Guia Biologia Ii-Prueba 8-LD

2021
GUÍA DE APOYO
BIOLOGÍA CELULAR
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA VIDA / UNIVERSIDAD ANDRÉS BELLO
01
“Proyectos de Investigación Educativa 2018” (Proyecto PIED-4/2018). / Ilustrado por Lucas Olivares A.
Ilustrado por Lucas Olivares Alvarado
02
GUÍA DE APOYO
BIOLOGÍA CELULAR
2021
UNIVERSIDAD ANDRÉS BELLO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA VIDA
“PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN EDUCATIVA 2018” (PROYECTO PIED-4/2018). 03

CONTENIDOS GENERALES
I
INTRODUCCIÓN A LA CÉLULA
__________________________________________________
INTRODUCCIÓN A LA CÉLULA............................................................................... 09
II
MÉTODOS DE ESTUDIO UTILIZADOS BIOLOGÍA CELULAR
__________________________________________________
MÉTODOS DE ESTUDIO UTILIZADOS BIOLOGÍA CELULAR �� 55
III
ORGANIZACIÓN INTERNA DE LA CÉLULA
__________________________________________________
ORGANIZACIÓN INTERNA DE LA CÉLULA ........................................................ 85
04
IV
GENÉTICA MOLECULAR
__________________________________________________
GENÉTICA MOLECULAR...........................................................................................239
V
DIVISIÓN CELULAR
__________________________________________________
DIVISIÓN CELULAR....................................................................................................297
R
REFERENCIAS
__________________________________________________
REFERENCIAS.................................................................................................................360
D
DESARROLLADORES
__________________________________________________
DESARROLLADORES...................................................................................................361
05
06
Cómo leer la guía
CÓMO LEER LA GUÍA
Esta guía fue confeccionada como una herramienta de aprendizaje para estudiantes y material de apoyo para
profesores y tutores de los cursos de Biología celular. De forma sintética podrás analizar las temáticas más relevantes que
deberías conocer y entender en este curso. El aprendizaje integrativo, que proporciona directrices para un conocimiento
permanente y fortalecido, se logra con la asistencia y participación en clases, estudio de apuntes y libros sugeridos. Por
lo cual, esta guía es un material de apoyo que proporciona el conocimiento base necesario para abrir la mente al mundo
de la ciencia mediante textos, imágenes y actividades que permitirán una autoevaluación permanente y descubrir lo que
te falta por aprender o debes reforzar.
La Guía de Apoyo Biología celular está organizada en 5 unidades, que contienen un despliegue de temáticas marcadas
como subtítulos. Estos están asociados a números de capítulos del libro guía del curso donde podrás encontrar de forma
extensa el contenido planteado en esta guía. Cada una de estas temáticas se desarrollan mediante la mixtura de textos,
imágenes, gráficas y palabras claves que permitirán buscar más información de forma rápida y puntual. Al final de cada
unidad encontrarás un cuestionario de autoevaluación que te permitirá ver el nivel de conocimiento en la respectiva
temática. Te recomendamos desarrollar las actividades de cada cuestionario, y luego cotejarlas con las respuestas de cada
autoevaluación que se ubican al final de la guía, de esta forma podrás evaluar tus debilidades temáticas y reforzarlas.
Te invito a usar esta guía como complemento a tus clases. Para profundizar debes apoyarte en el libro guía que
aparece en el programa del curso, recuerda que esto es solo una síntesis. Este material puedes utilizarlo como lectura
previa a cada clase y también para repasar las materias vistas en aula. Algunas figuras están en inglés, pero si prefieres,
puedes buscarlas en español en el libro guía en versión español.
07
08
UNIDAD I
09
ÍNDICE
1 N
__________________________________________________
1.Introducción a la célula.............................................................................................................................. 13
La célula (Capítulo 1, Alberts et al., 2010).................................................................................................. 13
La doble hebra de ADN (Capítulo 1, Alberts et al., 2010)........................................................................ 14
Características funcionales de la célula (Capítulo 1, Alberts et al., 2010).............................................. 15
Cuestionario 1: Introducción a la célula...................................................................................................... 18
2
COMPONENTE QUÍMICOS DE LA CÉLULA I
__________________________________________________
2. Componentes químicos de la célula I...................................................................................................... 21

La química de la vida es una química muy especial (Capítulo 2, Alberts et al., 2010). ....................... 21
Tipos de enlaces químicos (Capítulo 2, Alberts et al, 2010)..................................................................... 22
Las células están formadas de compuestos de carbono (Capítulo 2, Alberts et al, 2010)..................... 24
Cuestionario 2: Componentes químicos de la célula I.............................................................................. 28
3
N
COMPONENTE QUÍMICOS DE LA CÉLULA II

__________________________________________________
3. Componentes químicos de la célula II.................................................................................................... 31

Lípidos (Capítulo 2, Alberts et al., 2010)..................................................................................................... 31
Aminoácidos (Capítulo 3, Alberts et al., 2010).......................................................................................... 32
Aminoácidos (Capítulo 3, Alberts et al., 2010).......................................................................................... 32
Ácidos nucleicos (Capítulo 2 y 4, Alberts et al., 2010).............................................................................. 34
Cuestionario 3: Componentes químicos de la célula II............................................................................. 37
10
4
PROTEÍNAS, ESTRUCTURA Y FUNCIÓN
__________________________________________________
4. Proteínas, estructura y función................................................................................................................ 41
Forma y estructura de las proteínas (Capítulo 3, Alberts et al., 2010).................................................... 41
Las proteínas se pueden clasificar en muchas categorías o familias (Capítulo 3, Alberts et al., 2010)................. 43 43
Función de las proteínas (Capítulo 3, Alberts et al., 2010)....................................................................... 44
Cuestionario 4: Estructura y función de las proteínas.............................................................................. 47
R
RESPUESTA CUESTIONARIOS
__________________________________________________
Respuestas cuestionario 1: Introducción a la célula.................................................................................. 50

Respuestas cuestionario 2: Componentes químicos de la célula I........................................................... 51
Respuestas cuestionario 3: Componentes químicos de la célula II.......................................................... 52
Respuestas cuestionario 4: Estructura y función de las proteínas........................................................... 53
11
12
1
RESUMEN
El estudio de la biología celular nos ayuda a entender el funcionamiento de la vida. Para abordar este tema
introduciremos el concepto de célula como base de la vida. Todas las células se rigen por las mismas leyes químicas
y físicas; todas comparten moléculas similares e instrucciones escritas en el código genético (ADN). Sin embargo, en
la naturaleza se da una gran diversidad de formas de vida unicelulares y multicelulares. Podemos identificar células
procariontes y eucariontes. Ambas difieren en estructura, pero comparten algunos procesos biológicos. Las células
eucariontes tienen organelos y forman organismos multicelulares, además de que son más complejas que las células
procariontes. Para poder observar a las células utilizamos los distintos tipos de microscopio que existen. La similitud en
los procesos biológicos, físicos y químicos permite usar diferentes organismos como modelos de estudios para entender
el funcionamiento de organismos multicelulares más complejos, como el ser humano.
Palabras clave: célula, genoma, nucleótidos, cadena polinucleotídica, código genético, ADN, ARN, doble hebra,
azúcares-fosfatos, organismo multicelular, teoría celular, microscopía, eucariontes, procariontes, endosimbiosis, organelos,
organismos modelos.
La célula (Capítulo 1, Alberts et al., 2010)

La célula es la unidad morfológica y funcional de todo ser vivo. Nosotros somos organismos compuestos por muchas
células (multicelulares), de diferentes tipos y con diferentes funciones. Nuestra historia parte con un huevo fecundado
por un espermatozoide. Este evento de fecundación pasa a ser el origen de un organismo complejo (Fig.1). A partir de
este huevo fecundado se generarán otras células que llevan el mismo manual de instrucciones, pero que, de algún modo,
se desarrollarán y diferenciarán para cumplir funciones diferentes y específicas. Este manual de instrucciones o genoma
determina la naturaleza del organismo multicelular completo.
Figura 1. Diversidad biológica. La información

hereditaria contenida en el huevo fecundado
determina la naturaleza de todo el organismo
multicelular. A pesar de que todas las células del
organismo contienen la misma información (ADN),
esta información no se expresa al mismo tiempo,
lo que da lugar a una gran diversidad biológica y
permite la formación de tejidos y órganos diferentes.
13
Las células tienen una química fundamental similar, ya que están compuestas del mismo tipo de moléculas que
participan en el mismo tipo de reacciones químicas. En todas las células, las instrucciones genéticas –los genes– están
almacenadas en la molécula de ADN (ácido desoxirribonucleico). Esta molécula de ADN está formada por cadenas de
unidades (o monómeros) llamadas nucleótidos (Fig. 2A y B). Más adelante veremos que los nucleótidos están a su vez
formados por: una base nitrogenada, un azúcar y grupos fosfato.
A B
Figura 2. Estructura del ADN. (A) Nucleótido. (B) cadena
polinucleotídica. (C) ADN de doble hebra.
C D
La doble hebra de ADN (Capítulo 1, Alberts et al., 2010)

El ADN es una molécula compuesta por dos hebras de muchos nucleótidos (Fig. 2C), que se mantienen unidas
por interacciones débiles (enlaces puente de hidrógeno), que se forman entre los pares de bases A-T y C-G. Estas
interacciones son débiles comparadas con la unión de azúcares-fosfatos (Fig. 2B), esto permite que las dos hebras de
ADN se separen sin que la ninguna de las hebras del ADN se rompa. Además, permite la replicación de cada hebra
según su cadena molde (Fig. 3).
Figura 3. Copia del ADN durante la replicación. Cada célula hija conserva una hebra original y copia usando esta como molde, una hebra nueva.
Referencia, Figura 1-3. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
14
Características funcionales de la célula (Capítulo 1, Alberts et al., 2010)
Todas las células transcriben porciones de su información hereditaria de la misma forma, a través de un ARN (ácido
ribonucleico) intermediario. Luego, esta información es traducida con el fin de formar proteínas. La Figura 4, muestra
cómo fluye la información desde el ADN a las proteínas, pasando por su intermediario de ARNm (Dogma central de
la biología molecular). Esta información también puede fluir desde el ARN al ADN, algo que hemos aprendido de los
virus (transcripción reversa). Todas las células traducen el ARNm en proteínas de la misma manera. Todas las células
usan proteínas como catalizadores, formando estructuras, transporte, defensa, entre muchas otras funciones.
Figura 4. Dogma central de la biología molecular.
Aminoácidos
Además de cómo están compuestas las células, podemos clasificar sus funciones básicas en:
1) Nutrición. Las células toman sustancias del medio, las transforman, liberan energía y eliminan productos de desecho,
mediante el metabolismo.
2) Crecimiento y multiplicación. Las células son capaces de dirigir su propio crecimiento y multiplicación. Una célula
crece y se divide, formando dos células idénticas a la progenitora.
3) Diferenciación. En este proceso, células inmaduras (no especializadas) sufren cambios de forma o función hasta
convertirse en un tipo celular especializado.
4) Señalización. Las células responden a estímulos químicos y físicos tanto del medio externo como de su interior. Las
células de un organismo frecuentemente se comunican entre sí mediante señales químicas o físicas.
5) Evolución. Por cambios hereditarios que pueden influir en la adaptación de la célula a su entorno. El resultado de la
evolución es la selección de aquellos organismos mejor adaptados a vivir en un medio particular.
En base a estas funciones podemos entender cómo la vida funciona y se relaciona. En este sentido, también podemos
designar niveles de organización biológica, desde un átomo a organismo o viceversa (Figura 5).
Figura 5. Niveles de organización. Podemos

ver desde un tejido, células vivas hasta átomos.
Cada panel tiene una magnificación de 10 en una
progresión imaginaria desde un dedo, piel, células
de la piel, mitocondria, ribosomas, ribosoma, grupo
de átomos y un átomo.
Referencia: Figura 1–9 Introducción a la biología
celular, segunda edición. Editorial Médica
Panamericana 2004.
15
Este orden en el nivel de organización que se muestra en la Figura 5, nos da una idea de los tamaños de las células,
organelos celulares y proteínas que forman parte de nuestros tejidos.
Para poder visualizar las células necesitamos microscopios. Podemos clasificarlos en dos grupos: ópticos y electrónicos.
Estos microscopios difieren en la radiación utilizada para iluminar los objetos. En el caso de los ópticos es la luz visible,
mientras que en los microscopios electrónicos es un haz de electrones. También difieren en el tamaño de objetos que
se puede observar con ellos. En este sentido algunos conceptos importantes son la magnificación y la resolución. La
magnificación es la capacidad de aumentar el tamaño de una imagen. En cambio, la resolución, es la capacidad de
producir una imagen nítida o imágenes bien definidas de puntos situados muy cerca uno del otro.
Algunos ejemplos de microscopios ópticos son los microscopios campo brillante o campo claro, microscopía de
contraste de fases, microscopía de interferencia diferencial de contraste o de Nomarski, microscopio de Fluorescencia
y confocal. En cuanto a microscopía electrónica se destacan el microscopio electrónico de transmisión y microscopio
electrónico de barrido.
Para observar las muestras al microscopio estas deben ser preparadas. En el caso de observación mediante microscopía
óptica se utilizan tinciones o la emisión de fluorescencia cuando ciertas moléculas teñidas con compuestos fluorescentes
(fluorocromos), que absorben luz de determinadas longitudes de onda, son excitadas para que emitan luz en otras
longitudes de onda. En microscopía confocal por ejemplo, para excitar fluorocromos se utilizan láser y la imagen de una
muestra puede ser reconstruida tridimensionalmente con ayuda digital.
En la observación de una muestra con microscopios electrónicos las muestras son teñidas con metales pesados como
el tetróxido de osmio, citrato de plomo o el oro-paladio. El microscopio electrónico proporciona aumento de millones
de veces, y una resolución en muestras biológicas de unos 2 nm (nanómetros).
El estudio de las células permitió la construcción de los postulados de la teoría celular. Estos son:
1) La célula es la unidad morfológica de todo ser vivo.

2) Toda célula deriva de una célula precedente.
3) La célula es la unidad fisiológica de la vida.
4) Cada célula contiene toda la información hereditaria.
Cuando un organismo está solo compuesto de una célula, se conoce como organismo unicelular (ejemplos: protozoos
y bacterias). Cuando un organismo está compuesto por varias células se les llama pluricelulares. Podemos agrupar a los
organismos en los dominios filogenéticos Procariontes (bacterias y arqueas) y Eucariontes (Fig. 6).
Figura 6. Procedencia de las células eucariontes.

Los linajes eucariontes, eubacterias y arquea
divergen uno del otro muy tempranamente en la
historia de evolutiva, formando la diversidad de
organismos que conocemos hoy en día
Referencia Figura 1–29 Introducción a la
biología celular, segunda edición. Editorial
Médica Panamericana 2004.
Los organismos procariontes viven generalmente como organismos unicelulares, o bien formando comunidades
denominadas colonias. Viven en variados nichos ecológicos. También, podemos clasificarlos según el uso de O2 para
vivir (aerobios o anaerobios) o en base a su fuente de nutrientes. Por ejemplo: organotrofos (utilizan diversas fuentes
16 orgánicas), fotótrofos (cosechan energía luminosa de diversas formas) o litótrofos (usan como combustible el ácido
sulfúrico, H2, Fe+2 y nutrientes inorgánicos).
Además, los organismos procariontes no presentan núcleo ni otros organelos membranosos, aunque muchos poseen
una pared celular que les confiere protección extra.
Las células eucariontes son mucho más complejas, ya que presentan núcleo y organelos membranosos. Pueden ser
unicelulares (protistas, levaduras) o multicelulares (plantas, animales, etc.).
La célula eucarionte tiene diferentes organelos: núcleo, mitocondrias, retículo endoplásmico, aparato de Golgi,
peroxisomas, vesículas y lisosomas. Estos organelos se encuentran distribuidos en el citosol. Podemos encontrar células
eucariotas vegetales y animales. Las células eucariotas vegetales difieren de las células animales en la presencia de
cloroplastos, vacuolas y también en su morfología. La presencia de mitocondrias o cloroplastos en la célula eucariota
se explica mediante la teoría de la endosimbiosis. Es decir, es probable que hayan evolucionado a partir de una bacteria
aeróbica de vida libre que fue incorporada al ser fagocitada por una célula eucariota ancestral (Fig. 7).
Figura 7. Teoría de la endosimbiosis, que explica que

tanto mitocondrias como cloroplastos evolucionaron
a partir de una bacteria incorporada por fagocitosis
por una célula eucariótica ancestral. En la figura se
ejemplifica el caso de la mitocondria.
Referencia Figura 1–29. Introducción a la biología
celular, segunda edición. Editorial Médica
Panamericana 2004.
Tabla 1. Comparación de estructuras entre eucariotas y procariotas.
A pesar de la gran diversidad que observamos, todas las células tienen una química y física fundamental similar.
Están compuestas del mismo tipo de moléculas, las que participan en el mismo tipo de reacciones químicas. En todas las
células, las instrucciones genéticas determinan el destino que la célula cumplirá. Estas reglas básicas de la vida permiten
una conexión entre diferentes organismos. Debido a la similitud que existe entre los diversos organismos, podemos
aprovechar esta para entender y estudiar cómo funciona la vida. Para esto, se utilizan organismos modelos, los que han
permitido grandes avances en ciencia y medicina. Entre los organismos más utilizados encontramos: bacterias, roedores,
anfibios, insectos, peces, invertebrados, levaduras, algas y plantas.
17
CUESTIONARIO 1
1.- Complete el siguiente crucigrama asociando términos de organismos, estructuras, procesos u organelos celulares con
las definiciones mostradas.
- Horizontal
2. Tipo de molécula donde se guarda la información genética.

3. Proceso por el cual se copia el ADN.
5. Célula sin organelos membranosos.
6. Cambios hereditarios que pueden influir en la adaptación de la célula a su entorno.
7. Unidad morfológica y funcional de todo ser vivo.
- Vertical
1. Mecanismo mediante el cual las células responden a estímulos químicos y físicos.

18 4. Tipo de microscopía óptica.
2.- Preguntas de desarrollo
a) ¿En qué se diferencian un microscopio de barrido y uno de fluorescencia?
b) En al ADN la unión entre los pares de bases es débil comparada con la unión de azúcares-fosfatos. ¿En qué influye
que la estructura del ADN sea así?
c) ¿Cómo se explica que la información genética fluya de manera similar en todas las células?
d) ¿Por qué se dice que todas las células tienen una química fundamental similar?
3.- Asigne una ubicación a los elementos descritos en la columna izquierda en las figuras ubicadas en la derecha.
Núcleo
Ribosomas
Membrana celular Célula eucarionte animal
Vesículas
Retículo endoplasmático rugoso
Aparato de Golgi
cápsula
Mitocondrias
Vacuolas
Citoplasma
Lisosomas
Pared celular
Clorplastos
Flagelo
ADN
Célula procarionte bacteria

Célula eucarionte vegetal
19
20
2
COMPONENTES QUÍMICOS
DE LA CÉLULA I
RESUMEN
Las moléculas se forman a través de la interacción de sus átomos, diferentes tipos de enlaces están involucrados
cada cual con sus propiedades particulares. El entender cómo se relacionan, permite entender cómo se conforman los
organismos y cómo estos responden frente a ciertas propiedades del ambiente. Describiremos las propiedades del agua
y el comportamiento de moléculas hidrofílicas e hidrofóbicas, así como también, las características de los ácidos y las
bases. Examinaremos las propiedades del carbono y los grupos más comunes que lo contienen. Finalmente, veremos
ejemplos de carbohidratos.
Palabras clave: moléculas, átomos, orbitales, enlaces covalentes y no covalentes, agua, moléculas hidrofílicas e
hidrofóbicas, carbono, carbohidratos, polímeros, catión, anión, dipolos, moléculas anfipáticas, anfótero, ácidos, bases,
hidratos de carbono, azúcares, isómeros, enlaces glucosídicos, condensación, hidrólisis, lípidos, aminoácidos, nucleótidos.
La química de la vida es una química muy especial (Capítulo 2, Alberts et al., 2010).
La vida se basa en el carbono, depende exclusivamente de reacciones químicas que ocurren en soluciones acuosas y
en un rango determinado y restringido de temperaturas.
La vida es compleja y altamente regulada, y está dominada y coordinada por colecciones de moléculas poliméricas que
permiten el crecimiento y la reproducción de los organismos. Las moléculas están formadas por distintas combinaciones
de átomos que, a su vez, son las unidades más pequeñas de la materia que poseen propiedades de un elemento químico
en particular y que determinan el tamaño, la estructura y la función de las células vivientes. El núcleo del átomo es
denso, con carga eléctrica positiva, formado por protones (poseen carga +) y neutrones (eléctricamente neutros), los que
aportan la masa del átomo. También posee una nube electrónica ligera compuesta por electrones, que son partículas
eléctricamente negativas y casi sin masa que rodean u orbitan al centro. El peso atómico está determinado por el número
de protones más el número de neutrones (debido a su tamaño los electrones no son considerados para el cálculo de la
masa) (Fig. 1).
Figura 1. Estructura de un átomo. (A) Estructura de
un átomo de hidrógeno. (B) Estructura de un átomo de
carbono. Se puede observar el número y peso atómico
(el cual depende del número de protones y neutrones).
Referencia, Figura 2-1 Biología molecular de la célula,
quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones
Omega 2010).
21
Una forma de clasificar los átomos es a través de la tabla periódica, lo que permite entender cómo estos podrían
interactuar y formar moléculas. Los elementos químicos son átomos de un número específico de protones en el núcleo.
Si analizamos, por ejemplo, la abundancia de alguno de estos elementos químicos en los seres vivos, nos daremos cuenta
que el carbono es un elemento muy importante (Fig. 2A).
En los elementos químicos, la nube electrónica donde ese encuentran los electrones posee varias orbitas. Los
electrones más cerca del núcleo son atraídos más fuertemente a él y esta órbita sólo puede albergar un máximo de dos
electrones. La segunda órbita alberga un máximo de 8 electrones, al igual que la tercera. La cuarta, en cambio, puede
albergar 18 electrones. Un átomo será estable cuando sus orbitales estén llenos (Fig. 2B).
Figura 2. Átomos en la naturaleza. (A) Comparación de la abundancia relativa de elemtnos esenciales en el mundo no viviente respecto a la
abundancia en tejidos y animales. (B) Orbitales ocupados por sus respectivos electrones en algunos elementos comunes.
Referencia, Figura 2-3 y figura 2-4 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Las moléculas se forman cuando dos o más átomos iguales o diferentes se combinan. Esta combinación de átomos se
produce por la búsqueda de estabilidad, en donde los átomos interactúan con el fin de llenar sus orbitales. Por ejemplo,
en esta búsqueda de estabilidad, cuando un átomo tiene menos electrones que el número de protones en el núcleo, se
le denomina catión, y cuando el átomo tiene más electrones que el número de protones en el núcleo se le llama anión.
22
Tipos de enlaces químicos (Capítulo 2, Alberts et al, 2010)
Los enlaces entre átomos permiten la formación de moléculas. Para formar enlaces los átomos comparten o disputan
electrones para llenar sus orbitales – un átomo cede los electrones y otro los recibe. Podemos diferenciar dos tipos de
enlaces químicos: covalentes y no covalentes.
Enlace covalente
Una característica importante de los enlaces covalentes es que son muy fuertes. Se forma cuando un átomo comparte
un electrón con otro átomo para llenar su orbital (Fig. 3A).
La fuerza del enlace está definida como la energía necesaria para romper el enlace. Además, se van a formar tantos
enlaces covalentes como sea necesario para completar el número de electrones del orbital más externo, quedando los
ángulos de estos enlaces definidos (geometría del enlace). Puede haber enlaces covalentes simples, dobles e incluso
triples. Cuando los electrones en un enlace covalente son atraídos con mayor fuerza por uno de los átomos se forman 2
polos (dipolos).
Figura 3. Comparación de enlaces entre átomos. (A)
Enlace covalente. (B) Enlace iónico.
Referencia, Figura 2-5 Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
Cuando los electrones de un enlace covalente se comparten de manera equitativa se forma un enlace apolar. Moléculas
con enlace covalente polar se disuelven en solventes polares (ejemplo: un enlace O-H). Moléculas con enlace covalente
apolar se disuelven en solventes no polares (ejemplo: un enlace C-H o C-C).
Enlaces no covalentes
Un enlace no covalente es un enlace débil. Ejemplos de estos son: enlaces iónicos, puentes de hidrógeno, interacciones
hidrofóbicas y fuerzas de van der Waals.
En los enlaces iónicos, uno de los átomos toma un electrón del orbital más lejano (capa de valencia) del otro átomo,
quedando el primero con carga negativa por el electrón adicional y el segundo con carga positiva al perderlo (Fig. 3B).
Las moléculas con enlaces iónicos son solubles en solventes polares, por lo que se rompen con facilidad en ambiente
acuoso, obteniéndose los iones que lo forman (ejemplo NaCl).
Los puentes de hidrógeno se forman cuando un átomo de hidrógeno queda entre 2 átomos que atraen electrones
(generalmente oxígeno o nitrógeno). Cuantos más enlaces puentes de hidrogeno estén alineados, más fuerte será la
interacción entre los átomos (por ejemplo, adenina con timina- posee 2 enlaces y guanina con citosina posee 3 enlaces
puente de hidrogeno en el ADN). También serán más fuertes cuando los 3 átomos están alineados (ejemplo entre O-H
o entre N-H).
Las interacciones hidrofóbicas se producen debido al empuje de los grupos apolares o hidrofóbicos juntándolos para
reducir el contacto con grupos polares como el agua. Son responsable de varias configuraciones tanto en polímeros como
en las proteínas. Ejemplo de estas interacciones son las cadenas de hidrocarbonos en medio acuoso.
Fuerzas de van der Waals son el resultado de la participación de la fuerza de repulsión (que impide que dos átomos se
acerquen demasiado) y la fuerza de dispersión (atracción entre átomos). Estas fuerzas permiten la formación de dipolos
transitorios en la totalidad de la molécula.
La participación de enlaces covalentes y no covalentes permiten la formación de macromoléculas y la interacción de 23
estas (Fig. 4). Aun cuando una interacción débil por sí misma es insuficiente para estabilizar una estructura, la sumatoria
de miles de ellas confiere estabilidad biológica.
Figura 4. Formación de macromoléculas. Los enlaces covalentes son enlaces fuertes que permiten la formación y la estabilidad de las macromoléculas.
Los enlaces no covalentes son enlaces débiles, pero también son muy importantes para el ensamblaje de macromoléculas y la estabilidad biológica.
Referencia, Figura 2-32 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Propiedades del agua.

El agua corresponde al 70% del peso de la célula. La mayoría de las reacciones intracelulares ocurren en un medio
acuoso, por lo que la vida se articula en las propiedades del agua. Importantes propiedades del agua son:
-Elevada tensión superficial.

-Es un buen solvente porque es un dipolo.
-Tiene constante dieléctrica elevada.
-Es disolvente de moléculas anfipáticas, es decir, moléculas que tienen un extremo polar y un extremo apolar.
-Puede actuar como ácido o base (ver próximo apartado: ácido y base), por lo tanto, es anfótero.
-Tiene elevado calor específico, temperatura de ebullición, calor de vaporización y conductividad calórica.
-Es disolvente de compuestos polares de naturaleza no iónica.
-Tiene capacidad de solvatación o hidratación.
Todas las sustancias que tienen afinidad por el agua, es decir, son solubles en agua, se llaman hidrofílicas. Por el
contrario, sustancias hidrofóbicas son insolubles en agua ya que interrumpen la red de enlaces de hidrógeno del agua ya
que no forman interacciones con ella.
Ácidos y bases
Los ácidos son sustancias que liberan iones hidrógeno en solución. Los ácidos fuertes se disocian completamente
en solución (ejemplo, HCl), los ácidos débiles se disocian parcialmente (ejemplo: COOH). Las sustancias que liberan
protones para formar H3O+ cuando se disuelven en agua se denominan ácidos. Mientras más alta la concentración de
H3O+, más ácida es la solución.
Las bases son sustancias que reducen el número de iones hidrógeno (acepta iones de H) de la solución, disminuyendo
la concentración de iones H3O+, aumentado la OH-. Ejemplo de bases fuertes es el NaOH y de bases débiles el grupo
amino (NH2).
24
Las células están formadas de compuestos de carbono (Capítulo 2, Alberts et al, 2010)
El carbono juega un papel importante en la célula debido a la capacidad de formar fuertes enlaces covalentes con otros
átomos de carbono estructurando largas cadenas. Con respecto al % del peso de la célula, las moléculas que contienen
carbón son las más abundantes en la naturaleza (Fig. 5). El carbón es el ladrillo esencial que la célula utiliza para su
construcción, determinando también sus propiedades. Cuando el carbono se une al hidrógeno, forman compuestos o
grupos estables llamados hidrocarburos. Los compuestos hidrocarbonados son apolares, no forman puentes hidrógeno y,
por lo tanto, son insolubles en agua. Posee 4 espacios vacantes en el orbital externo (por lo tanto, puede formar 4 enlaces
covalentes) (Fig. 6). A los compuestos de carbono se les conoce como moléculas orgánicas.
Figura 5. Composición macromolecular

en una célula bacteria en base al
peso. Note que el 70% del peso de la
célula corresponde al agua y 30% a
compuestos químicos de los cuales el
15% corresponde a proteínas.
Referencia, figura 2-29 Biología
molecular de la célula, quinta edición.
(©Garland Science 2008 y Ediciones
Omega 2010).
Figura 6. El carbono y sus cuatro

enlaces. Debido a que el carbono tiene
cuatro electrones de valencia puede
formar cuatro enlaces. Estos enlaces
pueden ser cuatro simples, dos simples y
uno doble, dos dobles o bien uno simple
y uno triple.
Ciertas combinaciones de átomos se encuentran de forma reiterada en las moléculas orgánicas:
Grupos -CH3 (metilo), -OH (hidroxilo), -COOH (carboxilo), C=O (carbonilo), -NH2 (amino) y (PO3)-2 (fosfato).
Estas moléculas tienen propiedades químicas y físicas particulares que influyen sobre el comportamiento de la
molécula. Cuando se une el carbono al oxígeno se forman compuestos como: alcohol, aldehído, cetona, ácido carboxílico
y ésteres. Compuestos formados por la unión de carbono y nitrógeno también son comunes en la naturaleza, como por
ejemplos amidas y aminas.
Las moléculas orgánicas que forman las unidades monoméricas o subunidades a partir de las cuales se construyen
la mayoría de las macromoléculas y otros compuestos de la célula pueden ser agrupadas en cuatro familias: hidratos de
carbono, lípidos, proteínas, y ácidos nucleicos (Fig. 7).
Figura 7. Cuatro familias principales de

moléculas orgánicas en la célula.
Referencia, figura 2-17 Biología
Omega 2010).
25
En general, los hidratos de carbono, carbohidratos o azúcares son la principal fuente de energía para la célula. Pueden
encontrarse como monosacáridos, disacáridos (unión de dos monosacáridos), trisacáridos (unión de tres monosacáridos)
y oligosacáridos (unión de 2 a 10 monosacáridos). Cuando se unen más de tres monosacáridos pueden dar origen a
cadenas lineales o ramificadas. La unión de varios monosacáridos forma polisacáridos, por ejemplo: celulosa, almidón y
glucógeno.
Los lípidos son un grupo diverso de compuestos orgánicos que contienen largas cadenas hidrocarbonadas o
múltiples anillos unidos como en los esteroides. En este grupo podemos encontrar a los aceites, grasas y ceras; también
a los fosfolípidos y los esteroides. Además de constituir una fuente de energía, son importantes en señalización celular,
cumplen funciones estructurales en la célula y funciones catalíticas al aportar vitaminas para ayudar a las reacciones
enzimáticas.
Las proteínas están formadas por cadenas de aminoácidos unidos mediante un enlace covalente llamado enlace
peptídico. Las propiedades físicas de una proteína se determinan mediante la interacción de la proteína con otras
moléculas. Las proteínas cumplen diversas funciones: transporte, estructural, señalización, catálisis, regulación,
movimiento, defensa, homeostasis y de reserva.
Los ácidos nucleicos están formados por cadenas de nucleótidos, los cuales están constituidos por una base nitrogenada
unida a una molécula de azúcar de cinco carbonos que puede ser ribosa o desoxirribosa y uno o más grupos fosfatos.
Dependiendo si el azúcar es ribosa o desoxirribosa tendremos ácido ribonucleico (ARN) o ácido desoxirribonucleico
(ADN), respectivamente. El ADN es el material genético de todas las células y el ARN es esencial para transferir la
información del ADN a las proteínas. Además, constituye el material genético de algunos virus.
En este capítulo nos enfocaremos en los hidratos de carbono y en el siguiente revisaremos con mayor detalle los
lípidos, aminoácidos y nucleótidos.
Hidratos de Carbono
La forma general de un hidrato de carbono es Cn(H2O)m, son comunes y los encontramos como azúcares. Los
monosacáridos son simples de tres carbonos. Las moléculas que forman se llaman carbohidratos, como la glucosa
(C6H12O6). La glucosa puede convertirse en otros azúcares como manosa o galactosa mediante el cambio de orientación
de grupos OH específicos (isómeros) (Fig. 8).
Figura 8. Isómeros. Note que la glucosa, la galactosa y la manosa tienen la misma fórmula (C6H12O6), pero difieren en la disposición de los grupos
de uno o de dos de los átomos de carbono.
Referencia, panel 02-4. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Las moléculas de glucosa pueden formar grandes cadenas a través de enlaces glucosídicos producidos por con-
densación entre moléculas de glucosa (Fig. 9A). La ruptura de estos enlaces glucosídicos se produce por hidrólisis.
Algunos ejemplos importantes de disacáridos son la sacarosa o azúcar común, que está formada por una molécula de
glucosa y una de fructosa, la maltosa formada por dos glucosas unidas por un enlace glucosídico α(1→4) y la lactosa
formada por glucosa y galactosa.
Los enlaces glucosídicos pueden ser α o β (Fig. 9B). Dependiendo qué tipo de enlace sea utilizado, la función de
estas cadenas de glucosa puede cambiar de almacenamiento de energía a estructural. Por ejemplo, el almidón que es la
reserva de energía en plantas, está formado por dos polímeros distintos de glucosa: amilosa y amilopectina. La amilosa,
que corresponde al 25%, está formada por α-D-glucopiranosas (glucosas) mediante enlaces α-(1 → 4) en una cadena
26 no ramificada o escasamente ramificada (mediante α-(1 → 6)). A pesar que la amilopectina también está formada por
α-D-glucopiranosas, presenta una cadena altamente ramificada tanto en uniones α-(1 → 4), como α-(1 → 6). En el
caso de los animales la reserva de energía es el glucógeno (glicógeno), el cual está formado por cadenas ramificadas
de glucosa. El glucógeno se encuentra principalmente almacenado en células del tejido hepático y en menor cantidad
en el tejido muscular. En cambio, la celulosa corresponde a un polímero de glucosas unidas con enlaces β que forma
las paredes de las células vegetales, por lo que cumple una función estructural. Es la molécula orgánica más abundante
de la tierra. Otro ejemplo estructural es la quitina que forma parte del exoesqueleto de los artrópodos y de las paredes
celulares de los hongos.
Los oligosacáridos también pueden unirse a otras moléculas. Por ejemplo, cuando un oligosacárido se une a una
proteína forma un glucopéptido y cuando se une a un lípido forma glucolípido. Estos glucopéptidos y glucolípidos se
encuentran en las células formando parte de la membrana plasmática. Así, podemos encontrar que los carbohidratos
cumplen variadas e importantes funciones como: (i) soporte mecánico de la pared vegetal (celulosa), quitina exoesqueleto
de insectos y pared celular de los hongos; (ii) señalización (ejemplo: glucoproteínas y glucolípidos; y (iii) como fuente de
energía (ejemplo, almidón en plantas y glucógeno en animales).
Figura 9. Reacción entre

monosacáridos para formar
cadenas de disacáridos. (A)
Reacción de condensación para
formar un enlace glucosídico o
de hidrólisis para romperlo. (B)
Ejemplos de monosacáridos con
enlaces α o β.
Referencias, figura 2-19 y 2-20
Biología molecular de la célula,
quinta edición. (©Garland
Science 2008 y Ediciones Omega
2010).
27
CUESTIONARIO 2
DE LA CÉLULA I
1.- Resuelva esta sopa de letras (encuentre 12 palabras revisadas en este capítulo).
28
2.- Complete la siguiente tabla
CONCEPTO DESCRIPCIÓN
Enlace iónico
Se producen debido al empuje de los grupos apolares o

hidrofóbicos juntándolos para reducir el contacto con grupos
polares como el agua.
Fuerzas de van der Waals
Sustancias que reducen el número de iones hidrógeno

(acepta iones de H) de la solución.
Enlace que se forma cuando un átomo comparte un electrón

con otro átomo para llenar su orbital.
Moléculas anfipáticas
3.- Responda las siguientes preguntas:
a) ¿Cuál es la diferencia entre el número atómico y peso atómico?
b) ¿Por qué y de qué manera interactúan los átomos?
c) ¿Qué propiedades tiene el agua?

29
30
3
DE LA CÉLULA II
RESUMEN
Los lípidos son compuestos orgánicos constituidos principalmente por carbono (C), hidrógeno (H) y oxígeno (O),
pero también en algunas ocasiones de azufre (S), nitrógeno (N) y fósforo (P). Son moléculas diversas y los podemos
encontrar como ceras, grasas, aceites, fosfolípidos y esteroides. Las proteínas se forman por cadenas de aminoácidos que
traducen a partir del código transcrito en el ARN. Estas cadenas de aminoácidos forman una estructura tridimensional
que es la que le dará la característica funcional a la proteína. Cadenas de nucleótidos forman largas cadenas o polímeros
de ADN. La cadena de ADN es una doble hélice donde se guarda el código genético o manual de instrucciones que
seguirán las células durante su vida. Este código es transcrito en una cadena de ARN, pudiendo ser traducido a cadenas
de aminoácidos formando así las proteínas. El ARN es también una cadena de nucleótidos, pero a diferencia del ADN,
el ARN es una cadena sencilla, compuesta de una ribosa en vez de desoxirribosa, además de tener una base nitrogenada
llamada uracilo en vez de timina.

Palabras claves: ácidos grasos, esteroides, fosfolípidos, moléculas anfipáticas, aminoácidos esenciales, péptidos, proteínas,
zwitterion, chaperonas, ADN, ARN, aminoácidos, proteínas, estructura tridimensional, nucleótidos, base nitrogenada,
ribosa, desoxirribosa, pirimidina, purina, nucleósido, péptidos, proteínas, aminoácidos esenciales, punto isoeléctrico,
estructura primaria, estructura secundaria, desnaturación, chaperonas.
Lípidos (Capítulo 2, Alberts et al., 2010).

Los lípidos contienen largas cadenas hidrocarbonadas (como en los ácidos grasos) o múltiples anillos unidos como
en los esteroides.
Los aceites, grasas y ceras se forman con carbonos, hidrógenos y oxígenos. Contienen una o más subunidades de
ácidos grasos y generalmente carecen de estructuras en forma de anillos. Los ácidos grasos son componentes de las
membranas celulares y también son usados como fuente de energía ya que su metabolismo rinde hasta 6 veces más
calorías que los azúcares. Los ácidos grasos difieren en el largo de las colas y en el número y posición de los dobles
enlaces de carbono. Cuando no presentan dobles enlaces en sus colas, se les denomina ácidos grasos saturados (Fig. 1A),
en cambio, cuando presentan dobles enlaces, se denominan ácidos grasos insaturados (Fig. 1B) o poliinsaturados cuando
hay presencia de más de un doble enlace. Los ácidos grasos se almacenan en el citoplasma de las células en forma de
gotas de moléculas de triacilglicerol.
Los fosfolípidos son similares a los aceites, pero en ellos uno de los tres ácidos grasos es reemplazado por un grupo
fosfato, el cual tiene unido un grupo funcional corto (Fig. 1C). Además, tienen dos regiones muy distintas, una hidrofílica
y otra hidrofóbica, por lo que son moléculas anfipáticas o anfifílicas. Los fosfolípidos son los constituyentes principales
de las membranas biológicas.
Los esteroides se sintetizan a partir del colesterol (Fig. 1D), se diferencian de los demás lípidos porque presentan
cuatro anillos de carbono fusionados dando lugar a diferentes grupos funcionales. Ejemplo de esteroides son el colesterol,
la testosterona y el estrógeno.
Los lípidos pueden tener distintas funciones, por ejemplo, pueden cumplir funciones estructurales al formar parte
de las bicapas lipídicas de membranas celulares. También pueden ayudar en la consistencia de los órganos y proteger
de manera mecánica, o bien servir de aislante térmico en el tejido adiposo. Otra función importante de los lípidos es la
función catalítica ya que aportan vitaminas que ayudan al funcionamiento de las enzimas en las reacciones biológicas. Por
ejemplo, retinoides (vitamina A) o calciferoles (vitamina D). Los lípidos también participan de señalizaciones celulares
ya que muchas hormonas tienen estructura lipídica. Ejemplos son los glucocorticoides, mineralocorticoides, andrógenos, 31
estrógenos, y progestágenos. Esta función es muy importante ya que permite la adaptación de los organismos a su medio
ambiente.
A B
C D
Figura 1. Estructura de ácido graso, fosfolípido y esteroides. (A) Ácido graso saturado, sin presencia de dobles enlaces. (B) Ácido graso insaturado
presentando un doble enlace. (C) Fosfolípido y su orientación en la membrana. (D) Estructura del esteroide conocido como colesterol.
Referencia, panel 02-5 y figura 2-22 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010 ).
Aminoácidos (Capítulo 3, Alberts et al., 2010).

Los aminoácidos son la unidad fundamental de las proteínas. Cada proteína está formada por cadenas de aminoáci-
dos (iguales o distintos) unidos mediante enlaces covalentes, llamado enlace peptídico. De modo que la cadena de ami-
noácido también es conocida como polipéptido. Cuando estos péptidos son muy grandes, se les denomina proteínas. A
pesa que existen diferentes aminoácidos, todos ellos presentan un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino (-NH2)
unidos a un carbono central, conocido como carbono α (alfa). Los aminoácidos difieren entre sí solo por la cadena
lateral que está unida al carbono alfa, conocido también como grupo R (Fig. 2) y que puede tener distintas características
químicas resultando en 20 aminoácidos diferentes. Existen aminoácidos llamados esenciales que deben ser incorporados
en la dieta humana ya que el organismo no puede producirlos. Estos son: arginina, histidina, isoleucina, leucina, lisina,
metionina, fenilalanina, treonina, triptófano y valina. La lisina y el triptófano están pobremente representados en las
proteínas vegetales.
Figura 2. Estructura general de un aminoácido. Se aprecia
el grupo amino y carboxilo, el carbono alfa y el grupo R. El
aminoácido en su forma no ionizada y en su forma ionizada.
Referencia, figura 2-23 Biología molecular de la célula, quinta
edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
32
Los aminoácidos se comportan como anfolitos, es decir, pueden actuar como un ácido o como una base cediendo o
aceptando protones (anfóteros). La protonación o desprotonación de los grupos amino y carboxilo depende del pH. Por
ejemplo, a un pH muy ácido los aminoácidos serán cationes y a un pH muy básico aniones. El pH característico en el
cual la carga eléctrica neta del aminoácido es cero, se designa como punto isoeléctrico o pI; el pK es el pH en donde la
concentración del donador de protones (ácido) y aceptor de protones (base) son iguales. A pH neutro los aminoácidos
se encuentran ionizados, es decir, como ion dipolar o zwitterion (Fig.2). El carbono central (o α) es asimétrico, lo cual
permite tener dos imágenes especulares L y D. También podemos agrupar a los aminoácidos en familias, en función de
la naturaleza química de sus cadenas laterales (ácidas, básicas, polares sin carga y no polares) (Fig. 3). El conocer estas
características es importante porque las proteínas están definidas por sus aminoácidos y las cargas que estos presentan,
ya que influyen en la carga de la proteína y, por tanto, en su comportamiento.
Figura 3. Aminoácidos. Familia de aminoácidos: aminoácidos

ácidos, básicos, polares sin carga y apolares.
Referencia figura 3-2 Biología molecular de la célula, quinta
Los aminoácidos se unen mediante enlaces covalentes llamados enlaces peptídicos, producidos por condensación.
A su vez, estos enlaces pueden romperse mediante hidrólisis (Fig. 4). La formación de enlaces peptídicos entre los
aminoácidos tiene una limitación estérica (o de movimiento) que restringe las posibles conformaciones tridimensionales
en el espacio que pudiesen adoptar estos enlaces.
Figura 4. Enlaces peptídicos y estructura primaria de una proteína.

Referencia figura 3-1 Biología molecular de la célula, quinta
El plegamiento de la proteína está también restringido por la cantidad de diferentes enlaces no covalentes que
puedan existir entre una parte de la cadena peptídica y otra – lo que depende de la secuencia de aminoácidos (estructura
primaria) (Fig. 5A). Del mismo modo, la distribución de aminoácidos polares y no polares es uno de los factores más
influyentes en el plegamiento de las proteínas (Fig. 5B). Las proteínas se pliegan en conformaciones que requieren la 33
más baja energía. Todas las interacciones que ocurren, provocan que las proteínas tengan una estructura 3D, que le
otorga la característica funcional a la proteína. Por lo tanto, podemos decir que las proteínas son polipéptidos flexibles.
Si tratamos la proteína con ciertos solventes, que rompen los enlaces no covalentes, la proteína perderá su plegamiento
(desnaturación). Si removemos el solvente, la proteína volverá a su estado o conformación inicial (renaturación). Cada
proteína normalmente se pliega en una conformación estable particular. Esta conformación puede cambiar ligeramente
si esta proteína interactúa con otra molécula en la célula. Estos cambios de forma son cruciales para la función de la
proteína. Se sabe que el plegamiento de las proteínas es un proceso espontáneo muy rápido y que las interacciones
hidrofóbicas son muy importantes. Para maximizar la eficiencia del plegamiento, existen proteínas llamadas chaperonas
que asisten en el proceso de plegamiento.
Figura 5. Plegamiento de una proteína. (A) Enlaces no covalentes entre aminoácidos que conforman la cadena peptídica. (B) Las cadenas laterales
no polares de ciertos aminoácidos son forzadas a juntarse por fuerzas hidrofóbicas.
Referencia figuras 3-4 y 3-5 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Ácidos nucleicos (Capítulo 2 y 4, Alberts et al., 2010).

Los ácidos nucleicos están formados por subunidades llamadas nucleótidos. Los nucleótidos son moléculas
compuestas de una base nitrogenada unida a un azúcar de 5 carbonos (pentosa) pudiendo ser una ribosa (en el caso del
ARN) o desoxirribosa (en el caso del ADN) (Fig. 6A), además de tener uno o más grupos fosfato (Fig. 6B). Dentro de
las bases nitrogenadas encontramos dos grandes grupos: pirimidinas (presentan un solo anillo) y purinas (presentan dos
anillos fusionados (Fig. 7). Dentro de las pirimidinas encontramos citosina (C), timina (T) en el ADN y uracilo (U) en
el ARN. Dentro de las purinas se encuentran la adenina (A) y la guanina (G) (Fig. 7).
A B
Figura 6. Nucleótidos. (A) Ribosa (en ARN) y Desoxirribosa (en ADN). (B) Nucleótido formado por una base nitrogenada, un azúcar de 5
carbonos y uno o más grupo fosfato.
Referencias 6-4. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
34
Figura 7. Bases nitrogenadas. Fila superior,
de izquierda a derecha se muestran las bases
Pirimidinas nitrogenadas pirimidinas: timina (presente solo en
el ADN), uracilo (presente en solo en el ARN) y
citosina.
En la fila inferior de izquierda a derecha se muestra
las bases nitrogenadas purinas: guanina y adenina.
Purinas
Cuando la base nitrogenada se une al azúcar (ribosa o desoxirribosa) se denomina nucleósido (Fig. 8A). Nucleótido
en cambio se le denomina a la base nitrogenada más una pentosa y uno o más grupos fosfato (Fig. 8B).
A B Figura 8. Nucleósidos y nucleótidos. (A) Estructura

de un nucleósido formada por la base nitrogenada
y la pentosa. (B) Estructura de un nucleótido
formado por una base nitrogenada, una pentosa y
un grupo fosfato.
Referencias panel 02-6. Biología molecular de la
célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y
Ediciones Omega 2010).
La estructura tridimensional del ADN - la doble hebra de ADN - se debe a las características químicas y estructurales
de sus dos cadenas de polinucleótidos. Estas dos cadenas están unidas a través de enlaces tipo puente de hidrógeno
entre bases pertenecientes a ambas cadenas. Las bases están en la cara interna de la doble hélice y la cadena de azúcares
y fosfatos, unidos mediante enlaces covalentes, hacia afuera (Fig. 9). Además, las bases se disponen perpendicular a
la cadena por lo que se “apilan” dándole estabilidad a la molécula. En cada caso, una base nitrogenada de dos anillos
(purina) se une a una base de un anillo (pirimidina), es decir A-T y C-G (Fig. 9). De este modo, las secuencias lineales
de nucleótidos en el ADN y en el ARN codifican la información genética de la célula.
Figura 9. Doble hebra de ADN. Se observan las
pirimidinas citosina y timina, y las purinas adenina
y guanina.
Referencia figura 4-4 Biología molecular de la
35
Los nucleótidos también pueden actuar como transportadores de energía química. Por ejemplo, el ribonucléotido
adenosin-trifosfato, conocido como ATP es utilizado por la célula en diferentes reacciones, o también el guanosin-
trifosfato o GTP (Fig. 10).
Figura 10. Estructura química del adenosin-trifosfato.

Referencia figura 2-26. Biología molecular de la célula, quinta
36
CUESTIONARIO 3
DE LA CÉLULA II
1.- Resuelva el siguiente crucigrama.
Horizontal
5. Aminoácido apolar.
6. Grupo de bases nitrogenadas a las que corresponde el Uracilo.
7. Aminoácido esencial.
8. Tipo de enlace del Puente de hidrógeno.
9. Proteínas que ayudan al plegamiento.
Vertical
1. Base nitrogenada unida al azúcar. 37
2. Puede actuar como ácido o como base.
3. El ADN está compuesto por un azúcar llamado…
4. Los enlaces peptídicos forman parte de las …
2.- Preguntas de desarrollo
a) ¿Qué es el PI?
b) ¿Por qué es importante conocer si un aminoácido es polar, apolar, básico o ácido?
3.- Rotule el siguiente esquema.
38
39
40
4
PROTEÍNAS, ESTRUCTURA Y FUNCIÓN
RESUMEN
Las proteínas son fundamentales para que la célula pueda llevar a cabo sus procesos, constituyen la mayoría del
peso seco de la célula. Existen proteínas que forman parte de la membrana como canales o bombas que permiten y
regulan el paso de moléculas dentro y fuera de la célula. Otras proteínas llevan mensajes de una célula a otra, pueden
también actuar como integradoras de señales llevando una señal desde afuera hacia dentro de la célula, como desde la
membrana celular al núcleo. Existen otras proteínas con partes movibles como máquinas que mueven organelos por el
citoplasma. Otras que tienen la función especializada de reconocer lo propio del organismo de lo ajeno permitiéndonos
defendernos de infecciones, como los anticuerpos. Hay proteínas que tienen un rol estructural como fibras elásticas e
incluso existen algunas como fuentes de luminiscencia (que emiten luz). También están las enzimas, que promueven
reacciones químicas esenciales para la célula. Para entender cómo funcionan los organismos debemos conocer cómo las
proteínas funcionan e interactúan.
Palabras claves: estructura primaria, estructura secundaria, estructura terciaria, estructura cuaternaria, hélice alfa,
lámina beta, dominio, centro de unión o de enlace, subunidades proteicas, puentes disulfuro, estructura tridimensional,
proteína-ligando, sustrato, energía de activación, enzimas, KM, Vmax, cofactores, holoenzima, alostéricas, grupo prostético,
Forma y estructura de las proteínas (Capítulo 3, Alberts et al., 2010).

Las proteínas tienen variadas formas y estructuras, ya que son las moléculas más complejas y sofisticadas que
se conocen. Existen de diferentes tamaños y formas. La forma de la proteína está especificada en su secuencia de
aminoácidos, lo que se denomina estructura primaria de la proteína (Fig. 1). Cada aminoácido se une a otro mediante un
enlace peptídico, el cual es de tipo covalente. La secuencia repetida de átomos que forman parte del centro de la cadena
polipeptídica forma el esqueleto peptídico, la porción de los aminoácidos que no forman parte en el enlace peptídico le
dan a la proteína sus características.
Figura 1. Estructura primaria de una proteína.

Referencia figura 3-1 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
41
Si bien cada proteína se pliega de manera única de acuerdo a los aminoácidos que componen la estructura primaria,
existen patrones de plegamiento común. Estos tipos de plegamientos están dictados por las interacciones no covalentes
que se forman entre las partes de los aminoácidos. A estos plegamientos se les conoce como hélice alfa y láminas u
hoja beta, las cuales forman parte de la estructura secundaria (Fig. 2). La estructura secundaria se mantiene gracias a
puentes de hidrógeno entre los grupos N-H y C=O de la cadena polipeptídica sin involucrar a las cadenas laterales de
los aminoácidos.
Hélice alfa: se forma cuando enlaces entre N-H de cada enlace peptídico se une por puentes de hidrogeno al C=O
del enlace peptídico vecino. Todos los N-H apuntan hacia arriba mientras que los C=O hacia abajo (C-terminal), lo que
le da una polaridad a la cadena (C-terminal más negativo, y N-terminal más positivo) (Fig. 2A).
Figura 2. Estructura secundaria de una proteína. (A)

A Hélice alfa. (B) Lámina u hoja beta.
Referencia figura 3-7 Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
B
B
Las hélices alfa se encuentran principalmente en proteínas fibrosas como α queratina (Ej. pelo, uñas) y también en
proteínas globulares como la mioglobina. También son abundantes en proteínas de la membrana celular, receptores,
o proteínas con regiones de transmembrana (en este caso son generalmente largas cadenas hélice alfa compuestas por
aminoácidos con cadenas no polares). En otras proteínas las hélices alfa permiten la formación de estructuras estables
llamadas hélice super-enrollada (coiled-coil).
Lámina beta: las conformaciones beta están presentes en el centro de muchas proteínas. Se pueden formar tanto de
cadenas polipeptídicas que tienen la misma dirección (paralelas), como de cadenas polipeptídicas tienen direcciones
opuestas (antiparalelas) (Fig. 2B). Ambos tipos de conformaciones entregan una estructura rígida, que se mantiene a
través de puentes de hidrógeno que conectan a los enlaces peptídicos entre cadenas vecinas. No es una única cadena
peptídica, más bien, son agregados agrupados que se estabilizan. Las que están en un mismo plano se agrupan por pu-
42 entes de hidrógeno. Ejemplo de estas conformaciones las podemos ver en β-queratinas (como la seda).
La estructura terciaria de una proteína, corresponde a la disposición de la estructura secundaria de un polipéptido
al plegarse sobre sí misma, originando una conformación tridimensional (Fig. 3). En la estructura terciaria encontramos
enlaces no covalentes como puentes de hidrógeno, enlaces iónicos, fuerzas de van der Waals, interacciones hidrofóbicas,
pero también enlaces covalentes como puentes de disulfuro.
Figura 3. Estructura terciaria de una proteína.
Se observan tres ejemplos de conformaciones
globulares tridimensionales. De izquierda a
derecha se observa la proteína de hélice alfa
citocromo b562 que participa del transporte de
electrones en la mitocondria. Luego, al centro,
podemos ver un ejemplo de una proteína que
contiene tanto hélices alfa como láminas
beta (domino de unión al ADN de la enzima
deshidrogenasa láctica). Finalmente, a la
derecha se observa el dominio de la cadena
liviana de una inmunoglobulina (anticuerpo).
Referencia figura 3-11 Biología molecular de
la célula, quinta edición. (©Garland Science
2008 y Ediciones Omega 2010).
La estructura cuaternaria, es cuando la proteína forma un complejo con más de una cadena polipeptídica (con dos o
más estructuras terciarias) (Fig. 4). En una estructura cuaternaria podemos ver más de una subunidad proteica y también
interacción de las diferentes subunidades.
El estudio de las proteínas ha revelado la existencia de subestructuras que se forman a partir de la misma cadena
polipeptídica de la proteína, pero que se pliegan de manera independiente al resto de la proteína formando regiones
compactas y estables. Estas subestructuras (de estructura terciaria) reciben el nombre dominios, usualmente contienen
entre 40 a 350 aminoácidos y tienen importantes funciones biológicas, por ejemplo, los factores de transcripción tienen
un dominio que les permite unirse al ADN y un dominio que activa la transcripción (Fig. 4B). Existen diferentes
dominios y las proteínas pueden tener más de un dominio (por ejemplo, en una estructura cuaternaria cada cadena
polipeptídica podría presentar uno o más dominios). También puede ocurrir que diferentes proteínas presenten el
mismo dominio.
A B
Figura 4. Estructura cuaternaria de una proteína. (A) Hemoglobina formada por ensamblaje de dos subunidades simétricas. (B) Proteína Src
formada por diferentes dominios (SH2).
Referencia, figura 3-22 y 3-10 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
43
Las proteínas se pueden clasificar en muchas categorías o familias (Capítulo 3, Alberts et
al., 2010).
En las proteínas también existen motivos proteicos, los que son elementos conservados en la secuencia de aminoácidos,
que habitualmente se asocia con una función concreta. Son útiles para predecir la existencia de esos mismos elementos
en otras proteínas de función y estructura desconocida.
Podemos agrupar a las proteínas en familias, donde cada miembro tiene una secuencia de aminoácidos y conformación
3D que se asemeja a las otras proteínas pertenecientes a la familia correspondiente.
Proteínas complejas: los mismos enlaces no covalentes que permiten que una cadena proteica se pliegue en una
conformación específica, también permiten a las proteínas unirse unas a otras para producir largas estructuras en la
célula. Cuando una región de una proteína interactúa con otra molécula a través de un set de enlaces no covalentes,
se llama centro de unión o de enlace. Si un centro de unión reconoce la superficie de una segunda proteína, ambas se
pliegan formando una proteína mayor con una geometría precisa, ejemplo de esto son las subunidades proteicas. Una
cadena larga de moléculas proteicas puede construirse cuando cada molécula tiene un centro de unión complementario
a otra región de la superficie de la misma molécula. Ejemplo de estas conformaciones son los filamentos de actina o
queratina. Otro ejemplo son las fibras de colágeno que se agrupan lado a lado en arreglos que sobreponen formando el
tejido conectivo que entrega resistencia a los tejidos (Fig. 5A). La elastina es otro ejemplo, pero esta proteína contiene
cadenas polipeptídicas completamente desorganizadas (Fig. 5B).
Figura 5. Estructura de una proteína

compleja estructural. (A) Fibra de colágeno.
(B) Elastina como fibra elástica.
Referencia, figura 3-27 (©Garland Science
Otra forma de interacción entre cadenas polipeptídicas es la formación de puentes disulfuro entre las cadenas
laterales de dos cisteínas, las que pueden unir dos partes de la misma cadena polipeptídica o dos cadenas polipeptídicas
diferentes. Al ser enlaces covalentes, contribuyen de manera importante a la estabilidad de la estructura tridimensional
de la proteína (Fig. 6).
Figura 6. Puentes de disulfuro formado

entre dos cisteínas. Los puentes de
disulfuro se forman por oxidación de los
grupos -SH. Cuando hay oxígeno presente
se liberan los grupos hidrógeno de los
grupos -SH y los dos átomos de azufre
-S-S- quedan enlazados.
Referencia, figura 3-28 (©Garland Science
44
Función de las proteínas (Capítulo 3, Alberts et al., 2010)
Las proteínas son diversas y cumplen diferentes funciones. Por ejemplo, dentro de estas funciones podemos destacar:
señalización, transporte, motoras, estructurales, almacenamiento o reserva, reguladoras (expresión), defensivas, hormonas
y catálisis (enzimas) entre otras.
Por ejemplo, proteínas que realizan actividades de señalización se encargan de transmitir señales de manera
intra- o inter-celular. En este grupo se incluyen muchas de las hormonas y factores de crecimiento que coordinan
el funcionamiento fisiológico en animales (ejemplo: la insulina controla niveles de glucosa en la sangre y el factor
de crecimiento epidérmico (EGF) estimula el crecimiento y la división de las células epiteliales). Las proteínas
transportadoras llevan macromoléculas de un lugar a otro, como los citocromos o la hemoglobina. Las proteínas motoras,
en cambio, son las encargadas de generar movimiento en células y tejidos (ejemplos: miosina, kinesina, dineina). Las
proteínas estructurales dan estabilidad y pueden formar parte de la membrana como las glucoproteínas, del ADN como
las histonas o de los tejidos como la elastina. Las proteínas de almacenaje acumulan pequeñas moléculas o iones como la
ferritina o la ovoalbúmina. Proteínas reguladoras de la expresión génica se unen al ADN para activar o desactivar genes
(reguladores de la transcripción como el represor lactosa). Los anticuerpos son proteínas altamente especializadas de
nuestro sistema inmune que nos permiten defendernos de patógenos. Las hormonas permiten entregar señales a lugares
distantes en nuestro cuerpo (ejemplo: insulina y glucagón). Las enzimas son las encargadas de catalizar las reacciones
químicas en nuestro cuerpo.
Para entender cómo funcionan las proteínas como enzimas, receptores o anticuerpos, es necesario entender que la
interacción proteína-ligando es altamente selectiva (Fig. 7). Siendo el ligando la sustancia que es unida por la proteína
(ion, moléculas o macromoléculas). La habilidad de la proteína a unir selectivamente con alta afinidad a un ligando, está
dada por la formación de enlaces no covalentes. Diferentes regiones en la proteína pueden ofrecer diferentes sitios de
unión para diferentes ligandos, lo que permite regulación.
Figura 7. Unión proteína-ligando.

