Resumenes de BBM 2021 Por Denise Bourlot

Denise Bourlot | 2021
1
Hola gente! Les dejo mi carpeta de BBM. Van a encontrar resúmenes de:
- Estructura y función de aminoácidos y proteínas

- Enzimas
- Transducción de señales
- Bioenergética
- Metabolismo de glúcidos
- Metabolismo de lípidos
- Mecanismos genéticos básicos
- Integración metabólica
- Ciclo de ayuno-alimentación
- Regulación del peso corporal
- Cáncer
Todos los resúmenes los hice a partir de videos teóricos y filminas de la catedra, además de sacar
algunos datos del Lehninger y definiciones e imágenes complementarias de Google para entender
mejor los temas.
Esta materia se estudia haciendo cuadros sinópticos y repitiendo en voz alta, no hay otra forma.
Éxitos!
2
Estructura y función de aminoácidos y proteínas
AMINOÁCIDOS
Estructura general y clasificación
Son los monómeros constituyentes de las proteínas. Como su palabra lo indica, tiene un grupo amino, un grupo
acido, un carbono α al que se unen los 2 grupos funcionales, un hidrogeno y un grupo R (las características
químicas del grupo R le darán las características definitivas y clasificación a los distintos a.a).
El carbono α está unido entonces a 4 sustituyentes diferentes, es un centro quiral, por lo tanto le otorga
capacidad de formar isómeros ópticos; salvo en el caso que el grupo R sea un hidrogeno como en el caso de la
glicina.
Dependiendo la cadena del grupo R, a los a.a los podemos clasificar:
Con carga neta (-) → aquellos a.a que poseen en la cadena R un grupo acido. Por esto van a ser
monoaminodicarboxilicos, porque van a tener 2 grupos ácidos en total.
Con carga neta (+) → aquellos a.a que poseen en la cadena R un grupo amino. Por esto van a ser
diaminomonocarboxilicos, porque van a tener 2 grupos amino en total.
3
Prolina → tiene una estructura particular en su cadena R que desestabiliza la estructura alfa hélice.
Anillos aromáticos → tienen dobles enlaces alternados denominados dobles enlaces conjugados. Dicha
estructura química le da la capacidad a los a.a de absorber la luz ultravioleta y se utiliza para la cuantificación
proteica.
Cisteína → en vez de oxidrilo tiene un sulhidrilo (SH). Importante a.a para la formación de puentes disulfuro y
estabilización de la estructura plegada proteica.
Isomería óptica
Es la capacidad de ciertas moléculas de desviar la luz polarizada, a los que se denomina enantiómeros. Como ya
se dijo, el carbono α es un centro quiral porque tiene unido 4 sustituyentes diferentes, y es un ejemplo de
isomería óptica, ya sea que desvíe la luz en dirección izquierda o derecha.
L a.a → desvío de la luz polarizada a la izquierda
D a.a → desvío de la luz polarizada a la derecha
La dirección del desvío se determina experimentalmente.
Entre los isómeros ópticos, uno es imagen especular de la molécula del otro y no son superponibles, lo que le da
su propiedad/particularidad. Todos los a.a presentan isomería óptica, excepto el H sustituyente en el caso de la
alanina (CH3), por lo tanto tiene 2 sustituyentes iguales.
Para dibujarlo, se lo compara junto a una molécula patrón que es el gliceraldehido: en el gliceraldehído dibujado
se ubica su grupo aldehído hacia arriba y dependiendo si su OH está a la izquierda o a la derecha se lo denomina
L o D gliceraldehido. Por comparación con la alanina de localización de los H es que se dibuja la L o D alanina.
4
Los a.a que forman parte de las proteínas siempre son L-aminoácidos.
Propiedades ácido-base
Los a.a al tener un grupo acido y otro amino son capaces de ceder o captar protones (H+). Un a.a en su forma
zwitterionica (forma en la que tiene 1 carga – y una carga +) es capaz de ceder H+ del grupo amino o es capaz
de captar H+ para protonar al grupo acido.
A pH totalmente ácidos, los a.a se encuentran totalmente protonados (tanto su grupo amino como acido).
A pH básicos, los a.a se encuentran totalmente desprotonados (tanto su grupo amino como acido).
Por lo tanto, aquellas soluciones que son capaces de captar y ceder e- pueden actuar como soluciones buffers,
que son aquellas soluciones que son capaces de mantener constante el pH de una solución. Los a.a tienen
capacidad buffer ya que presentan esta propiedad acido-base.
Curvas de titulación
Imaginando un matraz de Erlenmeyer (recipiente) donde tenemos el a.a que vamos a titular, que tiene una bureta
colocada dentro se va a ir agregando pequeñas cantidades de base, de OH, de hidróxido de sodio; en una curva
5
de titulación acido-base, en el Erlenmeyer se coloca un colorante que cambia de color cuando hay un cambio
brusco de pH. A medida que agregamos más cantidad de base podemos ir dibujando una curva de acuerdo al
cambio de pH en la solución por los agregados sucesivos de base.
Se identifican distintas especies químicas en los distintos puntos de la curva por los agregaos sucesivos de base.
Para el a.a más sencillo donde el grupo R es un H, la glicina, a un pH acido el a.a esta totalmente protonado
(tanto su grupo amino como acido); cuando agrego OH/base a la solución, ese OH entrante va a interaccionar
con el H+ del grupo acido, encargado de cederlo (perdiéndolo) para formar otra especie.
Las titulaciones son equivalente-equivalente: cuando se agrega 1 equivalente de base, titule 1 equivalente de
protón y obtengo una nueva especie en solución.
Cuando tengo la mitad de equivalente (mitad de una especie química y mitad de otra, la protonada y la
desprotonada), me encuentro en un pH igual al pK, siendo el pK = -log de la contante de disociación de la
reacción (representado en el grafico como pK1 = 2.34, en una [OH-] = 0,5) → a 0,5 encuentro cantidades
iguales de la especie protonada y de la desprotonada, y el pH se va a corresponder con el pK de esa reacción.
➔ El pKₐ es una magnitud que cuantifica la tendencia que tienen las moléculas a disociarse en solución
acuosa, donde Kₐ es la constante de disociación ácida.
A un equivalente me encuentro con una especie química determinada, al llegar a la [OH-] = 1 ocurre un salto de
pH, que al ir agregando más base empiezo a titular el otro H+ restante, correspondiente al grupo amino para
desprotonarlo totalmente. Cuando llego a una [OH-] = 2 (es decir, 2 equivalentes de base) obtengo al a.a en una
nueva especie química completamente desprotonada.
En el medio de la curva, cuando agregue 1 ½ equivalente de base (es decir, [OH-] = 1,5), estoy en el equilibrio
químico de la reacción, donde tengo cantidades iguales de la especie parcialmente desprotonada y totalmente
desprotonada. Me encuentro en un pH que es igual al pK 2 = 9.60.
Capacidad buffer, la capacidad de mantener constante el pH, en que parte de la curva la tiene el a.a? Si nos
ubicamos en una zona cercana al pK y agregamos una pequeña cantidad de hidróxido de sodio (que equivale a
OH-), no hay cambios importantes en el pH; pero si el agregado es mayor, a un valor cercano al pH del pI
(punto isoeléctrico) hay un cambio importante en el pH. Por lo tanto, podemos decir que la capacidad buffer de
a.a es en torno a los pK (donde la curva se mantiene más contante/plana); en cambio, en el pI, el salto de pH es
tan grande que en dicha zona el a.a no es capaz de mantener la capacidad buffer.
El pI es el valor de pH al cual el a.a. presenta carga neta 0. Es el punto en el que ubicamos a una especie
aminoacídica parcialmente desprotonada (es decir, de las 3 especies del gráfico, la del medio), ya que tenemos 1
carga + y 1 carga -, por ende la carga neta es 0.
A pH < pI → carga neta (+) del a.a
A pH > pI → carga neta (–) del a,a
6
Como se calcula el punto isoeléctrico?
En la curva de titulación de un a.a neutro (como el anterior para la glicina) tenemos la titulación del H+ del
grupo acido, luego se produce un salto importante de pH para comenzar a titular el H+ del grupo amino. En el
medio tenemos el pI que se calcula siendo pI = (pKa1 + pKa2) / 2.
Esto cambia en el caso de un a.a acido (con grupo acido en el grupo R) como el glutamato. A pH ácidos está
totalmente protonado con una carga neta de +1, agrego base, agrego medio equivalente (0,5) y llego a un
equilibrio químico donde el pH = pK1, a la altura de 1 equivalente ya titulé completamente el H+ del grupo
acido y obtengo el zwitterion con una carga neta de 0, agrego medio equivalente más (ósea, 1,5 equivalente en
total) y me encuentro en un equilibrio donde el pH = pKR , porque empiezo a titular ahora el H+ del grupo acido
de la cadena R ya con 2 equivalentes de base agregados y me encuentro con una especie aún mas desprotonada
con una carga neta de -1. Ya a 2,5 equivalentes empiezo a titular el H+ del grupo amino a una pH = pK2 = 9.67,
y a 3 equivalentes ya titulé todo el H+ y me encuentro con una especie química donde la carga neta es de -2. En
este caso para calcular el pI busco la especie química que tenga carga neta 0, especie comprometida tanto en el
equilibrio de titulado del grupo acido del R (pKR) y en el equilibrio de titulado del grupo acido del a.a (pK 1), por
lo tanto: el pI par este a.a acido, glutamato, se calcula como pI = (pK1 + pKR) / 2. Al ser un a.a acido va a
tener un pI acido, cercano a 3 en este caso.
7
En el caso de un a.a básico va a tener un grupo amino en le grupo R. Tomando de ejemplo el a.a histidina, a un
pH acido está totalmente protonada con una carga neta de +2; comienzo a agregar OH, y en medio equivalente
(0,5) me encuentro a un pH = pK1 = 1.82. Al llegar a 1 equivalente de base se encuentra desprotonado el grupo
acido del a.a con una carga neta de +1. A 1,5 equivalente me encuentro con un equilibrio (pK R) donde empiezo
a titular el protón del grupo amino del grupo R. Al llegar a 2 equivalente me encuentro con una nueva especie
química que tiene carga neta 0. Al llegar a 2,5 equivalentes me encuentro con un pH = pK 2 donde comienza a
titularse el protón del grupo amino del a.a, para que en 3 equivalentes de base tener una forma totalmente
desprotonada y con una carga neta -1. El pI se calcula situándome en la especie química con carga neta 0, los
equilibrios en los que participa dicha especie química y se deduce la fórmula: pI = (pKR + pK2) / 2. En este
caso, al tener un grupo básico va a tener un pH básico. 7,7 será aproximadamente su pI.
ESTRUCTURA PROTEICA
Enlace peptídico
La unión de los monómeros constituyentes de las proteínas, los a.a, se produce mediante enlaces peptídicos. Es
un enlace covalente tipo amida que se forma por condensación del OH del grupo acido de un a.a con el H del
grupo amino de otro; de esta manera de pierde una molécula de H2O. El que determina que a.a se tiene que unir
8
con otro es el ARNm, ya que la secuencia de una proteína está determinada en una porción de un gen y
mediante los procesos de mecanismos genéticos básicos finalmente se traduce a una proteína.
Además de esto, se dice que es un enlace plano, ya que el N en el enlace amida tiene un par de e- libres que es
capaz de ceder al enlace entre el C y el N, cuando el O al ser muy electronegativo capta hacia si los e-. De esta
manera se forma un doble enlace entre el C=N y un enlace simple C-O, formando ahí un dipolo, con una carga +
sobre el N y una carga – sobre el O que atrajo hacia si más los e-.
No obstante, lo que ocurre en realidad es que el enlace peptídico no se presenta como ninguna de las 2 anteriores
figuras químicas explicadas. Se encuentra formando un enlace hibrido: esos e- se encuentran migrando e/ el C,
el N y el O (representado esto como una línea punteada). Esto determina que tenga un carácter parcial de doble
enlace, ya que no presenta la longitud ni de un enlace simple ni de un enlace doble, medido en ángstroms (Å) →
unidad de longitud empleada para expresar longitudes de onda, distancias moleculares y atómicas, etc.
Lo que genera el carácter parcial de doble enlace es la resonancia e/ los e-, que le confieren así rigidez al enlace
y no puede rotar, y al no poder rotar se forma un plano sobre el cual se “apoyan” dichos átomos intervinientes.
Por encima y por debajo de ese plano del enlace se ubican los otros Cα y sus grupos R, pero el enlace en si
forma un plano por su incapacidad de rotar. Si pueden rotar lo enlaces e/ el Cα y el N (ángulo Φ “fi”), e/ el Cα y
el siguiente C del enlace peptídico (ángulo ψ “psi”).
Cada enlace peptídico tiene carácter parcial de doble enlace por la resonancia, y seguidamente la incapacidad de
rotar. Esto limita el número de conformaciones posibles que puede adoptar una proteína.
Relación estructura-función
Las proteínas cumplen de las más diversas funciones, como transporte, inmunidad, estructurales, resistencia, etc.
La estructura determina la función de van a desempeñar. Las proteínas de transporte van a ser proteínas
globulares, como la hemoglobina que transporta el O2. En el caso de los anticuerpos (moléculas que se
sintetizan por los linfocitos B y T frente a la rta inmune a un antígeno) tiene una estructura típica, de cadenas
pesadas y livianas, y una región de interacción especifica con el antígeno para neutralizarlo. También hay
proteínas fibrosas, como el colágeno, con funciones principalmente estructurales. La conformación le va a dar
resistencia a la proteína. A su vez, existen proteínas estructurales como la ATP sintasa, ubicada en la membrana
mitocondrial interna; va a tener un dominio de interacción con a.a hidrofóbicos para interaccionar con la
9
membrana y quedarse adherida, y otra parte globular donde se sintetiza el ATP ubicada mirando a la matriz
mitocondrial (entorno acuoso = naturaleza de los a.a distinta).
Niveles de organización estructural proteica
Estructura primaria: secuencia de aminoácidos de una cadena polipeptídica unidos por enlaces covalentes tipo
amida (por condensación, con la pérdida de una molécula de agua) denominados enlaces polipeptídicos. Esos
enlaces son del tipo amida, plano (por encima y por debajo del cual se ubican los distintos R’s), con carácter
parcial de doble enlace, resonancia e incapacidad de rotar.
Siguiente nivel/grado de plegamiento →
Estructura secundaria: plegamiento local de la cadena polipeptídica (aquellos residuos que se encuentran cerca)
estabilizada principalmente por pueden de hidrogeno. Podemos encontrar 3 tipos de estructura secundaria.
1- Alfa hélice: estructura de doble hélice que se enrolla sobre su eje longitudinal hacia la izquierda. Está
estabilizada por puentes de hidrogeno e/ H y O del enlace peptídico, ubicados a 4 a.a de distancia, ya
que c/ vuelta de la hélice está dada por 3.6 residuos de a.a. IMPORTANTE: Los enlaces pdH que
estabilizan esta estructura se producen entre el H unido al nitrógeno del grupo amino de un a.a y el O
del grupo carboxilo de otro a.a.
Al generarse esas interacciones/estabilizaciones por pdH, resultan pequeños dipolos en estas
interacciones haciendo que la hélice tenga finalmente como una distribución de carga con un extremo –
y otro +. Los tipos de a.a tiene mucho que ver a la hora de poder plegaste y formar la estructura; para
que se de este plegamiento los R’s no deben ser pequeños químicamente para poder interaccionar.
Glicina y Prolina NO tendrán tendencia a formar esta estructura.
A su vez, a consecuencia del dipolo formado, se van a tener en cuenta los a.a que se encuentran en los
extremos de la hélice → son dependientes de su R para poder estabilizar la estructura.
Los grupos N-H de todos los enlaces peptídicos apuntan en la misma dirección, la cual es
aproximadamente paralela al eje de la hélice. Además, todos los grupos R se encuentran dispuestos
hacia afuera de la hélice.
La estabilidad de la alfa-hélice está afectada por diversos factores que incluyen, entre los más
importantes: la interacción electrostática entre aminoácidos sucesivos con cadenas R que contienen
10
grupos cargados, los tamaños de los grupos R adyacentes, las interacciones entre grupos R espaciados
por tres o cuatro residuos y la presencia de residuos de Prolina (aminoácido con una configuración
diferente a la de los otros aminoácidos).
2- Hoja β -plegada: estructura en la que la cadena polipeptídica esta más extendida, en forma de hoja y
zigzag, formado por los distintos planos del enlace peptídico. Está estabilizada por puestas de
hidrogeno e/ H y O del enlace peptídico. Pueden a su vez adoptar 2 conformaciones → paralela,
cuando todas las hojas/planos/cadenas polipeptídicas están en la misma dirección, el mismo sentido
N→C; o anti-paralela cuando están en dirección contraria (una cadena corre del grupo amino al
carboxilo y la otra del carboxilo al amino).
ANTI-PARALELA PARALELA
11
3- Giros β: giros o dobleces dentro de la cadena polipeptídica constituidos por 4 residuos de a.a,
estabilizados por pdH. Tenemos 2 tipos, tipo I y tipo II, clasificados según su orientación. Se ubican
principalmente en regiones de interacción entre las distintas hojas plagadas, sean paralelas (formando
un “rulito”) o antiparalelas.
Una misma proteína puede tener distintas estructuras secundarias. Ejemplo: proteína transportadora de ácidos
grasos, que tiene un dominio de hoja plagada beta con a.a hidrofílicos mirando hacia la cara externa por su
función de transporte de compuestos no solubles (hidrofóbicos). A su vez en su interior tiene características más
hidrofóbicas con a.a más hidrofóbicos que hace que interacciones con el ácido graso que va a transportar y una
“tapita” que hace que el AG baje cuando se ubica en el interior. Después tambien podemos ver distintos giros
beta.
Los a.a con R voluminosas como isoleucina, valina, tirosina, fenilalanina y demás, favorecen las
conformaciones beta. Los a.a como el glutamato, metionina y alanina favorecen las conformaciones alfa, caso
contrario a la prolina y glicina.
Hay un gráfico denominado diagrama de Ramachandran en el que se representan los ángulos Φ “fi” y ψ “psi”
del enlace peptídico, los ángulos que SI pueden rotar, y que en teoría podrían de -180 a +180 grados, pero por
impedimentos estéricos dados por los grupos R no es posible: ciertas rotaciones no se pueden dar. En el grafico
se puede ver que dependiendo el ángulo se pueden adoptar distintas conformaciones, y esos ángulos que se
puedan dar dentro de una proteína van a estar dados por la naturaleza de los a.a que la constituyen.
Estructura terciaria: plegamiento tridimensional de una proteína, donde distintas regiones de la misma
interaccionan entre si para formar el plegamiento final y funcional de la proteína. Esta conformación está
estabilizada por interacciones hidrofóbicas (e/ los grupos R), por puentes de hidrógeno, por interacciones
electroestáticas, por interacciones hidrofóbicas que producen el apilamiento de grupos aromáticos o “stacking” y
puentes disulfuro. Algunas bibliografías, al ser el enlace S-S un enlace covalente, lo consideran como
estabilizador de la estructura primaria, pero es tambien cierto que interviene en la estabilización de una
estructura tridimensional.
Estructura cuaternaria: estructuras proteicas oligomericas, ya que están constituidas por más de 1 cadena
polipeptídica (+ de 1 monómero). Es una estructura que tiene que ver con la interacción e/ esos monómeros.
Está estabilizada por las mismas interacciones que la estructura terciaria: por interacciones hidrofóbicas (e/ los
grupos R), por puentes de hidrógeno, por interacciones electroestáticas, por interacciones hidrofóbicas que
producen el apilamiento de grupos aromáticos o “stacking” y puentes disulfuro.
12
Perdida de estructura: desnaturalización e hidrolisis
Desnaturalización: aquellos procesos que llevan a la perdida de la estructura cuaternaria (si la tuviera), terciaria
y secundaria. La estructura primaria se mantiene estable. Una proteína desnaturalizada perderá su capacidad
catalítica si la tuviese.
Se puede dar por agentes desnaturalizantes físicos (ultrasonido; microondas; radiaciones ionizantes y
temperaturas extremas sea calor o frío) o químicos (sales concentradas y agentes caotrópicos; detergentes;
solventes orgánicos; cambios de pH; sustancias reductoras, alquilantes y oxidantes). Los agentes físicos alteran
los estados vibracionales e/ los enlaces llevando a la desestabilización de las estructuras. En el caso de los
agentes químicos encontramos a los agentes caotrópicos como la urea y el etanol que interaccionan con el H2O
ligada (la que interacciona directamente con la proteína) y desestabilización la interacción H2O-proteina, que
lleva a la perdida de las estructuras. Los detergentes afectan las interacciones hidrofóbicas: forma micelas con la
parte hidrofóbica de la proteína desestabilizando este tipo de interacción. Los cambios de pH, por otro lado,
cambian los estados de ionización de los a.a afectando la interacción entre ellos. Las sustancias reductoras,
alquilantes y oxidantes, por ejemplo el β-mercaptoetanol, que rompe puentes S-S reduciéndolos a sulfhidrilos.
Hay procesos de desnaturalización: reversibles e irreversibles
Reversibles → cuando se retira el agente desnaturalizante, la proteína vuelve a plegarse a su estado nativo,
“vuelve a poder plegarse”, porque la información del plegado de una proteína (para adoptar su estructura
final) está en la estructura primaria, en la secuencia de a.a, y en los procesos de desnaturalización la secuencia
de a.a no se pierde.
Hidrolisis: aquellos procesos que llevan a la perdida de la estructura cuaternaria, terciaria, secundaria e inclusive
primaria. Es justamente la ruptura del enlace peptídico. Los agentes hidrolíticos son con ácidos o bases en
presencia de calor, por lo general, y tambien por acción enzimática (como proteasas digestivas).
➔ Para hacer estudios de desnaturalización de una proteína se mide alguna propiedad estructural de la
misma. Se ven cambios de la estructura secundaria por distintos métodos (ej. fluorescencia) o se puede
medir la actividad de la proteína/enzima por agregados sucesivos de los distintos desnaturalizantes. De
esta manera se obtiene curvas de desnaturalización, en donde se grafica el % de proteína plagada o
desplegada x los sucesivos agregados desnaturalizantes (ej. guanidino, urea, SDS). Por lo general la
curva presenta una forma sigmoidea, donde a bajas [desnat] encontramos proteínas mayormente en su
forma plegada y a alta [desnat] en su forma totalmente desplegada, y en el medio encontramos mitad
plegadas y otra mitad desplegadas.
Para sacar el % de proteínas plegadas o no, se sigue alguna propiedad de la proteína y sirven para
estudiar cuan estables son.
Clasificación de proteínas
- Simples o conjugadas → clasificación en base a su composición química

- Globulares o fibrosas → clasificación en base a su conformación
Simples: proteínas compuestas solamente por a.a como por ejemplo el colágeno, actina e insulina.
Conjugadas: proteínas compuestas por aminoácidos y otra sustancia de naturaleza no proteica que recibe el
nombre de grupo prostético, necesitado del mismo para poder ser activas, como por ej: lipoproteínas,
glicoproteínas, nucleoproteínas, fosfoproteínas, hemoproteínas, flavoproteínas, metaloproteínas, fitocromos,
citocromos.
Globulares: proteínas con forma esferoidal, de ovillo o casi esférica en la que se encuentra una cadena
polipeptídica plegada y, todo esto, le confiere la capacidad de ser solubles. Van a cumplir funciones
metabólicas, de unión molecular y dinámicas (de transporte). Ejemplos: mioglobina, hemoglobina, insulina, etc.
13
Fibrosas: proteínas con forma longitudinal, alargada en la que se encuentra una cadena polipeptídica estirada y,
todo esto, le confiere la capacidad de ser insolubles. Van a cumplir funciones principalmente estructurales o
estáticas. Ejemplos: colágeno, queratina, lana, etc.
TÉCNICAS DE CUANTIFICACIÓN, SEPARACIÓN Y PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS
Técnicas de cuantificación → espectrofotometría (medida de color proteica).
Técnicas de separación y purificación
• Por carga → electroforesis, cromatografía de intercambio iónico.

• Por tamaño → diálisis, cromatografía de exclusión molecular.
• Por afinidad → cromatografía de afinidad.
Se hace in vitro para poder estudiar la función proteica en un organismo/célula.
Espectrofotometría
Proceso mediante el cual se puede mediar la luz que absorbe una sustancia. Hay sustancias que son capaces de
absorber la luz a una cierta longitud de onda; esas sustancias son las que tienen dobles enlaces conjugados
(como los a.a aromáticos). Las proteínas compuestas por a.a aromáticos tienen la capacidad de absorber la luz
UV, y dicha capacidad permite cuantificarlas.
Para esto se usan espectrofotómetros, equipos que tienen una lampara que emiten luz de las distintas longitudes
de onda, un monocromador que nos lleva a elegir la longitud de onda en la cual queremos medir (ej. elegimos
medir a 280 nanómetros, que es la longitud de onda en la que absorben los a.a aromáticos, y hacemos que todo
ese rango de luz que emite la lampara solo me deje pasar la longitud de onda correspondiente a esos 280). Pasa a
través de una cubeta en la que ponemos la proteína, que va a absorber parte de la luz, y va a dejar pasar lo que
no emite. Finalmente encontramos un detector que nos dará como resultado la absorbancia de dicha proteína.
Hay una relación matemática, denominada Ley de Lambert-Beer, que nos relaciona justamente esa absorbancia
con la concentracion de la solución que estamos midiendo, en este caso la proteína.
ε → la absortividad molar es un coeficiente o una constante de extinción molar que se termina para cada
compuesto a una concentracion 1M.
Camino óptico → distancia que tiene que recorrer ese haz de luz dentro de la cubeta.
Si podemos medir su absorbancia (A), podemos calcular su concentracion de sustancia (C). A mayor A, mayor
C.
14
Tambien, para poder cuantificarlas, se le puede agregar un colorante o reactivo utilizando el método de
Bradford, que interacciona con aquellos a.a hidrofóbicos, que le da el color azul. Cuantas más proteínas tenga en
solución, más color azul se va a tener y el espectrofotómetro va a detectar más absorbancia. En ese caso, en vez
de medir a 280 se mide a 595 nanómetros y es una forma que permite cuantificar proteínas. SIEMPRE se
cuantifican por absorbancia → “cantidad en color”.
Esta técnica va para cualquier molécula que presente color.
Electroforesis
Técnica de separación. Existen electroforesis que se realizan en condiciones nativas o en condiciones

desnaturalizantes. En condiciones desnaturalizantes se agrega un agente desnaturalizante por lo general es un
detergente y un agente reductor como el β-mercaptoetanol → el detergente al romper con esas interacciones
hidrofóbicas, si es una proteína formada por + de una subunidad y que está estabilizada por enlaces hidrofóbicos
los interrumpe, y el β-mercaptoetanol rompe puentes S-S favoreciendo su desplegado.
Se puede realizar sobre distintos soportes, de papel o en gel.
Proceso: consiste en sembrar una proteína en un soporte al cual se le aplica un campo eléctrico (se lo enchufa a
una fuente que le da energía eléctrica). Siendo las proteínas moléculas que se cargan, a un cierto pH esas
proteínas van a tener cierta carga, y eso determina que migren al polo (+) o al (-) del campo eléctrico.
Habitualmente se trabaja a un pH 8,6 en donde todas las proteínas están cargadas negativamente y tenderán a
migrar al polo (+). De esta forma las proteínas van a ir separándose según su relación carga-masa. Aquellas más
pequeñas y más cargadas van a correr más rápido hacia el polo (+), y aquellas proteínas más pesadas y menos
cargadas van a correr más lento (van a trotar nomas) o quedaran retenidas en el soporte.
Ejemplo de gel → gel de acrilamida → polímero que dependiendo de la concentracion que se ponga se formara
un entramado. Cuanta más acrilamida se pone el entramado es más pequeño y permite separas proteínas más
chicas. Se suele utilizar entre 10/12/15 % de acrilamida.
A las proteínas de distintos tamaños se las siembra en la parte superior, se le aplica el campo eléctrico, y las
proteínas más pequeñas migraran rápidamente hacia el cátodo y las más grandes quedaran más retenidas. El gel
después se tiñe, se decolora y aparecen las bandas de las distintas proteínas con distintos pesos. Habitualmente
las proteínas que nosotros no conocemos se corre en paralelo con una mezcla de proteínas de peso molecular
conocido (estándares de peso molecular, se compran) y se sabe la banda a que peso molecular corresponde.
Permite deducir, si se mide la distancia del lugar de siembra a la banda, se puede hacer un gráfico en donde se
grafica la distancia de migración vs el log del peso molecular con la curva estándar. Se obtiene el grafico, y si
luego se mide la distancia que recorrió nuestra proteína por el grafico podemos determinar el peso molecular
aproximado. Esto tambien permite aislar a una proteína de una mezcla proteica, por ejemplo: se ve todo un
bandeo de proteínas y sé que la de mi interés pesa 100 kDa entonces se puede identificar la proteína de interés
en una mezcla heterogénea.
• En una electroforesis nativa se separa según su relación carga-masa.
• En una electroforesis desnaturalizante a todas las proteínas le otorga una carga (-) y en esa condición
únicamente se separan por su masa porque tienen todas la misma carga.
15
La electroforesis en la que se utiliza un soporte de papel se utiliza en la bioquímica clínica para el

diagnóstico de ciertas patologías. Por lo general se hace en base a proteínas séricas, ya que el
fibrinógeno es muy abundante. Se hace una extracción de sangre, se deja coagular para obtener el suero
y sus células precipitadas. Se la siembra en el papel a pH = 8,6 para que todas las proteínas se carguen
negativamente y migren todas al polo (+). La muestra se simbra sobre el polo (-), aplicamos un campo
eléctrico y las proteínas migraran al polo (+).
Plasma → cuando se obtiene sangre en presencia de un anticoagulante.

Suero → no contiene proteínas de la cascada de coagulación, porque participaron en el proceso de
coagulación y quedaron retenidas dichas proteínas en el coagulo.
Una proteinograma normal, la electroforesis de las proteínas séricas humanas, tendría una banda muy
grande mayoritaria que corresponde a la albumina, una banda α1, banda α2, banda β y banda γ. Para
cuantificar las proteínas que han sido identificadas en las bandas se utiliza un aparato que actúa como
escáner que cuantifica el color como la ley de Lambert-Beer → cuanto ms coloreo, más absorbancia
tiene.
Una corrida electroforética de proteínas séricas tiene esa forma con esas bandas. El proteinograma
obtenido, que es la medida del color de c/u de las bandas resulta en curvas de ese tipo. El de la
albumina es un pico alto y puntiagudo (alto = mucha absorbancia, agudo = constituido por una sola
proteína) → es una muestra homogénea. En cambio, las otras bandas son más bajas = tienen menos
16
cantidad de proteínas, pero son bandas más anchas porque c/u de ellas no está formada por una única
proteína, si no por un conjunto de proteínas que tiene todas más o menos la misma movilidad. La banda
gamma es la más ancha porque tiene a todas las Ig para todos los antígenos. Para calcula la proporción
en % e calcula el área bajo la curva de c/u de los “picos”.
Alteraciones de proteinogramas de suero humano → valor diagnostico
Ausencia de la banda α1 → deficiencia de α-antitripsina.

Incremento de la banda α1 y α2, descenso de la banda β → reacción en fase aguda.
Incremento de la banda γ → infección.
Presencia de una banda monoclonal (+ coloreada) en la región γ → incremento de 1 tipo específico de
Ig → mieloma múltiple → cáncer
Ausencia/disminucion de la banda γ → inmunodeficiencia.
Incremento de bandas β y γ formando un puente → característico de infecciones hepáticas.
Electroforesis de hemoglobina
Se toma una muestra de sangre con anticoagulantes o no, se centrifuga la sangre, se toma el paquete de
glóbulos rojos, se los lisa/rompe para la liberación de hemoglobina → muestra con la que se va a
trabajar a pH 8,6 para tenerla cargada negativamente y que migre hacia el cátodo.
Hb del adulto (Hb A) → 2 cadenas alfa y 2 beta.

