la superficie de ésta.
7.Se deja secar la placa (aprox. 10 mins).
8.Así se preparan 10 placas, que serán

utilizadas de la siguiente manera: ocho
experimentales, un control positivo y un control
negativo. Esto se debe a que se ensaya cada
potencial mutágeno por duplicado.
9.Para realizar el ensayo se procede de la

siguiente manera: introducir una pinza en
etanol, flamear para esterilizar, tomar un disco
de papel de filtro estéril y depositarlo sobre
cada placa inoculada.
10.En cada placa experimental se deposita una gota (75 µl) sobre el disco de
papel de filtro de cada uno de los compuestos a ensayar.
11.En la placa de control negativo, el disco de papel de filtro será embebido con
agua estéril (75 µl).
12.En la placa de control positivo, el disco

de
papel de filtro será embebido con azida de
sodio dilución 1/50 (75 µl).
13.Se incuban las placas invertidas a 37° C

durante 48 hrs.
14.Luego del período de incubación se analizan

los resultados.

PROBLEMATICA
La presencia de sustancias mutagénicas en en la vida cotidiana,
particularmente en aquellos destinados al contacto con alimentos
y bebidas, puede llegar a representar una problemática para
salud pública y el medio ambiente.
Debido a los efectos adversos relacionados principalmente con

daños al ADN, problemas cardiovasculares, afectaciones en la
fertilidad, alteraciones neurológicas, entre otras enfermedades, así
como la alteración de receptores ambientales como
microorganismos, plantas y animales.
VENTAJAS
1. Es una prueba sencilla y rápida para
detectar si una sustancia es
mutagénica.
2. Es un test para la identificación
rápida de la producción de cáncer
por sustancias.
3. Existe una similitud entre las lesiones
que se producen en el ADN de la
bacteria y en las células humanas.
4. Gran amplificación biológica.
DESVENTAJAS
Los resultados de la prueba no siempre son predictivos del riesgo en
seres humanos.
La extrapolación de los resultados puede verse limitada por diferencias
en las vías metabólicas, la biodisponibilidad, la concentración y la
duración de la exposición entre bacterias y humanos.
Por lo tanto, deben interpretarse junto con otros datos toxicológicos y

estudios en para evaluar el riesgo potencial de una sustancia en seres
humanos.
BIBLIOGRAFIA
Test AMES (S/f). Cun.es. Recuperado el 7 de mayo de 2023, de

https://www.cun.es/diccionario-medico/terminos/test-ames
Test_de_Ames. (s/f). Quimica.es. Recuperado el 7 de mayo de 2023, de
https://www.quimica.es/enciclopedia/Test_de_Ames.html
Ames Test - Scientific background - Xenometrix. (9 de mayo de 2023)
https://www.xenometrix.ch/ames-test-scientific-background.html
(S/f-b). Edu.uy. Recuperado el 10 de mayo de 2023, de
https://eva.interior.udelar.edu.uy/pluginfile.php/72645/mod_folder/cont
ent/0/EnsayodeAmes.pdf?forcedownload=1

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Permite identificar compuestos que pueden

En condiciones normales, estas cepas no pueden crecer

7.Se deja secar la placa (aprox. 10 mins).

8.Así se preparan 10 placas, que serán

9.Para realizar el ensayo se procede de la

12.En la placa de control positivo, el disco

13.Se incuban las placas invertidas a 37° C

14.Luego del período de incubación se analizan

Debido a los efectos adversos relacionados principalmente con

Por lo tanto, deben interpretarse junto con otros datos toxicológicos y

Test AMES (S/f). Cun.es. Recuperado el 7 de mayo de 2023, de

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