Referencia, figura 3-36 (©Garland Science 2008 y
Las enzimas son catalizadores, es decir, aceleran una reacción química, hasta hacerla instantánea o casi instantánea.
Las moléculas sobre las cuales la enzima ejerce su acción catalítica se denominan sustratos, y estos deben pasar por
una serie de estados intermedios donde irán alterando su estructura hasta transformarse en el producto final. Como
catalizadores, las enzimas aceleran la reacción al disminuir la energía de activación (que corresponde a la energía libre o
cantidad de trabajo que un sistema termodinámico puede realizar) requerida por la reacción para alcanzar el estado de
transición más inestable y lograr así la formación de productos (Fig. 8A).
La característica más sobresaliente de las enzimas es su elevada especificidad. De esta forma, podemos definir
especificidad de sustrato y especificidad de acción. Cada reacción está catalizada por una enzima específica. La cinética
enzimática estudia la velocidad de las reacciones químicas que son catalizadas por las enzimas. La velocidad máxima
(Vmax) y la KM (constante de Michaelis-Menten) proporcionan una medida de la acción de la enzima – cuanto mayor
es la KM menor es la afinidad de la enzima por el sustrato (Fig. 8B).
Las enzimas muchas veces se agrupan formando túneles moleculares con múltiples sitios activos para procesar
sustratos. Así, el conjunto de reacciones catalizadas por enzimas genera una vía metabólica. También, existen enzimas
denominadas alostéricas, la cuales poseen sitios reguladores además de su sitio catalítico en su estructura cuaternaria, y 45
enzimas conjugadas (holoenzimas) que poseen en su estructura una parte no proteica denominada cofactor y una parte
proteica que se denomina apoenzima. En el caso de las enzimas conjugadas para que ejerzan su acción es necesario
que la apoenzima se una al cofactor. El cofactor puede ser una molécula inorgánica como Fe2+, Cu2+, K+, Mn2+ o Mg2+,
o puede ser una molécula orgánica (coenzima) como la vitamina B, vitamina C o Vitamina D. Cuando la unión del
cofactor con la apoenzima es de tipo covalente hablamos de un grupo prostético.
En general la acción de las enzimas es diversa y podemos clasificarlas de acuerdo con su función (Tabla 1). Existen
verdaderos circuitos que funcionan para la obtención de productos o para la activación o inhibición de procesos necesarios
para la célula. Por ejemplo, existen vías de activación por retroalimentaión positiva (por ejemplo, cuando una proteína
activa una segunda proteína y esta vuelve activar a la primera) o de inhibición por retroalimentación negativa (por
ejemplo, cuando una proteína activa una segunda proteína y esta al acumularse inhibe a la primera (Fig. 8C).
Figura 8. Propiedades de unión ligando-proteína. (A) Aceleración enzimática por decrecimiento de la energía de activación. (B) Cinética
enzimática. (C) Retroalimentación negativa.
Referencia, figuras 3-37, 3-46 3-45, 3-56 (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Tabla 1: clases de enzimas y tipo de reacción catalizada
46
CUESTIONARIO 4
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LAS
PROTEÍNAS
1.- Complete los siguientes espacios en blanco.
a) Los elementos de estructura secundaria, alfa-hélices y hojas beta, se empaquetan juntas formando elementos globulares
estables llamados _________.
b) ______________es un elemento conservado en la secuencia de aminoácidos, que habitualmente se asocia con una
función concreta.
c)Las _____________se estabilizan creándose una serie de puentes de hidrógeno. Se encuentran en: proteínas
fibrosas como alfa-queratina (Ej. pelo, uñas), proteínas de la membrana celular, receptores, o proteínas con regiones
transmembranas y en proteínas globulares como la mioglobina.
d)Las _____________ son moléculas pequeñas de naturaleza no proteicas esenciales para la actividad de la proteína.
e)Las vitaminas son ejemplos de _____________.
f )Las ______________ catalizan la formación o quiebre de enlaces covalentes.
2.- Resuelva esta sopa de letras. Encuentre nueve palabras relacionadas con la material revisado en esta guía.
47
3.- Conteste las siguientes preguntas.
¿De qué depende la función de una proteína?
¿Qué es un dominio?
¿Qué es una enzima alostérica?
¿Por qué una enzima es un catalizador?
48
49
RESPUESTAS CUESTIONARIO 1
1.
- Horizontal -Vertical
2. ADN 1. Señalización
3. Replicación 4. Confocal
5. Procarionte
6. Evolución
7. Célula
2.-
a) El microscopio de barrido corresponde a microscopía electrónica. En cambio, el microscopio de fluorescencia es óptico. Estos
microscopios difieren en la radiación utilizada para iluminar los objetos. En el caso de los ópticos es la luz visible, mientras que
en los microscopios electrónicos es un haz de electrones.
b) El que el ADN tenga esta estructura es muy importante, ya que, por un lado, la unión de azúcares-fosfatos le da estabilidad
y protección a las bases y por otro, la unión débil entre las bases permite que las dos hebras se puedan separar sin que la columna
vertebral del ADN se rompa, para ser leídas al momento de la replicación o cuando hay transcripción.
c) A través de la evolución se han ido fortaleciendo los mecanismos biológicos funcionales conservándose y heredándose de
generación en generación. Esto implica que compartamos muchas proteínas y moléculas con otras especies o bien que exista un
grado de variación, pero una historia en común.
d) Porque están compuestas del mismo tipo de moléculas, las que participan en el mismo tipo de reacciones químicas.
3.-
50
COMPONENTES QUÍMICOS DE
LA CÉLULA I
1.-
condensación covalente
ácido polar
solventes átomos
iónicos glucosa
isómeros lípidos
anfipática hidrofóbico
2.-
CONCEPTO DESCRIPCIÓN
Enlace iónico Enlace que se produce cuando uno de los átomos toma un electrón de la
capa de valencia del otro, quedando el primero con carga negativa por el
electrón adicional y el segundo con carga positiva al perderlo.
Interacciones hidrofóbicas Se produce debido al empuje de los grupos apolares o hidrofóbicos
juntándolos para reducir el contacto con grupos polares como el agua
Fuerzas de van der Waals Fuerza de repulsión que impide que dos átomos se acerquen demasiado.
Esta fuerza permite la formación de dipolos transitorios en la totalidad
de la molécula.
Bases Sustancias que reducen el número de iones hidrógeno (acepta iones de
H) de la solución.
Enlace covalente Enlace que se forma cuando un átomo comparte un electrón con otro
átomo para llenar su orbital.
Moléculas anfipáticas Moléculas que tienen dos regiones muy distintas, una hidrofílica y otra
hidrofóbica.
3.-
a) El número atómico corresponde al número de protones y el peso atómico es la suma del número de protones y neutrones en el
núcleo.
b) Los átomos interactúan para llenar sus orbitales y así ser estables. La interacción ocurre mediante la formación de enlaces (por
ejemplo, covalente y iónico).
c) El agua es un buen solvente porque es un dipolo. El agua es cristalina, tiene elevada tensión superficial y constante dieléctrica,
es disolvente de moléculas anfipáticas y puede actuar como ácido o base (es anfótero). Tiene elevado calor específico, temperatura
de ebullición, calor de vaporización y conductividad calórica. Es disolvente de compuestos polares de naturaleza no iónica y
capacidad de solvatación o hidratación.
51
COMPONENTES QUÍMICOS DE
LA CÉLULA II
1.-
Horizontal Vertical
5. fenilalanina 1. nucleósido
6. pirimidina 2. anfolito
7. valina 3. desoxirribosa
8. nocovalente 4. proteínas
9. chaperonas
2.-
a) El PI es el punto isoeléctrico, el cual corresponde al pH característico en el cual la carga eléctrica neta del aminoácido es cero.
b) Es importante porque las proteínas están definidas por sus aminoácidos y las cargas que estos presentan, ya que influyen en la
carga de la proteína y, por tanto, en su comportamiento.
3.-
52
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LAS
PROTEÍNAS
1.- 2.-
a) dominios alostérica
b) Motivo proteico dominio
c) alfa hélice holoenzima
d) cofactores ligando
e) coenzima receptor
f ) enzimas cuaternaria
enzima
insulina
polipeptídica
3.-
a) Depende de su composición de aminoácidos, pero más que nada de la estructura tridimensional en la cual la proteína se pliegue.
b) Son unidades estructurales, que se pliegan más o menos independiente en una estructura estable y compacta y que tienen
importantes funciones biológicas.
c) Son enzimas que poseen sitios reguladores además de su sitio catalítico en su estructura cuaternaria.
d) Porque aceleran las reacciones químicas en la célula, hasta hacerla instantánea o casi instantánea.
53
54
UNIDAD II
MÉTODOS DE ESTUDIO UTILIZADOS

BIOLOGÍA CELULAR
55
ÍNDICE
1
MÉTODOS EN BIOLOGÍA CELULAR I
__________________________________________________
1. Métodos en biología celular I................................................................................................................... 59

Aislamiento de células y cultivo celular (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008).............................................. 59
Fraccionamiento celular y análisis de proteínas (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008)................................ 61
Estudio de proteínas mediante Gel SDS-Page y Western blot (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008)...................... 65 65
Cuestionario 1: Métodos en biología celular I............................................................................................ 68
2
MÉTODOS EN BIOLOGÍA CELULAR II
__________________________________________________
2. Métodos en biología celular II................................................................................................................. 71

Biología molecular y asilamiento de ácidos nucleicos (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008)...................... 71
ADN recombinante y clonamiento de genes (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008)..................................... 71
Técnica de reacción en cadena de la polimerasa (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008)............................... 75
Técnicas de ADN fingerprint e identificación de moléculas por sondas........................................................
(Capítulo 8, Alberts, et al. 2008).................................................................................................................. 76
Cuestionario 2: Métodos en biología celular II.......................................................................................... 78
56
R
RESPUESTA CUESTIONARIO
__________________________________________________
Respuestas cuestionario 1.............................................................................................................................. 84

Respuestas cuestionario 2.............................................................................................................................. 85
84
57
58
1
RESUMEN
El progreso en la ciencia ha sido posible gracias a la investigación y a los avances tecnológicos. Debido al desarrollo
de microscopios, al aislamiento de compuestos biológicos y al entendimiento de cómo funcionan los organismos, se
ha avanzado en las últimas décadas de manera vertiginosa en el estudio y el entendimiento de la célula. Hoy en día
disponemos de colecciones de genes y proteínas que podemos estudiar, además de técnicas para poder aislar estas
moléculas desde tejidos u organismos. Así podemos aprender cómo los componentes que forman una célula funcionan
en conjunto y a su vez cómo las células se organizan para formar un organismo completo. El objetivo de la biología
celular es entender qué pasa dentro de la célula, cómo las células interactúan con el medio ambiente, cómo se adaptan
e interaccionan entre ellas, qué genes están encendidos (o apagados), qué transcritos de ARN están presentes, qué
proteínas están activas y dónde, con qué otras proteínas interactúan y a qué cascadas de señalización pertenecen. Este
conocimiento nos permite entender de mejor forma las enfermedades, permitiendo diseñar terapias más efectivas contra
estas.
Palabras clave: cultivo celular, cultivo primario, in vivo, in vitro, células primarias, líneas celulares, células madres,
tripsina, colagenasa, EDTA, clon, hibridoma, anticuerpo células madres, centrifugación, ultracentrifugación, citometría
de flujo, cromatografía, SDS, beta-mercaptoetanol, western blotting, geles de dos dimensiones, espectometría de masa,
MALDI-TOF, espectroscopía de resonancia magnética nuclear.
Aislamiento de células y cultivo celular (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008).

Para entender cómo los componentes de una célula se organizan y relacionan para formar una célula o un organismo
funcional podemos aislar estos componentes, crear librerías de genes o proteínas y estudiar su funcionamiento. Una
estrategia muy útil para poder estudiar componentes celulares es realizar cultivo de células. En general el cultivo celular
es el proceso por el cual las células pueden cultivarse en condiciones controladas (Fig. 1).
Figura 1: Células en cultivo vista por microscopía de

contraste de fase. A la izquierda se muestra un cultivo de
fibroblastos de ratón. A la derecha se muestra un cultivo
de mioblastos de pollo que se fusionan y forman fibras
musculares.
Referencia figura 8-4, Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
El cultivo celular es un estudio in vitro, al igual que trabajar con material purificado. En cambio, cuando trabajamos
con organismos completos hablamos de estudios in vivo. En cultivos celulares podemos obtener células primarias,
obtener diferentes líneas celulares, células madres y crear hibridomas. Un cultivo primario es aquel que puede realizarse
directamente del tejido de un organismo. Para llevarlo a cabo primero se obtiene una muestra de lo que nos interese
estudiar. Esta muestra puede provenir de un organismo adulto, embrión o tejido intacto. El primer paso es aislamiento
de células desde el tejido a través de la disrupción de la matriz extracelular (que es el conjunto de materiales extracelulares
que forman parte de un tejido, y que rodea y soporta las células que se encuentran en los tejidos de los mamíferos), y de
59
las conexiones entre células mediante el uso de enzimas que pueden romper estos tipos de uniones, como la tripsina y
colagenasa. También se utilizan agentes que se capturan o quelan iones de Ca+2, como el EDTA, debido a que estos las
conexiones entre células dependen de este ion. Luego, se suspenden las células (i.e. se sueltan de la superficie a la que están
adheridas), para cultivarlas en un medio indicado y en una superficie sólida para crezcan y se dividan. Las células crecidas
en cultivo proveen de una población celular homogénea, de la cual es posible extraer distintos componentes celulares,
por lo que son muy convenientes para trabajar en el laboratorio. En estos cultivos es relativamente simple variar el pH,
el nivel de O2, la concentración de glucosa, de factores de crecimiento y la presencia de otros componentes nutritivos.
De hecho, controlar factores como pH, temperatura, O2 y CO2 es una ventaja, ya que permite controlar las condiciones
de manera precisa, pudiendo cambiarlas fácilmente si la investigación lo requiere. Otra ventaja de los cultivos celulares,
es que permiten ensayar diferentes condiciones fisiológicas y el obtener con facilidad un número elevado de réplicas
idénticas y homogéneas de las muestras. Los cultivos celulares permiten trabajar con una población celular homogénea.
Desde un cultivo primario, el que se obtienen de una muestra de tejido, se pueden obtener un número determinado
cultivos sucesivos o sub-cultivos, proceso llamado pasajes de un cultivo. También se pueden generar obtener desde
un cultivo primario líneas celulares inmortales, que se obtienen al transformar un cultivo primario usando diferentes
metodologías. Con este tipo de estudios in vitro, es posible estudiar de manera más fácil, por ejemplo, el efecto de drogas
o también se pueden aislar componentes de interés. Sin embargo, a pesar que es una gran herramienta para el estudio
en áreas como farmacología, bioquímica, biología celular, biotecnología y medicina, una de las principales desventajas de
los estudios in vitro, es que no simulan fielmente lo que ocurre en un organismo multicelular. Otra desventaja es que son
sensibles a la contaminación, son inestables genómicamente, sobre todo después de varias divisiones celulares.
Crear cultivos celulares a partir de diferentes tejidos es muy útil, ya que nos permite estudiar distintos tipos de
células. Por ejemplo, el estudio de células madres ha sido de gran interés en el último tiempo, ya que estas células tienen
la capacidad de generar diferentes tipos de células y tejidos. Existen distintos tipos de células madres: (1) células madre
totipotentes, que pueden crecer y formar un organismo completo; (2) células madre pluripotentes, que no pueden formar
un organismo completo, pero sí cualquier otro tipo de célula del organismo; y (3) célula madre multipotentes, que sólo
pueden generar células de su mismo linaje embrionario de origen y (4) células unipotentes pueden formar únicamente
un tipo de célula particular (Fig. 2).
Figura 2. Jerarquía de las células madres.

Referencia: Modificado de Hayes et al, 2012.
Critical Care, 16:205.
60
Estas células madres provienen a su vez de distintas fuentes. La célula madre que se obtienen desde un embrión son
pluripotentes, en cambio, las células madres adultas son multipotentes (Fig. 2). La célula madre hematopoyética son
multipotentes y son ampliamente utilizadas en clínica, principalmente para trasplante de médula ósea. En la grasa
corporal se ha encontrado otro tipo de célula madre, denominada mesenquimal, que puede diferenciarse en numerosos
tipos de células como las células musculares, vasculares, nerviosas, hematopoyéticas, óseas, etc.
En los últimos años se han investigado mucho estas células y se ha logrado transformar células diferenciadas adultas
en células madres pluripotentes, mediante el uso de diferentes factores de transcripción. Estas células se denominan
células pluripotentes inducidas (iPCs). Estas células tienen un gran potencial para generar terapias celulares para
enfermedades como Parkinson, Distrofia muscular u otras enfermedades degenerativas.
Con las células cultivadas también se pueden preparar hibridomas. Los hibridomas son líneas celulares híbridas
compuestas de un linfocito B, célula del sistema inmune especializada en la secreción de anticuerpos, y una célula
tumoral. La fusión de estas dos células genera una línea híbrida inmortal capaz de producir un anticuerpo de interés,
virtualmente para siempre (Fig. 3). Para obtener linfocitos B productores de anticuerpos se inmuniza un ratón con un
antígeno de estudio, el cual producirá una respuesta inmune que derivará en la producción de anticuerpos por parte de
los linfocitos B.
Figura 3. Generación de hibridomas.

Mediante un agente de fusión es posible
fusionar dos células para formar una célula
combinada con dos núcleos diferentes
(heterocarionte). Cuando el heterocarionte
entra en mitosis y se produce una célula
híbrida con todos los cromosomas
concentrados en un solo núcleo. Estas células
híbridas generan líneas celulares inmortales
al combinarse con una célula tumoral,
convirtiéndose en un hibridoma.
Referencia figura 8-7, Biología molecular de
Fraccionamiento celular y análisis de proteínas (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008).

Las células pueden ser disgregadas por variados métodos que permiten el separar los componentes internos de ella
para su estudio (p.e. membrana plasmática, retículo endoplásmico o ribosomas). Las estrategias que se ocupan para lisarlas
(romperlas) generalmente son: shock osmótico o destrucción mecánica. Si el procedimiento es aplicado correctamente
es posible recuperar organelos intactos (como el núcleo, mitocondrias, Golgi, lisosomas y otros componentes celulares).
Al romperlas, obtenemos una “mezcla” celular llamado homogeneizado, del cual podemos separar los componentes
celulares, que ahora están suspensión, por su tamaño o densidad de estos.
Para separar los componentes del homogeneizado podemos usar la ultracentrifugación, que consiste en un rotor
en una cámara refrigerada al vacío, que permite aumentar la fuerza de gravedad al rotar, y con esto generar fuerza
centrífuga, que permite separar los componentes de la célula según su densidad (Fig. 4). En general, los componentes
celulares más grandes experimentan mayor fuerza centrífuga (que son más pesados y “caen” más rápido), y se mueven
más rápidamente que los componentes celulares más pequeños (que son más livianos y “flotan”). Esto significa que a
baja velocidad de rotación obtendremos componentes celulares grandes como el núcleo, células enteras y el citoesqueleto
(en forma de agregados). A medida que aumentamos la velocidad de centrifugación se irán obteniendo los componentes
celulares más pequeños. Por ejemplo, a velocidad media se pueden obtener mitocondrias y lisosomas y a altas velocidades
se puede obtener vesículas y ribosomas (Fig. 5).
61
Figura 4. Ultracentrifugadora preparativa.
Omega 2010).
Figura 5. Separación de subcomponentes celulares a

distintas velocidades de centrifugación.
Centrifugaciones repetidas a velocidades menores
fraccionan los extractos celulares permitiendo obtener los
componentes de mayor tamaño. A mayores velocidades
se pueden obtener los componentes celulares de menor
tamaño.
Omega 2010).
62
El método de centrifugación es el primer paso del fraccionamiento celular, pero, en general, solo permite separar
componentes que claramente difieren en su tamaño. Sin embargo, se puede obtener un mayor grado de separación
usando un gradiente continuo de densidad (usando sacarosa), que parte con una baja densidad en la parte superior del
tubo de ensayo y aumentando hacia el fondo del tubo (normalmente desde 5% a 20% de sacarosa). La muestra se agrega
en la parte superior del tubo, y los componentes subcelulares se van separando, sedimentan, a diferentes velocidades de
acuerdo con su forma y tamaño. Esta técnica se conoce como centrifugación por velocidad. El gradiente de sacarosa
estabiliza los componentes de una misma densidad en bandas, evitando que se mezclen, por lo que después de la
centrifugación es posible recoger los componentes subcelulares por separado (Fig. 6A).
La ultracentrifugación también se puede usar para separar componentes celulares basándose en la densidad de flotación
(técnica llamada sedimentación de equilibrio), independiente del tamaño y forma. Esta técnica usa la característica que
los componentes de una muestra mezclada, se desplazan dentro del tubo hasta alcanzar la zona en la que la densidad
de la solución es igual a la densidad del componente subcelular. En general, esta técnica utiliza gradientes de alta
concentración, de sacarosa o cloruro de cesio, para la separar proteínas o ácidos nucleicos (Fig. 6B). Para analizar el
contenido de las fracciones subcelulares de cada precipitado obtenido podemos, usar reacciones enzimáticas que detecten
componentes específicos dentro de la fracción. Por ejemplo, se puede colectar la fracción y medir la actividad enzimática
característica de mitocondrias o algún otro organelo. Alternativamente, podemos hacer análisis bajo el microscopio.
Si bien es posible obtener proteínas en cantidad suficiente sin necesidad de procesar todo el tejido, a veces, para
estudiar una proteína de interés, necesitamos enriquecer una fracción celular determinada. También es posible estudiar,
separar y clasificar poblaciones de células de acuerdo a la presencia de proteínas en la superficie de las células o de
acuerdo a las características morfológicas de las células. La citometría de flujo o FACS (fluorescence-activated cell sorter)
es una de las técnicas más usadas para estos propósitos. En esta técnica se utiliza un anticuerpo específico, el cual se
une a una proteína en la superficie de las células que componen el tejido. El anticuerpo, se marca con una molécula
fluorescente (fluoróforo) que emite luz al ser excitada por un láser. El flujo con el que pasan las células por el láser es muy
fino por lo que puede detectarse cada una de las células. La separación se produce por detección de carga, que dependerá
si la célula contiene o no fluorescencia (Fig. 7).
Figura 6. Separación por centrifugación. (A)

Separación por velocidad de sedimentación. (B)
Separación por sedimentación de equilibrio.
63
Figura 7. Citometría de flujo o FACS. Se determina la fluorescencia
de las células que pasan a través de un rayo láser. Cada gotita que
pasa contiene una sola célula, la cual reciben una carga negativa o
positiva, según la ausencia o presencias de fluorescencia. Cada gotita
es desviada en función de su carga, mediante un campo eléctrico
hacia los tubos de recogida.
Referencia figura 8-02, Biología molecular de la célula, quinta edición.
(©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Los componentes de la célula también pueden ser separados y estudiados mediante el uso de la cromatografía.
Por ejemplo, una mezcla de proteínas en solución puede ser separada al hacerla pasar a través de una columna que
contiene una matriz sólida porosa. Así, diferentes proteínas o bien otro tipo de moléculas, son retrasadas de acuerdo a
su interacción con la matriz.
Ejemplos de esta técnica son la cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de filtración en gel y cromatografía
de afinidad (Fig. 8). En la cromatografía de intercambio iónico las moléculas se agrupan de acuerdo con las cargas de su
superficie. En la cromatografía de filtración en gel las proteínas se separan por tamaño en matrices de dextrán, agarosa
o acrilamida. En la cromatografía de afinidad, se utiliza una matriz insoluble a la que está unida covalentemente un
ligando, como un anticuerpo o un sustrato enzimático, el que se unirá específicamente a una proteína.
A B C
Figura 8. Cromatografía. (A) Cromatografía de intercambio iónico. (B) Cromatografía de filtración por gel. (C) Cromatografía de afinidad.
Referencia figura 8-13, Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
64
Estudio de proteínas mediante Gel SDS-Page y Western blot (Capítulo 8, Alberts, et al.
2008).
Las proteínas pueden ser estudiadas en base a su forma, tamaño y carga neta. Las proteínas pueden estar cargadas
positiva o negativamente dependiendo de la carga que presenten los aminoácidos que la componen. Si se aplica un
campo eléctrico, la proteína puede migrar en un gel a una velocidad que depende de su carga, tamaño y forma. La
aplicación de esta propiedad es el uso de la electroforesis (separación de moléculas según la movilidad de estas en un
campo eléctrico), en geles de poliacrilamida con SDS (SDS-PAGE, SDS polyacrylamide-gel electrophoresis). Como matriz
inerte se utiliza un gel de poliacrilamida, el cual es un polímero de acrilamida, que presenta una textura determinada
(como malla porosa) por el que las proteínas migran (Fig. 9A). Proteínas más grandes migrarán más lento en este gel
que proteínas más pequeñas. Para la electroforesis, las proteínas se disuelven en una solución que contiene un detergente
cargado negativamente, llamado dodecil sulfato de sodio o SDS. Este detergente se une a las regiones hidrofóbicas de la
proteína cargándola negativamente, causando su denaturación, lo que permite que la proteína quede como una cadena
polipéptidica extendida – la aplicación de calor también ayuda a este fin (Fig. 9B).
La proteína, disuelta en estas condiciones, al ser sometida a un campo eléctrico migra desde el polo negativo al polo
positivo, en base a su tamaño en un gel de poliacrilamida. Para separar estructuras proteicas unidas por puentes disúlfuro
(S-S), se usa un agente reductor como el beta-mercaptoetanol, que rompe los enlaces S-S. Las proteínas pueden ser
visualizadas en el gel utilizando la tinción de azul de Coomassie (Fig. 9C). Cabe destacar que las proteínas que posean
un mismo tamaño migrarán a la misma distancia en el gel. El método de electroforesis en gel de poliacrilamida con
SDS es un método muy usado, ya que además de permitir estudiar los polipéptidos en base a su tamaño, proporciona
información sobre el peso molecular de la proteína y la composición de subunidades de cualquier complejo proteico.
Figura 9. SDS-PAGE. (A) Cámara de electroforesis. (B) Distintas cadenas polipeptídicas forman un complejo con las moléculas cargadas
negativamente de SDS y migran a través del gel de poliacrilamida. La velocidad de migración es mayor cuanto menor sea el tamaño del polipéptido,
por lo que se puede estimar el tamaño del polipéptido y de forma aproximada su peso molecular. (C) Análisis de muestras proteicas mediante
electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS teñido con azul de Coomassie. El carril 1, el más a la izquierda, contiene una mezcla de proteínas
del extracto celular inicial. Los otros carriles muestran una proteína de la fracción obtenida después de un fraccionamiento cromatográfico.
Referencia figura 8-18 y 8-19, Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
65
La técnica de electroforesis en gel de poliacrilamida con SDS, se puede complementar con el uso de anticuerpos
para detectar proteínas específicas mediante la técnica de blotting. En esta técnica las proteínas presentes en el gel son
transferidas (blotting) a una lámina de papel de nitrocelulosa o una membrana de nailon. La transferencia se hace al
situar la membrana sobre el gel y aplicar un campo eléctrico, de modo que las proteínas son arrastradas fuera del gel
y transferidas a la membrana. Luego, la membrana es incubada con anticuerpos que se unen específicamente a una
proteína de interés. Estos anticuerpos están unidos a un isótopo radiactivo o a una molécula detectable mediante el uso
de enzimas, o bien un marcador fluorescentemente. Este método se conoce como western blot o inmunoblot (Fig. 10).
Figura 10. Transferencia de tipo western (western blotting). La figura de la izquierda muestra un gel SDS-PAGE con muchas proteínas teñidas. Las
proteínas fueron transferidas a una membrana de nitrocelulosa y se las expuso a un anticuerpo que solamente reconoce a una proteína específica.
Las posiciones de la docena aproximada de proteínas reconocidas por este anticuerpo fueron reveladas mediante un anticuerpo secundario unido
a una enzima.

Las proteínas también pueden separarse en geles de dos dimensiones. En este caso las proteínas además de separarse
en el gel en base a su tamaño también lo hacen en base a su carga. En un primer paso las proteínas son separadas por
sus cargas intrínsecas. Así las cadenas polipeptídicas son separadas en un gradiente de pH, basándose en la variación
de la carga neta de la proteína con respecto al pH que la rodea. Cada proteína migra a una posición en el gradiente que
corresponde a su punto isoeléctrico (donde tiene carga eléctrica neta = 0) (Fig. 11). En el segundo paso, el gel se somete
a una electroforesis en dirección perpendicular respecto de la separación por pH. Se agrega SDS y las proteínas migran
de acuerdo a su tamaño como en un gel normal SDS-PAGE (Fig. 9).
Figura 11. Electroforesis en dos dimensiones. Se observa el primer paso donde las proteínas se separan en función de su carga en un gradiente
de pH en un tubo estrecho de gel de poliacrilamida. Las proteínas migaran hasta que alcanzan una zona de gradiente de pH igual a su punto
isoeléctrico y permanece inmóvil. Luego el estrecho gel que contiene las proteínas separadas se somete una segunda electroforesis en dirección
perpendicular
a la utilizada en el primer paso. Se agrega SDS y las proteínas se separan en función de su tamaño (Fig. 9).
66
Otra de las técnicas usadas frecuentemente es la espectrometría de masa, como método de alta sensibilidad para
identificar proteínas desconocidas o cuantificar proteínas conocidas, y para elucidar la estructura y propiedades químicas
de las moléculas. Este método, como su nombre lo indica, analiza la distribución de las moléculas en función de la
masa atómica. Requiere cantidades pequeñas de muestra y obtiene información característica como el peso y a veces
también la estructura de lo que se analiza. En este método, partículas cargadas tienen una dinámica muy precisa cuando
se someten a un campo eléctrico en una cámara de vacío. La espectrometría de masa separa iones de acuerdo a la razón
entre masa-carga. La forma de esta técnica más usada se llama matix-assisted laser desorption ionization-time-of-flight
spectrometry (MALDI-TOF).
Podemos estudiar las proteínas de manera aislada o bien asociadas a otras proteínas cuando forman complejos
(Tabla 1). El conocer el tamaño y la forma de los complejos proteicos por lo general permite interpretar su función.
Tabla 1: algunos ejemplos de estudios de proteínas.
67
CUESTIONARIO 1:
1.- Resuelva el siguiente crucigrama
Horizontal
3. Capacidad de producir cualquier otro tipo de célula correspondiente a los tres linajes embrionarios.
8. Permite separar los componentes celulares basándose en la densidad boyante, independiente del tamaño y forma.
Vertical
1. Enzima que destruye uniones celulares.

2. Técnica en la cual una mezcla de proteínas en solución pasa a través de una columna que contiene una matriz sólida
porosa.
4. Pérdida de la estructura tridimensional de la proteína.
5. Blotting que revela proteínas a través del marcaje con anticuerpos.
6. Fusión que permite producir célula hibridas.
7. Célula madre hematopoyética.
68
2.- Responda las siguientes preguntas.
A) ¿Cuál es la diferencia entre cromatografía de afinidad y de intercambio iónico?
B) ¿Qué es un anticuerpo monoclonal?
C) ¿Cuál es la función del SDS? Si se centrifuga una muestra celular a velocidad media, ¿Qué fracción obtenemos?
3.- Complete la siguiente tabla con las propiedades de la célula madre correspondiente
Tipo de célula Propiedades

Célula madre totipotente
Célula madre pluripotente
Célula madre multipotente
Célula unipotente
69
70
2
RESUMEN
La biología celular estudia las moléculas y los mecanismos macromoleculares responsables de la expresión de la
información genética, tales como la naturaleza molecular de los genes, la replicación génica, las mutaciones, además de
los mecanismos de control y expresión de los genes, entre otros. Existen diversas técnicas moleculares que nos permiten
visualizar la expresión de genes, determinar la ubicación de estos, como también conocer su secuencia. Hoy en día
podemos utilizar herramientas moleculares como vectores para la clonación de secuencias, preparación de librerías
genómicas, utilizar enzimas de restricción, como también utilizar anticuerpos para entender mejor como la información
génica repercute en nuestra biología.
Palabras claves: biología molecular, solventes orgánicos, gel de agarosa, enzimas de restricción, ADN recombinante,
vectores de clonamiento, clonación, sonda, hibridación, librería genómica, hibridación, Southern blot, northen blot, PCR,
transcriptasa reversa, RT-PCR, ADN fingerprint.
Biología molecular y asilamiento de ácidos nucleicos (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008).

Podemos utilizar la biología molecular para diversos propósitos: analizar el material genético (ADN y ARN) de
diversos organismos, analizar las variaciones evolutivas basados en la similitud entre las secuencias de diferentes genes
y/o proteínas, para el diagnóstico clínico mediante el análisis de marcadores moleculares, en tratamientos clínicos,
manipulación génica, mejora genética, como también en estudios inmunológicos y en la generación de vacunas
recombinantes.
Para poder llevar a cabo el análisis de ADN o ARN, primero hay que aislarlo. Sin embargo, dada la complejidad
macromolecular los ácidos nucleicos son difíciles de separar de otros componentes celulares como membranas o proteínas
residuales. Dado que el uso de métodos drásticos altera la estructura y características, es necesario utilizar métodos más
suaves basados en las propiedades físico-químicas del ácido nucleico.
La extracción del ADN comienza con el tratamiento con solventes orgánicos de la muestra (ejemplos son el fenol,
cloroformo o ambos). Una vez mezclada la muestra y centrifugada es posible obtener diferentes fases. En la fase
superior acuosa y menos densa quedan disueltos los ADN y ARN, en una fase intermedia o interfase, las proteínas
desnaturalizadas por la acción del cloroformo y el fenol y en la fase orgánica inferior y más densa se encuentran los
lípidos de membranas. Separada la fase superior acuosa, que contiene los ácidos nucleicos, se le agrega etanol o propanol
que produce la insolubilización del ADN el cual puede ser fácilmente obtenido por precipitación.
La extracción del ARN también se realiza a partir de un homogeneizado, pero se utiliza Trizol® , un reactivo listo
para la extracción de ARN desde tejidos y células. El Trizol® es una solución que ayuda a mantener la integridad del
ARN durante la homogeneización. La adición de cloroformo seguida de centrifugación, separa a la muestra en dos
fases; una acuosa en la que se encuentra el ARN y otra más densa orgánica. A partir de la fase acuosa se puede obtener
el ARN por precipitación con etanol.
Alternativamente, es posible obtener ADN y ARN basándose en las diferencias de solubilidad del ADN y ARN con
respecto a la concentración de sales en solución. Por ejemplo, a baja concentración de sales en una solución, solo el ARN
es soluble, en cambio ambos son solubles en soluciones de sal concentradas.
ADN recombinante y clonamiento de genes (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008).

El concepto de ADN recombinante se refiere a cuando una molécula de ADN se forma por la unión de segmentos
de ADN de distintos orígenes. Por ejemplo, cuando introducimos un gen que codifica para una proteína humana en el
genoma de una bacteria, estamos produciendo una molécula de ADN recombinante. De modo que la proteína que se 71
produce a partir de un ADN recombinante se denomina proteína recombinante.
La modificación genética de organismos es una herramienta muy utilizada para el estudio y para la producción de
moléculas de interés. Al introducir un gen de interés en el ADN de una bacteria (ADN recombinante) y permitir que
esta bacteria se multiplique estaremos obteniendo muchas copias idénticas del segmento de ADN de interés, es decir
estamos obteniendo clones.
Dentro de las distintas herramientas moleculares que se utilizan en la formación de moléculas recombinantes, están
las endonucleasas de restricción o enzimas de restricción. Estas enzimas cortan al ADN de doble hebra en sitios muy
específicos, los cuales son de naturaleza palindrómicas (es decir, son secuencias de ADN que poseen la misma secuencia
si se lee de 5’ a 3’ en una hebra o de 3’a 5’ en la hebra complementaria). Son extraídas de organismos procarióticos
(bacterias), donde actúan como “defensa” para degradar material genético extraño que entre en la célula procariótica.
Estas enzimas no pueden cortar ADN si éste se encuentra metilado. Las enzimas de restricción generan al momento de
cortar distintos tipos de cortes los cuales pueden ser extremos romos o extremos cohesivos dependiendo de la enzima de
restricción que genere el corte (Fig. 1).
Los fragmentos de ADN obtenidos pueden ser unidos entre sí para formar nuevas moléculas recombinantes
mediante el uso de las enzimas ligasas. Estas enzimas permitirán la formación del enlace covalente fosfodiester (Fig. 2).
Figura 1. Corte con enzimas de restricción. Las secuencias Figura 2. Ligamiento de secuencias. Como se observa en la
suelen tener seis pares de bases y son palindrómicas. Las figura, aquellos fragmentos que tengan los mismos extremos
enzimas cortan ambas cadenas de ADN en el lugar de la cohesivos pueden ser unidos a través del apareamiento de bases
secuencia de reconocimiento o cerca de ella. En el caso complementarias en los extremos. En el caso de fragmentos con
de algunas enzimas como Hpal, el corte libera extremos extremos romos también son posibles de unir, pero presentan una
romos; en otros casos como EcoRI, Hindlll y Pstl, el corte es mayor dificultad.
escalonado y genera extremos cohesivos. Referencia figura 8-32, Biología molecular de la célula, quinta
Referencia figura 8-31, Biología molecular de la célula, edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Omega 2010).
72
Es posible analizar los cortes de los fragmentos obtenidos mediante la técnica denominada electroforesis en geles de
agarosa. Este procedimiento permite separar los fragmentos de ADN por tamaño. La velocidad de migración en el gel
de agarosa es inversamente proporcional al tamaño; es decir, mientras más pequeña la molécula, más fácil y rápidamente
migrará a través de la trama del gel (Fig. 3).
Figura 3. Electroforesis en gel para separar moléculas de ADN en función de su tamaño.

Referencia figura 8-33, Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones
Omega 2010).
Gracias al uso de las enzimas de restricción, podemos realizar diferentes estudios como hacer mapas de restricción
de un plásmido o bacteriófago, fragmentar ADN genómico, para la generación de fragmentos que sirvan como sondas
marcadas (una sonda es una secuencia corta de ADN o ARN complementaria a la secuencia que se quiere identificar y
que se encuentra marcada para poder visualizarla), que se utilizan para identificar una molécula de DNA (Southern blot)
o de RNA (northern blot) o para la generar fragmentos para subclonarlos en vectores.
Los vectores de clonamiento son moléculas transportadoras que transfieren y replican los fragmentos de ADN que
llevan insertos, y que han sido obtenidos a través de cortes con enzimas de restricción o bien mediante la técnica de
amplificación por la reacción en cadena de la polimerasa (PCR, polymerase chain reaction). Existen diferentes tipos de
vectores, la elección final dependerá del tamaño de ADN que se quiere insertar y del propósito del experimento que se
quiere realizar. En general, podemos ocupar plásmidos bacterianos o fagos víricos. Los plásmidos son autoreplicativos, es
decir, se replican independientemente de la replicación celular. En su estructura básica presentan un origen de replicación
u ORI, poseen genes de selección que le otorgan resistencia a antibióticos y también contienen secuencias con sitios de
corte de enzimas de restricción conocidos (multicloning site, MCS). Gracias a los vectores podemos clonar secuencias
de ADN o hacer bibliotecas genómicas. En general, se siguen cinco pasos para realizar la clonación: (1) cortar el ADN
en una localización precisa mediante endonucleasas de restricción; (2) unir covalentemente los fragmentos de ADN,
usando enzimas ligasas, a un vector de clonamiento cortado previamente con las mismas enzimas; (3) introducir el
vector con el inserto en la célula huésped, la que tiene la maquinaria necesaria para la replicación del vector y por ende
del fragmento insertado; (4) seleccionar o identificar aquellas células huésped que contienen el ADN recombinante, y
(5) crecer las células que contiene el vector de interés (Fig. 4).
Figura 4. Clonamiento de una secuencia de ADN

de interés.
Referencia figura 8-40, Biología molecular de la
Las bibliotecas genómicas son un método que nos permite almacenar y estudiar la totalidad de ADN de un organismo
(genoma). Para esto se debe aislar el ADN genómico, fragmentar mediante el uso de enzimas de restricción, clonar estos
fragmentos de ADN en vectores y finalmente identificar y estudiar alguna secuencia de interés dentro de la biblioteca
(Fig. 5). La identificación de la secuencia de interés dentro de una biblioteca genómica puede realizarse mediante
el uso de sondas. Generalmente, las sondas están marcadas con una molécula reportera (radioactiva, colorimétrica o
fluorescente). Esta sonda al ser complementaria, hibrida con la secuencia objetivo. Hibridación es el proceso de unión
de dos hebras complementarias de ácidos nucleicos. Una de ellas será el ácido nucleico blanco (el que se quiere buscar 73
dentro de la biblioteca) y la otra será la sonda empleada para localizar ese ácido nucleico de interés (Fig. 6).
Figura 5. Librería genómica. Figura 6. Hibridación de sondas. Las condiciones de

Referencia figura 8-42, Biología molecular de la hibridación pueden ser más o menos exigentes. Mientras
célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y más exigentes, más específico es el resultado obtenido. En
Ediciones Omega 2010). la figura al subir la temperatura se aumenta la exigencia de
hibridación.
Referencia figura 8-36, Biología molecular de la célula, quinta
La identificación de secuencias de ADN o ARN, puede también realizare a través del uso de hibridación de sondas
complementarias a la secuencia de interés y la transferencia gel a una membrana para posterior detección (blotting)
(Fig. 7). Como se mencionó anteriormente, estas sondas están marcadas por lo que se hace posible detectar secuencias
de interés. En el caso de detección de ADN, la técnica ocupa una sonda de ADN y se llama Southern blot. Cuando
la secuencia a identificar es ARN, la técnica se llama northen blot. También podemos detectar ARNm (expresión de
un gen) en un tejido determinado o incluso en un organismo, técnica llamada hibridación in situ. En general, el éxito
de la detección depende de la concentración del ácido nucleico blanco, la complementariedad sonda-ácido nucleico
objetivo, concentración de la sonda, la longitud de la sonda, actividad específica de la molécula reportera, temperatura de
74 hibridación, el acceso al ácido nucleico diana y las condiciones de hibridación (pH, fuerza iónica, etc.).
1 2 3
Figura 7. Detección de ADN o ARN por mecanismos de hibridación y transferencia del gel. La sonda será detectada en función de su radiactividad,
fluorescencia o por métodos químicos. (1) Las moléculas de ADN o ARN no marcados son separados en un gel de agarosa en base a su tamaño.
(2) Una vez finalizada la electroforesis el gel es transferido a una membrana de nitrocelulosa por capilaridad. (3) Se retira la membrana con los
ácidos nucleicos adheridos a ella y (4) se hibrida el ADN o ARN con la sonda marcada en una solución de tampón. Finalmente, (5) se visualiza
mediante autorradiografía.
Técnica de reacción en cadena de la polimerasa (Capítulo 8, Alberts, et al. 2008).

La reacción en cadena de la polimerasa o PCR es una técnica ampliamente utilizada en la amplificación del ADN.
Esta técnica utiliza los conceptos de la replicación, pero utilizando ADN polimerasas provenientes de microorganismos
termófilos (que viven a temperaturas extremadamente altas), nucleótidos (dNTPs), partidores (cebadores o primers)
para el comienzo de la copia del fragmento de interés, una solución tampón adecuada y cofactores como el Mg+2 para el
correcto funcionamiento de la polimerasa. En cada ciclo de amplificación se duplica la cantidad de copias de la secuencia
de interés.
El PCR se efectúa en tres etapas que se repiten en un número determinado de veces o ciclos. Las etapas son: (1)
primero ocurre la desnaturación. Para esto se somete la muestra junto a los reactivos a alta temperatura (94-98ºC) para
separar las hebras del ADN templado. (2) Luego ocurre la etapa de hibridación a temperaturas más bajas (típicamente
40-60ºC) para permitir la hibridación de los partidores o “primers” en ambos extremos de la secuencia de interés. (3)
Finalmente, ocurre la extensión en la que la ADN polimerasa termoestable polimeriza desoxirribonucleótidos a la
temperatura óptima de la enzima (alrededor de 72ºC) (Fig. 8A).
Esta técnica puede ser combinada con el concepto de transcripción reversa que realizan los retrovirus. Esta
técnica se denomina RT-PCR, en ella se comienza desde el ARN utilizando una transcriptasa reversa, para
generar a partir del ARN una copia de ADN o ADNc. Luego se degrada el ARN y se establece una doble
cadena de ADN usando el fragmento generado, el cual puede ser amplificado por PCR y clonado (Fig. 8B).
75
Los productos obtenidos pueden ser analizados en geles de agarosa. La técnica de PCR puede ser utilizada bajo
distintas modalidades. Por ejemplo, como PCR anidado (en la que el producto de una amplificación es utilizado como
Figura 8. Amplificación de una secuencia de nucleótidos a partir de ADN o ARN. (A) PCR. (B) RT-PCR.
molde para realizar una segunda amplificación, con cebadores que se ubican dentro de la primera secuencia amplificada),
PCR in situ (donde el PCR se realiza sobre preparaciones fijadas en un portaobjetos), PCR multiplex (en la cual se
amplifica más de una secuencia en una misma reacción empleando dos o más pares de primers en único tubo), PCR en
tiempo real (que permite cuantificar la cantidad de un determinado ADNc de manera muy sensible y específica). El
PCR en tiempo real es cuantitativo a diferencia del PCR tradicional que es cualitativo.
La secuenciación de ADN también se basa en la amplificación e hibridación del ADN, pero mediante la utilización
de dNTP marcados (por ejemplo, adenina, citosina, guanina y timina marcadas). Hoy en día además del tradicional
método de secuenciación de Sanger existen tecnologías como la secuenciación por hibridación en un chip de ADN, con
el genoma o una colección de fragmentos de ADN (del inglés DNA microarray).
Técnicas de ADN fingerprint e identificación de moléculas por sondas (Capítulo 8, Alberts,

et al. 2008).
El ADN fingerprint se basa en los polimorfismos observables (cambio en nucleótidos) en las secuencias de ADN,
donde las diferencias entre los individuos son en promedio de 1 pb entre 1.000 pb. Cada diferencia de la secuencia del
genoma (prototipo) ocurre en alguna fracción de la población humana, lo que permite que cada individuo presente
patrones polimórficos distintivos. Esto es muy útil si se quiere estudiar poblaciones y cómo estas divergen en el tiempo,
hacer mapas de genes, análisis de paternidad (para establecer la relación entre dos individuos), o bien en criminalística.
Algunos de los polimorfismos o cambios en la secuencia afectan a los sitios de reconocimiento para las enzimas de
restricción, dando como resultado una variación en el tamaño de los fragmentos de DNA producidos después de la
digestión entre los individuos estudiados. Estas variaciones son llamadas Restriction Fragment Length Polymorphisms
(RFLPs). Otros polimorfismos pueden ser detectados mediante PCR utilizando estas variaciones como marcadores
moleculares (Simple Sequence Length Polymorphisms o SSLPs). Los SSLPs pueden clasificarse como minisatélites (largo
de: 10–60 pares de nucleótidos) o microsatélites (1 o más pares de nucleótidos) típicamente repetidas de 5-50 veces.
Ambos son considerados como repetidos en tándem.
La utilización de diversas técnicas de biología molecular en diversas áreas como la biotecnología o la biomedicina,
ha sido impresionante durante el último tiempo. El diagnóstico de enfermedades hereditarias específicas o adquiridas,
nuevos productos terapéuticos a través de la sobreexpresión de genes específicos, intervenciones clínicas más precisas y
efectivas, han derivado en la terapia génica y la medicina personalizada. El clonamiento y producción masiva de insulina
76 humana, el uso de proteínas fluorescentes, de transgenes u organismos transgénicos, mutagénesis dirigida han permitido
entender nuestra biología, además de desarrollar alimentos más nutritivos, nuevas drogas terapéuticas, resistencia a
enfermedades o nuevas terapias para el cáncer, o enfermedades neurodegenerativas y hereditarias.
77
CUESTIONARIO 2
1.- Complete el siguiente crucigrama asociando distintos conceptos, estructuras, compuestos.
Horizontal
4. Proceso de unión de dos hebras complementarias de ácidos nucleicos cuyo origen es distinto.
5. Diversidad en la secuencia de ADN que se presentan en los individuos de una población.
8. Secuencias cortas que hibridan a una secuencia objetivo y permiten el inicio del PCR.
9. Proceso por el que se obtienen dos células, moléculas u organismos idénticos.
10. Técnica de blotting que permite detectar ARN.
11. Secuencia corta de ADN o ARN complementaria a la secuencia que se quiere identificar.
Vertical
1. Estructuras circulares de ADN donde insertaremos fragmentos de ADN.
2. Secuencias circulares de ADN de origen bacteriano que permiten el clonar genes.
3. 1 o más pares de base típicamente repetidas de 5-50 veces.
6. Contiene transcriptasa reversa.
7. Enzimas que pegan secuencias.
78
¿Qué es un ADN recombinante?
¿Cuál es la diferencia entre un PCR y un PCR cuantitativo o en tiempo real?
¿Por qué son útiles las enzimas de restricción?
3. Complete la siguiente figura con sus pasos respectivos.
79
4.- Resuelva esta sopa de letras. Encuentre 10 palabras revisadas en esta guía.
80
1.-
Horizontal Vertical
3. pluripotencia 1. tripsina
8. ultracentrifugación 2. cromatografía
4. denaturación
5. western
6. hibridoma
7. multipotente
2.-
a) En la cromatografía de intercambio iónico las moléculas se agrupan de acuerdo a las cargas de su superficie. En cambio, en la
cromatografía de afinidad se utiliza una matriz insoluble que está covalentemente unida a un ligando, como un anticuerpo o un
sustrato enzimático, el que se unirá específicamente a una proteína. Esta última técnica obtiene proteínas con un alto grado de
pureza.
b) Es un anticuerpo producido por un clon de una célula B. Esta célula será una fuente estable y permanente de un solo tipo de
anticuerpo específico para un antígeno.
c) El SDS es un detergente que cumple la función de denaturar a la proteína, dejándola como una cadena polipeptídica estirada
y además le entrega una carga negativa, lo que permite hacerla migrar en un campo eléctrico.
d) Mitocondrias, lisosomas y peroxisomas.
3.-
Tipo de célula Propiedades
Célula madre totipotente Pueden crecer y formar un organismo completo

Célula madre pluripotente No pueden formar un organismo completo pero sí cualquier otro tipo de célula
correspondiente a los tres linajes embrionarios (endodermo, ectodermo y
mesodermo)
Célula madre multipotente Sólo pueden generar células de su misma capa o linaje embrionario de origen
Célula unipotente Pueden formar únicamente un tipo de célula particular
81
1.
- Horizontal Vertical
4. hibridación 1. vector
5. polimorfirsmo 2. plasmidio
8. cebadores 3. microsatélites
9. clonamiento 6. retrovirus
10. northern 7. ligasas
11. sonda
2.-
a) Se refiere a moléculas de ADN formadas por la unión de segmentos de ADN de distintos orígenes.
b) Ambas técnicas amplifican ADN. Sin embargo, PCR en tiempo real parte evaluando la cantidad de ARNm presente en la
célula. Por RT-PCR los ARN son copiados a ADN, el que es cuantificado de manera sensible y específica. Por tanto, el PCR en
tiempo real es cuantitativo, evalúa cantidad de una secuencia determinada en el tiempo, en cambio el PCR tradicional que es
cualitativo (evalúa presencia o ausencia).
c) Las endonucleasas de restricción cortan al ADN en sitios específicos, a partir de una secuencia que reconocen. Por lo que se
pueden utilizar para generar fragmentos específicos de ADN. Mediante su uso podemos hacer mapas de restricción, generar sondas
marcadas y para la generación de fragmentos que podrían ser subclonados en vectores apropiados.
3.-
4.-
agarosa
transgenes
buffer
Southern
secuenciación
endonucleasas
polimerasa
dntp
recombinante
PCR
82
83
84
UNIDAD III
ORGANIZACIÓN INTERNA
DE LA CÉLULA
85
ÍNDICE
1
ORGANIZACIÓN DE LA MEMBRANA PLASMÁTICA
__________________________________________________
1.Organización de la membrana plasmática.............................................................................................. 93

Membrana celular (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008)................................................................................ 93
Fluidez de la membrana (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008)..................................................................... 95
La bicapa lipídica es asimétrica (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008)......................................................... 96
Proteínas de membrana (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008). .................................................................... 97
La membrana plasmática está reforzada por la corteza celular (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008).................. 98 98
Cuestionario 1: Organización de la membrana plasmática...................................................................... 99
2
TRASNPORTE A TRAVÉS DE LA MEMBRANA CELULAR
__________________________________________________
2. Transporte a través de la membrana celular.......................................................................................... 103

Transporte a través de membrana (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008). .................................................. 103
Proteínas transportadoras y canales (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008)................................................. 105
Transporte de moléculas a través de la membrana (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008).....................................105 107
Osmosis y tonicidad (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008) .......................................................................... 110
Canales iónicos y potencial de membrana (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008)...................................... 111
Cuestionario 2: Transporte a través de membrana celular...................................................................... 113
86
3
COMPARTIMIENTOS Y TRANSPORTE INTRACELULAR
__________________________________________________
3. Compartimientos y transporte intracelular........................................................................................... 117
Organelos (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008). ........................................................................................... 117
Distribución Intracelular de Proteínas y vías secretoras (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008)............................119 119
Transporte de moléculas hacia fuera y hacia dentro del núcleo (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008)...............120 120
Cómo las proteínas entran a las mitocondrias y cloroplastos (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008)...................122 122
Retículo Endoplásmico (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008)...................................................................... 122
Cuestionario 3: Compartimientos y transporte intracelular................................................................... 124
4
COMPARTIMIENTOS Y VÍAS BIOSINTÉTICAS SECRETORAS Y ENDOCÍTICAS
__________________________________________________
4. Compartimentos y vías biosintéticas secretoras y endocíticas............................................................ 127
Funciones del retículo endoplásmico rugoso y liso (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008)....................... 127
Transporte desde el RE hacia el aparato de Golgi (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008).......................... 129
Formación de vesículas recubiertas con Clatrinas (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008)......................... 130
Funciones bioquímicas del aparato de Golgi (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008).................................. 133
Lisosomas y peroxisomas (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008).................................................................. 134
Endocitosis y exocitosis (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008)..................................................................... 136
Cuestionario 4: Compartimentos y vías biosintéticas secretoras y endocíticas.................................... 137
87
5
CÓMO OBTIENEN LA ENERGÍA LAS CÉLULAS A PARTIR DEL ALIMENTO
__________________________________________________
5. Cómo obtienen la energía las células a partir del alimento.................................................... ..........................141

Creamos orden en un universo que siempre tiende al desorden (Capítulo 2, Alberts, et al. 2008)................141
Los organismos obtienen energía para sintetizar moléculas orgánicas (Capítulo 2, Alberts, et al. 2008)......143
Reacciones favorables y desfavorables en términos de energía (Capítulo 2, Alberts, et al. 2008)...................145
Cuestionario 5: Cómo obtienen la energía las células a partir del alimento............................ ..........................150
6
MITOCONDRIAS Y CLOROPLASTO
__________________________________________________
6. Mitocondrias y cloroplastos..................................................................................................................... 155

Producción de energía (Capítulo 2, Alberts, et al. 2008)......................................................................... 155
Fosforilación oxidativa (Capítulo 14, Alberts, et al. 2008)....................................................................... 157
Cloroplastos y fotosíntesis (Capítulo 14, Alberts, et al. 2008)................................................................. 159
cuestionario 6: Mitocondrias y cloroplastos.............................................................................................. 163
88
7
CITOESQUELETO
__________________________________________________
7. Citoesqueleto............................................................................................................................................. 167
El citoesqueleto (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008)................................................................................... 167
Reorganización de los microtúbulos en la división celular y conformación de cilios y flagelos
(Capítulo 16, Alberts, et al. 2008)............................................................................................................... 171
Filamentos intermedios (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008)..................................................................... 172
Cuestionario 7: Citoesqueleto...................................................................................................................... 174
8
FILAMENTOS DE ACTINA Y CONTRACCIÓN MUSCULAR
__________________________________________________
8. Filamentos de actina y contracción muscular....................................................................................... 177

Filamentos de actina (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008).......................................................................... 177
Movimiento muscular (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008)........................................................................ 181
Cuestionario 8: Filamentos de actina y contracción muscular............................................................... 183
89
9
ADHESIÓN CELULAR Y MATRIZ EXTRACELULAR
__________________________________________________
9. Adhesión celular y matriz extracelular................................................................................................... 187
La célula en su contexto social (Capítulo 19, Alberts, et al. 2008)............................................................... 187
Uniones ocluyentes (estrechas), tipo gap y transmisoras de señal (Capítulo 19, Alberts, et al. 2008)................190
Lámina basal y tejidos (Capítulo 19, Alberts, et al. 2008)............................................................................. 192
Cuestionario 9. Adhesión celular y matriz extracelular........................................................................... 194
10
SEÑALIZACIÓN CELULAR
__________________________________________________
10. Señalización celular................................................................................................................................. 197
Transducción de Señales (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008).................................................................... 197
Características de las señales (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008)............................................................. 200
Las tres clases mayores de receptores de superficie celular (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008)........................201 201
Cuestionario 10: Señalización celular......................................................................................................... 205
11
COORDINACIÓN E INTEGRACIÓN DE SEÑALES
(SEÑALIZACIÓN II)
__________________________________________________
Coordinación e integración de señales (señalización celular II)............................................................ 209

Comunicación y coordinación celular (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008)............................................. 209
Vía de señalización receptores acoplados a proteína G (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008)................. 210
Receptores acoplados a enzima (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008)........................................................ 212
Hormonas (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008)............................................................................................ 215
Cuestionario 11: Coordinación e integración de señales (señalización celular II)............................... 216
90
R
RESPUESTA CUESTIONARIO
__________________________________________________
Respuestas cuestionario 1: Organización de la membrana plasmática ................................................. 219

Respuestas cuestionario 2: Transporte a través de la membrana celular............................................... 221
Respuestas cuestionario 3: compartimientos y transporte intracelular................................................. 223
Respuestas cuestionario 4: Compartimentos y vías biosintéticas secretoras y endocíticas................. 225
Respuestas cuestionario 5: Cómo obtienen la energía las células a partir del alimento...................... 227
Respuestas cuestionario 6: Mitocondrias y cloroplastos.......................................................................... 229
Respuestas cuestionario 7: Citoesqueleto................................................................................................... 230
Respuestas cuestionario 8: Filamentos de actina y contracción muscular............................................ 232
Respuestas cuestionario 9: Adhesión celular y matriz extracelular........................................................ 234
Respuestas cuestionario 10: Señalización celular.............................................................................235
Respuestas cuestionario 11: Coordinación e integración de señales (señalización celular II).......... 237
91
92
1
ORGANIZACIÓN DE LA MEMBRANA
PLASMÁTICA
RESUMEN
La membrana plasmática es esencial para la vida de la célula. Marca los límites, separando lo que existe en el interior
celular del medio que la rodea. La membrana permite que la célula sea una unidad independiente y seleccione lo que
entra y sale de la célula para su correcto funcionamiento. Al interior de la célula eucariota existen diferentes organelos
rodeados de membranas, lo que también permiten mantener las diferencias entre el contenido interior de estos organelos
y el citosol. Debido a las características de la membrana plasmática, la célula puede cumplir su rol biológico y realizar
diferentes funciones como: transporte, movimiento, reconocimiento y señalización celular.
Palabras clave: membrana plasmática, fosfolípidos, glicolípidos, colesterol, moléculas anfipáticas, triacilglicéridos, bicapa,
micelas, difusión lateral, flexión, flip-flop, insaturaciones, temperatura, colesterol, membrana asimétrica, glucolípidos,
glucocáliz, matriz extracelular, esfingolípidos, proteínas integrales, proteínas periféricas, cortex celular, lámina basal.
Membrana celular (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008).

La membrana plasmática encierra a la célula definiendo sus bordes y sirviendo de barrera entre lo exterior y lo
interior. Esta función es esencial para que la célula sobreviva. Además, es altamente selectiva permitiendo el traspaso
de nutrientes y moléculas a través de canales, proteínas y bombas. También cumple un rol esencial en señalización y
comunicación celular.
La membrana está estructurada como una bicapa lipídica constituida en su mayoría por fosfolípidos, glicolípidos,
colesterol y proteínas (Fig.1A), además de un porcentaje menor (2-10%) de hidratos de carbono.
A B
Figura 1. Membrana plasmática. (A) Bicapa fosfolipídica de la membrana plasmática. (B) Fosfolípido.
93
Los lípidos más abundantes en la membrana plasmática son los fosfolípidos. Este tipo de lípidos poseen características
anfipáticas, es decir, tienen una cabeza polar (hidrofílica) y sus colas son apolares (hidrofóbica) (Fig. 1B). La cabeza polar
está constituida por una molécula de glicerol, un grupo fosfato y un grupo polar. El grupo polar le dará la identidad al
fosfolípido. Así, por ejemplo, si se une un grupo colina el fosfolípido será denominado fosfatidilcolina y si es serina, será
fosfatidilserina (Fig. 2).
Figura 2. Fosfolípidos.
La principal función de los fosfolípidos es estructural y la presencia de colas apolares los hace insolubles en agua, pero
solubles en sustancias como grasa y disolventes orgánicos como el benceno.
El colesterol también es otro de los componentes importantes de las membranas. Tiene una estructura rígida y
planar compuesta por anillos esteroidales. El colesterol tiene dos funciones principales en las membranas: le da rigidez
y reduce la permeabilidad a moléculas pequeñas. Fuera de las membranas, el colesterol es el precursor de hormonas
esteroidales, como por ejemplo la testosterona o la progesterona (Fig. 3).
Figura 3. Colesterol. (A) Estructura del colesterol. (B) Colesterol en membrana plasmática.
94
Las moléculas anfipáticas están sujetas a dos fuerzas conflictivas (su cabeza hidrofílica es atraída por el agua, pero
su cola hidrofóbica repele el agua). Para poder resistir a estas fuerzas opuestas, los fosfolípidos forman una estructura
tipo bicapa, que es la conformación energéticamente más favorable para que estas fuerzas puedan estabilizarse (Fig.
4A). Al cerrarse la bicapa forma una estructura circular, evitando que existan bordes abiertos. De esta forma, se repele
el agua más eficientemente y, como consecuencia, se separa el ambiente interno del externo (Fig. 4B). Si bien esta
estructura evita que moléculas escapen de la célula, está tiene mecanismos que permiten que moléculas transiten desde
dentro hacia fuera y viceversa, o que las moléculas se muevan cambiando lugares en la bicapa transformándose en una
propiedad esencial de la membrana plasmática.
A B C
Figura 4. Formación de la membrana celular. (A) Conformación energéticamente más favorable. (B) Formación de un liposoma. (C) Micela y
bicapa.
Referencia figura 10-8, 10-9 y 10-7, Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Las colas apolares de los fosfolípidos tienden a juntarse cuando se encuentran en soluciones acuosas o polares. Esto
da paso a la formación de micelas, en la que las cadenas hidrofóbicas de los ácidos grasos están secuestradas en el interior
de la esfera, no dejando agua en el núcleo hidrofóbico (Fig. 4C).
Fluidez de la membrana (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008).

La membrana además de ser permeable y selectiva, es también flexible y fluida. La fluidez de la membrana ha sido
comprobada a través del uso de bicapas lipídicas sintéticas, como también estudiando el traspaso de moléculas marcadas
de un lado a otro de ella. Estos experimentos han permitido detectar los cambios de posición de los fosfolípidos y de
las proteínas que conforman la membrana plasmática. Así, por ejemplo, los diversos movimientos que pueden tener los
fosfolípidos que conforman la membrana son: rotación (giro en torno a su eje de manera longitudinal), difusión lateral
(cambio de posición en la misma monocapa, en un desplazamiento lateral), flexión (aumento o disminución del grado
de separación de las colas hidrocarbonadas) y flip-flop (movimiento de un fosfolípido entre las dos capas ayudado por
enzimas (llamadas flipasas) (Fig. 5A). Estos movimientos dependen de factores del entorno como la temperatura (a
mayor temperatura la tasa de movimiento en las membranas incrementa) y son posibles debido a que la membrana es
un mosaico fluido en constante movimiento.
La fluidez de la membrana también depende de otros factores. Como se mencionó anteriormente, el colesterol
es un componente importante de las membranas, y a mayor número de estas moléculas, mayor será la rigidez de la
membrana. Otro factor que influye en la fluidez de las membranas es la naturaleza de las colas hidrocarbonadas. Estas
colas hidrocarbonadas de los fosfolípidos pueden ser saturadas o insaturadas, es decir, estar conformadas sólo por enlaces
simples o que contienen enlaces dobles o triples en su conformación respectivamente. Las insaturaciones doblan el
esqueleto de carbono y con ello aumentan la separación de las moléculas, lo que hace menos posible un empaquetamiento
rígido aumentando de esta forma la fluidez de la membrana (Fig. 5B).
95
A B
Figura 5. Fluidez de la membrana. (A) Movimiento de fosfolípidos en la membrana celular. (B) Efecto de las insaturaciones en la fluidez de la
membrana.
Referencia figura 10-11 y 10-12, Biología molecular de la célula, quinta edición. (© Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
La fluidez de la membrana permite a distintas moléculas difundir rápidamente a través de ella. De este modo se
genera la posibilidad de interacción y de señalización de las moléculas que atraviesan la membrana. También permite
que las proteínas y lípidos puedan difundir de un sector celular a otro, o insertarse en la membrana después de haber
sido sintetizadas en otras regiones de la célula. Otras consecuencias de la fluidez de la membrana es que se asegura
la distribución equilibrada de moléculas durante la división celular entre la “célula madre” y las “células hijas”, como
también permite a las membranas poder fusionarse unas con otras para así mezclar sus moléculas.
La bicapa lipídica es asimétrica (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008).

Se dice que la membrana plasmática es asimétrica porque posee dos caras compuestas de diferentes tipos de
fosfolípidos y glucolípidos cada una. Además, cada una de las caras posee una orientación determinada siendo vital para
su función. Esta asimetría se mantiene a medida que la membrana crece (Fig. 6A). La membrana tiene sectores o áreas
especializadas donde se concentran algunos lípidos (esfingolípidos y colesterol) y proteínas específicas, denominadas
balsas lipídicas (Fig. 6B). Un componente importante que da origen a esta asimetría son los glucolípidos, ubicados
principalmente en la cara externa de la membrana plasmática (no citosólica). Los glucolípidos son lípidos a los cuales
se les ha asociado un azúcar (Fig. 6C). Esta adición de azúcares ocurre en el retículo endoplásmico y aparato de Golgi.
A B C
Figura 6. Composición de la membrana. (A) Asimetría de la membrana. (B) Balsas lipídicas. (C) Glucolípidos.
Referencia figura 10-16 y 10-18, Biología molecular de la célula, quinta edición. (© Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
96
Los glucolípidos presentes en la superficie de la membrana plasmática forman el glucocáliz, el cual cumple diversas
funciones como, por ejemplo: (1) aíslan y protegen la membrana, (2) actúan como receptores de membrana, (3) ayuda en
la asociación de células a la matriz extracelular y con otras células, (4) permiten la absorción de agua y (5) tienen función
en el reconocimiento celular (Fig. 7).
Figura 7. Glucocáliz.
Proteínas de membrana (Capítulo 10, Alberts, et al. 2008).