Hb fetal (Hb F) → 2 cadenas alfa y 2 gamma → es progresivamente sustituida por la Hb A.
Esta diferencia de composición hace que la Hb F tenga mayor afinidad por el O2 que la del adulto, ya
que la Hb F tiene que ser capaz de tomar el O2 de la Hb A de la madre.
En el adulto se encuentran bajas [Hb fetal], excepto en el caso de padecer anemia falciforme que se ve
aumentada. La anemia falciforme ocurre cuando hay una mutación dentro de la hemoglobina y se la
llama Hb S.
Hb S → se cambia un a.a con carga negativa por un a.a sin carga → tendencia a agregarse y
funcionalmente defectuosa → la sustitución de un solo a.a hace que la migración sea + lenta.
Esta electroforesis lleva a ver si el paciente presenta esa Hb defectuosa y si puede llegar a compensar
esa mutación con la síntesis de Hb F. Las Hb que más corre es la A, la sigue la F y por último la S.
17
18
Enzimas
Definición: catalizador biológico de naturaleza principalmente proteica.
Un catalizador, a su vez, es una sustancia que tiene la capacidad de acelerar o aumentar la velocidad de una
reacción química sin consumirse en la misma. Permiten que los tiempos en los que ocurren las reacciones
químicas del metabolismo u otros procesos biológicos sean compatibles con la vida. Ej: enzima invertasa de la
digestión que hidroliza al disacárido sacarosa en los monosacáridos que la componen → la reacción podría
ocurrir espontáneamente en ausencia de la enzima pero a una velocidad muy lenta, y la invertasa hace que la
reacción ocurra a una velocidad suficiente para que el tiempo sea compatible con el proceso de digestión.
Características de las enzimas
1) La mayoría son proteínas, o ARN (ribozimas).
2) Presentan alta especificidad por el sustrato (S) y muy específicas para la reacción que catalizan.
3) Presentan gran capacidad para acelerar reacciones químicas.
4) Actúan en un rango óptimo de pH y T (temperatura).
5) Medicina:
✓ Implicadas en patologías de origen genético (una mutación → deficiencia en la actividad enzimática →

trastorno metabólico).
✓ Utilidad en el diagnóstico clínico (por su actividad biológica).
6) Otras aplicaciones:
✓ Herramientas en técnicas de biología molecular.
✓ Blanco de fármacos en tratamiento de diferentes patologías.
En las enzimas proteicas ocurre lo mismo que con las proteínas de naturaleza no catalítica: pueden ser simples o
conjugadas. Cuando son simples, únicamente están constituidas por una parte proteica y se las denomina
apoenzimas. Cuando son conjugadas (no totalmente proteicas), las enzimas completas y activas se denomina
holoenzimas, con una parte proteica o apoenzima + un cofactor de naturaleza no proteica.
Tipos de cofactores:
Iones inorgánicos que se unen temporariamente/transitoriamente a las enzimas. Ej. Fe, Cu, Zn, etc.
Coenzimas: moléculas orgánicas pequeñas que interaccionan débilmente durante la catálisis, por ende se unen
reversiblemente. Transportadores transitorios de grupos funcionales. La mayoría de las coenzimas son derivadas
de vitaminas, muchas de las cuales deben ser incorporadas con la dieta. Ej. NAD (nicotin adenin dinucleótido o
nicotinamida adenina dinucleótido), coenzima A (CoA).
Grupos prostéticos: ion metálico o coenzima que está unido a la enzima de manera covalente. Ej. FAD (flavín
adenín dinucleótido o dinucleótido de flavina y adenina), Retinal.
19
Los cofactores tambien pueden ser clasificados en:
Catalíticos → si no son consumidos en la reacción.
No catalíticos/cosustratos → si son transformados durante la reacción.
Muchos cofactores, coenzimas y grupos prostéticos actúan como transportadores transitorios de grupos
funcionales. Por ejemplo, los grupos asilos son transportados por coenzima A, los e- pueden ser transportados
por iones como el Fe, por coenzimas como NAD o grupos prostéticos como FAD.
Ejemplos de cofactores: iones inorgánicos como Cu y Fe (ferroso o férrico) sirven de cofactores para citocromo
oxidasa, catalasa o peroxidasa. El K para la piruvato quinasa. Las enzimas que usan ATP como cosustrato
requieren Mg, ya que le sustrato real de estas enzimas es un complejo ATP-Mg. Otros iones que actúan como
cofactores enzimáticos son el manganeso (Mn), molibdeno (Mo), níquel (Ni), selenio (Se) y zinc (Zn).
Coenzima A: actúa como cofactor en reacciones donde se transfieren grupos acetilos o acilos que formaran una
unión tioéster con el grupo tiol o sulfhidrilo.
ATP: actúa como cofactor transfiriendo grupos fosfato.
NAD/NADP/FAD: están representadas en sus formas oxidadas en la foto; actúa como cofactores en reacciones
oxidativas aceptando e-, iones hidruro o átomos de H. El FAD se encuentra unido covalentemente a las
apoenzimas, constituyendo un grupo prostético.
20
Los humanos no podemos sintetizar de novo a muchas coenzimas, necesitamos ingerir para eso en la dieta a
precursores o vitaminas. La mayoría son vitaminas del grupo B.
Según el tipo de reacción catalizada, las enzimas se clasifican en 6 grandes grupos:
1- Oxidorreductasas: aquellas que catalizan reacciones redox o de oxido-reducción; en ellas se produce

la transferencia de e- de átomo de H o de iones hidruro.
2- Transferasas: catalizan reacción donde ocurre la transferencia de grupos funcionales. Ej.
fosfotransferasas transfieren grupos fosfato.
3- Hidrolasas: catalizan reacciones de hidrolisis → ruptura de un enlace por la incorporación de 1
molécula de H2O. También podemos verlas como si catalizaran la “transferencia de un grupo funcional
al agua”.
4- Liasas: catalizan la adición de grupos a un doble enlace o, a la inversa, la formación de un doble enlace
por la remoción de grupos.
5- Isomerasas: catalizan la transferencia de un grupo de una posición a otra dentro de la misma molécula,
para convertir un isómero de posición en otro.
6- Ligasas: catalizan reacciones donde hay formación de enlaces C-C, C-S, C-O, y C-N por reacciones de
condensación acopladas a la hidrolisis de ATP o cofactores similares como el GTP.
Código o Número EC
Conjunto de 4 números que identifican a una enzima. Ejemplo: EC 3.2.1.26 identifica a la invertasa o sacarasa
(nombre sistemático β-fructofuranosidasa).
El primer número corresponde a la clase o grupo (3=hidrolasas). El segundo y tercer número son subgrupos y
sub-subgrupos, y el cuarto corresponde a la enzima individual.
Funcionamiento de las enzimas
Las Enzimas son catalizadores altamente específicos que aumentan las velocidades de reacción por un factor de
105 a 1017. Esto pueden lograrlo por tener una estructura de sitio activo complementario al estado de transición.
Las reacciones catalizadas por enzimas se caracterizan por la formación de un complejo ES (enzima-sustrato).
Este luego se convierte en un complejo EP (enzima-producto) que se disocia para generar el producto libre (E +
P) y regenerar la enzima en su estado original.
21
La catálisis se realiza disminuyendo la energía de activación de la reacción. El equilibrio de la reacción no se

modifica por la acción de la enzima.
En el siguiente diagrama vemos cómo cambia la energía libre en el transcurso de una reacción. A la diferencia
de energía libre entre reactivos/sustratos y productos la denominamos ΔG: Cuando esta magnitud es negativa,
significa que en la reacción se libera energía libre; en este caso la reacción es exergónica y puede ocurrir
espontáneamente. Cuando esta magnitud es positiva, la reacción es endergónica y no puede ocurrir
espontáneamente. Como se va a ver en bioenergética, el ΔG está relacionado con el equilibrio de la reacción:
cuanto más – el ΔG, el equilibrio esta más desplazado hacia los productos.
Que una reacción sea exergónica y por lo tanto espontanea no significa que pueda ocurrir a una velocidad
apreciable. El ΔG se relaciona con el equilibrio pero no nos dice nada sobre la velocidad de la reacción. La
velocidad de la reacción depende de la energía de activación (Ea), que es la diferencia de energía libre entre el
estado de transición y el estado inicial (los reactivos y los productos). La Ea es la barrera energética que debe
superar para que los reactivos se conviertan en productos, y mientras más alta es esta barrera más lenta es la
reacción.
En el diagrama de la derecha tenemos una comparación de los cambios energéticos producidos en una reacción
catalizada o no catalizada, con y sin enzima. Vemos que la diferencia está en el valor de energía libre del estado
de transición. En presencia de la enzima se crea un nuevo camino para la reacción que ahora pasa por un estado
de transición diferente que es más estable o de menor energía libre que en ausencia de la enzima; en
consecuencia la enzima disminuye la Ea de la reacción, o la barrera energética a superar para pasar a producto, y
por lo tanto aumentara la velocidad de la reacción. Tambien podemos ver en el diagrama que la enzima no
modifica la energía libre de los estados iniciales o sustratos y estados finales o productos de la reacción. En
consecuencia, no modifica el ΔG de la reacción y por tanto no puede oficiar el equilibrio de la reacción.
¿De dónde proviene la energía para estabilizar el estado de transición y disminuir la Ea (ΔGŧ)?
➔ La mayor parte del poder catalítico de las enzimas proviene de la energía libre liberada al formarse
múltiples interacciones débiles entre el sustrato y la enzima. Esta energía de fijación contribuye tanto a
la especificidad como a la catálisis.
➔ Los sitios activos son complementarios al estado de transición, no a los sustratos en sí. El sitio activo
está estructurado para que esas interacciones débiles ocurran preferentemente en el estado de
transición.
Supongamos una reacción hipotética en la que se produce el quiebre o ruptura de una varilla metálica. En la
figura el sustrato es la varilla extendida, en estado de transición es la varilla doblada y los productos son los
trozos de la varilla quebrada. A la derecha vemos el diagrama del cambio de energía libre que ocurre en este
proceso.
En una segunda suposición, una enzima cuyo sitio activo (SA) es bien complementario al sustrato, con imanes
interactuando con la varilla metálica. Esta unirá al sustrato con muy alta afinidad, pero no va a ser efectivo para
22
catalizar la reacción porque se produciría una gran estabilización del complejo ES y la Ea terminara siendo
mayor que en ausencia de la enzima → disminución de la V. de la reacción → enzima NO efectiva.
En el caso de una enzima con el SA complementario al estado de transición o la varilla oblada. Esta enzima,
si bien tendrá menor afinidad por el sustrato, logrará estabilizar el estado de transición y disminuir la Ea.
Esto hace que logre ser un catalizador EFECTIVO.
Sitio activo
La necesidad de múltiples interacciones débiles para impulsar la catálisis es una de las razones de que las
enzimas sean tan grandes, generalmente mucho más grandes que los sustratos.
Antes se pensaba en un modelo llave-cerradura, en el que el sustrato era complementario al sitio activo o,
mejor dicho, al estado de transición de ese sustrato. Hoy es más aceptado el modelo de ajuste inducido.
Modelo de ajuste inducido: la complementariedad con el estado de transición del sustrato no es muy
evidente cuando tenemos la enzima aislada, pero aparece luego de la unión del sustrato debido a cambios
conformacionales inducidos por dicha unión.
23
CINÉTICA ENZIMÁTICA
Uno de los estudios clásica de la velocidad enzimática es construir curvas de la velocidad inicial de la
reacción en función de la concentracion de sustrato.
Se pueden conseguir dos tipos de curvas. Las enzimas que siguen la cinética de Michaelis-Mensten siguen
una curva hiperbólica y las enzimas alostéricas que presenta cooperatividad positiva muestran una curva
sigmoidea.
Que es y cómo podemos medir la velocidad de una reacción?
Cuando transcurre una reacción química ocurre un aumento en la concentración del producto concomitante
con una disminución de la concentración del reactivo/sustrato.
Velocidad de reacción es el cambio en la concentración de producto en la unidad de tiempo. También puede

definirse como el cambio en la concentración del sustrato en la unidad del tiempo, en este caso con el signo
invertido ya que disminuye con el tiempo. Es decir, se necesita de un método para medir como el producto
va apareciendo o como el sustrato va desapareciendo con el tiempo. Normalmente, se utiliza como
referencia alguna propiedad que cambien entre el sustrato y el producto, por ejemplo la densidad óptica o
“capacidad de absorber luz”, o si la reacción involucra gases podría medirse el cambio de presión, un
método de cuantificación como cromatografía, una reacción acoplada en la que el producto de la 1era
reacción sirva como sustrato de una 2da reacción acoplada que permita su fácil cuantificación.
Teniendo el método adecuado, se construye una curva de producto o sustrato en función del tiempo. La
velocidad de la reacción es relativamente alta a tiempos cortos, pero va disminuyendo con el tiempo hasta
ser 0 cuando alcanza el equilibrio ya que la concentración del sustrato va disminuyendo con el tiempo y
también se da por efecto de la reacción inversa cuya velocidad aumenta cuando se va formando producto.
Lo que interesa determinar es:
Velocidad inicial (V0): Velocidad a tiempo 0. Es el punto donde se conoce la cantidad de sustrato, que es la
que agregamos inicialmente al medio de reacción y sabemos que la concentración de producto va a ser igual
a 0 por lo que no va a haber influencia de la reacción inversa.
Hacemos esto para distintas concentraciones de sustrato (como se muestra en el grafico 0.2, 0.5 y 1.0) y en
cada caso determinamos la V0, calculando la pendiente de la tangente a la curva a tiempo 0.
24
Una vez determinada la V0 a diferentes concentraciones de sustrato, construimos una curva de velocidad
inicial (V0) en función de la concentración de sustrato. Recordemos, las enzimas que siguen la cinética de
M-M obtendrán una curva hiperbólica, y las enzimas alostéricas que presenta cooperatividad positiva
obtendrán una curva sigmoidea. En cualquier caso, siempre se observará una saturación con el sustrato, lo
cual es una característica distintiva de la catálisis enzimática.
Modelo de Michaelis Menten
Ecuación final →
La Vmax estará dada por k2, que es la constante de velocidad de la reacción de conversión del complejo ES
en producto por la concentracion de encima total. Sera la V que podría alcanzarse con una [S] = ∞. Se
puede ver claramente que cuando la [S] es muy grande e relación el Km, el valor en el denominador puede
ser despreciado y entonces la V0 tiende a ser igual a la Vmax.
El Km es la relación entre la suma de las contantes de V de las reacciones que hacen desparecer al complejo
ES, que son k2 y k-1 y esto dividido k1 que es la contante de V de la reacción en formación del complejo
ES. Podemos ver de la ecuación M-M que cuando la [S] = Km, la V0 será exactamente igual a la mitad de
la Vmax.
Otra manera de ver esto es que, a concentraciones muy altas de sustrato, toda la enzima estará formando el
complejo ES porque estará saturada por el sustrato, alcanzando así la velocidad máxima. Cuando la [S] =
Km solo la mitad de la [E] estará formando el complejo ES (50% de saturación). Tambien se puede decir
que el Km es una constante que está inversamente relacionada con la afinidad de la enzima por el sustrato: a
menor Km, mayor afinidad y la enzima saturará con menores concentraciones de sustrato.
La Vmax, en cambio, no es constante porque varía proporcionalmente con la cantidad de enzima y estará
relacionada con el número de recambio de la enzima, que sería k2 y Kcat (ver más adelante).
De las curvas hiperbólicas no es simple calculas la Vmax; tendremos una incerteza ya que la Vmax solo se
alcanza con [S] = ∞, y no podremos alcanzar nunca. Así mismo esa incerteza se aplica al Km porque
necesitaríamos saber ½ Vmax. Hay programas que calculan la velocidad máxima a partir de una serie de
datos experimentales mayores al número de parámetros a calcular (+ precisión).
25
Representación gráfica tradicional de Lineweaver-Burk (doble recíproca)
Se define como la transformación algebraica de la ecuación de M-M en una forma que nos permite calcular
los valores de Vmax y Km por extrapolación de una recta, y se usa si no disponemos de un programa de
computadora o de cálculo de regresión no lineal se utiliza este método.
Si tomamos la inversa de la ecuación de M-M, vamos a obtener la ecuación de una recta: la inversa de la V0
en función de la inversa de la [S], tendremos una recta que tendrá una pendiente igual al Km sobre la Vmax
y la ordenada al origen será igual a la inversa de la Vmax (1/Vmax). Tambien, si extrapolamos la resta
hasta el valor de la reciproca de V = 0, tendremos el valor de -1/Km. Con estos gráficos de doble reciproca,
podemos obtener los valores de Vmax y Km con relativa facilidad ad por un método gráfico.
Ordenada al origen → punto donde la recta corta al eje Y
Determinación de Km y Vmax de una enzima que sigue la cinética de M-M: experimento
Se necesitan 3 tubos de ensayo en los que ponemos tres concentraciones diferentes de sustrato (S1, S2, S3)
en un buffer con el pH óptimo de la enzima. Llevamos a cabo la reacción a la temperatura óptima y
largamos la reacción por el agregado de una misma cantidad de enzima en los tres tubos. Si el producto de
la reacción es coloreado podemos seguir el transcurso de la reacción con el tiempo por espectrofotometría.
De esta manera tenemos las tres curvas de concentración del producto en función del tiempo para los 3
tubos.
26
De las curvas a tiempo 0, calculamos las tres velocidades iniciales correspondientes a las tres [S].
Construimos un gráfico de la velocidad inicial en función de la concentración del sustrato donde veremos si
la curva es hiperbólica. Si es así, se puede usar un programa de cálculo de regresión no lineal para calcular
Km y Vmax o podemos usar la transformación doble recíproca para calcularlas.
Unidades
Unidad de actividad enzimática (UAE): Cantidad de producto formado de sustrato consumido por unidad
de tiempo (no solo habla de lo que se forma, sino tambien de la cantidad que se está consumiendo).
Por ejemplo 1 UAE puede definirse como:
❊ La cantidad de enzima que transforma un μmol de sustrato/min.
❊ La cantidad de enzima que sintetiza 1mol de producto por segundo.
Hay ciertas variaciones en ellas pero siempre son unidades de concentracion o cantidad por tiempo. Se
determinan en condiciones óptimas de pH, temperatura y [S].
Unidad Internacional (UI): Cantidad de enzima que cataliza la transformación de 1 μmol de producto por
minuto en condiciones óptimas de pH, temperatura y [S].
Actividad específica (AEsp): Número de unidades internacionales de enzima por miligramo de proteína
(μmo/min x mg proteína o AEnz/mg proteína).
La determinacion de la misma es importante durante el proceso de purificación de una enzima, porque a

medida que la purificacion aumenta la AEsp va a ir incrementando y, cuanto mas pura este una enzima,
mayor sera su AEsp.
Número de recambio, Kcat o k2: Número de moléculas de sustrato convertidas en producto por unidad de
tiempo y por molécula de enzima en condiciones de saturación.
Este valor equivale a la constante de V de transformación del complejo ES en P y se obtiene haciendo:
Kcat: Vmax/[E]total
27
Factores que alteran la actividad enzimática
La concentración de cofactores afectara la actividad enzimática de manera similar a como lo hacen las
concentraciones de solutos. Otros factores que afectan la actividad enzimática son la temperatura y el pH.
La temperatura: Los gráficos de actividad enzimática en función de la temperatura presentan normalmente

una forma de campana. Las reacciones químicas no enzimáticas son favorecidas por un aumento de la
temperatura, ya que el aumento de esta facilitará la superación de la barrera energética, que significa la Ea.
En el caso de las reacciones enzimáticas, sin embargo, el aumento de actividad ocurre a temperaturas
relativamente bajas; pero a temperaturas relativamente altas, las proteínas, los ARN y por tanto todas las
enzimas son desnaturalizadas, produciendo la disminución de la actividad enzimática. A su vez, las enzimas
mostraran una temperatura óptima para su actividad. Cuanto más estable es la enzima va a presentar una
mayor temperatura óptima → el máximo en la campana ocurrirá a mayores temperaturas.
El pH: La mayoría de las enzimas presentan un pH óptimo, ya que los cambios de pH pueden afectar la
ionización del sustrato (si este es ionizable) o de residuos de aminoácidos en diferentes partes de la
proteína, ocasionando cambios conformacionales, modificar la unión del sustrato o modificar el proceso de
catálisis en el sitio activo cuando se modifica la ionización de estos grupos en el sitio activo. Algunas
enzimas pueden ser desnaturalizadas cuando son sometidas a pH extremos. La mayoría de las enzimas
intracelulares tienen un pH óptimo cercano a 7 o 7.5, pero la pepsina que actúa en el estómago tiene un pH
óptimo de 2 y la tripsina (intestinal) tiene un pH óptimo alrededor de 8.
Mecanismos de inhibición de la actividad enzimática
En general, hay pocos inhibidores naturales, generalmente son fármacos o medicamentos usados con fines
terapéuticos, de gran importancia en medicina.
Clasificamos 2 grandes grupos de inhibidores:
Reversibles: se unen de manera reversible a la enzima por interacciones débiles. 4 tipos de mecanismos:
❊ Competitivo ❊ Mixto
❊ Acompetitivo ❊ No competitivo
28
Irreversibles: se unen de forma irreversible por unión covalente. Distintos mecanismos pero solo mencionamos
este porque tienen una amplia aplicación como fármacos:
❊ Inhibidores suicidas
Inhibidores reversibles
Competitivos
Similaridad estructural con el sustrato y se unen al mismo sitio que él, por lo que se produce una competencia
entre el inhibidor y el sustrato por la unión al SA. No modifican la Vmax, pero disminuyen la afinidad aparente
de la enzima por el sustrato (aumenta el Km) → tambien se puede expresar como KmI > Km.
Un inhibidor competitivo solo puede unirse a la enzima libre, pero no al complejo ES ya que el sitio activo está
ocupado por el sustrato. Si construimos un gráfico de doble reciproca en presencia y ausencia de una
determinada [IC], observamos un mayor Km en presencia que en ausencia del inhibidor. Disminuye el valor
absoluto de -1/Km. La competencia e/ sustrato e inhibidor por el mismo sitio genera una aparente disminución
de la afinidad por el sustrato. El Km en presencia del inhibidor se verá incrementado en una magnitud
relacionada con la [IC] y la constante de disociación del complejo E-IC, KI, que será una medida de la afinidad
E-I. En el grafico tambien vemos que la presencia del inhibidor no cambia el valor de la Vmax: al existir
competencia por el mismo sitio, si se incrementa suficientemente la [S] se podrá desplazar a todo el IC del sitio
activo y por lo tanto se alcanzará la Vmax.
Acompetitivos, mixtos y no competitivos
Se unen a un lugar distinto del sitio activo, pero terminan cambian la conformación de la enzima y del sitio
activo interfiriendo con la reacción. Estos 3 tipos de inhibidores producen una disminución de la Vmax, y entre
si se diferencian por el efecto que tienen sobre la afinidad aparente.
Si KmI < Km es un inhibidor acompetitivo.
Si KmI > Km aumenta es un inhibidor mixto.
Si KmI = Km es un inhibidor no competitivo.
29
Inhibidor acompetitivo
En este caso el inhibidor se une al complejo ES pero no se puede unir a la enzima libre, es decir, se necesita la
unión previa del sustrato para que el inhibidor pueda unirse a la enzima. La presencia del inhibidor en el
complejo ternario ESI de alguna manera impide que el sustrato pueda convertirse en producto. Esto solo puede
ocurrir desde el complejo S.
En la curva de doble reciproca vemos que esta situación genera curvas paralelas con una progresiva disminución
en los valores de Km y Vm a medida que aumentamos la concentracion de inhibidor.
Inhibidor mixto
Este inhibidor se une a la enzima libre y al complejo ES con diferente afinidad: KI es diferente de K’I. De alguna
manera la presencia del sustrato afecta a la unión del inhibidor. Como en el caso anterior, el producto solo puede
formarse desde el complejo ES y no desde el complejo ESI. En las curvas de doble reciproca podemos ver que
al irse incrementando la [IM] observamos una progresiva disminución de los valores de Vmax y un progresivo
incremento en los valores de Km.
Es más efectiva la unión a la enzima libre que al complejo ES.
Inhibidor no competitivo
El inhibidor se une a la enzima libre y al complejo ES con la misma afinidad. En este caso KI = K’I. Es un caso
particular de la inhibición reversible mixta. En la curva de doble reciproca, vemos que la presencia del inhibidor
produce una disminución en la Vmax y ningún cambio en el Km. Ni la presencia del inhibidor afecta la afinidad
de la E por el S, ni la presencia del S la afinidad de la E por el InC. Esta independencia por los 2 sitios de unión
de S e InC indicaría que estos sitios están de alguna manera alejados e/ si, que no hay interferencia e/ los
30
mismos, aunque la unión del inhibidor afecta al sitio activo de la E para dificultar la formación del producto y
hacer que disminuya Vm, por esa razón se indica un sitio activo “deformado”.
Inhibidores irreversibles - inhibidores suicidas (sustratos suicidas)
Estos inhibidores, específicamente los suicidas, son diseñados para inactivar selectivamente a una enzima. Son
análogos del sustrato y son convertidos por la enzima en una especie reactiva que termina uniéndose al sitio
activo de manera covalente, inactivando a la enzima.
Ej: ácido clavulánico (amoxicilina) es un inhibidor suicida para la β-lactamasa, la cual es una enzima que
expresan aquellas bacterias resistentes a la penicilina y sus derivados de la penicilina, como la amoxicilina. La
β-lactamasa rompe el anillo β-lactamico de la penicilina dando un compuesto inactivo: el ácido penicilinoico. La
penicilina y derivados son usados para combatir infecciones bacterianos. Estos inhiben la síntesis del
peptidoglicano de la pared celular de las bacterias impidiendo la formación de enlaces cruzados entre las
cadenas de péptidos esto disminuye la rigidez de la pared celular bacteriana, resultando en la muerte de las
bacterias por tener poca resistencia a la presión osmótica.
Para evitar a la resistencia a la penicilina o sus derivados, estos antibióticos se administran conjuntamente con
ácido clavulánico, el cual tiene una estructura similar a la penicilina y le permite unirse al sitio activo de la β
lactamasa. Tiene tambien un anillo β-lactámico que al ser clivado genera ahora un grupo muy reactivo que se
une a una serina del sitio activo y así puede inactivar a la enzima.
ENZIMAS REGULABLES
La actividad de una enzima puede estar regulada:
- Mediante la cantidad de enzima presente por la regulación de su síntesis, es decir, la regulación de su

concentración (a través de la transcripción de sus genes o degradación por ubiquitinizacion).
- Mediante la regulación de una enzima preexistente (ya presente en el sitio de acción).
31
Regulación de la actividad de una enzima preexistente
1. Regulación alostérica: regulación por medio de ligando.

2. Regulación por modificación covalente: por ejemplo, por fosforilación.
3. Regulación por compartimentalización: se la saca a la enzima de su sitio de acción.
4. Regulación por unión a proteína regulatoria.
5. Regulación por activación proteolítica (irreversible).
Suponiendo un ejemplo en el que ubicamos una ruta metabólica con pasos reversibles o irreversibles y donde
actuaran varios tipos de enzimas desde A (la molécula inicial) para resultar finalmente en D (el producto): Por lo
general, las enzimas que están reguladas en una ruta metabólica va a ser las primeras de la vía (para una gestión
productiva de recursos energéticos por parte de la c en cuanto a productos que no requiere) o en encrucijadas
metabólicas (donde un intermediario de las vías puede seguir varios pasos dependiendo la condición fisiológica
de la c, la condición energética intrac). También, por lo general, regulan reacciones irreversibles.
Enzimas alostéricas
Estas enzimas contienen dos sitios: un sitio activo o catalítico de unión del sustrato y un sitio regulatorio o
alostérico al que se le une un modulador positivo o negativo. Un modulador alostérico + es una sustancia o
molécula que se une al sitio, le produce un cambio conformacional y aumenta su actividad enzimática; un
modulador alostérico - es una sustancia o molécula que le produce un cambio conformacional que provoca la
disminución su afinidad por el sustrato → desciende la actividad catalítica.
32
• Siguen cinéticas del tipo sigmoideas donde se presenta el efecto cooperativo o cooperatividad que
siguen estas enzimas. Las curvas sigmoideas representan una variable que se incrementa primero
lentamente.
• La mayoría presentan estructura cuaternaria porque están compuestas por varias subunidades (como las
mencionadas recién, catalítica y regulatoria)
• Existen 2 tipos de enzimas alostéricas: homotrópicas (el modulador alostérico es igual que el sustrato)
o heterotrópicas (el modulador alostérico es una molécula distinta al sustrato).
En el gráfico de arriba podemos ver las velocidades iniciales vs [S]. Las curvas sigmoides, distintas a las curvas
Michaelianas que son hipérbolas. Vemos tambien una Vmax y un “Km”, que en vez de Km es K aparente o
K0,5 en donde la cinética está caracterizada por V = Vmax . [S]n / K0,5 + [S]n. K0,5 representa la misma
definición que la de Km.
Las enzimas alostéricas existen en dos conformaciones:
❊ Conformación R: Relajada, de mayor actividad (conf. favorecida por: modulador positivo).
❊ Conformación T: Tensa, de menor actividad (conf. favorecida por: modulador negativo).
Unión de un modulador → inducir una determinada conformación → cambio en la cinética.
Modulador + → R → toma la curva hiperbólica (similar a las Michaelianas).
Modulador - → T → corre la curva hacia la derecha.
Hay distintos modelos para ver cómo funcionan las enzimas alostéricas:
33
Modelo concertado (Monod): todo o nada (concierto → “todos a la vez”)
La enzima en su estado tenso, cuando se produce un cambio conformacional a todas sus subunidades a la vez
por el modulador alostérico que favorezca la conformación R y así aumente su afinidad por el sustrato. Pasan de
todas sus subunidades de estado tenso a estado relajado.
Modelo secuencial (Koshland) (secuencia → uno por uno)
La unión del modulador alostérico produce un cambio conformacional en una de sus subunidades favoreciendo
la unión por el sustrato. Este cambio conformacional produce el cambio conformacional de otro de manera
secuencial, que aumenta la afinidad por el sustrato y se van cambiando sucesivamente. Se evidencia un efecto
cooperativo, algo similar a lo que se vio con la hemoglobina.
Como pueden ser las curvas? Las curvas de cinética de las enzimas se diferencian en distintos tipos y evidencia
como puede afectar la velocidad la presencia de un modulador.
En el caso de las enzimas alostéricas homotrópicas, donde el modulador es = al sustrato, la velocidad en

presencia de un modulador + se desplaza hacia la izquierda variando su K0,5 y haciendo más eficiente la
actividad; en presencia de un modulador – se desplaza hacia la derecha aumentando así el K0,5.
En el caso de las enzimas alostéricas heterotrópicas, evidenciamos 3 situaciones:
- En donde el modulador + disminuya el K0,5 haciendo más afín la proteína por el sustrato pero que su
Vmax se mantenga igual.
- En donde el modulador – aumente el K0,5 y la Vmax.
- En donde el modulador alostérico + heterotrópico varíe tanto el K0,5 como la Vmax (aumentando la
Vmax o variando el K0,5 y disminuyendo la Vmax).
En todos los casos hay una variación del K0,5, donde la presencia del modulador alostérico + le otorga mayor
afinidad a la enzima por el sustrato.
34
Ejemplo de enzima alostérica - PKA (Proteín quinasa A)
Es un intermediario en las vías de traducción de señales de algunas hormonas como glucagón y adrenalina.
Quinasa → Fosforila sustratos. A → es dependiente del AMPc.
Está constituida por cuatro subunidades (dos subunidades catalíticas y dos subunidades regulatorias) que cuando
aumenta el AMPc en la célula (porque se produce una vía de traducción de señales donde se une una hormona a
un ligando y activa una adenilato ciclasa = aumenta el AMPc) lleva a que se una a los sitios regulatorios de la
PKA separándolos de los sitios activos, produciendo que la PKA se active y esta puede fosforilar toda una serie
de proteínas necesarias para activar esa vía de traducción de señales.
Modificación covalente
Consiste en la unión covalente de distintos compuestos que pueden activar o inactivar a la enzima. Son
reversibles y están dadas por otras enzimas. Ejemplos:
Mas ampliamente distribuida → Fosforilación
Hay proteinquinasas que fosforilan proteínas, siendo el ATP la molécula dadora del fosfato (P). Las enzimas
fosforiladas pueden ser activas o inactivas. Los residuos que se fosforilan son las tirosinas, las serinas, treoninas
o histidinas.
Quinasas → FOSFORILAN Fosfatasas → DESFOSFORILAN
Adenilación
Consiste en la unión de una adenina a la enzima, siendo también el ATP el dador y liberando pirofosfato (PPi).
Los residuos adenilados son las tirosinas. Tambien los residuos ε-amino de las lisinas, siendo el acetil-CoA el
dador del grupo acetilo.
Miristoilación
Consiste en la unión de un ácido graso, por lo general también a extremos ε-amino de las lisinas, siendo el
miristoil-CoA el dador del AG y de esta manera se activa o inhibe alguna proteína.
Ubiquinizacion
En residuos de lisina es la forma en la que se marcan ciertas proteínas para que estas sean degradadas por el
proteosoma. Este proceso es reversible, pero una enzima ubiquitinizada es inmediatamente degradada por el
proteosoma → la proteólisis es irreversible, pero el mecanismo de ubiquitinación es reversible.
35
ADP-ribosilacion
Siendo el NAD el dador del grupo ADP-ribosil
Metilación
En residuos de glutamina por la S-adenosil-metionina.
Ejemplo de enzima regulada de manera covalente: Glucógeno fosforilasa
Es la enzima encargada de la degradación del glucógeno a glucosa. Hay 2 isoformas de esta enzima que van a
corresponder al hígado y al musculo respectivamente. Existe en la conformación fosforilasa b (menos activa) y
en una conformación fosforilasa a (más activa).
Cuando es fosforilada por una fosforilasa quinasa por medio de dos moléculas de ATP, la proteína fosforilasa
toma la conformación a, convirtiéndose en más activa. Esta cascada está inducida por hormonas.
Fosforilada → más activa. Desfosforilada → menos activa. EN ESTE CASO.
Activación proteolítica
Es un tipo de regulación irreversible, ya que un zimógeno o una proenzima necesita ser proteolizada (escindir
alguna porción de la cadena polipeptídica) para ser activa.
Ej: Enzimas digestivas
Las enzimas proteolíticas existen en forma de zimógenos: tripsinógeno, proelastasa, procarboxipeptidasa y

