PRACTICA DE EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN DEL DNA. Leiner

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PRACTICA DE EXTRACCIÓN Y SEPARACIÓN DEL DNA

Introducción

ADN es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico. Éste constituye el material


genético de los organismos. Es el componente químico primario de los
cromosomas y el material del que los genes están formados, los genes contienen
la información que recibimos de nuestros padres, para la síntesis de proteínas que
finalmente se expresan en el fenotipo de los individuos. Hasta el momento No
existe otro mecanismo conocido de herencia que no sea dado a través del DNA.
Esta doble cadena de nucleótidos unidas por puentes de hidrógeno, alberga los
secretos de cada especie. Es por esto que su estudio y manipulación ha
revolucionada las ciencias biológicas y a partir de él se ha creado una gran rama,
llamada Biología Molecular.

El desarrollo de la biología molecular ha sido posible gracias manipulación de esta


molécula, por eso desde sus inicios, su extracción, separación y purificación ha
sido fundamental para los avances en esta área. Existen múltiples técnicas para
su extracción y purificación, las hay desde muy tecnificadas y costosas, como el
uso de kit comerciales que tienen columnas de sílica hasta las más caseras en
donde se usan ingredientes básicos como jabón y sales. En esta práctica
usaremos una técnica sencilla que permite su extracción y separación, teniendo
en cuenta que no se obtiene un DNA puro (sin proteínas) como se obtiene con los
kit comerciales.

Objetivo

Extraer y separar DNA de una muestra de frutas, verduras, plantas usando un


método sencillo.
Materiales

1. Vegetales, Frutas, Plantas


2. Agua
3. Jabon, detergente
4. Alcohol antiseptico
5. Recipientes vasos vidrios, copas
6. Sal
7. Macerador
8. Enzimas ablanda carnes

Procedimiento y preguntas

1. En un recipiente agregar 1gramo de la muestra y 2 ml de agua y macerar


¿Qué se espera que suceda con las células en este procedimiento?
R// Con este primer paso lo que se busca es hacer un método de ruptura
celular idóneo, el cual es necesario para poder hacer la ruptura de la grasa
de la membra y la rigidez de la pared celular, por esto es que se necesita
utilizar un método mecánico para romperlas.
2. Colar y agregar detergente, enzima y sal
Que le causa a la celula estas sustancias?
R// El detergente ayuda a romper las membranas celulares y liberar el
núcleo.
El ablandador de carne o cualquier tipo de enzima que se haya usado en su
caso, funciona como un sintetizador de proteínas, ayudando a que algunas
proteínas no degraden el ADN
La sal, esta permite que las moléculas de ADN puedan unirse, en vez de
repelerse entre sí.
3. Dejar a temperatura ambiente por 10 minutos
Qué esta ocurriendo en la celula?
R// Esto se hace para permitir que la disolución de lisis cumpla su función,
dónde la sal y el ADN permanecerán disueltos interaccionando
electrostáticamente con el agua

4. Agregar ¾ ml de Alcohol anticeptico dejar en reposo por maximo 30


minutos
Cuál es la función de este y que cambios se evidencian?
R// La baja temperatura ralentiza la actividad enzimática, evitando que
las moléculas biológicas, como el ADN, sean degradadas tras la ruptura
de las membranas celulares que conlleva la liberación de los componentes
subcelulares
5. Observar el DNA en la parte superior de la mezcla, se puede ver como
motas de algodón

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