En la membrana plasmática también encontramos proteínas, que se asocian a ella de diferentes maneras y las que
podemos agrupar de acuerdo con estas características en: (1) proteínas de transmembrana, (2) unidas a lípidos y (3)
unidas a proteínas. Tanto las proteínas de transmembrana como las proteínas unidas a lípidos corresponden a proteínas
integrales. Las proteínas que se asocian a la membrana mediante otras proteínas se denominan proteínas periféricas
(Fig. 8). Las proteínas periféricas pueden ser removidas sin destruir la membrana, en cambio para remover proteínas
integrales se requiere el uso de detergentes.
Las proteínas de membranas cumplen varias funciones, entre las más importantes están (1) transporte de metabolitos
y nutrientes, (2) transporte de iones, (3) anclaje de macromoléculas a la membrana (ambos lados), (4) receptores que
permiten a la célula recibir señales del medioambiente, (5) enzimas para reacciones catalíticas.
Figura 8. Proteínas de membrana. 1) proteína transmembrana, alfa hélice 2) proteína transmembrana, múltiples alfas hélice 3) proteína
transmembrana lámina beta 4) proteína alfa hélice anclada a membrana 5) proteína anclada a membrana mediante enlace covalente a lípido. 6)
proteína anclada a membrana mediante un oligosacárido. 7 y 8) proteínas unidas a membrana mediante interacciones no-covalentes a otra proteína.
97
En general, las cadenas polipeptídicas (proteínas) usualmente cruzan la bicapa como alfa hélice. Para el ambiente
hidrofóbico es esencial una composición de aminoácidos hidrofóbicos en la proteína. Las proteínas de membrana
pueden formar estructuras como poros, que son estructuras más complejas y que generalmente están conformadas por
varias alfa hélices, que forman un túnel hidrofílico por el que pasan las moléculas, por lo tanto, están compuestas por
aminoácidos hidrofóbicos e hidrofílicos. También existen cadenas polipeptídicas de proteínas que forman cilindros a
base de láminas beta (Fig. 9).
Figura 9. Proteínas de membrana. (A) Alfa hélice formando un canal de agua. Hacia el interior del canal se encuentran aminoácidos polares,
mientras que la parte externa del canal, que hace contacto con la membrana plasmática, está compuesta por aminoácidos hidrofóbicos (B) Lámina
beta formando un barril beta.
La membrana plasmática está reforzada por la corteza celular (Capítulo 10, Alberts, et al.
2008).
A pesar de las características mencionadas de la membrana, esta por sí misma es delgada y frágil. Su fuerza,
resistencia y propiedades mecánicas están dadas por una red de proteínas de membrana interconectadas por la cara
interna (formando una red con el citoesqueleto) llamada cortex o corteza celular (Fig. 10).
La fluidez de la membrana permite el movimiento de proteínas en ella, generando sitios especializados o dominios
de membrana. De esta forma, las células pueden asociarse a través de estos dominios especializados más fácilmente para
formar un tejido, crear barreras específicas en sectores de la membrana, captar nutrientes en sitios específicos de ella o
bien para unir la célula a la lámina basal.
Figura 10. Citoesqueleto basado en espectrina en la parte citosólica de la membrana celular de los eritrocitos humanos.
98
CUESTIONARIO 1
PLASMÁTICA
1.- Complete la siguiente tabla según tipo de proteínas y según el tipo de ubicación en la membrana (periféricas o
integrales).
Proteína Tipo de proteína Periférica Integral

1
2
3
4
5
6
7
8
2.- Rotule el siguiente esquema guiándose en la figura 2.
99
3.- Rotule el siguiente esquema.
a)¿Por qué se dice que la membrana plasmática es asimétrica?
b)¿Qué significa que un fosfolípido sea anfipático?
c)¿Qué es la corteza celular?
100
5.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre los 9 términos relacionados con la materia de este capítulo.
6.- Nombre tres factores importantes que influyen en la fluidez de la membrana ¿por qué es importante la fluidez de la
membrana?
101
102
2
TRANSPORTE A TRAVÉS DE LA
MEMBRANA CELULAR
RESUMEN
El interior de naturaleza hidrofóbica de la membrana plasmática impide el transporte de moléculas polares hacia el
interior de la célula. Esta función le permite a la célula mantener controlada la concentración de solutos en el citosol,
siendo diferente a la concentración que existe afuera de ésta. En la membrana plasmática las células han incorporado
proteínas que funcionan como canales y transportadores, para poder transportar moléculas solubles en agua y iones a
través de la membrana. Esto es vital porque le permite a la célula adquirir nutrientes y eliminar desechos. También le
permite exportar proteínas y regular la concentración de iones intracelulares. Para poder cumplir con estas funciones
esenciales, las células han desarrollado sistemas de transportes basados en proteínas.
En este capítulo analizamos los principios del transporte a través de la membrana y los diferentes mecanismos de
transportes que dispone la célula.
Palabras clave: transporte de moléculas, transportadores, canales, poros hidrofílicos, difusión, cambios conformacionales,
transporte pasivo, gradiente de concentración, gradiente electroquímico, potencial de membrana, difusión simple,
difusión facilitada, transporte activo, transportador acoplado, bombas impulsadas por ATP, uniporter, simporter,
antiporter, bombas, osmolaridad, canales selectivos, impulso nervioso.
Transporte a través de membrana (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008).

El transporte se define como el tránsito desde del interior de la célula hacia el exterior o viceversa. Gases como
O2 y CO2 pueden difundir fácilmente a través de la membrana, pero moléculas solubles en agua o iones requieren de
proteínas transportadoras (Fig. 1). En este sentido, existen dos clases principales de proteínas de membrana que median
el transporte de moléculas: los transportadores y los canales.
Los transportadores suelen ser proteínas integrales de membrana, que mueven moléculas pequeñas de un lado al otro
de la membrana. Para realizar este transporte un determinado soluto debe asociarse al transportador, sin gasto de energía.
Luego este transportador sufre un cambio de conformación que libera la molécula en el lado opuesto. Generalmente las
moléculas que son transportadas de esta manera son moléculas pequeñas o iones inorgánicos.
Los canales son poros hidrofílicos que atraviesan la membrana plasmática por los cuales ciertos solutos pueden pasar
por difusión. La mayoría de estos canales permiten el paso de iones inorgánicos, por lo que se les denomina canales
iónicos. Debido a que los iones están cargados eléctricamente, los movimientos de estos iones generan fuerzas eléctricas
poderosas a través de la membrana.
Mediante los transportadores y los canales es posible para la célula mantener la concentración de iones al interior, la
cual es muy diferente de la del exterior (Tabla 1).
103
La difusión de una molécula a través de la membrana plasmática depende de su tamaño y de su solubilidad. Así,
mientras más pequeña la molécula y menos se asocie con agua, tendrá una mayor rapidez en su paso a través de la
membrana (Fig. 1).
Figura 1. Paso de moléculas a través de la membrana plasmática.
Mientras más pequeña sea una molécula y, más importante aún,
mientras menos se asocia al agua; más rápido podrá difundir a
través de la membrana.
104
Proteínas transportadoras y canales (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008)
La diferencia entre proteínas transportadoras y canales es la manera con la cual pueden discriminar los solutos que
se transportan.
Cada tipo de membrana tiene su propio conjunto de proteínas transportadoras características, las cuales promueven
el paso para cierta clase de moléculas a través de la membrana tales como iones, azúcares o aminoácidos. Incluso algunas
de estas proteínas de membrana son tan selectivas que permiten solo el paso a algunos tipos de moléculas o iones, como
por ejemplo, permitiendo el paso de sodio, pero no de potasio. Las proteínas transportadoras, permiten el paso solo a
aquellas moléculas o iones que sean compatibles con su sitio de unión, por lo que realiza el transporte de una molécula
cada vez, cambiando su forma al interactuar con las moléculas que transportarán (sustrato) (Fig. 2A). Los canales, en
cambio, discriminan en base al tamaño y a la carga eléctrica de las moléculas que lo atraviesan y su forma no cambia al
interactuar con el sustrato (Fig. 2B).
Figura 2. Transporte de moléculas a través de la membrana plasmática. (A) Transportadores. (B) Proteína canal.
Referencia figura 11-3. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Transporte de moléculas a través de la membrana (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008).

El transporte de moléculas a través de la membrana puede clasificarse en dos grandes modalidades: transporte pasivo
(sin uso de energía por parte de la célula) y transporte activo (con uso de energía por parte de la célula).
Transporte pasivo
El transporte pasivo es aquel en que las moléculas son transportadas a través de una membrana semipermeable
a favor del gradiente de concentración, es decir, de una zona con mayor concentración de moléculas a una de menor
concentración y sin gasto de energía (Fig. 3A). De hecho, el movimiento de una partícula a favor de su gradiente de
concentración libera energía, mientras que el movimiento de una partícula en contra de su gradiente de concentración
requiere del gasto de energía (Fig.3A).
Debido a las características de la membrana, a su polarización eléctrica y a la concentración de iones cargados dentro
y fuera de la célula, se genera un gradiente electroquímico. Así el traspaso de moléculas de un lado a otro de la membrana
depende de su gradiente de concentración químico y eléctrico. De esta forma, el gradiente electroquímico combina el
potencial de membrana (diferencia en el potencial eléctrico a cada lado de la membrana) y el gradiente de concentración
los cuales trabajan en conjunto para aumentar la fuerza de transporte de iones (Fig. 3B).
105
Figura 3. Gradiente electroquímico. (A) Transporte
pasivo a favor de gradiente, sin gasto de energía.
(B) Gradiente dependiente de concentración de
moléculas y de cargas.
Referencia figura 11-4. Biología molecular de la
El transporte pasivo lo podemos clasificar en difusión simple y difusión facilitada. La difusión simple corresponde
al transporte pasivo inespecífico, pudiendo incluir el paso directo de una molécula a través de la membrana (como el
oxígeno, dióxido de carbono y moléculas apolares pequeñas solubles en lípidos) y transporte a través de canales (como
el agua). En el caso de la difusión facilitada, el transporte es por difusión a través de transportadores estereoespecíficos.
En estos casos, el transportador suele ser una proteína integral de membrana (permeasa). A diferencia de la difusión
simple, la difusión facilitada requiere de especificidad de sustrato, cada permeasa transporta un solo tipo de sustratos
químicamente parecidos (Fig. 4A). Además, la difusión facilitada es más rápida que la difusión simple, pero es saturable,
porque, el transporte ocurre a través de un número limitado de transportadores (Fig. 4B).
A B
Figura 4. Difusión simple y facilitada. (A) Transporte por difusión facilitada. (B) Diferencia entre transporte por difusión simple y facilitada.
Existe una velocidad máxima de transporte en la difusión facilitada que se alcanza cuando el transportador está trabajando a su máxima capacidad.
Este tipo de transporte es saturable.
106
Algunos transportadores también pueden moverse a través de la membrana para permitir que una molécula
determinada la atraviese (Fig. 5) Por ejemplo, los transportadores de glucosa son proteínas que se ubican en la membrana
de las células del hígado. Este transportador tiene dos conformaciones posibles, en una de ellas expone sus sitios de
unión para glucosa al exterior de la célula y en el otro expone estos sitios al interior de la célula.
Figura 5. Transporte a través de la membrana. Algunos transportadores pueden moverse por la membrana para así permitir el transporte de una
molécula de un lado a otro.
Transporte activo (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008).
El transporte activo moviliza moléculas en contra de su gradiente electroquímico. Este tipo de transporte es esencial
para la composición iónica intracelular y para importar solutos que se encuentran a una menor concentración en el
exterior en comparación al interior. Existen tres tipos principales de transporte activo: transportador acoplado, bombas
impulsadas por ATP y bombas impulsadas por luz (Fig. 6).
Figura 6. Tipos de transporte activo.

Transportador acoplados
Algunos transportadores son del tipo uniporte, es decir, transportan un tipo de moléculas en un solo sentido, a favor
del gradiente de concentración. Sin embargo, en el transporte acoplado, el transporte de un soluto depende estrictamente
del transporte de un segundo soluto. Como la unión entre los solutos y la proteína transportadora es específica y fuerte,
permite a los transportadores acoplados usar la energía almacenada en el gradiente electroquímico de un soluto (un ion)
para transportar el segundo en contra de gradiente, de modo que este tipo de transporte no requiere de la hidrólisis
de ATP. Podemos distinguir dos tipos de transportadores acoplados: (1) simporte, en la que las dos sustancias son
transportadas en la misma dirección y (2) antiporte, en la que ambas moléculas se transportan en direcciones opuestas
(Fig. 7).
107
Figura 7. Transporte activo acoplado.
célula, quinta edición. (©Garland Science 2008
y Ediciones Omega 2010).
Bombas impulsadas por ATP

Otro tipo de transporte a través de membrana es mediante el uso de bombas. Existen tres clases de bombas
dependientes de ATP: (1) bombas tipo P, (2) bombas tipo F (y tipo V) y (3) transportadores ABC. En general a las
bombas impulsadas por ATP, se les conoce comúnmente como ATPasas porque hidrolizan el ATP a ADP + Pi y porque
utilizan este tipo de energía para mover los iones a través de la membrana (Fig. 8).
Figura 8. Bombas impulsadas por ATP.

1) Bombas tipo P: son proteínas que se fosforilan (agregan grupos fosfato) a sí mismas, durante el ciclo de bombeo.
Una de las funciones vitales de las bomba tipo P es el transporte de iones cargados (Na+, K+, Ca2+, H+). Un ejemplo de la
utilidad de las bombas tipo P es el transporte de calcio. Las células eucariontes mantienen muy poco Ca2+ en su interior,
por lo que un pequeño importe de calcio bastaría para producir grandes cambios en la concentración, lo que se traduce
en un efecto determinado. En consecuencia, el gradiente de Ca2+ al interior de la célula cumple un rol importante en
señalización celular. Otro ejemplo de las bombas P, es el transporte de iones sodio-potasio. La bomba de sodio-potasio,
establece el gradiente de Na+ a través de la membrana plasmática. El K+ se encuentra en gran concentración al interior
de la célula. Por el contrario, la concentración de Na+ es baja al interior de la célula, pero alta fuera de ella (ver Tabla
1). Este transportador funciona en base a ATP, expulsando el Na+ de la célula (tres iones) en contra de su gradiente
electroquímico e incorporando K+ (dos iones) en contra de su gradiente de concentración. Las células animales gastan
1/3 de energía en estas bombas, es muy importante en células nerviosas, las que pierden K+ y ganan Na+ con cada
impulso nervioso. También se usan para regular el pH (Fig. 9).
108
Figura 9. Bombas de sodio-potasio.
Debido a que la cara interna de la membrana celular está cargada negativamente en relación con el exterior, la bomba
de sodio-potasio puede producir una corriente electroquímica a través de la membrana (potencial eléctrico). El efecto
electrogénico constituye el 10% del potencial de la membrana. Esta bomba también ayuda a controlar la concentración
de solutos al interior de la célula y, por lo tanto, ayuda en la osmolaridad o tonicidad del citosol.
2) Bombas tipo F (y tipo V), son proteínas tipo “turbina” constituidas por múltiples subunidades. Se encuentran
principalmente en la membrana de bacterias y en la membrana interna de la mitocondria y cloroplastos. Se les conocen
como ATP sintasas porque generan ATP usando gradiente de H+.
En las bombas impulsadas por ATP, el funcionamiento del sistema dependerá de la concentración relativa de ATP,
ADP y Pi, así como también de los gradientes electroquímicos de Na+ y K+.
3) Transportadores ABC, generalmente transportan moléculas pequeñas a través de la membrana a diferencia de las
bombas tipo F y V, que solo transportan iones, como la bomba de H+. Los transportadores ABC contienen dos dominios
ATPasas de unión de ATP. La unión de ATP produce cambios conformacionales que exponen sitios de unión para el
sustrato en un lado de la membrana y luego en el otro lado (Fig. 10).
Figura 10. Transportador ABC. (A) Transportador ABC bacteriano. (B) Transportador ABC eucarionte.
109
Osmosis y tonicidad (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008)
La osmosis corresponde al movimiento neto de un solvente de un lugar de menor concentración de soluto a otro
de mayor concentración de soluto, a través de una membrana semipermeable, siendo la presión osmótica la fuerza
necesaria para impedir la migración del solvente. En un organismo vivo, el solvente es generalmente agua y la membrana
semipermeable es la membrana plasmática de la célula (Fig. 11). La presencia de iones afecta la osmolaridad intracelular
y dado que la membrana plasmática es impermeable a ellos, la célula debe utilizar las bombas para controlar su
concentración y el flujo de agua hacia dentro o fuera de la célula.

Figura 11. Osmosis. Se produce cuando dos soluciones
con diferente concentración son separadas por una
membrana semipermeable. Debido a que el soluto no
puede atravesar la membrana, el disolvente difunde a través
de la membrana desde una zona de menor concentración
a la de mayor hasta equilibrar las concentraciones. Este
proceso no requiere de energía
La tonicidad celular corresponde a la presión osmótica de una solución comparada con el plasma. Las células se
pueden encontrar en diferentes medios, los que pueden afectar su tonicidad. Por ejemplo, se dice que una célula está en
una solución isotónica cuando la concentración de solutos fuera y dentro de la célula es igual, no afectando a la célula.
Una solución hipertónica es cuando existe mayor concentración de solutos en el exterior de la célula que al interior,
produciendo la salida del agua de la célula (crenación). En una solución hipotónica, hay menor concentración de solutos
al exterior de la célula que al interior, lo que produce entrada de agua a la célula pudiendo reventarla (citólisis). Estos
procesos también se observan en células vegetales. Sin embargo, en ellas la pared celular protege a la célula de los
procesos de crenación y citólisis (Fig. 12). En el caso de organismos como protozoos esta regulación se hace mediante
la expulsión de agua en vacuolas contráctiles especiales.
Figura 12. Respuesta de un eritrocito humano al cambio de osmoralidad en el fluido extracelular.

110
Canales iónicos y potencial de membrana (Capítulo 11, Alberts, et al. 2008).
La célula puede utilizar canales específicos para el transporte de ciertos componentes esenciales. Por ejemplo, el agua
y moléculas pequeñas solubles en agua pueden pasar a través de la membrana por acuaporinas. En general, los canales
son poros acuosos transmembrana que permiten el movimiento pasivo de un lado a otro de la membrana. Las porinas y
las uniones gap (un tipo de unión que conecta a dos células) son ejemplos de canales largos. Sin embargo, la mayoría de
los canales son pequeños y altamente selectivos, usados principalmente para el transporte de iones (Na+, K+, Cl- y Ca2+).
Una diferencia entre simples poros y canales iónicos, es que los canales iónicos no están siempre abiertos. Diferentes
estímulos producen cambios conformacionales en las proteínas que lo conforman, lo que permite que estos canales se
abran o se cierren (Fig. 13).
Figura 13. Activación de canales mediante diferentes

estímulos.
Referencia figura 11-21. Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
La función de los canales es hacer a la membrana temporalmente permeable a iones inorgánicos, pero de manera
selectiva, permitiéndoles difundir rápidamente de acuerdo con su gradiente electroquímico cuando el canal está abierto.
El flujo de iones cambia el potencial de membrana alterando así las fuerzas electroquímicas lo que facilita el movimiento
de otros iones. Existen diferentes estímulos que pueden influenciar la apertura o el cierre de los canales iónicos, por
ejemplo: activación por ligando (extracelular o intracelular), por voltaje o por activación mecánica.
Los canales iónicos que son activados por voltaje dependen de proteínas especializadas con dominios cargados llamados
sensores voltaicos. Estos sensores voltaicos son extremadamente sensibles a cambios en el potencial de membrana. Así,
un flujo de iones a través de la membrana es detectado como una corriente eléctrica y, si una acumulación de iones
no es balanceada por iones de carga opuesta, será detectada como una acumulación de carga eléctrica o de potencial
de membrana. Este cambio de voltaje y la depolarización temporal de la membrana es muy importante, porque es el
mecanismo que permite la transmisión de los impulsos nerviosos. El potencial de membrana está determinado por el
estado de los canales iónicos en la membrana y por la concentración de los iones en el citosol y en el medio extracelular
(Fig. 14).
Figura 14. Transmisión de un
impulso nervioso.
Referencia figura 11-28.
Biología molecular de la célula,
quinta edición. (©Garland
Science 2008 y Ediciones
Omega 2010).
111
Durante la transmisión de un impulso nervioso se produce la apertura secuencial de canales de sodio, lo que gatilla
la entrada de sodio al interior de la célula, depolarizando esa región de la membrana, es decir, cambiando la carga de
negativa (-) a positiva (+) en la cara citosólica de la membrana. Este evento promueve la apertura de canales de sodio
contiguos, los que continúan con la depolarización de la membrana. Los canales de sodio tienen un mecanismo de
inactivación, que hace que el canal abierto se cierre rápidamente aun cuando la membrana continúe depolarizada. Así, el
canal de sodio permanece inactivado hasta que la membrana recupera su polarización inicial, obligando a que el impulso
se transmita solo en una dirección. Los canales de potasio proveen de un segundo mecanismo de acción que ayuda
a que la polarización de la membrana se restablezca al permitir la salida de potasio (Fig. 15 A). El impulso nervioso
termina cuando llega al final del axón e impulsa la sinapsis química a través de la liberación de neurotransmisores, que
transmitirán el impulso a otra neurona o bien a una célula blanco (Fig. 15 B).
Figura 15. Propagación de un impulso nervioso. (A) Apertura de canales de sodio. (B) Sinapsis química.
Referencia figura 11-30 y 11-35. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
112
CUESTIONARIO 2
TRANSPORTE A TRAVÉS DE
MEMBRANA CELULAR
1.- Resuelva la siguiente sopa de letras, encuentre 10 palabras claves revisadas en este capítulo.
2.- ¿Qué tipo de transporte es el que muestra el esquema?
113
3.- Complete la siguiente tabla.
Propiedades Difusión simple Difusión facilitada T r a n s p o r t e Cotransportador

activo
Requiere proteínas
específicas
Transporte de solutos en
contra del gradiente
Acoplado a hidrólisis de
ATP
Cotransportador de iones a
favor de gradiente
Ejemplos de moléculas
transportadas
4.- Conteste las siguientes preguntas
a) ¿Qué es osmosis?
b) El transporte acoplado es activo, pero no hay hidrólisis de ATP, ¿de dónde se obtiene la energía?
c) ¿En qué se basa la propagación de un impulso nervioso?
5.- Asigne a cada figura el concepto que corresponda: hipertónico, bomba tipo P, canal, ATP sintetasa.
114
Horizontal
4 Corresponde a un gradiente que combina el potencial de membrana (diferencia en el potencial eléctrico a cada lado
de la membrana) y el gradiente de concentración.
6 Existe simple y facilitada, ambos son transporte pasivo.
8 Median el movimiento de un soluto de un lado de la membrana otra.
Vertical
1 Pueden difundir fácilmente a través de la membrana a través de difusión simple.

2 Son proteínas que se fosforilan a sí mismas permitiendo el transporte activo.
3 Proteínas integrales de membrana que permiten el transporte de moléculas.
5 Discriminan en base al tamaño y a la carga eléctrica de las moléculas.
7 Requieren de proteínas transportadoras o canales para su transporte a través de la membrana.
115
116
3
COMPARTIMIENTOS Y TRANSPORTE
INTRACELULAR
RESUMEN
A diferencia de las bacterias, las que generalmente consisten en un solo compartimiento intracelular rodeada de
una membrana plasmática, las células eucariontes están subdivididas en compartimientos rodeados de membranas que
son funcionalmente distintos. Estos compartimientos se conocen como organelos y contienen sus propias enzimas y
moléculas especializadas para ejercer su función. Esta organización obliga a la célula a tener un mecanismo de transporte
que permita el intercambio de productos específicos entre un compartimiento y otro. Para entender cómo funciona la
célula eucariótica es necesario conocer cómo se mantienen estos compartimentos, qué hay en ellos y cómo y qué se
distribuye entre ellos.
Palabras clave: organelos, compartimientos celulares, poro nuclear, retículo endoplásmico, mitocondrias, cloroplastos,
endosimbiosis, secuencia (péptido) señal, GTPasa Ran, GAP, GEF, mitocondrias, TOM y TIM, translocadores,
tilacoide, cloroplastos, retículo endoplásmico rugoso, partícula de reconocimiento de la señal (SRP).
Organelos (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008).

Cada célula eucariótica en su interior está subdivida en sub-compartimientos rodeados de membrana los cuales
poseen funciones específicas (Tabla 1, Fig. 1). Cada uno de estos compartimientos celulares tiene sus propias enzimas
características y moléculas especializadas, además de tener un complejo sistema de transporte y distribución.
Figura 1. Principales compartimentos

celulares en la célula animal.
Referencia figura 12-01. Biología
Omega 2010).
117
Tabla 1: Organelos de la célula eucarionte
Organelo Característica
Núcleo Contiene el genoma. Síntesis de ADN y ARN
Retículo endoplásmico rugoso Ribosoma asociado a él
Retículo endoplásmico liso No hay ribosomas asociados a él

Golgi Modificación covalente de proteínas y lípidos. Despacho a
otros sectores
Peroxisomas Reacciones de oxidación
Mitocondrias Genera energía
Lisosomas Contiene enzimas digestivas

Endosomas Distribución de material endocitado
Citosol Contiene vías metabólicas; sitio de síntesis de proteínas
Algunos organelos, como el núcleo y el retículo endoplásmico se cree que aparecieron como producto de la invaginación
de la membrana plasmática que terminó por rodear al ADN de una célula procariota ancestral, evolucionando a ser una
célula eucariota. De hecho, el lumen (o interior) del núcleo es topológicamente equivalente al citosol. Por su parte, el
lumen del retículo endoplásmico es continuo entre las membranas externa e interna y es equivalente topológicamente
con el espacio extracelular (Fig. 2A). Durante la evolución esta célula eucariota ancestral con núcleo y retículo pudo
eventualmente fagocitar a otras células procariontes de menor tamaño. Esto es lo que propone la teoría endosimbiótica,
la cual explica la aparición de otros organelos como el cloroplasto o las mitocondrias (Fig. 2B). El incorporar una bacteria
aeróbica ancestral le resultó beneficioso a la célula eucarionte primitiva, ya que pudo utilizar el oxígeno disponible en
el amiente, para así maximizar sus procesos metabólicos y de producción de energía. Este evento explica la aparición
de las mitocondrias. Del mismo modo, al incorporar a una cianobacteria fotosintética, las células eucariotas primitivas
pudieron realizar fotosíntesis, lo que dio origen a los cloroplastos que encontramos hoy en día en las células vegetales y
las algas.
Los diferentes compartimientos celulares no están aislados, si no que están en constante comunicación con otros
compartimientos. Entre ellos existe transporte de diferentes moléculas, como proteínas, lo que da cuenta de un sistema
complejo, específico y altamente regulado de distribución.
A B
Figura 2. Esquema evolutivo de algunos organelos. (A) Teoría de la aparición del núcleo y el retículo endoplásmico. (B) Teoría endosimbiótica.
118
Distribución Intracelular de Proteínas y vías secretoras (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008).
Uno de los procesos más importantes para la función de la célula es la distribución intracelular de proteínas y, en
este sentido, es necesario entender cómo las proteínas son distribuidas a los distintos organelos. Que una proteína
sea destinada a uno u otro organelo depende de la presencia de una secuencia señal en la proteína que se debe
transportar, señal que varía según el organelo (Fig. 2). Esta secuencia señal corresponde a una secuencia característica de
aminoácidos hidrofóbicos, conocida como péptido señal. Esta secuencia está localizada generalmente en el N-terminal
de la proteína que se quiere transportar. Una vez que la proteína llega a su destino, la señal es removida por enzimas
llamadas peptidasas. También existen secuencias señal en la parte interna de la cadena polipeptídica (signal patch), las
cuales también sirven como señal de destino. Por ejemplo, la señal para dirigirse hacia el retículo endoplásmico (RE)
corresponden a aminoácidos hidrofóbicos ubicados en el N-terminal de la proteína, pero aquellas proteínas con este
tipo de señal en el C-terminal se quedan en el lumen del RE. Esta secuencia señal no necesariamente corresponde
a una secuencia específica de aminoácidos, sino más bien, a una estructura tridimensional formada por aminoácidos
estrechamente relacionados. En este sentido es más importante la estructura que forman las secuencias de aminoácidos,
que la secuencia exacta de éstos. El péptido señal es reconocido por receptores especiales mediante complementariedad,
los que funcionan de guía para las proteínas a su destino (Tabla 2).
Tabla 2. Diferente secuencias señales en proteína. Referencia Tabla 12-3 Alberts et al, 2008.
Existen 3 vías principales por las cuales las proteínas pueden moverse de un compartimento a otro:
1) Transporte regulado: del núcleo al citosol, las proteínas se mueven a través de poros nucleares (altamente selectivo).
2) Transporte transmembrana: mediante proteínas traslocadoras. Transporta proteínas específicas a través de la
membrana desde el citosol a un sector topológicamente distinto.
3) Transporte vesicular: es un transporte que involucra envolver la carga (lo que se quiere transportar) en una membrana.
Ejemplo transporte desde el RE al Golgi, en este tipo de transporte la proteína no cruza membranas y debe ser entre dos
compartimentos de topología equivalente. Plastidios y mitocondrias se encuentran excluidos de esta ruta.
119
Transporte de moléculas hacia fuera y hacia dentro del núcleo (Capítulo 12, Alberts, et al.
2008).
El núcleo posee una envoltura (envoltura nuclear) que encierra al ADN y define el compartimiento nuclear. Está
formado por dos membranas, la membrana nuclear interna, que contiene proteínas específicas que actúan como lugares
de unión de la lámina nuclear, y la membrana nuclear externa, que es continua con la membrana del RE y forma un
continuo con ella. Las moléculas como proteínas que entran y salen del núcleo deben hacerlo por medio de los poros
nucleares. Los poros nucleares están formados por un componente columnar que forma el grueso de la pared del poro,
un componente anular que está localizado centralmente y un componente luminal que está compuesto por una gran
glicoproteína de transmembrana que participa en el anclaje a la membrana nuclear (Fig. 3).
Figura 3. Poro nuclear. Se aprecian fibrillas que se

extienden hacia el citosol y hacia la región nuclear. El
poro nuclear está compuesto de una subunidad central
llamada anular, una subunidad luminal y la subunidad
del anillo.
Omega 2010).
El poro nuclear forma canales proteicos que permiten la difusión de pequeñas moléculas (como el H2O) y proteínas
de hasta 60 kiloDaltons (kD) (Fig. 4A). Por lo tanto, el transporte de este tipo de moléculas es pasivo. Sin embargo,
es selectivo para moléculas más grandes. Las proteínas requieren de una señalización nuclear para ingresar al núcleo.
Esta señalización corresponde a una o dos secuencias cortas que contienen muchas lisinas (K) o argininas (R) (cargadas
positivamente). Existen proteínas citosólicas llamadas receptores de transporte nuclear, que se unen a la señal de
localización nuclear y guían el transporte desde o hacia el núcleo (Fig. 4B). Otra característica importante es que
el transporte a través del poro nuclear requiere de energía y posee direccionalidad. La célula obtiene la energía para
este proceso de la hidrólisis de GTP, tanto para la exportación como para la importación. Esto lo hace por medio de
proteínas especiales que unen GTP llamadas Ran. Así, Ran funciona como un interruptor molecular que dependiendo
de si une GTP o GDP experimenta dos conformaciones distintas. Así, cuando un receptor de importación nuclear con
su carga entra al núcleo desde el citosol, se encuentra con Ran que lleva una molécula de GTP. La proteína Ran-GTP
se une al receptor de importación haciendo que libere su carga. Una vez liberada su carga, el transportador nuclear
aún unido a Ran-GTP es transportado fuera del núcleo (Fig. 5A). En el citosol una proteína accesoria hace que Ran
hidrolice su GTP a GDP (Fig. 5B). Entonces suelta del transportador nuclear que está disponible para volver a unir otra
carga. Ran-GDP no puede unirse a transportadores en el citosol, esto solo sucede en el lado nuclear, de modo que existe
una direccionalidad. En el núcleo Ran intercambia el GDP por GTP y puede unirse nuevamente a un transportador sin
carga para sacarlo del núcleo (Fig. 5B). La exportación desde el núcleo ocurre de manera similar, excepto que Ran-GTP
en el núcleo promueve la unión de la carga a un receptor de exportación. Una vez en el citosol Ran-GTP hidroliza el
120 GTP soltando al receptor de exportación y promoviendo la liberación de la carga (Fig. 5A).
A B
Figura 4. Transporte a través del poro nuclear. (A) Transporte en base a tamaño por el poro nuclear. (B) Receptores de importación nuclear.
A B
Figura 5. Transporte hacia dentro y fuera del núcleo a través de la hidrólisis de GTP. (A) Importación y exportación nuclear. Ambos procesos
son llevados a cabo por Ran-GTP. En el caso de la importación, Ran-GTP se une al receptor de importación que lleva un cargo en el interior del
núcleo. Entonces, el receptor de importación suelta su cargo y es conducido fuera del núcleo (aún unido a Ran-GTP). En el citosol, Ran-GTP se
convierte en Ran-GDP y suelta al cargo. En el caso de exportación Ran-GTP promueve la unión del cargo al receptor de exportación. Al salir del
núcleo, Ran-GTP hidroliza el GTP a GDP liberando al receptor de exportación y al cargo. (B) Acción de Ran-GAP que transforma Ran-GTP
a Ran-GDP y Ran-GEF que promueve el intercambio de GDP a GTP. Tanto Ran-GAP como Ran-GEF son GTPasas reguladoras.
Referencia figura 12- 15 y 12-14. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
121
Cómo las proteínas entran a las mitocondrias y cloroplastos (Capítulo 12, Alberts, et al.
2008).

Los cloroplastos y las mitocondrias tienen membrana externa e interna. Además, los cloroplastos tienen un tercer
sistema de membranas llamado tilacoides. Las proteínas que irán a estos organelos poseen una secuencia señal en su
N-terminal específica. Ingresan a estos organelos por sitios especializados en la membrana (sitio de unión entre membrana
interna y externa). Una vez finalizado el transporte, su secuencia señal es removida. El proceso de transporte de proteínas
siempre es asistido por proteínas chaperonas, las cuales ayudan al correcto ingreso y plegamiento de las proteínas en el
interior del RE. En el caso específico de las mitocondrias, existen dos complejos transportadores conocidos como TOM
(en la membrana externa) y TIM (en la membrana interna). Además, el proceso de transporte de proteínas al interior de
la mitocondria requiere de proteínas chaperonas a ambos lados de la doble membrana mitocondrial (Fig. 6A).
En el caso del transporte hacia el interior del tilacoide del cloroplasto, las proteínas necesitan de dos secuencias
señales, ya que deben cruzar la membrana del cloroplasto para ingresar al estroma (dado por el reconocimiento de
la primera secuencia señal) y luego cruzar la membrana del tilacoide para ingresar al interior de este (mediante el
reconociendo la segunda secuencia señal) (Fig. 6B).
A Figura 6. Transporte de proteínas a través de mitocondrias y

cloroplastos. (A) Transporte a través de TOMO y TIM en la
mitocondria. (B) Transporte de proteínas hacia el tilacoide.
Referencia figura 12-25 y 12-29. Biología molecular de la
célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones
Omega 2010).
Retículo Endoplásmico (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008).

El retículo endoplásmico es una red de sacos membranosos interconectados que están distribuidos en el citoplasma.
Está plegado en una serie de túbulos o cisternas generando una superficie mayor que la de la membrana plasmática. En
ciertos sitios, la membrana del Retículo endoplásmico es continua con la membrana externa del núcleo. En su interior
o lumen, el cual está separado del resto de la célula posee una composición proteica e iónica distinta.
El retículo endoplásmico rugoso (RER) tiene ribosomas asociado a él, lo que permiten que las proteínas ingresen
al RER a medida que se sintetizan. El RER es el punto de entrada de las proteínas a otros organelos como el Golgi,
endosomas, lisosomas y la superficie celular. Una vez que las proteínas entran al RER, no tienen contacto con el citosol,
por lo que su transporte ocurre dentro de vesículas, de organelo en organelo. En este sentido podemos identificar dos
122 clases de proteínas importantes: 1) proteínas solubles en agua, translocadas a través de la membrana del RER y liberadas
en el lumen del RER. Este tipo de proteínas tienen como destino el lumen de otros organelos o la secreción fuera de
la célula. 2) Proteínas transmembranas, las que son solo parcialmente translocadas en la membrana del RER y quedan
embebidas en él. El destino de estas proteínas es: la membrana del RER, las membranas de otros organelos (como los
lisososmas) o la membrana plasmática.
La mayoría de las proteínas comienzan a entrar al RER a medida que se sintetizan (translocación co-traducional).
Para que esto suceda, primero una partícula de reconocimiento de la señal (SRP) se une a una secuencia señal (o péptido
señal) en la cadena polipeptídica que está siendo recién sintetizada en el ribosoma, deteniendo su síntesis. Esto permite
acercar al ribosoma a la membrana del RER, ya que la SRP es reconocida por un receptor específico que está embebido
en la membrana del RER. Este reconocimiento de la SRP por parte del receptor también permite unir el ribosoma a la
membrana de RER y abrir los canales translocadores (Fig. 7A). Luego la SRP se suelta para unirse a otro péptido señal
y libera el bloqueo de la síntesis de la proteína. Así, la proteína es translocada a medida que se sintetiza, ingresando al
lumen del RER. La secuencia señal de la proteína que está siendo sintetizada permanece unida al canal translocador
mientras el resto de la proteína es empujada a través del canal. Finalmente, la secuencia señal es cortada por una señal
peptidasa señal que están en la membrana del RER, en el lado lumimal (Fig. 7B).
A B
Figura 7. Translocación de proteínas en el RER. (A) Reconocimiento de péptido señal por SRP se produce durante la traducción y produce una
pausa. El SRP unido al ribosoma se une al receptor que reconoce SRP en la membrana del RER, lo que permite continuar con la traducción y
translocación de la proteína. (B) Translocación de proteínas al lumen del RER. El translocador reconoce el péptido señal y se activa. Mientras la
traducción continua hacia el lumen del RE la porción con el péptido señal queda sujeto al translocador. Finalmente, una péptidas corta el péptido
señal liberando la proteína al interior del RE.
La presencia de una secuencia señal después de la secuencia de inicio, determina que la proteína en vez de pasar al
lumen quede embebida como proteína de transmembrana en el la bicapa lipídica. Esto quiere decir que la secuencia
de aminoácidos en el N-terminal de la proteína inicia la translocación, pero una secuencia de término (secuencia de
término de transferencia) en la misma cadena polipeptídica, conformada por aminoácidos hidrofóbicos, detiene la
translocación y ancla la proteína a la membrana lipídica. El presentar alternadamente, es decir varias secuencias de inicio
y término, permite que las proteínas atraviesen la membrana muchas veces, característica frecuente que se encuentra
en los receptores celulares (Fig. 8). Además, la composición de ciertos aminoácidos cerca de la secuencia de inicio
determina si una proteína terminará en el citosol o en el lumen del RER.
Figura 8. Proteínas transmembranas complejas.

Omega 2010).
123
CUESTIONARIO 3
INTRACELULAR
1.- Identifique los organelos en la célula animal.
2.- Describa el proceso secuencial del ingreso de una proteína a un organelo.
3.- ¿Cuáles son las vías principales por las cuales las proteínas pueden moverse de un compartimento a otro?
4.- Asocie correctamente los siguientes términos
7. N-terminal –– Mitocondria
8. SRP –– Secuencia de aminoácidos que indica destino
9. GEF –– Reconoce péptido o secuencia señal
10. TOM –– Interruptor molecular
11. Péptido señal –– Secuencia de inicio
124 12. Ran-GTP –– Intercambiador de guanina nuclear

5.- Complete el siguiente cuadro.
Organelo Función
Núcleo
Retículo endoplásmico rugoso
Modificación covalente de proteínas y lípidos. Despacho a otros
sectores.
Reacciones de oxidación
Mitocondrias
6.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre las 10 palabras revisadas en este capítulo.
125
126
4
COMPARTIMENTOS Y VÍAS
BIOSINTÉTICAS SECRETORAS Y
ENDOCÍTICAS.
RESUMEN
Una vez que las proteínas ingresan al lumen del retículo endoplásmico se ensamblan en su conformación activa
con la ayuda de chaperonas, pueden sufrir modificaciones químicas y también pueden quedarse en el lumen o bien
salir del retículo hacia otros destinos. Si son proteínas que serán exportadas del RER, entonces deben hacerlo a través
de vesículas, lo que implica que el lumen de cualquier estructura delimitada por membranas del circuito de transporte
secretor y endocítico tienen una topología similar. En las células eucariotas, estas vesículas de transporte se forman y
desprenden de membranas para fusionarse con la membrana del organelo blanco (lugar donde de destino de la vesícula).
Estas vesículas transportan una carga o cargo específico de un lado a otro mediante un sistema controlado, organizado y
direccionado, lo que le permite a la célula comer, beber, secretar moléculas y remodelar su citoesqueleto.
Palabras claves: retículo endoplásmico, glicosilación, proteosoma, vesículas, puentes de disulfuro, fosfatidilcolina, COP-
II, COP-I, KDEL, clatrina, fosfatidilinositol, Rab, t-SNARE, v-SNARE, aparato de Golgi, vía endocítica, endosomas,
fagosoma, auofagosomas, hidrolasas, manosa-6-fosfato, lisosomas, peroxisomas, endocitosis, fagocitosis, pinocitosis,
exocitosis.
Funciones del retículo endoplásmico rugoso y liso (Capítulo 12, Alberts, et al. 2008).
Las proteínas que han sido sintetizadas en el retículo endoplásmico rugoso (RER) podrían ser exportadas al Golgi,
dentro de un circuito altamente organizado y direccionado, pero también podrían permanecer en el RER. El quedarse o
migrar hacia otros destinos dependerá, como mencionamos previamente, de la presencia de un péptido o secuencia señal
y también del correcto plegamiento de la proteína sintetizada. En el RER las proteínas sufren modificaciones químicas,
en su mayoría glicosilaciones (unión de oligosacáridos por enlaces covalentes a las cadenas laterales de asparragina). Las
glicosilaciones cumplen diversas funciones: entregan protección frente a la degradación, mantienen a las proteínas en el
RE hasta que se pliegan correctamente, ayudan a guiar las cargas hacia los organelos apropiados, sirven como señal de
transporte para empaquetar proteínas en vesículas de transporte, y también las proteínas glicosiladas son esenciales para
el reconocimiento de célula-célula cuando se encuentran en la membrana plasmática (cara extracelular). Además, en el
RE también se forman los enlaces puentes disulfuro por oxidación de cisteínas presentes en la cadena polipeptídica de
las proteínas que residen en el lumen del RE. Las proteínas con puentes disulfuros son resistentes a cambios de pH en
el exterior de la célula.
El correcto plegamiento de las proteínas en el RER es muy importante. Proteínas chaperonas son las encargadas de
llevar un control de calidad y, al igual que las glicosilaciones, ayudan en el proceso de plegamiento. En el caso de que una
proteína sea ensamblada incorrectamente, esta será retenida en el RE hasta su correcto plegamiento. Si esto no fuese así,
la proteína será enviada al citosol donde es marcada mediante la adición de ubiquitinas (proceso llamado ubiquitinación)
y dirigida a un complejo proteico llamado proteosoma, donde la proteína marcada será destruida (Fig. 1).
127
Figura 1. Degradación de proteínas por el
proteosoma. Las proteínas que son identificadas para
degradación son transportadas desde el lumen del RE
hacia el citosol, donde mediante la adición de grupos
ubiquintas quedan marcadas para ser dirigidas al
proteosoma y degradadas.
Es importante para la célula asegurarse de la calidad, del plegamiento y el transporte de proteínas de la manera
correcta. De hecho, el tamaño del RE está controlado por la cantidad de proteínas que fluyen dentro de él. Cuando se
rompe el equilibrio de cuantas proteínas se sintetizan y cuantas se transportan y/o pliegan correctamente, se produce
una señal para la creación de más RE o de proteínas chaperonas. Esta señal es conocida como programa de respuesta a
la acumulación de proteínas (de sus siglas en ingles UPR). Si la respuesta UPR es sobrepasada, entonces la célula puede
ir a apoptosis (Fig. 2).
Figura 2. Respuesta UPR.

El retículo endoplásmico liso no tiene ribosomas asociado a él, y dentro de sus funciones más importantes está la de
biosíntesis de lípidos, metabolismo de carbohidratos, detoxificación de drogas y en la regulación de las concentraciones
de calcio intracelular.
En el retículo endoplásmico liso se sintetizan la mayoría de los lípidos incluyendo fosfolípidos y colesterol (Fig. 3A),
por lo que esta región del retículo es responsable del ensamblaje de la mayoría de las membranas. Si bien cada nuevo
fosfolípido es agregado desde la cara citosólica del RE, existen mecanismos mediante proteínas para movilizar estos
fosfolípidos a la cara del lumen (Fig. 3B).
128
A B
Figura 3. Síntesis de fosfolípidos y ensamblaje de membranas. (A) Síntesis de fosfatidilcolina, es el fosfolípido más abundante en la membrana.
Se forma en tres pasos a partir de colina, dos ácidos grasos y un glicerol fosfato y cada etapa es catalizada por una enzima). (B) Translocación de
fosfolípidos de una cara del lumen a otra.
Transporte desde el RE hacia el aparato de Golgi (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008).
El camino desde el RE a la membrana plasmática requiere de muchos pasos. El aparato de Golgi es el sitio más
grande para la síntesis de carbohidratos, así como también, es una estación para el despacho y selección de productos
provenientes desde el RE. La salida y transporte de proteínas desde el RE es un proceso altamente regulado. Estas
proteínas deben transportarse en vesículas que se forman usando proteínas específicas. Las proteínas que van desde el
RER al Golgi son transportadas en vesículas formadas por proteínas llamadas COPII. En cambio, las vesículas que
van de regreso desde el Golgi hacia el RE, por ejemplo, proteínas que a veces se escapan del RE hacia el Golgi, son
transportadas en vesículas formadas por COPI. Las proteínas residentes del RE tienen una secuencia señal (etiqueta
molecular) que delata su destino, esta etiqueta corresponde a una secuencia aminoacídica particular: la secuencia KDEL
(Lisina-Ácido Aspártico- Ácido Glutámico-Leucina). KDEL es reconocida por un receptor de KDEL, una proteína de
transmembrana que es reconocida por COPI para formar vesículas que devuelven la proteína al RE (Fig. 4A). De este
modo, se forma una vesícula recubierta con COPI conteniendo a estas proteínas que habían escapado desde el RE, las
cuales viajan de vuelta desde el Golgi hacia el RE. A este tipo de transporte se le llama transporte retrógrado (Fig. 4B).
A B
Figura 4. Transporte de proteínas desde el retículo endoplásmico al aparato de Golgi. (A) Reconocimiento de secuencia KEDEL. (B) Tráfico de
vesículas con diferentes cubiertas y cargos.
129
A través de vesículas recubiertas con proteínas, la célula puede regular el transporte de proteínas de manera organizada,
direccionada y específica. Así, si quiere transportar proteínas hacia el aparato de Golgi, las vesículas estarán recubiertas
con COPII, en cambio si el transporte es retrógrado, con el fin de traer de vuelta proteínas que pertenecen al RER
pero han escapado al Golgi, utilizará vesículas recubiertas con COPI. Para transportar proteínas desde el Golgi a la
membrana plasmática o de la membrana plasmática hacia el interior de la célula, se utilizarán vesículas con otra proteína
llamada Clatrina.
Formación de vesículas recubiertas con Clatrinas (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008).
La formación de vesículas recubiertas de Clatrina depende del ensamble de una cubierta de proteínas en su superficie
citosólica, en el lugar donde se va a formar la vesícula. Una vez que la vesícula se desprende de su organelo parental se
deshace de su cubierta, para que pueda interactuar directamente con la membrana a la cual se debe fusionar. La cubierta
proteica cumple diferentes funciones: 1) forma a la vesícula y 2) ayuda a capturar moléculas de carga (Fig. 5).
Las proteínas que funcionan como receptor de carga reconocen su cargo y también reclutan a las clatrinas mediante
proteínas adaptadoras o adaptinas, formando una protuberancia que luego se transformará en una vesícula (Fig. 4). Las
proteínas adaptinas cumple con funciones esenciales como asegurar las clatrinas a la membrana de la vesícula y ayudar
a seleccionar la carga. Sin embargo, debe existir especificidad ya que las adaptinas que unen receptores de carga en la
membrana plasmática no son las mismas que se encuentran en el aparato de Golgi.
Figura 5. Ensamblaje y desarme de cubiertas de clatrinas. Receptores de cargo, con sus moléculas cargos ya adheridas son capturados por adaptinas,
las que también se unen a clatrinas ubicadas en la superficie citosólica de la vesícula naciente. Una vez que la vesícula se ha formado y comienza su
viaje, la cubierta de clatrina se desensambla nuevamente dejando a la vesícula desnuda en el citosol.
Cuándo y dónde se forman las vesículas y el destino final de éstas está determinado por una identidad molecular especial
definida por fosfoinosítidos (PIPs) que se unen a las proteínas adaptadoras. La interconversión de fosfatidilinositol (PI)
en PIP es altamente compartimentalizada y cada compartimento u organelo tiene sus propias PI, PIP y PIP fosfatasas
y quinasas. Esto le permite a la célula disponer de un conjunto de vesículas, cada una con un grupo de marcadores
específicos lo que facilita la distribución a cada compartimento blanco (Fig. 6). Una vez ya formadas las vesículas, se
deben desprender del lugar en que se formaron, esto ocurre gracias a la proteína llamada Dinamina la cual fomenta la
constricción y fisión del cuello de la vesícula recién formada, hasta liberarla (Fig. 7).
Cuando las vesículas se acercan al lugar de destino, los marcadores en la membrana de la vesícula son reconocidos
por complementariedad por los receptores de la membrana objetivo. Este proceso de reconocimiento depende de una
familia de proteínas llamadas Rab. Estas proteínas Rab se encuentran en la superficie de las vesículas y son reconocida
por otras proteínas de unión en la cara citosólica de la membrana objetivo. Cada organelo y cada vesícula de transporte
130 tienen una combinación específica de proteínas Rab y por ende encontramos diferentes proteínas Rab localizadas en
determinados subcompartimentos celulares (Tabla 1).
Figura 6. Localización intracelular de PIP.

Referencia figura 13-11. Biología molecular de la célula, quinta Figura 7. Rol de Dinamina.
edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010). Referencia figura 13-12. Biología
Omega 2010).
Tabla 1. Localización subcelular de algunas proteínas Rab.

Referencia Tabla 13-1. Biología molecular de la célula, quinta edición.
131
Además, otras proteínas llamadas v-SNARE (v- por vesicular) y t-SNARE (t- por target, objetivo) interactúan
ayudando en el proceso de reconocimiento y anclaje de las vesículas al lugar de destino (Fig. 8A). De este modo,
entregan especificidad en la unión en la fusión entre membranas (Fig. 8B).

Figura 8. Rol de las proteínas Rab y SNARE. (A) Rol de proteínas Rab en la dirección de vesículas a destino. Las proteínas Rab efectoras (en verde)
con las proteínas Rab-GTP (en amarillo) ubicadas en la superficie de la vesícula o en la membrana objetivo o en ambas, establecen
interactúan
la primera conexión entre dos membranas que se fusionarán (B) Interacción entre v-SNARE y t-SNARE para el proceso de reconocimiento y
anclaje de las vesículas.
Referencia figura 13-14 y 13-16., Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Una vez que los complejos SNARE han interactuado para poder fusionar las vesículas a sus membranas blanco, el
complejo debe desensamblarse para poder estar listo para una nueva ronda de anclaje y fusión. Una proteína esencial en
este proceso es NSF, la que cicla entre la membrana y el citosol y cataliza el proceso de desensamblaje (Fig.9).
Figura 9. Rol de las proteínas NSF en el desensamble del complejo v-SNARE/t-SNARE.

Referencia figura 13-18., Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
132
Funciones bioquímicas del aparato de Golgi (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008).
El aparato de Golgi está formando por un sistema de cisternas que consiste en compartimentos encerrados por
membrana. Su localización depende de la presencia de microtúbulos, pudiendo estar cerca del núcleo de la célula o bien
más distribuido hacia el citoplasma cerca de la salida del RE. Podemos identificar dos caras en el Golgi una cis (entrada)
y una trans (salida), cada una compuesta de distintos subcompartimentos especializados interconectados (Fig. 10A).
Figura 10. Aparto de Golgi (A) Estructura del aparato de Golgi. (B) Tipos de oligosacáridos encontrado en glicoproteínas de mamíferos. Se aprecia
el proceso ordenado de glicosilación que ocurre en el retículo endoplásmico y el Golgi. Primero, en el lumen del retículo endoplásmico actúan dos
glicosidasas y una manosidasa, luego en una segunda etapa, ya en el Golgi, una manosidasa del Golgi remueve manosas específicamente. En una
tercera etapa una N-acetylglucosamina transferasa adhiere N-acetylglucosaminas. En una cuarta etapa una Manosidasa II remueve manosas y
finalmente en una quinta etapa, /V-acetylglucosaminas, galactosas y ácidos salicílicos son adheridos.
Referencia figura 13-28 y 13-31 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Como se dijo anteriormente, las proteínas que se transportan, sufren una serie de modificaciones en el RE, como
las glicosilaciones, en el aparto de Golgi pueden adquirir aún más modificaciones. En el aparto de Golgi las proteínas
pueden sufrir además de las glicosilaciones, sulfataciones para finalmente ser destinadas a su lugar de función. La
glicosilación de las proteínas es un proceso ordenado y complejo, el cual parte cuando cadenas de oligosacáridos se
adhieren o son removidas. Tres tipos de enzimas glicosil-transferesas actúan en una determinada secuencia a medida que
la proteína avanza por el Golgi (Fig. 10B). A diferencia del RE, en el cual la mayoría de las proteínas están en el lumen,
en el Golgi las proteínas están rodeadas de membranas. Todas las glucosidasas y glucosil transferasas son proteínas
transmembranas de un solo paso, y generalmente, se organizan en complejos multienzimáticos.
Podemos identificar diferentes tipos de oligosacáridos que se unen al N-terminal de las proteínas. Por ejemplo,
oligosacáridos complejos y oligosacáridos con alta composición de manosas. Los oligosacáridos complejos, se encuentran
unidos al extremo N-terminal y son adheridos a las proteínas en el RE, pero en el Golgi son modificados (algunos
removidos o incluso otros azúcares pueden ser adheridos). Los oligosacáridos ricos en manosa también son modificados
en el Golgi. Las glucosil-transferesas, proveen de variadas glicosilaciones a las proteínas y lípidos de diferentes células
en diferentes estados de diferenciación (Fig. 10B). Proteínas altamente glicosiladas como proteoglicanos, son secretados
y forman parte de la matriz extracelular, mientras otros son parte de la cara exterior de la membrana celular. Otras
funciones importantes de estas proteínas modificadas con azúcares son: resistencia a digestiones por parte de enzimas
proteolíticas, proveer de mucus, reconocimiento y adhesión celular.
133
Lisosomas y peroxisomas (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008).
El transporte del RE al Golgi y del Golgi a otros compartimentos del sistema endomembranoso se lleva a cabo a
través del desprendimiento y fusión de vesículas transportadoras. El transporte puede ser hacia el interior de la célula a
través de la vía endocítica (lisosomas) o hacia el exterior de la célula, vía secretora. A medida que las proteínas y lípidos
son transportados hacia el exterior van sufriendo una serie de modificaciones químicas (adición de carbohidratos o
puentes disulfuros que ayudan a estabilizar la estructura proteica). En el caso de la vía secretora, la síntesis de proteínas
ocurre en el RE, luego estas proteínas siguen camino hacia la entrada del aparato de Golgi, y del Golgi a la membrana
celular o bien a través de endosomas a lisosomas. Por otro lado, la vía endocítica es responsable de la ingestión y
degradación de material extracelular al mover material desde la membrana plasmática a través de endosomas hacia
lisosomas (Fig. 11).
Figura 11. Las tres vías más entendidas de
transporte y separación de proteínas en el
trans-Golgi.
Referencia figura 13-64 Biología molecular
de la célula, quinta edición. (©Garland
Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Inicialmente las moléculas endocitadas son incorporadas a vesículas intracelulares pequeñas de forma irregular
llamadas endosomas tempranos. En los endosomas tempranos, las moléculas endocitadas encuentran por primera vez a
las hidrolasas lisosomales (que llegan a los endosomas desde Golgi). Algunas de estas moléculas ingeridas son devueltas
a la membrana (reciclaje), mientras otras pasan a ser parte de endosomas tardíos, donde comienza la digestión de las
moléculas endocitadas. Los endosomas tardíos después de un proceso de maduración en la que su pH interno decrece,
se transforman en lisosomas. Los lisosomas contienen enzimas hidrolíticas que serán necesarias para la digestión celular
y que funcionan a pH bajo.
Las células tienen una segunda vía de degradación llamada autofagia, por la cual es posible eliminar organelos,
o componentes celulares que ya no son necesarios. La autofagia comienza cuando un organelo se rodea de una
doble membrana creando un autofagosoma, el que después se fusiona con un lisosoma (Fig. 12A). En el caso de los
macrófagos y neutrófilos fagocitan bacterias o restos celulares formando un fagosoma el cual de la misma manera que
los autofagosomas pueden fusionarse a endosma tardío o un lisosoma. Las enzimas lisosomales sirven para destruir y
digerir bacterias (Fig. 12A). La membrana del lisosoma mantiene a las enzimas destructivas alejadas del citosol, además
estas enzimas dependen de pH específico para ejercer su función. La membrana de los lisosomas tiene características
únicas ya que las proteínas de su cara interior están altamente glicosiladas, quedando así protegidas de la degradación
por parte de las hidrolasas lisosomales. Para regular el pH la membrana del lisosoma posee bombas de H+ (Fig. 12B),
que mediante la incorporación de protones bajan el pH a aproximadamente 5,0 (el pH del citosol es 7,2).
El envío de hidrolasas lisosomales o proteínas de membrana lisosomales a los lisosomas, depende de una marca
específica la manosa-6-fosfato (M6P). Estas proteínas son enviadas en vesículas desde el trans-Golgi hacia el lisosoma.
Estas vesículas discriminan proteínas lisosomales de otras debido a esta etiqueta M6P. Receptores-M6P ubicados en la
membrana de la red trans-Golgi (TGN) reconocen las M6P adheridas a las proteínas y permiten la unión de proteínas
adaptinas que se unen a clatrinas formando la vesícula de envío. Una vez que las proteínas-M6P llegan al lisosoma, el
grupo M6P es cortado y el receptor-M6P es devuelto hacia al TGN para su reutilización (Fig. 12C). Así la actividad de
los lisosomas puede clasificarse en tres vías principales: endocitosis, fagocitosis y autofagia.
Los peroxisomas por su parte son organelos también rodeados por una sola membrana cuya función es oxidar com-
puestos para su degradación, por lo que usan oxígeno para realizar estas reacciones llamadas de peroxidación. Estas
reacciones generan peróxido de hidrógeno (H2O2) el que es degradado en los mismos peroxisomas porque es un com-
puesto tóxico para la célula. Los peroxisomas también son esenciales en el metabolismo lipídico, para el acortamiento
134 de los ácidos grasos o para su oxidación en las mitocondrias (β-oxidación). También aquí se oxida la cadena lateral del
colesterol (necesaria para la síntesis de ácidos biliares), como también aminoácidos, ácido úrico y otros sustratos, los
que en su formación utilizan oxígeno molecular y producen H2O2, la que es descompuesta por la enzima catalasa en
agua y oxígeno.
A B
Figura 12. Ruta de los lisosomas. (A) Tres vías de degradación en lisosomas. (B) Lisosoma controla el pH mediante bombas de hidrógeno. (C)
transporte de hidrolasas lisosomales a lisosomas.
Referencia figura 13-44, 13-36 y 13-42. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
135
Endocitosis y exocitosis (Capítulo 13, Alberts, et al. 2008).
Las células son capaces de internalizar diferentes moléculas o incluso a otras células. Para esto las moléculas ingeridas
son progresivamente rodeadas por la membrana plasmática para luego entrar como vesículas intracelulares endocíticas
(endo= dentro). Como mencionamos anteriormente, el destino de estas vesículas será el lisosoma donde el contenido será
digerido. En este proceso podemos diferenciar entre la pinocitosis y la fagocitosis. La pinocitosis que corresponde a la
ingestión de macromoléculas solubles y fluidos (pino= beber). En general, la pinocitosis se lleva a cabo principalmente por
medio de depresiones y de vesículas recubiertas por clatrina, luego se pierde su cubierta y se fusionan con el endosoma.
La captación de fluidos está compensada por la pérdida de fluidos por exocitosis. La fagocitosis, en cambio, corresponde
a la ingestión de material sólido como microorganismos o restos celulares (fago= que come) y que se inicia por la
formación de pseudópodos. Una de las células que fagocitan activamente son los macrófagos que encuentran a sus presas
mediante la unión de las partículas a su superficie celular y la activación de receptores de superficie.
En general el proceso de endocitosis puede estar mediado por receptores, los que generan un complejo receptor-
macromolécula en vesículas recubiertas por clatrina, por ejemplo, así ocurre el transporte de colesterol a través de
receptores de LDL (Fig. 13A). Finalmente, las macromoléculas endocitadas son seleccionadas en los endosomas, unas
para ir a los lisosomas otras para devolverse a la membrana.
El transporte vesicular no ocurre solamente al interior de la célula, sino que se extiende hacia y desde la membrana
plasmática. Proteínas, lípidos y carbohidratos nuevos son transportados desde el retículo endoplásmico, a través del
aparato de Golgi, a la superficie celular por vesículas de transporte que se fusionan con la membrana plasmática, proceso
conocido como exocitosis (exo= fuera). Cada molécula que sigue esta ruta debe pasar por una secuencia establecida
de organelos, siendo modificada químicamente en el camino. La exocitosis puede ser constitutiva, es decir, que ocurre
constantemente, esta ruta proporciona lípidos y proteínas recién sintetizadas a la membrana plasmática, o que genera
proteínas transportadas a la superficie celular y liberadas al exterior (secreción) (Fig. 13B). La exocitosis también puede
ser regulada, es decir, que responde a una señal específica, lo que sucede preferentemente en células de secreción. Estas
células están especialmente diseñadas para producir grandes cantidades de productos como, hormonas, mucus o enzimas
digestivas. Los productos de secreción se almacenan en vesículas secretoras que se acumulan cerca de la membrana
plasmática. La secreción se produce en respuesta a un estímulo (señal extracelular) que hace que las vesículas se fusionen
con la membrana plasmática, liberando su contenido al exterior.
A B
Figura 13. Endocitosis y exocitosis. (A) Endocitosis mediada por receptores de LDL. (B) Exocitosis constitutiva y regulada.
136
CUESTIONARIO 4
BIOSINTÉTICAS SECRETORAS
Y ENDOCÍTICAS
1.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre 10 palabras claves mencionadas en el texto
137
2.- En el siguiente esquema clasifique las palabras o conceptos del recuadro según corresponda entre la exocitosis
constitutiva, exocitosis regulada y lisosoma.
Clasifique Exocitosis constitutiva Exocitosis regulada Lisosoma

Lípidos recién sintetizados
Hormonas
Fagocitosis
Receptor
Proteínas recién sintetizadas
Autofagosoma
Manosa-6-fosfato
a) En el lisosoma existen proteínas de membrana e hidrolasas que cumplen importantes funciones, ¿cómo es posible que
estas proteínas no se destruyan en el ambiente ácido que existe al interior del lisosoma?
b) ¿Cuáles son las posibles vías que puede seguir un compuesto para ser digerido por un lisosoma?
c) ¿Cuál es el rol de la manosa-6-fosfato?
d) ¿Cuál es el rol de los peroxisomas?
e) ¿Cuál es el rol de las proteínas Rab?
138
Horizontal:
2. Resistencia a digestiones por parte de enzimas proteolíticas, proveen de mucus, reconocimiento y adhesión celular
4. Proteínas que aseguran a las clatrinas a la membrana de la vesícula y ayudan a seleccionar el cargo
5. Proteínas que recubren vesículas que van desde Golgi al RER
7. Ayuda a desprender las vesículas recién formadas de la membrana
8. Secuencia aminoacídica que determina el ingreso de proteínas del Golgi al RER
Vertical:
1. Se transforman en PIP ayudando a marcar molecularmente a las vesículas para dirigirlas al organelo blanco u objetivo
3. Son proteínas que recubren vesículas que transitan desde el Golgi hacia la membrana plasmática y viceversa
6. Proteínas que recubren las vesículas que van desde el RER al Golgi
139
140
5
CÓMO OBTIENEN LA ENERGÍA LAS
CÉLULAS A PARTIR DEL ALIMENTO
RESUMEN
Todas las reacciones que ocurren en la célula y que permiten que cumpla sus funciones, como creer, que se divida, que
interactúe con otras células y con el medio o que reciba señales dependen de energía. Las células deben obtener energía
desde elementos del medio que la rodea, al igual que nosotros que estamos formado por células debemos consumir
alimento y transformar este alimento en energía útil. Las reacciones que ocurren al interior de la célula, requieren de
un incremento en la reactividad química, que la célula controla mediante enzimas especializadas que funcionan como
catalizadores en una cadena de eventos que se desarrollan dentro de dos vías metabólicas opuestas: catabolismo y
anabolismo. Cada una de estas vías cumple un propósito en la producción de energía o en la construcción de elementos
útiles para la célula. Moléculas ricas en enlaces de energía y reacciones de óxido-reducción servirán para la obtener la
energía necesaria para las diversas reacciones y procesos que la célula debe realizar. La célula podrá utilizar diferentes
vías metabólicas (algunas dependientes de la presencia de oxígeno y otras no) para poder obtener la energía desde los
alimentos.
Palabras claves: energía, metabolismo, reacciones catabólicas, reacciones anabólicas, reacciones redox, reacciones
exergónicas, reacciones endergónicas, primera y segunda leyes de la termodinámica, entropía, energía calórica,
fotosíntesis, respiración, oxidación, reducción, NADH, NADPH, acetyl-CoA, piruvato, glicólisis, fermentación láctica,
fermentación alcohólica, ciclo del ácido cítrico.
Creamos orden en un universo que siempre tiende al desorden (Capítulo 2, Alberts, et al.
2008).
Para crear orden en un universo que siempre tiende al desorden llevamos a cabo una serie de reacciones químicas.
En algunas de ellas usamos componentes como aminoácidos, azúcares, nucleótidos, lípidos, entre otros, para construir
ladrillos estructurales o moléculas más complejas como: proteínas, cadenas de ADN, entre otros. Para llevar a cabo
esto, necesitamos una fuente de átomos y energía. Cada reacción en las células es catalizada (acelerada) por enzimas.
En el proceso de obtención de energía –y en otros procesos también– las enzimas se conectan en serie formando vías
metabólicas que ayudan a aumentar la eficiencia de estos procesos (Fig. 1).
Figura 1. Vía metabólica.