quimiotripsinógeno. Todos estos se encuentran en el páncreas y son volcados al intestino delgado cuando el bolo
ácido llega allí. En el páncreas, se encuentran inactivadas (zimógenos) para activarse solo en su sitio de acción
(ID). Ya en el intestino delgado, el tripsinógeno se activa por una enteropeptidasa que lo convierte en tripsina
escindiendo una porción de la cadena polipeptídica.
La tripsina tiene un efecto autocatalítico (autoactivacion) y a la vez proteoliza al quimiotripsinógeno

convirtiéndolo en quimiotripsina, a la procarboxipeptidasa activándola a carboxipeptidasa y activando a la
proelactasa a elastasa. De esta manera la tripsina activa al resto de las enzimas proteolíticas.
36
Ej: Coagulación
Actúan de manera similar a las digestivas. En el caso de la trombina, se activa por proteólisis y participa en la
formación de los trombos.
Unión a proteínas reguladoras
Para este mecanismo existen:
Proteínas inhibidoras → al unirse a una enzima inhiben su acción. Ej. inhibidor de tripsina
pancreática/antitrombina 3.
2da regulación de enzimas reguladas de manera irreversible, los zimógenos, para asegurarse que la tripsina no se
active en el páncreas porque podría digerir el tejido. Se une la tripsina inhibiendo su acción.
Ciclinas → proteínas que se unen a quinasas y las activan. Ej. CDK ciclina.
Compartimentalización
Mecanismo de regulación que pretende sacar a la enzima de su lugar de acción. Si una enzima es, por ejemplo,
activa en citosol una manera de regular su actividad es sacarla del citosol y llevarla a otro compartimiento intrac
como podría ser el núcleo o el RE.
Ej: Hexoquinasa IV
De ubicación hepática, cataliza la fosforilación de la glucosa a glucosa-6-fosfato. Cuando los niveles de glucosa
sanguíneo son elevados, estos ingresan a través del GLUT2 al hepatocito y esta glucosa es inmediatamente
fosforilada por la hexoquinasa IV. La hexoquinasa IV tiene un Km elevado para la glucosa (baja afinidad) y
solamente la fosforila cuando la glucosa está en concentraciones altas (condiciones en las que la glucosa ingresa
al hígado). A la hexoquinasa IV se le une una proteína reguladora que la recluta hacia el núcleo. Entonces,
cuando los niveles de glucosa en el citosol son elevados, la glucosa se une a la proteína reguladora compitiendo
con la fructosa-6-fosfato y haciendo que la hexoquinasa recluida en el núcleo se transloque al citosol donde es
activa. Cuando la glucosa-6-fosfato se isomeriza a fructosa-6-fosfato y esta se comienza a acumular porque no
se está utilizando, se une a la proteína reguladora que favorece la traslocación de la hexoquinasa hacia el núcleo.
La glucosa entrante compite con la F-6-P favoreciendo la separación de la hexoquinasa de la proteína reguladora
y haciendo hexoquinasa se transloque a su sitio de acción, el citosol, y pueda ejercer su acción.
37
Una enzima puede tener varios mecanismos de regulación y eso se ve en las distintas rutas metabólicas.
APLICACIONES CLÍNICAS DE LAS ENZIMAS
Diagnóstico clínico
Hay enzimas plasmáticas funcionales y enzimas plasmáticas no funcionales, es decir que al encontrar cierta
actividad enzimática en el plasma es indicativo de algún proceso patológico o cambios en la permeabilidad
celular que indicaría un incremento en la muerte celular. En el intercambio celular siempre puede haber perdida
de alguna de las enzimas citoplasmáticas; de las enzimas que se vuelcan al plasma sanguíneo se encuentran en
bajas concentraciones o proporciones, con lo cual si se dosa su actividad enzimática es baja.
Sin embargo, cuando hay un proceso de necrosis celular por alguna enfermedad o trauma, se rompen las células
que contienen enzimas citoplasmáticas y van al plasma por lo que dosar esas enzimas en el plasma es indicativo
de algún daño celular.
Isoenzimas: Enzimas que catalizan la misma reacción pero que difieren en su estructura primaria (porque están
codificadas por los mismos genes). Que tengan diferente estructura primaria hace que tenga diferente afinidad
por el sustrato, por ende tienen distintos parámetros cinéticos. Pueden responder a distintas moléculas
reguladoras y se encuentran en diferentes órganos.
Dosaje en plasma de enzima para detectar daño celular
Es importante la detección y dosaje enzimática. Por ejemplo, se dosa la lactato deshidrogenasa y la creatina
quinasa en plasma para detectar daño celular. La detección de distintas isoenzimas nos puede explicar cuál es el
órgano que se encuentra dañado.
Lactato deshidrogenasa (LDH): es una enzima formada por cuatro subunidades, y dependiendo de cómo son sus
subunidades se va a determinar su localización. Sus monómeros son: monómeros H (heart) y monómeros M
(muscle).
Isoforma LDH-1: cuatro monómeros H, localización en miocardio y eritrocito.
Isoforma LDH-2: tres monómeros de H y uno de M, en miocardio y eritrocito.
Isoforma LDH-3: dos H y dos M, en cerebro y riñón.
Isoforma LDH-5: cuatro M, en hígado y músculo esquelético.
Creatin quinasa (CPK): es una enzima constituida por dos monómeros, M (muscle) y B (brain).
Isoforma CPK-1: Dos monómeros B (dimero B-B), en el cerebro.
Isoforma CPK-2: un monómero B y uno M, en el miocardio.
38
Isoforma CPK-3: dos monómeros M (dimero M-M), en el músculo esquelético.
Si se dosa un incremento de estas enzimas en plasma indica un daño tisular, y para saber de donde proviene e
requiere al análisis de las isoformas enzimáticas. Una forma de analizarlo es por electroforesis (método de
separación que se basa en la relación carga/masa). Si estas isoenzimas difieren en su estructura primaria es
probable que difieran en su relación carga/masa.
Infarto de miocardio
Se caracteriza por el aumento de la CPK (CPK-2) y LDH (LDH-1 o LDH-2). Desde que se siente el dolor de
pecho hasta que llega el infarto: la primera enzima en aumenta es la CPK-2 (indicativo de ese infarto). La
troponina I tambien es indicativo más específico y se dosa en el plasma.
Daño hepático
Se dosan las aminotransferasas. Catalizan la transferencia del grupo amino e/ un alfa-cetoácido y un a.a.
Hay 2 aminotransferasas importantes:
TGP = transaminasa glutámico-pirúvico (alanina transferasa) → citoplasmática
TGO = transaminasa glutámico-oxalacético (aspartato transferasa) → citoplasmática y mitocondrial
El dosaje de estas en el plasma es indicativo de daño hepático.
Se calcula el índice de Ritis: relación de TGO/TGP. Dependiendo de este valor es que el daño es mayor o
menor. Lo normal es 1.15. <1 Daño hepático moderado >1 Daño hepático severo.
Otras enzimas que se dosan y son indicativo:
FAL: fosfatasa alcalina
γGT: Gama glutamiltransferasa
El dosaje de estas enzimas aumentadas es diagnóstico diferencial con patologías musculares o cardíacas.
Aplicación de las enzimas como medicamentos
Pepsina, tripsina, peptidasa, lipasa, amilasa, nucleasa, elastasa, celulasa (Enzimas digestivas): Tratamiento
de desórdenes gastrointestinales, pancreatitis crónicas, deficiencias enzimáticas.
Plasmina (degrada a la fibrina): Disolución de trombos y adherencias fibrinosas.
El plasminógeno se transforma en plasmina activa para degradar fibrina. El activador tisular de plasminógeno,
t-PA humano, se produce comercialmente por una proteína recombinante en E.coli y se emplea para disolver
coágulos en pacientes con infarto de miocardio.
Quimotripsina, tripsina, papaína, fibrinolisina: Tratamiento de abscesos, quemaduras infectadas, ulceras

infectadas, cervicitis, vaginitis, etc.
Enzimas como reactivos
En laboratorios de análisis clínicos para medir la [urea], la glucosa, la glucemia, el colesterol (colesterolemia), la
trigliceridemia, se utilizan kits que mediante el uso de una enzima (ureasa, glucosa oxidasa, colesterol oxidasa,
39
lipasa) se dosa los metabolitos y se lo acopla a una reacción colorimétrica. Se toma la muestra de sangre, se
utiliza el kit y se genera un color: A mayor color, mayor concentración → se dosa en el espectrofotómetro.
40
Transducción de señales
Proceso por el cual una señal extracelular es convertida en una respuesta celular, es decir, como la información
que recibe una célula es transducida a una respuesta química). En el caso de organismos unicelulares como son
las bacterias, las señales extracelulares serán las señales del medio (presencia o no se nutrientes, pH, cambio en
la temperatura, etc). En el caso de una planta, son señales que le dan otras células dentro del mismo organismo y
señales ambientales (luz, nutrientes, pH, etc). En el caso de un organismo multicelular, son señales ambientales
y señales producidas por otro tipo de células.
El objetivo es que el organismo funcione como un “todo” y que haya una respuesta integrada a una situación
metabólica específica.
Cuando estos sistemas no funcionan bien se cometen errores → ej. procesos carcinogénicos.
Modelo de señalización celular
Empieza con un estímulo que hace que una célula secretora secrete mensajeros químicos, los cuales se difunden
y llegan a receptores para dar una respuesta. Estos receptores pueden ser de membrana plasmática o
intracelulares, esto depende si la señal puede o no atravesar la membrana plasmática. Si puede → intracelular. Si
no puede → de membrana.
Características de la transducción de señales
• Especificidad
• Amplificación
• Apagado/Adaptación (a la señal)
• Integración (de las respuestas) → “un todo”
La especificidad se va a dar tanto entre la molécula señal y el receptor como en los transductores de señales y en
las proteínas efectoras.
La amplificación se da cuando una molécula señal desencadena la activación de varios efectores o, en este caso,
de segundos mensajeros.
41
El apagado se va a dar en todas las instancias de la transducción de señales, tanto sea en la unión de la molécula
señal al receptor como la desactivación de transductores o efectores.
Efectos en la célula:
• Si es una enzima metabólica → activa un cambio en el metabolismo.

• Si es una proteína reguladora de la expresión génica → cambio en la expresión génica, al principio de
la transcripción de los genes.
• Si es una proteína del citoesqueleto → cambios en la forma o movimientos celulares.
Componentes de la transducción
Señales - Receptores - Transductores - Efectores → van a ocasionar una respuesta la cual va a tener que ser
desactivada en algún momento para que estos sistemas funcionen → se quiere que esas respuestas se lleven a
cabo mientras este la presencia de la señal que las está desencadenando.
Tipos de señales
Las células reciben señales del ambiente o “1er mensajero”, que pueden ser antígenos, hormonas,
neurotransmisores, luz, presión, feromonas, citoquinas, etc. Son claves porque son los que van a desencadenar
los diferentes tipos de respuestas.
Naturaleza química:
❊ Iones pequeños: ion férrico → receptor férrico bacteriano.
❊ Moléculas orgánicas: Adrenalina → receptor adrenérgico.
❊ Polisacáridos: Heparina → receptores del FGF (factor de crecim. fibroblástico).
❊ Péptidos o proteínas: Insulina → receptor de insulina.
❊ Lipídicas: Hormonas tiroideas → TR.
Clasificación de señales
Se clasifican dependiendo a la distancia que se encuentre el receptor de donde se produce la señal, y pueden ser
señalizaciones:
Endocrina: El primer mensajero no necesariamente tiene que estar cerca de su célula diana. La molécula va por
circulación sanguínea y llega a la célula diana, que pueden llegar a estar muy distantes del sitio de liberación de
la señal. Un ejemplo es el caso de las hormonas.
Paracrina: La célula secretora está adyacente a su célula diana: hay una distancia relativamente corta. Por
ejemplo los neurotransmisores y los factores de crecimiento.
Autocrina: La misma célula libera factores que retroalimentan la señalización en la misma célula. Por ejemplo
los factores de crecimiento.
Contacto: Una célula está en contacto física con otra. Por ejemplo, las proteínas de membrana con la matriz
extracelular.
42
Receptores
Los receptores unen ligandos con alta especificidad. Esa especificidad se da igual que como se da con una
enzima por su sustrato o de un anticuerpo por el antígeno, con interacciones débiles, no covalentes y son
saturables.
En organismos pluricelulares, la señal depende de qué tipo de receptores tengamos y en donde estén. La que
tenga el receptor, va a responder al ligando.
Tipos de receptores según localización
Receptores intracelulares como es el caso de hormonas esteroideas, hormonas tiroideas, NO. Todas pueden
atravesra la membrana. La señalización que desencadenan altera la transcripción de genes. Respuestas lentas.
Receptores de membrana como es el caso de hormonas peptídicas y proteicas (insulina, glucagón), derivadas de
aminoácidos como la adrenalina, u otras sustancias que son muy grandes o muy polares y no pueden atravesar la
membrana. La señalización que desencadenan modifica la actividad de proteínas preexistentes o activa la
expresión génica. Respuestas lentas o rápidas.
Tipos de receptores según actividad
Ya se habló de la clasificación de receptores según su localización, pero existe una segunda clasificación según
su actividad enzimática:
Receptores CON actividad enzimática intrínseca: Receptor tirosin-quinasa, receptores guanilil-ciclasa.
Receptores SIN actividad enzimática intrínseca: Receptores acoplados a proteína G, canales iónicos activados
por ligando, receptores de adhesión, receptores nucleares.
Una vez que el ligando se une al recetor, se desencadena la transducción de esa señal, es decir que vaya desde el
receptor hasta el/los efectores. Para que esa señal sea transducida y amplificada se evidencia la síntesis de 2dos
mensajeros.
Segundos mensajeros: Moléculas pequeñas que se sintetizan en gran cantidad y que transducen la señal del
primer mensajero a las proteínas efectoras. Amplificación.
AMPc: Activa a la protein-quinasa A (PKA).
Ca++
DAG: Activa a la protein-quinasa C (PKC).
43
(IP3): Activa canales de Ca++ en el RE. Activa la presencia de otro segundo mensajero, que es el Ca++.
Actividad quinasa
Las proteínas con actividad quinasa activas por estos 2dos mensajeros, como la PKA o la PKC, fosforilan otras
proteínas con gasto de ATP en residuos de a.a que son capaces de ser fosforilados como la serina, tirosina,
treonina e histidina. El paso contrario, la desfosforilación, la realizan enzimas fosfatasas.
Tipos de respuestas celulares
1) Alteración de la actividad de una proteína preexistente → respuesta rápida (seg a min). Puede ser 1 o
más proteínas alteradas.
2) Alteración la síntesis de proteínas a nivel transcripcional → respuestas lentas (min a hs). Esta síntesis
de NUEVAS proteínas es desencadenada por señales que ingresan a la célula y activan factores de
transcripción; tambien las señales que están desencadenadas por receptores de membrana pueden
modificar la expresión génica.
SIEMPRE lo que se va a alterar es la respuesta celular, sea una respuesta rápida o lenta, y esas respuestas
van a depender del tipo celular, de los receptores y los transductores.
Ejemplos
Con un mismo mensajero, por ejemplo la acetilcolina, vamos a tener distintas respuestas celulares en distintos
tipos celulares.
Fibra muscular cardíaca: disminución de la frecuencia y de la fuerza de contracción desencadenada por ACh.
Ubicamos receptores muscarínicos asociados a proteína G.
Fibra muscular esquelética: Contracción de la fibra desencadenada por ACh. Ubicamos receptores de tipo
nicotínicos que son canales iónicos comandados por ligando.
Células de la glándula salival: Secreción desencadenada por ACh. Ubicamos receptores muscarínicos asociados
a proteína G.
44
Estas respuestas van a depender entonces de la especificidad de los receptores hacia sus ligandos y de la
integración de la señal porque van a ser distintos los transductores que tengan dentro cada uno de estos tipos
celulares.
Respuestas celulares integradas
La respuesta total de la célula va a ser la sumatoria de 2 vías de señalización conjuntas, por ejemplo. Esto quiere
decir que una célula es capaz de recibir un montón de señales y hacer una sola respuesta integrada que coordine
todas las diferentes señales que le están llegando.
Integración: capacidad de recibir múltiples señales y producir una respuesta UNIFICADA apropiada.
Desensibilización/Adaptación
Toda señal debe tener una duración temporal para una regulación del metabolismo y fisiología celular eficiente.
Tiene que haber un mecanismo de apagado de señal siempre, específico para cada vía de señalización. Por otro
lado, las células también deben tener un mecanismo de adaptación que si una señal es producida en el tiempo en
altas concentraciones, la célula tiene que desensibilizarse (dejar de recibir la señal por sobreestimulación o
persistencia de la misma).
Vías de desensibilización o adaptación a la señal
❊Secuestro del receptor: La célula saca al receptor de la membrana y ya no puede seguir recibiendo señales.
❊ Regulación por disminución del receptor: Degradación del receptor.
❊ Inactivación del receptor: Por fosforilación o acetilación.
❊ Inactivación de la proteína señalizadora: Alguno de los transductores que se encuentre en la vía, se recibe la
señal pero hay algo que lleve la señal hacia el efector.
❊ Producción de una proteína inhibidora: tanto la unión del ligando al receptor o alguno de los transductores en
la vía.
Respuestas orgánicas a Insulina-Glucagón
El receptor de insulina desencadena más de una vía, en el que podemos ubicar un complejo SNARE (proteína de
membrana de interacción con el citoesqueleto), un receptor del TNF (factor de necrosis tumoral), y flechas que
unen una cosa con otra denominadas conversación cruzada o cross top e/ las distintas vías de señalización. Esas
vías que se interrelacionan entre si es lo que da tantos tipos diferentes de respuestas en los distintos tipos
celulares, o en un mismo tipo celular bajo distintas condiciones fisiológicas.
45
Secretamos insulina cuando aumenta la glucemia, la cual aumenta con la ingesta de alimentos principalmente
rica en hidratos de carbono. Las células β del páncreas liberan insulina, esta lleva una señalización endócrina y
tiene sus órganos blanco: el adipocito, los hepatocitos y el músculo esquelético. En cada uno va a tener una
respuesta diferente:
- En tejido adiposo y en músculo esquelético (tejidos con mayoritarios en peso que tenemos en el
organismo) va a promover la captación de la glucosa para que baje la glucemia, generalmente de
manera rápida por el peso de dichos tejidos.
- En el hígado va a ver síntesis de macromoléculas, específicamente de lípidos a partir de los glúcidos de
sobra en circulación en esa situación post-prandial.
En el caso del ayuno, baja la glucemia porque se sigue consumiendo la glucosa en circulación y las células α
del páncreas liberan glucagón que por vía endócrina da su mensaje a los mismos órganos. Respuestas:
- En el tejido de adiposo va a promover la liberación de ácidos grasos para obtener energía.

- En el hígado va a haber producción y liberación de glucosa para poder mantener la glucemia.
- El músculo no se involucra ya que no puede liberar glucosa, y además no tiene receptores de glucagón.
Respuestas orgánicas a la Adrenalina
La adrenalina es segregada en períodos de alerta, en respuesta de pelea y huida. Va a haber en el tejido adiposo
liberación de ácidos grasos (combustible). En el hígado producción y liberación de glucosa (combustible). En el
músculo degradación de glucógeno (porque ante dicha respuesta va a necesitas movilizarse). El músculo aparte
de precisar combustible precisa O2, por eso evidenciamos broncodilatación, contractibilidad y excitabilidad
cardíaca favoreciendo la llegada de oxígeno al músculo.
VÍAS DE SEÑALIZACIÓN
Receptores acoplados a proteínas G (GCPR) → proteínas acopladas a nucleótidos de guanina (G)
No tienen actividad enzimática intrínseca, lo único que hacen es recibir el ligando y pasar dicha información a
las proteínas G. Las proteínas G son proteínas triméricas (tres subunidades, α, β y γ) que están asociadas al
receptor y cuando el ligando se une al receptor esta proteína se activa, se disocia por un lado la subunidad βγ y
por otro la α. La subunidad α va a regular la actividad de alguna enzima. La enzima va a sintetizar el segundo
mensajero o no (dependiendo si inhibe o activa) → respuesta. Hay muchos ligandos que activan a este tipo de
receptores, como se ve en la imagen. Dependiendo de cual sea este ligando va a activar a distinto tipo de
receptor que va a estar asociado a distintos tipos de proteínas G.
46
Receptores acoplados a proteínas Gs (estimulatoria)
Ejemplos → Receptor β-adrenérgico y receptor de glucagón.
Cuando se une el ligando al receptor se estimula la proteína G, se disocia la subunidad α, y se produce un

intercambio de nucleótidos de guanina, de ahí su nombre de proteína “G”: proteínas acopladas a nucleótidos de
guanina. En su forma no activada, la subunidad α (Gs α) está unida a un GDP, cuando se activa por medio del
receptor el GDP se disocia y se intercambia por una molécula de GTP, en consecuencia la subunidad α se
encuentra activada. La subunidad α activada, va a activar a su vez a una proteína de membrana, la
adenilil/adenilato ciclasa, la cual a partir de ATP sintetiza AMPc. El AMPc activa a la PKA (protein-quinasa A)
que tiene cuatro subunidades (dos catalíticas y dos regulatorias). Al unirse el AMPc se produce un cambio
conformacional, se liberan las subunidades catalíticas y el AMPc queda unido a las subunidades regulatorias.
Las subunidades catalíticas están listas para llevar a cabo su función: fosforilar proteínas (respuesta rápida por
modulación covalente enzimática, dependiente de ATP). La proteína blanco fosforilada puede una respuesta
metabólica por ejemplo y las unidades subcatalíticas de la PKA pueden ingresar al núcleo, fosforilar factores de
transcripción que activan la transcripción de determinadas enzimas (respuesta lenta).
Si tenemos un aumento de AMPc vamos a estimular la degradación de glucógeno e inhibir la síntesis de

glucógeno (polisacárido de reserva en hígado y musculo). La protein-quinasa activa (PKA) va a fosforilar la
glucógeno-fosforilasa-quinasa (GPK) y activada va a fosforilar a la glucógeno fosforilasa, entonces se va a
47
degradar el glucógeno a glucosa. Esto se va a dar en períodos de ayuno (señalización por glucagón) o en
situaciones de señalización por adrenalina.
Tambien vamos a tener que inhibir la síntesis de glucógeno; cuando la PKA fosforile a la glucógeno sintasa,
vamos a tenerla inactiva (o – activa) y, por otro lado, va a fosforilar a una protein-fosfatasa inhibiéndola para
que no active a la glucógeno sintasa.
Cuando tenemos un aumento en la glucemia y decrecen las concentraciones de AMPc, se va a desfoforilar la

quinasa con lo cual no va a poder fosforilar a la GPK y por lo tanto va a estar inactiva. Por otro lado, como la
fosfatasa va a estar activa se va a desfosforilar la glucógeno sintasa y a partir de glucosa se va a sintetizar
glucógeno.
Hay respuestas celulares diferentes ante la elevación de AMPc de acuerdo con el tejido y la situación en la que
estamos. Son todas respuestas rápidas de regulación coordinada recíproca.
48
Apagado de la señal en receptores acoplados a proteína Gs
Es necesario que se apague la señal para que sea la respuesta útil fisiológicamente. La primera forma de apagado
es con la disminución del ligando, y eso depende de la vida media que tenga ese ligando en circulación.
Para apagar la señal dentro de la célula hay diferentes mecanismos:
Fosfodiesterasa de nucleótidos cíclicos (PDE): Hidroliza el AMPc para transformarlo en 5’AMP (adenosin 5’-
monofofato o AMP nomas) que ya no tiene funciones señalizadoras para activar a PKA.
Actividad GTPasa intrínseca de Gα: Cuando esta como GTP activada pierde el fosfato, se hidroliza a GDP y
vuelve a estar inactiva; luego, vuelve a trimerizarse con las subunidades βγ y queda la proteína G inactiva al lado
del receptor hasta la llegada de un nuevo ligando. Cuando esta actividad se inhibe, un claro ejemplo de lo que
pasa se ve con la toxina colérica:
Toxina colérica: Es una proteína que se une a la subunidad α cuando esta como α GTP, la ADP ribosila (o sea que
la modifica covalentemente) y pierde su actividad GTPasa. Esta persistentemente activada y aumenta la cantidad
de AMPc. La toxina actúa a nivel del intestino (duodeno), en los enterocitos; el aumento de AMPc activa la PKA
y esta misma activa el canal de Cl- (cloruro) que promueve la salida de dichos iones hacia la luz intestinal. Sale
con el Cl- Na+ para hacer un balance de cargas, llevando a una perdida masiva de agua resultando en diarreas. Si
no es controlado, puede haber deshidratación y muerte.
Desensibilización
Se produce una desensibilización de la señal cuando hay presencia continua del ligando. Por ej. adrenalina y su
receptor β-adrenérgico en caso de estrés: una quinasa activada por PKA (βARK) fosforila al receptor adrenérgico,
y eso hace que se reclute a una proteína que es la β-arrestina (βarr) hacia dicho receptor. El efecto de βarr es
“esconder” a los receptores β-adrenérgicos, secuestrándolos en vesículas dentro de la célula hasta que baje la
concentración de AMPc → ya no tenemos tanta señalización por adrenalina → de esta manera, desciende la
actividad de PKA, no se va a fosforilar al receptor, no va a reclutar a la βarr y vuelve a la membrana plasmática.
Receptores acoplados a proteína Gq
Ejemplos → Receptor α1-adrenérgico (de adrenalina α1) y el receptor de acetilcolina muscarínico (M1).
Cuando llega la hormona se libera la subunidad Gq α, intercambia GDP por GTP, se activa y activa la fosfolipasa
C (PLC) la cual hidroliza al fosfatidil-inositol difosfato (PIP2) en diacilglicérido (DAG) e inositol trifosfato (IP3).
Ambos actúan como segundos mensajeros. El DAG activa a la protein- quinasa C (PKC). El IP3 abre canales de
Ca++ del RE al citosol y a su vez, el Ca++ activa proteínas de unión a Ca++. La PKC va a fosforilar diversas
proteínas blanco.
49
Apagado de señal de Gq
Por persistencia del ligando se puede producir el apagado. Tambien por la actividad GTPasa intrínseca de
Gq.
El DAG va a ser inactivado por distintas enzimas: puede ser transformado en acido fosfatídico por la enzima
DAGK (quinasa), en triglicéridos por la DAGT (transferasa) o degradado por una lipasa a glicerol y ácidos
grasos.
El IP3 es degradado a inositol + Pi → NO MAS actividad sobre canales de Ca++
El Ca++ es recapturado al RE por las bombas de Ca++.
Las proteínas fosforiladas por medio de fosfatasas se desfosforilan.
Receptores acoplados a proteínas Gi (inhibitoria)
Ejemplos → Receptores α2-adrenérgico y receptor de acetilcolina muscarínicos
Una vez que está activada como Gi α GTP, inactiva al adenilato ciclasa. El efecto metabólico es una
disminución en la concentración de AMPc, una consecuente disminución de PKA y activación de otros tipos de
vías metabólicas.
50
Receptores Tirosina quinasa
Los anteriores no, pero ESTOS SI tienen actividad enzimática intrínseca. Su señalización está asociada a la
supervivencia y a la división celular. Poseen 3 dominios: extracelular, de membrana y citoplasmático.
Ejemplos:
Receptor del factor de crecimiento epidermal (EGF)
El EGF da su señal mediante un receptor con actividad tirosin-quinasa. Se encuentra en la membrana plasmática
como un monómero y tiene muchos restos tirosina en sus dominios citoplasmáticos. Cuando se une al ligando se
dimerizan y se autofosforilan (fosforilan mutuamente) sus residuos tirosina.
Receptor de insulina
En este caso el receptor ya es un dímero (se encuentra dimerizado) pero cuando no está unido el ligando no está
activado. Cuando se une la insulina al receptor, los dímeros se autofosforilan en restos tirosina y esto hace que
recluten a una proteína, el IRS (sustrato de receptor de insulina). Al IRS también lo fosforilan en restos tirosina
y estos reclutan a la enzima fosfatidilinositol-3-quinasa (PI3K); esta fosforila el PI- difosfato (PIP2) a PI 3,4,5,-
trifosfato (PIP3). Como se dijo anteriormente, PIP2 se disocia en DAG e IP3 por PLC. En este caso, el mismo
PIP2 por la PI3K se forforila a PIP3. Este estimulo esta dado por señalización via Gq PIP3 y en este caso por
receptores T-Q. PIP3 activa a unas quinasas (PDK1) que fosforila y activa a la protein-quinasa B (PKB/Akt).
Activa y vía ATP, PKB fosforila proteínas blanco.
51
Son todas respuestas rápidas de la insulina. En este caso, la movilización vesicular hacia membrana para
promover la captación de glucosa por transportadores GLUT 4 y la modulación covalente de enzimas que
promueven a la síntesis de glucógeno. Por otro lado, esta misma PKB va a promover respuestas lentas porque
fosforila factores de transcripción que alteran la transcripción de genes (puede tanto aumentar como disminuir la
transcripción de ciertos genes).
52
En el caso de hiperglucemia, aumenta la [insulina] y a su vez aumenta la actividad de PKB, aumenta le

translocación de proteínas, aumenta la actividad de ciertas enzimas, y tambien regula la transcripción de genes.
Hay otra vía de la insulina, la vía de las MAPK, que esta involucrada en el crecimiento celular, que se verá en el
contexto regulación de crecimiento y CC, y no en regulación metabólica.
Vía de la insulina involucrada en el crecimiento celular
El receptor de insulina se fosforila por la llegada del ligando, recluta a IRS, lo fosforila y tenemos otras
proteínas adaptadoras como Grb2 que recluta un factor que intercambia nucleótidos de guanina, el Sos, en unas
pequeñas y monoméricas proteínas G que son las proteínas Ras (se activa por intercambio de nucleótidos de
guanina). Estas proteínas Ras activas desencadena la activación de una cascada de quinasas que son las MAPK
(variedad importante de nombres) y termina teniendo una respuesta lenta regulando la expresión de diferentes
genes.
53
Apagado de la señal Tirosin quinasa
Por persistencia del ligando se puede inducir el apagado, por protein-fosfatasas que desfosforilan tanto en
tirosina como en el caso de las proteínas blanco de PKB en serina y treonina.
Se produce la desfosforilación de PKB y PIP3 se degrada nuevamente a PIP2 por la enzima PTEN (cataliza la
reacción contraria de la PI3K). La desactivación de PIP3 lo devuelve a su ESTADO BASAL, PIP2.
Apagado de señal de la vía Grb2: por protein-fosfatasas que desfosforilan a todos los transductores y por la
actividad GTPasa intrínseca de la proteína Ras.
Receptores Guanilil ciclasa
Tienen actividad enzimática intrínseca. Su f (x) es transforman el GTP en GMPc. Tenemos 2 tipos de receptores
G-C: unos anclados a la membrana (ej. receptor del factor natriurético atrial) y otros citoplasmáticos (ej.
receptor del NO → gas → pasa la membrana). Esta actividad enzimática que sintetiza a partir de GTP-GMPc
activa a la protein-quinasa G (PKG), la cual va a fosforilar proteínas blanco.
Receptor NO (óxido nítrico)
En la imagen (más abajo) se evidencias 2 vías de señalización: 1) la vía de señalización de proteína G de la ACh
que activa a la NO sintasa (que, a partir de arginina, se produce el NO). Todo esto en las células endoteliales.
Como el NO es un gas, hay una rápida difusión el gas a través de la membrana y entra en las células musculares
lisas. Allí, 2) activa a la guanilato ciclasa y se produce GMPc a partir de GTP. Esto conlleva a una relajación
rápida de la musculatura lisa, por eso el NO es vasodilatador.
Apagado de señal de Guanilil ciclasa
Por un lado se presentan las protein-fosfatasas, ya que hace la reacción contraria a la protein-quinasas. Por otro
lado la acetilcolina se degrada por una enzima que se encuentra a nivel de la sinapsis, la acetilcolinesterasa. Por
último, hay una fosfodiesterasa específica para GMPc que vuelve a formar 5’GMP (GTP). Esta enzima
específica en inhibida por el viagra → aumento [GMPc] → aumenta la vasodilatación → facilita la llegada de
sangre al “guerrero”.
54
Canales iónicos de entrada regulada por ligando
Receptor nicotínico de acetilcolina
Anteriormente se vio un receptor muscarínico de la ACh que actuaba vía proteína Gq. En este caso, el receptor
nicotínico de ACh, abre canales iónicos. En su estado basal el canal está cerrado, en presencia de acetilcolina se
abre para facilitar la entrada de Na+ y Ca++. Puede haber una despolarización de la membrana o una
contracción muscular inducida por el Ca++.
Apagado de la señal de canales iónicos
A partir de la acetilcolinesterasa, que degrada a la acetilcolina en acetato y colina.
Receptores de adhesión: Integrinas
Los recetores de adhesión están dados por unas proteínas de membrana, las integrinas.
La integrina cuando esta inactiva no genera contactos íntimos con las proteínas de la matriz extrac. Se activan
por señales de la ME, o algún tipo de oligosacárido o proteína que s ele une, generando una respuesta a nivel del
citoesqueleto (efectos en la motilidad y forma de la célula).
55
Si la señal viene desde adentro de la célula, hay proteínas del citoesqueleto (ej. talina) que se unen con otras
proteínas del citoesqueleto que puede dar una señal o respuesta hacia la ME o hacia otra célula adyacente, en un
contacto célula/célula.
Receptores intracelulares: involucrados en la regulación de la transcripción
Van a ser receptores de pequeñas moléculas, por ejemplos las hormonas esteroideas, que llega por plasma por
proteínas transportadoras o carrier, ya que son moléculas lipofílicas. Entran a la célula y el receptor intracelular
(del citosol o nuclear; en este caso: nuclear), se une al ligando y actúa el mismo receptor como factor de
transcripción, uniéndose al ADN y activando la transcripción de algunos genes formando el complejo de
transcripción.
En el caso de las hormonas tiroideas: estas ingresan a la célula y se unen a su receptor TR; la particularidad es
que el complejo de transcripción está preformado pero no activo. El ligando activo del TR es la triyodotironina o
T3; al unirse se activa y empiezan a transcribirse los genes. Si no tiene la T3 unida, el complejo está inactivo.
56
Bioenergética
Bioenergética: Estudio de la transformación de la energía dentro de la célula.
Obtención energía → Fotótrofos y quimiótrofos → Transforman la energía química almacenada en compuestos

orgánicos reducidos en otro tipo de energía.
Obtención fuentes de carbono → Autótrofos y heterótrofos.
Metabolismo: Conjunto de procesos por los que la célula obtiene energía y el poder reductor a partir de su
entorno oxidando compuestos, para luego sintetizar los componentes fundamentales de sus macromoléculas
utilizando esta energía y poder reductor.
Para que una reacción química ocurra favorablemente dentro de la célula debe cumplir simultáneamente con 2
cuestiones independientes e/ si pero simultaneas: la parte cinética (desempeñado por las enzimas que ayudan
que las reacciones ocurran en un tiempo compatible con la vida a una V apreciable) y la parte termodinámica
(espontaneidad) de la reacción.
Termodinámica
Un sistema termodinámico se define como la materia comprendida en la región de estudio. Por ejemplo una
reacción química de una vía metabólica. El entorno es la materia del resto del universo.
Sistema + Entorno = Universo
La termodinámica estudia este proceso mediante diferentes leyes:
Primera ley de la termodinámica: La energía en el universo es constante. No se crea ni se destruye, se

transforma.
Función de estado termodinámica: función que depende del estado inicial y final del proceso y no de como
ocurre. Ejemplos son la entalpia y la entropía.
ΔH = Q – W → Entalpia (ΔH) → comprende el trabajo útil del sistema y el calor que se produce en el mismo.
Esta primera ley no nos habla de la espontaneidad.
Segunda Ley de la termodinámica: El grado de desorden (entropía) del universo (sistema + entorno) siempre
tiende a aumentar. Si bien habla de espontaneidad, al ser la entropía del universo no nos sirve para describir un
proceso de la reacción química de una vía metabólica porque solo deberíamos restringirnos al sistema.
∆Ss + ∆Se > 0 para un proceso espontaneo (Entropía)
Para esto, se introdujo una 3era f (x) de estado termodinámica que habla solamente del sistema y nos permite
poder predecir la espontaneidad o no de un proceso:
Energía libre de Gibbs (G): energía capaz de realizar trabajo durante una reacción a presión (P) y temperatura
(T) constante, como las condiciones que están dentro de la c normalmente. (∆G = Joules/mol). Tambien, es un
criterio de espontaneidad de una reacción química, ya que:
∆G negativo ―‣ reacción exergónica (libera energía) → Espontanea
∆G positivo ―‣ reacción endergónica (consume energía) → No espontanea
Ya tenemos una f (x) de estado termodinámico que mirando solo el sistema, la reacción química, nos va a
permitir saber si la reacción es espontanea o no.
La variación de la energía libre de Gibbs se vale de las 2 f (x) de estado descriptas anteriormente ya que:
57
∆G = variación de entalpia – (temperatura absoluta . variación de entropía)
∆H negativo → reacción exotérmica (libera calor).
∆H positivo → reacción endotermica (consume calor).
Para una reaccion x, donde
Si la G de los reactivos es mayor que la de los productos, entonces el cambio de energia libre va a ser mayor que
0 y hablariamos de una reaccion espontanea. (∆G < 0).
Si la G de los productos es mayor que la de los reactivos, entonces el cambio de energia libre, el ∆G, va a ser
mayor a 0 y la reaccion va a ser no espontanea. (∆G > 0).
Si la G de los reativos y productos es la misma el ∆G = 0 → se encuentra en el equilibrio.
En los 3 ejemplos se vio una doble flecha, es decir, una reacción que puede desarrollarse en un sentido o en el
opuesto, de izquierda a derecha y viceversa. Esto nos habla de una reacción reversible si está cerca del
equilibrio; si no es reversible, esta lejos del equilibrio.
El criterio de espontaneidad de una reacción química se puede definir con la siguiente ecuación, mediante las
cuales hay una relación directa entre el valor de ∆G y la [R] y [P] que están participando de la reacción.
58
Dicho de una manera más simple, la ∆G∘’ es el cambio de energía libre en condiciones estándar en el que se
evidencian parámetros bioquímicos específicos que se mencionan en la definición anterior. Estas condiciones,
sobre todo la concentracion de [R] y [P] 1M, nunca están presentes en la célula. Las condiciones estándar se
definen porque el ∆G∘’ nos va a permitir conocer otro criterio de la reacción que estamos estudiando. Nos va a
permitir hablar de la reversibilidad de la reacción en tanto hay una relación directa entre la variación de energía
libre estándar y la constante de equilibrio (Keq).
Para entender como funciona esto es útil repasar el concepto de equilibrio químico. En una reacción como la
anterior, reversible, solo con reactivos y nada de productos: al principio la reacción directa procede rápidamente
ya que hy mucho reactivo que puede convertirse en producto, pero la reacción inversa no se va a llevar a cabo
porque no hay productos que se vuelvan a convertir en reactivos. Sin embargo, a medida que se acumulan los
productos, la reacción inversa si va a empezar a suceder. Este proceso va a continuar hasta que el sistema de
reacción alcanza un puno de equilibrio (equilibrio químico) en el que las reacciones directa e inversa se llevan a
cabo a la misma velocidad. En este punto ambas reacciones siguen sucediendo pero las concentraciones totales
de R y P ya no cambian, no hay un cambio neto.
De esta manera, para la reacción A + B = C + D, podríamos definir la Keq una vez que se llega a ese equilibrio
como la [P] sobre la [R]. Si con la ecuación vista en la página anterior decimos que estamos en el equilibrio el
∆G = 0, y con este valor podemos despejar el valor de ∆G∘’. Nos va a quedar entonces, pasando el término del
otro lado de la ecuación, la ecuación vista en la foto de arriba → ∆G∘’ = - RT . logaritmo natural . [P] / [R] →
como estamos en el equilibrio y se acaba de mencionar, esa es la definición de constante de equilibrio (Keq): la
concentracion de productos sobre la concentracion de los reactivos.
59
• ΔG∘’ es una forma alternativa de expresar Keq.
Si los valores de Keq están cercanos a 1, podemos decir que la reacción está en equilibrio o cercano a la misma;
cuando está muy alejado (por arriba o debajo de ese valor, 2 o 3 órdenes de magnitud) la reacción está
ocurriendo lejos del equilibrio.
➔ Esto nos permite saber si la reacción:

• Si es reversible o irreversible.
• Si está ocurriendo cerca del equilibrio.
• Si puede ocurrir en un sentido o en otro.
Si es irreversible, va a estar desplazada en forma neta en 1 solo sentido.
Acoplamiento de las reacciones químicas
Si la célula fuera un sistema aislado, las reacciones químicas alcanzarían siempre el equilibrio, lo cual no sería
bueno ya que si las reacciones alcanzan el equilibrio la célula entraría en apoptosis porque no habría energía
libre para realizar el trabajo necesario para mantenerla viva. Las células se mantienen alejadas del equilibrio
manipulando las concentraciones de reactivos y productos para mantener sus reacciones metabólicas en la
dirección necesaria. Esto lo hacen acoplando reacciones → la c organiza las reacciones químicas en las
diferentes rutas metabólicas de manera en la que 1 reacción puede alimentar a la siguiente.
Ejemplos:
En el ejemplo anterior se ve la primera reacción de la glucolisis, donde la glucosa se fosforila en el C6 para dar
gluc-6-P + H2O. Si observamos el ΔG∘’ y la Keq (orden de 10-3 M) nos damos cuenta que la reacción tendería a
ocurrir de la manera inversa a la que está planteada (la glucosa de desfosforilaría). La reacción para que la
glucolisis proceda se logra porque se acopla una 2da reacción que es la hidrolisis del ATP → molécula de alta
energía. Es una molécula inestable que al hidrolizarse se estabiliza liberando energía. Vemos que ΔG∘’ (-) y la
Keq (orden de la 105 M) para la hidrolisis de ATP, y si sumamos una reacción con la otra nos queda que la
glucosa utilizando ATP se puede fosforilar a gluc-6-P + ADP con un ΔG∘’ = -4 kcal/mol y una Keq en un orden
de 102. Esto habla de la capacidad de la célula para acoplar 2 reacciones para que la de interés metabólico (1era
reacción) no ocurriera en el sentido inverso al necesario.
La hidrólisis de ATP es una reacción muy exergónica
ATP → molécula de adenina unida a una ribosa y 3 moléculas de P → clave de la alta transferencia de energía:
los P.
No solo los P, que sea una reacción muy exergónica se debe a:
60
❊ Disminución de la repulsión de cargas: Si se ve la estructura del ATP, hay cuatro cargas negativas ocupando
un espacio muy acotado en la molécula y hace que haya una gran repulsión de cargas dentro de la misma,
convirtiéndola en una molécula muy inestable. Está favorecida la entrada de una molécula de agua por ataque
nucleofílico al último de los fosfatos para liberar fosfato inorgánico (Pi) y ADP.
❊ Estabilización por resonancia: los productos pueden estabilizarse por resonancia → si vemos el P que se
libera tenemos 2 cargas (–) o si es que se ioniza ese producto habría una carga negativa más (ocurre
fisiológicamente). Las cargas negativas del fosfato pueden compartirse entre los cuatro oxígenos de este. Esto
hace entonces que las cargas negativas no estén en 1 O en forma estática, sino que está siendo compartido por
los 4 O de la molécula. La carga negativa se encuentra estabilizada y hace que sea una molécula menos estable
que su precursor: el ADP es mucho más estable que el ATP.
❊ Ionización de los productos: A pH fisiológico esta favorecida la liberación del protón al medio y por lo tanto
favorece la estabilización por resonancia de esas cargas negativas resultantes.
El ATP no es la única molécula de alta energía. Hay más intermediarios metabólicos fosforilados con alta
energía de hidrolisis y todos son bastante favorables a transferir esa energía.
Moléculas de alta energía: moléculas cuyos enlaces fosfato covalentes (específicamente anhídrido fosfórico)
tienen almacenada energía que se libera cuando se hidrolizan. La característica principal de estos enlaces es que
tienen una alta transferencia de, en este caso, grupos fosfato. Todos los compuestas están fosforilados y el ATP
estaría en el centro de la tabla, lo que nos indica su valor como moneda de transferencia de energía en las
células. Los enlaces fosfato hacen que las moléculas sean inestables y que cuando se hidrolizan hacen que los
productos sean más estables que la molécula hidrolizada, y en ese proceso liberan energía que es aprovechada
en general por reacciones acopladas, por otra reacción que necesita energía para proceder en el sentido deseado.
METABOLISMO
El metabolismo es el conjunto de reacciones que se llevan a cabo dentro de la célula → generan energía y poder
reductor a partir de la conversión de distintos compuestos.
Desde el punto de vista energético, se puede dividir en dos grupos de reacciones:
Anabolismo: Son todas las reacciones químicas que requieren aporte de energía y poder reductor para la síntesis
de moléculas orgánicas complejas a partir de precursores sencillos. ΔG > 0. No va a ocurrir espontáneamente a
61
menos que se acople una reacción, como por ejemplo de hidrolisis de ATP y moléculas de poder reductor. La
célula hace esto para sintetizar moléculas orgánicas complejas a partir de precursores sencillos (por ejemplo, a
partir de aminoácidos formar proteínas) utilizando ATP y poder reductor.
Catabolismo: reacciones químicas que transforman combustibles en energía celular. ΔG < 0. Le sirve a la célula
para oxidar carbohidratos, grasas y proteínas en moléculas más sencillas, como CO2, agua y amoníaco. En este
proceso ocurre un trabajo útil, que es justamente la obtención de energía a través de la oxidación de compuestos
y hay liberación de calor. Estas reacciones ocurren para formar ATP y poder reductor.
El catabolismo son siempre vías convergentes a un intermediario que es el Acetil-CoA, y se puede ver como los
HdC en forma de almidón, glucógeno y sacarosa, la glucosa misma a a.a como alanina, serina,y lípidos como
TAG, fosfolípidos o AG convergen en la formación de Acetil-CoA cuando esos compuestos son oxidados. El
Acetil-Coa tiene un papel clave porque es tambien precursor de otras moléculas, entonces hablamos ahora de
Acetil-CoA como precursor de AG, TAG, colesterol y otros lípidos complejos. Ese Acetil-Coa nos habla de un
anabolismo divergente, porque de un compuesto salen varios.
Por otro lado, tenemos un metabolismo cíclico como lo es el Ciclo de Krebs.
62
La organización estructural del metabolismo se puede ver en la siguiente imagen, focalizándose en las
moléculas de ATP que se generan o hidrolizan tanto en el catabolismo como en el anabolismo. Al metabolismo
se lo ve clasificado acá en 3 etapas:
➔ De izquierda a derecha, la etapa 1 habla de la degradación de lípidos complejos en AG y glicerol, de

los polisacáridos en monosacáridos y de las proteínas en aminoácidos, procesos que liberan energía en
forma de ATP. Luego esas moléculas sencillas entran en la etapa 2 donde se transforman en acetil-
CoA; los AG y glicerol directamente en acetil-CoA tambien formando ATP, algunos a.a tambien se
pueden transformar en acetil-CoA y los monosacáridos pasando por piruvato tambien van a dar acetil-
CoA. En la etapa 3 este actil-CoA alimenta al CdK mediante una serie de oxidaciones,
descarboxilaciones oxidativas formando intermediarios de reducción que van a entrar en la cadena
respiratoria para el transporte de e- y mediante fosforilación oxidativa formar ATP.
➔ De derecha a izquierda a partir de algunos precursores como acetil-CoA o piruvato podemos formar
tambien respetivamente lípidos, glúcidos, o a.a que van a formar la molécula mas compleja de
almacenamiento, por ejemplo energía en forma de TAG a partir de AG y glicerol o de glucógeno a
partir de glucosa, etc.
Ciclo de Krebs
En una visión general, el Ciclo de Krebs, ciclo del ácido cítrico o ciclo de los ácidos tricarboxilicos se alimenta
a partir de una molécula de dos carbonos, el acetil-CoA, que puede provenir de la oxidación de los ácidos
grasos, de los glúcidos o de los aminoácidos. El acetil-CoA entra en el ciclo y termina oxidándose
completamente a CO2 y, en las reacciones que forman parte del ciclo, se forman moléculas de poder reductor
que luego van a entran en la fosforilación oxidativa y van a producir el ATP. Por cada acetil-CoA que entra al
ciclo de Krebs, se dan 3 NADH y 1 FADH2; también se forma una molécula de GTP (molécula de alta energía).
63
1) Condensación: El ciclo comienza con la condensación aldólica del acetil-CoA (producto de la piruvato
deshidrogenasa o de la β-oxidación de AG) y del oxalacetato para formar el citrato, esto regulado por la
actividad enzimática de la enzima citrato sintasa. En realidad, primero se forma un intermediario que es
el citril-CoA, el cual se hidroliza por una molécula de H2O y libera CoA por un lado y citrato para el
ciclo. Ese CoA se reutiliza en la reacción de la piruvato deshidrogenasa. La enzima cataliza la
condensación aldólica entre el grupo metilo del acetil-CoA y el carbonilo del oxalacetato, con hidrólisis
64
del enlace tioéster y formación de CoA-SH libre. Esta es una reacción irreversible y el citrato ahora es
el sustrato de la segunda reacción.
2) Deshidratación: Luego, a partir de citrato se produce una simple reacción de isomerización mediante la
cual se cambia la posición de los grupos funcionales formando el isocitrato, la molécula que va a
permitir el paso descarboxilación oxidativa. El paso dos consiste primero en una deshidratación y
luego una hidratación, ambos mediados por la enzima aconitasa, es mediante esta deshidratación e
hidratación que ocurre la isomerización. Si bien es una reacción reversible, transcurre siempre hacia la
derecha debido a que el isocitrato se consume muy rápidamente.
3) Descarboxilación oxidativa: Ocurre la descarboxilación oxidativa del isocitrato. En esta reacción se

pierde un carbono (en forma de CO2), el producto es el α-cetoglutarato (molécula de 5 carbonos), se
pierde el primero de los carbonos. Y al ser una descarboxilación oxidativa ocurre la primera formación
de NADH para formar esa reacción redox. La enzima implicada, isocitrato deshidrogenasa, requiere
Mn+2 como cofactor. El producto se convierte en sustrato de la siguiente enzima, que además es una
reacción irreversible.
4) Descarboxilación oxidativa: El α-cetoglutarato va a ser el sustrato de la siguiente enzima que es otra

reacción irreversible catalizada por α-cetoglutarato deshidrogenasa que es un complejo grande, similar
en estructura a la piruvato deshidrogenasa. Es la segunda reacción de descarboxilación oxidativa, se
libera el segundo CO2 y se reduce una nueva molécula de NAD+ a NADH. El producto de esta
reacción es una molécula de cuatro carbonos, el succinil-CoA (molécula de 4C).
65
• De la reacción 1 a 2b las moléculas son de 6C.

• Las tres primeras reacciones, desde el punto de vista termodinámico, son espontáneas e irreversibles.
• En la tercera y cuarta se oxida un C y se reducen 2 NAD+, obteniendo 2 NADH.
• Si se presta atención, las 2 moléculas de CO2 que se liberan por las 2 descarboxilaciones oxidativas
son diferentes a las 2 moléculas de C que entraron formando la molécula de acetil-CoA.
A partir de acá y luego de la primera parte, las siguientes reacciones consisten en volver a formar oxalacetato a
partir de succinil-CoA, que es la molécula de partida.
5) Fosforilación a nivel de sustrato: La succinil-CoA sintetasa cataliza la reacción de succinil-CoA en

succinato, reacción de hidrólisis reversible donde la energía almacenada en el enlace tioéster (sulfuro +
acilo) del succinil-CoA (molécula de alta energía porque tiene un potencial de transferencia similar al
del ATP) se usa para fosforilar un GDP o ADP en GTP o ATP (mecanismo de fosforilación a nivel de
sustrato).
6) Deshidrogenación: El succinato de 4C se transforma en fumarato por una deshidrogenación, por la

succinato deshidrogenasa la cual se encuentra unida a la membrana mitocondrial interna. La enzima
tiene un FAD unido covalentemente y se reduce un FADH2 en esta reacción. En este caso la energía
libre estándar de la reacción es un pequeña como reducir un NAD+ a NADH, entonces se reduce un
FAD a FADH2.
7) Hidratación: El fumarato se hidrata para formar malato, reacción catalizada por la enzima fumarasa. Es
una reacción reversible. Hay un estado de transición, que es un carbanión, es decir, la hidrólisis no es
directa, sino que primero se forma el carbanión por adición de un oxidrilo y luego la misma fumarasa
añade el H+ faltante para la oxidación y así se forma el malato.
66
8) Deshidrogenación: El malato se oxida, mediado por la enzima malato deshidrogenasa, formando

oxalacetato. Esta reacción tiene energía libre estándar suficiente como para reducir un NAD a NADH
(acá se forma la 3era molécula de NADH del ciclo).
En esta segunda parte recién vista del ciclo a partir de succinil-CoA, no hay perdida ni ganancia de C ya que
desde el inicio al final se presentan moléculas de 4C.
En el ciclo solo 3 de las 8 reacciones son espontaneas, ya que poseen un ΔG estándar netamente negativo: las
catalizadas por la citrato sintasa, por la isocitrato deshidrogenasa, la α-cetoglutarato deshidrogenasa. Además,
son los pasos regulados por regulación alostérica.
Las 5 reacciones restantes son reacciones son reversibles y tienen un ΔG estándar alrededor de 0.
67
Regulación del ciclo de Krebs
La regulación del ciclo se realiza por medio de puntos de control. La explicación se va a centrar en las enzimas
que participan de las 3 reacciones mencionadas anteriormente. Las 3 enzimas poseen modulación alostérica, y
los moduladores de las enzimas alostéricas tienen efecto cooperativo, ya que se van potenciando uno con otro:
por ejemplo, cuando se une en la citrato sintasa, ATP, succinil-CoA, NADH y citrato (el producto), el efecto es
muy potente y es mucho mayor que si se unieran en momentos distintos (c/u con su sitio alostérico especifico).
Esto tambien vale para las otras 2 enzimas.
Los moduladores tanto positivos como negativos se encuentran en la foto con un + o – para c/u de las enzimas
alostéricas.
Las tres enzimas tienen en común que el ATP y el NADH son moduladores negativos (ya que marcan un balance
energético en la célula) y producen grandes efectos a nivel enzimático. Las concentraciones muy altas de ATP
van a enlentecer el ciclo y cuando el ADP o Ca++ son altos favorecen la velocidad el ciclo.
En el caso específico de la citrato sintasa: uno de sus reguladores alostéricos negativos es el citrato, y cuando la
carga energética es alta no está acumulándose en la célula, ya que puede salir para ser precursor de ácidos grasos
(AG). Entonces, la realidad es que el citrato nunca se acumula porque puede salir de la mitocondria y cumplir
otras funciones.
Hasta ahora se vio al ciclo de Krebs desde un punto de vista bien catabólico, netamente oxidativo. Pero tambien
es una vía que puede participar, cuando la carga energética es alta, en la síntesis de varios componentes como
una vía ANABÓLICA. A su vez, cuando hay carga energética baja, funciona como vía CATABÓLICA.
Por esto se dice que el ciclo de Krebs es una vía anfibólica → aquella vía que puede funcionar en cualquiera
de los 2 sentidos, dependiendo de la disponibilidad energética.
Se puede ver en la siguiente imagen como a partir de varios de sus intermediarios se pueden sintetizar moléculas
diferentes:
• El citrato puede salir de la mitocondria al citosol dando acetil-CoA, convirtiéndose en el precursor de

la biosíntesis de AG y de los esteroles.
• El α-cetoglutarato, que por una reacción de transaminación (reacción simple, reversible, 1 solo paso)
se forma el aminoácido glutamato y a partir de él se puede formar otros a.a como arginina, prolina o
glutamina. También, las purinas que forma parte de los ácidos nucleicos.
• El succinil-CoA de las porfirinas y del grupo hemo.
68
• El oxalacetato, que por transaminación puede dar aspartato y a partir de el asparagina o bases
pirimidínicas.
• El fosfoenol piruvato, que deriva del oxalacetato y puede dar (por síntesis de novo en el hígado)
glucosa. También es intermediario para síntesis de otros a.a.
El ciclo de Krebs puede funcionar de una manera anabólica y se usan algunos de esos intermediarios, pero
cuando tiene que recuperar su rol oxidativo (catabólico) esos intermediarios que “salieron” tienen que
recuperarse y para eso se producen las reacciones anapleróticas (“de relleno”).
Reacciones anapleróticas: A partir de otros intermediarios se vuelven a formar los intermediarios del ciclo de
Krebs después que estos hayan sido utilizados en a la vía anabólica. Son importantes porque son las que hacen
que el ciclo funcione anfibólicamente. Son 4 en total.
- El oxalacetato se puede regenerar a partir de piruvato por carboxilación y consumo de una molécula de
ATP. Esta reacción está catalizada por la piruvato carboxilasa y es importante en hígado y riñón.
También se puede formar oxalacetato a partir del fosfoenolpiruvato fosforilado por la
fosforenolpiruvato carboxiquinasa y consumo de GDP. La fosforenolpiruvato carboxilasa a partir de la
carboxilación de fosfoenolpiruvato + HCO3 (bicarbonato) también puede formar oxalacetato y sin
formación de ATP.
- La enzima málica carboxila piruvato usando NADPH y bicarbonato forma malato y NADP+. Puede
usar NADHP como también NADH. Es una enzima reversible que puede funcionar en ambos sentidos
y está ampliamente distribuida en varios organismos.
- Transaminaciones → intercambio entre un grupo amino y un grupo ceto entre un a.a y un α-cetoácido.
Son reacciones importantes como reacciones anapleróticas del CdK a partir de aminoácidos.
69
Fosforilación oxidativa
Es el proceso mediante el cual se acopla la oxidación de las moléculas orgánicas combustibles con la síntesis de
ATP (como por ej. NADH y FADH2 para dar ATP). En eucariontes ocurre en la mitocondria.
Este acoplamiento clave se produce por un gradiente de protones a través de la membrana mitocondrial interna.
En la fosforilación oxidativa se utilizan el NADH y el FADH producidos en las vías catabólicas para reducir el
O2 (aceptor final de los e-) a agua. Este proceso es muy exergónico, y se aprovecha esa energía utilizándola para
sintetizar ATP, y la cantidad de ATP generada es bastante alta.
El gradiente de protones se produce por el transporte de electrones desde el NADH y el FADH2 a través de una
serie de transportes acoplados a la MMI que genera un gradiente de protones hacia el lado externo de la
membrana que después va a canalizar la síntesis de ATP por una enzima particular.
Para entender cómo funciona el trasporte de e- en la cadena respiratoria que se acopla a la fosforilación
oxidativa y síntesis de ATP finalmente, se deben repasar unos conceptos de termodinámica: Una molécula (o
sustancia A) oxidada puede tomar electrones del entorno y reducirse; eso, genera un potencial de reducción
(valor numérico que muestra la capacidad de aceptar electrones que tiene una determinada sustancia/molécula).
Al contrario, una sustancia B reducida puede liberar electrones y oxidarse, eso; genera un potencial de donor de
electrones (valor numérico que muestra la capacidad de ceder electrones que tiene una determinada
sustancia/molécula) → mismo valor que el anterior pero con “signo negativo”.
Si hacemos la sumatoria de la reacción redox, la sustancia A que se reduce y la sustancia B que se oxida,
podemos tener un Δ o un cambio en ese potencial de reducción estándar.
70
Hay una fórmula matemática que fácilmente permite calcular el valor del ∆G∘ (en este caso) a partir del valor
del ΔE (variación/cambio del potencial de reducción). Es una relación directa que implica el número de
electrones que se ponen juego, cuantos e- son cedidos y aceptados en la reacción (n), y un valor constante o
constante de Faraday (F) que tiene un valor para c/sistema. En resumen, con el valor de ΔE (como esta en la
ecuación) podemos calcular o predecir si esa reacción redox va a ocurrir de manera espontánea (∆G < 0, lo que
implica un ∆E > 0) o no espontanea ((∆G > 0, lo que implica un ∆E < 0).
La variación del potencial de reducción (ΔE) es inversamente proporcional al ∆G.
Fuerza impulsora del transporte de electrones que permite la formación del gradiente de protones y la
síntesis de ATP
Como es que los e- que van pasando de una proteína a otra en la cadena trasportadora de e- puede ser la
fuerza impulsora para la síntesis de ATP? Los electrones viajan desde el primer dador de e-, el NADH formado
en el CdK, y llega al O2 que es el aceptor final de los e- por medio de varios transportadores intermedios que
tienen c/u un valor determinado de potencial de reducción. El NADH tiene un potencial de reducción estándar
de -0,3 V (volts) y el O2, aceptor final, de +0,8 V aproximadamente. Los transportadores que están en el medio
entre estos 2 compuestos tiene un potencial de reducción que va a ir en gradiente creciente de un valor negativo
a uno positivo.
El potencial de reducción es una función de estado porque es una función termodinámica, depende del estado
inicial y el final. Esto significa que como el transporte de electrones va del NADH al O2, la energía que se pone
en juego es el cambio del potencial de reducción (potencial de reducción del O2 - potencial de reducción del
NADH). En este caso una diferencia de potencial de reducción estándar de 1,13 V entre el NADH y el O2
permite la formación del gradiente de protones y la síntesis de ATP. Se pueden formar alrededor de 7,15
moléculas de ATP por cada NADH. Esto tambien habla de una eficiencia del proceso de alrededor de 35%.
Al ser una función de estado, la energía que se pone en juego seria la misma si suponemos que NADH le
entrega los e- al O2 sin pasar por los intermediarios, pero la eficiencia del proceso caería drásticamente.
71
La cadena de transporte de electrones mitocondrial es un sistema de dadores y aceptores de electrones

que funciona en modo espontáneo hacia el aceptor final que es el oxígeno.
• Tienen potenciales de reducción muy cercanos entre sí y que permite a c/u recibir un electrón y
cedérselo al siguiente miembro de la cadena transportadora hasta que llega al O2.
• Funciona de manera espontánea ya que el ΔG del proceso es menor a 0.
Compuestos intervinientes en la cadena transportadores de electrones
Funciona el proceso de la manera explicada anteriormente ya que están implicados muchos transportadores y
todos los transportadores tienen en común la posesión de hierro, como un ion que se reduce de Fe3 a Fe2 y se
oxida de Fe2 a Fe3 cada vez que recibe y cede el electrón. Este hierro puede ser parte de las proteínas de Fe
sulfuradas (varios pertenecen a este tipo proteico) o tambien pueden ser participantes del grupo hemo como
algunas hemoproteínas (como los citocromos).
NAD+ → nicotinamida adenina dinucleótido
Estructura compleja de 2 nucleótidos (nicotinamida y adenina) unidos. El anillo heterocíclico es capaz de tomar
e- del medio y reducirse, o liberarlo al medio y oxidarse.
72
FAD+ → flavina adenina dinucleótido
Los nucleótidos de flavina pueden ser mononucleótidos como la FMN, o dinucleótidos como el FAD+, flavina
adenina dinucleótido. Son estructuras complejas, y lo que tienen en común ambas es que tienen un anillo
heterocíclico de 3 ciclos que es el encargado de recibir los protones y reducirse parcialmente de FADH, o tomar
un 2do protón y reducirse a FADH2.
A diferencia del NAD+ que se encuentra soluble, todos los nucleótidos de flavina siempre están unidos
covalentemente a la enzima que realiza la reacción de oxido-reducción.
UBIQUINONA → Transportador en la MMI, es un lípido y no una proteína como el resto de los

transportadores. Es un anillo aromático con 2 grupos ceto enfrentados, por eso en una “quinona”. Puede estar en
la forma totalmente oxidada (como se ve en la imagen abajo), como radical semiquinona (cuando toma el primer
protón) o en la forma totalmente reducida: ubiquinol (cuando toma el segundo protón). Cada uno de los protones
va a formar parte de lo que era el grupo ceto para transformarse en un alcohol. El ubiquinol es un
dihidroalcohol.
CITOCROMOS → Poseen un grupo hemo, que es un anillo tetrapirrolico y grupo protético de muchas proteínas
que participan en reacciones redox, como los citocromos en este caso. Los grupos hemo están unidos
covalentemente a las proteínas a través de los grupos sombreados en recuadros. En el centro del grupo hemo se
encuentra acomplejado el átomo de Fe que se oxida o se reduce cuando actúan en este tipo de reacciones, lo
mismo que las proteínas Fe-S (hierro sulfuradas) que encontramos un ejemplo en la imagen: los 4 átomos de S
están unidos a la proteína a través de 4 cisteínas respectivamente de su estructura primaria y a un átomo de Fe de
manera central.
73
En base a la estructura de c/u de los transportadores de la cadena vemos que son capaces de trasportar diferentes
cantidades de protones y electrones:
• El NAD+ cuando se reduce a NADH transporta 1 H+ y 2 e-.