141
Figura 2. Vías catabólicas y anabólicas. A través de vías
catabólicas la célula puede obtener formas de energía
aprovechable para después, mediante vías anabólicas, poder
construir moléculas.
A partir de la degradación de macromoléculas provenientes de los alimentos (vías catabólicas) obtendremos calor y
produciremos diferentes formas de energía, lo que nos permitirá construir distintas macromoléculas que necesitamos
mediante la utilización de esa energía (vía anabólica) (Fig. 2). La vida es posible debido a los elaborados mecanismos
celulares que permiten extraer la energía del ambiente para almacenarla en enlaces químicos. Luego esa energía
almacenada en los enlaces es utilizada para construir moléculas ordenadas. Esto parecería contravenir la segunda ley
de la termodinámica. Esta ley señala que en el universo (o cualquier sistema aislado), el grado de desorden puede solo
puede aumentar. En términos de probabilidad, los sistemas cambiarán espontáneamente hacia los arreglos que tienen
una mayor probabilidad, y por ende hacia el desorden, el que se mide como entropía (Fig. 3).
Figura 3. Todo tiende al desorden según la segunda ley de la
termodinámica.
Así, no hay que ver a la célula como un sistema aislado, porque toma su energía del medio ambiente: comida,
compuestos inorgánicos o fotones de la luz. Entonces, las reacciones químicas en la célula que generan orden también
generan calor, el cual se dispersa en los alrededores incrementando así el desorden o entropía del ambiente. De esta
forma, la energía calórica liberada por la célula compensa el orden generado al interior de ella al aumentar el desorden
en el medio que la rodea (Fig. 4).
Figura 4. Termodinámica de una célula. La célula toma
componentes del exterior y los reorganiza en estructuras
funcionales con gasto de energía, la cual se disipa en forma de
calor contribuyendo a la entropía del ambiente.
142
Los organismos obtienen energía para sintetizar moléculas orgánicas (Capítulo 2, Alberts,
et al. 2008).
Todos los animales viven de energía almacenada en enlaces químicos, de moléculas orgánicas fabricadas por otros
organismos de los cuales se alimentan. Estas moléculas en los alimentos proveen los átomos necesarios para construir
nueva materia viviente. Algunos animales obtienen su energía al comer a otros animales y otros organismos obtienen
su energía de la energía solar, a través de fotosíntesis (un proceso que convierte la energía electromagnética del sol en
enlaces de energía química en las células).
Figura 5. Fotosíntesis. Los organismos fotosintéticos son capaces de capturar fotones provenientes de la luz solar para transformarla en energía
que después utilizarán en la construcción de macromoléculas.
Los organismos fotosintéticos, obtienen los átomos que necesitan de fuentes inorgánicas como el carbono del CO2
atmosférico, hidrógeno y el oxígeno del agua, nitrógeno del amonio y nitrato del suelo (Fig. 5). La utilización del
carbono forma un gran ciclo que involucra la biósfera como un todo, cruzando los límites entre individuos.
Por otro lado, las células obtienen energía a través de la oxidación de moléculas orgánicas. Este proceso de oxidación
es gradual y controlado. Así, las células obtienen energía desde azúcares y otras moléculas al permitir que los átomos de
carbono e hidrógeno de estas moléculas se combinen con el O2 (Fig. 6).
Figura 6. Fotosíntesis y respiración, procesos complementarios. En la parte izquierda del diagrama se muestra cómo la fotosíntesis –llevada a cabo
por plantas y organismos fotosintéticos– usan la energía del sol para producir azúcares y otras macromoléculas desde átomos de carbono en el
CO2 de la atmósfera. A su vez, estos organismos sirven de alimento para otros organismos. En el lado derecho del diagrama, cómo la respiración
celular de la mayoría de los organismos usa O2 para oxidar las moléculas ingeridas en el alimento, liberando el CO2 nuevamente hacia la atmósfera.
143
Las reacciones de oxidación y reducción (redox) involucran transferencia de electrones. Como en realidad el
número de electrones es conservado en una reacción química (nada se pierde o se gana), oxidación y reducción ocurren
simultáneamente: si una molécula gana un electrón en una reacción (reducción), una segunda molécula debe perder
un electrón (oxidación) (Fig. 7A). Además, debido a que las adiciones de electrones involucran también a un protón,
las hidrogenaciones son reductoras y las deshidrogenaciones son oxidantes, un cambio que es fácil de apreciar en una
molécula (Fig. 7B). Se denomina agente reductor a aquel elemento químico que suministra electrones de su estructura
química al medio, aumentando su estado de oxidación, es decir, siendo oxidado. Por otro lado, el agente oxidante es el
elemento químico que tiende a captar esos electrones, quedando con un estado de oxidación inferior al que tenía, es
decir, siendo reducido.
Figura 7. Proceso de óxido-reducción. (A) Transferencia de electrones durante la formación de un enlace covalente. El átomo que termina con una
mayor carga electrónica (cargado negativamente) se encuentra reducido, mientras que el otro átomo (que tendió a ceder electrones) queda cargado
positivamente y, por tanto, oxidado. (B) Hidrogenaciones y deshidrogenaciones. Mientras más hidrogenaciones tenga una molécula más reducida
está, por el contrario, mientras menos hidrógenos presentes, más oxidado se encuentra.
144
Reacciones favorables y desfavorables en términos de energía (Capítulo 2, Alberts, et al.
2008).
Los cambios en energía libre de Gibbs o entalpía determinan si una reacción puede o no ocurrir. La primera ley de
la termodinámica indica que la energía nunca se pierde, solo se transforma, y como vimos, la segunda ley indica que
una reacción química puede ocurrir solo si resulta en un incremento neto en el desorden del universo. De modo que
podemos expresar el incremento neto del desorden en un sistema en términos de energía libre o entalpía. Las reac-
ciones energéticamente favorables serán aquellas que crean desorden mediante el incremento de energía libre del siste-
ma al cual pertenecen (ΔG negativo). Estas reacciones liberan energía al medio por lo que se conocen como reacciones
exergónicas. En el lado opuesto están las reacciones energéticamente desfavorables (con ΔG positivo) utilizadas para
construir orden en la célula. Es decir, requieren de energía por lo que se las conoce como reacciones endergónicas (Fig.
8A). Estas reacciones energéticamente desfavorables solo ocurren si es que están acopladas a una segunda reacción con
ΔG negativo tan grande que la sumatoria final del proceso sea negativa. (Fig. 8B).
A Figura 8. Reacciones de energía. (A) Reacciones ex-

ergónicas y endergónicas. Una reacción es exergónica
cuando libera energía, son energéticamente favorables y,
por tanto, su ΔG es negativo. Una reacción endergónica
es energéticamente desfavorable y, por tanto, requiere de
energía, siendo su ΔG positivo. (B) Reacciones de aco-
plamiento. Una reacción energéticamente desfavorable
puede ocurrir si se acopla a una reacción energética-
mente favorable, como, por ejemplo, la energía cinética
de las rocas puede ser utilizada para elevar un cubo de
agua. La energía cinética del agua en el cubo puede ser
utilizada por máquinas hidráulicas.
Referencia figura 2-50 Y 2-56. Biología molecular de
la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y
La energía es guardada en los enlaces químicos (covalentes) en un pequeño set de moléculas transportadoras activadas.
Estas moléculas difunden rápido en la célula y llevan los enlaces de energía a sitios donde esta es utilizada para la
biosíntesis de moléculas (Fig. 9A). Un ejemplo de estos enlaces químicos es la molécula de ATP, la energía almacenada
es usualmente aprovechada para unir dos moléculas. Por ejemplo, dos moléculas A y B se unen para producir AB en
una reacción energéticamente desfavorable mediante el uso de ATP en una reacción de condensación (Fig. 9B). Por otra
parte, en la célula, la ruptura de moléculas o polímeros es realizada mediante la hidrólisis catalizada por enzimas. Esta
reacción de hidrólisis es energéticamente favorable, mientras que la biosíntesis requiere energía (Fig. 9C).
145
A B
Figura 9. Transferencia de energía. (A) Reacciones de transferencia de energía y su rol en el metabolismo. (B) Reacción energéticamente
desfavorable llevada a cabo por ATP. (C) Reacción de condensación e hidrólisis.
Referencia figura 2-55, 2-59 y 2-64 Y. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Otros importantes transportadores de energía son el dinucleótido de nicotinamida y adenina (NADH en su forma
reducida y NAD+ en su forma oxidada) y el dinucleótido de nicotinamida y adenina fosfato (NADP+ o NADPH cuando
está reducido). Ambos son importantes transportadores de electrones que participan activamente en las reacciones de
óxido-reducción y que son parte de las reacciones acopladas en las células (Fig. 10). Estos transportadores activados
llevan electrones de alta energía y átomos de hidrógeno. El NADH tiene un rol especial como intermediario en el
sistema catabólico en reacciones que generan ATP a través de la oxidación de la comida. Mientras, el NAPDH opera en
un grupo de enzimas que catalizan reacciones anabólicas, llevando electrones de alta energía necesarios para la síntesis
de moléculas biológicas. Otro transportador importante, es el acetil-CoA, el cual puede transferir grupos acetilo. Es
usado para unir dos unidades de carbono en la biosíntesis de colas de hidrocarbono de los ácidos grasos.
Figura 10. NADH y NADPH. Reacción energéticamente desfavorable llevada a cabo por ATP.
146
En la célula existen organelos, como la mitocondria y el cloroplasto, que nos permiten transformar y obtener la
energía, en donde el uso de gradientes electroquímicos es esencial para la producción de ATP. Sin embargo, esta
conversión de energía pasa por varias etapas. En la primera etapa debemos pasar de polímeros a monómeros para
obtener moléculas como la glucosa. De esta forma podemos metabolizar la glucosa a través del proceso denominado
glicólisis, el cual consta de 10 reacciones (Fig. 11). Al final de la glicólisis, por cada molécula de glucosa se obtendrán
2 moléculas de ATP, 2 moléculas NADH y 2 moléculas de piruvato. Este proceso produce ATP sin la necesidad de
utilizar oxígeno (anaerobio) y ocurre en el citosol tanto de células aeróbicas como anaeróbicas (que necesitan oxígeno
o no, respectivamente, para vivir). Cada molécula de glucosa, de seis carbonos, es transformada en dos moléculas de
piruvato de tres carbonos cada una.
En las células aeróbicas, la glicólisis es un preludio del proceso de digestión, por lo que el piruvato formado en
la glicólisis es transportado al interior de las mitocondrias donde se convierte acetil-CoA. El acetil-CoA entra en el
denominado ciclo del ácido cítrico o ciclo de los ácidos tricarboxílico o ciclo de Krebs (tiene esos tres nombres), que
son una serie de reacciones en las que se vuelve a la primera molécula aceptora de acetil-Co (por eso se llama ciclo),
generando como productos CO2 (desecho), NADH, FADH2 (moléculas que transportan electrones de alta energía) y
GTP (que se usa para sintetizar ATP) (Fig. 15A). Finalmente, los electrones de alta energía son utilizados en la cadena
transportadora de electrones o cadena respiratoria que utiliza oxígeno para formar agua y produce grandes cantidades
de moléculas de ATP (energía).
Figura 11. Glicólisis.

Omega 2010).
147
Ante la falta de provisión de oxígeno las células también pueden usar el piruvato para sintetizar ATP usando reacciones
de fermentación. Es el caso de las células musculares que, al faltarles oxígeno obtienen energía de la fermentación láctica,
convirtiendo el piruvato en lactato para sintetizar ATP. Esta es la razón por la que cuando el tejido muscular se ve
exigido por ejercicios fuertes, se produce acumulación de lactato (que al acumularse produce dolor muscular). La enzima
clave en este proceso es la lactato deshidrogenasa (Fig. 12A). Otra ruta fermentativa es la fermentación alcohólica, que
utiliza la levadura para hacer pan o la cerveza (Saccharomyces cerevisiae), donde el piruvato se transforma en etanol y CO2,
para sintetizar ATP. La enzima clave en este proceso es la alcohol deshidrogenasa (Fig. 12B).
A
Figura 12. Fermentación láctica y alcohólica. (A) Fermentación
láctica, cuando hay baja disponibilidad de oxígeno, por ejemplo, en
una célula muscular que está bajo contracciones vigorosas, el piruvato
producido durante la glicólisis es convertido a lacatato por acción de
la enzima lactato deshidrogenasa. (B) En algunos organismos que
crecen anaeróbicamente, como la levadura, el piruvato es convertido, vía
acetaldehído, en CO2 y etanol.
Referencia figura 2-71. Biología molecular de la célula, quinta edición.
Figura 13. Producción de acetil-CoA a partir de azúcares y grasas. En las mitocondrias de células eucariotas es donde se produce acetil-CoA a
partir de los azúcares y grasas.
148
Las grasas también son utilizadas como fuente de energía, éstas son almacenadas como triglicéridos en gotas de
lípido, que cuando se necesitan son degradados para obtener ácidos grasos y glicerol, los ácidos grasos son transportados
por el torrente sanguíneo, para ser oxidados en las mitocondrias de células que necesitan energía. Al oxidarse producen
acetil-CoA (Fig. 13). Este acetil-CoA entra al ciclo de Krebs y continua su degradación para obtener ATP.
El metabolismo de las plantas, en cambio, producen NADPH (no NADH) y ATP mediante el proceso denominado
fotosíntesis. Esto ocurre en un organelo especializado llamado cloroplasto. El cloroplasto está aislado del resto de la
célula vegetal por una membrana impermeable a las moléculas transportadoras activadas. Por lo que el ATP que se
produce en el cloroplasto solo se usa para sintetizar azúcares, que luego son transportados a la mitocondria para producir
ATP, o cuando hay exceso al resto de la planta en forma de sacarosa. Durante períodos de exceso de fotosíntesis, el
cloroplasto también puede convertir los azúcares en grasa o almidón (Fig. 14).
Figura 14. Metabolismo en plantas.

En las mitocondrias de las células eucariontes (tanto animales como vegetales), al entrar al ciclo del ácido cítrico se
produce la oxidación del acetil-CoA a CO2, lo que resulta en la generación de NADH (Fig. 15A), el cual será utilizado
para producir ATP en la cadena respiratoria (también llamada fosforilación oxidativa). La glicólisis y el ciclo del ácido
cítrico no solo se utilizan en la célula para generar ATP y poder reductor (NADH y FADH2), sino también produce
precursores para la síntesis de moléculas como aminoácidos, nucleótidos o ácidos grasos (Fig. 15B), que son bloques de
construcción de moléculas complejas que la célula necesita para su sobrevida.
A B
Figura 15. Ciclo de ácido cítrico y glicólisis. (A) Ciclo de ácido cítrico. (B) Glicólisis y ciclo del ácido cítrico.
149
CUESTIONARIO 5
Horizontal
3 Cuando una molécula cede un electrón

4 Reacciones que liberan energía al medio
6 Medida del desorden de un sistema
8 Son reacciones que usan la energía liberada
por reacciones exergónicas
Vertical
1. Producto final de la glicólisis

2. Metabolización de la glucosa en el citosol
5. Producto final de la fermentación láctica
150 7. Nicotinamide adenine dinucleótido reducido
2.- Complete el esquema
3.- ¿Cuál de estas dos moléculas está más reducida?
4.- Compare el metabolismo de azúcares y grasas completando el siguiente esquema.
151
5.- Resuelva esta sopa de letras. Encuentra 9 palabras claves revisadas en esta guía.
152
153
154
6
MITOCONDRIAS Y CLOROPLASTOS
RESUMEN
Las células deben producir una gran cantidad de energía para llevar a cabo todos los procesos esenciales que le
permiten a un organismo existir. Durante períodos sin comida o ejercicio físico, la glucosa se usa más rápido de lo
que se repone. Por lo que, para poder reponerla en ciertos tejidos, se puede realizar el proceso inverso a la glicólisis
llamado gluconeogénesis. En este proceso, la célula puede sintetizar glucosa a partir de moléculas orgánicas distintas a
los carbohidratos como piruvato o aminoácidos. A través de la glicólisis la célula puede producir ATP, sin embargo, las
células eucariotas disponen de otras vías para producir energía. Las mitocondrias son organelos especializados donde
se producen las moléculas que más tarde serán oxidadas en la cadena transportadora de electrones permitiendo la
obtención de grandes cantidades de ATP. Las células que presentan cloroplastos pueden, además, hacer fotosíntesis,
proceso mediante el cual un conjunto de reacciones produce moléculas orgánicas a partir de la luz y el CO2 atmosférico.

Palabras claves: gluconeogénesis, mitocondrias, cloroplastos, cadena transportadora de electrones piruvato, acetil-CoA,
oxaloacetato, ciclo de Krebs, cadena transportadora de electrones, fosforilación oxidativa, gradiente de protones, ATP
sintetasa, NADH, NADPH, FADH2, clorofila, fotosíntesis, tilacoide, estroma, fotosistemas I y II, fijación del carbono,
ribolusa 1,5 bifosfato, rubisco.
Producción de energía (Capítulo 2, Alberts, et al. 2008).

Para obtener energía la célula metaboliza glucosa a través del proceso de glicólisis. Al final de este proceso se obtienen
2 ATP, 2 NADH y 2 moléculas de piruvato. Sin embargo, a veces, la célula usa más rápido estas moléculas de lo que se
reponen, por lo que debe recurrir al proceso inverso para generar glucosa a partir de otras moléculas como aminoácidos,
lactato o piruvato. Este proceso, llamado gluconeogénesis, necesita de energía (4 ATP y 2 GTP), pero es necesario para
llevar glucosa a otros tejidos como el cerebro. En mamíferos (humanos) la gluconeogénesis ocurre principalmente en las
células del hígado, donde la glucosa es repartida vía el sistema circulatorio. La gluconeogénesis es un proceso altamente
regulado, de modo que existe un equilibrio entre la glicólisis y la gluconeogénesis.
Una vez que la célula obtiene las moléculas de piruvato de la glicólisis, estas son transportadas a la mitocondria donde
son descarboxilados por el complejo piruvato deshidrogenasa para ser transformados en acetil-CoA. Como resultado
de esta descarboxilación por cada molécula de glucosa se producen CO2 (desecho), 2 NADH y 2 acetil-CoA (Fig.
1A). El acetil-CoA es la molécula de entrada al ciclo de Krebs o ciclo del ácido cítrico. Los ácidos grasos también son
transformados a acetil-CoA en la mitocondria, pero a diferencia de los azúcares, no deben ser transformados en piruvato
sino que pueden ser oxidados directamente a acetil-CoA (Fig. 1B).

155
A B
Figura 1. Metabolismo de la glucosa. (A) La piruvato deshidrogenesa transforma el piruvato en acetil-CoA, produciendo NADH en el proceso.
(B) Transformación de los ácidos grasos en acetil-CoA. El ciclo de oxidación de los ácidos grasos es catalizado por una serie de cuatro enzimas
en la mitocondria. Por cada vuelta del ácido graso en el ciclo, se acorta en dos carbonos (mostrados en rojo) y genera una molécula de acetil-CoA,
una molécula de NADH y otra de FADH2.
Referencia figura 2-81. Biología molecular de la célula, quinta edición. (ÓGarland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
El ciclo de Krebs produce 2/3 de la oxidación total de los compuestos carbonados, produciendo CO2 y electrones
de alta energía en forma de NADH. El NADH y FADH2 pasan a través de una cadena transportadora de energía
en la membrana de la mitocondria, utilizando O2 para producir H2O. En el ciclo, el O2 es la mejor manera para que
NADH entregue su electrón y se oxide a NAD+. El acetil-CoA no es oxidado directamente, sino que es transformado
a oxaloacetato para formar ácido tricarboxílico o ácido cítrico (6 carbonos). La oxidación del ácido cítrico ocurre de
manera gradual produciendo moléculas transportadoras activadas ricas en energía. Como resultado, en cada vuelta del
ciclo se obtienen 2 moléculas de CO2 (desecho), 3 moléculas de NADH, 1 molécula de GTP y 1 de FADH2 (Fig.
2). El ciclo de Krebs produce la mayor parte del dióxido de carbono (CO2) en los tejidos animales. Por otro lado, la
producción de NADH y FADH2 permitirá más tarde movilizar electrones de alta energía en la cadena transportadora
de electrones, impulsando la producción de ATP. El ciclo dirige el exceso de energía hacia la biosíntesis de ácidos grasos,
por lo cual permite el almacenamiento energético. También, proporciona precursores para la biosíntesis de proteínas
y ácidos nucleicos; y sus componentes regulan directamente (producto-precursor) o indirectamente (alostéricamente)
otras rutas metabólicas.
Figura 2. Ciclo de Krebs o del ácido cítrico. El acetil-

CoA reacciona con oxaloacetato para formar un ácido
tricarboxílico de seis carbonos o citrato (ácido cítrico).
Dos moléculas de CO2 son producidas como desecho, pero
también son producidas 3 moléculas de NADH, una de
FADH2 y un GTP. Los átomos de carbono de cada molécula
intermediaria se muestran en amarillo.
Omega 2010).
156
El ciclo ocurre en la matriz mitocondrial de las células eucariontes (Fig. 3) y la regulación del ciclo de Krebs en las
células animales ocurre fundamentalmente en dos sitios: primero a nivel de la enzima piruvato deshidrogenasa y luego
a nivel de la enzuma isocitrato deshidrogenasa, dentro del ciclo. En bacterias aeróbicas el ciclo de Krebs ocurre en el
citosol de la bacteria.
Figura 3. Mitocondria. Es posible apreciar la matriz que es
donde ocurre el ciclo de Krebs, membrana externa e interna y el
espacio intermembrana.
Fosforilación oxidativa (Capítulo 14, Alberts, et al. 2008).

Los transportadores de energía NADH y FADH2 generados durante el ciclo de Krebs deben donar sus electrones
de alta energía a la cadena transportadora de electrones, en la membrana de las crestas mitocondriales (Fig. 3) oxidando
el NADH a NAD+, FADH2 a FAD+ (Fig. 4A). Los electrones pasan rápidamente a lo largo de la cadena utilizando el
O2 para producir H2O. De este modo, la oxidación del NADH y FADH2 permite que los electrones pasen a lo largo
de una cadena con aceptores y donadores de electrones especializados, cayendo sucesivamente a un estado menor de
energía. La energía que liberan los electrones en este proceso produce el bombeo de iones hidrógenos (H+, protones) a
través de la membrana –desde la matriz de la mitocondria hacia el exterior– generando un gradiente de H+ (Fig. 4B). El
gradiente de H+ generado por gradiente de concentración entrará nuevamente al compartimiento interior a través de un
transportador específico llamado ATP sintetasa. El paso a través de la ATP sintetasa genera ATP a partir de ADP+Pi
(Fig. 4C, Fig.5A). Al final de la serie de transferencia de electrones, los electrones pasan a una molécula de O2 que al
combinarse con H+ forma H2O.
A B C
Figura 4. Transporte de electrones y gradiente de hidrógeno. (A) Donación y transporte electrones en la cadena transportadora de electrones. (B)
Gradiente de hidrógeno mediante bombas. (C) Producción de ATP por la ATP sintetasa.
El proceso de transporte de electrones a través de la cadena transportadora de electrones recibe el nombre de

fosforilación oxidativa o cadena respiratoria. Los complejos que participan aceptando y donando electrones y los
transportadores de electrones son proteína especializadas y, el bombeo de protones crea un pronunciado gradiente
electroquímico de protones a través de la membrana interna mitocondrial, que finalmente se traduce en energía útil para
la célula (Fig.5B). Todo el proceso, desde la obtención de acetil-CoA a la obtención de ATP, es coordinado y regulado
(Fig. 5C), siendo la fosforilación oxidativa el proceso que produce la mayoría del ATP en las células (Tabla 1).
157
Tabla 1: Producción de energía total a partir de una molécula de glucosa desde glicólisis a fosforilación oxidativa.
Proceso Producto directo Final ATP producido por molécula

Glicólisis 2 NADH (citosólico 3*
2ATP 2
Oxidación del Piruvato a 2 NADH (matriz mitocondrial 5
AcetilCoA (2 por glucosa)
Completa oxidación del 6 NADH (matriz mitocondrial 15
AcetilCoA en ciclo de Krebs 2 FADH2 3
2 GTP 2
Total 30
*El NADH que se produce en el citosol aporta menos energía, porque debe ser transportado a la mitocondria
para entrar a la fosforilación oxidativa y ese transporte requiere energía ya que la membrana de la mitocondria es
impermeable al NADH. Cada NADH vale 2,5 ATP y cada FADH2 vale 1,5 ATP ya que entra en el segundo complejo
aceptor de electrones.
A C
Figura 5. Respiración celular. (A) La ATP sintetasa permite la producción de ATP aprovechando el gradiente electroquímico de protones. La
ATP sintetasa también puede producir el proceso inverso, es decir usar ATP para bombear hidrógenos hacia fuera de la matriz. (B) Fosforilación
oxidativa permite el traspaso de electrones a través de diferentes complejos enzimáticos como el complejo NADH deshidrogenasa, el complejo
citcoromo b-c1 y el complejo citocromo oxidasa. (C) Metabolismo en la mitocondria donde cada proceso ocurre en un área diferente de la
mitocondria. El piruvato o bien un ácido graso ingresa a la mitocondria para convertirse en acetil-CoA y entrar al ciclo de Krebs en la matriz
mitocondrial, el cual produce NADH y FADH2, que pasarán a la cadena transportadora de electrones ubicada en la membrana interna de la
mitocondria, y también CO2 como producto de desecho. En la cadena transportadora de electrones el NADH (y también el FADH2, que no
aparece en esta figura) son oxidados. Los electrones son transportados a través de diferentes complejos enzimáticos produciendo un gradiente de
protones que será cosechado como ATP por la ATP sintetasa.
158 Referencia figura 14-19, 14-26 y 14-10. Biología molecular de la célula, quinta edición. ©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Las células pueden obtener energía de los alimentos o de la luz solar, la cual es utilizada primero para crear una
gradiente electroquímica de protones a través de una membrana. Esta gradiente sirve como almacén de energía y es
utilizada para dirigir una variedad de reacciones, en mitocondrias y cloroplastos. La energía es liberada cuando los
protones vuelven al compartimiento de menor concentración.
Cloroplastos y fotosíntesis (Capítulo 14, Alberts, et al. 2008).

La fotosíntesis realizada por plantas, algas y bacterias fotosintéticas es un conjunto de reacciones que producen
moléculas orgánicas a partir de la luz, el H2O y el CO2 atmosférico. Durante este proceso, se libera oxígeno molecular a
la atmósfera producto de la separación del H2O. El O2, será requerido para el proceso de respiración celular –no solo en
animales sino también en plantas y bacterias.
La fotosíntesis se realiza en un organelo especializado intracelular llamado cloroplasto, que contiene pigmentos
captadores de luz, como el pigmento verde clorofila (Fig. 6). Los cloroplastos son orgánulos de mayor tamaño que las
mitocondrias y se encuentran en plantas y algas, pero no en animales ni hongos. Su estructura es más compleja que la
de las mitocondrias. En la mayoría de las plantas las hojas son el principal lugar donde se realiza la fotosíntesis, proceso
que produce ATP y NADPH, y que finalmente son usados para convertir CO2 en azúcar al interior del cloroplasto. Los
cloroplastos tienen una membrana externa altamente permeable y una membrana interna menos permeable, en la cual
las proteínas transportadoras están incrustadas. La membrana interna rodea un largo espacio llamado estroma (análogo
a la matriz mitocondrial), el que contiene una red compleja de discos llamados tilacoides que cuando se apilan forman
una grana. Aquí se encuentran muchas enzimas metabólicas (Fig. 6).
Figura 6. Cloroplasto. En la hoja se aprecian pigmentos

verdes (clorofila). El cloroplasto está compuesto de un
estroma, membrana interna y externa y presenta tilacoides.
La compleja red de tilacoides forman la grana.
quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega
2010).
La fotosíntesis es un proceso complejo, pero se puede resumir del siguiente modo:
La primera fase es dependiente de la luz. En ella la energía del sol es capturada y almacenada transitoriamente en
enlaces de alta energía de ATP o del transportador de electrones activado NADPH. Estas reacciones fotosintéticas de
transferencia de electrones que producen energía (llamadas también reacciones de luz), se producen en la membrana de
los tilacoides (Fig. 7A). En estas reacciones, la energía derivada de la luz energiza a un electrón en el pigmento orgánico
(clorofila) permitiendo que el electrón se mueva a través de una cadena transportadora de electrones en la membrana
del tilacoide. El electrón donado a la cadena transportadora de electrones por la clorofila, es reemplazado finalmente por
un electrón extraído desde el H2O (Fig. 7B).
159
A
Figura 7. Cosecha de energía en la molécula de clorofila. (A) Complejo de antena para la captación de la luz por parte de la clorofila. Este complejo
antena es un colector de energía luminosa en forma de electrones excitados. Esta energía se transfiere hasta dos moléculas especiales de clorofilas en
el centro de reacción fotoquímica. En el centro de reacción produce un electrón altamente excitado que es transportado rápidamente por la quinona
a una cadena transportadora de electrones en la membrana del tilacoide. (B) Energización de electrones. Un electrón de baja energía es excitado por
energía lumínica en el centro de reacción de la clorofila. Este electrón es ahora transferido a un aceptor reducido dejando a la molécula de clorofila
oxidada. Inmediatamente el otro electrón de baja energía pasará del dador de electrones al centro de reacción de la clorofila. Los electrones de baja
energía son aportados por el H2O.
Así, para construir moléculas a partir del CO2, la célula requerirá de energía (ATP) y poder reductor (NAPDH).
Para producir NADPH del NADP+ la célula usa la energía del sol para convertir a los electrones de baja energía del
H2O en electrones de alta energía en NADPH. El primer fotón es absorbido por el primer sistema fotosintético en
el cloroplasto llamado fotosistema II. Ese fotón es usado para producir un electrón de alta energía que es dado a la
cadena transportadora de electrones (Fig. 8). A medida que viaja por la cadena produce el bombeo de hidrógenos en la
membrana del tilacoide creando un gradiente de protones el cual, al igual que en la mitocondria, será aprovechado por
una ATP sintetasa en la membrana del tilacoide.
La cadena transportadora de energía, entrega el electrón generado por el fotosistema II al segundo fotosistema
160 (Fotosistema I). Como en el fotosistema I el electrón comienza con un nivel de energía más alto que en el fotosistema
II, la luz es capaz de impulsar al electrón a un nivel de energía más alto, el cual es necesario para producir NADPH a
partir de NADP+. Un segundo fotón activa nuevamente al electrón. Finalmente, O2 es liberado cuando 4 electrones han
sido removidos desde 2 moléculas de H2O (lo que requiere 4 fotones de luz) (Fig. 9). Sin embargo, si se necesita energía
(ATP) los cloroplastos pueden ajustar su producción de ATP sin la necesidad de generar NADPH, al generar un modo
cíclico de fotofosforilación.
Figura 8. Flujo de electrones en la membrana del tilacoide. Un electrón excitado es transportado en la cadena transportadora de electrones por
carriers o transportadores (plasquinona, plastocianina y ferrodoxina) pasando de un complejo enzimático a otro (primero el complejo citocromo
b6-f, luego el complejo ferrodoxina NADP reductasa y produciendo un gradiente de protones (H+). Los H+ liberados de la oxidación del H2O
en el espacio del tilacoide, así como también, los consumidos durante la producción de NADH en el estroma también contribuyen al gradiente
electroquímico de H+ que será convertido en ATP por la ATP sintetasa.
Figura 9. Fotosistema II y I. Cambio en el potencial de redox

de cada molécula está indicado en el eje Y. El fotosistema II
pasa electrones derivados del agua hacia el fotosistema I. El
flujo neto de electrones a través de ambos fotosistemas se
produce en serie desde el agua al NADP+ y produce NADPH
y ATP. El ATP es producido por la ATP sintetasa a partir del
gradiente electroquímico de H+.
La segunda fase es independiente de la luz. En ella, el ATP y el NADPH producidos por la cadena de transporte
de electrones fotosintética, sirven como fuente de energía y poder reductor respectivamente para manufacturar azúcares
usando CO2. Estas reacciones de fijación de carbono, comienzan en el estroma del cloroplasto y continúan en el citosol
de las hojas de la planta. Así la formación de ATP, NADPH y O2 (fase 1, luminosa) sirven para la conversión de CO2 a
carbohidratos (requiere luz indirectamente) son procesos separados (Fig. 10).
161
Figura 10. Fases dependiente e independiente de la luz. El agua
es oxidada y el oxígeno es liberado en reacciones de transferencia
de electrones fotosintéticas. Mientras que el carbono es fijado
para producir azúcares y una variedad de otras moléculas en las
reacciones de fijación del carbono.
Este proceso de reacciones independientes de luz ocurre en el estroma, el CO2 y H2O son convertidos en azúcar,
y necesita de energía. El primer paso en la fijación del carbono es la adición de una molécula de CO2 a una molécula
de ribulosa 1,5-bifosfato, compuesto rico en energía, por la enzima llamada rubisco (nombre completo: ribulosa-1,5-
bisfosfato carboxilasa/oxigenasa). Así, por cada 3 moléculas de CO2 que entran al ciclo, se genera una molécula nueva
de gliceraldehído 3-fosfato, usando 9 ATP y 6 NADPH (Fig. 11).
Figura 11. La fijación del carbono forma moléculas orgánicas
a partir de H20 y CO2. El número de átomos de carbono de
cada molécula se indica en el recuadro blanco. Hay moléculas
intermediarias entre el gliceraldehído-3-fosfato y la ribulosa-1,5-
bisfosfato.
Durante el proceso de fotosíntesis, la planta produce materia orgánica que convierte la energía de la luz en energía
química. Alrededor de las raíces, los microorganismos se encargan de procesar esta energía que la planta utiliza para
crecer, y también para generar electrones como productos secundarios. Finalmente, tenemos procesos conectados que
generan energía para las células de los organismos y que dependen del funcionamiento de una cadena de procesos,
realizados en dos organelos esenciales: mitocondrias y cloroplastos.
162
CUESTIONARIO 6
1.- Nombre las estructuras indicadas en los siguientes diagramas.
2.- En los esquemas anteriores identifique en qué lugar sucede cada uno de estos procesos
1.Ciclo de ácido cítrico
2.Fosforilación oxidativa
3.Fijación del carbono
4. Traspaso de electrones entre fotosistema II y I
163
3.- Complete el siguiente cuadro con los productos finales de cada proceso.
Glicólisis Descarboxilación del piruvato Ciclo de ácido cítrico Fosforilación oxidativa (ATP)
4.- Resuelva esta sopa de letras. Encuentre 10 palabras claves que se revisaron en esta guía
164
165
166
7
CITOESQUELETO
RESUMEN
Las células para funcionar adecuadamente deben organizarse en el espacio e interactuar mecánicamente con su
medioambiente. Esto requiere que las células se organicen internamente para resistir el estrés mecánico que impone
el ambiente, como también para poder adaptarse continuamente a los cambios ya que las células crecen, se dividen
y se mueven. Para poder llevar a cabo todas estas funciones las células eucariontes han desarrollado un grupo de
filamentos proteicos específicos denominados en su conjunto citoesqueleto. El citoesqueleto y sus funciones dependen
del comportamiento de tres familias de proteínas que se ensamblan en tres tipos de filamentos. Cada tipo de filamento
tiene propiedades mecánicas, dinámicas y biológicas específicas, sin embargo, comparten principios y características de
funcionamiento.
Palabras claves: citoesqueleto, filamentos, propiedades dinámicas, citoesqueleto filamentos intermedios, microtúbulos,
inestabilidad dinámica, tubulina, centrosoma, dineína, kinesina, colchicina, taxol, axonema, cilios, flagelos, vimentina,
neurofilamentos, lámina nuclear, queratina.
El citoesqueleto (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008).

La habilidad de las células eucarióticas de adoptar diferentes formas, la organización de los componentes en su
interior, la forma de interactuar mecánicamente con el medioambiente y llevar a cabo movimientos coordinados depende
principalmente del citoesqueleto. Este citoesqueleto es una red tridimensional de filamentos proteicos que contribuye a
la integridad de la célula, define la forma celular, interviene en endocitosis y exocitosis, participa activamente en la mitosis
y en las interacciones intercelulares. Otra propiedad de los filamentos que constituyen el citoesqueleto es que no siempre
son estructuras permanentes, sino que se desensamblan y se reconstruyen todo el tiempo. Esta característica le permite
a la célula reorganizarse continuamente mientras se divide, crece, y responde a su entorno. Además, el citoesqueleto
también permite el movimiento de células a lo largo de una superficie, la contracción muscular y los cambios de forma
a medida que el embrión se desarrolla. Sin citoesqueleto, las heridas nunca sanarían o los espermatozoides nunca
llegarían al óvulo. También, el citoesqueleto controla la posición de los organelos en el citoplasma, además de proveer la
maquinaria de transporte y comunicación entre ellos.
La red de filamentos de las proteínas que componen el citoesqueleto proporciona un marco estructural a la célula,
funcionando como un andamiaje molecular que determina el tamaño y la forma de ésta, así como la organización general
del citoplasma. Los tres tipos principales de filamentos proteicos que componen el citoesqueleto son: (1) filamentos de
actina o microfilamentos de 8 nm de diámetro, (2) filamentos intermedios de 10 nm de diámetro y (3) microtúbulos
de 25 nm de diámetro. Estos filamentos se construyen en el interior de la célula y pueden movilizarse a la membrana
plasmática, a los organelos y pueden interactuar entre sí mediante proteínas adaptadoras (Fig.1A).
Cada uno de los filamentos del citoesqueleto está formado a partir de pequeñas subunidades proteicas, las que
mantienen diferentes dinámicas y propiedades mecánicas, pero comparten principios bioquímicos y físicos fundamentales.
Los filamentos intermedios se componen de subunidades menores que son elongadas y fibrosas. Los microtúbulos y
filamentos de actina, en cambio, se componen de subunidades que son de forma globular y compacta. La diferencia en
las estructuras que se forman a partir de las subunidades y las fuerzas de atracción entre las ellas producen las diferencias
críticas en la estabilidad y propiedades mecánica de cada tipo de filamento (Fig. 1B).
167
Figura 1. Filamentos del citoesqueleto. (A) Una célula de cultivo ha
sido fijada y marcada para mostrar los componentes principales del
citoesqueleto, microtúbulos en verde y filamento de actina en rojo. El
ADN se muestra marcado en azul. (B) Citoesqueleto durante cambios de
forma de la célula. Los filamentos proteicos se componen de subunidades
lo que permite regular el ensamblaje y desensamblaje de los filamentos.
Referencia figura 16-1 y 16-7. Biología molecular de la célula, quinta
Microtúbulos (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008).
Los microtúbulos se encuentran distribuidos por todo el citoplasma en una forma “estrellada”, apareciendo durante
la interfase celular donde rápidamente se organizan para formar el huso mitótico bipolar en la división celular. También
pueden adoptar formas móviles como cilios y flagelos en la superficie de la célula. Al igual que pueden servir para el
transporte de moléculas a través del espacio citoplasmático (por ejemplo, en las neuronas).
Los microtúbulos son estructuras tubulares de 25 nm de diámetro y de longitud pueden variar entre unos pocos
nanómetros a micrómetros. Se originan en los centros organizadores de microtúbulos (centrosoma) y se extienden a lo
largo de todo el citoplasma (Fig. 2). El centrosoma aparece cerca del núcleo cuando no hay mitosis, contienen cientos
de estructuras tipo anillo compuestos de gamma-tubulina que sirven como sitios de nucleación. La formación de los
microtúbulos se produce por la polimerización de dímeros de una proteína globular llamada tubulina. Se han descrito
tres tipos de tubulinas llamadas alfa-, beta- y gamma-tubulina. Generalmente la tubulina-gamma se encuentra en el
centrosoma, mientras que la alfa y la beta-tubulina forman parte del dímero que polimeriza el microtúbulo formando
enlaces no covalentes, tanto entre sí como entre los dímeros polimerizan proporcionando una orientación específica
(Fig. 3A). Al final se forma un tubo compuesto por 13 protofilamentos paralelos de tubulina (Fig. 3B). Como los
microtúbulos se mantienen por balance entre ensamblaje y desensamble, pueden sufrir rápidas remodelaciones. Por
ejemplo, crecen desde los centrosomas una y otra vez, a modo de exploración, pero cuando se asocian a su extremo
más (+) a proteínas, o bien cuando este extremo encuentra otra estructura en la célula, se estabilizan evitándose el
desensamble (proceso llamado catástrofe). Esto permite crear sistemas organizados de microtúbulos en la célula.
En células animales, el centrosoma contiene un par de centriolos, que corresponden a estructuras celulares cilíndricas,
compuestos por agrupaciones de microtúbulos y que cumplen una función esencial durante la mitosis, ya que desde
los centriolos se formarán y organizarán los filamentos que constituyen el huso mitótico, el cual es el responsable de la
separación de los cromosomas. Los centriolos están rodeados de material pericentriolar, donde se inicia el crecimiento
de los microtúbulos desde el extremo menos (-) hacia el extremo más (+), lo que da polaridad (Fig. 3C). Esta polaridad
es crucial para dirigir la dirección del transporte intracelular.
Figura 2. Centrosoma. En el interior se
aprecian dos centriolos desde los cuales
crecen los microtúbulos que formarán el huso
mitótico durante la mitosis.
Referencia figura 16-11. Biología molecular
168
Figura 3. Microtúbulos. (A) Alfa- y beta-tubulina unidas.
Muchas subunidades unidas en la misma orientación formarán un
protofilamento. (B) 13 protofilamento de tubulina alineados de forma
paralela. (C) Estructura de un microtúbulo con sus extremos más y
menos, lo que le da polaridad al microtúbulo.
Los microtúbulos forman verdaderos caminos por los cuales los organelos, vesículas y otros componentes celulares
se desplazan. Para este desplazamiento existen proteínas accesorias, especialmente proteínas motoras las cuales son las
encargadas de movilizar a los organelos.
Los microtúbulos sufren continuos ciclos de ensamblado y desensamblado, como resultado de la hidrólisis de
GTP (energía) tras la polimerización, fenómeno conocido como inestabilidad dinámica (Fig. 4). Cuando la célula lo
requiere los microtúbulos se pueden estabilizar selectivamente, por la unión de proteínas accesorias. Los microtúbulos
determinan la forma y polaridad de la célula, y la célula los utiliza para transportar moléculas vesícula u organelos en forma
direccionada. Así, la función y la organización de los microtúbulos depende de la asociación con proteínas accesorias
(Fig. 5). Dos proteínas importantes que se asocian a los microtúbulos son: la dineína y kinesina. Estas proteínas motoras
tienen la capacidad de moverse usando como “pistas” a los microtúbulos (también llamadas motores moleculares), y usan
ATP para desplazarse a lo largo de los microtúbulos. Estas proteínas difieren en la orientación de su movimiento. Así,
las kinesinas se mueven hacia el extremo (+) de los microtúbulos (hacia la periferia de la célula) y dineínas se mueven
hacia extremo (-) de los microtúbulos (hacia el interior de la célula) (Fig. 6). Estas proteínas mueven importantes cargas,
incluyendo organelos, mRNAs y vesículas, entre otros. Así, se ha descrito que la posición y localización del RE y el
aparato de Golgi dependen de los microtúbulos.
Otras proteínas importantes son aquellas que ayudan en la conformación de la estructura celular, por ejemplo,
estabilizando a los microtúbulos. Estas proteínas son conocidas como proteínas asociadas a microtúbulos o MAPs (Fig.
7).
Figura 4. Inestabilidad dinámica. La adición de subunidades de tubulina con GTP permite que el filamento crezca en una conformación lineal que
puede rápidamente formar la muralla cilíndrica del microtúbulo. Las subunidades que contienen GTP forman un casquete que le da estabilidad
al extremo del microtúbulo. La hidrólisis de GTP a GDP, cambia la conformación de las subunidades lo que curva el protofilamento haciéndolo
menos estable. Cuando el casquete se pierde se produce un acortamiento de microtúbulo, fenómeno que se conoce como catástrofe.

169
Figura. 5. Proteínas accesorias
asociadas a microtúbulos. Se muestran
algunas de las proteínas accesorias
más importantes del citoesqueleto de
microtúbulos.
Referencia panel 16-3. Biología
Omega 2010).
Figura 6. Proteínas motoras. Dineína

moviliza hacia el extremo (-) y
Kinesina hacia el extremo (+).
Referencia figura 17-16. Essential
Biology of the cell. (©Garland Science
Figura 7. Proteínas asociadas a los

microtúbulos MAP. MAP permite la
estabilización o desestabilización de
los microtúbulos.
Referencia figura 16-44. Biología
Omega 2010).
170 Diversos estudios han permitido describir todas estas importantes funcionalidades que poseen los microtúbulos.
Por ejemplo, al utilizar la droga colchicina, que previene la polimerización de los microtúbulos, impide que la mitosis
siga su curso y se detiene. El taxol, es otra droga que interactúa con los microtúbulos, evitando que se despolimericen,
lo que también interfiere con los microtúbulos durante la mitosis deteniéndola. La inactivación o la destrucción del
huso mitótico durante la mitosis, eventualmente mata a las células, por lo que estas drogas se han usado como drogas
anticáncer, debido a que las células cancerosas se dividen activamente.

Reorganización de los microtúbulos en la división celular y conformación de cilios y

flagelos (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008).
Durante la interfase (ciclo celular) se produce la duplicación del centrosoma. Luego, los centrosomas se separan y
se condensa la cromatina. Durante la profase (mitosis) se rompe la envoltura nuclear y se forma el huso mitótico. En
metafase (mitosis) se pueden observar tres tipos de microtúbulos llamados: astrales, interpolares y cinetocóricos (Fig. 8).
Durante la anafase (mitosis), las proteínas motoras y el desensamble de los microtúbulos ayudan a la separación de los
cromosomas.
Figura 8. Microtúbulos durante mitosis. En

azul pintan los microtúbulos cinetocóricos que
se une a los cromosomas en el cinetocoro, para
arrastrarlos hacia cada uno de los polos. En
rojo se pintan los microtúbulos interpolares que
mantienen las dos mitades del huso mitótico.
En verde se ven los microtúbulos astrales que
interactúan con el cortex celular. Todos los tipos
de microtúbulos nacen de cada centrosoma
ubicados en cada polo, se orientan con el extremo
(-) hacia el centrosoma y crecen hacia el extremo
(+), alejándose del centrosoma. Como indican
las flechas dobles, los microtúbulos astrales
sufren de inestabilidad dinámica, mientras que
los microtúbulos cinetocóricos e interpolares
arrastran a los cromosomas hacia los polos.
Sin embargo, los microtúbulos no solo cumplen un rol esencial en la mitosis, sino también en la célula en interfase
ya que forman parte de cilios y flagelos. Los cilios y flagelos son extensiones permanentes de la membrana plasmática,
construidas a partir de microtúbulos. Los cilios con su movimiento permiten el desplazamiento del líquido extracelular
sobre la superficie de la célula. Los flagelos, por su parte, están diseñados para mover a la célula completa propagando
olas regulares que impulsa a la célula por el fluido. Los cilios son más cortos que los flagelos, pero se encuentran en mayor
número. Sin embargo, ambos presentan la misma estructura básica, pero diferente tipo de movimiento. Su movimiento
resulta del deslizamiento de microtúbulos adyacentes, impulsado por la acción de dineínas ciliares o flagelares (Fig.
9A). Los cilios crecen de un cuerpo basal que cumple la función de centro organizador de microtúbulos en la base de la
estructura. En el centro del cilio o flagelo los microtúbulos se re arreglan en una conformación llamada axomena. En este
rearreglo se disponen los microtúbulos y sus proteínas accesorias en un patrón particular llamado 9+2, que consiste en
9 dobletes de microtúbulos dispuestos en anillo alrededor de un par de microtúbulos dispuesto al centro, estos arreglos
de microtúbulos están conectados por proteínas como dineínas y nexinas (Fig. 9B). Los microtúbulos están asociados
con una serie de proteínas que mantienen su estabilidad y otras que generan la fuerza con la que los cilios o flagelos se
doblan (dineína ciliar) para ejercer su movimiento (Fig. 9A).
171
Figura 9. Movimiento y composición de cilios o flagelos. (A) El ATP permite a la dineína ejercer su acción motora deslizando los microtúbulos
unos sobre otros. (B) Diagrama de un cilio o flagelo. En esta estructura se aprecia el arreglo 9+2 y proteínas que permiten al arreglo permanecer
junto, como nexina, dineína en brazo exterior e interior.
Filamentos intermedios (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008).

Los filamentos intermedios tienen gran fuerza de tensión y su función principal es permitir a las células resistir el
estrés mecánico, que ocurre cuando son estiradas o presionadas. Estos filamentos son los más durables de los tres tipos de
filamentos que forman el citoesqueleto y no están implicados en movimiento celular. Forman una red en el citoplasma,
rodeando al núcleo y extendiéndose hacia la periferia de la célula y con cierta frecuencia tienen una distribución a
veces coincidente con la de los microtúbulos (Fig. 10). Están usualmente anclados a la membrana plasmática en las
uniones de célula-célula, donde la cara externa de la célula está conectada con la otra célula. Los filamentos intermedios
también están en el núcleo formando la lámina nuclear, estructura que se desarma cuando la célula entra en mitosis y
la membrana nuclear se desintegra.
Figura 10. Filamentos intermedios. Tienen una

estructura tipo cuerda. Se encuentran distribuidos a
lo largo del citoplasma y formando la malla debajo de
la membrana interior nuclear. En el tejido epitelial se
extienden por el citoplasma desde una unión celular
hasta otra proporcionando resistencia al epitelio entero.
Referencia panel 16-1. Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
Estas proteínas fibrilares que forman los filamentos intermedios tienen un N-terminal (amino terminal) globular y un
COOH (carboxilo) terminal globular. Cuando un monómero se une a otro monómero forma un enrollamiento dimérico
y luego se agrupan a su vez en tetrámeros antiparalelos y en protofilamentos. La agrupación de 8 protofilamentos forma
un filamento intermedio de 10 nm, con una estructura similar a la de una cuerda o fibra (Fig. 11).
172
Figura 11. Fibra de filamento intermedio. En la esquina superior izquierda se observa una región en hélice en un monómero y luego un
sobreenrollamiento dimérico. En la esquina superior derecha se observa un tetrámero escalonado de dos dímeros sobreenrollados. Finalmente,
abajo se observan ocho tetrámeros enrollados en un filamento tipo cuerda.
El domino central de diferentes proteínas de filamentos intermedios son de tamaño y secuencia de aminoácidos
similares, de modo que cuando se empaquetan siempre forman filamentos del mismo diámetro y estructura interna. Por
otro lado, los extremos terminales globulares, que están expuestos en la superficie del filamento permiten la interacción
con otros componentes del citoplasma. En células epiteliales, por ejemplo, los filamentos intermedios se unen a la
membrana en regiones especializadas de contacto (desmosomas y hemidesmosomas) (Fig. 12). Los dominios globulares
varían en tamaño y secuencia aminoacídica entre diferentes proteínas de filamentos intermedios.
Figura 12. Organización del citoesqueleto en una célula epitelial. La parte
apical es la superficie que da al lumen intestinal. En azul observamos a los
filamentos intermedios que dan resistencia al epitelio, se unen a regiones
especializadas de contacto como los desmosomas y hemidesmosomas. En
verde se aprecian los microtúbulos y en rojo los filamentos de actinas que
veremos en el siguiente capítulo.
Los filamentos intermedios son abundantes en células musculares, nerviosas y epiteliales. Estos filamentos están en
gran cantidad en el citoplasma por lo que produce un gran reforzamiento interno. Los filamentos intermedios pueden
ser agrupados en 4 clases:
1) Filamentos de queratina, presentes en las células epiteliales.

2) Vimentina o filamentos relacionados a vimentina, presentes en el tejido conectivo, células musculares y células en el
sistema nervioso (células gliales).
3) Neurofilamentos, presentes en las neuronas.
4) Lamina nuclear, que se encuentra en el núcleo de las células y le da resistencia a la membrana nuclear.
Muchos filamentos intermedios se estabilizan con proteínas accesorias. Estas proteínas accesorias también sirven
para unir a los filamentos intermedios con microtúbulos y con filamentos de actina. 173
CUESTIONARIO 7
CITOESQUELETO
1.- Nombre las estructuras señaladas en el siguiente diagrama
2.- Complete la siguiente tabla
Nombre Función
Dineína
Proteína motora que se mueve a lo largo de los microtúbulos
citoplasmáticos hacia el termino +
Tienen gran fuerza de tensión y su función principal es de
permitir a las células resistir el estrés mecánico
Centrosoma
Alfa y beta tubulina
Estructura interna de microtúbulos los cilios y flagelos de
las eucariotas
Vimentina
Los microtúbulos sufren continuos ciclos de ensamblado
y desensamblado como resultado de la hidrólisis de GTP
174
3.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre 11 palabras calves revisadas en esta guía.
4. Resuelva el siguiente crucigrama
Horizontal:
2. Proteínas asociadas a microtúbulos que ayudan a la estabilización
3. Previene la polimerización de los microtúbulos al unirse a la tubulina libre
5. Red de filamentos de proteínas que componen y proporciona un marco estructural a la célula
6. Los microtúbulos se producen por la polimerización de dímeros de una proteína globular
7. Filamentos en las células epiteliales
Vertical:
1.Producir movimiento por encima de la superficie celular o de impulsar a las células a través de un fluido
4. Microtúbulos que se encuentran entre los cinetocóricos pero que no contactan con los cromosomas.
175
176
8
FILAMENTOS DE ACTINA Y
CONTRACCIÓN MUSCULAR
RESUMEN
El citoplasma de la célula está organizado espacialmente mediante una red de proteínas filamentosas conocidas como
citoesqueleto. Tres tipos de proteínas forman esta red: microtúbulos, filamentos intermedios y filamentos de actina. Los
filamentos de actina o microfilamentos se ensamblan a través de la unión de subunidades. También son esenciales para
diferentes procesos de la célula tales como movimiento, mitosis y contracción muscular. La contracción muscular es el
resultado del deslizamiento en direcciones opuestas, de microfilamentos con los filamentos de miosina II. En células
no musculares los filamentos de actina son responsables de diversos “movimientos” celulares como, por ejemplo, la
citocinesis. El movimiento celular se produce como consecuencia de extensiones de la membrana plasmática mediante
polimerización de microfilamentos en el borde de avance de la célula. Al igual que los microtúbulos, muchos de los
filamentos de actina son inestables.
Palabras claves: filamentos de actina, citocalasina, faloidina, lamelopidoa, filopodio, gateo celular, complejo ARP,
formin, cofilin, timosina, profilina, miosina, señalización Rho, contracción muscular, troponina, tropomiosina, calcio,
sarcómero, retículo sarcoplasmático.
Filamentos de actina (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008).

Los filamentos de actina o microfilamentos se ubican bajo la membrana plasmática entregando fuerza y firmeza.
Dependiendo de las proteínas que se asocien con los filamentos de actina, la célula podrá ejercer diferentes funciones y
formar diferentes estructuras como microvellosidades o manojos contráctiles en el citoplasma (Fig.1). Algunas de estas
estructuras dinámicas llamadas lamelopodios y filopodios, son utilizadas por la célula para la exploración y movimiento
(“gateo” celular). Otra función de los filamentos de actina es estar involucrado en la formación del anillo contráctil lo que
permite la división celular. En general, los filamentos de actina determinan la forma de la superficie celular y se necesitan
para el movimiento celular.
Los filamentos de actina son delgados y flexibles, son de aproximadamente 7 nm de diámetro y generalmente se
encuentran formando redes (Fig. 2). Tienen una estructura polarizada al igual que los microtúbulos, pero son más cortos,
flexibles, delgados y se encuentran en mayor abundancia que ellos.
Figura 1. Filamento de actina.
177
Los filamentos de actina se polarizan de manera similar a la tubulina, creciendo por la adición de monómeros
de actina a cada extremo terminal. La función del filamento de actina depende de la dinámica de equilibrio entre el
filamento de actina y un conjunto de monómeros que están disponibles en la célula. El mecanismo de ensamble y
desensamble es similar a lo que ocurre con los microtúbulos, y al igual que estos, los filamentos de actina también son
polarizados. El extremo más (+) crece más rápido y cada nuevo monómero lleva consigo ATP, el que es hidrolizado poco
después de la unión (Fig. 3).
Figura 2. Distribución de los filamentos de actina (microfilamentos)
en la célula.
Referencia panel 16-1. Biología molecular de la célula, quinta edición.
Figura 3. Dinámica entre ensamble y desensamble de filamentos de

actinas.
Referencia panel 16-3. Biología molecular de la célula, quinta edición.
La utilización de toxinas presentes en hongos como la citocalasina (impide la polimerización) o la faloidina (evita la
despolimerización), afectan las funciones de estos filamentos, y han sido de gran utilidad para estudiar su dinámica de
polimerización. En la célula no todos los monómeros de actina se transforman en filamentos, para ello la célula cuenta
con una variedad de proteínas que le permiten controlar su polimerización. Para esto, existen proteínas como la timosina,
profilina y cofilina que funcionan regulando la polimerización. La timosina, compite por los monómeros de actina con
la profilina impidiendo que polimericen. La cofilina, impide el reensamblaje porque despolimeriza el extremo menos (-)
de los microfilamentos. La profilina, en cambio, facilita la polimerización de los microfilamentos, al facilitar el cambio
ADP a ATP en el monómero de actina (Fig. 4). Así, cuando la célula necesita de filamentos de actina debe estabilizarlos.
La formación y el crecimiento de los filamentos de actina es asistido por proteínas accesorias (ARP), que promueven
la formación de la malla de filamentos ramificados por ejemplo en el lamelopodio. Estas proteínas se unen al filamento
de actina y generan la nucleación de nuevos filamentos que crecerán produciendo ramificaciones (Fig. 5A). Las proteínas
llamadas forminas ayudan a que los filamentos crezcan sin formar ramificaciones (Fig. 5B).
Figura 4. Proteínas asociadas a los filamentos

de actina. Se muestran algunas de las proteínas
más importantes del citoesqueleto de actina.
La timosina, se une a las subunidades
impidiendo el ensamblaje. La cofilina, acelera
el desensamblaje. Geisolina, rompe filamentos
y se une al extremo (+). La proteína casquete,
estabiliza el filamento. La profilina acelera
el crecimiento del filamento de actina. La
tropomiosina, estabiliza los filamentos.
Referencia panel 16-3. Biología molecular de
178
A B Figura 5. Formina y complejo ARP. (A)
Ramificaciones y compejos ARP permite
la formación de redes. (B) Formina
permanece asociada al extremo (+) y nuclea
el ensamblaje.
Referencia panel 16-35 y figura 16-36.
Essential Biology of the Cell y Biología
molecular de la célula, quinta edición
(©Garland Science Ediciones Omega 2016.
Los filamentos de actina se encuentran distribuidos en el citoplasma, pero también se encuentran en alta cantidad
debajo de la membrana plasmática. Allí ayudan a formar el cortex celular. Para esto se unen distintos filamentos de
actina en una malla que entrega soporte a la cara externa de la célula y le otorga fortaleza mecánica. Esta malla de actina
bajo la membrana gobierna la forma y las propiedades mecánicas de la membrana plasmática y de la superficie celular,
siendo el rearreglo de los filamentos de actina en el cortex los responsables de las bases moleculares para los cambios
en la forma celular y la locomoción. El “gateo” celular depende de actina, ejemplos de estos son células como la ameba
carnívora que se mueve en busca de comida, generando proyecciones de la membrana celular se mueve en dirección de
un gradiente de concentración de moléculas, como por ejemplo los glóbulos blancos que se mueven atraídos por factores
que liberan las bacterias (Fig. 6).
Figura 6. “Gateo” celular. La formación de una protuberancia

dependiente de la polimerización de actina y la adherencia
firme del lamelipodio en el borde extremo de la célula, genera
un movimiento hacia adelante (flecha verde). Al mismo
tiempo, una contracción en el extremo opuesto de la célula
ayuda al impulso hacia adelante (flecha verde). Luego se
forman contactos focales nuevos en el frente, mientras otros
se desensamblan en la parte posterior.
Referencia panel 16-86. Biología molecular de la célula,
2010).
Los lamelopodios y filopodios son otro ejemplo de cómo las células utilizan a los filamentos de actinas. Los
lamelopodios y filopodios son estructuras mótiles exploratorias, que se extienden y retractan a gran velocidad (Fig. 7).
179
Figura 7. Un fibroblasto en movimiento. En los recuadros
se muestran los rearreglos de filamentos de actina. En rojo
se muestran los filamentos de actina y las flechas apuntan al
extremo menos. Los filopodios son proyecciones espigadas
de la membrana que le permite a la célula explorar su
medioambiente.
Referencia panel 16-47. Biología molecular de la célula, quinta
Cuando los filopodios y lamelopodios encuentran una superficie favorable pueden adherirse a ella, mediante proteínas
llamadas integrinas que ayudan al desplazamiento celular al generar contactos entre la célula y la matriz extracelular. En
la cara interna de la membrana plasmática, las integrinas capturan filamentos de actina creando un anclaje. La actina
también se asocia con la miosina para formar estructuras contráctiles (Fig. 8). Todas las proteínas motoras asociadas a
actina son de la familia de las miosinas y utilizan de ATP, para moverse a lo largo de los filamentos de actina desde el
extremo (–) al extremo (+). Existen varios tipos de miosinas. La miosina II fue el primer motor molecular descrito, se
encuentra principalmente en el músculo esquelético.
Señales extracelulares del medio pueden cambiar la distribución de los filamentos de actina al afectar proteínas
asociadas a los filamentos. Esto permite que la célula reaccione frente al medio que la rodea. Ejemplos de estas proteínas
son las proteínas de la familia Rho y proteínas que unen GTP. La vía de señalización Rho es un interruptor molecular,
transformándose de un estado inactivo a otro activo. Esta señalización es importante porque le da forma al citoesqueleto,
organizan los filamentos de actina, gatilla la formación de filopodios, organiza las fibras de actina con la miosina II en
el músculo y promueve el movimiento celular (gateo).
Figura 8. Movimiento de actina y miosina.

Referencia 16-56 Biología molecular de la célula, quinta edición (©Garland Science Ediciones Omega 2010).
180
Movimiento muscular (Capítulo 16, Alberts, et al. 2008).
En el músculo existen filamentos finos, formados por las proteínas actina, troponina y tropomiosina, y filamentos
gruesos formados por miosina II. Los filamentos finos (actina) y gruesos forman haces que se entrelazan entre sí. La
contracción muscular depende de manojos de filamentos de actina y miosina. El agrupamiento de miosina II es un
filamento bipolar que contienen cabezas que se proyectan hacia afuera en direcciones opuestas, con una región media
de filamentos solamente (Fig. 9).
Figura 9. Estructura de la miosina. Las cadenas ligeras de la
miosina están desactivadas. Mediante el uso de ATP se activan y
quedan en estado activo.
Referencia 16-72 Biología molecular de la célula, quinta edición
(©Garland Science Ediciones Omega 2010).
Los filamentos de miosina se asocian a los filamentos de actina en orientación opuesta, produciendo el deslizamiento
durante la contracción muscular. Los filamentos de actina se deslizan en dirección opuesta a los filamentos de miosina,
generando la fuerza contráctil. Las fibras del músculo esquelético están formadas por largas células formadas por la
fusión de pequeñas células musculares (Fig. 10). El núcleo de estas células se posiciona bajo la membrana plasmática para
dejar espacio a las miofibrillas que se ensamblan en el citoplasma de la célula muscular (sarcoplasma). El sarcoplasma
está conformado por miofibrillas contráctiles, que se dividen en sarcómeros, la unidad mínima de contracción (Fig. 11).
Figura 10. Fibra de muscular.

Referencia 16-73 Biología molecular de la célula, quinta edición
(©Garland Science Ediciones Omega 2010).
Figura 11. El sarcómero en la contracción muscular.