• El FAD+, FMN y UQ cuando se reducen FADH2, FMNH2 y UQH2 respectivamente transportan 2 H+ y
2 e-.
• Los citocromos o las proteínas Fe-S que contienen hierro en su estructura transportan solo un electrón,
porque es el Fe que se reduce de +3 a +2 y viceversa.
Todos estos transportadores se hallan organizados en COMPLEJOS que se localizan en la membrana

mitocondrial interna, los respirosomas.
Podemos ver como se ordenan esos trasportadores de electrones en la MMI, agrupándose en una serie de
complejos proteicos que se ordenan secuencialmente en base a sus potenciales de reducción.
Primeramente el NADH cede los electrones (producto de la oxidación del CdK) al complejo I llamado NADH Q
oxidorreductasa, formado por varias proteínas. Este complejo transporta los electrones desde el NAD+ hacia la
ubiquinona o Q. El complejo II está formado por la enzima succinato deshidrogenasa, enzima que tiene FAD+
unido covalentemente, y es el FADH el que le entrega los e- a la ubiquinona. La ubiquinona recibe los
electrones del complejo I y II y, en una serie de oxidaciones de a 1 e-, se produce la reducción de la ubiquinona
en su forma totalmente reducida a ubiquinol y le pasa esos electrones al complejo III, formado por varias
proteínas. El complejo III se llama Q citocromo C oxidorreductasa, y el mismo entrega los electrones al
74
citocromo C, proteína móvil con una porción hidrofóbica (unida a la MMI) y una parte más hidrofílica (que mira
hacia el exterior). El citocromo C, al recibir los electrones, se mueve a través de la membrana y los entrega al
complejo IV llamado Citocromo c oxidasa. Acá comienza una serie de transportes entre diferentes proteínas
dentro del complejo IV hasta que finalmente son entregados al oxígeno que se reduce a agua.
En la siguiente imagen vemos cómo van variando los diferentes potenciales de reducción en c/u de los
transportadores para pasar del NADH al O2.
Complejo I
Transfiere electrones desde el NADH hasta la ubiquinona (Q). Está formado por 42 cadenas polipeptídicas, una
molécula FMN unida covalentemente a una de estas proteínas y estas proteínas contienen 6 centros
ferrosulfurados, que permite que la ubiquinona se reduzca y difunda por la membrana hasta el complejo III
donde entrega los electrones. En este proceso se transfieren o se bombean 4 H+ desde la matriz mitocondrial al
espacio intermembrana.
Complejo II
Transfiere los electrones del FADH a la ubiquinona y tiene un FAD+ unido covalentemente. En este caso no
hay un bombeo neto de H+ al espacio intermembrana. La ubiquinona va recibiendo los e- y, desde el complejo
II, la misma puede recibir electrones de manera directa de FAD, proveniente tanto de la glicerol 3-P
deshidrogenasa (enzima del metabolismo de HdC) como de acil-CoA deshidrogenasa (enzima del metabolismo
de AG).
75
Complejo III
Transfiere electrones desde la ubiquinona reducida al citocromo C oxidado. Esto provoca un bombeo de 4 H+
hacia el espacio intermembrana en dos pasos de dos H+ c/u.
Complejo IV
Transfiere electrones desde el citocromo C reducido al O2. Se bombean 4 H+ hacia el espacie intermembrana.
76
Como se acopla el transporta de electrones con la síntesis de ATP
La clave está en el gradiente de protones que se genera. Se dice que es un gradiente químico porque en el
espacio intermembrana se acumulan H+ y dentro de la matriz mitocondrial se acumulan oxhidrilos (OH-) a
causa del bombeo de protones de c/u de los complejos, generando un gradiente de carga. Con una carga
netamente positiva de un lado de la membra y otra netamente negativa del lado de la matriz mitocondrial. Esto
da lugar a explicar lo que describe la hipótesis quimio-osmótica.
Hipótesis Quimio-Osmótica: Explica que la transferencia de electrones a través de la cadena respiratoria que
provoca el bombeo de protones desde la matriz hacia el citosol a través de la MMI genera un gradiente de pH.
El gradiente de pH junto con la diferencia de potencial que trae aparejado constituyen la fuerza protón-motriz,
utilizada para dirigir la síntesis de ATP a través de la enzima ATPsintasa.
ATPsintasa
Es una proteína que tiene varias subunidades y está anclada a la membrana mitocondrial. Tiene una subunidad
F0 (anclada a la membrana) y una F1 (en la matriz mitocondrial). La subunidad F0 es un canal de protones: los
protones que se fueron acumulando en el espacio intermembrana como consecuencia de la cadena
transportadora de electrones van a empezar a volver a la matriz. Como los protones no puede atravesar la
membrana plasmática y ningún tipo de membrana, la única forma de retornar al espacio y minimizar el
gradiente creado es a través de la ATPsintasa. El movimiento de protones a través del canal de protones de la
subunidad F0 hace que la enzima se desplace por c/H+ que pasa y vaya cambiando la conformación de las
proteínas que componen en complejo de la subunidad F1. Además el movimiento, que tiene capacidad catalítica
de fosforilación de ADP, genera el ATP. A medida que los protones van pasando va a permitir que el sitio
activo esté disponible para primero unir los sustratos correspondientes (el ADP y fosfato); después el pasaje de
mas protones va a producir un cambio conformacional que va a enfrentar esos sustratos y va a vencer la barrera
energética como para que se produzca la reacción. Mas protones van a seguir pasando y van a cambiar la
conformación de la subunidad F1, permitiendo que el ATP formado y unido al sitio activo se libere.
77
Fosforilación oxidativa del ADP
Hay trasportadores de grupos P que ayudan al funcionamiento del ATPsintasa, porque la formación de ATP y
liberación del mismo por la ATPsintasa en la matriz mitocondrial; sin embargo ese ATP debe ser utilizado
mayormente en el citosol y por lo tanto debe salir de la matriz. La salida del ATP de la matriz mitocondrial al
citosol está favorecida por un transportador de nucleótidos de adenina, un antiporte o cotransporte que
compensa la salida de ATP con la entrada de ADP, el sustrato de la ATPsintasa en la matriz. Se equilibra la
salida de ATP (producto) de la matriz mitocondrial con la entrada de ADP (sustrato) desde el citosol. También
hay entrada de fosfato por un translocador con simporte con protones e ingresa el fosfato a la matriz. Por estos
transportadores la célula se asegura la entrada de los 2 sustratos, fosfato y ADP, y la salida del producto de la
enzima, el ATP.
Inhibidores y desacoplantes de la cadena transportadora de electrones
El funcionamiento de la CTE puede ser intervenido por sustancias de origen endógeno o exógeno: los
inhibidores y desacoplantes → importantes consecuencias sobre el trasporte de e- y muchas veces sobre el
metabolismo oxidativo y síntesis de ATP → consecuencias desde el punto de vista clínico.
Tipos de interferencias que pueden provocar
- Inhibición de la transferencia electrónica (Cianuro, CO) → se unen fuertemente a la citocromo oxidasa

e impiden el trasporte de e-.
78
- Inhibición de la ATPsintasa (Aurovertina, Oligomicina)

- Desacoplamiento de la fosforilación y el transporte electrónico (FCCP, DNP)
- Inhibición del intercambio ATP-ADP (Atractilósido)
Inhibidores
Cualquiera sea el inhibidor, el transporte de e- se va a detener porque no va a haber aceptores de los mismos. Se
detiene la CTE completamente y por ende el gradiente de H+, produciendo una inhibición total de la síntesis de
ATP. Algunos ejemplos destacados:
• Rotenona: Inhibe el transporte en el complejo I

• Antimicina A: Inhiben el complejo III
• Cianuro o CO: Inhiben complejo IV
Desacoplantes
Los protones van a volver a la matriz no por la ATPsintasa, si no por unos desacoplantes que pueden ser
transportadores de H+, disipando el gradiente del espacio intermembrana y, en consecuencia, se deja de formar
ATP.
Ej. 2,4 – Dinitrofenol (DNP). Es una molécula hidrofóbica por ser un anillo aromático, que puede atravesar
fácilmente la membrana; lo que hace es protonarse y desprotonarse en el grupo fenol: en el espacio
intermembrana (con un pH + acido por la acumulación de H+) la molécula se carga de H+, atraviesa la
membrana y cuando llega a la matriz con un pH alcalino favorece la disociación de ese protón y lo libera al
medio; Así, funciona el mismo como un trasportador hidrofóbico que atraviesa membrana y trasporta H+.
Produce el desacople de la formación de H+ por la cadena transportadora con la síntesis de ATP.
En todos los desacoplantes se pone en juego energía a través del transportador de e- pero no se aprovecha como
trabajo útil, porque no se forma ATP: el gradiente se disipa solo como calor.
Que pasa si, al ser una función de estado, había un transporte de e- directo desde el primer transportador hacia
el O2 sin pasar por los intermediarios? La energía que se pone en juego, como es una función de estado
termodinámica, es exactamente la misma; lo que sucede es que no va a haber una síntesis alta de ATP porque
esa energía no se va a aprovechar para formar ATP sino que se va a disipar como calor. Eso, lo responde el
primer principio de la termodinámica que decía que la energía que se ponía en juego se dividía entre el trabajo
útil y el calor que se disipa.
Algunos desacoplantes como la termogenina (desacoplante fisiológico muy activo en recién nacidos) forma
poros conductores de H+ en la MMI que disipan el gradiente, disminuyendo la formación de ATP porque por
protones van a volver a la matriz pero no por la ATPasa sino por los poros.
79
Diferencias entre inhibidores y desacoplantes
Inhibidores → al frenarse totalmente la CTE no se genera el gradiente de H+ y la síntesis de ATP baja. La

velocidad de la CTE disminuye o se para y la síntesis de ATP disminuye o se para
Desacoplantes → la CTE funciona normalmente pero esta inhibida la síntesis de ATP por efecto del mismo y la
fuga del gradiente. La CTE no se detiene pero como la célula censa que la energía es baja y el ATP que se forma
es bajo, acelera el metabolismo oxidativo (por ej. CdK), para generar más poder reductor (NADH y FADH2)
para ingresar en la CTE. La CTE va a estar muy acelerada por un efecto de compensación pero la ATPsintasa va
a estar afectada.
80
Metabolismo de glúcidos
Digestión y absorción
Los principales hidratos de carbono que incorporamos en la dieta son el almidón, la lactosa y la sacarosa.
Almidón: Al degradarse se obtienen dos compuestos principales: la amilosa, que son muchas unidades de
glucosa unidas por enlaces glucosídicos del tipo α (1→4), y la amilopectina, que son las mismas unidades
enlazadas por uniones glucosídicas α (1→6) en las ramificaciones.
Lactosa: Disacárido compuesto por glucosa y galactosa mediante un enlace glicosídico β (1→4).
Sacarosa: Disacárido compuesto por glucosa y fructosa unidos por enlaces glicosídicos α (1→2).
Glucógeno
Compuesto carbo-hidratado de almacenamiento que se encuentra en muchos tipos celulares. Está compuesto por
unidades de glucosa enlazadas por enlace glucosídico α (1→4) y con uniones α (1→6) en las ramificaciones.
El hígado y el músculo esquelético contienen los mayores depósitos de glucógeno. Los procesos digestivos
convierten a estos hidratos de carbono de la dieta en los monosacáridos que los constituyen al hidrolizar sus
respectivos enlaces glucosídicos.
Digestión del almidón: Comienza en la boca donde las glándulas salivales liberan α-amilasa salival,
convirtiendo al almidón en unidades más pequeñas llamadas α-dextrinas. En el estómago la α-amilasa se
inactiva por la actividad propia del estómago y su pH acido. El páncreas libera α-amilasa pancreática y
bicarbonato (HCO3) hacia la luz del ID: el bicarbonato neutraliza las secreciones gástricas y la α-amilasa
pancreática continua la digestión de las α-dextrinas a las que transforma en disacáridos como la maltosa,
trisacáridos como la maltotriosa y oligosacáridos también llamados dextrinas límites, las cuales contienen
isomaltosa. La isomaltosa son dos residuos de glucosa unidos por enlaces α (1→6).
La digestión final de estos últimos compuestos como también de la sacarosa y lactosa provenientes de la dieta
ocurre por acción de las disacaridasas, unidas a los enterocitos y sus microvellosidades. Las glucoamilasas
hidrolizan uniones del tipo α (1→4) de dextrinas, maltasas e isomaltasas que hidrolizan a maltosas e
isomaltosas, las sacarasas a sacarosas y las lactasas a lactosas. Los monosacáridos obtenidos que son glucosa,
lactosa y fructosa, que se desplazan al interior de las células epiteliales del intestino a través de transportadores.
Las reservas de glucosa en el organismo son aproximadas a los que se requieren diariamente.
81
Acción de la amilasa
➔ Como resultado de la α-amilasa salival obtenemos productos como oligosacáridos, trisacáridos y α-

dextrinas.
➔ Como resultado de la α-amilasa pancreática se obtienen unidades más pequeñas como maltosa e
isomaltosa.
➔ Por ultimo, como resultado o de las disacaridasas se obtienen unidades finales: los monosacaridos.
La absorción de los monosacáridos se da mediante el mecanismo de entrada en el enterocito por el transporte

activo dependiente de sodio: absorción de la glucosa y galactosa y transporte por difusión facilitada: se absorde
la fructosa.
Proteínas transportadoras de glucosa en el intestino
Transportadores de glucosa dependientes de Na: La glucosa y la galactosa se desplazan a través de los

cotransportadores de Na-glucosa solo ubicado en el lado mucoso de los enterocitos.
82
Transportadores facilitadores de glucosa: Tanto la glucosa como la fructosa se movilizan en estos

transportadores por difusion facilitada. Se encuentran ubicados tanto en el lado mucoso y seroso de los
enterocitos o células epiteliales absorbentes. Son los integrantes de la familia GLUT.
• Fructosa: sale de la celula exclusivamente por GLUT 5.

• Glucosa y galactosa: salen de la célula por GLUT 2.
Na+-K+ ATPasa: Es un trasnpore activo secundario, y se emplea para bombear Na+ desde el interior de la
célula hacia la sangre. Se aplican para equilibrar [Na+] intracelulares y que el contansportador Na/gluc funcione.
Las propiedades de las proteínas GLUT difieren entre los distintos tejidos porque el metabolismo de la glucosa
es particular en cada tejido. En la mayoría de los tipos celulares, el Km es relativamente bajo para la glucosa. La
concentración intracelular de la glucosa refleja mas o menos aquella de la sangre.
En varios tejidos la tasa de transporte de la glucosa se convierte en un limitante de la velocidad cuando la

cantidad de glucosa sérica o glucemia es baja.
83
Eritrocito: La glucosa no es un limitante cuando la concentración de glucosa en el exterior es baja. El GLUT 1

y GLUT 3 teniendo un Km aproximado de 1mM está presente en concentraciones relativamente altas pudiendo
así compensar las variaciones que ocurren en la concentración de glucosa en sangre desde una hipoglucemia de
2,2 mM, a una glucemia normal en ayuno de 4,5 mM hasta una glucemia posprandial de 7,5 mM.
Hígado: El Km para el GLUT 2, es relativamente elevado (15 - 20mM), relacionado con la función del hígado
como regulador de la glucemia ([gluc] en sangre). De esta manera en el hígado ante una hiperglucemia no se
satura su transporte hacia el interior de la célula.
Músculo y tejido adiposo: Presentan GLUT 4 y tienen un mecanismo especial, el cual se pone a disposición
para que ingrese glucosa dentro de las células. Mediante el estímulo de la INSULINA se promueve el transporte
de vesículas intracelulares que portan los GLUT 4 hacia la membrana; de esta manera, el músculo puede hacer
glucólisis para obtener energía y también almacenar glucosa como glucógeno.
En el caso del tejido adiposo lo tiene disponible para hacer glucolisis y a partir de sus productos formar ácidos
grasos y glicerol.
84
Destinos de la glucosa
La glucosa es esencial para el metabolismo, siendo el combustible universal y fuente de carbono para la síntesis
de otros compuestos.
Una vez que la glucosa es transportada dentro de la célula es fosforilada por una hexoquinasa para formar
glucosa-6-fosfato. La glucosa-6-fosfato puede entrar en varias vías metabolicas, las tres mas comunes en los
tejidos son la glucólisis, la vía de las pentosas 5P y la síntesis de glucógeno o glucogenogenesis. La
fosforilacion de la glucosa a glucosa-6-fosfato condiciona su permanencia dentro de la celula.
En los tejidos la fructosa y galactosa se convierten en intermediarios del metabolismo de la glucosa.
La glucólisis provee fuentes de ATP. Las células que tienen mitocondrias oxidan glucosa hasta CO2 y H2O y a
glucólisis y ciclo de Krebs; las que no tienen mitocondrias producen ATP mediante glucólisis anaeróbica. Otro
destino de la glucosa 6-P es la oxidación vía pentosas 5P la cual genera NADPH con poder reductor, usado para
reacciones biosintéticas que previenen el daño por oxidación en las células y como precursor de nucleótidos.
También la glucosa 6-P puede convertise en UDP-glucosa, el precursor de la síntesis de glucógeno con función
de almacenamiento.
Glucólisis
Es la vía en la cual una molécula de glucosa (6C) es degradada por una serie de reacciones enzimáticas para
dar dos moléculas de piruvato (3C).
- Se produce ATP y NADH.

- Es una vía central en el citosol celular de todos los tejidos
- Constituye la única fuente de energía en eritrocitos, médula renal, cerebro y espermatozoides
Consta de dos fases:
• Fase preparatoria.
• Fase de recuperación.
En la fase preparatoria la glucosa es fosforilada dos veces por ATP y degradada en dos fosfatos triosas llamados
dihidroxiacetonafosfato (DHAP) y gliceraldheido-3P (GA3P) que se pueden interconvertir.
En la fase de recuperación el gliceraldheido-3P es oxidado por NADH y fosforilado por Pi, generando un enlace
fosfato de alta energía que puede ser transferido al ADP para formar ATP. El fosfato restante también se
reordena para formar otro enlace fosfato de alta energía que se transfiere a otra molécula de ADP.
85
FASE PREPARATORIA
Reacción 1: fosforilación de la glucosa
Se fosforila la glucosa a partir de la transferencia de un fosfato del ATP a la glucosa para formar glucosa 6P.
Determina su utilización metabólica, no puede transportarse como glucosa 6P al exterior. Es una reacción
irreversible. ΔG`0= -16,7 Kj/mol. Sin embargo la fosforilación no compromete a la glucosa para que haga la
glucólisis. Esta reacción es uno de los tres puntos claves en la regulación de la glucólisis. La enzima que lleva a
cabo este proceso es la hexoquinasa. Las hexoquinas son enzimas de la famila hexo específicas de tejido que
difieren en sus propiedades cinéticas.
Isoformas de Hexoquinasa
Tienen valores de Km mayores que las otras hexoquinasas y se llaman glucoquinasas. En el resto se utiliza
hexoquinasas como nombre genérico.
Hexoquinasa (tejidos extrahepáticos):
- Km: 0,1mM.
- Inhibida por su producto.
Glucoquinasa (hígado y c β pancreáticas):
- Km: 10mM.
86
- No es inhibida por su producto.
- Es inhibida por la fructosa 6P.
Reacción 2: isomerización de la glucosa
Isomerización de la glucosa 6P a fructosa 6P. Es llevada a cabo por la enzima P-hexosa isomerasa. Es clave
este reordenamiento de los carbonilos e hidroxilos en posiciones 1 y 2 para los siguientes pasos:
- La presencia del OH sobre el C1: para su posterior fosforilación.

- La presencia de un C en posición 2: para que la molécula se pueda escindir en dos triosas.
Reacción 3: fosforilación de la fructosa-6P
Es la fosforilación de la fructosa 6P en fructosa 1,6biP. La enzima que lleva a cabo esta reacción es la P-
fructoquinasa-1 (PFK-1). Se considera el principal paso de la regulación de la vía glucolítica. Esta fosforilación
requiere ATP y es irreversible. La PFK-1 compromete de forma irreversible a la glucosa en la vía glucolítica. La
PFK-1 presenta distintas isoformas en los distintos tejidos.
Reacción 4: lisis de la fructosa- 1,6 biP
Lisis de la fructosa 1,6 biP es dos compuestos de 3C fosforilados. Está llevada a cabo por la enzima aldolasa a
partir de una ruptura aldólica. Los productos son la dihidroxiacetonafosfato (DHAP) y gliceraldheido 3P (GA
3P).
87
Reacción 5: conversión de DHAP en GA3P
Conversión de DHAP (cetosa) en GA3P (aldosa). Solo el GA3P puede ser degradado en los siguientes pasos de
la glucólisis, así la DHAP se convierte en GA3P por la enzima isomerasa triosa fosfato.
FASE DE RECUPERACIÓN
Reacción 6: fosforilación del G3P
Comienza la fase de recuperación de la glucólisis. Ocurre la fosforilación en posición 1 del GA3P a partir de Pi,
y también ocurre su oxidación. Esta reacción es llevada a cabo por la enzima gliceraldehido 3P deshidrogenasa,
la cual oxida al grupo aldehído del GA3P transfiriendo los electrones a NAD para formar NADH. El enlace
fosfato de alta energía en posición 1 es el punto de inicio de la fosforilación a nivel de sustrato que se da en el
siguiente paso, que es la formación de un enlace de alta energía donde antes no existía y sin el uso de oxígeno.
88
Reacción 7: fosforilación de ADP y desfosforilación del 1,3 BPG
La energía del enlace es lo suficientemente elevada para que sea favorable para su transferencia hacia el ADP.
La enzima encargada de esta reacción es la P-glicerato quinasa y se obtiene ATP y el 3,P-glicerato. Es una
reacción reversible. La formación de ATP por transferencia del grupo fosforilo a partir de un sustrato y sin la
presencia de oxígeno se conoce como fosforilación a nivel de sustrato para distinguirla de la fosforilación ligada
a la respiración. La fosforilación a nivel del sustrato implica enzimas solubles e intermediarios químicos, la
fosforilación ligada a la respiración implica enzimas de membrana y un gradiente transmembrana de H+.
Reacción 8: conversión de 3-PG a 2-PG
Para transferir el P-ester en la posición 3 del PG, al ADP y convertirlo en ATP (posteriormente en otro paso), es
necesario correrlo desde el sitio 3 de baja energía a la posición 2 para convertirlo en un enlace de alta energía.
La enzima que cataliza esta reacción es la P-glicerato mutasa.
Reacción 9: deshidratación del 2-PG
Se complementa con el paso anterior para aumentar la energía del enlace fosfato. La enzima interviniente es la
enolasa y el compuesto formado es el fosfonol piruvato (PEP).
89
Reacción 10: fosforilación de ADP y desfosforilación del PEP
Tenemos preparado el enlace de alta energía para que el grupo fosfato pueda ser transferido a otra molécula de
ADP y formar el segundo ATP. La enzima que cataliza esta reacción es la piruvato quinasa y el PEP pasa a
formar el piruvato. La reacción es irreversible y es otra fosforilación a nivel del sustrato. Además, es otro paso
importante en la regulación de la vía glucolítica.
Ingreso de otros monosacáridos a la glucólisis
Muchos glúcidos entran en la glucólisis luego de ser transformados en uno de los intermediarios glucolíticos.
Manosa: Por una hexoquinasa se convierte en una manosa 6P y por una isomerasa pasa a ser una fructosa 6P,
pudiendo así entrar a la vía.
Galactosa: A través de un derivado azúcar nucleótido unido a galactosa se convierte en galactosa 1P para
formar el UDP-galactosa. Este se convierte UDP-glucosa, y esta en glucosa 1P, que puede convertirse en
glucosa 6P y entrar a la vía. El UDP queda disponible para acoplarse a otra galactosa y reiniciar el ciclo.
Fructosa: A través de su quinasa forma la fructosa 1P y por una aldolasa se escinde en dihidroxiacetonafosfato
(DHAP) y gliceraldheído. A expensas de una quinasa forma el gliceraldheído 3P y la DHAP por una isomerasa
cambia a gliceraldheído 3P, quedando constituidos otros intermediarios.
90
Rendimiento de la glucólisis
Glucosa + 2 ATP + 2 NAD+ + 4 ADP + 2 Pi → 2 piruvato + 2 ADP + 2NADH + 2H+ + 4 ATP + 2 H20
Balance neto: Glucosa + 2 NAD+ y 2 ADP + Pi → 2 piruvato + 2 NADH y 2 H+ + 2 ATP + 2 H20
El NADH producido debe reoxidarse continuamente a NAD con el fin de contar con un aceptor de electrones
para la reacción 6.
Existen dos rutas alternas para la reoxidación del NADH citosólico:
• Aeróbica: implica lanzaderas que transfieren equivalentes de reducción a la cadena respiratoria.

• Anaeróbica: implica a la lactato deshidrogenasa, reduciendo el piruvato a lactato.
Destinos del piruvato y su catabolismo del piruvato
Según las diferentes condiciones en que se encuentran los tejidos se obtendrán diferentes compuestos.
En presencia de oxígeno/aerobiosis: va a continuar su oxidación hasta Acetil-CoA y este, vía ciclo de Krebs,
hasta CO2 y H20.
En condiciones sin oxígeno/ anaerobiosis: se va a convertir en lactato por el proceso llamado fermentación
láctica, que ocurre en eritrocitos, músculo en contracción vigorosa y en algunos microorganismos.
Transaminación a Alanina: por transaminasas.
91
Fermentación láctica/ glucólisis anaeróbica
El piruvato se reduce a lactato por la enzima lactato deshidrogenasa. La reacción ocurre en el citosol y es
fácilmente reversible. Se utiliza NADH y se regenera el NAD+, necesario para la glucólisis. Además, la
reacción tiene una variación de energía estándar muy negativa.
Descarboxilación oxidativa del piruvato en aerobiosis
El piruvato se oxida para dar lugar a Acetil-Coa y CO2, a consecuencia del accionar de una agrupación
estructurada de tres enzimas con múltiples copias de cada uno de ellos: el complejo de la piruvato
deshidrogenasa o PDH, ubicado en mitocondrias. Se produce una deshidrogenación y descarboxilación del
piruvato que se combinan para formar el grupo acetilo del Acetil-CoA.
Estas reacciones requieren del accionar secuencial de:
E1: Piruvato deshidrogenasa.
E2: Dihidro-lipoil-transacetilasa.
E3: Dihidrolipoil-deshidrogenasa.
Además, se requiere de cinco coenzimas o grupos prostéticos diferentes: Tiamina pirofosfato (TPP), flavina-
adenina dinucleótido (FAD), Coenzima A (CoA), nicotinamida adenina dinucleótido (NAD) y lipoato.
También hay cuatro vitaminas esenciales y componentes importantes en el sistema: la tiamina en el TPP, la
riboflavina en el FAD, la nicotina amida en el NAD y el pantotenato en el CoA.
92
En el paso 1 el C1 del piruvato se elimina en forma de CO2, y el C2, que se encuentra en un estado de oxidación
correspondiente a un aldehído, se une al TPP de la E1 en forma de grupo hidroxietilo, formado el derivado
hidroxietilo por descarboxilación. Es el paso más lento y limitante de la reacción global.
En el paso 2 también interviene la piruvato deshidrogenasa. El grupo hidroxietilo se oxida para dar lugar a un
ácido carboxílico (acetato). Los 2 electrones eliminados en esta reacción de oxidación reducen el -S-S- de un
grupo lipoilo de la E2 para dar lugar a 2 grupos tiol (-SH). La porción acetilo producido en esta reacción de
oxido-reducción se esterifica en primer lugar con uno de los grupos -SH del lipoilo.
A continuación, en el paso 3, se transesterifica con el CoA para dar Acetil-CoA: el grupo sulfhidrilo del CoA
completa los dos -SH del grupo lipoillisina para que quede totalmente reducida, y el CoA se una al grupo acetilo
formando el acetil-CoA. Así la energía de oxidación impulsa la formación de un tioéster del acetato de elevada
energía.
El resto de las reacciones catalizadas por el complejo de la PDH (por la E3 en los pasos 4 y 5) son transferencias
electrónicas necesarias para la regeneración de la forma oxidada (disulfuro) del grupo lipoilo de la E2,
preparando así al complejo enzimático para otro ciclo oxidativo. Los e- extraídos del grupo hidroxietilo
procedente el piruvato pasan a través del FAD al NAD+.
Todas las enzimas y coenzimas se encuentran agrupadas, permitiéndole a los intermediarios reaccionar
rápidamente sin difundir fuera de la superficie del complejo enzimático. La secuencia de 5 reacciones es un
ejemplo de canalización de sustratos o channeling, proceso de transferencia directa de un intermediario
metabólico entre los sitios activos de dos enzimas que catalizan reacciones secuenciales en una ruta biosintética.
93
Gluconeogénesis
Proceso por el cual se sintetiza glucosa a partir de compuestos que no son hidratos de carbono. El GLUCAGÓN
induce este mecanismo y ocurre en situaciones como el ayuno, además de que muchas reacciones de la
glucólisis se invierten con el fin de mantener las concentraciones de glucosa en sangre. Tambien, ocurre
principalmente en el hígado.
Los precursores más importantes son el lactato, el glicerol y los aminoácidos (especialmente alanina).
Son todas reacciones reversibles al paso de la glucólisis con la excepción de tres que son las llamadas
reacciones de rodeo: incluyen primero la conversión de piruvato en PEP, segundo la conversión de fructosa 1,6
biP en fructosa 6P y tercero la conversión de glucosa 6P en glucosa.
94
Precursores gluconeogénicos
Lactato: a expensas de la lactato deshidrogenasa forma piruvato.
Alanina: por una reacción de transaminación forma piruvato.
Glicerol: puede incluirse en la vía glucolítica a partir de glicerol transformándolo en glicerol 3P a expensas de
una quinasa. A su vez, la glicerol 3P deshidrogenasa utiliza el P añadido para convertirse en dihidroxiacetona P.
Este último, a su vez, es una de las dos triosas que se forman en la glucólisis, y por reacción inversa pueden
entrar en un proceso gluconeogénico.
Formación de PEP a partir de piruvato vía OXA (oxalacetato)
En primer lugar, el piruvato se transporta desde el citosol a la mitocondria, o se genera en la mitocondria a partir
de la alanina en el proceso de transaminación. Ya en la mitocondria, el piruvato se carboxila para formar el
oxalacetato por la enzima piruvato carboxilasa, que es exclusiva de la mitocondria y requiere biotina (vitamina
B8) para su funcionamiento. El oxalacetato se interconvierte en malato, sale de la mitocondria al citosol, se
convierte otra vez en oxalacetato reaccionando con GTP para finalmente dar PEP.
La formación de PEP a partir de piruvato se cataliza por una serie de enzimas, en vez de una sola como ocurre
en el paso inverso en la glucólisis, ya que es una reacción una gran variación de energía libre, por lo tanto
irreversible.
El bicarbonato se convierte en CO2 a expensas del ATP. El CO2 reacciona con la biotina y la enzima, pudiendo
así reaccionar en el piruvato para dar oxalacetato.
El CO2 que se había sumado, se libera en la reacción catalizada por la fosfoenol piruvatocarboxiquinasa
citosólica generando al PEP. La reacción requiere GTP como dador del fosfato, y se pueden encontrar isoformas
de la fosfoenol piruvatocarboxiquinasa en mitocondria y en citosol. No hay perdida ni ganancia neta de C.
95
Vías alternativas para la obtención de PEP
Debido a que la membrana mitocondrial no tiene transportador de OXA, antes de ser exportado al citosol debe
ser reducido a malato mediante la malato deshidrogenasa mitocondrial, a expensas del NADH. Así el malato
sale de la mitocondria mediante un transportador específico de la MMI y en el citosol se reoxida a OXA con
producción del NADH citosólico por la malato deshidrogenasa citosólica.
El NADH citosólico generado por la malato deshidrogenasa citosólica se requiere y es fundamental para reducir
el 1,3 bifosfoglicerato en gliceraldehído 3P durante lo gluconeogénesis. El NADH citosólico siempre va a ser
menor que el existente en la mitocondria.
El proceso de formación de PEP es distinto cuando el lactato es el precursor gluconeogénico, producido en