Referencia 16-42 Essential biology of the cell (©Garland Science
La contracción muscular es producida por el acortamiento simultáneo de todos los sarcómeros, que resulta del
deslizamiento de los filamentos de actina sobre los de miosina. Cuando el músculo es estimulado para contraerse, las
cabezas de miosina “caminan” a lo largo del filamento de actina en repetidos ciclos de unión y desunión. Para cumplir
estos ciclos se necesita de unión de ATP e hidrólisis de ATP para impulsar a la molécula de miosina unidireccionalmente
a lo largo del filamento de actina. Al hacerlo, las cabezas de miosina empujan en contra el filamento de actina causando
el deslizamiento. La acción de muchas cabezas de miosinas tirando los filamentos de actina causan la contracción del
sarcómero, y por ende la contracción muscular.
La interacción molecular entre la miosina y la actina en el músculo ocurre sólo cuando el músculo esquelético recibe
una señal desde el sistema nervioso. La señal gatilla un potencial de acción en la membrana plasmática de las células 181
musculares. Esta excitación eléctrica recorre unos túbulos llamados transversales (o túbulos T) que se extienden hacia
el interior de la membrana plasmática alrededor de cada miofibrilla (Fig. 12A). Esta señal abre canales de Ca2+ del
retículo sarcoplasmático (retículo endoplásmico de la célula muscular), que contiene altas concentraciones de Ca2+,
que es liberado en repuesta al cambio de voltaje a largo de la membrana plasmática (Fig. 12B). En el músculo, el
Ca2+ interactúa con un interruptor molecular formado por proteínas especializadas asociadas (complejo troponina y la
tropomioisna) a los filamentos de actina. La tropomiosina bloquea el lugar de unión de la actina a la miosina, pero el
calcio media el desplazamiento de la tropomiosina dejando expuesto los sitios de interacción actina/miosina (Fig. 12C).
Figura 12. Señal de contracción muscular. (A) Señal que gatilla una contracción muscular. (B) Potencial de acción en la membrana de células
musculares. (C) Desplazamiento de la tropomiosina mediada por calcio.
Referencia 16-77 y 16-78 Biología molecular de la célula (©Garland Science Ediciones Omega 2010).
182
CUESTIONARIO 8
1.- Investigue y complete los siguientes recuadros con una breve descripción de los eventos que suceden durante la
contracción muscular.
183
2.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre las 10 palabras ocultas en el recuadro que se relacionan con la materia
revisada en este capítulo.
3.- Conteste las siguientes preguntas, argumente su respuesta.
¿Cuál es el principal parecido entre micrtotúbulos y los filamentos de actinas?
¿Cuál es el rol del calcio en el movimiento muscular?
¿Qué es el rigor mortis?
¿Qué son y cuál es el rol de los filopidos y lamelopios?
184
Horizontal
4. Despolimeriza el extremo (-) de los microfilamentos

5. Bloquea el lugar de unión de la actina a la miosina
6. La excitación eléctrica recorre unos túbulos T llevando la señal hacia el retículo sarcoplasmático el cual libera
Vertical
1. Para la contracción muscular los filamentos de actina interactúan con filamentos de

2. La contracción muscular es producida por el acortamiento simultáneo de los
3. Organiza las fibras de actina con la miosina II en el músculo y promueve el gateo
7. Filamentos delgados y flexibles, tienen cerca de 7nm de diámetro y generalmente se encuentran formando redes
185
186
9
ADHESIÓN CELULAR Y MATRIZ
EXTRACELULAR

RESUMEN
Una de las interacciones que ocurren entre célula y célula son las que las mantienen unidas, permitiendo la existencia
de los tejidos. Estas uniones entre células son variadas, siendo algunas directas y otras a través de la unión de la célula al
material extracelular que ellas mismas secretan. El poder mantenerse juntas es lo que hace posible que las células formen
tejidos e incluso organismos multicelulares. Las uniones celulares le entregan a la célula la propiedad de resistencia
y la forma de los diferentes tipos de tejidos. Las uniones de hendidura entre células generan vías de comunicación y
señalización, lo que les permite a las células comunicarse, coordinar su comportamiento y regular la expresión de genes.
Dependiendo de la manera en que las células se anclen a otras células o a la matriz, les permiten también adoptar una
orientación específica lo que ayuda– dependiendo del gradiente o exposición a señales – a que las células se especifiquen
y diferencien, entregándole al organismo la posibilidad de crecer, desarrollarse y repararse cuando es necesario.
Palabras claves: adhesión celular, uniones de anclaje, bandas adherentes, contactos focales, hemidesmosomas,
desmosomas, cadherinas, cateninas, integrinas, matriz celular, uniones ocluyentes, uniones tipo gap, claudinas, ocludinas,
conexina, conexón, sinapsis, lámina basal, laminina, proteoglicanes, colágeno, matriz celular, tejido conectivo, ácido
hialurónico.
La célula en su contexto social (Capítulo 19, Alberts, et al. 2008).

Cada tejido es un ensamble organizado de células que se mantienen unidas mediante contactos célula-célula, célula-
matriz extracelular o ambos. La unión celular (o cell junction en inglés) puede ser entre una célula con otra célula, o de
una célula con la matriz extracelular o ambos. La adhesión celular es un proceso en el cual las células se reconocen y se
unen unas a otras mientras se mueven y ensamblan en un tejido (Fig.1).

Figura 1. Tejido epitelial y conjuntivo. En el
tejido conjuntivo la matriz extracelular es la
que soporta el estrés mecánico. En el tejido
epitelial las células se conectan unas a otras
y la resistencia mecánica es transmitida por
filamentos del citoesqueleto, de cada célula,
anclados a las zonas de adhesión célula-
matriz y célula-célula.
Referencia figura 19-01. Biología molecular
Dentro de los tejidos es posible identificar distintos tipos de uniones, por ejemplo, uniones de anclaje (Fig. 2A),
187
ocluyentes u oclusivas (estrechas) (Fig. 2B), uniones que forman canales (Fig. 2C) y también uniones que transmiten
señales (Fig. 2D).
Las uniones entregan resistencia mecánica a los tejidos ya que se apoyan en los filamentos de actina o filamentos
intermedios del citoesqueleto que están anclados en los sitios de unión célula-célula o célula-matriz extracelular. Las
uniones de anclaje se construyen mediante el uso de proteínas accesorias (Fig. 2A).
A B C D

Figura 2. Uniones celulares en tejidos animales. (A) Las uniones de anclaje célula-célula (típicamente a través de proteínas cadherinas) o célula a
matriz (típicamente a través de proteínas integrinas). (B) Uniones ocluyentes (involucran proteínas claudinas) que sellan espacios entre las células
epiteliales. (C) Uniones formadoras de canales (compuestas de proteínas conexinas) forman pasajes para que pequeñas moléculas y iones pasen
de una célula a otra. (D) Uniones de transmisión de señal que generalmente involucran proteínas de anclaje junto con proteínas que median la
transducción de señales.
Las uniones de anclaje pueden formarse mediante el uso de proteínas de transmembrana adheridas a filamentos
intermedios o a filamentos de actina. Dependiendo del tipo de filamento, la unión de anclaje recibe nombres distintos.
Además, las proteínas de transmembrana pueden estar ancladas a diferentes proteínas intracelulares (Tabla 1).
Tabla 1: Uniones de anclaje.
Referencia tabla 19-1, Biología molecular de la célula, quinta edición (© Garland Science 2008 y Ediciones
Omega 2010).
Las uniones de anclaje que involucran filamentos de actina y que une una célula a otra célula se denominan uniones
adherentes o bandas adherentes (Fig.3). Si la unión es de la célula a la matriz celular se denomina adhesión célula-matriz
asociada a actina o contactos focales. Cuando las zonas de anclaje involucran filamentos intermedios uniendo a una
célula con célula se denominan desmosomas y cuando unen a la célula con la matriz, hemidesmosomas (Fig.3, Tabla 1).
Estas uniones dependen de proteínas transmembrana denominadas cadherinas y de proteínas intracelulares
denominadas cateninas. Existen distintos tipos de cadherinas y cateninas que también tienen un patrón particular
de expresión. Dentro de las cadherinas clásicas encontramos: (a) E-cadherina que se expresa en el tejido epitelial; (b)
N-cadherina que se expresa principalmente en el tejido neuronal, tejido cardiaco y fibroblastos; (c) P-cadherina que
se expresa en el tejido epitelial mamario y la placenta; (d) VE-cadherina que se expresa en células endoteliales (vasos
sanguíneos). No obstante, también existen cadherinas no clásicas y protocadherinas que están presentes en diferentes
tejidos.
Las cadherinas median la adhesión célula-célula por un mecanismo homofílico, los dominios de las cadherinas son
repetitivos, similares a los dominios globulares de las inmunoglobulinas (Fig. 4A) y cada dominio une moléculas de Ca2+
las cuales son esenciales para mantener su estructura y por lo tanto su función (Fig. 4B). En general, cuando hablamos
188 de bandas adherentes (dependientes de filamentos de actina) la conexión entre célula-célula se produce mediante
cadherinas clásicas y a cateninas intracelulares (alfa, beta, gamma y P120-catenina, entre otras) siendo beta-catenina una
de las proteínas más importantes (Fig. 4C). Cuando la unión célula-célula depende de filamentos intermedios, la unión
se produce mediante cadherinas no clásicas como la desmogleina y desmocolina en cada célula, siendo una catenina
gamma o placofilina el sitio de anclaje.
Figura 3. Uniones de anclaje.
Figura 4. Cadherina y cateninas. (A) Tipos de cadherina. Estas proteínas tienen porciones extracelulares con dominios repetitivos, pero la parte
intracelular es más variada pudiendo interaccionar con una amplia variedad de otras proteínas. (B) Domino extracelular de una cadherina clásica.
En células opuestas se unen homofílicamente y dependen de Ca2+ para cumplir su función. (C) Las cadherinas se acoplan indirectamente a los
filamentos de actina y otras proteínas de anclaje a β-catenina.
Referencia figura 19-07, 19-09 y 19-14. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010). 189
Los desmosomas, mantienen contactos intercelulares puntiformes que constan de una placa interna de proteína que
se unen a los filamentos intermedios (como por ejemplo queratina en la mayoría de las células epiteliales) (Fig. 5A).
También pueden unirse a proteínas transmembrana del tipo de cadherina (desmogleina y desmocolina) que se proyectan
al espacio intercelular pudiendo entrelazarse a otras células (Fig. 5B).
Figura 5. Desmosomas. (A) Una placa densa de proteínas sirve de anclaje intracelular para los filamentos intermedios. (B) La célula también
puede proyectar al espacio intercelular proteínas de las familias de las cadherinas.
En uniones entre célula y matriz celular o lámina basal (por ejemplo, contactos focales cuando filamentos de actina
están involucrados o hemidesmosomas cuando filamentos intermedios están involucrados) las proteínas implicadas en el
anclaje se llaman integrinas, que al igual que las cadherinas son dependientes de calcio. Las adhesiones focales permiten
a las células mantenerse en contacto con la matriz extracelular (por ejemplo, en el músculo).
Uniones ocluyentes (estrechas), tipo gap y transmisoras de señal (Capítulo 19, Alberts, et
al. 2008).
En vertebrados encontramos uniones oclusivas y en plantas septadas. Las uniones oclusivas o también llamadas
uniones estrechas mantienen a las proteínas de la membrana confinadas a regiones definidas actuando como barreras
para la difusión, impidiendo el paso de sustancias de un compartimiento a otro a través de los espacios intercelulares.
El estrechamiento es llevado a cabo por bandas de proteínas llamadas claudinas y ocludinas que se disponen en cadenas
a lo largo de la línea de unión a modo de barrera (Fig. 6). El disponer de estas berreras en forma de cadenas, impide el
escurrimiento de nutrientes, como la glucosa, permitiendo que entren a través de transportadores específicos.
190
Figura 6. Uniones estrechas y flujo de glucosa. Una función
importante de las uniones estrechas es permitir que sustancias como
la glucosa entren sólo por transportadores específicos. En células
epiteliales esto permite que la glucosa siga un flujo ordenado desde
el lumen intestinal hasta la sangre.
Las uniones tipo Gap o de hendidura permiten el paso directo de pequeñas moléculas entre 2 células. Las uniones
gap están constituidas por proteínas formadoras de canales denominadas conexinas, y se llama conexón al canal que
forman. Cada conexina es una proteína de 4 dominios de transmembrana y se requieren 6 de ellas para formar un
conexón (Fig. 7).
Figura 7. Uniones tipo gap y conexones. Se muestran en verde los
conexones formados por seis unidades de conexinas.
Los canales que se forman entre células pueden usar conexinas del mismo tipo, formando canales homotípicos, o de
un tipo diferente en ese caso los canales serán heterotípicos.
Otro tipo de conexión son las uniones transmisoras de señal, que permiten conectar a dos células a través de una
señalización. Esta señalización puede involucrar contacto directo entre las células. Por ejemplo, las células del sistema
inmune, como linfocitos, reconocen a un antígeno presentado por una célula dendrítica o presentadora de antígeno,
mediante el receptor del linfocito y el complejo mayor de histocompatibilidad de la célula que presenta al antígeno –esta
conexión se denomina sinapsis inmunológica. En el caso de las células nerviosas existe la sinapsis nerviosa, donde la
transmisión de un impulso nervioso se produce mediante la liberación de neurotransmisores que van de la neurona que
manda el impulso a aquella que lo reciba (Fig. 8).
191
Figura 8. Organización de la sinapsis.
Lámina basal y tejidos (Capítulo 19, Alberts, et al. 2008).

La lámina basal es una fina capa de matriz extracelular que separa el tejido epitelial y otros tipos de células, como
las fibras musculares o las células adiposas, del tejido conectivo (Fig. 9). Está formada principalmente por lamininas,
colágeno tipo IV, nidógeno, además de otras glicoproteínas conocidas como proteoglicanes (Fig. 9).
Figura 9. Lámina basal. Se muestra la lámina basal de tres tejidos: músculo, epitelio y glomérulo renal.
La compleja red de proteínas y polisacáridos secretados localmente y que forman la matriz extracelular, proporcionan
una malla asociada a la superficie celular. La variación en la cantidad relativa de los constituyentes de la matriz y en la
forma en que se organizan dan origen a la diversidad de tejidos. Por ejemplo, la matriz puede calcificarse dando origen
a huesos y dientes, puede formar la estructura transparente de la córnea, o bien puede generar los tendones. De esta
forma, las uniones entre células y la unión de ellas a la matriz conforman el pilar de todos los tejidos de un organismo
multicelular (Fig. 10A).
El tejido conectivo ocupa el espacio entre otros tejidos y órganos, además le da sostén al organismo (Fig. 10B). Este
tejido está constituido por cadenas de carbohidratos complejos (>50.000 disacáridos de N-acetilglucosamina y ácido
glucurónico por molécula). Presenta la propiedad de retener grandes cantidades de agua y de adoptar una conformación
extendida en disolución (acojinar o lubricar). Estas propiedades se consiguen gracias al gran número de grupos OH y de
cargas negativas presentes en esta molécula (Fig. 11). En este tejido los glicosaminoglicanes como el ácido hialurónico
cumplen un rol esencial. El ácido hialurónico (AH) es un polisacárido del tipo de glicosaminoglicán (GAG). Este
polisacárido de textura viscosa que se encuentra en la sinovia, el humor vítreo y tejido conectivo de numerosos organismos
y es un importante GAG en la homeostasis articular (articulaciones, cartílagos y piel).
Las células del tejido conjuntivo también secretan colágeno que son proteínas y los mayores constituyentes de la
matriz extracelular formando la mayor parte de la piel y los huesos. Los proteoglicanes, están compuestos de cadenas
de GAGs unidos a una proteína central, se sintetizan en el aparato de Golgi y actúan como moduladores de señales en
procesos de comunicación entre la célula y su entorno. El proteoglicano es exportado en vesículas secretoras a la matriz
extracelular.
192
Figura 10. Tejido conjuntivo y uniones entre células.
(A) En el resumen de uniones celulares de una
célula epitelial encontramos en la parte más apical
uniones oclusivas, luego uniones intercelulares de
anclaje (uniones adherentes) y luego desmosomas.
Más cercano a la parte basal se observan uniones
tipo gap y finalmente uniones de anclaje a la matriz
celular (contactos focales y hemidesmsomas). (B) El
tejido conjuntivo contiene una variedad de células
y de componentes de la matriz extracelular. El tipo
predominante es el fibroblasto que secreta matriz
extracelular.
Referencia figura 19-01 y 19-53. Biología molecular
de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008
Figura 11. N-acetilglucosamina, ácido glucurónico y ácido hialurónico.

193
CUESTIONARIO 9
EXTRACELULAR
1.- En los siguientes dibujos señale los distintos tipos de uniones:
2.- Señale las características de las distintas formas de unión señaladas en el siguiente dibujo.
194
3.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre 11 palabras revisadas en esta guía
195
196
10
RESUMEN
El poder llevar a cabo procesos complejos como moverse, responder frente al medioambiente, crecer, desarrollarse,
reparar o regenerar tejidos, requiere que las células que componen el organismo puedan coordinarse y responder frente
a una serie de señales o estímulos. ¿Cómo se comunican las células? ¿cómo reciben e interpretan señales? ¿cómo se
coordinan? ¿cómo deciden? ¿cómo saben qué hacer y cuándo hacerlo?, todas estas son importantes preguntas que la
ciencia ha intentado responder con el tiempo. Las señales que reciben las células y la comunicación que existe entre
ellas es esencial para que un organismo multicelular responda y se adapte a su medio ambiente. Estas señales pueden
ser de naturaleza química o física y la interpretación que hace la célula de estas señales se refleja en un cambio de
comportamiento determinado por la expresión de genes. A este proceso se le conoce como transducción de señales.
Palabras claves: receptor, ligando, proteínas efectoras, factor de transcripción, señal autocrina, señal paracrina, señales
endocrinas, receptores intracelulares, sinapsis nerviosa, señales inhibitorias y estimulatorias, hormonas, acetilcolina,
canales iónicos, proteína G, Quinasas, fosfatasa, GEF, GAP, segundos mensajeros, AMP cíclico, diacilglecerol,
retroalimentación negativa y positiva.
Transducción de Señales (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008).

Los organismos unicelulares responden a cambios en su medio ambiente, por ejemplo, modificando su comportamiento
de acuerdo a los nutrientes o toxinas del medio. Las bacterias responden a señales químicas secretadas por sus vecinos
y que se acumulan cuando hay altas densidades (efecto conocido como “quorum sensing” o percepción de quórum). Esto
les permite coordinar su comportamiento, incluyendo la movilidad, reproducción y otras actividades esenciales.
En un organismo multicelular, ocurre algo similar, donde la comunicación entre células es a través de moléculas
señalizadoras extracelulares. Las células de los organismos multicelulares detectan y responden tanto a señales internas
como externas, las que controlan la división celular, crecimiento y diferenciación durante el desarrollo, así como también,
su comportamiento dentro de un tejido. Los sistemas de comunicación intracelular son complejos y han evolucionado
para permitir la colaboración celular, con el fin de fomentar la organización de los distintos tipos de tejidos y la aparición
de diferentes tipos celulares. De este modo, la mayoría de las células en un organismo emiten y reciben señales, donde
la recepción de esas señales depende de una proteína receptora (receptor) usualmente –pero no siempre– ubicado en la
superficie celular. Podemos resumir el proceso de respuesta de una célula del siguiente modo: (1) un receptor en la célula
receptora se une a una molécula señalizadora o ligando (la señal). (2) Esta unión, activa una o más vías de señalización
intracelular. (3) Se procesa la señal en la célula receptora y activan los blancos apropiados (proteínas efectoras). (4) Se
provoca un cambio en el comportamiento celular (Fig. 1).
197
Figura 1. Transducción de una señal. Una molécula extracelular (ligando)
se une a una proteína receptora en la membrana citoplasmática. Desde
allí la señal intracelular es activada por una o más proteínas (vía de
señalización). Finalmente, una o más proteínas en la vía de señalización
alteran la actividad de proteínas efectoras generando cambios en el
comportamiento de la célula.
Las proteínas participantes de la vía de señalización activan a una o más proteínas efectoras, las cuales generan una
respuesta celular a la señal que fue recibida por la célula al inicio. Frecuentemente, la respuesta celular incluye la expresión
de genes, los que requieren de factores de transcripción. Los factores de transcripción se unen a promotores específicos
y activan la expresión de genes blanco. Otras proteínas efectoras, pueden actuar directamente sobre las proteínas que
regulan la forma celular y así inducir cambios en el citoesqueleto. También, otro grupo de proteínas efectoras pueden
regular el crecimiento celular mediante la inducción del arresto del ciclo celular (detención) o la generación de cambios
metabólicos.
Las señales que recibe la célula pueden ser de naturaleza química o física. En el caso de las señales de naturaleza
química, éstas las podemos dividir en señales de corta o larga distancia. Por ejemplo, señales autocrinas y paracrinas son
locales (corta distancia), mientras que señales endocrinas son mucho más distantes y tienen blancos más generales (por
ejemplo, las hormonas sexuales).
La señal autocrina, es una señal que la propia célula envía y recibe. La señal paracrina, es una señal que es secretada
por células al extracelular. A menudo, estas moléculas secretadas son mediadores locales, que actúan solo en las células
cercanas a la fuente de la señal (Fig. 2A). También a corta distancia encontramos señales de contacto entre célula-célula,
a través de un receptor en la membrana de la célula blanco con un ligando de la célula señalizadora (Fig. 2B).
No siempre los receptores están en la superficie de las células, algunos de ellos pueden ser receptores intracelulares.
En estos casos la molécula señalizadora (ligando) debe entrar a la célula para unirse al receptor. Para esto, el ligando debe
ser pequeño e hidrofóbico para que pueda atravesar la membrana plasmática por difusión simple (Fig. 2C).
Las señales endocrinas son de larga distancia donde se secretan moléculas de señalización llamadas hormonas a la
circulación sanguínea (Fig. 2D).
198
Figura 2. Tipos de señal. (A) Señal paracrina. (B) Señal dependiente
de contacto. (C) Receptores intracelulares. (D) Señal endocrina.
Referencia figura 15-04 y 15-03. Biología molecular de la célula,
quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Las señales de origen eléctrico son otro tipo de señales las cuales pueden también clasificarse como locales o a
distancia. En este sentido, como se vio en el capítulo anterior, las señales a través de uniones tipo GAP entre células
pueden entregar señales de origen químico o eléctrico conectando los citoplasmas de células vecinas (Fig. 3A), por
ejemplo, la sinapsis eléctrica del músculo cardíaco.
La sinapsis nerviosa o señal sináptica se encarga de entregar señales a una célula blanco específica y distante de
manera rápida (Fig. 3B), por ejemplo, la sinapsis química de la unión neuromuscular.
Figura 3. Señales por uniones gap y sinápticas. (A) Las células están conectadas por uniones tipo gap por las cuales pueden intercambiar pequeñas
moléculas intracelulares como calcio o AMP cíclico y por tanto pueden responder a señales extracelulares de manera coordinada. (B) Las señales
sinápticas son realizadas por neuronas que transmiten señales eléctricas a lo largo de sus axones, liberando neurotransmisores en lugar de la sinapsis
ubicado lejos del soma celular.
199
Características de las señales (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008).
El proceso en que una señal ejerce su función se puede descomponer en seis etapas principales: (1) síntesis de la
molécula señalizadora en la célula que envía la señal; (2) liberación de la molécula señalizadora; (3) transporte de la
molécula señalizadora a la célula blanco; (4) detección de la señal por un receptor específico; (5) cambio en el metabolismo
celular, funciones o desarrollo; (6) remoción de la señal, finalizando la respuesta.
Las moléculas señalizadoras pueden ser de distintas naturalezas incluyendo proteínas, pequeños péptidos,
aminoácidos, nucleótidos, hormonas, retinoides, derivados de ácidos grasos e incluso gases disueltos como monóxido
de carbono (CO) y óxido nítrico (NO). Estas moléculas son liberadas al espacio extracelular por exocitosis desde la
célula señalizadora (la que envía la señal) y algunas de ellas pueden llegar a la célula receptora y atravesar la membrana
por difusión simple. Otras señales en cambio son recibidas a través de un receptor en la membrana celular. La célula
receptora o blanco responde a través de sus receptores, que se unen al ligando para que se inicie la respuesta celular. El
sitio de unión del receptor a su ligando tiene una estructura muy compleja, diseñada específicamente para reconocer la
estructura tridimensional particular de cada ligando. Muchas moléculas señalizadoras actúan a muy baja concentración
(típicamente ≤10-8 M), y sus receptores usualmente se unen a ellas con alta afinidad.
Cada célula está programada para responder a combinaciones específicas de señales extracelulares. Estas pueden
ser estimulatorias o inhibitorias y pueden actuar en una innumerable cantidad de combinaciones determinando el
comportamiento celular. Así, dependiendo del tipo celular, de qué estímulo sea y de la especificidad ligando receptor, la
célula responderá de manera específica (Fig.4).
Figura 4. Combinación de señales y efectos. El

comportamiento de una célula depende de muchas
moléculas de señalización extracelular. Cada tipo de
célula presenta un conjunto de receptores que le permite
responder frente a un grupo de moléculas señalizadoras
producida por otras células. Como se observa en la figura,
una célula requiere de múltiples señales para sobrevivir,
señales adicionales para crecer y dividirse o diferenciarse.
Si la célula no recibe las señales de sobrevivencia, la
célula procederá a morir por apoptosis (muerte celular
programada).
Omega 2010).
Si bien, las moléculas señal que un organismo produce pueden ser usadas en numerosas combinaciones para controlar
diversos comportamientos de la célula de manera específica; solo se necesita un número relativamente bajo de diferentes
moléculas señal para producir un efecto. La complejidad de la señalización está dada por las distintas maneras en que
una célula puede responder a la combinación de señales que recibe. Por ejemplo, la acetilcolina es una molécula de
señalización (neurotransmisor) que tiene diferentes efectos dependiendo de qué tipo de célula reciba esta molécula
(Fig. 5A). Si esta molécula se une a células musculares cardiacas, éstas se relajan (Fig. 5B). Por el contrario, si este
neurotransmisor se une a células del músculo esquelético, estas células se contraen (Fig. 5C). También, esta molécula
señalizadora puede actuar en otros tipos celulares, como las células de las glándulas salivales, donde su efecto es estimular
la liberación de la saliva (Fig. 5D).
200
A B C D
Figura 5. Diferentes señalizaciones mediante acetilcolina. (A) Molécula de acetilcolina. (B) Efecto en la fibra muscular cardíaca produciendo
reducción de la frecuencia y fuerza de contracción. (C) Efecto en la fibra muscular esquelética, produciendo contracción. (D) Efecto en las células
de la glándula salival produciendo secreción.
En animales complejos, las células endocrinas que liberan hormonas y las células nerviosas trabajan juntas de manera
coordinada, regulando el comportamiento celular a distancia. Las diferentes células endocrinas usan diferentes hormonas
para comunicarse específicamente con sus células blanco (Fig. 6A). En cambio, diferentes células nerviosas pueden usar
el mismo neurotransmisor para comunicarse (Fig. 6B). Tanto señales producidas por diferentes células endocrinas como
por diferentes neuronas, pueden combinarse para generar una respuesta determinada.
Figura 6. Combinación de señalizaciones producen distintos efectos.
(A) Señales endocrinas mediante combinación de hormonas. Las
células endocrinas secretan hormonas en la sangre, y estas hormonas
actúan solo en las células blanco que tienen los receptores específicos.
(B) Señalización sináptica mediante una red neuronal y diferentes
células blanco. En la señalización sináptica la especificidad surge de
los contactos sinápticos entre una célula nerviosa y las células blanco
específicas que reciben la señal. En general, solo una célula blanco, la
cual debe estar en comunicación sináptica con una célula nerviosa es
expuesta a los neurotransmisores liberados por el terminal nervioso.
Las tres clases mayores de receptores de superficie celular (Capítulo 15, Alberts, et
al. 2008).
La mayoría de las moléculas señalizadoras se unen a proteínas receptoras en la superficie de la célula blanco activando
las vías de señalización, por lo que no se requiere que la molécula señalizadora entre al citosol o al núcleo directamente.
La mayoría de estas proteínas receptoras pertenecen a una de las 3 clases, definidas por el mecanismo, de transducción
de la señal (transmisión de la señal): (1) receptores acoplados a canales iónicos, (2) receptores acoplados a proteínas G y
(3) receptores acoplados a enzimas (Fig. 7).
Los receptores acoplados a canales iónicos se ven envueltos en sinapsis rápidas entre células nerviosas y otras
células blanco excitables, como las células musculares. Este tipo de señales es mediado por un pequeño número de 201
neurotransmisores que abren o cierran de manera transitoria los canales iónicos, formados por proteínas, a las cuales
ellos se unen, cambiando brevemente la permeabilidad a iones de la membrana plasmática y por tanto la excitabilidad
de las células blanco postsinápticas (Fig. 7A).
Los receptores acoplados a proteínas G actúan directamente regulando la actividad de proteínas blanco unidas a la
membrana plasmática -generalmente enzimas o canales iónicos. Este tipo de señalización depende de una proteína G
heterotrimérica compuesta de tres subunidades distintas, una subunidad alfa, que une el nucleótido de guanina (GDP o
GTP), una subunidad beta y una subunidad gamma. Las subunidades beta y gamma están asociadas formando un dímero
estable. La subunidad alfa, en cambio, está unida a la subunidad beta de manera que se disocia reversiblemente durante el
ciclo funcional de la proteína G. Cuando una molécula señal se une al receptor de la célula blanco, este receptor adquiere
una conformación que le permite interactuar con la proteína G que se encuentra en estado inactivo, produciendo
un complejo transitorio. El acoplamiento del receptor activado con la proteína G produce cambios conformacionales
que inducen el cambio de GDP por GTP (estado activo). La activación de la proteína G genera la separación de la
subunidad alfa la que puede modular positiva o negativamente a diferentes canales iónicos (principalmente para potasio
o calcio) o enzimas generadoras de segundos mensajeros. Ejemplos clásicos se estas ultimas son la enzima adenilil-
ciclasa, que cataliza la formación del AMP cíclico a partir de ATP y la enzima fosfolipasa C, que cataliza la formación
de dos segundos mensajeros: el inositol 1,4,5 trisfosfato y el diacilglicerol. También la activación de la proteína G (que
corresponde a una familia de proteínas) participa en forma directa en la apertura de canales iónicos. Una vez transmitida
la señal el GTP es hidrolizado, inactivando a la proteína G, la cual vuelve a su conformación original (Fig. 7B).
Los receptores acoplados a enzimas funcionan como enzimas o asociados directamente con enzimas que ellos
activan. Generalmente usan proteínas de transmembrana que exponen su sitio de unión a ligando fuera de la célula y su
sitio catalítico o de unión a la enzima hacia dentro. Los receptores acoplados a enzimas son heterogéneos en estructura
(comparados con los otros tipos de receptores). La gran mayoría, sin embargo, son proteínas quinasas (que fosforilan) o
están asociados a proteínas quinasas un conjunto específico de proteínas en las células blanco (Fig. 7C).
Estos receptores activan vías de señalización intracelular a través de moléculas señalizadoras intracelulares. Algunas
de las moléculas señalizadoras internas son pequeñas moléculas o iones, que a menudo son llamados segundos mensajeros
(siendo los primeros mensajeros la señal extracelular). Estos segundos mensajeros son generados en grandes cantidades
en respuesta a la activación del receptor y difunden lejos de su lugar de origen, esparciendo la señal al interior de la célula.
Ejemplos de estos segundos mensajeros son el AMP cíclico y Ca2+, ambos solubles en agua y difunden en el citosol,
mientras que otros como el diacilglecerol, son hidrofóbicos y difunden en el plano de la membrana plasmática. Las
señales también dependen de proteínas que se pueden comportar como interruptores moleculares, es decir que pasan
de inactivo a uno activo por medio de una señal, y vuelven a su estado normal (apagado), a través de otra señal (Fig. 8).
Figura 7. Tres clases de receptores. (A) Receptores

acoplados a canales iónicos. La molécula señal produce un
cambio conformacional que permite la apertura del canal.
(B) Receptores acoplados a proteínas G. La molécula
señal se une a un receptor, lo cual le permite la unión de
la proteína G. Al producirse el intercambio de GDP por
GTP, la proteína G, ahora activada, puede activar a otras
enzimas como la adenilil-ciclasa y la fosfolipasa C o canales
iónicos. (C) Receptores acoplados a enzimas. La unión de la
molécula señalizadora al receptor causa la dimerización del
receptor activándolo o bien la unión de enzimas asociadas
que permiten la activación de la señalización en una cascada
de fosforilaciones.
Referencia figura 15.16. Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
202
Figura 8. Activación e inhibición de interruptores moleculares. La
activación depende de la adición de un grupo fosfato, ya sea por
fosforilación o por unión de GTP en vez de GDP. (A) Señalización
por fosforilación. Una proteína quinasa une covalentemente
un grupo fosfato proveniente del ATP, activando a la proteína
señalizadora y una fosfatasa remueve el grupo fosfato, apagando la
señal. (B) Señalización mediante unión a GTP. La unión de GTP
activa la señalización, mientras que el cambio de GTP a GDP
apaga la señal.
Referencia figura 15.18. Biología molecular de la célula, quinta
La actividad de cualquier proteína regulada por fosforilación depende del balance entre la actividad de quinasas que
fosforilan y de fosfatasas que desfosforilan (Fig. 8A). Otra clase de interruptores moleculares proteicos son aquellos que
pueden unir GTP (GTPasas monoméricas). Estas proteínas cambian de un estado encendido (activo) cuando unen
GTP a uno apagado (inactivo) cuando la hidrólisis de un fosfato convierte el GTP en GDP (Fig. 8B). Las proteínas
activadoras de GTPasa (GAPs) promueven el estado inactivo de las proteínas al aumentar la tasa de conversión de
GTP a GDP. Por el contrario, los factores de intercambio de guanina (GEF), activan a las GTPasa monoméricas ya que
promueven la liberación del GDP lo que permite la unión de GTP (Fig. 9).
Figura 9. GAP y GEF. Una proteína activadora de GTPasa (GAP)

inactiva al promover la hidrólisis de fosfato transformando el GTP
a GDP. Las proteínas GEF promueven el intercambio de GDP.
Referencia figura 15.19. Biología molecular de la célula, quinta
Relación entre señales y respuestas

La relación entre la señal y la respuesta varía dependiendo de la vía de señalización. La función de un sistema
intracelular es detectar y medir el estímulo específico en una locación particular de la célula y después generar una
respuesta medida y apropiada en el tiempo correcto en otra locación, es decir, para que un sistema funcione es muy
importante el dónde y el cuándo. En este sentido, es importante: (a) la sincronización de la señal, es decir, si la respuesta
es lenta o rápida; (b) sensibilidad a señales extracelulares, es decir, alta concentración si es un neurotransmisor o baja
concentración si es hormona; (c) dinámica de rango del sistema de señalización, lo cual se relaciona con la sensibilidad
y el rango de respuesta; (d) persistencia de una señal, es decir, si hay retroalimentación positiva o bien existe una
señal continua; (e) procesamiento de la señal, lo que puede convertir una señal simple en una respuesta compleja; (f )
Integración de señales, que permite que una respuesta esté gobernada por múltiples entradas o señales; (g) coordinación
de múltiples respuestas en una célula, mediante una sola señal extracelular. Por ejemplo, cuando una señal modula la
fuerza en la respuesta de otras señales.
La velocidad de la respuesta influye en la coordinación de la señal y depende del recambio de las moléculas
señalizadoras (Fig. 10A). Algunas señales implican cambios en la expresión génica, que inducen la síntesis de nuevas
proteínas. Estas señales ocurren lentamente ya que implican procesos de transcripción, traducción y distribución de
proteínas a su lugar de acción (por ejemplo, señales de división celular y crecimiento). Otras señales son mucho más 203
rápidas ya que no requieren cambios en la transcripción de genes. Pueden actuar directamente fosforilando y activando
proteínas blanco (por ejemplo, en los cambios en el movimiento celular y la secreción).
La persistencia y el procesamiento de una señal pueden involucrar complejos procesos como las retroalimentaciones
positivas donde una proteína “A” influye en la producción de otra proteína “B”, y esta segunda proteína refuerza la
señalización (Fig. 10B). La retroalimentación negativa, por otro lado, implica que una proteína “A” induzca la producción
de otra proteína “B”, y luego ésta, una vez que se acumula, inhiba la producción de la primera (Fig. 10B) generando
variación en la expresión de genes.
La persistencia de una señal también puede ajustarse, lo que involucra diferentes estrategias como secuestro del
receptor por internalización mediante el endosoma, o bien mediante la digestión del receptor. También puede producirse
la inactivación del receptor, de la proteína señalizadora o de la producción de una proteína inhibidora (Fig.10C).
Las señales son complejas y pueden a su vez integrarse unas con otras, lo que implica la coordinación de diferentes
señales para producir una respuesta a uno o varios estímulos determinados (Fig. 10 D).
Figura 10. Relación entre señales y respuestas. (A) Coordinación y velocidad de respuesta. Una molécula señalizadora activa una vía de señalización
intracelular que puede ser rápida o lenta. Si la proteína señalizadora se une a un receptor el cual activa directamente a una proteína que efectúa un
cambio en el comportamiento celular, la respuesta será rápida. En cambio, si la proteína señalizadora activa, por medio de un receptor, una vía de
señalización que depende de factores de transcripción que activen la expresión de genes, y que estos genes sean transcritos a ARN y traducidos
a proteína para que estas ejerzan un cambio en el comportamiento celular, la respuesta será lenta. (B) Retroalimentación positiva y negativa. Un
estímulo activa a la proteína A, que a su vez activa a una proteína B. La proteína B ejerce su acción ya sea incrementado o inhibiendo la producción
de A. (C) Mecanismos por el cual la célula se vuelve insensible a la molécula de señalización extracelular. Se muestran mecanismos que operan a
nivel de receptor. Una señal puede bloquearse por medio del secuestro de un receptor en endosomas, por degradación del receptor en lisosomas,
por inactivación del receptor o de la molécula señalizadora, o bien por producción de una proteína inhibitoria. (D) Integración de señales. Una
molécula de señalización A y otra B se unen a sus respectivos receptores activando la fosforilación de una misma proteína (Y) pero en diferentes
sitios de la proteína Y. La proteína Y solo se activa cuando ambos sitios están fosforilados, por lo que necesita de las señales de A y B en conjunto.
Referencia figura 15.06, 15-26, 15-29 y 15-20. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
204
CUESTIONARIO 10
a) ¿Qué pasos deben cumplirse para que una señal se transforme en un cambio en el comportamiento de la célula?
b) El diagrama muestra una señal lenta y otra rápida. Explique cómo se producen ambas señales.
c) Explique cómo una misma molécula, como la acetilcolina, puede generar señales diferentes.
d) ¿Cuáles son las tres clases mayores de receptores de superficie celular?
2.- Complete el siguiente recuadro de verdaderos y falsos. Argumente por qué es verdadero o por qué es falso.
Dentro de las tres clases mayores de receptores de superficie
celular están las fosfatasas.
La retroalimentación positiva genera oscilaciones en le expresión

de genes.
Una manera de manejar la intensidad de una señal es secuestrando
el receptor.
Una señal paracrina es una señal a larga distancia.
Una hormona hidrofóbica necesita de un receptor intracelular.

205
Horizontal
3. Señal que la propia célula se envía a sí misma.
4. La proteína G que se acopla a receptores para desencadenar una señal es una proteína.
6. Señal a larga distancia mediada por hormonas en el torrente sanguíneo.
7. Proteínas que desfosforila.
Vertical
1. Retroalimentación que tienen la capacidad de aumentar o mantener una señal.
2.Ejemplo de segundo mensajero hidrofóbico.
5. Proteína que fosforilan.
206
207
208
11
COORDINACIÓN E INTEGRACIÓN DE
SEÑALES
(SEÑALIZACIÓN CELULAR II)
RESUMEN
El que una célula pueda responder de manera adecuada a una señal es crucial para el adecuado funcionamiento del
organismo. La presencia de receptores capaces de detectar una molécula señalizadora o unir un ligando constituye un paso
fundamental dentro de este proceso. El receptor debe tener una alta afinidad y especificidad por la molécula señalizadora
ya que las señales deben responder exactamente al estímulo que las gatilla, evitando así respuestas inespecíficas o no
controladas. De hecho, cuando una señal se genera sin la necesidad de un estímulo, da paso al desarrollo de enfermedades
(un ejemplo de esto es el cáncer). La respuesta de una célula a una señal también depende de la concentración o
intensidad de la señal. La amplificación de una señal se produce a través de segundos mensajeros que tienen la función
de fortalecer o aumentar la eficiencia de la señal misma. Las hormonas cumplen un rol importante en la activación de
señales a distancia. Algunas hormonas son hidrofóbicas y otras hidrosolubles, por lo tanto, siguen diferentes estrategias
para poder circular por la sangre hasta llegar a su célula blanco para la activación de la señal.
Palabras claves: receptor, ligando, amplificación, hormonas, morfógenos, BMP, inhibición lateral, Notch, serina-
treonina quinasas, enzimas tirosina quinasas, dominio SH2, Ras, MAP quinasa, RTK, GPCR, adenilato ciclasa,
AMPc, fosfolipasa C, PKA, PIP2, IP3, diacilglicerol, calcio, calmodulina, arrestin, hormonas liposolubles, hormonas
hidrosolubles, esteroides, retinoides, hormonas tiroideas, insulina, glucagón, eicosanoides, prostaglandinas, leucotrienos.
Comunicación y coordinación celular (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008).

La coordinación celular es esencial para que las células de un tejido respondan adecuadamente frente a un estímulo
determinado. Por ejemplo, durante el desarrollo se producen múltiples señales de crecimiento y división celular que
permiten el crecimiento del embrión. Durante este proceso las células responderán a estas señales dependiendo del lugar
en que se encuentren y, por tanto, de acuerdo a la concentración de la señal. Esto permite que las células se diferencien
y adopten diferentes linajes formando así diferentes tejidos. Por ejemplo, una célula sometida a una determinada
concentración de una molécula señalizadora se comportará diferente de otra célula sometida a la misma molécula
señalizadora, pero en una concentración diferente (ya sea más o menos concentrada). A estas moléculas señalizadoras
que funcionan en gradiente se les denomina morfógenos (Fig. 1A). Un ejemplo de esto es lo que ocurre con el gradiente
de la proteína morfogénica ósea o BMP, por sus siglas en inglés, que se forma después de la fecundación y es esencial
para el desarrollo, el patrón embrionario y en la formación esquelética temprana. El efecto del morfógeno se expande
desde una fuente localizada, formando un gradiente de concentración a lo largo de un tejido (Fig. 1B).
La inhibición lateral es otro proceso que permite que las células adopten distintos linajes o se diferencien hacia
distintos tipos celulares. La inhibición lateral se da en células que se comunican mediante contacto (receptor-ligando).
Una célula que presenta ligando en su superficie se une al receptor presentado en la célula vecina, activando una vía
de señalización que inhibe la producción de ligando en la célula que presenta el receptor. De este modo, cada célula
que presenta ligando se rodea por células diferentes a ella que solo presentan receptor (Fig. 2). La inhibición lateral es
originada por la vía de señalización Notch implicada en la definición de linajes de las células y esencial en el desarrollo
de diferentes tejidos.
209
Figura 1. Destino celular. (A) Gradiente de morfógenos.
Células que reciben una mayor concentración de
moléculas señalizadoras porque han sido secretadas en
el lugar se diferenciaran a ser células tipo A. Células que
reciban una concentración media del morfógeno porque
se encuentran más lejanas de la zona en que estos han
sido secretados se diferenciarán a células tipo B. Células
que reciben al morfógeno en bajas concentraciones
se diferenciarán a células tipo C. (B) Gradiente del
morfógeno BMP en un huevo fecundado de pez cebra.
Omega 2010) y fotografía modificada de Autumn P
Pomreinke et al. Elife. 2017 Aug 31;6. pii: e25861.
Figura 2. Inhibición lateral mediada por receptor

llamado Notch y ligando llamado Delta. En este
ejemplo, células individuales del epitelio que comienzan
a desarrollarse como células neuronales, señalan a las
células vecinas a no convertirse en neuronas. Esta señal
inhibitoria es dependiente del contacto entre el receptor
Notch y su ligando Delta.
Omega 2010).
Vía de señalización receptores acoplados a proteína G (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008).
Los receptores son proteínas transmembrana que se unen a ligandos pequeños y tienen dominios intracelu-
lares que permiten que las señales al interior de la célula se activen. Los receptores acoplados a proteína G (GPCR)
tiene disposición cilíndrica y siete hélices transmembrana. Cuando el ligando se une al receptor se producen cambios
conformacionales en la superficie citoplásmica de este lo que promueven la activación de la proteína G (vista en el
capítulo anterior). Un ejemplo de GPCR es el receptor β 2-adrenérgico que responde al neurotransmisor adrenalina.
La señal que se desencadena cuando se activa un GPCR se puede resumir de la siguiente manera: (1) molécula señal-
izadora se une al receptor, (2) el receptor cambia su conformación y se une a la proteína G trimérica, (3) La subunidad
α de la proteína G se desplaza exponiendo sitio de unión a nucleótidos, (4) se produce intercambio de GDP por GTP,
produciendo el cierre del sitio de unión a nucleótidos, (5) se disocia la subunidad α del receptor y del complejo βγ. La
subunidad α unida a GTP y el complejo βγ regulan cada una las actividades de las moléculas de señalización cascada
abajo. El receptor permanece activo mientras haya una molécula señal unida a él, catalizando la activación de muchas
moléculas de proteína G durante este tiempo (Fig. 3A).
La proteína G activa puede, a su vez, activar a la enzima adenilato ciclasa o adenilil ciclasa que se encuentra en la
membrana. Como se revisó en el capítulo anterior, esta enzima promueve el cambio de ATP a AMP cíclico (AMPc)
a través de una reacción de ciclación que elimina dos grupos fosfato como pirofosfato (PPi). El AMPc funciona como
210
segundo mensajero amplificando la señal y puede unirse y activar a otras proteínas quinasas, como por ejemplo la
proteína quinasa A (PKA) (Fig. 2B). La activación de PKA provoca la liberación de sus subunidades catalíticas, que al
ingresar al núcleo fosforilan factores de transcripción como CREB, que finalmente, con ayuda de otras proteínas, activa
la transcripción de genes específicos (Fig. 3B).
Proteínas G también pueden activar a la enzima fosfolipasa C (PLC) en la membrana, la cual hidroliza PIP2
(fosfatidil-inositol-(4,5)-bifosfato) produciendo dos mensajeros intracelulares: diacilglicerol (DAG) que queda en la
membrana e inositol-(1, 4,5)-trifosfato (IP3) soluble. El IP3 difunde hacia el citosol y se une a canales de calcio en la
membrana del retículo endoplásmico causando la apertura de estos canales y la liberación del calcio al citosol. El calcio
en el citoplasma se une a la proteína quinasa C (PKC) y la moviliza a la membrana plasmática activándola. PKC necesita
de diacilglicerol y de calcio para activarse, una vez activada puede fosforilar a otras proteínas blanco cascada abajo (Fig.
4).
Figura 3. Activación de receptores acoplados a proteína G y cascada de adenilato ciclasa-AMPc. (A) Un GPCR inactivo se encuentra unido a
una proteína G inactiva. Cuando una señal extracelular es recibida por el GPCR, se produce un cambio conformacional del receptor de la proteína
G. La alteración de la subunidad alfa de la proteína G le permite intercambiar su GDP por GTP, activándose tanto la subunidad alfa como la
beta y la gamma. (B) La unión de una molécula de señalización extracelular a su GPCR activa la enzima adenilil-ciclasa a través de una porteína
G activada, lo que aumenta la concentración de AMP cíclico (AMPc) en el citosol. Este aumento de AMPc induce la activación de PKA, la que
libera sus subunidades catalíticas, que entran al núcleo donde fosforilan a un factor de transcripción llamado CREB. Una vez fosforilado CREB,
recluta a otras proteínas para iniciar la transcripción de genes. Esta vía de señalización controla muchos procesos celulares, que van desde la síntesis
de hormonas en células endocrinas a la producción de proteínas necesarias para la inducción de memoria a largo plazo en el cerebro.
Referencia figura 15-32 y 15-36 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
211
Figura 4. Activación de la cascada PLC. Una
molécula señal activa al GPCR y a la proteína
G, la proteína G, a su vez, activa a la fosfolipasa
C en la membrana. Dos pequeños mensajeros
intracelulares se producen cuando PLC
activado hidroliza a PI(4,5)P2: diacilglicerol que
se queda en la membrana e inositol trifosfato
o IP3. El IP3 difunde en el citoplasma y libera
calcio desde el retículo endoplásmico. El calcio
difunde por el citoplasma y activa a la proteína
quinasa C la cual puede activar a otras proteínas
intracelulares.
Referencia figura 15-39. Biología molecular de
Como se dijo en el capítulo anterior, el calcio (Ca2+) es muy importante como molécula señalizadora. Por
ejemplo, cuando el ovocito es fecundado se produce una ola de Ca2+ citosólico que se cree es liberado por una forma
específica de PLC que es introducida en el citoplasma del huevo por el espermatozoide al momento de la fertilización
(Fig. 5). La proteína calmodulina también es una proteína receptora de calcio (presenta cuatro sitios de unión al ion
Ca2+). Esta proteína interviene y regula una multitud de procesos celulares, como por ejemplo la funcionalidad y la
arquitectura del citoesqueleto, la motilidad celular, la proliferación celular, la apoptosis, la autofagia, la homeostasia
metabólica, la contracción muscular y la translocación de fosfolípidos en las membranas, entre otros.
Figura 5. Fertilización del huevo por el espermatozoide produce una ola de calcio en el citplasma.
Para detener o apagar la señal inducida por GPCRs, un grupo de GPCRs (GPK) quinasa fosforilan al receptor en
múltiples sitios, lo cual recluta a una proteína llamada arrestina. La arrestina a su vez se une al receptor impidiendo que
vuelva a ser activado por una proteína G (Fig.6).
Figura 6. Término de la señal mediada por GPCRs por un grupo de quinasas GPK. Un GPCR activado estimula a quinasa (GPK) para que
fosforile al GPCR en varios lugares, mediante la hidróslisis de ATP. La unión de una proteína llamada arrestin al receptor fosforilado impide la
unión del receptor a la proteína G, y por tanto terminal la señal.
212
Receptores acoplados a enzima (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008).
Otro tipo de receptor, son los denominados receptores acoplados a enzimas, los cuales son muy variados. Estos
receptores pueden estar acoplados a enzimas que presentan alguna actividad catalítica como fosfotasa, quinasa y proteasa,
entre otras. En el caso de los receptores acoplados a enzimas quinasa existen dos grandes grupos: (a) serina-treonina
quinasas; que corresponden a la gran mayoría y fosforilan grupos hidroxilos de serinas y treoninas en sus proteínas
blanco; y (b) enzimas tirosina quinasas que fosforilan proteínas en tirosina. Muchas de las proteínas señalizadoras
intracelulares son controladas por fosforilación, siendo ellas mismas quinasas y comúnmente la señalización ocurre en
cascadas.
Una estrategia simple y efectiva para realizar la especificidad de las interacciones entre moléculas señalizadoras, es
localizar a todas las moléculas participantes en la misma parte de la célula o incluso dentro de largos complejos proteicos,
de modo de asegurar la interacción entre ellas y evitar interactuar con otras proteínas sin relación. Estos mecanismos a
menudo involucran adaptadores proteicos tipo “andamio” que unen grupos de proteínas que interactúan entre sí en un
mismo complejo señal (Fig. 7A), como también proteínas intracelulares que se unen directamente a la parte intracelular
del receptor (Fig. 7B).
Figura 7. Complejos señalizadores intracelulares. (A) Señalización sobre proteína andamio. El complejo de señalización se pre-ensambla en una
proteína andamio previo a su activación. Otras veces, la proteína andamio se une después de que el receptor ha sido activado. La proteína andamio
facilita que haya otras proteínas que participan en la cascada puedan fosforilarse y activarse. (B) Señalización sobre un receptor activado. En este
caso el receptor activado se fosforila en diferentes sitios, lo que permite que proteínas señalizadoras intracelulares se unan al receptor activado y
continúen transmitiendo la señal intracelularmente.
El ensamblaje de dichos complejos señalizadores depende de varias interacciones entre dominios conservados que
se encuentran en muchas proteínas de señalización intracelular. Cada uno de estos módulos proteicos o adaptadores,
pueden unirse a un motivo de otra proteína o lípido. El motivo de reconocimiento puede ser un péptido pequeño, una
modificación covalente o un dominio proteico. Un ejemplo común de estos dominios es el dominio Src homólogo 2
(SH2) y los dominios unión-fototirosina (PTB), que se unen a tirosinas fosforiladas en receptores activados o proteínas
señalizadoras intracelulares (Fig. 8A). Por ejemplo, una de estas proteínas adaptadoras es Grb2. Cuando Grb2 reconoce
al receptor activado puede reclutar a otra proteína llamada Sos (Ras-GEF perteneciente a la gran familia de las GTPasas
activadoras), que transmitirá la señal hacia el interior de la célula. La señalización Ras activa a una serie de proteínas
quinasas cascada abajo que generan cambio en la expresión de genes y en la actividad proteica de la célula (Fig. 8B).
213
Figura 8. Función de dominios y Ras. (A) Función de los dominios SH2 y PH2. Este ejemplo está basado en el receptor de insulina, el cual es
un receptor acoplado a proteína G, del tipo tirosina-quinasa. El receptor una vez activado se fosforila así mismo en el aminoácido tirosina. Luego
recluta a otra proteína llamada PTB, lo que permite propagar las fosforilaciones. Luego se recluta a la proteína adaptadora Grb2, que mediante
uno de sus dominios SH3 una la proteína activadora GTPasa llamada Sos (Ras-GEF), que activa la GTPasa Ras. Los dominios PTB, SH2, SH3
están presentes en varias proteínas y son muy usados en señalización. (B) Vía de señalización Ras y activación de proteína quinasa MAP. Una
Ras activada, puede estimular o encender a una MAP serina /treonina quinasa que comienza a fosforilar diversas proteínas en una cascada de
fosforilación intracelular (Raf-Mek-Erk) que termina por producir expresión de genes que conducen a cambios de comportamiento en la célula.
Uno de los dominios más importantes dentro de los receptores acoplados a enzima es el dominio tirosina quinasa,
que se encuentra presente en los receptores tirosina quinasa (RTK, por sus siglas en inglés). Estos RTK desempeñan
un papel importante en procesos como: proliferación, migración, metabolismo, diferenciación y supervivencia celular; y
también regulan el proceso de comunicación intracelular durante el proceso de desarrollo. Estos receptores en su estado
inactivo (cuando no hay señal) se encuentran como monómeros. La unión del ligando induce a la formación de un dímero,
facilitando la fosforilación de las tirosinas en los dominios quinasa, las que a su vez van activando por fosforilación a
otras tirosinas (Fig. 9A) Finalmente, esta cadena de activación recluta proteínas de señalización intracelular, formando
grandes complejos de señalización (Fig. 9B). Estas señales pueden integrarse para asegurar que la célula responda a
un estímulo determinado (Fig. 10). La incorporación de actividad de enzimas en el proceso de transducción de señales
amplifica el efecto dentro de la célula, por lo que pequeñas cantidades del ligando producen respuestas robustas dentro
de la célula. Como podemos ver los procesos de señalización son complejos y altamente regulados.
Figura 9. Señalización por medio de RTK. (A)

Activación de RTK. La molécula señal produce
una fosforilación cruzada. (B) Activación en
cascada. Se producen sucesivas fosforilaciones
que van activando la señal cascada debajo de
múltiples proteínas señalizadoras intracelulares.
Referencia figura 15-53 y 15-54. Biología
(©Garland Science 2008 y Ediciones Omega
2010).
214
Figura 10. Integración de señales. El ejemplo muestra
dos receptores activados por moléculas señalizadoras
diferentes. A la izquierda se observa un receptor acoplado
a proteína G (GPCR) y a la derecha un receptor tirosina
quinasa (RTK), el cual se fosforila en tirosinas. Ambos
receptores activan a una serie de proteínas. Al final
de la cascada vemos a cinco quinasas que fosforilarán
proteínas reguladoras o efectoras.
Omega 2010).
Hormonas (Capítulo 15, Alberts, et al. 2008).

Las hormonas también son importantes moléculas señalizadoras. Podemos clasificar a las hormonas en dos
clases o grupos: (1) solubles en lípidos y (2) solubles en agua. Las hormonas solubles en lípidos o liposolubles, pueden
atravesar fácilmente la membrana plasmática, pero para poder llegar a su lugar de acción deben viajar por la sangre. Para
esto, necesitan proteínas transportadoras que las lleven, ya que las hormonas liposolubles son hidrofóbicas. Ejemplos de
estas hormonas son los esteroides (Fig. 11A), las hormonas tiroideas y los retinoides. Como estas hormonas difunden a
través de la membrana citoplasmática la unión al receptor es intracelular.
Otro es el caso de las hormonas hidrosolubles, las que viajan fácilmente en la sangre acuosa, pero al ser hidrofílicas no
pueden atravesar la membrana plasmática. Para solucionar este problema se unen a receptores en la membrana celular.
Esta unión activa el receptor acoplado a proteína G. La proteína G activa a la adenilil-ciclasa produciendo una gran
cantidad de AMPc como segundo mensajero, el cual a su vez activa quinasas en el citosol para modular la respuesta
fisiológica. Ejemplo de estas hormonas son derivados de aminoácidos como la serotonina, melatonina, histamina o
adrenalina. También péptidos como la insulina y glucagón; o eicosanoides, como prostaglandinas o leucotrienos (Fig.
11B).
Figura 11. Hormonas como moléculas de

señalización. (A) Aldosterona. (B) Leucotrieno.
215
CUESTIONARIO 11
SEÑALES
1.- Una los siguientes términos o conceptos con las frases que lo definen o identifican.
1.Ras. BMP
2 Prostaglandinas. Fosfolipasa C.
3.Calmodulina. Activa a una serie de proteínas quinasas
cascada, como por ejemplo MAP-quinasa.
4. Morfógeno. Inhibición lateral.
5. Notch. Hormonas hidrosolubles.
6.Separa PIP2 en dos moléculas: diacilglicerol AMPc.
que queda en la membrana y IP3 soluble.
7.Hormonas tiroideas. La unión del ligando induce a la formación
de un dímero, facilitando la fosforilación de
las tirosinas en los dominios quinasa.
8. RTK. Presenta cuatro sitios de unión al ion Ca2+,
por lo que puede capturar Ca2+ con una alta
afinidad.
9.Adenilil ciclasa.
10. PKC necesita de esta molécula y de calcio GPCR.
para activarse.
11. Un ejemplo de estos receptores es el Diacilglicerol.
receptor β 2-adrenérgico que responde al
neurotransmisor adrenalina.
216 2.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre 11 palabras revisadas en este capítulo.
3.- Ordene los eventos de una señalización.
217
REFERENCIAS
Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K & Walter P (2010) Biología Molecular de la Célula, traducción al
español de la 5a edición. Editorial Omega, Barcelona.
Alberts B, Bray D, Hopkin K, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P (2016). Essential Biology of the Cell.
cuarta edición. Editorial Omega, Barcelona.
Pomreinke AP, Soh GH, Rogers KW, Bergmann JK, Bläßle AJ, Müller P. (2017). Dynamics of BMP signaling and
distribution during zebrafish dorsal-ventral patterning. Elife. Aug 31;6. pii: e25861. doi: 10.7554/eLife.25861.
218
PLASMÁTICA
1.-
Proteína Tipo de proteína Periférica Integral
1 Transmembrana alfa hélice X
2 Transmembrana alfa hélice X
3 Transmembrana lámina beta X
4 Proteína alfa hélice anclada a X
membrana
5 Proteína anclada a lípido X
6 Proteína anclada a membrana X
mediante un oligosacárido
7 Proteína anclada a otra proteína X
8 Proteína anclada a otra proteína X
2.-
3.-
219
4.-
a) Se dice que la membrana es asimétrica porque tiene dos caras compuestas de dos sets diferentes de fosfolípidos y glucolípidos.
Además, el lado citosólico es levemente negativo y el lado exterior está cargado positivamente.
b) Los fosfolípidos son anfipáticos, es decir, tienen una cabeza polar (hidrofílica) y sus colas son apolares (hidrofóbica).
c) Es una red de proteínas de membrana interconectadas (formando una red citoesquelética). Su función es entregar resistencia y
propiedades mecánicas.
5.-
Asimetría
Colesterol
Corteza
Glucocaliz
Hidrofílico
Insaturaciones
Glucolípidos
Esfingolípidos
Fosfolípidos
6.- Insaturaciones, presencia de colesterol, temperatura.

La fluidez permite a las proteínas difundir rápidamente a través de la membrana. De este modo, genera posibilidad de interacción
y de señalización. También permite a las proteínas y lípidos difundir de un sector a otro e insertarse en la membrana después
de haber sido sintetizadas otras regiones de la célula. Otras consecuencias de la fluidez de la membrana es que se asegura la
distribución equilibrada de moléculas entre célula madre y células hijas, permite a las membranas fusionarse unas con otras y así
mezclar sus moléculas.
220
TRANSPORTE A TRAVÉS DE LA
MEMBRANA CELULAR
1.-
acuaporinas
permeasa
uniporter
neurotransmisor
osmolaridad
difusión
depolarización
transportador
crenación
antiporter
2.-
Antiporte
3.-
Propiedades Difusión simple Difusión facilitada Transporte activo cotransportador

Requiere proteínas - + + +
específicas
Transporte de solutos en - - + +
contra del gradiente
Acoplado a hidrólisis de - - + -
ATP
Cotransportador de iones a - - - +
favor de gradiente
Ejemplos de moléculas O2, CO2, hormonas Glucosa y aminoácidos Iones, moléculas pequeñas Glucosa y aminoácidos
transportadas esteroidales, diferentes (uniporters); agua e hidrofílicas, lípidos, (bombas (simporter) ; diferentes iones y
drogas iones (canales) acopladas a ATP) sucrosa (antiporters)
4.-
a) Corresponde al movimiento neto de un solvente de un lugar de menor a mayor concentración de solutos a través de una
membrana semipermeable, siendo la presión osmótica la fuerza necesaria para impedir la migración de solvente.
b) El transporte acoplado cosecha energía almacenada en el gradiente electroquímico de un soluto (un ion) que está a favor de
gradiente para transportar un segundo soluto en contra de gradiente.
c) En la apertura secuencial de canales de sodio y potasio y en la consecuente depolarización de la membrana, la que se vuelve a
polarizar para regresar al estado de reposo inicial. 221
5.-
Bomba tipo P ATP sintetasa Canal Hipertónico
6.-
Horizontal
4 electroquímico
6 difusión
8 uniporters
Vertical
1 gases
2 bombas
3 transportadores
5 canales
7 iones
222
INTRACELULAR
1.-
2.-
Proteína recién sistentizada presenta un péptido señal en su N-terminal.