aerobiosis después de realizar un ejercicio intenso o por glucólisis en eritrocitos, porque genera otro rodeo: la
conversión de lactato en piruvato en el citosol por la lactato deshidrogenasa. En este caso ya no es necesario
transportar el poder reductor hacia el citosol ya que se obtiene con esta reacción (generamos NADH + H+). Así
entra el piruvato a la mitocondria y actúa la piruvato carboxilasa de la misma manera que la otra vía,
sintetizando oxalacetato y este internamente en la mitocondria se convierte en PEP por la fosfoenolpiruvato
carboxiquinasa mitocondrial, y así puede salir al citosol y recién ahí hacer gluconeogénesis.
Si el precursor es alanina, se puede convertir en piruvato por transaminación y seguir el camino de las mismas
conversiones.
El OXA u oxalacetato también se puede convertir en aspartato y salir de la mitocondria como aspartato y salir
de la mitocondria como tal.
96
Los pasos restantes de la gluconeogénesis tienen lugar en el citosol comenzando con el PEP como sustrato, los
pasos de la glucólisis se revierten para formar gliceraldehido 3P.
Por c/ molécula de GA3P que se forma, una se convierte en dihidroxiacetona P (DHAP), así el GA3P y DHAP
se condensan para formar fructosa 1,6-biP a través de la reacción inversa de la aldolasa. El GA3P puede formar
DHAP entrando así en la vía gluconeogénica en este nivel.
En la conversión de la fructosa 1,6-biP en fructosa 6P interviene la enzima fructosa 1,6-biPasa, liberando un

fosfato. No es la inversa de la P fructoquinada-1 de la glucólisis, ya que no se forma ATP con el fosfato que
sale, porque este fosfato tiene una unión de baja energía, entonces no se promueve la hidrolisis prácticamente.
En la siguiente reacción, cuando la fructosa 6P se convierte en glucosa 6P, actúa la misma isomerasa de la
glucólisis.
El tercer rodeo lo constituye la conversión de glucosa 6P en glucosa, a partir de una desfosforilación mediada
por la glucosa 6-Pasa, que hidroliza el éster P. Esta enzima se encuentra en la cara luminal del RE de los
hepatocitos, células renales, enterocitos y no en otros tejidos, por ende, otros tejidos son incapaces de
suministrar glucosa en sangre. Esta enzima también se utiliza para degradar glucógeno hepático y formar
glucosa sanguínea.
97
Localización y participación de la glucosa 6-Pasa en la regulación de la glucemia
La glucosa 6P ingresa por transportadores específicos del tipo T1. Otros transportadores del tipo T son
utilizados para exportar la glucosa y a los grupos fosfatos desde el interior del RE hacia el citosol, para
finalmente exportarse la glucosa desfosforilada vía GLUT 2 hacia la sangre.
Balance global de la gluconeogénesis
Es energéticamente cara pero esencial, por eso se usa ATP y GDP para que sea favorable.
98
La gluconeogénesis necesita mucho ATP, el cual sale del tejido adiposo, por la señalización de adrenalina se
activa la lipolisis con lo cual vamos a aumentar la concentración de ácidos grasos como fuentes de ATP.
REGULACIÓN METABÓLICA
El flujo de una reacción catalizada por una enzima puede modularse mediante cambios en el número de
moléculas de la enzima o mediante cambios en la actividad catalítica de las enzimas preexistentes. Estos
cambios ocurren en respuestas a señales desde el interior o exterior celular y se dan en respuesta a las distintas
circunstancias metabólicas.
El número de enzimas en una célula está en función de las velocidades relativas de síntesis y de degradación de
dichas enzimas. La estabilidad de los ARNm o su resistencia a la degradación por ribonucleasas celulares es
variable.
Otra forma de alterar la actividad de una enzima es secuestrar o reclutar a la enzima y su sustrato en
compartimentos diferentes. Los cambios alostéricos se dan por cambios en la concentración local de un sustrato
de una ruta en particular, como por ejemplo la glucosa o un producto de la ruta como ATP, o un cofactor como
NADH, los cuales son indicadores del estado metabólico de la c.
En la regulación covalente algunas enzimas se interconvierten de manera reversible entre su forma activa e
inactiva. Esto ocurre principalmente por fosforilación y desfosforilación en residuos específicos de las cadenas
laterales. Las enzimas pueden asociarse con proteínas reguladoras aumentando o disminuyendo su actividad.
99
Factores que afectan la actividad de las enzimas
La actividad total puede cambiarse la alteración del número de sus moléculas o su actividad efectiva en un
compartimiento c.
Entre los pasos 7 y 10 de la actividad efectiva en una c vemos que la enzima se activa frente a su sustrato, la
enzima puede unir a un ligando como factor alostérico, la regulación covalente experimentando fosforilación o
desfosforilación y a tener en cuenta: las fosforilaciones no siempre activan. En un paso 10 se muestra el cambio
de actividad que puede tener una enzima cuando se combina con una proteína reguladora.
Una enzima puede ser influida por una combinación de factores.
Principios de la regulación hormonal
Frente a cambios en la [glucosa] aumenta la secreción de ciertas hormonas por tejidos específicos con fines
específicos. Estas hormonas se unen a sus receptores, generando una cascada de señalización que induce a la
expresión de otras proteínas y fosforilación y desfosforilación de otras, dando una respuesta concreta a la
situación metabólica. Todas las células utilizan continuamente ATP, entonces requieren un aporte constante de
combustible para proveer energía para generar ATP.
La insulina y el glucagón regulan la movilización y almacenamiento de combustible. Su f (x) es asegurar que las
células tengan una fuente constante de glucosa, de ácidos grasos y aminoácidos para generar ATP. Mantienen
las concentraciones de glucosa en sangre cerca de 90mg/dl =5mM a pesar del hecho de que la ingestión de
hidratos de carbono varía constantemente durante el día.
El mantenimiento de cifras constantes de glucosa en sangre requiere la presencia de insulina y glucagón para
regular el metabolismo de carbohidratos, de lípidos y aa.
La insulina es liberada por células β pancreáticas como respuesta a la ingestión de glúcidos promoviéndola
como uso de combustible y almacenamiento de esta como grasa y glucógeno. Tiene una función anabólica e
incrementa la síntesis de proteínas y crecimiento celular. Las concentraciones de insulina en sangre disminuyen
a medida que los tejidos absorben la glucosa y la utilizan.
El glucagón aparece como una hormona contra-reguladora y va decreciendo en respuesta a la ingesta de hidratos
de carbono y se eleva durante el ayuno. La concentración en sangre se incrementa a medida que las cifras
circulantes de glucosa disminuyen, respuesta que promueve la producción de glucosa a partir de la degradación
de glucógeno y gluconeogénesis. Cuando hay mucho glucagón estimula la movilización de ácidos grasos del
tejido adiposo.
100
La adrenalina que es la hormona de lucha o huida aparece en respuesta al ayuno y tienen efectos en el
metabolismo del combustible opuestos a la insulina. Aparece como una hormona contrarreguladora en respuesta
a un estrés o actividad física intensa.
REGULACIÓN DE LA GLUCOLISIS Y GLUCONEOGÉNESIS
Glucólisis
1er punto de regulación: llevado a cabo por la hexoquinasa/glucoquinasa
2do punto: llevado a cabo por la fosfofructoquinasa-1 (PFK-1)
3er punto: llevado a cabo por la piruvato-quinasa
Hexoquinasa, PFK-1 y piruvato quinasa catalizan reacciones alejadas del equilibrio.
Gluconeogénesis
Regulación de los rodeos en torno a los puntos de regulación de la glucólisis.
1er rodeo: llevado a cabo por la piruvato carboxilasa y PEP carboxiquinasa
2do rodeo: llevado a cabo por la fructosa 1,6 biPasa
3er rodeo: llevado a cabo por la glucosa 6-Pasa
Regulación de glucólisis
Regulación de la actividad de la hexoquinasa (tejidos extrahepáticos)
Se la menciona como nombre genérico y su isoforma presente en otros tejidos MENOS en el HIGADO. Cataliza
la reacción de la fosforilación de la glucosa a partir de ATP a gluc 6-P. En este caso cuando hablamos de
hexoquinasas genéricas decimos que la gluc 6-P es un inhibidor de la misma, decir que tiene una inhibición
alostérica la enzima por el producto de la reacción. A partir de la gluc 6-P se podían sintetizar por ejemplo
glucógeno y también podía entrara a la via de las P5P.
101
Regulación de la actividad de la glucoquinasa o hexoquinasa IV (hígado)
Esta, que es hepática, no es inhibida por el producto de la reacción (gluc 6-P) sino por la fruc 6-P, que siempre
se encuentra en equilibrio con la gluc 6-P por la acción de la glucosa isomerasa (reg de isoenzimas). Como
diferencias entre ellas, glucoquinasa y hexoquinasa 1 (musc):
- La glucoquinasa tiene un Km mayor (10mM) con respecto a la hexoquinasa I (0,1 mM). Esto quiere
decir que la glucoquinasa no se satura por la concentra de glucosa sanguínea que es de 5 mM, lo que
contribuye a la f(x) del hígado en mantener la glucemia. La hexoquinasa I si se encuentra saturada y
funciona a vmax.
- Cuando la concentración de lucosa en sangre aumenta, también aumenta la actividad de la

gluctoquinasa pero la hexoquinasa I ya está funcionando a vmax a valores de [gluc] normales. No
puede responder a un aumento de la glucemia pero si la glucoquinasa.
- La glucoquinasa se compartimentaliza, es decir, es regulada por compartimentalización. Cuando la

[fruc 6-P] de hígado es elevada hay una proteína reguladora capaz de reclutar a la hexoquinasa 4 y
llevarla hacia el núcleo; si la [gluc] es elevada la proteína reguladora libera a la glucoquinasa hacia el
citosol haciendo posible que la gluc sea fosforilada a gluc 6-P. Así la fruc 6-P compite con la gluc por
la unión o desunión de la proteína reguladora con la glucoquinasa. Quien gana? Depende de las
condiciones metabólicas
➔ Mucha glucosa en sangre, la gluc entra al hepatoc por GLUT2 y promueve la gluc, la desunión de la
glucoquinasa con la proteína reguladora haciendo que la glucoquinasa entre al citosol y fosforile
glucosa.
➔ Poca glucosa en sangre (por debajo de 5 mM), la fruc 6-P inhibe a la glucoquinasa reclutándola hacia el
núcleo por la proteína reguladora.
Regulación de la actividad de la PFK-1
Esta enzima adiciona un fosfato a la fructosa 6P formando fructosa 1,6 biP por ATP. Cataliza la reacción
limitante de la velocidad de la vía ya que los metabolitos en este punto se comprometen a seguir la vía
glucolítica.
102
Tiene regulación alostérica, con efectos alostéricos positivos y negativos:
Moduladores alostéricos +: AMP, que es un compuesto determinante de baja energía; y la fructosa 2,6 biP.
Moduladores alostéricos -: ATP (compuesto determinante de alta energía), citrato y H+.
Síntesis de fructosa 2,6 biP
Responde a los niveles de glucagón e insulina que reflejan los niveles de glucosa en sangre.
Es sintetizada por la enzima bifuncional PFK-2/Fru 2,6biPasa. Es bifuncional porque tiene una función quinasa
y una función fosfatasa.
- Cuando está activa la función quinasa, se puede sintetizar el modulador fructosa 2,6 biP a partir de la
fructosa 6P. Añade 1 P.
- Cuando está activa la función fosfatasa, le saca un fosfato y queda la fructosa 6P: el modulador
alostérico + no puede funcionar porque falta 1 P y la glucolisis no progresa.
-
Regulación de la PFK-2/Fru2,6biPasa por modificación covalente
Si se quiere evitar que progrese la glucolisis por disminución de glucosa en sangre y se secreta la hormona
glucagón activando una vía de señalización para la producción de AMPc para activar la PKA. La PKA fosforila
a la parte quinasa de la enzima bifuncional inactivándola, y solo queda activa la parte fosfatasa, haciendo que si
yo tenía fruc 2,6 biP se le retire el P quedando como fruc 6-P y no hay estimulación + de la PFK-1. Así coincide
que por glucagón se interrumpa la glucolisis.
Si hay mucha glucosa en sangre tenemos insulina que va a activar por una via una fosfatasa que retira el fosfato
de la parte quinasa de la bifuncional y por ende queda activa la parte quinasa y se activa la parte fosfatasa. Si
queda activa la parte quinasa la bifuncional de adhiere un P a la fruc 6-P convirtiéndola en fruc 2,6 biP, y así
puede inducir a activar a la PFK-1 para promover la glucolisis.
Hígado: La fosforilación mediada por AMPc-PKA (glucagón) DISMINUYE los niveles de fruc 2.6 biP y en
consecuente INHIBE la vía glucolítica.
103
Regulación de la piruvato quinasa
Posee regulación alostérica y por modificación covalente. Es una enzima inducible, es decir que se induce su
transcripción génica cuando las condiciones inducen a que haya glucólisis. Cataliza la reacción de
fosfoenolpiruvato a piruvato con formación de ATP.
Regulación alostérica: En tejidos glucolíticos, incluido hígado.
Modulador positivo: fructosa 1,6biP, del cual se hablaba en la regulación anterior producto de la PFK-1.
Modulador negativo: ATP, como indicador de alta energía, alanina (sintetizada a partir del piruvato en 1 paso,
haciendo mas lenta su producción en la glucolisis), acetil-CoA porque puede provenir de la oxidación de los AG
que se acumulan mucho y se oxidan cuando es requerida su energía cunado hay carencia de energía, AG de
cadena larga. Todas estas menciones caracterizan la presencia de una energía favorable.
Regulación por modificación covalente: SOLO en hígado.
Fosforilada → menos activa
Desfosforilada → más activa.
La fosforilación esta mediada por la vía de señalización estimulada por el glucagón que hace que PKA
promueva la adición de un fosfato y la enzima quede menos activa.
La insulina activa una fosfatasa que la desfosforila y la activa, promoviendo la glucólisis.
La isoenzima hepática puede estar regulada por el glucagón que activa a la PKA que depende del AMPc, la cual
la fosforila y la inactiva. Cuando desciende la [glucagón], una proteína fosfatasa desfosforila a la piruvato
quinasa activándola; este mecanismo impide que el hígado consuma glucosa a través de la glucolisis cuando la
concentración de glucosa en sangre es baja y en lugar de ello el hígado “corta” glucosa.
104
En el músculo posee una isoforma diferente que es activa cuando está fosforilada (adrenalina).
Regulación del complejo piruvato deshidrogenasa
PDH es un complejo formado por múltiples unidades de 3 enzimas con sus cofactores a partir de la cual se
forma acetil-CoA a partir del piruvato. Tiene una regulación covalente y alostérica.
Regulación covalente por fosforilación
Fosforilado → PDH inactivo.
Desfosforilado → PDH activo.
Se fosforila una quinasa a expensas del ATP, la cual tiene moduladores positivos y negativos.
Mod + → activan a la quinasa: aumento de NADH con respeto al NAD+, aumento de acetil-CoA con respecto
al CoA y el aumento de ATP con respecto al ADP. También el + Ca (musculo) y compuestos activos por la via
de la insulina en hígado y en tej adiposo.
Mod – → inhiben a la quinasa: aumento de ADP y aumento de piruvato.
Regulación alostérica
Moduladores positivos: Todas las coenzimas o grupos prostéticos → TPP, FAD, CoA, NAD, lipoato
Moduladores negativos: acetil-CoA aumentado y el NADH, otro producto de la reacción del complejo y el
acetil-CoA en respuesta a una condición de baja energía como producto de la oxidación de AG.
105
Regulación de la gluconeogénesis
• Cuando la glucólisis está activa, esta se inactiva, las dos vías tienen un control recíproco para disminuir
ciclos fútiles.
• Cuando el nivel de energía de la célula es alto, la glucólisis se inactiva y el piruvato... debe ser utilizado
para la síntesis y almacenamiento de glucosa.
• Cuando el nivel de energía de la célula es bajo, la glucosa debe ser rápidamente degradada para obtener
energía.
3 son las reacciones de las vías que son reguladas recíprocamente.
Regulación coordinada de la glucolisis y gluconeogénesis
3 secuencias en la vía de la gluconeogénesis están reguladas: la que va del piruvato al PEP, la que va de fruc 1,6
biP a fruc 6-P y la que va de gluc 6-P a glucosa.
Estos pasos corresponden a aquellos de la glucolisis que son catalizados por enzimas reguladoras. Las enzimas
involucradas en estos pasos en la gluconeogénesis difieren de aquellas que catalizan las reacciones inversas en
la glucólisis. Los pasos desde la glucosa a piruvato en glucolisis o desde piruvato a glucosa en la
gluconeogénesis depende de la cantidad relativa o de la cantidad de estas enzimas glucolíticas o
gluconeogénicas.
El piruvato es un sustrato clave para la gluconeogénesis. El acetil-CoA que se produce por la oxidación de los
ácidos grasos activa la piruvato carboxilasa, de esta manera el piruvato se convierte en oxalacetato. Así el
aumento de acetil-CoA actúa recíprocamente haciendo que disminuya la actividad de la piruvatodeshidrogenasa
para discontinuar con la glucólisis pero activa la piruvatocarboxilasa para promover a la gluconeogénesis.
La fosfoenolpiruvatocarboxiquinasa (PEPCK) se induce y es la enzima que produce fosfoenolpiruvato a partir

de oxalacetato. La PEPCK citosólica es una enzima inducible, es decir que la cantidad de la enzima aumenta
debido al aumento de la transcripción de su gen y en consecuencia la traducción de su ARNm. Un inductor muy
importante es el AMPc que se incrementa por las hormonas que activan a la adenilatociclasa como el glucagón y
la adrenalina. El AMPc activa PKA, y al ser una quinasa fosforila factores de transcripción, en especial los que
estimulan la transcripción del gen de la PEPCK. A su vez, vista la glucolisis, se analiza que cuando el glucagón
106
esta elevado PKA fosforila a la piruvato quinasa inactivándola entonces el fosfoenolpiruvato no se convierte en
piruvato.
Cuando tenemos el fosfoenolpiruvato se invierten los pasos de la glucólisis y se forma la fructosa 1,6biP.
En la conversión de fructosa 1,6biP en fructosa 6P actúa la fructosa 1,6biPasa liberando el P. Se previene un

ciclo fútil, porque las condiciones que favorecen a la gluconeogénesis la concentración de los compuestos que
activan a la fosfofructoquinasa 1 de la glucólisis están disminuidos. También la fructosa 2,6biP y AMP son
inhibidores alostéricos de la fructosa 1,6biPasa. Luego de isomerizar la fructosa 6P a glucosa 6P la fosfatasa
cataliza la reacción de la glucosa 6P a glucosa.
La enzima glucoquinasa de la glucolisis es la de reacción inversa que es relativamente inactiva en la

gluconeogénesis ya que su Km es alto y la [gluc] es muy baja en sangre en el ayuno.
Transporte de equivalentes de óxido-reducción entre mitocondria y citosol
En el citosol tiene que permanecer una concentración de NAD+ para contar con un aceptor de electrones para la
reacción número 6 de la glucólisis en la cual está involucrada la gliceraldehido 3-P deshidrogenasa y que había
2 vías → una aeróbica, donde se emplea el sistema de lanzadera para llevar a cabo este proceso, y otra
anaeróbica donde la lactato deshidrogenasa es la que hace que el piruvato se reduzca a lactato obteniendo así el
NAD+.
- La [NADH] en citosol es baja en citosol y [NAD+] es alta.

- La [NADH] en mitocondrias es alta y la MMI es impermeable al NADH.
Como se reoxida el NADH generado en la glucolisis a NAD+? De donde proviene el NADH necesario para la
gluconeogénesis? Porque este NADH tiene que entrar a la mitocondria y después oxidarse por fosforilación
oxidativa?
Estos procesos ocurren a partir de 2 mecanismos de lanzaderas:
➢ Lanzadera malato/aspartato
➢ Lanzadera glicerol-3P/DHAP (dihidroxiacetona P)
107
Lanzadera malato-aspartato
Es la lanzadera de NADH más activa y funciona en las mitocondrias de hígado, riñón y corazón.
Los equivalentes de reducción de NADH citosólicos se transfieren en primer lugar al oxalacetato citosólico
obteniéndose malato por acción de la malato deshidrogenasa citosólica.
El malato pasa a través de la MMI mediante el transportador del malato-α-cetoglutarato. Dentro de la matriz, los
equivalentes de reducción pasan por acción de la malato deshidrogenasa mitocondrial al NAD+, formándose
NADH. Así este NADH puede pasar e- de forma directa a la cadena respiratoria. En el paso de este par de e- al
oxigeno se generan unas 2,5 moléculas de ATP. El oxalacetato formado a partir del malato no puede pasar
directamente al citosol: primero se transamina a aspartato, que puede salir a través del transportador glutamato-
aspartato; en el citosol, por una reacción de transesterificación, se regenera el oxalacetato y se completa el ciclo.
Lanzadera Glicerol 3P - DHAP
Esta lanzadera cede los equivalentes de reducción desde el NADH a la ubiquinona y de la ubiquinona al
complejo 3 de la cadena respiratoria.
En el citosol la DHAP acepta 2 equivalentes de reducción del NADH en una reacción catalizada por la glicerol
3P deshidrogenasa citosólica. Una isoenzima de esta está ubicada en la parte exterior de la MMI, la cual va a
transferir dos equivalentes de reducción desde el glicerol 3P del espacio intermembrana a la ubiquinona, con lo
que proporciona energía para la síntesis de 1,5 moléculas de ATP por par de electrones.
108
Relaciones intertisulares en la síntesis hepática de glucosa
Estas relaciones son importantes ya que utilizan mecanismos capaces de proveer continuamente compuestos que
otorgan energía a un musculo en una situación de necesidad energética. Tambien se aprovecha la vehiculizacion
de grupos amonio (NH4+) provenientes de la degradación de proteínas musculares.
Ciclo glucosa-alanina
Los músculos esqueléticos en contracción vigorosa operan de manera anaeróbica, produciendo piruvato y
lactato a partir de la glucólisis y además se genera amonio cuando se produce la degradación de las proteínas,
como recién se mencionaba. En el músculo y otros tejidos que degradan aminoácidos como combustibles los
grupos amino pasan al glutamato por reacciones de transaminación.
El glutamato puede transferir el grupo amino al piruvato que está disponible porque es producto de glucólisis
por la acción de la alanina aminotransferasa, que es una reacción de transaminación (que se verá más adelante
en metabolismo de a.a) formándose alanina. La alanina formada pasa a la sangre y es transportada al hígado, en
el citosol de los hepatocitos la alanina aminotransferasa transfiere el grupo amino de la alanina a la α-
cetoglutarato formándose piruvato y glutamato. El glutamato puede entrar a las mitocondrias donde va a liberar
amonio que se va a transformar en urea. El piruvato formado puede hacer gluconeogénesis, formar glucosa e ir
esta glucosa a músculo, quedando disponible en este tejido para hacer glucólisis necesaria para la obtención de
ATP en una situación de requerimiento de energía. En el hígado el piruvato se utiliza para sintetizar glucosa por
gluconeogénesis la cual es devuelta a la sangre.
{Resumen}
1) En músculo: transaminación de piruvato para producir alanina, que viaja al hígado por el torrente sanguíneo.
2) En hígado: transaminación de alanina a piruvato que pasa a gluconeogénesis.
3) La glucosa producida se libera al torrente sanguíneo.
Este proceso ayuda a mantener el balance de nitrógeno (se transporta NH4+ al hígado).
Ciclo de Cori
Como ya se dijo, los músculos esqueléticos en contracción vigorosa operan de manera anaeróbica produciendo
piruvato y lactato a partir de la glucolisis. El lactato liberado de las c que realizan la glucolisis anaeróbica es
captado por otros tejidos sobre todo hígado, corazón y musculo esquelético, y oxidado de nuevo a piruvato. En
el hígado el piruvato se utiliza para sintetizar glucosa por gluconeogénesis, la cual es devuelta a la sangre. Así,
la recirculación de lactato y glucosa e/ tejido periféricos e hígado se denomina ciclo de Cori.
109
Metabolismo del glucógeno
Transformación de la glucosa 6 fosfato en glucógeno para el almacenamiento de la glucosa. Es una vía

metabólica del hígado y del músculo esquelético.
Estructura del glucógeno
Es un polisacárido de la glucosa que tiene uniones α (1→4) y ramificaciones α (1→6). Se encuentra en forma de
gránulos intracelulares, que también tienen enzimas junto a sus proteínas reguladoras para la síntesis y
degradación del mismo. Tiene un extremo reductor y muchos extremos no reductores. La síntesis y degradación
se va a dar siempre a partir de los extremos no reductores.
Sirve tener extremos no reductores porque de esa forma la síntesis y degradación se da a partir de dichos
extremos, multiplicando los sitios de ataque enzimático.
Almacenamiento de glucógeno
Almacenamos glucógeno para que nos sirva en una situación de necesidad como fuente de glucosa.
Las grasas que están conformadas por TAG tienen una movilización más lenta que el glucógeno. Además, no se
pueden usar como fuente de energía en ausencia de O2 (solo metabolismo aeróbico) y no son sustratos
gluconeogénicos para mantener la glucemia → las grasas se catalizan desde acetil-CoA y desde el no podemos
obtener glucosa.
La glucosa es osmóticamente activa, acumularía agua provocando la lisis celular, costaría energía bombearla al
interior celular contra gradiente. El glucógeno no crea problemas osmóticos (compacta) y es una fuente de
movilización rápida de glucosa.
110
Glucogenogénesis: síntesis de glucógeno
Se sintetiza a partir de glucosa 6P, proviene de la fosforilación de la glucosa por hexoquinasas utilizando ATP y
mediante la enzima fosfoglucomutasa pasa el fosfato del C6 al C1 y se forma glucosa 1P.
A partir de glucosa 1P vamos a obtener glucógeno y Pi. Esta reacción es termodinámicamente desfavorable
(endergónica). Por ello se debe activar la glucosa con un enlace de alta energía cuyo ΔG de hidrólisis sea muy
negativo. Esa glucosa activada va a ser UDP-glucosa: la glucosa 1P reacciona con UTP y se forma UDP-glucosa
y se libera pirofosfato (PPi). Este pirofosfato, en una reacción muy exergónica, se hidroliza a dos Pi por la
pirofosfatasa. Entonces, al formarse la UDP-glucosa a partir de la UDP-glucosa pirofosforilasa (reacción es
muy exergónica) se desplaza la formación de la UDP-glucosa. La UDP-glucosa se une a un glucógeno cebador /
n (aquel que tiene un OH 4 libre) y mediante la glucógeno sintasa se forma el glucógeno con una unidad más de
glucosa. El UDP que queda libre vuelve a regenerarse a UTP mediante la hidrólisis de ATP por una enzima que
es la nucleosidodifosfoquinasa.
Entonces, tenemos 5 reacciones acopladas:
1. Isomerización de glucosa 6P.
2. Formación de UDP-glucosa mediante la reacción de glucosa 1P y UTP.
3. Hidrólisis del pirofosfato.
4. Síntesis glucógeno por la glucógeno sintetasa.
5. Re-síntesis de UTP a partir de UDP + ATP.
Suma global = Glucosa 6P + ATP + Glucógeno con (n)glucosas + H2O ――> Glucógeno (n+1) glucosas + ADP + 2pi
111
Reacción de la glucógeno sintasa (reacción 4)
La enzima glucógeno sintasa reacciona con el glucógeno cebador (aquel que tiene un OH 4 libre) y se forman
enlaces α (1→4) sucesivos en dicho extremo no reductor.
Mediante esta enzima se forma un glucógeno con una unidad más de glucosa. El producto de su accionar son
cadenas lineales con monómeros de glucosa unidas por enlaces α (1→4) y SOLO forma esos enlaces en un
extremo no reductor que, como ya se dijo, correspondería al glucógeno cebador.
Resumen: UDP glucosa + glucógeno cebador (porción de glucosa con un OH 4 libre) → glucógeno sintasa →
cadenas lineales de glucosa.
Enzima ramificante
Transfiere una cadena de aproximadamente 7 residuos de glucosa desde el extremo no reductor de la cadena y
forma un enlace α (1→6), dando lugar a un punto de ramificación.
Por cada ramificación tenemos otro extremo no reductor expuesto, dándole más “puntos de ataque” a la
glucógeno sintasa y por ende aumentando la velocidad de la síntesis de glucógeno.
Glucógeno sintasa: No puede unir residuos de glucosa libre porque tiene Km bajo (más afinidad) para
moléculas grandes de glucógeno (macromoléculas), por eso su actividad es añadir residuos de glucosa a una
cadena en crecimiento. Tiene Km alto (menos afinidad) para la glucosa libre u oligosacáridos.
Glucogenina: Proteína grande que se autoglicosila utilizando unidades de UDP-glucosa y así forma una
proteína que tiene adosado un oligosacárido de glucosa con uniones α (1→4). A este complejo glucoproteico si
pueden seguir uniendo las unidades de UDP glucosa, la glucógeno sintasa y luego actuara la enzima ramificante.
El resultado de esto es un primer oligosacárido unido a la glucogenina, luego comienza a actuar la glucógeno
sintasa y después la enzima ramificante. Tenemos un primer nivel de ramificación, segundo, tercero... Vamos a
tener un último nivel de ramificación donde va a seguir actuando las enzimas que metabolizan el glucógeno,
sintetizándolo o degradándolo.
112
Glucogenólisis: degradación del glucógeno
Partimos de una molécula de glucógeno con n unidades de glucosa que se degrada a glucosa 1P por la
glucógeno-fosforilasa c/ añadido de Pi, quien luego por la fosfoglucomutasa se isomeriza a glucosa-6P.
La glucógeno fosforilasa incorpora una molécula de Pi a la molécula de glucógeno para dar la glucosa 1P y una
molécula de glucógeno con un residuo menos de glucosa (n-1) → fosforólisis. (incorporación de Pi). Solamente
hidroliza las uniones α (1→4) desde un extremo no reductor.
Enzimas desramificantes
Cuando encontramos un punto de ramificación comienza a actuar la enzima desramificante. Es una enzima
bifuncional con actividades transferasa y α 1-6 glucosidasa.
La actividad transferasa transfiere residuos de glucosa de una unión α (1→4) a otro extremo no reductor,
creando una cadena más larga donde puede seguir actuando la glucógeno fosforilasa. Queda una glucosa sola
unida a un OH 6 α (1→6).
La actividad α 1-6 glucosidasa hidroliza la glucosa libre (incorpora 1 molécula de H2O) y se pierde el punto de
ramificación. La acción combinada de la glucógeno fosforilasa y la enzima desramificante lleva a la fosforólisis
e hidrólisis completa de la molécula de glucógeno.
113
Funciones del metabolismo del glucógeno
El metabolismo del glucógeno cumple distintas funciones dependiendo en qué órganos este:
- En el hígado se utilizan las reservas de glucógeno para el mantenimiento de la glucemia. La glucosa 6-

P va a ser desfosforilada y va a ir a glucosa sanguínea.
- En el músculo el glucógeno se utiliza como combustible para ser utilizado por la misma fibra muscular,
no va a ser liberado a sangre va directo a glucólisis → síntesis de ATP = energía.
Hígado:
Glucosa 6 Pasa → glucosa → liberación a sangre.
Musculo esquelético:
Glucógeno → glucosa 6-P → glucolisis
Glucosa 6-P → glucolisis y otras vías
114
Para sintetizar glucosa 6-P partimos de la glucosa, si estamos en el hígado actúan glucoquinasas y en el músculo
hexoquinasas.
Solamente en el hígado vamos a tener a la glucosa 6-P de fosforilada a glucosa por la glucosa 6-Pasa, para luego
ser exportada a sangre.
115
Enfermedades de almacenamiento de glucógeno
Tipo I: Enfermedad de von Gieke. Deficiencia de glucosa 6-fosfatasa en el hígado. No se puede llevar a cabo la
desfosforilación de la glucosa. Tenemos un incremento de la glucosa 6P intracelular. Incremento del
almacenamiento del glucógeno. Produciendo hepatomegalia (aumento del hígado) e hipoglucemia.
Tipo III: Enfermedad de Cori. Deficiencia de actividad 1-6 glucosidasa (enzima desramificante). Glucógeno de
cadenas muy cortas, no hay degradación completa.
Tipo V: Enfermedad de Mc Ardle. Deficiencia de glucógeno fosforilasa (muscular). Calambres ante actividad
intensa. No usa reservas de glucógeno.
Regulación del metabolismo del glucógeno
Hay una regulación coordinada entre vías de degradación y síntesis: si está activada la vía de síntesis de
glucógeno, se tiene inhibida la glucogenólisis.
Las enzimas reguladas son la glucógeno fosforilasa y la glucógeno sintasa. Sufren regulación alostérica y por
modificación covalente, y hay un fino de control hormonal.
Regulación de la glucógeno fosforilasa
Modificación covalente
En el hígado y músculo tenemos receptores de glucagón y receptores β adrenérgicos, asociados a proteína Gs

que activa a la adenilatociclasa para la formación de AMPc y la activación consiguiente de PKA. La PKA
fosforila a la glucógeno fosforilasa quinasa, activándola. Ya activa, fosforila y activa a la glucógeno fosforilasa,
encargándose de la degradación de glucógeno.
Si tengo una hormona hiperglucemiante como el glucagón o adrenalina vamos a promover esta degradación, que
se libere glucosa 6-P y que esta: en el hígado pueda aumentar la glucemia, y en el músculo aumentar el
metabolismo de glúcidos dentro de la fibra muscular.
La glucógeno fosforilasa quinasa no solamente es activada por fosforilación por PKA, si no que también el
Ca++ la activa: cuando todavía no está la señalización completa hormonal para que se eleve la glucemia en el
caso del hígado o que se active el metabolismo en el caso del musculo, el Ca ++ es liberado del retículo
sarcoplasmático por actividad intensa y puede activar a la glucógeno fosforilasa quinasa, y esta a su vez activar
a la glucógeno fosforilasa. Antes de que le llegue el mensaje de la hormona un mensaje neuromuscular le puede
activar la fosforilación de la glucógeno fosforilasa y la degradación de glucógeno.
116
Modulación alostérica
En el caso de la glucógeno fosforilasa vamos a tener los estados T (menos activo) y R (más activo) típicos de las
enzimas. En su estado R va a estar fosforilada y va a cumplir con su función de degradación de glucógeno, y en
el estado T mucho menos o nada.
Si tenemos una enzima es su estado T, la fosforilasa quinasa la fosforila y dicha fosforilación tiende a que pase a
su estado R.
La fosforilasa A (fosforilasa fosforilada) cuando está en su estado R tiene un estado mas activo. La presencia de
glucosa 6-fosfato quiere decir que tengo suficiente glucosa en el tejido y no se necesita degradar más glucógeno,
por ende puede devolver a la glucosa fosforilada A a su estado T. Acá tenemos una modificación alostérica.
En el caso de la fosforilasa T desfosforilada (en su estado basal) en presencia de AMP en el musculo puede
llevarla a su estado R.
Resumen: A la fosforilasa quinasa la puede activar PKA o Ca++. Las protein fosfatasas están activadas por
disociación de una subunidad inhibitoria, señalización llevada a cabo por insulina
En el hígado la glucosa libre va a inhibir a la glucógeno fosforilasa y en el musculo tenemos que tanto el ATP
como la glucosa 6-P inhiben a la glucógeno fosforilasa.
Regulación de la glucógeno sintasa
Posee modulación alostérica y modificación covalente. Tiene dos formas: la forma B (inactiva y fosforilada) y la
forma A (activa y desfosforilada).
La GSK-3 (glucógeno sintasa quinasa 3) va a inactivar a la glucógeno sintasa fosforilándola, ya que es una
quinasa.
GSK-3 fosforilada por PKB → inactiva
GSK-3 desfosforilada → activa
La insulina inhibe GSK-3: inhibe la inhibición de la glucógeno sintasa, y por ende la devuelve a su estado
activo. Las proteinfosfatasas activan GSK-3 (en este caso, PP1), y estas son inhibidas por glucagón y adrenalina,
activadas por insulina y activadas alostéricamente por glucosa 6P y glucosa.
117
Regulación coordinada de la actividad de la glucógeno fosforilasa y glucógeno sintasa
Cuando están activas proteinquinasas vamos a tener tanto la glucógeno sintasa como la glucógeno fosforilasa
fosforiladas. Al estar fosforiladas la glucógeno sintasa va a estar menos activa y la glucógeno fosforilasa más
activa.
Cuando tenemos activas a las proteinfosfatasas vamos a tener todo desfosforilado, tanto la glucógeno fosforilasa
como la glucógeno sintasa: la glucógeno sintasa va a estar activa y la glucógeno fosforilasa menos activa.
Activación de la síntesis de glucógeno
Señalización vía insulina: el IRS activa una fosfatidilinositol 3-quinasa que fosforila el PIP2 a PIP3 y este activa
a la PKB. La PKB fosforila a la GSK-3 (glucógeno sintasa quinasa 3) inactivándola, entonces no puede inactivar
a la glucógeno sintasa que queda activa y se sintetiza glucógeno. Por proteinfosfatas se activa la GSK-3 como se
dijo anteriormente.
118
La glucogeno sintasa, cuando esta fosforilada tiende a estar en el estado T. Entonces, mediante las quinasas
mencionadas anteriormente, va a fosforilarse e inactivarse; por protein fosfatasas se activa. La glucogeno sintasa
fosforilada puede estar en su estado R en presencia de glucosa (en el higado) y de glucosa 6-P (en higado y
musculo esqueletico).
Podemos ver tambien una regulacion coordinada covalente: la glucosa 6-P inhibe alostericamente a la
glucogeno fosforilasa, y en este caso decimos que activa alostericamnete a la glucogeno sintasa.
INTEGRACIÓN
Glucogenólisis: partimos desde el glucógeno por medio de la glucógeno fosforilasa vamos a tener mucha
glucosa 1-P. Por medio de la glucógeno fosforilasa y la enzima desramificante obtenemos un poquito de glucosa
libre, la que estaba unida por uniones α (1→6). La glucosa 1-P luego por la fosfoglucomutasa pasa a glucosa 6-
P y ahí dependiendo en que órgano estemos la siguiente reacción: en el hígado va a ir hacia glucosa libre y en el
musculo puede ir hacia glucolisis u otras vías (como la PP).
Glucogenogénesis: partimos de la glucosa que para a glucosa 6-P, luego a glucosa 1-P, se activa a UDP-glucosa
y por la glucógeno sintasa se forman las uniones α (1→4) y por la enzima ramificante uniones α (1→6) para
formar la molécula de glucógeno. Una de las vías de regulación de este proceso es por AMPc: el mismo va a
activar a la glucógeno fosforilasa favoreciendo la glucogenólisis, va a inhibir a la glucógeno sintasa y, a su vez,
esta [AMPc] celular va a estar incrementada por glucagón y adrenalina, y va a estar disminuida por la insulina.
119
VÍA DE LAS PENTOSAS FOSFATO
120
Uno de los destinos de la glucosa 6-P es su oxidación vía pentosas fosfato. Esta vía es citosólica y se encuentra
en todos los tejidos. Es especialmente activa en órganos esteroidogénicos como la corteza adrenal o las gónadas,
la glándula mamaria, hígado, tejido adiposo y eritrocitos.
Sustrato: glucosa 6P
Productos: NADPH (da el poder reductor citosólico para procesos de biosíntesis reductoras) y ribosa 5P
(sustrato para la biosíntesis de nucleótidos, que van a formar parte de ácidos nucleicos, ATP, CoA, NAD, FAD)
En tejido adiposo, hígado, glándula mamaria, corteza adrenal, se encuentra presente esta vía porque son tejidos
con alta actividad biosintética, especialmente de lípidos, AG y esteroides. En eritrocitos esta vía se usa casi
exclusivamente para la producción de NADPH utilizado en la reducción del glutatión.
Fases
Oxidativa → irreversible y reguladora.
No oxidativa → reversible e interconvierte monosacáridos.
Fase oxidativa
Produce NADPH y ribulosa 5P.
Empieza con la oxidación de la glucosa en su carbono 1 mediante un intermediario y luego se oxida a ácido
carboxílico el ácido 6 fosfogluconato. Al oxidarse el carbono 1 de la glucosa 6P se reduce una molécula de
NADPH. El 6-fosfogluconato vuelve a oxidarse mediante una descarboxilación oxidativa a ribulosa 5 fosfato y
CO2. En este proceso oxidativo se obtiene una segunda molécula de NADPH.
La ribulosa 5P va a ser modificada por 2 enzimas: la fosfopentosa isomerasa, que la isomeriza a ribosa 5P y
pasamos de tener un grupo ceto a tener un grupo aldehído; y la fosfopentosa epimerasa, que epimerisa a xilulosa
5P (epímeros: aquellos monosacáridos que difieren solo en la conformación de uno de sus carbonos
asimétricos).
121
Las necesidades de la célula van a determinar cual enzima ataca: La ribosa 5P va a ser utilizada para la síntesis
de nucleótidos y como sustrato de la fase no oxidativa. La xilulosa 5P va a ser utilizada en la fase no oxidativa
para la interconversión de monosacáridos. Además, es un potente regulador del metabolismo de glúcidos.
Fase no oxidativa
Tenemos dos moléculas de ribulosa 5P, una pasa a xilulosa 5P y la otra a ribosa 5P.
Las ribosas son modificadas por 2 enzimas: la transcetolasa, que transfiere unidades de 2C, y la transaldolasa
que transfiere unidades de 3C.
Comenzando con dos unidades de 5C, las ribosas, por la transcetolasa vamos a obtener unidades de 3C y de 7C,
ya que se transfieren dos unidades de C de un compuesto al otro. Luego, por una transaldolasa se transfieren tres
unidades de C desde el C7 al C3 da una unidad de C6 y una de C4. Por último la unidad de 4C, la eritrosa 4P,
reacciona con otra xilulosa 5P y por la transcetolasa me va a dar una fructosa 6P y un gliceraldehído 3P.
La trancetolasa actúa 2 veces y la transaldolasa 1 sola.
Resultado final: 3 pentosas 5P nos dan 2 hexosas 6P (fructosas) y una triosa 3P (el gliceraldehído).
122
Regulación de la vía de las pentosas fosfato
Se va a dar a nivel de la reacción catalizada por la glucosa 6P deshidrogenasa, es decir en la fase oxidativa. Esta
regulada por la disponibilidad de NADP+, el sustrato. Si hay alta concentración de NADPH, se inhibe la
enzima; si se consume mucho NADPH porque hay activos procesos biosintéticos, va a aumentar la [NADP+] y
va a aumentar la velocidad de la glucosa 6P deshidrogenasa, por ende aumenta la velocidad de la vía.
Integración de la vía de las pentosas fosfato con otras vías
Esta vía está integrada con otras, sobre todo con la glucólisis y la gluconeogénesis. La fructosa 6P y el GA3P
son productos de la vía glucolítica, y hay una estrecha relación entre la glucolisis y la fase no oxidativa. Como
esta fase de la vía es reversible de acuerdo a las necesidades celulares (lo que consumo): por ejemplo, si
sintetizo nucleótidos y estoy consumiendo ribosa 5-fosfato, toda la vida va a estar desplazada a la formación de
ribosa 5-fosfato. Dependiendo de las necesidades celulares van a ser los productos de la vía resultantes.
Requerimiento de ribosa 5P (modalidad 1)
Supongamos que tenemos células en división activa en tejidos altamente proliferativos, entonces se necesita
mucha síntesis de ácidos nucleicos y para eso precisamos ribosa 5P. Va a estar activa la rama no oxidativa de la
vía, la que interconvierte azucares, porque a partir de glucosa 6-P obtengo fructosa 6P, y la fructosa 6P y el
GAP3 van a terminar sintetizando ribosa 5P. Al no estar la rama oxidativa no voy a tener descarboxilaciones y
no se pierden C.
123
Requerimiento de NADPH y ribosa 5P (modalidad 2)
Puede ser en una célula que se esté dividiendo y creciendo (síntesis de lípidos de membrana y proteínas). Vamos
a tener activa la rama oxidativa y la acción de la isomerasa. Entonces tenemos que glucosa 6P + 2NADP+ +
H2O me va a dar ribosa 5P + 2NADPH + 2H + CO2.
Requerimiento de NADPH (modalidad 3)
En células con síntesis activa sobre todo de lípidos, que tienen amplio requerimiento de NADPH. Vamos a tener
muy activa la rama oxidativa. La fase no oxidativa va a ser utilizada para regenerar la glucosa 6P nuevamente y
que pueda seguir siendo oxidada. Oxidación completa de la glucosa a CO2 y alto rendimiento de NADPH.
124
Requerimiento de NADPH y ATP (modalidad 4)
Para procesos biosintéticos. Por la rama oxidativa, la glucosa 6P produce NADPH y ribulosa 5P, y van a la fase
no oxidativa: llevan los monosacáridos hacia el GA3P para que por glucólisis se sintetice piruvato y ATP en el
citosol.
El piruvato después puede ser oxidado aeróbicamente, luego a la mitocondria y por piruvato deshidrogenasa el
acetil-CoA entra al Ciclo de Krebs → + ATP + energía.
125
Utilización de NADPH
- Para la reducción del glutatión.

- Como fuente de poder reductor para la biosíntesis.
- En procesos de detoxificación para poder oxidar y hacer hidrofílicas a ciertas sustancias nocivas para el
organismo.
- Como sustrato para un estallido respiratorio en fagocitosis, lo utilizan los macrófagos.
- Para la síntesis de óxido nítrico
Importancia del glutatión
Cuando el oxígeno no es completamente reducido, se producen sustancias reactivas del oxígeno que son
altamente reactivas. Son sustancias que oxidan y dañan tanto a las proteínas como fosfolípidos de membrana y
dan lugar a la lisis celular y se llaman ROS. Tenemos mecanismos de defensa contra estos ROS y son
eliminados por acción de peroxidasas que requieren glutatión reducido.
El glutatión reducido (GSH) es regenerado por el NADPH proveniente de la vía de las PP por acción de la
glucosa 6-P deshidrogenasa. Una deficiencia en esta enzima genera sensibilidad al daño oxidativo (anemia
hemolítica) y esto es muy importante a nivel de los eritrocitos porque no tienen recambio de proteínas y la ppO2
(presión parcial de O2) es alta, por ende el ambiente es altamente oxidativo.
El glutatión tiene un estado oxidado (GSSG) y un estado reducido (GSH). Para que sea reducido necesito que la
glutatión-reductasa utilice el NADPH como poder reductor y la glutatión- peroxidasa reduzca al peróxido de
hidrógeno a H2O.
El NADPH impide el estrés oxidativo. En el caso que haya una respiración mitocondrial, radiaciones ionizantes
u otros agentes estresores se produce primero un radical super óxido y al incorporar protones se produce el
peróxido de hidrógeno, que por la glutatión peroxidasa es reducido a H2O. Si no se tuviera la defensa
antioxidante de la glutatión peroxidasa el peróxido de hidrogeno va a seguir generando otros radicales libres que
son todavía más reactivos que el peróxido de hidrogeno, llegando a un daño oxidativo a lípidos, proteínas y
ADN. Un ejemplo de estresor es la divicina.
126
Deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa
En los eritrocitos, que consumen sólo glucosa por vía glucolítica, la glucosa 6-fosfato puede entrar glucólisis o
vía de las PP. Si hay una deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa va a haber una deficiencia en la
producción de NADPH; eso lleva a una deficiencia en la reducción de glutatión y una acción deficiente también
de la glutatión peroxidasa. Se acumulan las sustancias reactivas del oxígeno y estas reaccionas con el Fe de la
hemoglobina produciendo la β-hemoglobina y esto precipitan en cuerpos de Heinz.
Por otro lado, las sustancias reactivas del oxígeno (ROS) van a atacar a la membrana del eritrocito y otras
proteínas produciendo la hemólisis.
El estrés oxidante por infección, fármacos y habas verdes producen hemólisis.
Regulación coordinada del metabolismo de glúcidos
Regulación del metabolismo por el estado energético de la célula
Una de las estrategias de regulación del metabolismo de glúcidos es por el estado energético celular. Al estado
energético de las células se la llama carga energética (CE) y está definida como la relación que existe ente los
127
nucleótidos de adenida ATP, ADP y AMP. Esta relación vamos a tener en el numerador los nucleótidos que
tengan enlaces de alta energía. El ATP tiene dos enlaces de alta energía y el ADP uno. Entonces se suma las
concentraciones de ATP más 1/2 ADP sobre el total de los nucleótidos de adenina.
Esta carga energética va a ser entre 1 cuando el 100% de los nucleótidos de adenina estén como ATP y 0 cuando
el 100% de los nucleótidos de adenina estén como AMP. Ninguna de estas dos situaciones ocurre
fisiológicamente entonces CE está comprendida entre 0,80 y 0,95.
Cuando la carga energética aumenta, es decir es cercana a 1, se inhiben las vías generadoras de ATP y se activan
las vías utilizadoras de ATP. Esto es cierto hasta cierto punto, ya que hay excepciones.
Generadoras: glucólisis y glucogenólisis. Utilizadoras (anabólicas): gluconeogénesis y glucogenogénesis.
Estas regulaciones por CE son de tipo alostérico. ATP y ADP actúan como moduladores alostéricos inhibiendo
o activando vías catabólicas y anabólicas.
Hay excepciones a esta regla, la AMP quinasa (AMPK), regulada por la CE y además modula covalentemente la
función de ciertas enzimas por fosforilación. No solamente está regulada por CE, también por glucemia o
necesidades especiales de órganos en situaciones particulares.
128
Regulación del metabolismo por glucemia o necesidades especiales
El metabolismo de glúcidos no solamente está regulado por CE: también por glucemia o necesidades especiales
de órganos en situaciones particulares. La disponibilidad de combustible y la necesidad de los tejidos siempre
tiene que estar en un balance.
Este balance lo van a orquestar:
• el nivel de nutrientes en sangre

• el nivel hormonal
• el impulso nervioso
Si tenemos una ingesta de alimentos voy a aumentar los combustibles de la sangre (carbohidratos, grasas y
proteínas), se libera insulina y van a ser utilizados por la célula o almacenados. Si tengo una baja de combustible
voy a tener glucagón u otras hormonas de estrés que va a favorecer que aumenten los combustibles en sangre
sacándolos de su lugar de almacenaje, favoreciendo que haya y pueda seguir la función de celular.
La glucosa en sangre debe mantenerse en un rango de concentraciones estable y relativamente estrecho. Si la

concentración de glucosa en un ayuno fisiológico es mayor a 110 mg/dl o menor a 60 mg/dl estamos en
condiciones de hiperglucemia o de hipoglucemia. El organismo va a tratar de no llegar a esos valores.
Si tengo un aumento en la glucemia se voy a activar procesos hipoglucemiantes: captación de la glucosa,

almacenamiento de la glucosa y consumo de la glucosa, mediados por la insulina. Los órganos intervinientes
son el hígado, el músculo y el tejido adiposo.
Si tengo un descenso de la glucemia se van a activar los procesos hiperglucemiantes: obtención de glucosa a
partir de glucosa almacenada y gluconeogénesis, mediados por glucagón. Los órganos intervinientes son el
hígado y tejido adiposo (provee energía).
Si tengo una situación con necesidad especial, como una situación de estrés, voy a necesitar la provisión de
glucosa y energía independientemente del estado nutricional del organismo, mediado por la adrenalina. Los
órganos intervinientes son el hígado, el músculo, el tejido adiposo y el sistema cardiovascular.
El hígado siempre va a estar presente porque es, por excelencia, el órgano regulador de la glucemia.
Aumento de la captación de glucosa
En el músculo esquelético y el tejido adiposo, los GLUT 4 son sensibles a insulina. El aumento de la relación
insulina/glucagón sanguínea favorece la exposición de estos transportadores de glucosa desde el interior de la
célula a la membrana plasmática. Esto esta mediado por PI3K/PKB y se produce una entrada masiva de glucosa
hacia la célula.
129
En el hígado, el aumento en la captación de glucosa es distinta. Los transportadores GLUT 2 no son sensibles a
insulina, tienen baja afinidad a la glucosa en condiciones normales (glucemia normal = 5mM). Sus
transportadores tienen un Km elevado para la glucosa. Si estamos en una situación de hiperglucemia ahí la
captación de glucosa es mayor dentro del hepatocito (tiene que haber un aumento muy grande de glucosa para
que ingrese).
Aumento del almacenamiento de glucosa
Tanto en el músculo como en el hígado va a activarse el almacenamiento de glucosa → síntesis de glucógeno.

Cuando tenemos señalización por insulina, la glucógeno sintasa va a estar desfosforilada porque está inhibida la
GSK-3 (glucógeno sintasa quinasa 3) y están activadas las proteín-fosfatasas. Al estar desfosforilada y activada
la glucógeno sintasa voy a activar la síntesis de glucógeno.
Aumento del consumo de glucosa
Se activa la oxidación de la glucosa: las vías de glucólisis y vía de las pentosas fosfato.
En músculo esquelético y tejido adiposo aumenta la glucólisis porque aumento la captación de glucosa, y en el
tejido adiposo va a estar activada la vía de las pentosas fosfato
En eritrocitos o cerebro tienen consumo basal de glucosa porque sus transportadores de glucosa GLUT 1 y 3
ingresan glucosa a velocidad constante independientemente de la glucemia. GLUT 1 y 3 tienen un Km bajo para
la glucosa (a 5mM, es decir en glucemia normal, están actuando al 100%).
130
En el hígado y el tejido adiposo van a contramano de la regulación de la glucólisis por carga energética. La
glucólisis se realiza para obtener acetil-CoA, que se utilizara como sustrato en la síntesis de AG y TAG. Dicha
síntesis va a necesitar NADPH, por ende aumenta la vía de las pentosas fosfato para dar este producto.
La glucólisis se activa cuando la entrada de glucosa en el hepatocito activa la glucoquinasa, ya que se exporta
desde el núcleo hasta el citosol y ahí se activa.
Otro punto de regulación de la insulina es a nivel de fosfofructoquinasa 1 (PFK-1). Si hay una señalización por
insulina la concentración de AMPc es baja y las fosfatasas están activadas. Entonces, la enzima bifuncional va a
estar desfosforilada y va a tener la actividad fosfofructoquinasa 2 activa. Por lo cual se aumenta la concentración
fruc 2,6 biP, aumenta la activad de PFK1 y aumenta la vía glucolítica.
131
El tercer punto de regulación de la glucólisis también está regulado por la insulina. En el caso de la piruvato
quinasa la señalización por insulina promueve su desfosforilación quedando mucho más activa y promoviendo
la glucólisis.
La piruvato quinasa no solo está regulada por fruc 1,6 biP, tambien está regulada por CE, pero bypaseamos la
regulación por CE por mas que tengamos mucho ATP (mucha glucosa, glucolisis, cadena transportadora, etc) ya
que igualmente va a seguir funcionando como producción de acetil-CoA, y para eso necesitamos que la piruvato
deshidrogenasa este activada (tanto en hígado como en tejido adiposo).
La insulina desfosforila y activa a la piruvato deshidrogenasa favoreciendo la formación del acetil-CoA.
Aumento de la glucogenólisis
En el caso contrario, cuando tenemos un descenso en la relación insulina/glucagón ya que hay un aumento de la
secreción de glucagón, vamos a activar a la glucogenólisis.
Hígado: Va a ser activada por glucagón o adrenalina.
132
Músculo: activada por adrenalina.
Mediante la vía de señalización del glucagón, se activa la PKA que activa a la glucógeno fosforilasa quinasa;
esta última fosforila y activa a la glucógeno fosforilasa, y el glucógeno se degrada a glucosa 1P que luego pasa a
glucosa 6P. En el músculo va a glucólisis y en el hígado va a sangre para mantener la glucemia.
La glucógeno fosforilasa quinasa no solo se activa por AMPc o PKA, también se activa por Ca++. En el caso
del músculo, el Ca++ es libera del retículo sarcoplasmático a citosol mediante estimulación neural, mientras que
la estimulación hormonal (H. estrés, adrenalina) va a estar dada por la activación de PKA por estimulación
hormonal vía AMPc. Independientemente del estado nutricional del músculo se va a activar la degradación de
glucógeno, ya que el Ca++ activa la glucógeno fosforilasa quinasa, luego se activa la glucógeno fosforilasa y se
produce la glucogenólisis.
En células hepáticas, el aumento de Ca++ citoplasmático no va a estar dado por estimulación neural sino por
estimulación hormonal de adrenalina y sus receptores α-adrenérgicos asociados a proteína Gq que va a
incrementar la [IP3] y [DAG] dentro de los hepatocitos. El IP3 abre los canales de calcio que activan a la
glucógeno fosforilasa quinasa y la degradación de glucógeno. El Ca++ y los DAG activan a PKC que van a
inhibir a la glucógeno sintasa con la cual se inhibe la síntesis de glucógeno. En hepatocitos y en células
musculares tambien existe la estimulación hormonal de glucagón y adrenalina por receptores β adrenérgicos que
aumenta la [AMPc].
133
En una situación de aumento de [AMPc] vamos a tener muchas proteínas fosforiladas: glucógeno fosforilasa,
fosforilasa quinasa y la glucógeno sintasa. Esto activa la degradación de glucógeno.
La PKA su vez fosforila a una proteína inhibidora de las protein fosfatasas, y esta proteína inhibidora fosforilada
secuestra e inactiva a las proteínas fosfatasas. En esta situación está activada la PKA y fosforiladas las enzimas:
favorecemos la degradación de glucógeno.
En otra situación cuando tenemos una señalización por insulina vamos a tener bajas [AMPc] y la proteína
inhibidora de las protein fosfatasas no van a estar fosforilada; la protein fosfatasa va a estar activada y se van a
desfosforilar tanto glucógeno fosforilasa quinasa como la glucógeno fosforilasa, y se van a desfosforilar también
la glucógeno sintasa, con lo cual está favorecida la síntesis de glucógeno.
Otra forma de obtener glucosa para aumentar la glucemia es por gluconeogénesis en el hígado. El principal
punto de regulación: glucosa 1,6 bifosfatasa.
Cuando tenemos regulación por glucagón hay un aumento [AMPc] y PKA activa, con lo cual esta enzima
bifuncional PFK2/F26BPasa va estar fosforilada y activada la actividad fosfatasa de dicha enzima. Disminuye la
[F26BP], disminuye la actividad de PFK1, se activa la fru1,6,bisPasa y se promueve la gluconeogénesis.
134
El tercer punto de regulación es la inhibición de la piruvato quinasa.
La piruvato quinasa cuando esta fosforilada está menos activa, y estas fosforilaciones se dan por señalización de
adrenalina y glucagón, que activan PKA y cuando hay un bajo nivel de glucosa en sangre se inhibe la piruvato
quinasa.
De la misma manera, el piruvato que obtengo para la gluconeogénesis por los sustratos gluconeogénicos
(alanina, lactato, glicerol, otros a.a, etc) voy tender a que el piruvato sea convertido en oxalacetato para que siga
la vía gluconeogénica y no se oxide a acetil-CoA para que entre en el Ciclo de Krebs u otros destinos
metabólicos.
135
Entonces vamos a tener inhibida la piruvato deshidrogenasa y activada la piruvato carboxilasa.
Es el mismo patrón que la piruvato quinasa, se activa PKA, la piruvato deshidrogenasa (E1) está fosforilada e
inactiva.
A su vez la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa (PEPCK) y la glucosa 6 fosfatasa están reguladas

transcripcionalmente por PKA.
La señalización por glucagón y adrenalina activan PKA y la subunidad catalítica activa de la PKA puede
ingresar al núcleo y ahí fosforila factores de transcripción que favorecen la transcripción de estos genes.
En la gluconeogénesis es un proceso caro y se necesita mucho ATP. Ese ATP sale del tejido adiposo (reservas
de TAG) por la señalización del glucagón y adrenalina porque se activa la lipólisis y aumenta la concentración
de ácidos grasos como fuente de ATP.
136
Para redondear: en el hígado, donde tenemos el proceso tanto de degradación de glucógeno como de síntesis del
mismo, glucolisis y gluconeogénesis, si tenemos una situación de glucosa en sangre elevada va a aumentar la
señalización por insulina por un lado y por otro lado vía GLUT 2 va a ingresar glucosa al interior del hepatocito.
Vía señalización por insulina se activan las protein fosfatasas y se inhibe la glucógeno sintasa quinasa 3 (GSK-
3). Con eso obtenemos una activación d la glucógeno sintasa (activación de la síntesis de glucógeno). Por otro
lado, vamos a tener una inhibición de la glucógeno fosforilasa (disminuye el proceso de degradación de
glucógeno). La misma señalización por insulina va a favorecer la síntesis de genes glucolíticos (como la
hexoquinasa, PFK-1, piruvato quinasa, etc) y su actividad. Disminuye la actividad F2,6BPasa al estar
desfosforilada, se activa la actividad PFK-2, aumenta la [F2,6BP] y se activa la glucolisis.
En el caso contrario, cunado hay una baja glucemia, aumenta la señalización por glucagón y por ende se activa
PKA y termina todo fosforilado. Va a estar fosforilada la fosforilasa quinasa, la glucógeno fosforilasa y activada
esta última se aumenta la degradación de glucógeno. Se inhibe la glucógeno sintasa ya que va a estar fosforilada
y disminuye la síntesis de glucógeno.
Por otro lado, esta enzima bifuncional PFK2/F26BPasa va a estar fosforilada y activada su actividad F26BPasa,
por esto disminuye la [F26BP], disminuye la actividad de la PFK-1 y baja la tasa de glucolisis. La piruvato
quinasa va a estar fosforilada e inhibida y disminuye la glucolisis.
137
El hígado puede recibir señales tanto de glucagón como de adrenalina. En el caso del hígado ambas
señalizaciones llevan al mismo resultado.
En el músculo por adrenalina vamos a tener un aumento de la glucogenólisis y un aumento de la glucólisis. La

glucosa 6-P va a seguir hacia piruvato, en cambio en el hígado el piruvato va a ser utilizado en la síntesis de
glucosa para aumentar la glucemia.
138
139
Metabolismo de lípidos
Definición, localización y funciones de los lípidos
Lípidos: grupo diverso de compuestos/moléculas desde el punto de vista estructural cuya característica
compartida es la insolubilidad en el agua. Por esta característica se encuentran compartimentalizados. Sus
estructuras diversas explican la diversidad de sus funciones.
F(x): ser componentes de las membranas biológicas, gotas en el citoplasma de adipoc, precursores de hormonas,
precursores de vitaminas liposolubles, aislantes térmicos, moléculas de señalización, cofactores enzimáticos,
transportadores electrónicos, pigmentos que absorben la luz, forman asociaciones con proteínas para su
transporte por el plasma sanguíneo (lipoproteínas), etc. Tambien participan en el metabolismo energético.
Aspectos bioenergéticos del metabolismo lipídico
- Digestión, absorción, transporte de lípidos dietarios
- Degradación de los lípidos de almacenamiento de energía: beta-oxidación; activación de ácidos grasos y