El péptido señal es reconocido por SRP.
SRP es reconocido por un receptor en membrana cercad de un translocador.
El translocador se abre y la secuencia señal secuencia señal de la proteína que está siendo sintetizada permanece unida al canal
translocador mientras el resto de laproteína es empujada por el canal.
La secuencia señal es cortada por una señal peptidasa que están en la membrana del RER, en el lado del lumen.
3.-
Del núcleo al citosol las proteínas se mueven a través del poro nuclear (altamente selectivo).
Transporte transmembrana: mediante proteínas traNslocadoras. Transporta proteínas específicas a través de la membrana desde
el citosol a un sector topológicamente distinto.
Transporte vesicular: es un transporte que involucra envolver el cargo en una membrana.
4.-
7. N-terminal 10. Mitocondria
8. SRP 11. secuencia de aminoácidos que indica destino
9. GEF 8. Reconoce péptido o secuencia señal
10. TOM 12. interruptor molecular
11. Péptido señal 7. secuencia de inicio
12. Ran-GTP 9. intercambiador de guanina nuclear
223
5.-
Organelo Función
Núcleo Síntesis de ADN y ARN.
Retículo endoplásmico rugoso Modificación de proteínas
Golgi Modificación covalente de proteínas y lípidos.
Despacho a otros sectores.
Peroxisomas Reacciones de oxidación
Mitocondrias Energía
6.-
Endosimbiosis
Translocador
Mitocondrias
Tilacoide
Cianobacteria
Peroxisomas
Chaperonas
TIM
Organelos
Retículo
224
BIOSINTÉTICAS SECRETORAS Y
ENDOCÍTICAS
1.-
Lisosomas
Exocistosis
Autofagosoma
Manosa
Golgi
Presoxisomas
Hidrolasas
Clatrinas
Pinocitosis
Glucosilación
2.-
Clasifique Exocitosis constitutiva Exocitosis regulada Lisosoma

Lípidos recién sintetizados X
Hormonas X
Fagocitosis X
Receptor X
Proteínas recién sintetizadas X
Autofagosoma X
Manosa-6-fosfato X
3.-
a) Las proteínas se protegen al estar altamente glicolsiladas

b) Existen tres vías principales: endocitosis, fagocitosis y auofagosomas (en el cual puede autodigerir organelos y así reciclar
componentes de la célula.
c) Es un marcaje molecular que le permite a las vesículas discriminar proteínas lisosomales de otras proteínas. De esta manera
estas proteínas pueden ser destinadas a los lisosomas
d) Son responsable de proteger a la célula de su propia producción de peróxido de hidrógeno. Son esenciales en el metabolismo
lipídico, para el acortamiento de los ácidos grasos o para su oxidación en las mitocondrias.
e) Las proteínas Rab se encuentran en la superficie de las vesículas y son reconocida por otras proteínas de unión en la cara
citosólica de la membrana objetivo. Cumplen un rol esencial en la guía de vesículas al destino correcto.
225
4.-
Horizontal
2. glucoproteínas
4. adaptinas
5. COPI
7. dinamina
8. KDEL
Vertical
1. fosfatidilinositol
3. clatrina
6. COPII
226
1.-
Horizontal
3. oxidación
4. exergónica
6. entropía
8. acopladas
Vertical
1. piruvato
2. glicólisis
5. lactato
7. NADPH
2.-
227
3.-
4.-
5.-
Biosíntesis
acetilCoA
endergónica
prituvato
fotosíntesis
glicólisis
oxidación
cítrico
fermentación
228
1.-
2.-
1. matriz mitocondrial
2. membrana interna de la mitocondria
3. estroma
4. membrana del tilacoide
3.-
Glicólisis Descarboxilación del piruvato Ciclo de ácido cítrico Fosforilación oxidativa

(ATP)
2ATP, 2NADH, 2 2 NADH 6 NADH 30
Piruvato 2 FADH2
2 GTP
4.-
tilacoide
acetylCoA
oxidación
electrones
grana
estroma
fotosistema
mitocondria
clorofila
citocromo
229
CITOESQUELETO
1.-
2.-
Nombre Función
Dineína Proteína motora que se mueve a lo largo de los microtúbulos citoplasmáticos hacia el término -
Kinesina Proteína motora que se mueve a lo largo de los microtúbulos citoplasmáticos hacia el
termino +
Filamentos intermedios Tienen gran fuerza de tensión y su función principal es de permitir a las células resistir el
estrés mecánico
Centrosoma Contienen cientos de estructuras tipo anillo compuestos de gamma tubulina que sirven como sitios
de nucleación
Alfa y beta tubulina Proteína globular que compone los microtúbulos
axonema Estructura interna de microtúbulos los cilios y flagelos de las eucariotas
Vimentina Filamentos en el tejido conectivo, células
Inestabilidad dinámica Los microtúbulos sufren continuos ciclos de ensamblado y desensamblado como resultado
de la hidrólisis de GTP
3.-
Microtúbulo
Kinesina
Taxol
Citoesqueleto
Axonema
Colchicina
neurofilamento
flagelos
cilio
protofilamento
230 centrosoma
4.-
Horizontal
2. MAP
3. Colchicina
5. citoesqueleto
6. tubulina
7. queratina
Vertical
1. flagelos
4. interpolares
231
1.-
2.-
timosina
formina
miosina
cofilina
sarcómero
actina
citocalisina
tropomiosina
filopodio
contracción
232
3.-
a) Ambos presentan inestabilidad dinámica y el filamento presenta polaridad.

b) El calcio se une a la tropomiosina permitiendo su desplazamiento y dejando expuesto el lugar de unión de la miosina.
c) En los músculos la miosina se une fuertemente filamento de actina. Si no hay ATP la miosina no se suelta de la actina
produciendo lo que se conoce como configuración de rigor. Cuando uno muere no hay producción de energía, lo cual genera la
rigidez de los músculos lo que se conoce rigor mortis.
d) Son estructuras motiles exploratorias, que se forman y retractan a gran velocidad. Los filopodios y lamelopodios cumplen un rol
importante en el movimiento celular.
4.-
Horizontal
4. cofilina
5. tropomiosina
6. calcio
Vertical
1. miosina
2. sarcómeros
3. filopodios
7. actina
233
EXTRACELULAR
1.-
2.-
3.-
conexina
colágeno
conectivo
sinapsis
hialurónico
hemidesmosoma
desmosoma
focal
ocludina
catenina
234 cadherina
1.-
a) 1) Síntesis de la molécula señalizadora en la célula señaliza,

2) liberación de la molécula señalizadora,
3) transporte de la molécula señalizadora a la célula blanco,
4) detección de la señal por un receptor específico,
5) activación de proteínas, por ejemplo, mediante fosforilación, para la activación de una o más vías de señal
ización intracelular
6) factor de transcripción ingresa al núcleo celular y activa la expresión de genes específicos produciendo
proteínas efectoras
7) remoción de la señal, finalizando la respuesta.
b) Señales rápidas: son señales que no requieren cambios en la transcripción de genes. Pueden actuar directamente fosforilando y
activando proteínas blancos.
Señales lentas: si la señal implica cambios en la expresión génica, será más lenta ya que necesita de los siguientes pasos: transcripción,
maduración del ARN, exportación del ARN fuera del núcleo, traducción, paso por el sistema endomembranoso, llegada de la
proteína al lugar de acción. Cada una de estas etapas requiere de ciertos tiempos.
c) Porque la respuesta a una señal ocurre en un contexto determinado. Una misma molécula puede generar efectos diferentes
dependiendo del tejido (tipo de células blanco) y de la presencia de otras señales.
d) 1) receptores acoplados a canales iónicos,

2) receptores acoplados a proteínas G
3) receptores acoplados a enzimas
2.-
Dentro de las tres clases mayores de F Las fosfatasas desforforilan proteínas, no son receptores.
receptores de superficie celular están
las fosfatasas
La retroalimentación positiva genera F La retroalimentación positiva mantiene una señal, en cambio la retroalimentación negativa
oscilaciones en le expresión de genes produce oscilaciones en la expresión de genes.
Una manera de manejar la intensidad V Si receptores son secuestrados hacia el interior de la célula en un endosoma se disminuye la
de una señal es secuestrando el capacidad de responder a una señal
receptor
Una señal paracrina es una señal a F La señal paracrina es una señal local
larga distancia
Una hormona hidrofóbica necesita de V Una hormona hidrofóbica puede cruzar la membrana plasmática por lo que no necesita de
un receptor intracelular un receptor de superficie
235
3.-
Horizontal
3. autocrina
4. trimérica
6. endocrina
7. fosfatasa
Vertical
1. positiva
2. diacilglicerol
5. quinasa
236
SEÑALES
1.-
1.Ras 4. BMP
2 Prostaglandinas 6. Fosfolipasa C
3.Calmodulina 1. Activa a una serie de proteínas quinasas cascada, como por ejemplo
MAP-quinasa.
4. Morfógeno 5. Inhibición lateral
5. Notch 2. Hormonas hidrosolubles
6.separa PIP2 en dos moléculas: diacilglicerol que queda en la 9. AMPc
membrana y IP3 soluble
7.Hormonas tiroideas 8. La unión del ligando induce a la formación de un dímero, facilitando
la fosforilación de las tirosinas en los dominios quinasa
8. RTK 3. Presenta cuatro sitios de unión al ion Ca, por lo que puede capturar
Ca2+ con una alta afinidad
9.Adenilato ciclasa 7. Hormonas liposoluble
10. PKC necesita de esta molécula y de calcio para activarse 11. GPCR
11. Un ejemplo de estos receptores es el receptor β 2-adrenérgico que 10. Diacilglicerol
responde al neurotransmisor adrenalina
2.- 3.-
tirosina 2 5 1
diacilglicerol
calmodulina
pirofosfatasa
esteroides
arrestina
fosfolipasa
glucagón
treonina
morfógenos
quinasas 3 4
237
238
UNIDAD IV
GENÉTICA MOLECULAR
239
1
MECANISMOS GENÉTICOS BÁSICOS I
__________________________________________________
1.Mecanismos genéticos básicos I............................................................................................................... 245

El ADN (Capítulo 4 Alberts, et al. 2010).................................................................................................... 245
En eucariontes el ADN está contenido en el Núcleo (Capítulo 4, Alberts et al., 2010)....................... 247
Empaquetamiento del ADN (Capítulo 4, Alberts et al., 2010)................................................................ 250
Cuestionario 1: Mecanismos genéticos básicos I...................................................................................... 252
2
MECANISMOS GENÉTICOS BÁSICOS II
(REPLICACIÓN & REPARACIÓN)
__________________________________________________
2.Mecanismos genéticos básicos II (replicación y reparación)............................................................... 255

Modelo de replicación del ADN (Capítulo 5, Alberts et al., 2010)......................................................... 255
Replicación del ADN: inicio, elongación y término (Capítulo 5, Alberts, et al. 2008)........................ 256
Reparación (Capítulo 5, Alberts, et al. 2008)............................................................................................. 260
Cuestionario 2: Mecanismos genéticos básicos II .................................................................................... 262
240
3
DEL ADN A LA PROTEÍNA
¿CÓMO LEEN LAS CÉLULAS EL GENOMA?
__________________________________________________
3. Del adn a la proteína ¿cómo leen las células el genoma? Transcripción................................................... 267
De ADN a ARN (Capítulo 6, Alberts, et al. 2008).................................................................................... 267
La transcripción produce un ARN complementario a una hebra de ADN
(Capítulo 6, Alberts, et al. 2008)................................................................................................................. 268
Transcripción en procariontes y eucariontes (Capítulo 6, Alberts, et al. 2008).................................... 270
Modificaciones del ARN mensajero en células eucariontes. .................................................................. 272
De ARN a ADN (Capítulo 6 y 24, Alberts, et al. 2008)............................................................................ 275
Cuestionario 3: del DNA a la proteína: Cómo leen las células el genoma............................................. 276
4
TRADUCCIÓN Y CONTROL DE LA EXPRESIÓN GÉNICA
__________________________________________________
4.
4. Traducción y control de la expresión génica ........................................................................................ 281 Sí
Síntesis de proteínas y código genético (Capítulo 6, Alberts, et al. 2008).............................................. 281 R
Regulación de la expresión génica (Capítulo 7, Alberts, et al. 2008). .................................................... 284 C
Cuestionario 4: Traducción y control de la expresión génica.................................................................. 289
241
R
RESPUESTA CUESTIONARIOS
__________________________________________________
Respuestas cuestionario 1: Mecanismos genéticos básicos I................................................................... 293

Respuestas cuestionario 2: Mecanismos genéticos básicos II.................................................................. 294
Respuestas cuestionario 3: Del adn a la proteína: cómo leen las células el genoma............................. 296
Respuestas cuestionario 4: Traducción y control de la expresión génica............................................... 297
242
243
244
1
RESUMEN
La vida depende de la habilidad de las células de almacenar, recuperar, transcribir y traducir la información genética
(instrucciones) que poseen para hacer y mantener un organismo vivo. Esta información se pasa de una célula a sus
descendientes mediante división celular y de generación en generación a través de células reproductivas. Estas instrucciones
se almacenan en cada célula dentro del material genético en los genes, elementos contenedores de información para la
característica de una especie como un todo y de los individuos en ella. ¿Cómo la información necesaria para el desarrollo
de un organismo y que dirige la vida de cada una de sus células cabe en un espacio tan pequeño como el núcleo?
¿Cómo la información se hereda de manera tan precisa? ¿qué tipo de instrucciones contiene el material genético? Las
propiedades y las funciones de una célula se determinan en gran manera con las proteínas que esa célula es capaz de
producir y en el momento que se producen. El conocer como está constituido el material genético de cada célula nos
entrega pistas esenciales de cómo funciona un organismo.
Palabras claves: genes, nucleína, ácido nucleico, cadena antiparalela, doble hélice, enlaces fosfodiéster, núcleo, nucléolo,
cromosomas, expresión génica, genoma, cromatina, regiones intergénicas, cariotipo, bandas G, exones, intrones, telómeros,
centrómero, cinetocoro, origen de replicación, histonas, nucleosoma, heterocromatina, eucromatina, epigenética.
El ADN (Capítulo 4 Alberts, et al. 2010)

Una serie de observaciones y experimentos permitieron que se descubriera que en el ADN se encuentra la
información genética de las células. Primero, los experimentos de Gregor Mendel nos mostraron cómo se heredan
ciertas características de una generación a otra (lo que más tarde conoceríamos como genes). Mendel dedujo que
estas características venían en pares (alelos) y se heredaban de modo de que cada padre aportaba un alelo al futuro
individuo. Friedrich Miescher aisló una sustancia que contenía fósforo a partir de células de pus (leucocitos) de vendajes
quirúrgicos, que denominó nucleína, y a pesar de que purifica parcialmente el ácido nucleico y estudia sus propiedades,
la estructura no se conoce hasta finales de la década del 1940. Los estudios de Frederick Griffits demostraron que el
material genético puede ser transferido de una bacteria muerta a una viva, lo que se denominó transformación y Avery,
MacLeod y McCarty demostraron que en el ADN se almacena la información genética (Fig. 1).
Figura 1. Experimentos que mostraron que el

ADN es el material que contiene la información
genética.
245
¿Qué tipo de instrucciones contiene la información genética? Mucho de los genes que contienen las células, codifican
para proteínas, que son el ladrillo fundamental de funcionamiento; enzimas catalizan reacciones, proteínas regulan la
expresión de los genes, también permiten a las células comunicarse entre sí y moverse. ¿De dónde nacen todas estas
instrucciones? Los experimentos de Alfred Hershey y Martha Chase ayudaron a confirmar que en el ADN se almacena
la información genética. Erwin Chargaff descubrió que la composición de bases de ADN varía entre especies, pero que
el ADN de diferentes tejidos, de una misma especie tienen la misma composición de bases. El ADN de una especie dada
no varía con la edad, estado nutricional ni variaciones ambientales. En todos los ADN (independiente de la especie) se
cumple que: A = T y G = C => A + G = T + C (Purinas = Pirimidinas). ¿Cómo esta información podía ser almacenada
y transmitida a la siguiente generación? ¿Cómo podía codificar para proteínas, cómo se lee la información y cuál es esta
información? Estas preguntas empezaron a ser contestadas a partir del descubrimiento de la estructura molecular del
ADN por parte del modelo propuesto por Francis Crick, James Watson y Rosalind Franklin. El Nobel de medicina
recayó en Maurice Wilkins, Francis Crick y James Watson por el modelo de la estructura molecular del ADN y su
importancia para la transferencia de información en la materia viva. Basándose en el análisis de la molécula de ADN
por rayos X, se dedujo que el ADN tenía dos cadenas poliméricas, formando una doble hélice (Fig. 2A). Una molécula
de ADN consiste en dos cadenas complementarias de nucleótidos, en las que los nucleótidos están unidos unos a otros
covalentemente a través de azúcares y fosfatos. Las bases quedan una frente a la otra al interior de la doble hélice, por lo
que las pirimidinas forman puentes de hidrógenos con purinas (A-T y G-C). Las bases solo pueden ajustarse sí y solo
sí, las cadenas son antiparalelas (Fig. 2B).
Figura 2. Estructura del ADN. (A). El ADN y sus unidades de construcción. Se observa la doble hélice y que las cadenas son antiparalelas
(mientras una va de 3´ a 5´ la otra va de 5á 3´) (B). Bases complementarias en el ADN de doble hebra. Note que entre adenina y timina se forman
dos enlaces de hidrógeno y entre guanina y citosina tres de estos enlaces.
Los nucleótidos están unidos covalentemente por enlaces fosfodiéster que unen el extremo 3ÓH de una azúcar con
el grupo hidroxilo 5´ del azúcar siguiente. En la doble hélice se aprecia un surco mayor y otro menor (Fig. 3).
246
Figura 3. La doble hebra de ADN.
Referencia figuras 4-5 Biología molecular de la
Al ser las cadenas antiparalelas se genera una polaridad, mientras una cadena va de 3á 5´la otra va de 5á 3´. La
estructura 3D del ADN - la doble hebra de ADN- se debe a sus características químicas y estructurales de sus dos
cadenas de polinucleótidos. El apareamiento complementario de las bases es el empaquetamiento energéticamente más
favorable.
La estructura del ADN provee de un mecanismo para la herencia, los genes acarrean la información biológica y cada
base puede ser considerada como una letra en un código alfabético de cuatro letras que entrega mensajes en la estructura
química del ADN. Este código deberá pasarse o copiarse de una célula a la siguiente a través de un mecanismo preciso.
Debido a que cada hebra de ADN contiene una secuencia de nucleótidos, que es exactamente complementaria a la
secuencia de nucleótidos de la otra hebra que compone la doble hélice, cada hebra puede actuar como templado o molde
para la síntesis de una hebra complementaria (Fig. 4).
Figura 4. El ADN como templado de su propia
replicación.
Referencia figuras 4-5 Biología molecular de la
El Genoma corresponde al conjunto completo de información contenida en el ADN de un organismo. En el

genoma está la información para todas las moléculas de proteína y ARNs que el organismo sintetizará durante su vida.
La transformación de la información codificada en una secuencia de nucleótidos particular a un producto funcional
necesario para el desarrollo de un organismo se denomina expresión génica. Por ejemplo, si un gen codifica para una
proteína, primero esta información debe ser transcrita a ARN para luego ser traducida a una secuencia de aminoácidos.
De modo que es la secuencia de nucleótidos la que define a la secuencia de aminoácidos de una proteína. La expresión
de los genes es altamente regulada y esta regulación permite que tengamos distintos tipos de células y tejidos.
247
En eucariontes el ADN está contenido en el Núcleo (Capítulo 4, Alberts et al., 2010)
Una típica célula diploide humana contiene 2 metros de ADN de doble hebra (aproximadamente). El núcleo de una
célula eucarionte es el compartimento en donde se encuentra contenido el material genético en una célula eucarionte
(los procariontes carecen de membrana nuclear). El núcleo tiene un nucleoplasma (carioplasma), el cual corresponde a
la fase acuosa con proteínas y cofactores, y una doble membrana que forma la envoltura nuclear y que es atravesada por
los poros nucleares y es continua con el retículo endoplásmico (Fig. 5).
Dentro del núcleo podemos encontrar el nucléolo que corresponde al sitio donde ocurre la síntesis de ribosomas. El
nucléolo contiene ADN, RNA ribosómico, proteínas y ribosomas que están siendo sintetizados.
Figura 5. Núcleo de una célula eucarionte.

¿Cómo un ADN de gran longitud puede estar incluido en un núcleo de dimensiones mínimas? Una célula humana
promedio tiene un núcleo de entre 5 a 8 μm de diámetro. En células eucariontes el ADN se empaqueta a través de
proteínas llamadas histonas que se unen al ADN y lo ayudan a enrollarse y súper enrollarse formando bucles – en
altos niveles de organización. Pero, aun así, el ADN es capaz de ser leído, replicado y reparado. También existen
proteínas no histónicas que se unen al ADN. Las bacterias carecen de histonas (con excepción de algunas especies en
el dominio de las arqueas), por lo que el ADN se empaqueta a través de un superenrrollamiento, enzimas como HU,
la topoisomerasa I y la ADN girasa ayudan en este proceso. De modo que el ADN puede ordenarse formando cromo-
somas. En bacterias como la E. coli hay 4,7x106 pares de bases (pb) en un cromosoma circular, mientras que en seres
humano hay 3x109 pb en 46 cromosomas (22 pares homólogos y un par sexual (X, X o X, Y). Se conoce como croma-
tina, al ADN asociado a proteínas (necesarias para el enrollamiento del ADN, transcripción, replicación y reparación).
Un cromosoma puede contener miles de genes y regiones intergénicas (Fig. 6).
Podemos, entonces, definir a los genes como un fragmento de ADN que codifica la información para la síntesis de
proteínas, o diferentes ARN que no necesariamente serán traducidos a proteínas. Este gen ocupa un lugar (locus) en
un cromosoma específico y contiene elementos necesarios para regular su transcripción. Solo un pequeño porcentaje
del gen se transcribe a ARN, estas secuencias se denominan exones. Las secuencias que no codifican se denominan
intrones (Fig. 6). Mediante la comparación de genomas podemos encontrar secuencias de ADN conservadas, aquellas
sin función determinada pueden mutar al azar con mayor frecuencia que las zonas codificantes.
248
Figura 6. Organización de genes en un cromosoma
humano. Se observa un cromosoma humano
y distintas magnificaciones de una región del
cromosoma que permite observar genes y regiones
intergénicas, y finalmente la estructura de un gen
compuesta de secciones de ADN reguladoras,
exones e intrones.
El set de cromosomas puede ser analizado mediante un cariotipo o cariograma. En un cariograma podemos ordenar
los cromosomas en grupos de acuerdo a su morfología y tamaño, y en el caso de individuos diploides como nosotros,
identificar cromosomas homólogos (uno heredado del padre y otro de la madre). También se pueden utilizar tinciones
específicas (como bandas G) o a través de hibridación con sondas fluorescentes marcadas (FISH) para identificar
aberraciones (Fig. 7).
Figura 7. Patrón de bandas en cromosomas humanos.
Cromosomas del 1 al 22 están numerados y también
se muestran el par sexual (cromosoma X e Y). Este es
el patrón de bandeo que se obtiene al utilizar Giemsa
(bandas G).
Omega 2010).
249
Otra característica importante, es la existencia de tres elementos necesarios para producir un cromosoma estable en
eucariontes. Estos elementos son: los telómeros, origen de replicación y centrómero. Los telómeros son los extremos
de los cromosomas, los que están constituidos por secuencias repetitivas de ADN que permiten la replicación de los
extremos del cromosoma. El origen de replicación u ORI, es esencial para la replicación del ADN. El centrómero
permite que durante la división celular cada copia de cromosoma replicado sea arrastrado a cada una de las células hijas
(esta tarea la lleva a cabo junto a un complejo de proteínas llamado cinetocoro) (Fig. 8).
Figura 8. Tres secuencias de ADN

esenciales para producir un cromosoma
eucariótico que pueda replicarse y segregar
correctamente en mitosis. Cada cromosoma
eucariótico tiene múltiples orígenes de
replicación, dos telómeros y un centrómero.
Referencia figura 4-21, Biología molecular
250
Empaquetamiento del ADN (Capítulo 4, Alberts et al., 2010)
En el núcleo podemos distinguir distintas regiones, unas con regiones de cromatina altamente condensada, la cual
se denomina heterocromatina, y otras con ADN menos condensado o eucromatina. La heterocromatina constituye
aproximadamente el 10% de un cromosoma interfásico (en mamíferos se concentra en la región del centrómero y
telómero) y esta zona es transcripcionalmente inactiva. La zona de cromatina en estado relajado o eucromatina, en
cambio, es transcripcionalmente activa.
Las histonas están presentes en gran cantidad en la célula, su masa total casi equivale al ADN. Las histonas son
responsables del primer y más básico nivel de enrollamiento o empaquetamiento del ADN. Cada centro nucleosómico
o nucleosoma individual consiste en un complejo de 8 histonas – dos moléculas de cada una de las histonas: H2A, H2B,
H3 y H4 – y ADN de doble hebra (147 pb). El octámero de histonas forma un centro nucleosómico en el cual se enrolla
el ADN y cada nucleosoma se repite cada 200 pares de base (Fig. 9A). El enrollamiento y superenrollamiento llevan
al ADN a altos niveles de organización (Fig. 9B). Numerosos enlaces puentes de hidrógeno se forman entre el ADN
y cada nucleosoma. También existen interacciones hidrofóbicas y enlaces iónicos que mantienen a la proteína unida al
ADN en el nucleosoma. Las histonas tienen una cola aminoacídica en el N-terminal que se extiende hacia fuera del
centro histona-ADN. Estas colas están sujetas a modificaciones covalentes las que controlarán aspectos críticos de la
estructura y función cromática.
Figura 9. Empaquetamiento del ADN. (A) Se

observa cómo se aisló el núcleo histónico y se
obtuvo el ADN unido a él. En este procedimiento
se descubrió un ADN espaciador que da cuenta de
la distancia entre cada nucleosoma. La digestión
con nucleasa permite obtener un nucleosoma con
el ADN adherido a él. La disociación del ADN
del nucleosoma se lleva a cabo utilizando grandes
concentraciones de sal. (B) Estructura en un modelo
zigzag de enrollamiento de la fibra del ADN a 30nm
de cromatina. (C) Complejo de remodelación que
utiliza ATP para producir un deslizamiento del
nucelosoma y permitir, por ejemplo, la trasncripción.
Referencias figura 4-23, 4-31, 4-29, Biología
molecular de la célula, quinta edición. (©Garland
En eucariontes, las histonas están dentro de las proteínas más conservadas en la evolución, pero existen variantes
menos conservadas. Los nucleosomas tienen una estructura dinámica capaz de sobrellevar cambios conformacionales y
de composición, siendo esta propiedad de gran importancia en la regulación de la expresión genética y, por tanto, están
frecuentemente sujetos a cambios catalizados por complejos remodeladores de cromatina-dependientes de ATP (Fig.
9C).
251
CUESTIONARIO 1
¿Qué es un nulceosoma?
¿Qué es la expresión génica?
¿Cuáles son las características estructurales de la doble hebra de ADN?
¿Qué son la eucromatina y la heterocromatina?
¿Para qué es útil un cariotipo?
2.- Rotule la siguiente figura, mostrando las secuencias de ADN esenciales para que un cromosoma se replique y herede
de manera estable.
252
3.- Rotule las siguientes partes del núcleo:
4.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentra las 9 palabras relacionadas con la materia vista en esta guía.
253
254
2
(REPLICACIÓN Y REPARACIÓN)
RESUMEN
La capacidad que tienen las células de mantener un orden funcional en un universo caótico depende de la capacidad
de copiar de manera lo más precisa posible la información genética. Este proceso de “copiado” se denomina replicación
de ADN y debe ocurrir antes de que una célula se divida en dos células hijas genéticamente iguales. El mantener la
información lo más precisa y ordenada depende de una constante vigilancia del material genético y de su reparación, ya
sea por errores en la replicación o por el constante daño que recibe a causa de agentes químicos, radiación del ambiente,
accidentes térmicos o de moléculas reactivas provenientes desde dentro de la célula. Describiremos cómo se llevan a cabo
los procesos de replicación y reparación mencionando las proteínas más importantes que participan en estos procesos.
Palabras claves: replicación de ADN, semiconservativo, ADN Polimerasa, origen de replicación, helicasas, primasa,
partidor, elongación, exonucleasa, fragmentos de Okazaki, ligasa, proteínas de unión a ADN de hebra simple,
topoisomeresa, pinzas deslizantes, Ter, Tus, telómeros, reparación de ADN, errores en la replicación, mutación, ROS,
BER, NER, recombinación no homóloga y homóloga, BRCA1, BRCA2.
Modelo de replicación del ADN (Capítulo 5, Alberts et al., 2010).

Mientras la sobrevivencia de la célula en el corto tiempo depende de prevenir cambios en el ADN, la sobrevivencia
de la especie a largo plazo depende de un ADN susceptible a cambios a través de las generaciones. La replicación del
ADN implica la generación de una copia exacta del genoma de una célula. Existen tres modelos que explican cómo la
replicación puede ser efectuada: el modelo conservativo, el semiconservativo y dispersivo.
En el modelo conservativo las hebras paternas transfieren información a un intermediario, el cual luego es copiado.
La hélice paterna se conserva y la hija es completamente nueva. En el modelo dispersivo la hélice paterna se rompe en
fragmentos, se dispersa, copia y se ensambla en dos nuevas hélices. En el modelo semiconservativo las moléculas de
ADN hijas contienen una hebra paterna y una nueva (Fig. 1). Los experimentos de Meselson and Stahl demostraron
que el modelo semiconservativo de replicación era como las células pasaban la información de una célula a otra. Además,
debido a la complementariedad de bases, cada cadena de ADN puede especificar la secuencia de nucleótidos de su
cadena complementaria (Fig. 2).
Figura 1. Modelo semiconservativo de replicación. En este modelo las hebras de ADN hijas
contienen una hebra original y una recién sintetizada.
Referencia figura 5-5 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science
255
Figura 2. La química de la síntesis de ADN.
Referencia figura 5-3 Biología molecular de la célula, quinta edición.
Replicación del ADN: inicio, elongación y término (Capítulo 5, Alberts, et al. 2008).
La ADN polimerasa cataliza la adición de un desoxirribonucleótido al extremo 3’-OH de una cadena de
polinucleótidos, por lo tanto, la nueva cadena de ADN se sintetiza en el sentido 5’ 3’ (Fig. 2). La cadena naciente
tendrá una secuencia de nucleótidos complementaria a la de la cadena molde. Los nucleótidos entran en la reacción
como desoxirribonucleósidos trifosfato. La rotura del enlace fosfoanhídrido del nucleósido trifosfato entrante produce
la liberación de fosfatos de alta energía, lo que permite la reacción de polimerización (Fig. 3). La ADN polimerasa es una
enzima que adiciona desoxirribonucleótidos al extremo 3’-OH de la nueva hebra que está apareada a la hebra molde o
templado (Fig. 3). La replicación comienza en un punto de origen y normalmente transcurre en forma bidireccional. En
procariontes existe solo un origen de replicación, pero en cromosomas eucariontes existen múltiples sitios de replicación.
Figura 3. La síntesis de ADN es catalizada por la ADN polimerasa.

256
El inicio de la replicación es llevado a cabo en un sitio específico y por varias proteínas que participan en el proceso.
El inicio de replicación (llamado ORI en procariontes) se caracteriza por secuencias de nucleótidos características ricas
en AT. En eucariontes los orígenes de replicación tienden a estar agrupados en conjuntos o unidades de replicación. Al
igual que en bacterias, las horquillas de replicación se forman en pares y crean una burbuja de replicación a medida que
se mueven en dirección contraria desde un punto de origen en común. Grandes complejos de múltiples subunidades
proteicas llamadas ORC (origen recognition complex) se unen a los orígenes de replicación. La interacción ORC-origen
persiste a lo largo de todo el ciclo celular. Durante G1, ADN helicasas y 2 proteínas cargadoras de helicasas Cdc6 y Cdt1
se ensamblan en el complejo ORC-ADN para formar el complejo pre-replicativo en cada origen (Fig. 4).
Figura 4. Mecanismo del inicio de la replicación en eucariontes.

Durante G1, el origen de replicación es reconocido por el complejo de
reconocimiento del origen (ORC), para luego reclutar dos proteínas
(Cdc6 y Cdt1) que ayudan a reclutar a la helicasa formando el complejo
prereplicativo (pre-RC). La activación de proteínas quinasas dependientes
de ciclinas (Cdk) promueve la degradación de las proteínas cargadoras de
helicasa y activa a la helicasa dando inicio a la replicación en la fase S.
No se podrá formar un nuevo complejo prereplicativo sino hasta que la
célula vuelva a G1.
Referencia figura 5-36 Biología molecular de la célula, quinta edición.
Proteínas quinasas que gatillan la replicación también se encargan de reprimirla evitando el ensamble de nuevos
complejos proteicos en el origen de replicación hasta que una nueva fase M resetea el ciclo celular. Las helicasas (AdnB
protein) son proteínas especiales que ayudan a mantener la doble hebra de ADN abierta en la horquilla de replicación
con el uso de ATP.
En procariontes el proceso de replicación es similar a eucariontes. En el origen de replicación una proteína llamada
DnaA reconoce el origen de replicación y abre el dúplex en un sitio específico. DnaB es la helicasa se encarga de
desenrollar el ADN y mantener abierta la horquilla de replicación, y otra proteína llamada DnaC es requerida por DnaB
para posicionarse en la horquilla de replicación.
Una vez que la doble hebra se ha abierto ingresan las primasas. Las primasas son necesarias ya que para replicar la
cadena de ADN se necesita un partidor o cebador para generar un polinucleótido corto, dejando un extremo 3’-OH
disponible para la elongación por la ADN polimerasa (Fig. 5A). La primasa utiliza ribonucleótidos trifosfatos y existe
flexibilidad para error de apareamiento.
257
Figura 5. Replicación del ADN. (A) Horquilla de
replicación con las proteínas más importantes. (B) Hebra
líder y retrasada con los fragmentos de Okazaki.
Referencia figuras 5-19 y 5-7 Biología molecular de
la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y
El proceso de elongación es realizado por la ADN polimerasa. En E. coli la primera ADN polimerasa descubierta
fue la ADN polimerasa I. Esta polimerasa, tiene actividad polimerasa 5´- 3´ y actividad exonucleasa 3’- 5’, que permite
eliminar nucleótidos erróneamente apareados, por lo que se conoce como actividad correctora de errores. También tiene
actividad exonucleasa 5´- 3´, cuya función es eliminar el ARN iniciador en la síntesis de la cadena discontinua y también
interviene en la reparación de ADN. La ADN polimerasa II está más involucrada cuando ocurre reparación de ADN, al
igual que la ADN polimerasa I posee actividad polimerasa 5´- 3´, pero solo posee actividad exonucleasa 3’- 5’. La ADN
polimerasa III, fue la más difícil de aislar y es la principal responsable de la replicación del ADN. Al igual que la ADN
polimerasa I y II, polimeriza en dirección 5´- 3´ y tiene capacidad correctora o exonucleasa 3’- 5’ (Tabla 1).
En eucariontes la ADN polimerasa α sintetiza fragmentos de ADN discontinuos y es la encargada de cebar ambas
hebras. Esta polimerasa forma un complejo con la primasa y diversos estudios sugieren que funciona en conjunto con
la primasa para crear los partidores para cada fragmento de Okazaki. A partir del cebador, la ADN polimerasa δ sin-
tetiza la hebra continua y tiene actividad correctora. La ADN polimerasa ε, también tienen una actividad de síntesis
durante la replicación y participa en reparación y en el proceso de recombinación de la célula. La polimerasa β, a difer-
encia de las anteriores, participa mayormente en la reparación de errores. De hecho, se encuentra más activa en células
que no están en división celular. En eucariontes también se encuentra la ADN polimerasa γ, la cual está encargada de
la síntesis de ADN y reparación de errores en las mitocondrias (Tabla 1).
258
Tabla 1: ADN polimerasas entre procariontes y eucariontes
Debido a que la elongación ocurre en sentido 5’ – 3´ una de las hebras se copiará de manera continua, a esta hebra se
le denomina hebra líder, pero la otra deberá incluir una acomodación especial para poder ser copiada en sentido 5’ – 3´.
Este ajuste imposibilita la copia de manera continua, generando fragmentos de 1.000 a 2.000 nucleótidos de largo
en bacterias y de 100 a 200 nucleótidos en eucariontes, llamados fragmentos de Okazaki (Fig. 5B). En este sentido la
horquilla de replicación es asimétrica, con una hebra líder y otra retrasada.
La complementariedad de bases por sí sola no asegura la inexistencia de errores al sintetizar el ADN, por esto es
esencial que la polimerasa tenga una actividad exonucleasa o de corrección de errores, donde inmediatamente después
que la ADN polimerasa coloca equivocadamente un nucleótido, retrocede (3’ -5´), saca el nucleótido erróneo y continua
con la polimerización. Esta corrección de errores (3’ -5’) no sería posible si la dirección de síntesis del ADN fuese en
dirección 3’ -5´ en vez de 5’ -3´.
Una vez que se ha terminado el proceso de elongación, los partidores de ARN son removidos por la actividad ex-
onucleasa de la ADN polimerasa I (en procariontes) en combinación con una enzima llamada ARnasaH que degrada
ribonucleótidos. La ADN polimerasa I sintetiza ADN para llenar los espacios que quedan, agregando los nucleótidos
por complementariedad. En eucariontes, otra exonucleasa es la encargada de eliminar los partidores y es la ADN poli-
merasa δ la que rellena los espacios entre los fragmentos de Okazaki. Luego, tanto en procariontes como eucariontes,
los fragmentos son unidos gracias a la actividad de una enzima llamada ligasa.
Otras proteínas importantes son las proteínas de unión a ADN de hebra simple (SSBP) que mantienen extendida la
hebra de ADN evitando que las hebras vuelvan a unirse por complementariedad formando alguna estructura secundaria
y protegiendo a la hebra simple de la degradación. Pero al mismo tiempo estas proteínas al unirse no cubren a los
nucleótidos, de modo que permiten la síntesis.
Las topoisomeresa I y II, son las que son esenciales para evitar el superenrollamiento de la doble hebra a medida que se
forma la horquilla de replicación. Además, debido a la tendencia que tiene la ADN polimerasa a disociarse rápidamente
del ADN, se necesita de proteínas accesorias conocidas como pinzas o abrazadera deslizantes. Estas proteínas ayudan a
la polimerasa a quedarse unida al ADN a medida que se mueven sintetizando (Fig. 5A).
Las funciones fundamentales de la replicación son conservadas entre procariontes y eucariontes. Las enzimas que
participan, la geometría de la horquilla de replicación, la existencia de una hebra retrasada y líder han variado muy
poco durante la evolución. Como consecuencia, mucho de lo que sabemos de replicación en eucariontes viene de lo
estudiado en bacterias. Sin embargo, una gran diferencia entre procariontes y eucariontes es que la célula eucariótica
tiene nucleosomas en los cuales el ADN se enrolla para empaquetar al ADN. Proteínas remodeladoras de cromatinas
ayudan a desplazar a los nucleosomas para que el ADN pueda ser replicado en forma eficiente. A medida que avanza la
replicación algunas de las proteínas histónicas se mantienen unidas al ADN y son distribuidas a la hebra hija detrás de la
horquilla de replicación (Fig. 6A). Como el ADN se ha duplicado, se requerirá de nuevas histonas para poder empaquetar
al ADN correctamente. Alguna de las proteínas histónicas que conforman estos nucleosomas tienen modificaciones
epigenéticas, pero el mecanismo de duplicación del cromosoma eucariótico, a través de proteínas especializadas, asegura
que los patrones de modificación de las histonas también se hereden a las células hijas (Fig. 6B). 259
Figura 6. Distribución de histonas y herencia de patrones epigenéticos durante la replicación. (A) Algunas histonas siguen unidas al ADN mientras
otras son nuevamente sintetizadas para formar nuevamente el nucleosoma detrás de la horquilla de replicación. (B) Algunas modificaciones
epigenéticas son heredadas a la célula hija, a partir de las cuales, proteínas especializadas vuelven a completar el patrón epigenético original.
En procariontes, el cromosoma es único y circular, y el término de la replicación está determinado por secuencias
específicas llamadas Ter, que funcionan como sitios de unión para proteínas llamadas Tus. En eucariontes, sin embargo,
el proceso es más complejo. Como la ADN polimerasa necesita de partidores para iniciar la síntesis, existe un problema
para sintetizar los extremos 3’ de los cromosomas. Si el problema no es solucionado, los cromosomas se acortarían
excesivamente con cada replicación. La solución es agregar secuencias de ADN a los extremos de los cromosomas o
telómeros. Esta acción es catalizada por una enzima telomerasa. La telomerasa es una ribonucleoproteína (contiene
proteína y ARN), donde el ARN funciona como templado complementario a la secuencia de ADN presente el telómero.
Después que se extiende la cadena parental de ADN (usando ARN como templado), se procede a la replicación de la
cadena retrasada mediante una polimerasa convencional, usando esta extensión como templado para sintetizar la cadena
complementaria. Finalmente, el extremo más largo se cerrará formando un T al final del cromosoma. Después de la
etapa embrionaria, los humanos carecemos de esta enzima, por lo que el acortamiento de los telómeros determina el
número de ciclos de replicación que una célula pueda cursar. Debido a esto, se ha relacionado el acortamiento de los
telómeros al envejecimiento celular.
Reparación (Capítulo 5, Alberts, et al. 2008)

El ADN que es replicado, siempre se está evaluando por posibles errores de copia. Si esto sucede, los errores deben ser
reparados. Además, el ADN está sujeto a alteraciones producto del ambiente, exposición a rayos ultra violeta o agentes
provenientes en el interior de la célula. Para evitar estos errores o accidentes, la célula tiene diferentes mecanismos de
reparación. Cuando ocurre un cambio heredable en el material genético de una célula recibe el nombre de mutación.
Menos de 1 en 1.000 mutaciones que se producen por cambios accidentales de bases resultan en un cambio permanente
en el ADN. En general, se pueden producir cambios en el ADN como consecuencia de daño oxidativo, metilaciones,
hidrólisis o rayos UV que pueden producir cambios o eliminación de bases (Fig. 7A).
Figura 7. Daños producidos en el ADN.
(A) Depurinación y desaminación
producidos por hidrólisis. (B) Dímeros
de timidina producidos por los rayos
UV, los que al no ser reparados causan
un impedimento físico a la replicación y
transcripción.
Referencia figura 5-45 Biología molecular
Science 2008 y Ediciones Omega 2010)
y figura 7.18 The Cell: a Molecular
Approach, octava edición. (Editorial
Sinauer Associates, Universidad de
260 Oxford, 2019).
El mal apareamiento de bases como producto de errores en la replicación en la doble hebra, genera distorsiones
(desapareamientos, inserciones de bases y deleciones de bases) que son detectadas por proteínas específicas del complejo
MMR. Por ejemplo, en bacterias, esta tarea la hacen unas proteínas llamadas MutS y MutL de este complejo. En
eucariontes hay un complejo MMR homólogo o similar con 9 proteínas de las cuales las principales son: MLH1, MSH2,
MSH3, MSH6 y PMS2. Fallas en estas proteínas desencadenan el desarrollo de cánceres colorrectales a temprana edad
debido a la acumulación de mutaciones en células del tracto intestinal.
Los rayos X, agentes alquilantes, hidrólisis y radicales de oxígeno (ROS) activan un mecanismo de reparación
llamado reparación por escisión de bases (BER). Este tipo de reparación se basa en una batería de enzimas llamadas
ADN glicosilasas que reconocen tipos específicos de bases alteradas y catalizan su remoción hidrolítica (Fig. 8A). Las
alteraciones voluminosas producidas por dímeros de timina, debido a radiación UV, pueden ser reparados por una
enzima llamada fotoliasa la cual necesita luz visible para producir la reparación (fotoreactivación) (Fig. 8B), la cual
es capaz de romper el enlace covalente producido entre las pirimidinas. Sin embargo, este sistema de reparación por
fotoreactivación no está presente en animales con placenta como el ser humano. Alternativamente, cualquier alteración
voluminosa que distorsione a la doble hebra puede ser reparado por un sistema llamado reparación por escisión de
nucleótidos (NER). Este sistema de reparación es llevado a cabo por un complejo proteico que hace una búsqueda de
regiones distorsionadas en la doble hebra, más que un cambio específico de una base (Fig. 8C).
Cuando hay rotura de la doble hebra se activa un sistema de reparación por recombinación. Este sistema de reparación
puede llevar a cabo una recombinación homóloga o no homóloga. En el caso de la recombinación no homologa se produce
pérdida de nucleótidos en los extremos a reparar. Luego hay unión de los extremos, lo cual significa que este sistema
no es un sistema preciso de reparación (Fig. 8D). En cambio, el sistema de reparación por recombinación homóloga es
muy preciso. Esto se debe a que una vez que es degradado el fragmento con el error, utiliza a la hebra complementaria
como molde para volver a copiar el pedazo faltante. La recombinación homóloga ocurre solo en heterodúplex de ADN
(doble hebra) que tienen una extensa región de homología o similitud la una con la otra e implica la invasión de una
hebra sobre otra. Las proteínas RecA Ecoli (o Rad51 en eucariontes) permiten a una hebra de ADN de hebra simple
aparearse (dirigiendo la invasión de una hebra sobre la otra) con una región homóloga de otra cadena ADN de doble
hélice y donde las proteínas BRCA1 y BRCA2 también cumplen un rol importante en la atracción de las proteínas al
sitio de reparación (Fig. 8D).
A B
Figura 8. Daños producidos en el ADN
desencadenan distintos sistemas de
reparación. (A) Reparación por escisión de
bases. (B) Reparación por eliminación de
nucleótidos. (C) Reparación por fotoliasa.
(D). Reparación por recombinación no
homóloga y por recombinación homóloga.
Referencia figuras 5-48 y 5-51 Biología
2010) y figura 7.18 The Cell: a Molecular
Apporach, octava edición. (Editorial Sinauer
Associates, Universidad de Oxford, 2019).
C D
261
CUESTIONARIO 2
1. Resuelva esta sopa de letras. Encuentre las 9 palabras relacionadas con la materia de esta guía.
¿Por qué se dice que la replicación es semiconservativa?
¿Por qué la replicación ocurre de 5’ a 3’ y no de 3’ a 5’?
¿Cuáles son las diferencias entre la reparación por recombinación homóloga y la no homóloga?
¿Por qué una hebra es adelantada y otra retrasada durante la replicación?
262
3.- Complete los siguientes espacios en blanco.
La replicación del ADN implica la generación de una copia exacta del __________. Este proceso requiere de mecanismos
de _____________y ________________.
La __________ ______cataliza la adición de un desoxirribonucleótido al extremo ___________ de una cadena de

_____________. La_____________ entre el desoxirribonucleótido entrante y el que está en la cadena molde, guía la
formación de la nueva cadena de ADN.
La rotura del enlace _______________ del _________________ entrante entrega la energía necesaria para la reacción
de polimerización.
4.- Rotule la siguiente figura.
263
Horizontal
3. Agrega secuencias de ADN a los extremos de los cromosomas.

4. Reconocen tipos específicos de bases alteradas y catalizan su remoción hidrolítica.
6. Los experimentos de Meselson and Stahl demostraron que el modelo de replicación es …
8. Proteínas que participan en la recombinación homóloga.
9. El apareamiento de bases como producto de errores en la replicación produce …
11. Dejan un extremo 3’-OH disponible para la elongación por la ADN polimerasa.
Vertical
1. Nombre de fragmentos cortos de ADN en la hebra retrasada.

2. Esenciales para evitar el superenrollamiento de la doble hebra a medida que se forma la horquilla de replicación.
5. Alteraciones voluminosas producidas por radiación UV producen un dímero de …
7. Secuencias de nucleótidos características ricas en AT.
10. Reparación de lesiones que producen deformaciones en la doble hélice.
264
265
266
3
DEL ADN A LA PROTEÍNA
¿CÓMO LEEN LAS CÉLULAS EL
GENOMA?
TRANSCRIPCIÓN
RESUMEN
En esta sección se explica cómo las células interpretan y usan la información de sus genomas. La información
genética se encuentra escrita en un alfabeto de cuatro letras que es universal para todas las especies. Este alfabeto se
transcribe, pasando de ADN a ARN, el cual será finalmente decodificado para transformarse en secuencias lineales
de aminoácidos (traducción) que formarán proteínas esenciales para el funcionamiento del organismo. Cuando una
célula hace una proteína debe determinar qué sector del genoma debe leer y transcribir. Este proceso está altamente
regulado para producir una proteína específica en la cantidad necesaria, en el momento justo y en el tejido adecuado. Sin
embargo, no siempre ocurre una transcripción de ADN a ARN. De los retrovirus hemos aprendido que el proceso de
transcripción puede ocurrir de manera inversa, es decir, de ARN a ADN.
Palabras claves: transcripción, ribonucleótidos, ARN polimerasas, ARNm, monocistrónico, policistrónico, subunidad σ,
zona promotora, caja TATA, factores de transcripción, activadores (enhancers), proteínas modificadoras de la cromatina,
maduración de ARNm, splicing, cap, poli(A), splicing alternativo, transcriptasa reversa, integrasa, retrovirus, transposón,
retrotransposones retrovirales, retrotransposones no retrovirales.
De ADN a ARN (Capítulo 6, Alberts, et al. 2008)

El ADN en el genoma no dirige la síntesis de proteínas directamente, sino que lo hace a través del ARN. A pesar que
el proceso en sí es conservado entre las diferentes especies, existen algunas diferencias entre procariontes y eucariontes.
El ARN es transcrito desde un segmento de ADN (gen). Cuando el ARN producido lleva información para producir
una proteína se denomina ARN mensajero (ARNm).
Muchas copias idénticas de ARNm pueden ser hechas a partir del mismo gen y cada ARNm puede dirigir la síntesis
de muchas proteínas idénticas. La eficiencia de producción dependerá del momento, necesidad de la célula y de los genes
que las codifican (Fig. 1).
Figura 1. De ADN a ARN y de ARN a proteínas. El gen A transcribe múltiples
copias de ARNm para luego ser traducido a proteína A. El gen B también transcribe
ARNm pero en menor cantidad, la cual es traducida a proteína B. Ambos genes
transcriben con eficiencia y esto se ve reflejado en la cantidad de proteínas traducidas.
Referencia figura 6-3, Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland
267
Al igual que el ADN, el ARN está compuesto por una azúcar, una pentosa llamada ribosa (en el caso del ADN
se llama desoxiribosa), bases nitrogenadas (contiene las mismas bases con la excepción de uracilo en vez de timina) y
grupos fosfato. Además, mientras el ADN es de doble hebra, el ARN es de hebra simple por lo que puede adoptar
distintas conformaciones 3D (Fig. 2 A, B).
Figura 2. Estructura del ARN. (A)
Estructura de la ribosa, desoxirribosa,
uracilo y timina. (B) Conformaciones que
puede adoptar el ARN.
Referencia figura 6-4 y 6-6, Biología
Omega 2010).
La transcripción produce un ARN complementario a una hebra de ADN (Capítulo 6,

Alberts, et al. 2008)
La transcripción es el proceso por el cual la información contenida en el genoma, específicamente en los genes,
se utiliza para generar un producto final funcional el cual podría ser, según el tipo de ARN que se transcriba, una
proteína. Este proceso comienza con la apertura de una pequeña porción de la doble hélice del ADN. El ARN será
sintetizado por una ARN polimerasa la que formará una cadena de ARN dictada por la complementariedad de bases
utilizando el ADN como molde. Una de las dos hebras servirá de templado para la síntesis del transcrito. Cuando existe
complementariedad entre el nucleótido que entra con el que está en el molde, entonces se forma un enlace covalente
(enlace fosfodiester) entre el nuevo ribonucleótido y la cadena de ARN que crece (Fig. 3).
Figura 3. El ADN es transcrito por la ARN polimerasa.
La polimerasa abre la doble hebra para poder formar por
complementariedad una cadena de poliribonucléotidos a partir del
ADN usado de molde. El transcrito recién sintetizado sale por el
canal de salida. Al igual que la replicación, la transcripción siempre
ocurre de 5´-3´.
El ARN no permanece unido a la hebra molde de ADN. Por el contrario, la cadena de ARN es inmediatamente
desplazada detrás de la unión del ribonucleótido de modo que las moléculas de ARN son liberadas como moléculas
de hebra simple. Una característica esencial es que la cadena creciente de ARN siempre se sintetiza de 5’ a 3’. Como se
observa en la Figura 3, la ARN polimerasa tiene la capacidad de desarrollar al ADN enfrente del sitio de polimerización
y no necesita de una helicasa, como la ADN polimerasa, para abrir una nueva región de templado. El proceso de
transcripción es rápido (en células de mamíferos el promedio de transcripción es de 3.100 a 4.000 bases por minuto)
268 permitiendo que muchos ARN puedan ser transcritos desde el mismo gen en poco tiempo (Fig. 4).
Figura 4. Transcripción de dos genes observados
por microscopía electrónica. La micrografía muestra
que muchas ARN polimerasas simultáneamente
transcriben ambos genes.
Referencia figura 6-9, Biología molecular de la
La célula puede transcribir distintos tipos de ARN, no todos tienen como destino final convertirse en
proteínas (Tabla 1, referencia Tabla 6-1, Alberts, et al., 2008) y en eucariontes tampoco todos son transcri-
tos por el mismo tipo de ARN polimerasa (Tabla 2).
Tabla 1. Tipos principales de ARN que fabrican las células.
Tabla 2. ARN polimerasa en procariontes y eucariontes
Cada segmento de ADN transcrito o gen, también es llamado unidad de transcripción. El gen ocupa un locus
específico en un cromosoma. En procariontes como la E. coli, los genes son policistrónicos, es decir, en un ARNm
pueden ir codificados por más de un tipo distinto de mensajeros, lo que puede llevar a producir distintos tipos de
proteínas a partir de un solo ARNm. En eucariontes la transcripción es monocistrónica, es decir, a partir de un gen se
sintetiza un tipo de ARNm, lo que produce un tipo de proteína (Fig. 5). 269
Figura 5. Transcripción policistrónica en procariontes
y monocistrónica en eucariontes. Como se observa la
transcripción policistrónica permite transcribir desde
un mismo ARNm diferentes proteínas. En cambio, en
eucariontes la transcripción es monocistrónica, lo que
implica que a partir de un gen un ARNm es transcrito que
será traducido en una proteína.
Omega 2010).
Transcripción en procariontes y eucariontes (Capítulo 6, Alberts, et al. 2008)

La estructura general de un gen se observa en la Figura 6, consta de secuencias reguladoras, un promotor y en el
caso de eucariontes, de exones e intrones (Fig. 6A). Como se describió en el Capítulo 1, los exones son los que llevan el
mensaje para la formación de la proteína, y se ha observado que los intrones algunas veces también son importantes en
regulación. En procariontes, debido a que el proceso de transcripción es casi simultáneo con la traducción, no tienen una
separación de intrones y exones. En procariontes, el gen además tiene una secuencia operadora (cercana al promotor o
incluida en él) que controla el acceso de la ARN polimerasa al promotor, por lo que permite regular la expresión de genes
adyacentes, es decir, la transcripción policistrónica. El conjunto de genes que serán transcritos como un solo ARNm
recibe el nombre de operón y, por lo tanto, involucra al promotor, operador, y secuencia de genes (Fig. 6B).
En procariontes la ARN polimerasa es un complejo grande de 5 subunidades ααββ’ω y subunidad σ. La subunidad
σ se une transitoriamente al promotor y dirige la síntesis de ARN a regiones específicas.
Figura 6. Estructura de un gen. (A) El gen en eucariontes

se puede dividir en de tres partes: secuencias reguladoras,
que determinan dónde y cuándo se transcribe, secuencias
codificantes llamadas exones, y secuencias no codificantes
llamadas intrones. (B) En procariontes, el gen presenta
secuencias reguladoras, una secuencia operadora y las
secuencias codificantes adyacentes a la secuencia operadora. La
trascripción es policistrónica, lo que permite que de un ARNm
se traduzcan en varias proteínas.
Referencia figura 6 Molecular Biology and Evolution y 6-22,
Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland
La ARN polimerasa procariótica carece de actividad exonucleasa 3’ -5’ por lo que comete más errores que la ADN
polimerasa. Existen señales codificadas en el ADN que indican dónde comenzar y dónde terminar la transcripción.
El factor sigma (σ) reconoce la zona promotora, la que corresponde a una señal de inicio heterogénea en su secuencia
nucleotídica (caja Pribnow). De este modo la ARN polimerasa mediante la ayuda del factor sigma se une a dos se-
cuencias del promotor, que se encuentran 10 nucleótidos río arriba (posición –10 aproximadamente) y 35 nucleótidos
río arriba (-35), respectivamente, del sitio de inicio de la transcripción. El ARN es sintetizado a partir del sitio de
270 inicio (nucleótido +1), utilizando como templado la hebra complementaria a la cual se encuentra el promotor (Fig.
7A). El promotor es muy importante porque controla o promueve la transcripción de los genes a través del recono-
cimiento por parte de proteínas específicas. Después de 10 nucleótidos aproximadamente, el factor sigma se libera
dando comienzo a la elongación. La señal de terminación está determinada por una secuencia rica en AT (repetidos
UA en el ARN) (Fig. 7B). En eucariontes la transcripción es más compleja que en procariontes, y la secuencia pro-
motora es mucho más diversa que la secuencia de procariontes. De hecho, el promotor en eucariontes comprende un
amplio rango de secuencias de ADN. En la mayoría de los casos poseen secuencias reguladoras como potenciadoras o
amplificadoras llamadas “enhancer”, a las cuales se les unen proteínas activadoras de la transcripción. Estas secuencias
pueden estar muy distantes de la zona de inicio de la transcripción. Los promotores son complejos en estructura y el
ADN es capaz de plegarse sobre sí mismo para poner en contacto a las proteínas activadoras, proteínas que se unen
a secuencias reguladoras e influyen controlando la transcripción (factores de transcripción), proteínas mediadoras, re-
modeladoras de la cromatina y la polimerasa (Fig. 7C). El promotor en eucariontes se puede dividir en tres regiones
promotor distal, central y proximal. El promotor central contiene el sitio de unión para la polimerasa conocido como
caja TATA (5’-TATAAA-3’), y el sitio de inicio a la transcripción (Fig. 7D). En el promotor central pueden unirse los
factores generales de la transcripción. La región conocida como promotor proximal se encuentra río arriba (250 bases
aproximadamente) del promotor central y generalmente corresponde a secuencias reguladoras primarias, donde facto-
res generales de la transcripción también se unen. El promotor distal está río arriba del promotor proximal y también
contiene sitios de unión para factores de transcripción.
Una diferencia importante entre procariontes y eucariontes, es que en las células eucarióticas la iniciación de la
transcripción debe lidiar con el enrollamiento del ADN en los nucleosomas y en procariontes este problema está ausente
(Fig. 7C, Tabla 3). En eucariontes, la ARN polimerasa requiere de factores de transcripción generales (FT) para el inicio
de la transcripción. Ellos se unen de manera secuencial a regiones específicas del ADN y ayudan a las ARN polimerasas
a unirse correctamente a sus promotores respectivos, ya que ayudan a separar la doble hebra del ADN, posicionar a la
polimerasa en el promotor y a liberar a la polimerasa del promotor iniciando así la elongación (Fig. 8, Tabla 4). Estos FT
corresponden a proteínas que interactúan y se designan como TFII porque la polimerasa II es la encargada de transcribir
el ARN mensajero (Tabla 2, referencia Tabla 6-1, Alberts, et al., 2008; 6-2, Fig. 5). La ARN polimerasa en ocasiones
también requiere de activadores (enhancers), mediadores y proteínas modificadoras de la cromatina.
Figura 7. Transcripción en procariontes y

eucariontes. (A) La secuencia de ADN tiene
dos hebras, solo una de las hebras tendrá un
promotor (estas secuencias son asimétricas)
y la polimerasa transcribirá utilizando como
templado la hebra complementaria a la cual
se encuentra el promotor. Debido a que la
polimerasa solo sintetiza de 5’ a 3’, puede
transcribir una sola hebra por gen. (B) En
procariontes, el factor sigma reconoce dos
secuencias en el promotor ayudando a la
polimerasa a posicionarse para el inicio de
la transcripción. (C) La transcripción en
eucariontes depende de proteínas (factores
de transcripción) que reconocen sitios de
unión (secuencias o elementos reguladores)
y que interactúa con la polimerasa o factores
generales de transcripción de la transcripción
a través de mediadores y la participación
de remodeladores de la cromatina (D)
Secuencias consenso que son reconocidas
por factores generales de la transcripción.
Referencia figura 6-13, 6-11, 6-9 y 6-17,
Biología molecular de la célula, quinta
edición. (©Garland Science 2008 y
271
Tabla 3. Diferencias en el proceso de transcripción entre eucariontes y procariontes.
Tabla 4. Factores generales de la transcripción en eucariontes.
Referencia: tabla 6-3 Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones
Omega 2010).
272
Figura 8. Iniciación de la transcripción del ADN en eucariontes. (A)
Unión de factores de inicio de la transcripción. (B) Utilización de
mediadores y enhancers durante transcripción.
Referencia figura 6-16 y 6-19, Biología molecular de la célula, quinta
273
Modificaciones del ARN mensajero en células eucariontes.
En procariontes la traducción de este ARNm ocurre simultáneamente con la transcripción, en eucariontes en cambio,
la transcripción ocurre en el núcleo, pero la traducción ocurre fuera de él. Para esto el ARNm debe ser procesado
(maduración), exportado del núcleo y traducido en el citoplasma o asociado al retículo endoplásmico (Fig. 9A). El proceso
de maduración del ARNm significa que el transcrito primario de ARN sufrirá una serie de modificaciones importantes:
(1) adición de “cap” o caperuza en el extremo 5’ ocurre al inicio del ARN naciente, cuando la polimerasa ha transcrito
25 nucleótidos aproximadamente, el cual ayuda a la iniciación de síntesis de proteínas, ayuda a que la célula distinga
ARNm de otros ARN y a la protección del transcrito creciente de la degradación. Este cap es una 7-metil-guanosina
que se une al primer nucleótido del mensajero en el extremo 5’ del transcrito mediante un enlace 5’-5’ y sirve de señal de
reconocimiento para el ribosoma (Fig. 9B). (2) adición de una cola de poli(A) en el extremo 3’ (Fig. 9C). En eucariontes,
El extremo 3’ de la mayoría de los transcritos de la RNA polimerasa II se define, no por un evento de terminación de
transcripción como en procariontes, sino por el corte del transcrito en un sitio específico y la adición de la cola de poli(A)
en el extremo 3’ cortado. La señal para el corte es la secuencia AAUAAA, localizada 10-30 nucleótidos río arriba del
sitio de corte, llamada señal de poli-adenilación y que es reconocida por un complejo proteico llamado CPSF (Cleavage
and polyadenylation specificity factor). CPSF va asociado al dominio CTD de la polimerasa junto con CstF (factor de
estimulación del corte: Cleavage-Stimulation Factor), ambos son importantes para cortar el transcrito después de la
señal de reconocimiento (Fig. 9D). Después del corte, la enzima poli-A polimerasa adiciona 100-200 residuos de A al
extremo 3’ de la hebra de ARN para completar el transcrito primario. La adición de poli(A) ayuda a la exportación del
ARNm maduro hacia el citoplasma, le da estabilidad de ARNm en el citoplasma evitando que se degrade el transcrito
y permite que el ARNm maduro sea exportado del núcleo al citoplasma y traducido en el citoplasma. (3) El “splicing” o
corte y empalme, permite la eliminación de intrones (secuencias internas que no son codificantes). El splicing de ARNm
es catalizado por el spliceosoma, formado por ribonucleoproteínas nucleares pequeñas (snRNPs) y otros componentes,
el que reconoce tres porciones en el ARN precursor (secuencias definidas cortas o consensos) (Fig. 10A). La naturaleza
del sitio catalítico de las ribonucleoproteínas es formada por moléculas de ARN y no por proteínas. Una vez finalizado
el splicing, el spliceosoma dirige a un conjunto de proteínas para que se unan al ARNm, cerca del sitio que había sido
ocupado por el intrón. Estas proteínas se les conoce como exon junction complex (EJC) y ellas marcan el sitio donde
ocurrió un evento de splicing exitoso. El splicing muestra una gran plasticidad, lo que ayuda en el proceso de evolución y
también significa que la célula puede regular el patrón de splicing produciendo variaciones. En el genoma eucariótico los
genes pueden sufrir splicing de diversas formas, lo que significa que un mismo gen pueda producir un grupo proteínas
diferentes pero relacionadas (splicing alternativo) (Fig. 10B). En procariontes el splicing también ocurre, pero es un
evento aislado que se da en ARN no codificantes como en ARNt.
Figura 9. Modificaciones del ARNm. (A) Diferencias

entre procariontes y eucariontes, mientras al ARNm
debe sufrir un proceso de maduración para salir del
núcleo y ser traducido, el ARNm en procariontes es
transcrito y traducido simultáneamente sin proceso
de maduración (B) Adición de la Cap al extremo
5´ del transcrito. (C) La adición de cola de poli(A)
ocurre 10-30 nucleótidos río abajo de la señal de
poliadenilación. (D) CPSF y Cstf están asociados al
dominio CTD de la ARN polimerasa, una vez que
CPSF detecta la señal de poliadenilación corta el
transcrito con ayuda de CSTF, luego se adiciona la
cola de poli(A) y algunas se asocian al extremo 3´.
Referencia figura 6-21, 6-22 y 6-38 Biología
274
Figura 10. Proceso de splicing en
eucariontes. (A) Proceso de splicing.
(B) Splicing alternativo del gen de la
tropomiosina de rata.
Referencia figura 6-26 y 6-27, Biología
Omega 2010).
De ARN a ADN (Capítulo 6 y 24, Alberts, et al. 2008).

El dogma central de la biología molecular establecía en una primera instancia que el ADN pasaba a ARN y este a su
vez a proteína. Pero a medida que se fueron descubriendo otros procesos moleculares, este dogma se fue modificando.
Por ejemplo, al entender cómo infectaban los retrovirus, permitió descubrir y entender que era posible pasar de ARN a
ADN, rompiendo la lógica que hasta ese momento se había pensado inquebrantable. Los retrovirus pueden hacer esto
porque poseen una enzima llamada transcriptasa reversa, la cual les permite a estos agentes infecciosos sintetizar una
cadena de ADN complementaria (cADN) a partir de un templado de ARN. Estos virus se integran en nuestro genoma
mediante otra enzima llamada integrasa y permanecen ahí por tiempos indefinidos. El virus del VIH es un ejemplo de
estos virus.
Con el paso del tiempo también se pudieron describir que existen otros elementos genéticos que forman parte de
nuestro genoma con similares características a los virus. Estos elementos usan distintos mecanismos para insertarse en
nuestro genoma y tienen la capacidad de moverse de una posición a otra. Ejemplo de esto son los transposones, que utilizan
la enzima transposasa para poder cortar en una secuencia blanco e insertar el transposón en ese lugar. Estas inserciones
pueden ocasionar la inactivación de un gen o bien agregar secuencias nuevas. En algunos organismos los transposones
pueden llegar a constituir más de la mitad del genoma. Otros elementos son conocidos como retrotransposones
retrovirales y retrotransposones no retrovirales. Ambos utilizan distintas estrategias, los retrotransposones retrovirales,
por ejemplo, usan una estrategia parecida a los retrovirus para integrarse (usando una transcriptasa reversa para la
conversión de ARN a ADN y una integrasa para insertarse). Sin embargo, a diferencia de los virus, no tienen capacidad
infectiva, es decir, carecen de proteínas como cápside o envoltura. En el caso de los retrotransposones no retrovirales, la
estrategia ocupada para insertarse en nuestro genoma es diferente. Muchos de estos elementos generan repeticiones, los
que son observables en nuestro ADN. En humanos la mayoría de ellos son versiones truncadas e inmóviles (ejemplo el
elemento L1), pero algunos producen la hemofilia al insertarse en el gen que codifica para el factor VIII, importante en
coagulación.
275
CUESTIONARIO 3
DEL DNA A LA PROTEÍNA: CÓMO LEEN
LAS CÉLULAS EL GENOMA
1. ¿En qué se diferencia el proceso de transcripción en procariontes con respecto al de eucariontes?
2. ¿Cuál son las tres modificaciones importantes que sufre el ARNm en su proceso de maduración?
3. ¿Qué es un transposón?
4. De acuerdo a la siguiente secuencia de ADN y a la ubicación del promotor (TATA), transcriba el correspondiente
ARNm
5’-TGGGTG…..TATAT….CGCTTAAGCATGCATCGAACCCATGCC AC TCGCTGACGCCCAATA-3’
3’-ACCCAC……ATATA….GCGAATTCGTACGTAGCTTGGGTACGGTGAGCGACTGCGGGTTAT-5´
276
5. Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre las 10 palabras relacionadas con la materia de esta guía.
277
6. Resuelva el siguiente crucigrama
Horizontal
3. Permite el splicing y dirige a un set de proteínas para que se unan al ARNm, cerca del sitio que había sido ocupado
por el intrón.
5. ARN que codifica para proteínas.
8. Zona codificante en el ARNm inmaduro.
9. Secuencia nucleotídica heterogénea que controla el inicio de la transcripción.
10. Proteína que interactúa con proteínas activadoras, remodeladoras de la cromatina y factores de inicio de la
transcripción.
Vertical
1. Enzima que permite cortar en una secuencia diana e insertar el transposón en ese lugar.
2. Poseen una enzima llamada transcriptasa reversa que permite hacer una cadena de ADN a partir de una secuencia
de ARN.
4. Participan en la maduración del ARNm y ayudan en el splicing.
6. Le da estabilidad al ARNm en el citoplasma y sirve de señal de reconocimiento para el ribosoma.
278 7. Set de genes adyacentes puede ser transcrito como una sola unidad produciendo varias proteínas distintas.
279
280
4
TRADUCCIÓN Y CONTROL DE LA
EXPRESIÓN GÉNICA
RESUMEN
El producto final de los genes que se transcriben a los ARN mensajero (ARNm) son proteínas. En 1950 se comenzó
a descifrar cómo una secuencia lineal de nucleótidos dispuesto en el ARNm podía ser transformada a una secuencia
lineal de aminoácidos, considerando que las naturalezas de ambas moléculas son diferentes. Este proceso (de ARNm a
proteína) denominado traducción es un criptograma desarrollado y perfeccionado por la naturaleza durante 3 billones de
años de evolución. La maquinaria que utiliza la célula para llevar a cabo la traducción se denomina ribosoma. El conocer
este mecanismo es vital ya que la transcripción de un gen y su posterior traducción a proteína permite el funcionamiento
celular. Este funcionamiento es preciso y altamente regulado, las células saben qué hacer y cuándo hacerlo. El control de
la expresión génica permite a un organismo adaptarse y comportarse de manera adecuada en un sistema y transcribir y
traducir señales cuando es necesario.
Palabras clave: traducción, ribosoma, regulación de la expresión, promotor, operón, represor, activador, factores de
transcripción, proteínas reguladoras, regiones enhancer, epigénetica, remodelamiento de cromatina, metilaciones,
acetilaciones, ubiquitinaciones, fosforilaciones, retroalimentación positiva y negativa.
Síntesis de proteínas y código genético (Capítulo 6, Alberts, et al. 2008).

Para formar una proteína, la información genética contenida en el ARNm en un lenguaje de 4 letras (ácidos nucleicos)
deber ser traducida a una secuencia de aminoácidos para formar una proteína. Se necesitan tres nucleótidos del ARNm
para codificar un aminoácido, por lo que un ARNm compuesto de 300 nucleótidos codificará una proteína de 100
aminoácidos. A los 3 nucleótidos que codifican para un aminoácido los denominamos codones. El código genético
corresponde al conjunto de reglas necesarias para traducir una secuencia de nucleótidos del ARNm a una secuencia
de proteína en el proceso de traducción. El código establece las combinaciones de codones que dan como resultado un
aminoácido. Este código es universal, es decir, en un organismo determinado un codón codifica para el mismo aminoácido
que en cualquier otro organismo. El código no es ambiguo, es decir, cada codón codifica para un solo aminoácido, pero
es degenerado, es decir, un aminoácido puede ser codificado por más de un codón. En la traducción siempre existe un
codón que marca el inicio de este proceso. Este codón de inicio corresponde al codón AUG y determina el aminoácido
metionina. También existen codones que marcan el término de la traducción, los que son llamados codones de término
o sin sentido (UAA/UGA/UAG) los cuales no codifican para ningún aminoácido y por tanto indican el lugar que deja
de producirse la proteína. Dependiendo en qué base se comience la traducción, el marco de lectura puede ser diferente
(Fig. 1). Un marco de lectura abierto es aquel que comienza en un codón AUG de inicio, continúa con una extensión de
codones codificantes y termina en un codón de término y que por lo menos tenga una extensión de más de 50 codones
(50 aminoácidos) sin codón de término.
Figura 1. Marco de lectura. Se muestran los tres posibles marcos de
lectura para la síntesis de una proteína. Dependiendo de la base en que
se comience la traducción se obtendrán diferentes proteínas.
281
El encargado de realizar el proceso de traducción es el ribosoma, el cual es un complejo molecular compuesto por dos
subunidades (mayor y menor), las que están formadas a su vez por ARN ribosomales (ARNr) y proteínas. El ribosoma
esencialmente es una ribozima, donde el ARN ribosomal y no proteínas, son los responsables de la estructura que lo
conforman. Las proteínas solo estabilizan la estructura, y el ARNr cataliza eficientemente la síntesis de las nuevas
proteínas. En la formación de las proteínas, el ribosoma necesita de nuevos aminoácidos, los que son transportados al
ribosoma por un ARN especial llamado ARN de transferencia (ARNt). Este ARN posee una región complementaria
al codón, llamada anticodón, además de llevar unido en su extremo 3` al aminoácido correspondiente al anticodon.
El ARNt tiene una estructura de “trébol” y existen muchas moléculas diferentes de ARNt, al menos una para cada
aminoácido (Fig. 2).
Figura 2. ARN de transferencia para fenilalanina (Phe). El ARN de transferencia tiene forma de trébol. En el extremo 3´ se encuentra unido el
aminoácido Phe. En azul se marca la secuencia donde se encuentra el anticodón.
Para que la traducción comience, deben ocurrir diferentes eventos. Uno de ellos es el proceso de “carga” de los
aminoácidos a sus respectivos ARNt, proceso que se conoce como activación. Este proceso ocurre en el citosol (no en
los ribosomas), requiere de ATP y lo cataliza la enzima llamada aminoacil-tARN-sintetasa.
Recordemos que en eucariontes el ARNm luego de que termina el proceso de transcripción, sale del núcleo y
llega al citoplasma donde se produce la traducción. Cuando el ARNm se une al ribosoma comenzará a ser traducido
3 nucleótidos a la vez (es decir por cada codón). El ARNt cargado o activado con el primer aminoácido (que casi la
totalidad de las veces es un AUG, es decir, codifica para el aminoácido metionina en eucariontes o N-Formilmetionina
en bacterias) se fija a la subunidad menor del ribosoma. El anticodón del ARNt se hibrida por complementariedad
con el codón AUG correspondiente a metionina. Luego se ensambla la subunidad mayor del ribosoma, formando un
ribosoma funcional y comienza la elongación (Fig.3).
282
Figura 3. Visión del proceso de traducción en eucariontes. El ARNm
maduro posee factores de inicio de la traducción (eIF4E y eIF4G) unidos
a la CAP en el extremo 5´. La cola de poli(A) tiene unida proteínas a ella
que interactúan con los factores eIF4G. Esta interacción es importante
para asegurar que ambos extremos del ARNm estén intactos. El proceso
de traducción requiere de energía.
Al ensamblarse completamente el ribosoma genera tres sitios funcionales que son esenciales para el proceso de
traducción. Estos sitos se denominan: sitio P (o peptidil) que es el lugar donde se forma el enlace peptídico entre los
aminoácidos de la nueva proteína naciente; sitio A (o aminoacyl), donde se acepta un nuevo ARNt que viene cargado
con su aminoácido correspondiente; sitio E (exit o empty en inglés), el que corresponde al sitio de salida para ARNt
“vacíos”.
Durante la elongación, la cadena polipeptídica se alarga mediante unión covalente de aminoácidos sucesivos,
transportados al ribosoma y posicionados correctamente por el apareamiento entre el anticodón en el ARNt y el codón
en el ARNm, lo cual se repite dependiendo del largo del ARNm. El término y liberación del ARNm, ribosomas y
proteína recién sintetizada, ocurre cuando el ribosoma llega a un codón de término en el ARNm. Esto ocurre gracias
a la ayuda de factores de liberación. Finalmente, ocurre el plegamiento y maduración de la proteína recién sintetizada,
en el que este polipéptido se pliega para adoptar su forma 3D adecuada e incluso puede sufrir modificaciones post-
traduccionales.
Si bien el proceso de traducción y su mecanismo es muy similar en procariontes y eucariontes, existen algunas
diferencias. Por ejemplo, en procariontes, la subunidad menor del ribosoma, unida al tRNA de inicio, reconoce una
secuencia específica de hasta 6 nucleótidos, llamada sitio de unión de ribosomas, también llamada secuencia de Shine-
Dalgarno que facilita el reconocimiento del codón de inicio. En eucariontes se ha descrito la existencia de una secuencia
en el ARNm denominada Kozak que, a pesar de no ser tan conservada como la secuencia Shine-Dalgarno, facilita el
reconocimiento de la secuencia de iniciación durante el proceso de traducción.
Una molécula de ARNm puede ser traducida simultáneamente por una serie de ribosomas, tanto unidos a membranas
como en forma libre. Estas estructuras se llaman polirribosomas o polisomas (Fig. 4). 283
Figura 4. Poliribosomas. Una serie de ribosomas traduce el mismo
ARNm.
Regulación de la expresión génica (Capítulo 7, Alberts, et al. 2008).

La expresión de genes (cuándo, en qué tejido y qué cantidad debe expresarse) es esencial para el funcionamiento del
organismo, por lo que es un proceso estrictamente regulado. Todas las células de nuestros tejidos tienen el mismo ADN,
pero cada célula perteneciente a un tejido determinado expresa un conjunto de genes particular que le da su identidad y
funcionalidad, siendo diferente a células de otro tejido. La transcripción de cada gen es controlada por regiones regulato-
rias en el ADN, cercano al sector donde comienza la transcripción. Los dos componentes fundamentales de las regiones
regulatorias son: (1) secuencias cortas y definidas de ADN, (2) proteínas que reconocen esas secuencias regulatorias y se
unen a ellas. Las proteínas reguladoras de genes contienen motivos estructurales que son capaces de leer secuencias de
ADN específicas, las que se pueden leer un patrón o un código en la superficie del ADN de doble hélice. Ejemplos de
estas proteínas de unión al ADN, son factores de transcripción hélice-vuelta-hélice (HTH, como el operón Lac y muy
común en procariontes) que tienen un dominio de unión al ADN compuesto por dos α hélices; dedos de zinc (como
receptor de la hormona glucocorticoide); cremalleras (o cierre) de leucina (como Myc); y motivo hélice-bucle-hélice
(bHLH, como las proteínas Hes y Myb) presente en una gran familia de factores de transcripción en eucariontes, con-
tiene una región básica y otra compuesta por hélice-vuelta-hélice que funciona como dominio de dimerización (Fig. 5).
Regulación de la expresión génica en procariontes

Figura 5. Proteínas reguladoras de la expresión génica. (A) Proteínas de hélice-vuelta-hélice. (B) Dedos de Zinc. (C) Proteínas cremalleras de
leucina. (D) Motivo Hélix-bucle-Hélix.
Referencia figura 7-13, 7-15, 7-20 y 7-24, Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
284
El control de la transcripción se lleva a cabo mediante el encendido o apagado de genes de manera específica. En
procariontes hay dos ejemplos que grafican bien como esto sucede: (1) operón triptófano (Fig. 6A) y (2) operón Lac
(Fig. 6B). En procariontes la trascripción de genes es policsitrónica, es decir, varios ARNm que codifican para distintas
proteínas pueden estar controladas por una misma región promotora. Una secuencia de ADN específica recluta a la
ARN polimerasa para unirse al ADN y comenzar la transcripción. En la región promotora existe una región reguladora
llamada operador, la cual corresponde a una secuencia que es reconocida por proteínas que ayudan en la regulación de
la expresión.
(1) operón triptófano: la bacteria tiene un conjunto de genes que permiten la síntesis de triptófano (un aminoácido)
gobernados bajo un mismo promotor. Sin embargo, cuando en el medio hay triptófano no hay necesidad de sintetizarlo.
Así, el triptófano libre es capaz de unirse a un represor, el cual al cambiar su conformación y es capaz de unirse en la
zona operadora ubicada en el promotor impidiendo que la polimerasa pueda unirse y comience la transcripción. Como
consecuencia de esto, la expresión de genes para síntesis del triptófano se apaga (Fig. 6A).
(2) operón Lac: la bacteria consume glucosa como fuente de energía, pero cuando esta no está disponible requiere
utilizar otras fuentes de energía. Para esto CAP (un activador ubicado a una cierta distancia del promotor río arriba de
una zona operadora que controla genes que degradan lactosa) activa la expresión de genes para degradar lactosa. Sin
embargo, se necesita de otra señal para poder activar la expresión de genes que permitan utilizar lactosa como fuente de
alimento (en vez de glucosa), ya que un represor está siempre unido a la zona operadora impidiendo la expresión de estos
genes. La segunda condición para que la degradación de lactosa ocurra, es que haya lactosa en el medio. Si hay lactosa
para degradar, entonces los genes respectivos deben expresarse. Cuando la lactosa está presente se une al represor, el cual
cambia su forma y se suelta de la zona operadora permitiendo la unión de la polimerasa y la transcripción de genes para
su degradación. De este modo podemos entender que se pueden activar (regulación positiva) o apagar genes (regulación
negativa) dependiedno de la necesidad de la célula (Fig. 6B).
Figura 6. Regulación de le expresión en procariontes. (A)

Operón triptófano: es un sistema repisible (control negativo),
cuando hay triptófano en el medio se une a un represor
impidiendo la expresión de los genes necesarios para síntesis de
triptófano. Sin embargo, en ausencia de triptófano o a niveles
muy bajos, el represor se suelta permitiendo la transcripción
de los genes del operón Trp. (B) Operón Lac, es un sistema
inducible que está bajo control negativo ya que existe un represor
que impide la expresión de los genes para la degradación de
lactosa. El sistema para activarse requiere de dos condiciones:
(1) baja concentración de glucosa y (2) presencia de lactosa. El
operón Lac también está bajo control positivo, ya que existe
otra proteína (CAP) que estimula la transcripción de los genes
estructurales cuando hay baja concentración de glucosa.
Referencia figura 7-35 y 7-39, Biología molecular de la célula,
2010).
Regulación de la expresión génica en eucariontes. 285

En eucariontes el sistema es más complejo ya que involucra muchas proteínas, además de largas y heterogéneas
secuencias de ADN para el reconocimiento, como también de loops o bucles, que involucran una mayor distancia entre
el lugar de transcripción y la secuencia reguladora. La ARN polimerasa de eucariontes requiere de factores generales
de transcripción, que se ensamblan en el promotor antes del inicio de transcripción. Además, las células eucarióticas
carecen de operones y existen secuencias reguladoras que pueden estar ubicadas a una gran distancia del promotor.
En consecuencia, un promotor puede ser regulado por una gran cantidad de elementos regulatorios esparcidos por el
genoma (Fig. 7). Estas secuencias reguladoras son conocidas como secuencias enhancer (exacerbadoras o potenciadoras),
las cuales son reconocidas por proteínas de regulación génica (factores de transcripción) que a su vez interactúan
con proteínas mediadoras permitiendo, por ejemplo, activar la transcripción de genes (Fig. 7). Incluso, la unión de
ciertos grupos como metilaciones al promotor también afecta la expresión de genes, encontrándose por ejemplo zonas
promotoras hipermetiladas que impiden la transcripción de genes. En regiones heterocromatinizadas, el ADN está muy
condensado lo que impide la transcripción de genes. Existen múltiples formas de heterocromatina que mantiene genes
en silencio (ejemplo, la heterocromatina pericentromérica) o proteínas que son importante en estos procesos (ejemplo,
proteínas del grupo polycomb). La estructura cromática dependerá de que proteínas se unan a secuencias específicas del
ADN, lo que varía de célula en célula y de acuerdo al estado de desarrollo.
Figura 7. Regulación de la expresión génica

en eucariontes.
Sin embargo, además de controlar el nivel de transcripción de un gen,

también existen mecanismos de control que operan en el ARN recién transcrito, interviniendo en el proceso de
maduración (por ejemplo, splicing alternativo), en la exportación del núcleo, en la degradación de ARN en el núcleo
(exosomas), regulación mediada por microARN (miARN) los que permiten activar o desactivar genes. Una vez fuera
del núcleo, el transporte del ARNm maduro hacia los ribosomas también es regulado, así como también, la estabilidad
del ARNm en el citoplasma, selectivamente degradando y traduciendo ciertos ARNm. También existe la inactivación
o activación selectiva de proteínas una vez que ya han sido hechas o bien al agregar modificaciones (modificaciones
post-transcripcionales), como por ejemplo, agregar azúcares o grupos metilos y acetilos entre otros (Fig. 8).
Figura 8. La regulación de la expresión génica en

eucariontes puede ser controlada en diferentes etapas.
(1) a nivel de transcripción se controla cuando y
cuan seguido un gen es transcrito, (2) se controla el
proceso de maduración del ARNm, (3) se selecciona
que ARNm se exporta del núcleo hacia el citosol,
(4) selectivamente se degradan ciertas moléculas de
ARNm, (5) se selecciona qué ARNm son traducidos
en los ribosomas y (6) selectivamente se activan o
inactivan proteínas.
286 En eucariontes el ADN está empaquetado en cromatina, lo que Omega 2010).
también provee de oportunidades para la regulación génica que no están disponibles en bacterias. Además, de las
regiones de heterocromatina en las cuales los genes no pueden ser transcritos, existen proteínas represoras que inactivan
la expresión de diferentes maneras: por competición, por la unión a la misma secuencia regulatoria, enmascarando la
superficie de activación o interactuando con factores de inicio de la transcripción. Pero estas proteínas reguladoras no
son represores y activadores estrictos como en bacterias (Fig. 9).
La remodelación de la cromatina también es un mecanismo de regulación. En este sentido, se han identificado
diferentes tipos de modificaciones a las histonas (como metilaciones, acetilaciones, ubiquitinaciones o fosforilaciones),
que generan un código que da como resultado la activación –cuando se relaja la cromatina– o la inactivación de la
expresión génica –cuando se heterocromatiniza o condensa- (Fig. 10). A este tipo de control se le denomina regulación
epigenética.
Figura 9. Algunos mecanismos de represión de la expresión

génica en eucariontes. (1) Por competición con un activador por
el sitio de unión (2) ocultando la superficie de activación, (3) por
interacción directa con factores generales de transcripción.
Figura 10. Algunos significados del código de histona. Arriba se

muestra la histona H3 con algunas posibles modificaciones como
metilaciones en azul, acetilaciones en fucsia y fosforilaciones en
amarillo. Abajo se muestran interpretaciones del código.
El código de histona ayuda a determinar la función biológica. Existen complejos de proteínas que leen estos códigos 287
(complejo lector) y otros complejos proteicos que escriben (complejo escritor). Estos complejos pueden expandir
modificaciones específicas en la cromatina por largas distancias en el cromosoma. Pero también estas modificaciones
pueden ser detenidas por proteínas especializadas (Fig. 11). El sistema de regulación de la expresión génica es complejo,
la misma expresión de ciertas proteínas puede autorregular su propia expresión, ya sea de manera de activación
(retroalimentación positiva) o de represión (retroalimentación negativa), construyendo así intricados circuitos génicos.
Figura 11. Barreras a la expansión heterocromática.

Omega 2010).
288
CUESTIONARIO 4
EXPRESIÓN GÉNICA
1.- Resuelva esta sopa de letras. Encuentre 10 palabras claves en el texto.
2.- Explique qué es regulación epigenética.
289
3.- Dado el siguiente cuadro de codones y sus respectivos aminoácidos. Investigue la consecuencia de mutaciones en la
secuencia de ADN.
Secuencias Proteína
Secuencia sin mutación
AUG CUC AGC GUU UAU ACC AUG UGA
Secuencia con mutación 1
AAG CUC AGC GUU UAU ACC AUG UGA
AUG CUC AGC GUU UAA ACC AUG UGA
SEGUNDO
TERCERO
PRIMERO
4.- En la siguiente figura se muestra el operón Triptófano, ¿en que se basa su funcionamiento?
290
1. -
a) El nucleosoma es la unidad básica de repetición de la cromatina eucariótica. Se compone de alrededor de 150 pares de bases de
ADN enrolladas alrededor de un núcleo de histonas. Los nucleosomas se organizan como cuentas de un collar las cuales, a su vez,
son plegadas sobre sí mismas repetidas veces para formar un cromosoma.
b) Es la secuencia de nucleótidos en el ADN que se transcribe a ARN, el cual puede ser traducido en una secuencia de aminoácidos.
c) La doble hebra de ADN corresponde a dos cadenas complementarias de nucleótidos, en los que los nucleótidos están unidos unos
a otros covalentemente en la cadena a través de azúcares y fosfatos.
Las bases quedan una frente a la otra al interior de la doble hélice y pirimidinas forman puentes de hidrógenos con purinas.
Las dos cadenas son antiparalelas
d) La eucromatina corresponde a cromatina ligeramente laxa o no tan compactada que posee gran concentración de genes, y
frecuentemente se encuentra en transcripción activa. Por el contrario, la heterocromatina corresponde a regiones de la cromatina
más condensadas o empaquetadas donde la transcripción de genes no se produce (transcripción inactiva).
e) Para detectar anomalías cromosómicas que pueden ser enfermedades congénitas y adquiridas.
2.- 3.-
4.-
Eucromatina
Núcleo
Cariotipo
Intrones
Cinetocoro
Genoma
Cromosoma
Histonas
Exones
291
1.-
Exonucleasa
Okazaki
Helicasas
Telómeros
Mutación
Homóloga
Hidrólisis
Metilaciones
Topoisomerasa
2.-
a) Cada ronda de replicación, cada una de las dos hebras es usada como templado (molde) para la formación de una hebra de
ADN complementaria.
b) La razón principal de por qué la copia o elongación del ADN es en sentido 5’ – 3´, es porque la capacidad correctora es de 3´ – 5´.
Además, una replicación en sentido 3´ – 5´ requeriría de dos tipos distintos de polimerasas para hacer la replicación.
c) Ambas recombinaciones requieren de la rotura de la doble cadena para activarse. En la recombinación no homóloga hay
pérdida de nucleótidos en los extremos a reparar y luego hay unión de los extremos, lo cual implica pérdida de nucleótidos por lo
que no es un sistema preciso de reparación. El sistema de reparación por recombinación homóloga, en cambio, es muy preciso ya
que utiliza la otra hebra como molde.
d) Durante la replicación se abren las hebras, una hebra molde es en dirección 5’-3’ y la otra 3’-5’ porque son antiparalelas.
Debido a que la elongación ocurre en el sentido 5’ – 3´ una de las hebras se copiará de manera continua, se le denomina hebra líder
o adelantada, pero la otra deberá incluir una acomodación especial para poder ser copiada en sentido 5’ – 3´, por lo que se copia de
manera discontinua o hebra retrasada.
3.-
a) genoma/replicación/ reparación
b) polimerasa/ 3’ –OH/ polinucleótidos/ complementariedad
c) fosfoanídrido/ nucleósido trifosfato
292
4.-
5.-
Horizontal
3. Telomerasa
4. glicosilasas
6. semiconservativo
8. BRCA
9. distorsiones
11. primasas
Vertical
1. Okazaki
2. Toposiomerasas
5. pirimidina
7. ORI
10. NER
293
DEL ADN A LA PROTEÍNA: CÓMO LEEN
LAS CÉLULAS EL GENOMA
1.- En procariontes la ARN polimerasa posee una subunidad sigma que reconoce y se une transitoriamente al promotor y dirige
la síntesis de ARN a regiones específicas. En eucariontes el inicio de la transcripción es más compleja, la polimerasa requiere de
factores de transcripción generales (FT) para el inicio de la transcripción.
En procariontes no hay núcleo por lo que el ARN es sintetizado y directamente traducido. En eucariontes el ARN requiere de un
proceso de maduración para salir del núcleo y ser traducido.
En eucariontes la iniciación de la transcripción debe lidiar con el enrollamiento del ADN en los nucleosomas y en procariontes
este problema está ausente.
2.-
(1) adición de “cap” o caperuza en el extremo 5’
(2) adición de una cola de poli(A) en el extremo 3’
(3) “splicing” o corte y empalme, el cual permite la eliminación de intrones (secuencias internas que no son codificantes)
3.- Llamados parásitos moleculares, corresponden a secuencias cortas de ADN que utilizan la enzima transposasa para poder
cortar en una secuencia diana e insertarse en ese lugar, pudiendo adicionar nuevos genes o interrumpir genes de la célula.
4.-
ARNm
CGCUUAAGCAUGCAUCGAACCCAUGCC AC UCGCUGACGCCCAAUA
5.- 6.-
Splicing Horizontal
Policistrónico 3. Spliceosoma
Transposon 5. ARNm
Integrasa 8. Exón
Caperuza 9. Promotor
Promotor 10. Mediador
Intrón
Retrovirus Vertical
Uracilo 1 Transposasa
Transcripción 2 Retrovirus
4 Ribonucleoproteínas
6 Poliadenilación
7 Policistrónico
294
EXPRESIÓN GÉNICA
1.-
Policistronica
Operon
Regulación
Polirribosomas
Promotor
Expresión
Metionina
Represor
Anticodon
Ribosoma
2.- La regulación epigenética se vale del remodelamiento de la cromatina para activar (cuando se relaja la cromatina) o apagar
(cuando se heterocromatiniza o condensa) genes. En este sentido se han identificado diferentes tipos de modificaciones y proteínas
que cumplen esta función, por ejemplo: metilaciones, acetilaciones, ubiquitilaciones, fosforilaciones y proteínas que ponen estas
marcas.
3.-
Secuencias Proteína
Secuencia sin mutación
AUG CUC AGC GUU UAU ACC AUG UGA Met-Leu-Ser-Val-Tyr- Thr-stop
AAG CUC AGC GUU UAU ACC AUG UGA Met-stop
AUG CUC AGC GUU UAA ACC AUG UGA Met-Leu-Ser-Val- stop
4.- Normalmente la bacteria necesita sintetizar triptófano. Sin embargo, cuando hay triptófano en el medio no hay expresar de
sintetizar triptófano. El triptófano libre se une a un represor, el cual al cambiar su conformación es capaz de unirse en la zona
operadora bloqueando la expresión de genes para síntesis de triptófano. Así este sistema de regulación negativa regula la expresión
de genes que codifican para proteínas que sintetizan triptófano.
295
296
UNIDAD V
DIVISIÓN CELULAR
297
1
CICLO CELULAR Y CONTROL DEL CICLO
__________________________________________________
1. Ciclo celular y control del ciclo............................................................................................................... 303

El ciclo celular (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008)..................................................................................... 303
Control del ciclo celular: Cdks-ciclina (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008)............................................ 305
El control del ciclo celular depende de la proteólisis cíclica (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008)......................309 307
Inicio de la replicación y de la mitosis (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008)............................................. 309
Control del ciclo celular: p53 y G2-M (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008)............................................. 310
Cuestionario 1: Ciclo celular y control del ciclo........................................................................................ 311
2
CRECIMIENTO, DIVISIÓN Y MUERTE CÉLULAR
__________________________________________________
2. Crecimiento, división y muerte celular ................................................................................................. 315

Mitosis (M) (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).......................................................................................... 315
El citoesqueleto durante la mitosis (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008)................................................... 317
Control del crecimiento celular y tamaño (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008)....................................... 318
Muerte celular (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008)..................................................................................... 321
Cuestionario 2: Crecimiento, división y muerte celular........................................................................... 323
298
3
MEIOSIS Y CICLO VITAL EN ORGANISMOS EUCARIONTES
__________________________________________________
3. Meiosis y ciclo vital en organismos eucariontes.................................................................................... 327

Reproducción sexual y asexual (Capítulo 21, Alberts et al., 2010)......................................................... 327
Meiosis (Capítulo 21, Alberts et al., 2010)................................................................................................. 329
Gametogénesis (Capítulo 21, Alberts et al., 2010).................................................................................... 333
Cuestionario 3: Meiosis y ciclo vital en organismos eucariontes............................................................ 338
4
CÁNCER
__________________________________________________
4.Cáncer.......................................................................................................................................................... 341
Características del cáncer (Capítulo 20, Alberts, et al. 2008).................................................................. 341
Cambios en el genoma que pueden desencadenar la patología (Capítulo 20, Alberts, et al. 2008)................345 343
Características de las células cancerosas y de los cánceres (Capítulo 20, Alberts, et al. 2008)........................347 345
Genes críticos que producen cáncer (Capítulo 20, Alberts, et al. 2008)................................................ 348
Cuestionario 4: Cáncer................................................................................................................................. 352
299
R
RESPUESTAS CUESTIONARIOS
__________________________________________________
Respuestas cuestionario 1: Ciclo celular y control del ciclo.................................................................... 355

Respuestas cuestionario 2: Crecimiento división y muerte celular........................................................ 356
Respuestas cuestionario 3: Meiosis y ciclo vital en organismos eucariontes ........................................ 357
Respuestas cuestionario 4: Cáncer.............................................................................................................. 358
300
301
302
1
CICLO CELULAR Y CONTROL
DEL CICLO
RESUMEN
Todas las células vienen de una célula preexistente, por lo que, tanto en organismos unicelulares como multicelulares,
las células deben reproducirse, lo que se realiza a través de ciclos repetidos de crecimiento y división celular. Las células se
dividen o replican en una serie de eventos ordenados y altamente regulados. Estos eventos ocurren dentro de un proceso
conocido como ciclo celular, el cual incluye etapas de duplicación de material, y la división celular. En organismos
unicelulares como bacterias y levaduras, el ciclo celular permite crear un organismo nuevo. En organismos multicelulares,
en cambio, diferentes secuencias de división celular son requeridas para producir un organismo funcional. Incluso en el
cuerpo adulto, la división celular es requerida para reemplazar células que mueren en los tejidos. De hecho, si la división
celular se detuviera en nuestros cuerpos moríamos a los pocos días. Si bien los detalles de la división celular y los tiempos
de cuándo esta ocurre, varían de organismo en organismo, los procesos esenciales son conservados en todas las especies.
De esta manera, el ciclo celular permite que una célula herede su material genético a células hijas y el proceso asegura
que las células que se producen sean idénticas a la original.
Palabras clave: ciclo celular, división celular, crecimiento celular, interfase, mitosis, fase S, fase G1, fase G2, fase G0,
profase, prometafase, metafase, anafase, telofase, citocinesis, Cdks, ciclina, CAK, Cdc25, quinasa Wee1, p27, CIK,
ubiquitina ligasa, APC/C, securinas, separasa, proteosoma, SCF, origen de replicación, Cdc6, complejo pre-replicativo,
complejo de pre-iniciación, cohesinas p53, p21, Cdc25, Wee1.
El ciclo celular (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).

El ciclo celular es el mecanismo esencial por el cual todos los organismos vivientes se reproducen. Este proceso tiene
la función de traspasar información genética a las próximas generaciones donde una célula debe replicarse en forma
precisa para producir dos copias exactas. Todas las células para formar una nueva célula deben duplicarse y dividirse.
Sin embargo, este proceso es un sistema altamente regulado y comprende un circuito de proteínas controladoras o
reguladoras que dirige la progresión del ciclo celular. Estas proteínas funcionan como interruptores bioquímicos que
regulan el inicio de cada etapa. Estas etapas deben asegurar la correcta duplicación y segregación de los cromosomas.
Los procesos de control y regulación aumentan la fidelidad del ciclo celular y permite recibir señales tanto internas como
externas, las cuales mantienen un equilibrio dictando el comportamiento celular (Fig. 1).
Figura 1. Ciclo celular. Primero la célula crece y replica sus cromosomas para
luego pasar a una etapa de segregación celular y finalmente se produce la
división que da como resultados dos células hijas.
303
El ciclo celular en células eucarióticas se divide en fases, partiendo por el crecimiento celular y la duplicación de los
cromosomas. Esta duplicación de cromosomas ocurre en una fase llamada S (síntesis). Esta fase S requiere de 10 a 12
horas., ocupa cerca de la mitad del tiempo del ciclo celular. Luego viene la segregación cromosómica que permitirá la
distribución de los cromosomas a cada célula hija. Finalmente, se produce la división celular (durante mitosis o M). Esta
fase M es más rápida, tomando alrededor de 1 hora. La mitosis o M, tiene dos fases: (a) división nuclear o mitosis (b)
división citoplasmática o citocinesis (Fig.2).
Figura 2. Fase S y M. Durante la fase S se duplican los cromosomas.
Luego en fase M se produce, primero la división nuclear y luego la
división citoplasmática.
La fase M en sí está compuesta de varias etapas: profase, prometafase, metafase, anafase, telofase y finalmente la
división citoplasmática en la citocinesis. Temprano en M ocurre un estadio llamado profase, en el que el ADN del
cromosoma duplicado (en S) se desenrolla y condensa en dos pares compactos llamados cromátidas hermanas. Cuando
la envoltura nuclear desaparece durante mitosis (prometafase), las cromátidas hermanas se unen al huso mitótico.
Eventualmente todas las cromátidas hermanas se alinearán en la línea ecuatorial durante la metafase. Durante la anafase
se produce la destrucción de la cohesión de las cromátidas hermanas y se separan migrando hacia polos opuestos. El
desensamble del huso permite la segregación de los cromosomas. Luego en telofase se reestablece la envoltura nuclear y
se acentúa la invaginación entre las células que permitirá la citocinesis (Fig.3).
Figura 3. Mitosis y citocinesis. Se observan las etapas de M, profase, prometafase, metafase, anafase y telofase. La citocinesis comienza en anafase
y termina con la formación de dos células hijas.
Durante la interfase la célula crece en forma continua. En la fase M, se detiene el crecimiento y se produce la
división, primero el núcleo y después la célula. Pero la parte que toma más tiempo es la replicación del ADN, la que
está limitada a la parte de la interfase conocida como fase S. El ciclo comienza con la fase G1 (Gap 1), pasa a S y luego
a la fase G2 (Gap 2), el cual es el intervalo entre la fase S y la fase M. Las fases G son importantes para el crecimiento
de la célula y también para dar tiempo a la célula para detectar cambios y señales del interior y del exterior. En algunos
casos las células salen del ciclo celular a una etapa llamada G0, si las condiciones son desfavorables (falta de nutrientes)
o para diferenciarse (la mayor parte de las células de nuestro cuerpo están en G0). Esta salida del ciclo celular puede ser
permanente (ej. neuronas, células musculares esqueléticas, llamadas también postmitóticas) o reversible (ej. células del
304 hígado, linfocitos, fibroblastos).
Control del ciclo celular: Cdks-ciclina (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).
En cada una de las etapas del ciclo celular existen puntos de control, que funcionan como un reloj molecular que
dispara los eventos del ciclo celular en secuencia, de manera programada y en un solo sentido. Esto permite proveer de
un tiempo fijo para completar cada evento del ciclo. El sistema de control es independiente de los eventos que controla,
es decir, los mecanismos de control operan incluso si el evento al cual controla falla (Fig. 4A). De este modo, el control
del ciclo celular se basa en la conexión de una serie de interruptores biomoleculares, cada uno inicia un evento específico
del ciclo celular permitiendo aumentar la precisión y la fidelidad de la replicación.
Los interruptores que participan del ciclo son binarios (encendido/apagado) y por tanto disparan eventos de manera
completa e irreversible. Además, el control del ciclo celular es robusto y fiel y es altamente adaptable y puede ser
modificado en células específicas o también responder a señales intracelulares y extracelulares.
Durante la progresión del ciclo celular hay tres transiciones regulatorias (checkpoints): (1) inicio o punto de restricción
en G1 tardío: la célula entra al ciclo celular y comienza la duplicación cromosomal. (2) G2/M, el sistema de control
gatilla los eventos mitóticos tempranos que producen el alineamiento de los cromosomas en el huso durante metafase.
(3) Transición metafase-anafase, el sistema de control estimula a la separación de las cromátidas hermanas, llevando a
la célula a citocinesis.
El sistema de control del ciclo celular depende de proteínas quinasas ciclo-dependientes que se activan cíclicamente:
Cdks quinasas que son dependientes de ciclinas (cyclin-dependent kinases o Cdks). La actividad de estas quinasas sube y
baja durante el ciclo produciendo cambios cíclicos en la fosforilación de proteínas intracelulares que inician o regulan los
mayores eventos del ciclo celular. La actividad de las Cdks depende de un arreglo complejo de enzimas y otras proteínas
que regulan a estas quinasas. Las más importantes se conocen como ciclinas. Se llaman ciclinas porque sufren ciclos
de síntesis y degradación durante el ciclo celular. De modo que también activan de manera cíclica a las Cdks (Fig. 4B).
Las ciclinas se definen por la etapa del ciclo celular en el cual se unen a Cdks y a su función. Existen ciclinas
G1/S-ciclinas, que activan Cdks en G1 tardío gatillando el inicio o punto de restricción, entrada al ciclo celular. Su nivel
decae en la fase S para dar paso a S-ciclinas, las que se unen a las Cdks justo después de la progresión a través del inicio
y ayudan en la estimulación de la duplicación de los cromosomas. Estas ciclinas se mantienen hasta etapas tempranas
de M, cuando surgen las M-ciclinas que activan Cdks que estimulan la entrada a mitosis en el punto de control G2/M
(Fig. 5).
Figura 4. (A) Puntos de control y etapas en

ciclo celular y Cdk-ciclina. La figura muestra un
controlador que rota en el sentido de las manillas
del reloj, el cual enciende cada una de las etapas
esenciales del ciclo cada vez que pasa un punto de
control. Información sobre la finalización de cada
evento del ciclo y sobre el medio ambiente en el cual
está la célula puede hacer que la célula detenga el
ciclo celular en alguno de estos puntos de control.
Los más importantes se muestran en amarillo.
(B) Cuando la cicilina forma un complejo con la
quinasa dependiente de ciclina (Cdk) se activa la
función quinasa que permitirá gatillar diferentes
eventos del ciclo celular.
Referencia figura 17-14 y 17-15. Biología molecular
de la célula, quinta edición. (©Garland Science
305
Figura 5. Ciclina-Cdk en cada etapa. Las concentraciones de los tres tipos mayores de ciclina oscilan durante el ciclo celular, mientras que la
concentración de Cdk no cambia durante el ciclo celular. Al final de G1, sube la concentración de ciclina G1/S dando inicio a la formación de
G1/S-Cdk impulsando la progresión a través del primer punto de control. El complejo S-Cdk se forma al inicio de la fase S y gatilla la replicación
de los cromosomas y algunos eventos mitóticos tempranos. El complejo M-Cdk se forma durante G2, pero se mantiene inactivo hasta el final de
G2 donde ejerce su acción gatillando los eventos tempranos de mitosis. Otra proteína regulatoria llamada APC/C, que discutiremos más adelante,
regula el paso de metafase a anafase.
Las ciclinas no solo activan a su correspondiente Cdks, sino que también las dirigen a sus proteínas objetivo. Como
resultado cada complejo cilcina-Cdk fosforila un set diferente de proteínas y el mismo complejo ciclina-Cdk puede
inducir diferentes efectos en tiempos diferentes del ciclo. La activación completa de las ciclinas-Cdks ocurre cuando una
quinasa llamada activadora de Cdk o CAK, por sus siglas en inglés, fosforila a la Cdk causando un cambio conformacional
que incrementa la actividad de la Cdk (Fig. 6A).
6. Control del funcionamiento de las Ciclina-Cdk. (A) Activación total de Cdk mediante la fosforilación del sitio activo.
Figura
Nótese que necesita que la unión de ciclina-Cdk solo activa parcialmente a la Cdk, para la activación completa se necesita una
fosforilación adicional. (B) Inactivación de Cdk mediante una segunda fosfarilación por la quinasa Wee1, acción que puede ser
revertida por la fosfatasa Cdc25. (C) Activación de la proteína inactivadora de Cdk, p27, la que se une a la ciclina y a la Cdk que
forman el complejo.
Referencia figura 17-17, 17-18 y 17-19. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
No obstante, las Cdk pueden ser apagadas mediante una segunda fosforilación adicionado por la acción de una
quinasa llamada Wee1. Esta acción puede ser revertida por una fosfatasa llamada Cdc25, la cual remueve este fosfato
(Fig. 6B). Otra manera de suprimir la actividad de Cdk es mediante la unión de proteínas inhibitorias de Cdk (llamadas
CKIs). La célula de este modo, cuenta con mecanismos de regulación de la actividad en G1-S y S-Cdks desde el inicio
del ciclo celular (Fig. 6C).
306
El control del ciclo celular depende de la proteólisis cíclica (Capítulo 17, Alberts, et al.
2008).
La activación específica de los complejos ciclinas-Cdk guían la progresión a través del punto de inicio y los puntos
de control G2-M. La progresión a través de metafase-anafase no se gatilla por fosforilación de proteínas, sino por su
destrucción. El regulador clave en esta etapa es llamado complejo promotor de anafase o ciclosoma (anafase promoting
complex, o APC/C). APC/C es un miembro de la familia de las enzimas ubiquina ligasas, que estimulan la destrucción
de proteínas por el proteosoma.
APC/C cataliza la ubiquitinación de 2 complejos proteicos mayores: (a) destrucción de securin (securinas), que
normalmente protege a la unión proteica que mantiene juntas a las cromátidas hermanas en mitosis temprana (por
proteínas llamadas cohesinas). La destrucción de securin durante la transición metafase-anafase activa una proteasa,
llamada separasa, que media la separación de las cromátidas hermanas durante la anafase cortando las cohesinas (Fig.
7A); (b) las S-ciclinas y las M-ciclinas son el segundo blanco objetivo ya que las APC/C inactivan a la mayoría de
las Cdks de la célula mediante la ubiquitinación. Para esto APC/C se une a la subunidad activadora de la proteína
Cdc20 y con la ayuda de dos proteínas E1 y E2, une grupos ubiquitinas a las ciclinas mandándolas al proteosoma para
degradación (Fig. 7B). Muchas de las proteínas fosforiladas por las Cdks se desfoforilan por fosfatasas presentes en
anafase. Estas desfosforilaciones son necesarias para la progresión por M.
Figura 7. Control del ciclo por parte de APC/C. (A) Activación de APC/C por acción de Cdc20 promueve la destrucción de securina. Al ser
destruida securina, activa la enzima separasa que degrada las cohesinas que mantienen unidas las cromátidas hermanas. (B) APC/C es activado
por Cdc20, y con ayuda de las proteínas E1 y E2 se produce la ubiquitinación de las ciclinas y su subsecuente degradación en el proteosoma.
Inactivación de Cdk mediante la ubiquitinación mediado por APC/C.
Otra proteína ubiquina ligasa que controla el ciclo celular es SCF, este complejo ubiquitina proteínas CKI en G1
tardío permitiendo la activación de las Cdks de fase S (S-Cdks) y la replicación del DNA (Fig. 8).
Figura 8. Control proteólisis por SFC. La actividad de la ubiquitin ligasa SCF depende de la unión de la proteína a la CKI. Una vez que esto
sucede, se produce la fosforilación y ubiquitinación de CKI lo que la conduce a degradación.
307
De este modo, el ciclo celular funciona como una secuencia de interruptores bioquímicos que trabajan con otras
proteínas para hacer un sistema robusto, el cual opera esencialmente como mecanismo celular autónomo que activa
interruptores moleculares los que, a su vez, activan eventos específicos del ciclo celular en respuestas a señales internas y
externas (Fig. 9). El uso de mecanismos que involucran la destrucción de proteínas asegura que el ciclo celular siempre
transcurra en un solo sentido, sin posibilidad de devolverse al paso anterior.
Figura 9. Control del ciclo celular. El punto central del control del ciclo celular consiste en una serie de complejos ciclina-Cdk (en amarillo).
La actividad de estos complejos también induce una serie de procesos inhibitorios que promueven información sobre cómo la célula interpreta
el medioambiente extracelular, daño en el ADN, si el ADN ha sido completamente replicado o si el huso está unido a los cromosomas. Estos
mecanismos de control no están presentes en todas las células, por ejemplo, están ausentes en células embrionarias tempranas.
308
Inicio de la replicación y de la mitosis (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).
La replicación debe ocurrir con mucha precisión para minimizar los riesgos de mutación en la próxima generación.
Cada nucleótido en el genoma debe ser copiado solo una vez – evitando así riesgos de duplicación o amplificación. Como
se revisó anteriormente, la replicación se inicia en el origen de replicación (ORI) (en varios puntos del cromosoma en
el caso de las células eucariotas). Durante todo el ciclo celular el complejo de reconocimiento del origen de replicación
(ORC) permanece asociado con el ORI. En mitosis tardía y G1 temprano una proteína llamada Cdc6 estimula la
formación de un complejo pre-replicativo o pre-RC en el ORI dando paso a la replicación. Al inicio de la fase S, se
activan las S-Cdk que junto a otras proteínas quinasa orquestan la formación de un complejo aún mayor, llamado
complejo de pre-iniciación, el que desenrolla el ADN permitiendo la unión de la polimerasa y otras enzimas para la
replicación. La activación de la S-Cdk también promueve la degradación de Cdc6 y el desensamblaje del pre-RC en
el ORI hasta el próximo G1 evitando que se produzcan múltiples copias. Durante la fase de mitosis se activan M-Cdk
dando paso al inicio de la mitosis y deteniendo la fase S. Luego en anafase se estimula APC/C, la cual vuelve a estimular
la formación del complejo pre-RC dando comienzo a un nuevo ciclo (Fig. 10).
Las ciclinas S-Cdks estimulan el incremento en la síntesis de ADN, pero también la duplicación de la estructura
cromática al promover la duplicación de las 4 subunidades histónicas que forman el octámero-histona en el centro de
cada nucleosoma.
Otras proteínas esenciales en este proceso son las cohesinas, las que ayudan a mantener a las cromátidas hermanas
unidas después de que han sido replicados al final de la fase S (Fig. 11). Son precisamente estas cohesinas las que son
degradadas por la acción de separasa (liberada por la acción de APC/C).
Figura 10. Control de la duplicación cromosomal. La

preparación del ADN cromosomal para la replicación
comienza en G1 con el ensamble del complejo pre-
replicativo (preRC) en el origen de replicación. La
activación del complejo S-Cdk lleva a la formación del
complejo multiproteico llamado complejo de pre-iniciación
que ayuda a desenrollar al ADN y comienza la replicación y
al desensamblar del complejo preRC, el cual no se reformará
hasta una nueva fase G1. Se muestran dos horquillas de
replicación que irán abriendo y replicando el cromosoma por
completo. La segregación de cromosomas completamente
duplicados sucede en M.
Omega 2010).
Figura 11. Cohesinas. Formadas por cuatro subunidades a

modo de bisagra.
Omega 2010).
309
Control del ciclo celular: p53 y G2-M (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).
Los puntos de control del ciclo celular son esenciales para que ocurra de manera precisa y, por tanto, están ubicados en los puntos críticos del
ciclo. En G1 y S evitan que la célula entre o complete S si es que el ADN está dañado. En G2 previenen que la célula entre en mitosis (división del
núcleo y citocinesis) si es que el ADN está dañado o incompletamente replicado. El daño en el ADN causa un incremento en la concentración
y actividad de una proteína llamada p53. Esta proteína es un factor de transcripción que, a su vez, activa la transcripción de un gen que codifica
para una proteína inhibidora de Cdks llamada p21. Así, p21 se une a G1/S-Cdk previniendo continuar hacia la fase S. La detención en G1 le da
tiempo a la célula para reparar el ADN dañado antes de replicarlo (Fig. 12A). Si el daño es muy severo para ser reparado, p53 induce la muerte
de la célula (apoptosis o muerte celular programada). Por ende, si p53 falta, las células se replican acumulando un gran número de mutaciones lo
que resulta en cáncer.
Figura 12. Control del ciclo celular por p53 y retroalimentación positiva. (A) El daño en el ADN provoca la activación de proteínas quinasas que
fosforilan a p53 activándola. Normalmente p53 se une a otra proteína llamada Mdm2, la cual induce la degradación de p53 en el proteosoma. Sin
embargo, cuando p53 se fosforila no puede unirse a Mdm2. Como consecuencia, p53 se acumula en el citoplasma y luego en el núcleo activa la
transcripción de p21 que es una proteína inhibidora de Cdk (una CKI). (B) Retroalimentación positiva para el inicio de M. Cdk1 se une ciclina
M, el complejo resultante es solo parcialmente activo, se activa completamente cuando es fosfarilada por la quinasa activadora de Cdk (CAK), pero
al ser nuevamente fosforilada por Wee1 vuelve a inactivarse. Al final de G2 una fosfatasa Cdc25 remueve un fosfato activando completamente a
M-Cdk. La actividad de Cd25 es reestimulada por M-Cdk, la cual también inhibe la actividad de Wee1.
Otro punto de control se encuentra en G2 antes de M. Si se detectan daños en la célula una vez que la replicación
en S ha comenzado, se previene la entrada a M deteniéndose en G2 para la reparación. Los complejos ciclinas-Cdks se
inhiben si se fosforilan en ciertos sitios. Para que una célula progrese a M, ciclinas M-Cdk deben ser activadas mediante
la desfosforilación llevada a cabo por fosfatasas específicas. El punto de control inhibe esas fosfatasas, por tanto, el ciclo
celular no progresa. Cuando las células entran a G2 tienen gran cantidad de M-ciclinas pero estas están inactivas por
acción de Wee1, siendo Cdc25 la encargada de reactivar el ciclo. La capacidad que tienen las propias ciclinas M-Cdks
de activar a Cdc25 e inactivar a Wee1 crea una poderosa retroalimentación positiva (Fig. 12B).
310
CUESTIONARIO 1
DEL CICLO
1.- Responda las siguientes preguntas
a) ¿Cómo sabe la célula en qué etapa del ciclo celular se encuentra?
b) ¿Qué puntos de control existen durante el ciclo?
c) ¿Qué requiere una Cdk para activarse?
d) ¿Cómo se puede desactivar la actividad de una Cdk?
e) ¿Qué actividad tiene APC/C y SFC?
2.- Complete el siguiente esquema
311
3.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre 11 palabras revisadas en esta guía.
312
313
314
2
CRECIMIENTO, DIVISIÓN Y MUERTE
CELULAR
RESUMEN
La mitosis forma parte del ciclo celular, siendo la etapa que ocurre después del término de la interfase (fases G1, S
y G2). La mitosis es corta en comparación con la interfase, y su función es permitirle a la célula dividirse en dos células
hijas iguales. La mitosis está compuesta de varias etapas llamadas: profase, prometafase, metafase, anafase, telofase y
finalmente la división citoplasmática en la citocinesis. Para que la mitosis ocurra, debe ocurrir un re-arreglo importante
del citoesqueleto y debe desaparecer la membrana nuclear, la cual se reestablece una vez culminada la mitosis.
El que la célula pueda dividirse, es muy importante para que un organismo crezca y regenere sus tejidos, pero a su vez,
el control del tamaño celular y de un órgano dentro de un organismo multicelular, también depende en gran parte del
crecimiento celular y del balance, entre el número de nuevas células y de la muerte de otras. En este capítulo, revisaremos
cómo estos procesos se mantienen en equilibrio en los organismos multicelulares, y cómo estos son esenciales para el
desarrollo y homeostasis.
Palabras clave: mitosis, interfase, cromátidas, condensina, profase, prometafase, metafase, anafase, telofase, citocinesis,
cinetocoros, huso mitótico, microtúbulos, centriolos, fragmoplasto, crecimiento celular, división celular, sobrevivencia
celular, muerte celular, mitógenos, factor de crecimiento, E2F, Myc, p53, TGF-β, senescencia replicativa, vía TOR,
factores de sobrevivencia, apoptosis, caspasas, apoptosoma, citocromo C, necrosis, vía extrínseca, Fas, vía intrínseca.
Mitosis (M) (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).

La mitosis o fase M, se extiende por aproximadamente una hora, siendo la etapa más dramática del ciclo celular. En
este período, se reorganiza y se reparte el material genético y los organelos a dos células hijas. El problema central de la
fase M, es segregar correctamente los cromosomas que fueron replicados en S, de manera que cada célula hija reciba una
copia idéntica del genoma. Para resolver este problema el citoesqueleto primero separa los cromosomas duplicados hacia
los polos de la célula (durante mitosis) y luego divide el citoplasma en dos mitades (citocinesis).
Las ciclinas M-Cdks promueven la condensación de los cromosomas replicados a compactar cromátidas para facilitar
la segregación, al igual que inducen el ensamblaje del huso mitótico, el que separará a los cromosomas segregándolos
hacia 2 células hijas. El proceso de condensación comienza con la fosforilación de las subunidades de las proteínas
llamadas condensinas (proteínas de estructura similar a las cohesinas) (Fig. 1).
Figura 1. Condensina y condensación de los

cromosomas. (A) Condensina. (B) Cromosoma
condensado.
Referencia figura 17-27 y 17-26. Biología
315
Las etapas de fase M son 6: profase, prometafase, metafase, anafase y telofase, constituyen mitosis. Finalmente, la
citocinesis, la cual comienza en anafase y se materializa después de telofase dividiendo el citoplasma.
Profase: se condensa el material genético (ADN), compacta cromátidas, se forman los cromosomas y se desarrolla
huso mitótico. Comienza la migración de los centrosomas hacia extremos opuestos de la célula. Los microtúbulos se
desestabilizan y se organizan en el huso mitótico (Fig.2A).
Prometafase: en esta fase comienza a desorganizarse la envoltura nuclear producido por la fosforilación y
desensamblaje de las proteínas de los filamentos intermedios de la lámina nuclear. Los microtúbulos del huso mitótico
pueden unirse a los cromosomas mediante sus cinetocoros y empezar a moverse activamente (Fig. 2B).
Metafase: los cromosomas se alinean en el ecuador de la célula, a mitad de camino entre los polos del huso mitótico.
Los microtúbulos cinetocóricos se unen a las cromátidas hermanas y a los polos opuestos del huso (Fig. 2C).
Anafase: las cromátidas hermanas se separan de forma sincrónica formando los dos cromosomas hijos, cada uno es
arrastrado hacia el polo del huso al que está adherido. Los microtúbulos cinetocóricos se acortan y los polos del huso
también se separan. Ambos procesos contribuyen a la segregación de los cromosomas (Fig. 2D).
Telofase: las dos dotaciones de cromosomas hijos llegan a los polos del huso y los cromosomas comienzan a
descondensarse. Se reorganiza de nuevo la envoltura nuclear formando dos núcleos, lo que marca el fin de la mitosis. El
citoplasma acentúa su constricción o anillo contráctil llevada a cabo por filamentos de actina y miosina (Fig.2E).
Citocinesis: el citoplasma se divide en dos por acción del anillo contráctil dando como resultado dos células hijas con
un núcleo e igual dotación cromosómica (Fig. 2F).
A B C
D E F
Figura 2. Fase M. Mitosis: (A) Profase, (B) Prometafase, (C) Metafase, (D) Anafase, (E) Telofase; (F) Citocinesis.
Referencia panel 17-1. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
316
El citoesqueleto durante la mitosis (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).
El huso mitótico es esencial para la división del material genético. Durante la anafase, el huso mitótico forma
un arreglo bipolar de microtúbulos que empuja a las cromátidas hermanas aparte. Como fue explicado en la Unidad
III, los tres tipos del huso que participan durante el proceso, son los microtúbulos astrales, cinetocóricos y polares; y
también participan proteínas motoras que se asocian a los microtúbulos. El huso comienza a formarse en el centrosoma
(principal centro de organización de microtúbulos de la célula), promovido por M-Cdk, la cual fosforila proteínas
asociadas a microtúbulos influenciando su estabilidad. Luego se replican los centriolos y comienzan a migrar hacia los
polos (Fig. 3). Durante la prometafase los microtúbulos se unen al cinetocoro de los cromosomas y la membrana nuclear
se desensambla al fosforilarse las proteínas del poro nuclear y la lámina nuclear. Estas fosforilaciones desestabilizan
a las proteínas del poro y a los filamentos intermedios de la lámina nuclear adheridos a ellas. Durante la telofase se
reestablecerá la envoltura nuclear nuevamente. La división citoplasmática se produce por la acción de un anillo contráctil
alrededor del ecuador de la célula formado por filamentos de actina y miosina. Este anillo se comienza a formar debajo de
la membrana plasmática al final de la mitosis (Fig. 2E). Finalmente, estos filamentos invaginan la membrana dividiendo
a la célula en dos (Fig.2F).
Figura 3. Centriolos en replicación. El centrosoma
consiste en un par de centriolos asociados a la matriz
pericentriolar (en verde). En cierto punto de G1, los
centriolos comienzan a separarse. Durante S, centriolos
hijos comienzan a crecer cercano a los centriolos
originales. Para G2, los nuevos centriolos han crecido. Los
dos pares de centriolos permanecen juntos en el mismo
complejo centrosomal hasta el comienzo de la fase M
donde comienza a separarse. Cada centrosoma ensambla
sus propios microtúbulos.
Referencia 17-31. Biología molecular de la célula, quinta
edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega
2010).
De este modo, podemos identificar al menos tres tipos de fuerzas que ejerce el citoesqueleto durante la segregación
de los cromosomas. La primera es la fuerza que ejercen los microtúbulos debido a la despolarización de los microtúbulos
en el cinetocoro (Fig. 4A). La segunda es la fuerza del flujo microtubular, en el cual los microtúbulos mismos son
movilizados hacia el polo del huso y en donde el microtúbulo se desmantela en el extremo terminal (-) y nueva tubulina
se adiciona al extremo terminal (+), cercana al cinetocoro, para compensar (Fig. 4B). Esto genera una fuerza que ayuda
en el tiraje de los cromosomas. La tercera fuerza es de expulsión polar ejecutada por proteínas quinesinas y motoras en
el extremo del cromosoma interactúan con el huso interpolar y transportan al cromosoma lejos de los polos (Fig. 4C).
A B C
Figura 4. Fuerzas ejercidas durante mitosis. (A) Fuerza en el cinetocoro. El microtúbulo se adhiere al cinetocoro. Una estructura en forma de collar
permite la polimerización y despolimerización del extremo expuesto (+). La despolimerización impulsa al cinetocoro hacia el polo. (B) Fuerza del
flujo microtubular. A pesar de que la despolimerización del microtúbulo debería acortarlo progresivamente, esto no sucede porque se compensa
con la adición de nueva tubulina en el término (+), a la misma velocidad que subunidades de tubulina se pierden en el extremo terminal (-). Sin
embargo, este flujo provoca tensión que ayuda a la segregación de los cromosomas. (C) Fuerza de expulsión polar. Estas fuerzas opuestas cooperan
para contribuir con la segregación de los cromosomas.
Referencia 17-40, 17-41 y 17-42 Biología molecular de la célula, quinta edición. (ÓGarland Science 2008 y Ediciones Omega 2010). 317
La biorientación de los cinetocoros genera tensión, y estas señales de tensión indican si la adhesión del huso al
cinteocoro es correcta o no. Básicamente es un ensayo de prueba y error basada en tensión y estabilidad. El correcto
ensamblaje no solo incrementa la afinidad por la adhesión, sino que también induce a otros microtúbulos a adherirse. La
tensión depende de una quinasa llamada Aurora-B, asociada al cinetocoro (Fig. 5).
Figura 5. Adhesión del huso al cinetocoro.

2010).
Durante metafase los cromosomas se alinean en la placa ecuatorial celular – a medio camino de cada polo- generando
la placa metafásica. Se cree que en este proceso participan tanto el continuo alargamiento y acortamiento del huso
mitótico, como la acción de proteínas motoras.
Durante anafase, como vimos en el capítulo anterior, la proteólisis generada por la separasa dispara la separación de
cromátidas hermanas completando la mitosis. Los cromosomas hijos son arrastrados hacia los polos por despolimerización
de los microtúbulos en el cinetocoro y los dos polos del huso también se separan entre sí. En esta etapa, la célula en
división debe asegurarse de que todos los cromosomas se hayan adherido correctamente al huso mitótico antes de
completar mitosis. De lo contrario la célula deberá inhibir el progreso de mitosis mediante el bloqueo de APC/C. Sin
APC/C, las cromátidas hermanas no se separan, es por esto que este es un punto de control entre metafase y anafase.
Finalmente, el anillo contráctil comienza a formarse hasta que logra separar a la célula en dos células. En células
vegetales, en cambio, la citocinesis involucra la formación de una nueva pared celular en vez de la acción del anillo
constrictor. La posición de esta nueva pared determina la posición de las dos células hijas respecto de sus células vecinas.
El proceso de ensamblaje es guiado por una estructura llamada el fragmoplasto, el que se forma de los remantes de los
microtúbulos interpolares.
Los organelos encerrados en membrana deben distribuirse en las dos células hijas cuando la célula se divide.
Organelos como la mitocondria y los cloroplastos no pueden ensamblarse espontáneamente a partir de sus componentes
individuales. Tanto las mitocondrias como los cloroplastos tienen su propio ADN y proteínas y pueden dividirse de
manera independiente a la mitosis de la célula. Las células tampoco pueden hacer un nuevo retículo endoplásmico o
aparato de Golgi, a menos que ya existan algunas partes prexistentes. El retículo endoplásmico en las células interfásicas
es continuo con la membrana nuclear. Una vez que entra en M, la reorganización de los microtúbulos libera al retículo
endoplásmico, el cual permanece intacto hasta que es cortado en dos durante la citocinesis. Del mismo modo, el aparato
de Golgi se fragmenta durante mitosis y los fragmentos se asocian a microtúbulos del huso mediante proteínas motoras,
lo que le permite distribuirse a las células hijas durante anafase.
Control del crecimiento celular y tamaño (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).
Como hemos visto, el proceso de división celular es esencial para construir tejidos, reemplazar células e incluso
construir un organismo completo a partir de un huevo recién fecundado. El ciclo celular es un proceso muy regulado en
el cual participan muchas proteínas. Sin embargo, las células animales solo pueden dividirse un número limitado de veces,
lo que se denomina senescencia replicativa. Cuando las células experimentan esta senescencia replicativa se diferencian o
mueren. De este modo, el número de células que presentará un organismo depende del equilibrio entre la división celular
y la muerte celular. Este balance también influencia el tamaño que podrían alcanzar ciertos órganos o la expansión de
ciertos tejidos. El control del tamaño de los órganos del cuerpo es esencial para los organismos multicelulares. Como se
controla el tamaño es una pregunta que aún está bajo intensa investigación. Básicamente, podemos decir que el tamaño
de un órgano o de un organismo depende de su masa celular, lo cual, a su vez, depende del número total de células y del
tamaño de esas células, es decir, del crecimiento, división y muerte celular.
318 En bacterias y en otros organismos unicelulares, el crecimiento y la división celular está regulado principalmente
por la disponibilidad de nutrientes en el medio. Sin embargo, en organismos multicelulares esto no es suficiente. Hay
varias señalizaciones extracelulares (moléculas señalizadoras) que regulan el número y tamaño celular. En este sentido
podemos destacar: (1) mitógenos, (2) factores de crecimiento y (3) factores de sobrevida, que se explican a continuación.
1. Mitógenos: son factores que promueven la división celular a través de señales de división celular (gatillando una
ola de actividad G1/S-Cdk), la que es entregada en forma de mitógenos usualmente desde células vecinas. Ejemplos
de mitógenos son: factor de crecimiento derivado de plaqueta (platelet derived-growth factor, o PDGF)), y factor de
crecimiento epidermal (epithermal growth factor, EGF) (Fig. 6). En la figura 6, se observa cómo un mitógeno activa la vía
de señalización a través de la activación de una GTPasa monomérica llamada Ras. Como vimos en la Unidad III, Ras
activa quinasas como MAP. La señal resulta en la expresión del factor de transcripción llamado Myc, el cual incrementa
la producción de G1-Cdk, la que fosforila a la proteína retinoblastoma (Rb). Esta fosforilación resulta en la liberación
de E2F que promueve la entrada al ciclo celular mediante una retroalimentación positiva.
Señales de proliferación anormales pueden causar detención del ciclo celular en vez de activación. Por ejemplo, la
activación excesiva de Myc también inactiva a Mdm2. Al inactivar Mdm2, p53 se activa produciendo la detección del
ciclo celular o induciendo la muerte de la célula (Fig. 7).
Figura 6. Acción de mitógeno. Los mitógenos se unen

a receptores en la membrana de la célula para iniciar
una cascada de señalización. La principal cascada es
vía Ras, una GTPasa que activa a una quinasa llamada
MAP. MAP activa a proteínas reguladoras que inducen
la expresión de Myc, el que, a su vez, induce la expresión
de G1-Cdk. Este complejo ciclina-Cdk fosforila a Rb, la
cual libera a E2F, induciendo la entrada al ciclo celular
ya que E2F es capaz de promover la transcripción de
genes de la fase S. Además, una vez que se producen
S-Cdk, estas promueven una retroalimentación positiva.
2010).
Figura 7. Activación de p53 por sobreexpresión de Myc.

La sobreexpresión de Myc activa la proteína Arf, la que a
su vez inactiva a Mdm2. Así p53 puede incrementar sus
niveles y ejercer su función.
2010).
319
2. Factores de crecimiento: estimulan el crecimiento celular e incrementan la masa celular promoviendo la síntesis
de proteínas y otras macromoléculas e inhibiendo la degradación. Son moléculas señalizadoras extracelulares produci-
das por otras células capaces de activar vías de señalización, como la vía TOR (Fig. 8). Es importante notar, que tam-
bién existen señales que inhiben la acción de los factores de crecimiento como, por ejemplo, la proteína TGFβ.
Figura 8. Efectos de los factores de crecimiento mediante
la activación de la vía TOR. Un factor de crecimiento
se une a un receptor activándolo. El receptor fosforilado
activa a una PIP3 quinasa la cual activa la proteína quinasa
TOR. TOR es una quinasa, puede activar a otras proteínas
reguladoras promoviendo el crecimiento celular y la síntesis
de proteínas.
Referencia 17-65 y 17-68. Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
3. Factores de sobrevida: promueven la sobrevivencia celular suprimiendo la muerte celular programada (apoptosis).
La sobrevivencia y la muerte son esenciales en la existencia de cualquier organismo o tejido. El mecanismo llamado
apoptosis, o muerte celular programada, ayuda a regular el número de células. En los tejidos adultos la muerte celular se
equilibra con la división celular, a menos que el tejido esté en expansión o en reducción. Los factores de sobrevivencia
como las proteínas de la familia Bcl2 le permiten a la célula evadir la muerte. Se unen a receptores en la superficie celular
y gatillan señales intracelulares, lo que reprime el programa de muerte celular (Fig. 9).
Figura 9. Efectos de factores de sobrevida. Un factor de
sobrevida Bcl2 se une a un receptor activando una vía de
señalación que induce la expresión de la proteína Bcl2, la
que bloquea la muerte celular programada.
2010).
320
Muerte celular (Capítulo 17, Alberts, et al. 2008).
La apoptosis corresponde a una muerte celular programada que involucra una cascada proteolítica intracelular. Una
célula que muere por apoptosis puede ser fagocitada por macrófagos y sus componentes pueden ser reciclados. Además,
de ayudar en el control del número celular, la apoptosis es un mecanismo por el cual organismos multicelulares pueden
eliminar células que ya no se necesitan. Por ejemplo, ayuda a moldear los dedos en el desarrollo de las patas del ratón y
en las manos y pies humanos. También, ayuda a eliminar la cola en los renacuajos durante la metamorfosis o eliminar
neuronas redundantes.
La apoptosis se desencadena en respuesta a estímulos que activan dos vías: vía intrínseca y la vía extrínseca. En el
caso de la vía extrínseca de activación, la célula presenta un receptor en su membrana plasmática llamado Fas. Células del
sistema inmune como Natural Killer (NK) o linfocitos reconocen a Fas mediante un ligando y activan una señalización
que permite reclutar unas proteínas llamadas caspasas. Las caspasas son proteasas sintetizadas en forma inactiva, como
procaspasas, que por medio de proteólisis se activan (Fig. 10A). La proteólisis puede ser llevada a cabo por otras caspasas,
estableciéndose una cascada de caspasas (Fig. 10B). Las caspasas efectoras hidrolizan proteínas celulares como lamininas
y proteínas citosólicas, llevando a la célula a una muerte controlada. De modo que cuando una célula NK presenta el
ligando Fas y una célula tiene el receptor de Fas se activa la apoptosis (Fig. 11).
Figura 10. Caspasas. (A) Activación proteolítica de caspasas. Cada caspasa inicialmente es sintetizada en una forma inactiva llamada procaspasa.
Las caspasas, generalmente se activan por una escisión proteolítica realizada por otra caspasa activada. Esta escisión corresponde al corte de
prodominios, los dos fragmentos que quedan de la procaspasa se unen formando una caspasa activa. (B) Cascada de caspasas. La primera procaspasa
que se activa se denomina procaspasa iniciadora que al sufrir la escisión se activa y es capaz de activar a otras procaspasas (ejecutoras) que generan
una casada irreversible de activación.
Referencia 18-05. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
321
Figura 11. Activación de la vía extrínseca de la apoptosis. El ligando Fas en la membrana de un linfocito citotóxico se une a un receptor Fas de
muerte en la membrana de la célula blanco. La parte citosólica del receptor activado Fas recluta a la proteína adaptadora FADD, la cual une a la
procaspasa iniciadora formando un complejo (DISC) que induce la señalización para la muerte. Una vez que la procaspasa iniciadora se activa,
induce a la cascada de activación de procaspasas ejecutoras.
Referencia 18-06. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
En cambio, la activación de la vía intrínseca (o mitocondrial) de la apoptosis se produce cuando las mitocondrias
liberan citocromo c al citosol. El citocromo c se une y activa a la proteína Apaf1 que inicia la apoptosis. Apaf1 se une
con otras Apaf1 unidas a citocromo c formando una estructura llamada apoptosoma, el activa procaspasas iniciadoras
iniciando la cascada de activación (Fig. 12).
La activación de caspasas produce la pérdida de la asimetría fosfolipídica de la membrana plasmática, haciéndola más
permeables a partículas pequeñas. La célula se separa en pequeños fragmentos cubiertos de membrana llamados cuerpos
apoptóticos. Finalmente, los restos de la célula son fagocitados por un macrófago.
Una de las grandes diferencias de la apoptosis con respecto a la necrosis, es que la necrosis es una muerte por autolisis
prematura provocada por un agente nocivo donde hay compactación del núcleo y rotura de la membrana, con lo cual se
pierden los organelos y se genera una respuesta inflamatoria destructora.
Figura 12. Activación de la vía intrínseca de la apoptosis. La unión del citocromo c a Apaf1 causa la hidrólisis de su dATP a dADP. Este cambio
induce la formación de un complejo de mayor tamaño llamado apoptosoma, el cual recluta procasapasas iniciadoras, facilitando su activación y
produciendo una cascada de caspasas que induce la apoptosis.
322 Referencia 18-08. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
CUESTIONARIO 2
CRECIMIENTO, DIVISIÓN Y MUERTE
CELULAR
Horizontal
3 Apaf1 se junta con otras Apaf1 unidas a citocromo C formando una estructura llamada
6 Activación de la vía extrínseca de la apoptosis depende de
7 Tienen un rol importante en la condensación de los cromosomas
8 La proteína EFG corresponde a un factor de
Vertical
1 Es una muerte celular programada
2 Proteínas de la familia Bcl2 corresponde a un factor de
4 Las caspasas se activan por porteólisis de una
5 Durante esta fase se desensambla la envoltura nuclear
9 Myc es un factor de transcripción que corresponde a un 323
2.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre 9 palabras revisadas en este capítulo.
324
3.- Complete el siguiente cuadro comparativo entre Necrosis y apoptosis colocando una “x” donde corresponda.
Características Necrosis Apoptosis
Condensación del núcleo
Desintegración de la cromatina
Formación de cuerpos apoptóticos
Desintegración de organelos
Fragmentación del ADN
Depende de energía
325
326
3
MEIOSIS Y CICLO VITAL EN
ORGANISMOS EUCARIONTES
RESUMEN
La reproducción asexual es directa, simple y origina un nuevo organismo idéntico al organismo parental. Por ejemplo,
organismos unicelulares pueden reproducirse por división mitótica, algunas plantas y las hidras pueden propagarse a
partir de una proporción de tejido de la planta original. Los gusanos pueden partirse por la mitad y a partir de cada una
se puede volver a formar un organismo completo. En todos los casos mencionados anteriormente, el organismo que se
produce es igual al original. En cambio, en la reproducción sexual la progenie producida se diferencia de los organismos
parentales y de otros organismos de la misma progenie. Esto se debe a que durante la reproducción sexual se produce
la combinación de genomas de dos organismos parentales. Este tipo de reproducción parece presentar numerosas
ventajas, y en consecuencia muchos organismos (animales y plantas) lo han adoptado. En este capítulo describiremos la
reproducción sexual y el proceso de meiosis que lo hace posible.
Palabras clave: reproducción asexual, reproducción sexual, variación, meiosis, haploide, diploide, alelos, cromosomas
homólogos, entrecruzamiento, crossing over, leptoteno, cigoteno, paquiteno, diploteno, diacinesis, complejo sinaptonémico,
quiasmas, no-disyunción, síndrome de Down, células germinales primordiales, células de Sertoli, testosterona,
progesterona, ovogénesis, espermatogénesis, fecundación, reacción acrosómica, reacción cortical.
Reproducción sexual y asexual (Capítulo 21, Alberts et al., 2010).

La fusión de dos células, una materna y otra paterna, refleja el evento central de la reproducción sexual. Este acto
produce organismos diferentes en un proceso más complejo, que sólo la transmisión de información genética, como
sucede en la reproducción asexual. La hidra, un invertebrado, se reproduce de manera asexual generando brotes, que dan
origen a un organismo idéntico al parental (Fig. 1A). Los mamíferos, en cambio, generan descendencia por reproducción
sexual, combinando la información genética de un espermatozoide y un óvulo (Fig. 1B), lo que producirá un organismo
diferente a los progenitores.
Figura 1. Tipos de reproducción. (A) Hidra,

reproducción asexual mediante brotes. (B)
Reproducción sexual en humanos mediante
gametos.
Referencia, Figura 21-01. Biología molecular
327
La reproducción sexual involucra la fusión de dos células, llamada gametos. Los gametos provienen de células diploides,
de la línea germinal como, por ejemplo: espermatogonias y ovogonias; que se transformarán en espermatozoides y
óvulos, respectivamente. Los gametos son células haploides, altamente especializadas, generadas por un tipo de división
celular llamado meiosis (Fig. 2A). Todas las otras células de un organismo, son diploides y se conocen como células
somáticas. Una célula haploide no se divide y sólo permanece como célula haploide por un corto período de tiempo.
La fusión de dos gametos durante la reproducción sexual, involucra la fusión de dos núcleos haploides generando una
célula diploide llamada zigoto. El zigoto resultante seguirá un proceso denominado segmentación (varias divisiones
mitóticas consecutivas) y especialización celular, para formar el futuro embrión (Fig. 2A). Algunos organismos haploides
(eucariotas inferiores) como el alga verde Chlamydomonas, utilizan otra estrategia en la cual proliferan como haploides
a través de mitosis, pero se reproducen sexualmente formando un zigoto diploide que subsiste transitoriamente después
de la fecundación, para luego realizar meiosis produciendo cuatro células haploides genéticamente diferentes, las que
nuevamente pueden multiplicarse por mitosis (Fig. 2B).
La reproducción sexual permite la aparición de nuevos genotipos (combinaciones de genes) que pueden ser ventajosos
para una mejor adaptación, permitiéndole al organismo sobrevivir en un ambiente determinado. Sin embargo, es natural
también que ocurran mutaciones que produzcan alelos desventajosos. La reproducción sexual disminuye ese riesgo, ya
que siempre se selecciona el mejor conjunto genético posible.
Figura 2. Diferencias entre el crecimiento de organismos diploides y haploides. (A) Meiosis y reproducción sexual mediante gametos. (B)
Organismos haploides con una corta fase diploide.
Referencia, Figura 21-03. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
328
Meiosis (Capítulo 21, Alberts et al., 2010).
El proceso de meiosis en mamíferos ocurre en los testículos y ovarios, que son los lugares donde residen las células
de la línea germinal. El proceso de meiosis comienza con una ronda de replicación de ADN, que duplica todos los
cromosomas en la célula precursora de la línea germinal. De modo que esta célula pasa de ser 2n/2c a 2n/4c, donde “n”
corresponde al número de juegos cromosómicos (ploidía) –uno paterno y otro materno- y “c” corresponde a la cantidad
de ADN en una célula haploide, en este caso al duplicar los cromosomas cada par de homólogos tiene 4c (Fig. 3).
Durante este proceso, los cromosomas homólogos permanecen asociados, lo que asegura la correcta segregación de los
cromosomas homólogos durante las divisiones celulares de manera que cada gameto recibe finalmente un set haploide
completo.
Figura 3. Ploidía y cantidad de ADN. Se observa a modo de
ejemplo un núcleo diploide (2n) con un par de cromosomas
homólogos, materno (m) en azul y paterno (p) en rojo. Al
principio este núcleo hipotético cuenta con sus cromosomas
no duplicados 2c, pero luego al replicar sus cromosomas, su
cantidad de ADN su duplica, 4c.
La reducción de ADN diploide a haploide ocurre porque esta ronda de duplicación, es seguida de dos divisiones
celulares sucesivas. Así, al final de las dos divisiones celulares se producen 4 células haploides, genéticamente diferentes
(Fig. 4A). En cambio, la mitosis produce solo dos células idénticas a la original (Fig. 4B). La meiosis, toma mucho
más tiempo que la mitosis (por ejemplo, el proceso en humanos macho requiere de 24 días y en hembras puede durar
décadas).
Figura 4. Diferencias entre meiosis y mitosis. (A) En la
meiosis después de la replicación del ADN, son necesarias
dos divisiones para producir gametos haploides. En la
meiosis I, los homólogos están formados por cromátidas
hermanas duplicadas, estrechamente unidas. Durante
profase I, se aparean y luego segregan a distintas células
hijas. En la meiosis II, se separan las cromátidas hermanas.
Cada célula diploide que entra en meiosis produce
cuatro células haploides genéticamente distintas. (B) En
la mitosis en cambio, los homólogos no se aparean y las
cromátidas hermanas se separan durante una sola división.
En consecuencia, cada célula diploide que se divide por
mitosis da lugar a dos células hijas genéticamente idénticas
a la original. En la figura se ejemplifica solo un par de
cromosomas homólogos.
Referencia, Figura 21-05. Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
329
La meiosis, se clasifica en primera división meiótica (o meiosis I) y segunda división meiótica (meiosis II). En la
meiosis I, ocurre un fenómeno llamado entrecruzamiento (crossing over), en el cual, parte de los cromosomas homólogos,
intercambian segmentos entre sí. En esta etapa, también se separan los cromosomas homólogos (paternos y maternos),
segregando al azar en las células hijas (Fig. 4A). Esta primera división genera dos células haploides (n) con su material
genético duplicado 2c. La meiosis I, se divide en profase I, metafase I, anafase I y telofase I. Además, la profase I se
subdivide en cinco fases: leptoteno, cigoteno, paquiteno, diploteno y diacinesis (Fig. 5A). En leptoteno, los cromosomas
se ven como hebras finas desapareadas que consisten en dos cromátidas hermanas unidas entre sí. Luego, se emparejan
para que, en el cigoteno, los homólogos materno y paterno comiencen a asociarse para formar bivalentes (Fig. 5B). Así,
comienza a formarse el complejo sinaptonémico, en sitios donde los homólogos están estrechamente asociados para que
ocurran eventos de recombinación. En paquiteno, el proceso de ensamblaje del complejo sinaptonémico está completo y
los cromosomas homólogos permanecen en sinapsis a lo largo de toda su longitud, produciéndose el entrecruzamiento o
crossing over, proceso en el cual, parte de los cromosomas homólogos intercambian segmentos entre sí, proporcionando
variación genética al futuro gameto. El complejo sinaptonémico, mantiene a los pares homólogos juntos y los alinea,
facilitando que la recombinación ocurra entre cromátidas no hermanas (Fig. 5C). También sirve para espaciar los eventos
de recombinación en cada cromosoma.
Posteriormente, comienza el diploteno, donde los cromosomas homólogos se separan, se desmontan los complejos
sinaptonémicos y los cromosomas se condensan y acortan, pero se mantienen unidos por un quiasma o quiasmata,
estructura que refleja el entrecruzamiento entre las cromátidas no hermanas (Fig. 5B, 6A). En diacinesis, los cromosomas
se condensan preparándose para las siguientes fases. Es durante la etapa de anafase I, que cada cromosoma homólogo
duplicado migra hacia cada polo (Fig. 4A). Dado que la orientación de los pares homólogos es al azar, la distribución
de cromosomas paternos y maternos en cada gameto es diferente, constituyendo otra fuente de variación (Fig. 6B).
En consecuencia, pueden existir 2n gametos diferentes, siendo n = el número haploide de cromosomas. Por ejemplo,
en humanos el número haploide es 23 cromosomas, por lo tanto, n=23, pudiendo producir 223 gametos distintos
(223=8.388.608), solo por la distribución al azar de los cromosomas homólogos y sin considerar la variación genética
introducida por el crossing over.
Durante profase I, la envoltura nuclear se desintegra y se forma el huso mitótico que se fija a los cromosomas bivalentes.
En la metafase I, los cinetocoros de las cromátidas hermanas están fusionados entre sí, de modo que los microtúbulos
del huso mitótico al unirse al cinetocoro de los cromosomas bivalentes, arrastra a cada cromosoma homólogo a un polo
distinto (Fig. 7A). En consecuencia, la manera en que los cromosomas se disponen en el ecuador no es igual a como
sucede en mitosis, ya que como los quiasmas mantienen unidos a los cromosomas homólogos, obliga a que éstos a que
se ordenen uno al lado del otro y no uno detrás del otro como sucede en mitosis (Fig. 7B). Los cromosomas homólogos,
son separados hacia polos opuestos en anafase I, pero las cromátidas hermanas se mantienen unidas hasta la siguiente
división (Fig. 7C).
Finalizada la primera división meiótica, cada célula queda con un núcleo con un miembro de cada par de homólogo,
por lo tanto, es un núcleo haploide. Por lo general, la citocinesis ocurre en paralelo con esta etapa. Hay muy poca o
ninguna interfase entre meiosis I y la meiosis II.
330
Figura 5. Profase I. (A) Etapas de profase I, (B)
La estructura formada por dos cromosomas
homólogos estrechamente alineados,
llamado bivalente. En el bivalente, las
cromátidas hermanas de cada homólogo están
estrechamente conectadas en toda su longitud.
Los homólogos generalmente están unidos
entre sí por un complejo proteico llamado
complejo sinaptonémico o sinaptinémico. A la
derecha se observa un entrecruzamiento entre
dos cromátidas no hermanas evidenciado
por un quiasma, el cual se observa cuando el
complejo sinaptonémico se desorganiza y los
pares de homólogos se separan un poco, al
final de la profase I. (C) Esquema simplificado
de un complejo sinaptonémico. Se observan
proteínas cohesinas sosteniendo a la cromatina
de las cromátidas hermanas de cada homólogo.
Además, se ve el eje interno de los homólogos
y los filamentos transversos que forman parte
estructural de este complejo proteico llamado
sinaptonémico.
Referencia, Figura 21-06 y 21-08. Biología
2010).
Figura 6. Entrecruzamiento y segregación de

cromosomas, fuentes de variación genética de
los organismos que se reproducen sexualmente.
(A) El entrecruzamiento durante paquiteno
permite el intercambio de segmentos
de DNA entre cromosomas homólogos
contribuyendo a la variabilidad genética. (B)
Debido a que la segregación de cromosomas
homólogos es al azar se producen 2n gametos
haploides diferentes para un organismo con n
cromosomas. En este caso n = 3, por lo que
existen 23= 8 posibles gametos diferentes.
Referencia, Figura 21-13. Biología molecular
331
Figura 7. Alineamiento de los cromosomas en metafase I. (A) Mitosis. Los cromosomas se distribuyen uno detrás del otro. (B) En meiosis como
los quiasmas mantienen unidos a los cromosomas homólogos, obliga a que estos se ordenen uno al lado del otro. (C) Anafase I. Los cromosomas
homólogos son separados hacia polos opuestos, pero las cromátidas hermanas no se separan.
Referencia, Figura 19-06. Essential cell biology, tercera edición. Referencia figura 21-12. Biología molecular de la célula, quinta edición (©Garland
En la meiosis II, vuelven a ocurrir la profase II, metafase II, anafase II y telofase II. En la meiosis II se separan las
cromátidas hermanas, generando dos células haploides (n), cada una con una copia de su material genético (c), por lo
que se producen cuatro células (1n/1c) (Fig. 4B).
Pero, la meiosis no es un proceso perfecto. En los humanos, este proceso debe ocuparse de 23 pares de cromosomas
duplicados (92 cromosomas). Esto es complejo y, por ende, pueden ocurrir errores en la distribución de los cromosomas.
En algunos casos ocurre no-disyunción, generando que algunas células haploides carezcan de algún cromosoma, mientras
otras contengan más de una copia. Esto resulta, en condiciones como por ejemplo el síndrome de Down en el cual ocurre
una trisomía del cromosoma 21 (Fig. 8).
Figura 8. No disyunción meiótica.
Referencia Figura 19-14. Essential cell biology, tercera edición
332
Gametogénesis (Capítulo 21, Alberts et al., 2010).
La gametogénesis, corresponde al proceso de proliferación y diferenciación celular que da origen a gametos
haploides: óvulos y espermatozoides. En vertebrados, tempranamente durante el desarrollo, ciertas células se definen
como progenitoras de los gametos. Estas células son diploides y se llaman células germinales primordiales (PGC). Las
PGC migran para formar las gónadas (ovario y testículos). Después de un período de proliferación mitótica, las PGC
realizan meiosis para formar los futuros gametos.
Al observar un cariotipo humano, se distingue que existe un par de cromosomas sexuales, denominados cromosoma
X e Y. El sexo masculino, está determinado por la presencia de un cromosoma X y otro Y, en cambio, el sexo femenino
está determinado por la presencia de dos cromosomas X. Esta determinación sexual, se debe a la presencia de un gen
llamado SRY en el cromosoma Y, que codifica para un factor de transcripción que activa un programa de diferenciación
masculina, redireccionando un embrión hembra a uno macho. El gen Sry actúa sobre una población de células somáticas
en la gónada en desarrollo e induce la diferenciación de ellas en células de Sertoli (en vez de células foliculares de las
hembras). Las células de Sertoli producen una hormona, que inhibe el desarrollo del aparato reproductor femenino,
mientras que los testículos secretan testosterona desde el embrión masculino, el ovario no secretará progesterona en las
hembras hasta la pubertad (Fig. 9).
Figura 9. Determinación sexual,
mediante la presencia del gen Sry.
Se muestran las células de la línea
germinal PGC (en rojo) y las células
somáticas (verde y azul). El gen Sry
actúa en una subpoblación de células
somáticas durante el desarrollo
gonadal, induciendo su diferenciación
en células de Sertoli. Las células de
Sertoli, al llegar a la pubertad, dirigen
la espermatogénesis. En ausencia de Sry,
las PGC se involucran en el desarrollo
de ovocitos y las células somáticas se
transforman en células foliculares, las
que actúan de soporte al ovocito durante
su desarrollo o en células de la teca
secretoras de progesterona. Las células
foliculares transforman progesterona en
estrógeno.
Referencia Figura 21-19. Biología
molecular de la célula, quinta edición
Omega 2010).

333
Figura 10. Ovogénesis. La figura muestra solo un par de cromosomas homólogos. Las ovogonias se forman a partir de las células germinales
primordiales (PGC). Estas células, durante la embriogénesis, migran hacia la gónada en desarrollo. Comienzan a dividirse por mitosis hasta que
la ovogonia empieza la división meiótica I, transformándose en ovocito primario (entre los 3 y los 8 meses de gestación en el embrión humano).
El ovocito primario permanece en profase I (después del diploteno), hasta que la hembra alcanza la madurez sexual. En esta etapa un subgrupo
de ovocitos, maduran completando la meiosis I y comienzan la meiosis II (ovocitos secundarios). Tanto en la etapa de ovocito primario como
secundario, se producen cuerpos polares que degeneran rápidamente. En la mayoría de los vertebrados el ovocito permanece en Meiosis II, hasta
que es fecundado por un espermatozoide. En la mayoría de los animales, el ovocito en desarrollo se aísla y nutre gracias a la ayuda de células
accesorias especializadas.
Referencia Figura 21-23. Biología molecular de la célula, quinta edición (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Figura 11. Espermatogénesis. Las espermatogonias se forman a partir de las

células germinales primordiales (PGC). Estas células, migran a la gónada en
desarrollo durante la embriogénesis. Cuando el animal alcanza la madurez sexual,
las espermatogonias proliferan por mitosis. Algunas mantienen la capacidad
de dividirse de forma indefinida (células madre de las espermatogonias), otras
en cambio, se diferenciarán. Para ello, experimentan un número limitado de
mitosis, y luego comienzan la meiosis, transformándose en espermatocitos
que se coinvertirán en espermátidas haploides y después en espermatozoides.
La espermatogénesis se produce continuamente a partir de la pubertad. Cada
epermatogonia que comienza la diferenciación, da lugar a cuatro gametos
maduros, los cuales pasan por un elaborado proceso de diferenciación celular,
cuando acaban la meiosis.
Referencia Figura 21-30. Biología molecular de la célula, quinta edición
334
Ovogénesis
Cuando las ovogonias –o células que darán origen a los óvulos, localizadas en los folículos del ovario– inician la
meiosis I, se denominan ovocitos primarios. Después de la profase I, se detiene la meiosis por días o años (según la
especie). En mamíferos, los ovocitos primarios se forman muy temprano durante el desarrollo (entre los 3 y los 8 meses
de gestación en el embrión humano), permaneciendo en una etapa posterior al diploteno de la profase I, hasta que la
hembra es sexualmente madura. En las hembras recién nacidas, la mayoría de los ovocitos están rodeados por una
capa simple de células foliculares, lo cual recibe el nombre de folículo primordial. De forma periódica, una pequeña
proporción de los folículos primordiales comienzan a crecer, acumulan ribosomas, ARNm, proteínas y secretan la zona
pelúcida, pasando a convertirse en folículos en desarrollo, en los que hay muchas capas de células foliculares (recibiendo
el nombre de células de la granulosa) que rodean al ovocito en crecimiento.
Después de la pubertad, aproximadamente una vez cada mes, la glándula pituitaria secreta una ola de hormona folículo
estimulante (FSH: folicule stimulating hormone), que acelera el crecimiento de unos 10 ó 12 folículos antrales. Hacia la
mitad del ciclo menstrual, la secreción de FSH y de la hormona luteinizante (LH: luteinizing hormone) desencadenan
la ovulación. En la ovulación, un ovocito primario concluirá la meiosis I, formando un corpúsculo polar y un ovocito
secundario (de gran tamaño). Tanto el corpúsculo polar y el ovocito secundario, efectúan la segunda división meiótica
hasta la metafase II; rápidamente el folículo aumenta de volumen y se rompe en la superficie del ovario, liberando el
ovocito secundario, rodeado por una cubierta de células de la granulosa, envuelta por una matriz gelatinosa. Después de
la ovulación, el folículo vacío se transforma en una estructura endocrina llamada cuerpo lúteo, que secreta progesterona,
preparando el útero para el embarazo. Para que el ovocito secundario termine su meiosis II, este debe ser fecundado por
un espermatozoide. Entonces, a partir del ovocito secundario se formarán dos células: una grande, que contiene la mayor
parte del citoplasma original, y otra pequeña o segundo cuerpo polar. Los cuerpos polares se desintegran rápidamente,
mientras que la otra célula se desarrolla para convertirse en un óvulo maduro haploide. Una vez que los núcleos del
espermatozoide y ovocito maduro se fusionen, se dará inicio al desarrollo embrionario. Si no se produce la fecundación,
el cuerpo lúteo degenera y la mucosa del útero se desprende en el transcurso de la menstruación (Fig.12).
Figura 12. Etapas de desarrollo del óvulo. Ovogénesis. Células de la granulosa (en verde) rodean al ovocito en desarrollo. Estas células están
separadas de la capa interna de células de la teca (en azul), por una lámina basal intermedia (en negro). Después de la ovulación, el folículo vacío
se transforma en el cuerpo lúteo. Su función es secretar progesterona preparando el útero para el embarazo. Si no hay fecundación, el cuerpo
lúteo degenera y la mucosa del útero se desprende en el transcurso de la menstruación. LSH: hormona de estimulación folicular. LH: hormona
luteinizante.
Referencia Figura 21-26. Biología molecular de la célula, quinta edición (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Espermatogénesis
La producción de espermatozoides o espermatogénesis en humanos, comienza después de la madurez sexual, siendo
un proceso de producción continua. La producción de espermatozoides, ocurre en el epitelio que forma la pared de unos
tubos del testículo llamados tubos seminíferos. Las células diploides que darán origen a los espermatozoides, llamadas
espermatogonias, se localizan alrededor del límite externo de estos túbulos junto a la lámina basal. Las espermatogonias
proliferan por mitosis un número limitado de veces antes de dejar de proliferar iniciada la meiosis I, transformándose
en espermatocitos primarios. Los espermatocitos primarios, dan lugar a los espermatocitos secundarios (meiosis II)
que se diferencian en espermátidas. Las espermátidas haploides, experimentan grandes cambios morfológicos hasta
diferenciarse en espermatozoides. Tanto las espermatogonias, como el proceso de espermatogénesis, es apoyado por las
células de Sertoli ubicadas en los túbulos seminíferos. Las células de Sertoli forman la barrera hemato-testicular en los
túbulos seminíferos y secretan proteínas, fagocitan cuerpos residuales dando soporte nutritivo y estructural. Además, 335
regulan la función de las células de Leydig, que se encargan de secretar testosterona durante la espermatogénesis. Una
vez que las espermátidas se han convertido en espermatozoides, son liberados a la luz del tubo seminífero y luego pasan
al epidídimo, un largo tubo que se encuentra junto al testículo. En el epidídimo, se almacenan los espermatozoides para
seguir madurando. El término de la maduración de los espermatozoides humanos ocurre en el tracto genital femenino,
en un proceso que se llama capacitación.
El proceso de capacitación, es esencial para que la fecundación ocurra y consiste en una serie de cambios bioquímicos
y funcionales, que exponen receptores de superficie celular esenciales para a la unión de los espermatozoides a la zona
pelúcida del óvulo.
De los espermatozoides eyaculados en un coito humano, alrededor de 200 alcanzarán en el oviducto el lugar
adecuado para la fecundación. A diferencia del ovocito, el espermatozoide es una célula extraordinariamente móvil e
hidrodinámica, lo que es clave para la fecundación (Fig. 13A). Los espermatozoides presentan un flagelo, carecen de otros
orgánulos citoplasmáticos, pero contienen muchas mitocondrias que le proporcionan la energía que necesita el flagelo
para su movimiento (Fig. 13B). En general, el espermatozoide presenta dos regiones, morfológica y funcionalmente
distintas, que están rodeadas por una membrana plasmática única: la cola y la cabeza (Fig. 13A). En el núcleo, el
ADN se encuentra condesado en la cabeza, de modo que su volumen queda reducido al mínimo. Además, en la cabeza
de los espermatozoides se encuentra una vesícula secretora especializada llamada vesícula acrosómica, que contiene
enzimas hidrolíticas, que son liberadas cuando un espermatozoide entra en contacto con la cubierta del ovocito (reacción
acrosómica) (Fig. 14A). Esta reacción acrosómica, es clave para que el espermatozoide se una a la zona pelúcida y la
atraviese, para fusionarse con el ovocito secundario.
La zona pelúcida consiste de diferentes glicoproteínas que forma una red tridimensional. La unión del espermatozoide
a la membrana del ovocito, promueve la reacción cortical, que tiene como resultado el entrecruzamiento estrecho de
los componentes de la zona pelúcida, para prevenir que otros espermatozoides se unan a la membrana del óvulo (Fig.
14B). Cuando el espermatozoide y ovocito fusionan sus membranas, se inducen cambios que reanudan la meiosis II del
ovocito, produciéndose el segundo corpúsculo polar que será degradado. Una vez que el espermatozoide se ha fusionado
con el óvulo, el núcleo del espermatozoide se descondensa. Los dos núcleos haploides (llamados pronúcleos), rompen
sus membranas y se fusionan y combinan sus cromosomas formando un solo núcleo diploide o zigoto. Además del
material genético aportado por el espermatozoide, éste aporta un centriolo, estructura esencial para la formación del
huso mitótico de la primera división celular del embrión.
Figura 13. El espermatozoide. (A) Estructura de

un espermatozoide. (B) Dibujo de una sección
transversal de la pieza media de un espermatozoide
de mamífero. El centro del flagelo está formado por
un axonema (estructura 9+2). Las mitocondrias
(en verde) proporcionan el ATP necesario para el
movimiento del flagelo.
Referencia Figura 21-27 y 21-28. Biología
molecular de la célula, quinta edición (©Garland
336
Figura 14. Fecundación. (A) Reacción acrosómica y unión del espermatozoide al óvulo. (B) Reacción cortical. Los contenidos de los gránulos
corticales inactivan ZP3, impidiendo la unión a la membrana plasmática del espermatozoide. Además, se endurece la zona pelúcida. De modo que
se bloquea la polispermia.
Referencia Figura 21-33 y 21-34. Biología molecular de la célula, quinta edición (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
337
CUESTIONARIO 3
¿Cuáles son los mecanismos de variabilidad genética durante meiosis?
¿Qué es el complejo sinaptonémico?
¿Cuál es la importancia del gen Sry?
2.- Elabore un cuadro comparativo entre ovogénesis y espermatogénesis.
338
3.- En los siguientes esquemas identifique cada uno de los procesos y haga una pequeña descripción de ellos.
339
340
4
CÁNCER
RESUMEN
El cáncer, junto a las enfermedades cardiovasculares, es la principal causa de muerte en Chile. Esta patología
rompe las reglas más básicas del comportamiento celular que permiten la mantención y construcción de organismos
multicelulares. Pero precisamente, el hecho que el cáncer corrompa el comportamiento celular, nos ha permitido
aprender de nuestra propia biología. Los intentos por encontrar estrategias terapéuticas han permitido descubrir, cómo
funcionan y se integran diversas vías de señalización que se desregulan en el cáncer. El cáncer promueve el crecimiento
y división descontrolada de las células, así como también, entrega mecanismos para evadir la apoptosis. Este crecimiento
descontrolado destruye tejidos y es capaz de diseminarse por todo el organismo.
Las células cancerosas son genéticamente inestables y, como consecuencia, numerosas proteínas, relacionadas con el
ciclo celular, señalización, crecimiento, supervivencia y reparación del ADN se vuelven anormales durante el desarrollo
de la patología. El cáncer puede analizarse desde el punto de vista social, económico, microevolutivo, médico o biológico.
En este capítulo analizaremos los principios biológicos del cáncer.
Palabras clave: cáncer, señalización, división celular, crecimiento celular, reparación de ADN, tumor maligno, tumor
benigno, metástasis, carcinomas, sarcomas, mutaciones, cambios epigenéticos, origen clonal, translocación, detección
temprana, progresión tumoral, inestabilidad genética, efecto Warburg, microambiente tumoral, proto-oncogenes, genes
supresores de tumores, Myc, p53, RB, BRCA, Ras, RTK, AKT, PI3K, ganancia de función, pérdida de función.
Características del cáncer (Capítulo 20, Alberts, et al. 2008).

La oncología es la ciencia que se encarga del estudio de los tumores; haciendo mayor énfasis en las patologías
malignas (neoplasias o crecimiento anormal de tejidos). La palabra onkos deriva del griego que significa tumor o masa
y, por tanto, en el cáncer hace referencia a la neoplasia. A su vez, karkrinos viene del latín que significa cangrejo (a raíz
de las observaciones realizadas por Hipócrates sobre la forma que adoptaban algunos tumores).
Las primeras referencias de esta enfermedad, se remontan a observaciones de muestras de huesos de dinosaurios con
presencia de tumores óseos. También se han encontrado momias egipcias con cáncer óseo y papiros que describen el
tratamiento del cáncer con procedimientos de cauterización. Esto derriba el mito que el cáncer es una enfermedad de
nuestra época, ya que siempre ha estado presente. Es más, cualquier organismo compuesto por células puede desarrollar
cáncer.
El cáncer –las células cancerosas– rompen las reglas más básicas del comportamiento celular, que permiten la
mantención y la construcción de organismos multicelulares. Las células, en un tejido sano, se reproducen por división
celular y se organizan en arreglos colaborativos llamados tejidos. Es una sociedad peculiar, pues una célula es capaz
de auto sacrificarse por el bien de su sociedad. Las células cancerosas rompen esta sociedad, como consecuencia de
interrupciones moleculares al comportamiento celular normal. Una mutación puede ser peligrosa, si entrega una ventaja
selectiva que le permita a esta célula transformarse en cancerosa, crecer, dividirse y sobrevivir más que sus células vecinas.
Las células cancerosas se pueden clasificar según dos propiedades heredables: (1) se reproducen desafiando los
controles impuestos en el organismo para el crecimiento, división celular y supervivencia; y (2) invaden y colonizan
territorios del mismo organismo, reservados para otras células (Fig. 1). En consecuencia, un tumor no necesariamente es
cáncer. Los tumores benignos son neoplasias no invasivas, mientras que un tumor sólo es considerado maligno cuando
las células adquieren la capacidad de invadir otros tejidos.
La capacidad de invasión permite a las células cancerosas soltarse de su tejido, entrar en el flujo sanguíneo y formar
tumores llamados secundarios. El invadir zonas distantes en el cuerpo se conoce como metástasis. Las células metastásicas
son de la misma clase de células que las del tumor primario y generalmente afecta órganos como pulmón, huesos, hígado
y cerebro –es la metástasis la que finalmente acaba con la vida del paciente (Fig. 2). 341
Figura 1. Tumor cancerígeno invade otros
tejidos.
Referencia figura 20-03. Biología molecular de
Figura 2. Paciente con métastasis.

Referencia Figura 20-01. Biología molecular
El cáncer se clasifica según el tejido y tipo de célula del cual proviene el tumor. Entonces, podemos encontrar, por
ejemplo: (a) los carcinomas, que surgen a partir de células epiteliales y (b) sarcomas, que surgen desde el tejido conectivo
o muscular. También, hay algunos cánceres fuera de esta clasificación como cánceres que afectan a la sangre (leucemias
y linfomas, derivados de los glóbulos blancos y células hematopoiéticas) y cánceres derivados de células del sistema
nervioso.
De acuerdo con esta clasificación, cuando estamos en presencia de un adenoma sabemos que es un tumor epitelial
benigno con organización glandular, pero si es un adenocarcinoma, entonces corresponde a tumor similar al anterior
en su origen, pero maligno. En general, los cánceres muestran características que reflejan su origen. Un melanoma, por
ejemplo, sintetiza pigmentos, lo cual es una propiedad de los melanocitos, células que le dan el color a la piel. El 80% de
los cánceres son carcinomas, pero no todos los cánceres presentan el mismo riesgo de mortalidad. Si bien, la incidencia
(número de casos nuevos) de muchos cánceres es alta, hoy en día muchos cánceres tienen un buen pronóstico si son
detectados a tiempo (Fig. 3).
Figura 3. Incidencia y mortalidad de cáncer
en Estados Unidos. Los nuevos casos
(incidencia) se muestran en verde oscuro y la
mortalidad por año en verde claro. Algunos
cánceres tienen alta incidencia, pero su
mortalidad no es tan alta, como por ejemplo
cáncer de mama o sistema urinario. Pero otros
tienen alta incidencia y mortalidad, como por
ejemplo cáncer al sistema respiratorio.
342
Cambios en el genoma que pueden desencadenar la patología (Capítulo 20, Alberts, et al.
2008).
En el cáncer influyen fuertemente las interacciones entre genes o de los genes con el ambiente. Un cambio en el
genoma, puede comenzar un proceso “microevolutivo” que entrega ventajas selectivas a la célula que lo sufre, generado
un ambiente propicio para el desarrollo de más mutaciones. Con el paso del tiempo, esta acumulación de mutaciones,
puede desencadenar el desarrollo de un tumor de carácter maligno. En este contexto, podemos esperar dos tipos de
cambios en el genoma: mutaciones en el ADN y/o cambios epigenéticos. Los cambios epigenéticos, corresponden a
cambios heredables de la estructura de la cromatina, que producen la inactivación de genes, o que pueden causar la
sobreexpresión de oncogenes (Fig. 4). Las mutaciones del ADN, que también se heredan de una célula a otra, también
pueden resultar en la inhibición de genes o activación de oncogenes. De esta forma, las células cancerosas heredan vías
de señalización alteradas desde una célula madre a una célula hija, que en combinación a nuevas mutaciones o cambios
epigenéticos, pueden promover el inicio o acelerar la progresión de un cáncer.
Figura 4. Cambios en el genoma que inducen la inactivación de un gen. Una mutación corresponde a un cambio irreversible en la secuencia del
ADN. Mientras que los cambios epigenéticos se basan en alteraciones que, aun cuando son heredables de una célula a otra cuando estas se dividen
por mitosis, son reversibles. Sin embargo, ambos pueden inducir la inactivación de un gen. Es importante notar que las marcas epigenéticas
generalmente revierten durante la formación de los gametos, por lo que no son traspasada a los hijos.
Referencia Figura 20-12. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
El cáncer puede producirse por mutaciones en células de la línea germinal (que forman gametos) o células somáticas
(que forman el resto del organismo). Para que las mutaciones se hereden de padres a hijos, éstas deben estar presentes
en el ADN de los gametos. Solo una pequeña proporción de los casos de cáncer se deben a mutaciones heredables. De
hecho, se estima que alrededor de entre 5% y 10% de todos los tumores descritos tienen un carácter hereditario. Sin
embargo, lo que sí se puede heredar es la susceptibilidad de padecer cáncer, lo que no implica necesariamente la certeza
de desarrollar la patología.
La mayoría de los casos de cáncer se producen a partir de mutaciones en células somáticas (células no que no forman
gametos). Las causas son multifactoriales, lo que obedece al efecto combinado de factores genéticos y ambientales. Sin
bien existen múltiples factores de riesgo, como los carcinogénicos químicos, que causan cambios locales en la secuencia
de nucleótidos; rayos X, que causan quiebres en los cromosomas y translocaciones; o la radiación UV que también daña
el ADN; el mayor factor de riesgo es el tiempo o envejecimiento. El cáncer necesita de un proceso “microevolutivo” para
desarrollarse y, si bien, una célula anormal puede surgir a partir de una sola mutación, esta mutación individual no es
suficiente para producir cáncer. Se necesita de al menos 20 genes mutados para inducir la progresión de un tumor a un
cáncer; y para reunir ese número de mutaciones en una célula se necesita tiempo. Inclusive, en un ambiente sin agentes
mutagénicos, las mutaciones ocurrirían espontáneamente, en un rango estimado de 10-6 (0,000001) mutaciones por 343
gen por cada división celular. Este rango es el reflejo de las limitaciones en la precisión de la replicación y reparación
del ADN. El trabajo de Tomasetti y colaboradores (2017), publicado en la revista Science (una muy prestigiosa revista
científica), muestra que las mutaciones producidas por errores en la replicación son responsables de 2/3 de todas las
mutaciones presentes en cáncer. En este estudio se estudiaron pacientes de 69 países que padecían de 17 cánceres
diferentes. Además, nuestro sistema de reparación va perdiendo su efectividad a medida que envejecemos. En conclusión,
el riesgo de cáncer aumenta con la edad (Fig. 5).
Sin embargo, esto no quiere decir que el ambiente o nuestros hábitos no constituyan un factor de riesgo. Por ejemplo,
la obesidad y el sedentarismo aumentan el riesgo de ciertos cánceres, también existen diversos reportes sobre la aparición
de cánceres ocupacionales (exposición a asbesto, arsénico o radiación) y también está muy bien documentado que fumar
aumenta el riesgo de cáncer pulmonar.
Figura 5. Cáncer en función de la edad. El gráfico muestra la incidencia de

cáncer de colon en Inglaterra y Gales. La incidencia de cáncer aumenta en
función de la edad. Si una sola mutación fuese suficiente para desencadenar un
cáncer y esta mutación tuviera la misma probabilidad de ocurrir en cualquier
momento, la incidencia debería ser independiente de la edad.
De hecho, el consumo de cigarrillos ha sido un factor importante en el aumento de la incidencia y mortalidad por
cáncer de pulmón (ver Fig. 1). Sin embargo, el establecer el efecto del cigarrillo en cáncer tomó bastante tiempo, ya
que el cáncer se desarrolla aproximadamente 35 años después que una persona comienza su hábito de tabaquismo.
En consecuencia, el efecto positivo de las campañas contra tabaco también ha tomado tiempo para ser evaluado en su
totalidad.
Si los cánceres crecen gradualmente a partir de una célula aberrante y de una mutación original, debiéramos ser
capaces de rastrear el origen clonal de un cáncer. Esto es posible de demostrar, ya que los tumores secundarios (metástasis)
corresponden a células del tumor primario (original). Por ejemplo, pacientes con leucemia mieloide crónica presentan
una proliferación anormal de los glóbulos blancos. Estas células al volverse malignas sufren alteraciones genómicas,
siendo una típica lesión la translocación entre los cromosomas 9 y 22 (humanos). Esta translocación, se denomina
translocación Filadelfia y está presente en todas las células cancerosas de los pacientes. Durante esta translocación se
genera un nuevo gen híbrido, que activa de manera anormal una enzima tirosina quinasa, que induce el crecimiento
anormal de las células. Se ha demostrado que esta translocación es la misma en un mismo paciente, pero es diferente
entre pacientes distintos (Fig. 6). En conclusión, la evidencia indica que la mayoría de los cánceres se originan a partir
de una célula aberrante, es decir tiene origen clonal.
344
Figura 6. Translocación entre el cromosoma 9 y el 22.
Referencia Figura 20-05. Biología molecular de la célula,
Omega 2010).
Características de las células cancerosas y de los cánceres (Capítulo 20, Alberts, et al. 2008).
Una de las características del cáncer es que la progresión tumoral es un proceso gradual. Como mencionamos antes,
se requiere de tiempo para acumular las mutaciones necesarias para producir la enfermedad. De esta forma, el cáncer se
desarrolla en forma gradual a partir de células que se van volviendo cada vez más aberrantes e inestables genéticamente.
Esto abre puertas para la detección temprana y tratamiento oportuno de muchos cánceres. Por lo tanto, si somos capaces
de detectar a tiempo un cáncer, es posible tratarlo de manera eficaz. A esto apuntan los programas de rastreo o búsqueda
de cáncer de mama (mamografías) o de cáncer cervicouterino (programas de citología vaginal, Papanicolaou o PAP) y
la prevención por vacunación contra el virus del papiloma humano.
La progresión tumoral involucra rondas sucesivas de cambios hereditarios al azar y de proliferación, seguidos de
selección natural. El ambiente al interior del tumor es generalmente de baja calidad: bajo en oxígeno y nutrientes. Esto
obliga a las células cancerosas a adaptarse continuamente, valiéndose de mutaciones que les confiera ventajas sobre sus
vecinas para sobrevivir en este ambiente tumoral (Fig. 7).
Las células cancerosas son genéticamente inestables, ya que la célula es incapaz de reparar daños o bien corregir la
replicación, por lo que acumulan cambios de marera rápida. Estas mutaciones, facilitan la pérdida de la integridad de sus
cromosomas y generan un ambiente propicio para más mutaciones, que se heredan de una célula a otra.
Las células cancerosas muestran un control alterado de crecimiento, aumentando su tasa de proliferación cuando las
demás células se detienen. Estas células no obedecen las señales les indican que detengan su crecimiento y proliferación.
Por ejemplo, la mayoría de las células normales dejan de proliferar una vez hacen contacto unas con otras (inhibición
por contacto). En cambio, las células cancerosas, carecen de estas restricciones y continúan creciendo, acumulándose
unas sobre otras (Fig. 7). También muestran una mayor supervivencia, escapando al sistema inmune, los mecanismos
de senescencia celular o evitando la apoptosis. Estas alteraciones al funcionamiento normal del organismo, rompen el
equilibrio que existe entre la división y la muerte celular (Fig. 8).
Las células cancerosas, además, tienen un metabolismo alterado para los azúcares. Por ejemplo, cuando las células
normales disponen de oxígeno, éstas oxidan la glucosa produciendo CO2 y ATP durante la fosforilación oxidativa. Sin
embargo, las células de un tumor metabolizan grandes cantidades de glucosa, la que destinan en su gran mayoría a la
producción de macromoléculas y a la acumulación de lactato, en vez de producción de energía en la mitocondria, aún
en presencia de oxígeno. En este sentido, las células cancerosas se parecen más a las células embrionarias que a células
adultas. Las células tumorales consumen 100 veces más glucosa que células normales. A este metabolismo anormal se le
conoce como efecto Warburg (Fig. 9).
345
Figura 7. Evolución clonal de un tumor.
Referencia Figura 20-11. Biología molecular de la célula,
2010).
Figura 8. Desarrollo de un tumor cuando se rompe el equilibrio

entre la división celular y la apoptosis (muerte celular).
Figura 9. Efecto Warbug.

Referencia Figura 20-12. Biología molecular de la célula, sexta
346
Si bien cada cáncer es diferente, los distintos cánceres comparten características comunes, como los que se resumen
en la Tabla 1.
Tabla 1: Características de las células tumorales.
Características comunes de las células tumorales

Crecen en presencia de señales que indican lo contrario.
Sufren efecto Warburg (cambian su metabolismo de aeróbico a anaeróbico, en presencia de O2).
Las células se dividen, en ausencia de señales que les indiquen que deben dividirse.
Escapan de sus tejidos originales (invasivos) y proliferan en sitios foráneos (metástasis).
Tienen una respuesta anormal al estrés (bajo oxígeno y nutrientes), lo que les permite sobrevivir y
continuar dividiéndose en condiciones letales para células normales.
Son genéticamente inestables.
La metástasis, es un proceso en el que las células cancerosas abandonan el tumor primario para colonizar otros
tejidos dentro del organismo. Para ello las células tumorales, deben ser capaces de romper la matriz extracelular, soltarse
y migrar, ingresando al torrente sanguíneo. Cuando las células tumorales entran en un vaso linfático, a menudo quedan
atrapadas en los ganglios linfáticos pudiendo dar lugar al desarrollo de un tumor nuevo en estos tejidos. Sin embargo,
para que una célula cancerosa metastásica sea exitosa y colonice otros tejidos, debe adaptarse a las nuevas condiciones
de ese tejido, ser capaz de crear un nuevo nicho y desarrollar un nuevo tumor. Estas etapas no son fáciles de alcanzar, los
estudios indican que menos de una de cada mil células de tumores malignos son capaces de lograrlo (Fig. 10).
Las células cancerosas se favorecen del lugar donde están proliferando (nicho) e interactúan con otras células que
forman parte de él, lo que significa que el microambiente del tumor desempeña un papel importante en la progresión del
cáncer. En el nicho tumoral (Fig. 11), las células cancerosas coexisten con muchas otras células normales del organismo.
Estas últimas a pesar de que no presentan anormalidades en su genoma, son influenciadas por las células cancerosas
a través de señales, para ayudar al desarrollo del tumor. Estas señales, por ejemplo: inactivan la respuesta inmune
contra el tumor, construyen más vasos sanguíneos para alimentar al tumor o ayudan en el proceso de metástasis. Estos
descubrimientos, han llevado al desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas, dirigidas no solo contra las células del
tumor, sino que también contra el microambiente tumoral.
Figura 10. Metástasis de un tumor.

Referencia Figura 20-17. Biología molecular de la
347
Figura 11. Microambiente tumoral. Los tumores
están formados por muchos tipos de células, por
ejemplo, células tumorales, células del epitelio
vascular, fibroblastos y macrófagos. Estas células
interactúan en el nicho tumoral y esta interacción es
muy importante en el desarrollo del tumor.
Genes críticos que producen cáncer (Capítulo 20, Alberts, et al. 2008).
La transformación de una célula normal en una célula cancerosa, puede ocurrir como consecuencia de la alteración
de dos clases de genes: los proto-oncogenes o los genes supresores de tumores.
Los proto-oncogenes, son genes que codifican para proteínas celulares que regulan el crecimiento y diferenciación
normales de las células en condiciones fisiológicas. Sin embargo, un proto-oncogen por mutación se puede transformar
en un oncogen, produciendo la activación de vías que inducen proliferación celular, sin la necesidad de señales
extracelulares necesarias para esa acción (Fig. 12A). La función activada del oncogen es una ganancia de función, ya
que presenta más actividad que el proto-oncogen normal. Esta transformación, puede ocurrir por diversos mecanismos
tales como: la integración del genoma de un virus, mutaciones puntuales, deleciones, inserciones, amplificación génica o
translocaciones cromosómicas. Todas las mutaciones que transforman un proto-oncogen en un oncogen son de carácter
dominante (Fig. 12B).
Los genes supresores de tumores por su parte, codifican para proteínas que regulan el ciclo celular o que participan
en la reparación del ADN. Por lo tanto, mutaciones que causan la pérdida de función en estos genes, ayudan a la
transformación de células cancerosas (Fig. 13). Las mutaciones en genes supresores de tumores son recesivas, por lo
que se requiere que la mutación esté presente en ambos alelos, para causar su completa inactivación. Ejemplos de genes
supresores de tumor son: la proteína p53, proteína del retinoblastoma (Rb), BRCA1 y BRCA2, estos últimos dos están
relacionados directamente con el cáncer de mama y ovario.
348

Figura 12. Oncogen y mutaciones en genes supresores de tumores. (A) La mutación en un proto-oncogen produce ganancia de función por
distintos mecanismos, y es dominante. (B) Las mutaciones en los protooncogenes, que otorgan ganancia de función, se expresan en forma
dominante, basta solo un alelo mutado. Las mutaciones en genes supresores de tumores, que producen la pérdida de función, se manifiestan en
forma recesiva, cuando están los dos alelos mutados.
Referencia Figura 20-33 y 20-27. Biología molecular de la célula, quinta edición. (©Garland Science 2008 y Ediciones Omega 2010).
Estudios han mostrado que el 74% de los tumores, tiene mutaciones en tres vías de señalización que dan cuenta de
un total de 21 genes mutados recurrentemente. (1) Genes de la vía de señalización de la proteína del retinoblastoma
(Rb). Esta vía regula el inicio de la división celular (Fig. 13). (2) Genes de la vía de señalización RTK/Ras/PI3K. Esta vía
transmite señales al interior de la célula para el crecimiento y división celular, desde el extracelular (Fig. 14). (3) Genes
de la vía de señalización p53. Esta vía regula la respuesta al daño al ADN y estrés celular (Fig. 15).
349
Figura 14. Sobreactivación de la vía
PI3K/AKT. La vía de señalización impulsa
el crecimiento celular y la biosíntesis de
proteínas, mediante la metabolización
de la glucosa. Esta vía se activa de forma
anormal al principio de la progresión
del tumor sin necesidad de molécula
señalizadora.
Figura 13. Inactivación de la proteína del retinoblastoma (Rb) y activación de E2F. La proteína p16 mantiene inactiva a Cdk4, pero si sufre una
mutación o Rb sufre una mutación que libera a E2F, se iniciará el ciclo celular de manera descontrolada.
Figura 14. Inactivación de la proteína del

retinoblastoma (Rb) y activación de E2F. La proteína
p16 mantiene inactiva a Cdk4, pero si sufre una
mutación o Rb sufre una mutación que libera a E2F, se
iniciará el ciclo celular de manera descontrolada.
350
Figura 15. Acción de la proteína p53. La proteína
p53 es un sensor de estrés celular que responde
a señales hiperproliferativas, daño en el ADN,
hipoxia, acortamiento de los telómeros, baja
concentración de oxígeno (hipoxia). Las células
que presenten mutación en p53 no pueden
detener el ciclo celular, aunque exista daño en el
ADN, así también evadirán la apoptosis.
En un cáncer, generalmente más de una vía está anormalmente alterada (Fig. 16), lo que complica las estrategias
terapéuticas. Además, cada tumor tiene una “historia evolutiva” individual, lo que significa que todos los pacientes son
diferentes, a pesar que presenten un mismo tipo de cáncer y en un mismo estadio. Esto ha llevado al desarrollo del
concepto de medicina personalizada, con menos daños colaterales producto del tratamiento y mayor eficiencia. En
estos últimos años hemos experimentado grandes avances en la prevención, diagnóstico y tratamiento del cáncer. Por
ejemplo, el desarrollo de ensayos moleculares altamente sensibles permite la detección temprana y precisa (diagnóstico).
Los cánceres detectados en estadios tempranos, pueden ser extraídos mediante cirugía o tratados mediante radioterapia,
proporcionando mejores expectativas de recuperación y de calidad de vida a los pacientes.
Figura 16. Principales vías activadas en cáncer.

351
CUESTIONARIO 4
CÁNCER
1.- Proponga una explicación para los siguientes casos:
a) Sabemos que el fumar causa cáncer pulmonar, pero ¿cómo se explica que el cáncer aparezca con un retraso de
aproximadamente 35 años?
b) ¿Cuál sería la razón que en muchos cánceres se vea alterada la vía de tirosina quinasas como RTK o se vea alterada
la vía de p53?
c) ¿Cómo se explica que hoy aparezcan cada vez más casos de cáncer?
d) ¿Por qué es importante el gen de la proteína del retinoblastoma?
352
Horizontal:
4. Uno de los principales factores de riesgo del cáncer es el:
5. Las células cancerosas tienen un metabolismo alterado denominado efecto:
7. La translocación del cromosoma 9 con el 22 en la leucemia mieloide crónica se denomina cromosoma o translocación:
Vertical:
1. Gen supresor de tumores que codifica para una proteína llamada:
2. Cuando el factor de transcripción se sobreexpresa es conocido como:
3. El proceso que permite que una célula cancerosa pase al torrente sanguíneo y colonice tejidos lejanos se denomina:
6. Un adenoma es un tumor:
3.- Resuelva la siguiente sopa de letras. Encuentre 10 palabras revisadas en esta guía. 353
354
DEL CICLO
1.-
a) El ciclo celular depende de Cdks quinasas que son ciclinas dependientes. La actividad de estas quinasas sube y baja (ciclos de
expresión y degradación) durante el ciclo celular produciendo cambios cíclicos en la fosforilación de proteínas intracelulares que
inician o regulan los mayores eventos del ciclo celular. Existen ciclinas específicas para cada parte del ciclo celular, por lo que la
célula puede sensar en que parte del ciclo se encuentra.
b) G1 tardío – S, la célula entra al ciclo celular y comienza la duplicación cromosomal.
G2/M: el sistema de control gatilla los eventos mitóticos tempranos que producen el alineamiento de los cromosomas en el huso
durante metafase
Transición metafase-anafase: el sistema de control estimula a la separación de las cromátidas hermanas, llevando a la célula a
citocinesis.
c) Unirse a una ciclina y una fosforilación.
d) Una Cdk puede ser desactivada mediante una segunda fosforilación (por ejemplo, por acción de Wee1) o mediante la fosforilación
de proteínas inhibitorias de Cdk (CIK) como p21
e) APC/C tiene dos funciones principales:
1) Destrucción de securin (securinas), lo que activa a separasa que media la separación de las cromátidas hermanas y desemboca
la anafase.
2) Destrucción de la S-ciclinas y las M-ciclinas Acción de SFC. Es una ubiquitina ligasa que que ubiquitina ciertas proteínas
CKI en G1 tardío permitiendo la activación de S-Cdks y la replicación del DNA.
2.-
3.-
ciclina
fosfatasa
ciclo
anafase
quinasa
profase
proteólisis
mitosis
control
ubiquitinación
p53
355
CRECIMIENTO DIVISIÓN Y MUERTE
CELULAR
1.-
Horizontal
3. apoptosoma
6. FAS
7. condensina
8. crecimiento
Vertical
1. apoptosis
2. sobrevivencia
4. procaspasa
5. prometafase
9. mitógeno
2.-
centriolo
mitógenos
crecimiento
caspasas
anafase
citocinesis
fragmoplasto
separasa
telofase
3.-
Características Necrosis Apoptosis
Condensación del núcleo X
Desintegración de la cromatina X
Formación de cuerpos apoptóticos X
Desintegración de organelos X
Fragmentación del ADN X
Depende de energía X
356
1.-
a) La asignación de homólogos en cada célula es al azar, lo que constituye la primera fuente de variación. De este modo, cada
célula diploide que entra en meiosis produce cuatro células haploides, cada una hereda una copia materna o una copia paterna
de cada cromosoma, pero no las dos. A este procedimiento se le denomina permutación cromosómica. La otra fuente de variación
es el proceso de entrecruzamiento o crossing over, en el que los pares homólogos permanecen juntos y ocurre recombinación entre
cromátidas no hermanas. Es decir, hay intercambio de material genético.
b) Es una estructura proteica formada por dos elementos laterales y uno central que se van cerrando a modo de cremallera.
Este complejo mantiene a los pares homólogos juntos y los alinea de manera que la recombinación ocurra entre cromátidas no
hermanas. También sirve para espaciar los eventos de recombinación en cada cromosoma.
c) Es esencial para la determinación sexual. Este gen codifica para un factor de transcripción que activa un programa de
diferenciación masculina, redireccionando un embrión hembra a uno macho. Se encuentra en el cromosoma Y.
2.-
3.-
Bloqueo de la poliespermia, Entrecuzamiento o crossing
después de la unión del espermio over, donde hay intercambio
con el ovulo se produce la reacción de material genético entre
cortical, en donde se modifica la cromátidas no hermanas
zona pelúcida (carbohidratos ZP3
y corte ZP2)
Fenómeno de no-disyunción Reacción acrosómica, en la que

meiótica. Ejemplo de esta enzimas hidróliticas ayudan al
anomalía es el síndrome de Down. espermio a atravesar la zona
pelúcida.
357
CÁNCER
1.-
a) Una mutación no es suficiente para causar un cáncer. Si bien el humo del tabaco produce una serie de daños en el ADN, las
células con mutaciones en su ADN necesitan heredar estas mutaciones y adquirir nuevas mutaciones que entreguen ventajas
selectivas frente a sus vecinas, permitiéndoles dividirse, sobrevivir y crecer más. El acumular estas transformaciones para formar
un cáncer requiere de tiempo.
b) Esta vía de señalización es importante para el crecimiento celular. Promueve el consumo de glucosa y la biosíntesis de proteínas.
Por su parte p53 es un gen supresor de tumores y es un punto de control clave en el ciclo celular. La falta de función de p53 facilita
que una célula acumula daños en su ADN y evada la apoptosis.
c) Hoy día poseemos test diagnósticos más precisos que permiten identificar al cáncer. Además, existen más conciencia y chequeos
médicos y también la población es mucho más numerosa. Por lo que es normal percibir que hay más casos de cáncer hoy que hace
una generación atrás.
d) Es un gen supresor de tumores que controla la entrada al ciclo celular al mantener inactivo a E2F. La proteína Retinoblastoma
(Rb), es un freno de la transición G1/S.
2.-
Horizontal
4. envejecimiento
5. Warbug
7. Filadelfia
Vertical
1. retinoblastoma
2. oncogen
3. metástasis
6. benigno
3.-
sarcoma
mutación
incidencia
protooncogen
arsénico
melanoma
envejecimiento
prevención
microambiente
358
359
REFERENCIAS
Alberts B, Bray D, Hopkin K, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P (2004) Introducción a la biología
celular, segunda edición. Editorial Médica Panamericana, Madrid.
Alberts B, Bray D, Hopkin K, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K, Walter P (2016). Essential Biology of the
Cell, cuarta edición. Editorial Omega, Barcelona.
Alberts B, Johnson A, Lewis J, Raff M, Roberts K & Walter P (2010) Biología Molecular de la Célula, traducción al
español de la 5a edición. Editorial Omega, Barcelona.
Geoffrey M. Cooper and Robert E. Hausman. (2019). The Cell: A Molecular Approach, 8va Edición. Editorial
Sinauer Associates, Universidad de Oxford.
Mairead Hayes, Gerard Curley, Bilal Ansari, & John G Laffey. 2012. Clinical review: Stem cell therapies for acute
lung injury/acute respiratory distress syndrome – hope or hype?. Critical Care 2012, 16:205.
Pomreinke AP, Soh GH, Rogers KW, Bergmann JK, Bläßle AJ, Müller P. (2017). Dynamics of BMP signaling and
distribution during zebrafish dorsal-ventral patterning. Elife. Aug 31;6. pii: e25861. doi: 10.7554/eLife.25861.
Tomasetti C, Li L and Vogelstein B. Stem cell divisions, somatic mutations, cancer etiology, and cancer prevention.
Science 2017; 355: 1330-1334. DOI: 10.1126/science.aaf9011.
360
DESARROLLADORES
“PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN EDUCATIVA 2018” (PROYECTO PIED-4/2018).
______________________________________
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA VIDA / UNIVERSIDAD ANDRÉS BELLO
Ilustrado por Lucas Olivares Alvarado

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Correo: lucas.olivares.a@ug.uchile.cl
Número: +56954008712
Instagram: unlucasdibujante
361
GUÍA DE APOYO
BIOLOGÍA CELULAR
2021
UNIVERSIDAD ANDRÉS BELLO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA VIDA
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“PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN EDUCATIVA 2018” (PROYECTO PIED-4/2018). 03

2. Componentes químicos de la célula I...................................................................................................... 21

COMPONENTE QUÍMICOS DE LA CÉLULA II

3. Componentes químicos de la célula II.................................................................................................... 31

Respuestas cuestionario 1: Introducción a la célula.................................................................................. 50

La célula (Capítulo 1, Alberts et al., 2010)

Figura 1. Diversidad biológica. La información

La doble hebra de ADN (Capítulo 1, Alberts et al., 2010)

Figura 4. Dogma central de la biología molecular.

Figura 5. Niveles de organización. Podemos

1) La célula es la unidad morfológica de todo ser vivo.

Figura 6. Procedencia de las células eucariontes.

Figura 7. Teoría de la endosimbiosis, que explica que

Tabla 1. Comparación de estructuras entre eucariotas y procariotas.

2. Tipo de molécula donde se guarda la información genética.

1. Mecanismo mediante el cual las células responden a estímulos químicos y físicos.

a) ¿En qué se diferencian un microscopio de barrido y uno de fluorescencia?

Célula procarionte bacteria

Propiedades del agua.

-Elevada tensión superficial.

Figura 5. Composición macromolecular

Figura 6. El carbono y sus cuatro

Ciertas combinaciones de átomos se encuentran de forma reiterada en las moléculas orgánicas:

Figura 7. Cuatro familias principales de

Figura 9. Reacción entre

Se producen debido al empuje de los grupos apolares o

Fuerzas de van der Waals

Sustancias que reducen el número de iones hidrógeno

Enlace que se forma cuando un átomo comparte un electrón

3.- Responda las siguientes preguntas:

a) ¿Cuál es la diferencia entre el número atómico y peso atómico?

b) ¿Por qué y de qué manera interactúan los átomos?

c) ¿Qué propiedades tiene el agua?

Lípidos (Capítulo 2, Alberts et al., 2010).

Aminoácidos (Capítulo 3, Alberts et al., 2010).

Figura 3. Aminoácidos. Familia de aminoácidos: aminoácidos

Figura 4. Enlaces peptídicos y estructura primaria de una proteína.

Ácidos nucleicos (Capítulo 2 y 4, Alberts et al., 2010).

A B Figura 8. Nucleósidos y nucleótidos. (A) Estructura

Figura 10. Estructura química del adenosin-trifosfato.

1.- Resuelva el siguiente crucigrama.

b) ¿Por qué es importante conocer si un aminoácido es polar, apolar, básico o ácido?

3.- Rotule el siguiente esquema.

Forma y estructura de las proteínas (Capítulo 3, Alberts et al., 2010).

Figura 1. Estructura primaria de una proteína.

Figura 2. Estructura secundaria de una proteína. (A)

Figura 5. Estructura de una proteína

Figura 6. Puentes de disulfuro formado

Figura 7. Unión proteína-ligando.

Tabla 1: clases de enzimas y tipo de reacción catalizada

1.- Complete los siguientes espacios en blanco.

¿De qué depende la función de una proteína?

¿Qué es una enzima alostérica?

¿Por qué una enzima es un catalizador?

MÉTODOS DE ESTUDIO UTILIZADOS

1. Métodos en biología celular I................................................................................................................... 59

2. Métodos en biología celular II................................................................................................................. 71