transporte a la mitocondria; beta-oxidación de ácidos grasos saturados; beta oxidación de ácidos grasos de
cadena impar; balance y regulación de la β-oxidación.
- Síntesis y degradación de cuerpos cetónicos
- Biosíntesis de los ácidos grasos: Acetil-CoA carboxilasa; AG sintasa, regulación de la síntesis de ácidos
grasos; mecanismos de elongación y desaturación de ácidos grasos; ácidos grasos esenciales y familias de ácidos
grasos.
Digestión, absorción y transporte de lípidos dietarios
Los lípidos o las grasas están presentes en nuestra dieta en una gran variedad de alimentos: fuentes de origen
animal como fiambres, lácteos, carnes y huevos; alimentos procesados como panes, galletitas, papas fritas; y
otras fuentes como semillas, aceites, palta, frutos secos, aceitunas. Las grasas que ingerimos al comer pescado
ricas en un tipo de AG beneficiosos para la salud que son los AG de la serie omega 3. El 90% de las grasas que
ingerimos con los alimentos están constituidos por TAG (molécula de glicerol que tiene esterificados en c/u de
sus 3 C 3 AG) y el 10% restante de los lípidos dietarios corresponde a colesterol, esteres de colesterol,
fosfolípidos, AG libres (no esterificados) y vitaminas liposolubles.
Los TAG se deben hidrolizar para dar AG libres y monoacilglicéridos antes de ser absorbidos a nivel intestinal.
En niños y adultos, la digestión de las grasas se produce de forma eficaz y casi completa en el intestino delgado
por la actividad de lipasas pancreáticas; en recién nacidos la secreción de las lipasas pancreáticas es baja de
forma que la digestión de las grasas la realizan las lipasas segregadas por glándulas linguales (lipasa lingual) y
lipasa gástrica. El estómago además interviene en este proceso de digestión de las grasas gracias a su acción
agitadora que ayuda a crear emulsiones. De esta forma se digieren los TAG ricos en AG de cadena corta y
media presentes en la leche materna. Las grasas que llegan al duodeno son emulsionadas por las sales biliares
procedentes de la vesícula biliar y forman micelas. Las lipasas pancreáticas en el intestino degradan los TAG de
estas micelas y los AG y otros productos de la digestión son tomados por la mucosa intestinal y convertidos
nuevamente en TAG a nivel de los enteroc. Estos TAG son incorporados con colesterol y apolipoproteína en los
quilomicrones.
Los quilomicrones, un tipo de lipoproteína plasmática, viajan por el sistema linfático y el torrente sanguíneo
hacia los diferentes tejidos llevando los lípidos dietarios. La lipoprotein lipasa activada por la apo-C II en los
capilares de los distintos tejidos convierten a los TAG en AG libres y glicerol, es decir, degradan esos TAG. Los
AG libres entran a las c de los distintos tejidos donde serán oxidados para obtener energía o reesterificados para
su almacenamiento como TAG. El glicerol sigue por plasma hasta el hígado donde será metabolizado.
140
Dicho lo anterior, las grasas que entran en el duodeno se mezclan con la bilis y que posteriormente se
emulsionan: este proceso es crítico ya que aumenta la superficie expuesta de las gotas lipídicas para que actúen
las enzimas digestivas a nivel de la interfase lípido agua de la propia gota lipídica.
La emulsificación se produce gracias a 2 mecanismos complementarios: por un lado la presencia de sales

biliares, producidas a partir del colesterol en el hígado y almacenadas en la vesícula; y por otro lado un proceso
de mezclado producido por los movimientos peristálticos.
Las sales biliares están formadas por un anillo esteroideo por una cadena lateral de glicina o taurina unidas por
enlace amida. Poseen una cara polar y otra no polar los que les permite interactuar con la superficie de las gotas
de TAG a nivel del duodeno estabilizándolas para impedir que coalezcan, es decir, impedir que se junten entre si
formando una gota lipídica de mayor volumen. De esta manera se aumenta la superficie expuesta para que
actúen las lipasas pancreáticas.
Las propiedades biofísicas de la interfase lípido-agua de dicha gota lipídica en presencia de sales biliares facilita
cambios conformacionales de las lipasas para que adquieran su actividad máxima y puedan acceder y digerir a
estos lípidos dietarios.
141
La lipasa pancreática cataliza la hidrolisis de los AG de las posiciones 1 y 3 de los TAG generando 2
monoacilgliceridos (tiene esterificado 1 AG a nivel del OH del C2 del glicerol) y AG libres. La emulsión es
tratada en el intestino por esta enzima.
La colipasa es una enzima liberada por la vesícula que se une a la lipasa facilitando su anclaje a la superficie de
la gota lipídica para que la lipasa puede ejercer su función hidrolítica.
La isomerasa actúa sobre los 2 monoacilgliceridos trasladando el grupo acilo de la posición 2 a la 1 generando
unos monoacilgliceridos sobre los cuales van a actuar las lipasas.
La colesterol esterasa hidroliza los esteres de colesterol, es decir, actúa rompiendo el enlace éster e/ AG y el OH
del colesterol en los esteres de colesterol liberando colesterol libre y AG libres.
La fosfolipasa A2 actúa hidrolizando el enlace éster que une el AG al OH del C2 de un glicerofosfolipido,

siendo los productos de la actividad de esta enzima un AG libre y un lisofosfolipido, ósea, un glicerofosfolipido
que no tiene esterificado ningún AG a nivel del C2. En ese lisofosfolipido actúan luego lisofosfolipasas que
liberan AG libres y glicerol fosfato que se elimina por heces.
Control hormonal de la digestión
- La llegada de los lípidos y de proteínas parcialmente digeridas al duodeno estimula a células de la mucosa para
que liberen colecistoquinina, que es una hormona peptídica que estimula a la vesícula biliar y al páncreas
exocrino para que liberen bilis y lipasas respectivamente.
- La secretina es otra hormona peptídica secretada por células intestinales, que se encargan de estimular al
páncreas para que libere bicarbonato, neutralizando así el pH ácido para que puedan actuar las lipasas
pancreáticas. Esta hormona también incrementa la secreción de bilis en el hígado
- La gastrina en el estómago estimula la liberación de jugo gástrico, que contribuye con la formación del
quimo.
142
Absorción de los Lípidos | Resíntesis de TAG y EC en enterocitos | Enzimas involucradas
Los AG libres, monoacilglicéridos y colesterol libre son los principales absorbidos en el yeyuno. Estos lípidos
junto con las sales biliares forman micelas pequeñas que se acercan al borden en cepillo de los enteroc para que
los lípidos puedan atravesar la membrana y entrar a la c, donde a nivel de RE eran sustratos para la síntesis o
resíntesis de TAG y esteres de colesterol los que junto a apoproteínas formaran un tipo especial de lipoproteínas,
los quilomicrones, que se liberan por exocitosis hacia la linfa para pasar luego a sangre a nivel de la vena
subclavia transportando estos lípidos dietarios exógenos para ser utilizados por distintos tejidos.
Dentro del enterocitos, los 2 monoacilglicéridos y AG libres de cadena larga y muy larga reaccionan e/ si para
formar TAG, el colesterol y AG libres reaccionan para formar esteres de colesterol, mientras que
lisofosfolipidos y AG libres reaccionan para formar fosfolípidos. En estas reacciones participan numerosas
enzimas que se denominan acil-CoA sintetasas y diferentes tipos de acil-transferasas. Los AG con longitudes de
cadena inferiores a 14 átomos de C, es decir, AG de cadena corta y media, entran directamente a los enteroc sin
necesidad de ser asistidos por micelas desde donde pasan directamente al sistema de la vena Porta y son
transportadas por los diferentes tejidos.
Las enfermedades que perjudican la secreción biliar como los trastornos hepáticos conducen a grandes
deficiencias es la absorción de grasas de la misma manera que enfermedades que afectan la secreción
pancreática de lipasas como la fibrosis quística. Como resultado, los TAG con longitudes de cadena media
143
pueden tolerarse mucho mejor en las personas que presentan estas enfermedades y se utilizan como principal
fuente de energía en su alimentación.
Trasporte de lípidos dietarios y estructura de los quilomicrones
Los quilomicrones son una de las clases de lipoproteínas que se encuentran en el torrente sanguíneo
desempeñando un papel esencial en el transporte lipídico e/ los distintos tejidos. Mas allá de la diversidad de
lipoproteínas plasmáticas y de las diferencias en su composición lipídica y proteica, todas las lipoproteínas
comparten características estructurales comunes, especialmente un forma esférica que contiene un núcleo
interno formado por componentes lipídicos y proteicos hidrofóbicos, Mientras que las estructuras proteicas
hidrófilas y los grupos de cabezas polares de los fosfolípidos como el OH del colesterol se encuentra en el
exterior de la partícula lipoproteica expuesta hacia el agua, circulando por plasma o linfa.
El quilomicrón es básicamente una gota de TAG y esteres de colesterol dietarios exógenos recubierta por
fosfolípidos, colesterol y una capa externa de apoproteínas que ayudan a dispersar y solubilizar en parte la grasa
dietaria para su transporte a los diferentes tejidos.
Metabolismo de los quilomicrones: en el intestino se sintetiza la apolipoproteína B48, la apoproteína

característica de ellos quilomicrones, mediante un proceso de división? de ARNm. Los quilomicrones recién
sintetizados, es decir, con apo B48 y TAG como principal lípido constituyente salen a circulación donde reciben
por transferencia a partir de las HDL (otro tipo de lipoproteína plasmática) otras apoproteínas como la apo CII y
la apo E.
La apo CII es un activador de la hidrolisis de los TAG por parte de la enzima lipoprotein lipasa que se encuentra
anclada en el endotelio capilar de diferentes tejidos principalmente musculo, donde los AG liberados a partir de
los TAG dietarios se van a utilizar como fuente de energía y del tejido adiposo donde esos AG se usan para
resintetizar TAG que serán almacenados. Los AG libres que no son incorporados en los tejidos permanecen en
circulación donde van a ser transportados por albumina y el glicerol va hacia el hígado donde la glicerol quinasa
lo fosforila a glicerol 3-P para que entre en la vía glucolítica a la altura de las triosas P.
Los quilomicrones que de esta forma descargaron gran parte de sus TAG transfieren la apo CII a partículas de
HDL convirtiéndose en quilomicrones remanentes, ricos en esteres de colesterol, fosfolípidos, colesterol, apo
B48 y apo E, que vuelven al hígado donde sufren endocitosis mediado por receptor y van a ser digeridos a nivel
de los lisosomas.
IMPORTANTE: La unión de apo CII a la LPL induce un cambio conformacional en la enzima, lo que la activa
para que de esta forma pueda degradar los TAG.
144
Movilizacion de TAG almacenados en el tejido adiposo
La capacidad de los depositos de alamacenar grasa es virtualmmete ilimitada, esto quiere decir que todo lo que
ingerimos, digerimos y absorvemos que esta en exceso respeto de las necesidades energeticas se va a acumular
como TAG en el tejido adiposo. En cambio, la liberacion de grasa de los depositos de almacenamiento esta
controlada hormonalmente para poder satisfacer las necesidades del organismo en cuanto a la generacion de
energia.
La movilizacion de los TAG almacenados en el tejido adiposo (lipolisis) se inica cuando el GLUCAGON en
situacion de AYUNO o ADRENALINA en situacion de ESTRÉS se unen a un receptor acoplado a proteina Gs
en la membrana de los adipoc, que lleva a la activacion de la adenilato ciclasa, aumento [AMPc] y activacion de
PKA. PKA fosforila varias proteinas diana del adipoc y se estimula la lipolisis.
El pricipal efecto estimulador es sobre las perilipinas, proteinas que recubren la cara citosolica de las gotas
lipidicas de los adipoc. Normalmente las perilipinas bloquean el acceso de las enzimas que degradan los TAG, y
tras la fosforilacion mediada por PKA sufren un cambio conformacional que permite el ingreso de las lipasas
sensibles a hormonas que tambien, ahora fosforiladas por PKA, pueden hidrolizar sus sustratos, los TAG, para
degradarlos. Los productos de la hidrolisis (AG libres y glicerol) salen del adipoc y llegan al plasma, donde los
AG se unen a albumina para ser transportados a los tejidos donde se captan por difusion pasiva y facilitada; la
mayor parte del glicerol se capta a nivel de los hepatoc donde se utiliza como sustrato gluconeogenico.
145
Utilizacion de AG por los distintos tejidos
Cuando baja la glucemia, el el higado se activa la gluconeogenesis (mucho ATP). Ese ATP el higado lo obtiene
a partir de los AG que proceden del tejido adiposo donde esta muy activa la lipolisis por señalizacion mediada
por adenalina y glucagon.
La ruta metabolica mediante la cual los AG son degradadados para obtener energia se denomina β-Oxidación.
β-Oxidación
Es una via que comprende la oxidacion del Cβ de los AG sean saturados, monoinsaturados, poliiinsaturados o
de cadena impar que ocurre en la mitocondria en tejidos como el higado, musculo esqueletico (en reposo) y
cardiaco, riñones y tejidos adiposo entre otros.
Consiste en la oxidacion escalonada de la cadena carbonada de AG de 2 en 2 C. Desde el extremo que tiene el

grupo carboxilo hacia el N-terminal con la liberacion de una molecula de acetil-CoA por vuelta. Antes de ser
oxidados, los AG deben ser activados y transportados hacia la matriz mitocondrial donde se encuentran las
enzimas de la β-oxidación.
146
Dado que la membrana mit. int. es impermeable a los AG libres de cadena larga y a los acil-CoA, interviene un
sistema de transporte especifico que funciona en estrecha relacion con la activacion metabolica necesaria para
iniciar la ruta de la β-oxidación.
Una serie de acil-CoA sintetasas (ACS) catalizan la activacion de los AG mediante la conjugacion de los
mismos con la coenzima A (CoA) con gasto de una molecula de ATP. Las ACS presentan isoformas tejido
especificas: la ACS para los AG de cadena larga es una enzima que pued estar unida a membrana mit. ext.
Activacion y transporte de AGs
Las ACS utilizan un mecanismo de 2 pasos:
1ro → activacion del grupo carboxilo del AG por el ATP para producir un intermiediario denominado
aciladenilato, con la liberacion de PPi.
2do → el grupo carboxilo activado reacciona con el grupo tiol de la CoA desplazando el AMP y formando el
acil-CoA.
La ruptura del ATP a AMP proporciona la fuerza impulsora parav esta reaccion ya que el PPi es hrolizado por la
pirofosfatasa presente en la mayor parte de las c.
Los acil-CoA deben entrar a la matriz para ser oxidados: el transporte se inica con la transferencia de la porcion
acilo a un transportador llamado carnitina, en una reaccion catalizada por la enzima carnitina aciltransferasa I (o
carnitina palmitoiltransferasa I), que esta envevida en la membrana mit. ext. con su sitio activo hacia el
citoplasma.
La CPT I produce entonces acil carnitina que atraviesa la membrana interna por un transportado especifico,
carnitina acil-carnitina translocasa.
Una segunda enzima CPT II, localizada del lado de la matriz de la membrana mit. int. completa el proceso de
transferencia intercambiando acil-carnitina por carnitina libre y produciendo entonces acil-CoA que ya esta
dentro de la matriz mitocondrial.
La translocasa cataliza el intercambio reversible de la acil-carnitina por carnitina, de manera que la carnitina
libre que se forma en la matriz puede volver al espacio intermembrana y luego desplazarse hacia el citoplasma a
traves de poros de la memebrana mit. ext.
La CPT I se inhibe fuertemente por el malonil-CoA, que es el primer intermediario de la sintesis de AG;
entonces la entrada de los AG a las mitocondrias es el PASO LIMITANTE de la velocidad de la β-oxidación y
el PRINCIPAL PUNTO de regulacion de la via. Asi, se logra que las condiciones c que favorecen la sintesis de
AG eviten la transferencia de moleculas de acilo a la matriz mitocondrial evitando su oxidacion y favoreciendo
147
por otro lado su empaquetamiento como TAG en VLDL (tipo de lipoproteina plasmatica) para que sean
transportados al tejido adiposo donde seran almacenados.
Pasos de la β-oxidación
Una vez en el interior de la matriz los acil-CoA se oxidan mediante una serie de pasos en las que las cadenas
acilo se acordan 2 C c/ vez. El fragmento de 2 C se libera en froma de acetil-CoA. Cada paso comporta 4
reacciones. La ruta es ciclica ya que casa paso o vuelta termina con la formacion de un acil-CoA cortado en 2 C
que experimenta a continuacion el mismmo proceso de 4 reacciones en el paso o ciclo siguiente.
Una molecula de palmitoil-CoA, procedente de un AG de 16 atomos de C, sufre 7 ciclos de oxidacion para dar 8
moleculas de acetil-CoA (8x2=16).
Se llama β-oxidación porque las 4 reacciones que forman c/ paso de la via ocurren a nivel del Cβ. A partir del C
carboxilico, los demas C hasta el N-terminal: el primero alfa, 2do beta, 3ero gama…
1era reaccion → deshidrogenacion para dar un derivado enoil. Esta primera reaccion de oxidacion la cataliza
la enzima acil-CoA deshidrogenasa, que utilizando FAD como grupo prostetico elimina 2 H+ de los C α y β
para dar un trans 2 enoil-CoA. El FADH2 sede los 2 e- a una proteina lanzadera, la flavoproteina de
transferencia de e- o ETF, que los tranfiere a la coenzima Q de la cadena transportadora de e-.
2da reaccion → hidratacion del doble enlace del trans 2 enoil-CoA, catalizada por una enoil-CoA hidratasa y
produce un β-hidroxiacil-CoA.
3era reaccion → deshidrogenacion del grupo hidroxilo (su oxidacion a cetona). Esta segunda reaccion de
oxidacion la cataliza una β-hidroxialacil-CoA deshidrogenasa que produce β-cetoacil-CoA y NADH que
tranfiere sus e- al complejo NADH deshidrogenasa de la cadena transportadora de e-.
148
4ta reaccion → Tiolisis, catalizada por la tiolasa, donde ocurre la fragmentacion del β-cetoacil-CoA mediante
el accionar de una 2da molecula de CoA sobre el Cβ (fragmentacion tiolica) liberando un acetil-CoA de 2 C y
un acil-CoA 2 C + corto que el sustrato original.
En el siguiente esquema aparece el ciclo más fácil de visualizar, en el circulo están los productos, en el margen
izquierdo se escriben las enzimas y numeradas los tipos de reacción.
Hay muchos trastornos que afectan la oxidacion de AG, el mas comun, la deficiencia de acil-CoA
deshidrogenasa de cadena media. Tiene una frecuencia de 1 en 15.000 y fue asociado con casos de sindrome de
muerte subita del lactante. Los ninios con esto presentan ya en el 1er anio de vida higado graso, concentraciones
elevadas en sangre de intermediarios de AG, hipoglucemia y algunas patologias a nivel de musculo esqueletico
y cardiaco.
Rendimiento energetico: tomando como ejemplo al acido palmitico (16 C)
Palmitoil-CoA + 7 CoA-SH + 7 FAD + 7 NAD + 7 H2O → 8 Acetil-CoA + 7 FADH2 + 7 NADH + 7 H+
149
Cada molecula de Acetil-CoA se metaboliza en el CdK de la misma forma que se metaboliza el proveniente del
piruvato en la reaccion catalizada por el complejo piruvato deshidrogenasa, producinedo 3 NADH, 1 FADH y 1
GTP en la fosforilacion a nivel de sustrato, que tranfieren sus electrones a la cadena transportadora de e- y
llevan a la produccion de 10 moles de ATP.
8 moles de acetil-CoA → 80 ATP
El FADH y NADH produciodos en c/ paso de la β-oxidación ceden sus e- a la cadena transportadora de e- a

nivel de la flavoproteina transportadora de e- y del complejo 1 produciendo 1,5 y 2,5 moles de ATP
respectivamente → 4 ATP en total.
4 x 7 (pasos de β-oxidación) → 28 moles de ATP
A este rendieminto energetico hay que restarle los 2 ATP durante la activacion del acido palmitico a palmitoil-
CoA en la reaccion catalizada por la acil-CoA sintetasa
80 + 28 – 2 = 106 ATP / a. palmitico → rendieminto neto en moles de ATP obtenidos a partir de la oxidacion
completa de CO2 y H2O de una molecula de a. palmitico.
Regulacion de la β-oxidación
La oxidacion de los AG se controla por la disponibilidad de sustratos para su oxidacion, es decir, la presencia de
AG en la matriz determina su oxidacion. En animales, esa disponibilidad se controla mediante le control
hormonal de la movilizacion de las grasas en adipoc; tiene sentido que la liberacion y uso de esa grasa sea
controlada por hormonas ya que son los mensajeros extrac encargados de estimular al tejido adiposo para que
libere combustible qu epueda ser utilizado por otros tejidos en f(x) de su necesidad energetica.
Principial punto de control → al nivel de la carnitina acil transferasa I
• El control del transporte de acil-CoA desde el citoplasma a la matriz (donde estan las enzimas de la
via) constituye el principal punto de control.
La regulacion de la carnitina acil transferasa I se regula por malonil-CoA, el primer intermediario de la sintesis
de AG, inhibiendo el transpote de acil-CoA a la matriz. La [malonil-CoA] tambien esta controlada por
hormonas proporcionando una estrecha coordinacion entre sintesis y β-oxidacion de AG (higado)
150
• Una alta relacion NADH/NAD+ produce la inhibicion de la β-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa y el

acetil-CoA inhibe a la tiolasa.
151
152
Sintesis de cuerpos cetonicos
El acetil-CoA producido en la via se utlizara en musculo para produccion contraccion y en el higado para las
rutas de biosintesis. Cuando las condiciones metabolicas hacen que se sintetice mas acetil-CoA que el que puede
oxidarse en el Ciclo de Krebs, entra en juego OTRO POSIBLE DESTINO METABOLICO: la conversion en
cuerpos cetonicos
→ CETOGENESIS: tiene lugar en las mitocondrias del higado y, en menor medida, en el riñon.
Las situaciones metabolicas que estimulan la cetogenesis son por ejemplo, el ayuno, donde la ingesta de
carbohidratos es reducida. El hígado se pone a sintetizar glucosa a partir de precursores no glusídicos mediante
la vía de gluconeogénesis.
153
El ATP necesario para la gluconeogénesis procede de la beta oxidación de ácidos grasos movilizados por la activa
lipólisis en el tejido adiposo. Los elevados niveles de acetil CoA hepáticos resultantes inhiben a la piruvato
deshidrogenasa (PDH) y activan a la piruvato carboxilasa (PC) para formar oxalacetato que se usa para convertir
en fosfoenol piruvato en la gluconeogénesis, así se enlentece el flujo a través de la citrato sintasa, lo que hace que
se eleven las concentraciones de acetil-CoA.
En la matriz mitocondrial 2 moleculas de acetil-CoA se condensan por actividad inversa de la tiolasa para dar
acetoacetil-CoA, que puede reaccionar a su vez con una 3era molecula de acetil-CoA para dar β-hidroxi-β-
metilglutamil-CoA (HMG-CoA) catalizado por la HMG-CoA sintasa.
La HMG-CoA sufre la accion de la HMG-CoA liasa para producir acetoacetato (primer cuerpo cetonico) y
acetil-CoA. El acetoacetato experimenta una reduccion dependiente de NADH para dar lugar a β-hidroxi-
butirato (otro cuerpo cetonico) catalizado por la β-hidroxi-butirato deshidrogenasa. En cantidades muy
pequenias, el acetoacetato puede descarboxilarse para producir acetona (tercer cuerpo cetonico).
➢ Utilizacion de cuerpos cetonicos:
Se transportan desde el higado (donde se sintetizaron) hasta los tejidos perifericos donde se utiliza como
combustible alternativo, ya que la acetoacetato y la β-hidroxi-butirato pueden reconvertirse denuevo en acetil-
CoA para la generacion de energia.
154
La reconversion implica la transferencia enzimatica de una porcion de CoA desde el succinil-CoA al

acetoacetato para dar acetoacetil-CoA y succinato, catalizada por la enzima β-acetoacetil-CoA transferasa
presente en todo lo tejidos exceoto en higado, de manera que este organo es el que mas puede sintetizar cuerpos
cetonicos pero no consumirlos como combustible.
El acetoacetil-CoA se convierte posteriormente por la tiolasa en 2 moleculas de acetil-CoA que entrar al CdK.
Interrelacion del metabolismo de lipidos y glucidos en ayuno
En situacion de ayuno cuando baja la glucemia el glucagon estimula la glucolisis, de manera que el tejido
adiposo libre hacia la sangre AG libres que se transportan por albumina y glicerol. El glicerol llega al higado
donde se utiliza para la sintesis de glucosa por gluconeogenesis, y dicha glucosa es volcada a sangre para
sostener la glucemia. Los AG libres llegan al higado y se β-oxidan para proporcionar la energia que necesita el
higado para hacer gluconeogenesis.
El acetil-CoA que se produce en la β-oxidacion se acumula en las mitocondrias hepaticas al no poder ser
oxidado en el CdK, porque el oxalacetato ya esta utilizando en la gluconeogenesis. De manera que ese acetil-
CoA se deriva a la sintesis de cuerpos cetonicos, los que el higado vuelca a la sangre para que sean utilizado
como fuente de energia en tejidos extrahepaticos como musculo cardiaco y corteza renal. Tambien el acetil-CoA
producto de la β-oxidacion es un modulador alosterico + de la piruvato carboxilasa.
155
La produccion de cuerpos cetonicos es un hecho fisiologico, ya que durante un periodo de ayuno normal
algunos tejidos en especial el corazon obtienen esa energia metabolizando los cuerpos cetonicos producidos por
el higado.
La cetogenesis se produce tambien en 2 situaciones patologicas: inanicion (ayuno extremo en la que el cerebro,
que normalmente utiliza glucosa como 1pal fuente de energia, sufre una adaptacion metabolica para poder
uilizar cuerpos cetonicos) y diabetes no tratada (los tejidos son incapaces de utilizar de forma adecuada la
glucosa, se produce una cantidad de cuerpos cetonicos superior a la capacidad de uso de los tejidos perifericos,
la cetosis, que provoca la disminucion del ph sanguineo).
Sintesis de AG
Los AG se encuentran principalmente esterificados formando parte de los TAG almacenados en el tejido
adiposo, en los fosfolipidos de las membranas c y de los esteres de colesterol. Una muy pequenia proporcion se
encuentra como AG libre no esterificado en nuestra c, mientras que es su mayoria como AG libre se encuentran
circulando e/ tejidos unidos a la albumina. Una gran parte del contenido total de AG en nuestro organismo
proviene de la dieta, minetras que el resto se sintetiza de novo.
La síntesis de novo se produce mediante una vía reductora que utiliza acetil-CoA como precursor y que se
realiza en el citoplasma en casi todos los tipos c, principalmente hepatoc, de glándulas mamarias en periodos de
lactancia y adipoc.
Ocurre en 2 etapas:
➢ Síntesis del intermediario de 3 C malonil-CoA a partir de acetil-CoA y bicarbonato

➢ Elongación, por adición escalonada de unidades de 2 C procedentes del acetil-CoA, hasta palmitato
(16 C), principal producto de la AG sintasa.
Requiere:
- Fuente de carbonos
- Fuentes de poder reductor
- Energía metabólica
Fuentes de poder reductor
Las fuentes de poder reductor del NADPH requerido para esta síntesis es la RUTA DE LAS PENTOSAS P. Por
cada molécula de glucosa que se oxida a ribulosa 5-P en la fase oxidativa de la vía, se generan 2 NADPH → 1ra
x la reacción catalizada por la gluc 6-P deshidrogenasa
2da x la reacción catalizada por 6-fosfogluconato deshidrogenasa
NADPH → fuente de poder reductor para las rutas de biosíntesis
Otra fuente de NADPH para la síntesis de AG es una reacción catalizada por la isoforma citosólica de la enzima
malica, que cataliza la descarboxilación oxidativa del malato (4 C) para dar piruvato (3 C).
Por otro lado, los C necesarios para la síntesis de novo de AG proceden del acetil-CoA derivado del
metabolismo de hidratos de carbono y proteínas dietarias.
156
Transporte de acetilos (y de transportadores electrónicos) hacia el citoplasma
El acetil-CoA originado en la matriz mitocondrial debe transportarse al citoplasma para ser útil en la síntesis de
AG pero, al igual que los acil-CoA de cadena mas larga, el acetil-CoA no puede atravesar la membrana
mitocondrial interna y utiliza un sistemas de lanzadera que proporciona un mecanismo de control de la síntesis y
genera gran parte del NADPH necesario.
El citrato, formado en las mitocondrias a partir de acetil-CoA y oxalacetato (primer paso del CdK), se transporta
a través del transportador de citrato de la membrana mit. int. hacia el citoplasma. Luego, sufre la acción de la
citrato liasa que lo hidroliza con gasto de 1 ATP para regenerar acetil-CoA y oxalacetato. Así, el acetil-CoA ya
esta disponible en el citoplasma para la síntesis de AG.
El oxalacetato no puede volver directamente a la matriz mitocondrial porque la membrana mit. int. carece de
transportador para el compuesto entonces:
→ 1ero: se reduce a malato por la malato deshidrogenasa citosólica (paso inverso al del CdK)
→ 2do: parte del malato vuelve a la matriz a través del transportador de malato y alfacetoglutarato
→ 3ero: se incorpora al CdK hasta dar citrato
Por otro lado, el malato que queda en el citosol se descarboxila oxidativamente por la enzima malica para dar
piruvato (fuente de generación de NADPH). El piruvato resultante se transporta por su transportador especifico
a la matriz donde se convierte en oxalacetato por la piruvato carboxilasa.
➔ Mediante este mecanismo de transporte, por c/ mol de malato en el citoplasma se genera 1 mol de
NADPH
La mayor parte del resto de moles de NADPH necesarios para sintetizar palmítico se genera en el citoplasma a
partir de la ruta de las PP.
157
Las condiciones metabólicas que determinan que el citrato en la matriz (generado en exceso respecto a la
cantidad que se necesita en el CdK) sea transportado hacia el citoplasma: exceso de hidratos de carbono
ingeridos con la dieta. Luego de una dieta rica en HdC sube la glucemia, los tejidos captan a través de sus
GLUT dicha glucosa (incluyendo al hepatoc) para oxidarla por glucolisis, complejo de la piruvato
deshidrogenasa, Ciclo de Krebs (CdK), cadena transportadora de e-, fosforilación oxidativa y también para
almacenarla como glucógeno. Si luego de esto la glucemia sigue elevada, tanto el hígado como el tej. adiposo
convierten ese exceso de glucosa en AG para su almacenamiento.
El hígado y el tejido adiposo tiene la capacidad de desviar el acetil-CoA generado a partir del consumo en
exceso de HdC porque expresan una citrato sintasa que NO se inhibe alostéricamente por una carga energética
elevada = una alta relación ATP/ADP y NADH/NAD. Pero SI lo hace si se inhibe la isocitrato deshidrogenasa
enlenteciendo la oxidación de citrato en el CdK que determina su transporte al citoplasma.
➢ Nota: (reg del CdK) → el citrato en el citoplasma será sustrato de la citrato liasa que lo hidroliza para
producir acetil-CoA y oxalacetato mediante la lanzadera descripta anteriormente.
158
Dicho en seminarios anteriores, cuando sube la glucemia la insulina estimula en musculo y tejidos adiposo la
captación de glucosa y su oxidación a través de la glucolisis (ambos tejidos) y a través de la vía de las PP en
adiposo.
En cerebro y eritroc la glucosa ingresa a velocidad constante independientemente de la glucemia. A través de los
GLUT 1 y 3 respectivamente.
El hígado y el tej. adiposo funcionan a contramano en cuanto a la regulación de la glucolisis por carga
energética. Esto significa que en la situación metabólica de que la glucemia es elevada, en dichos órganos la
glucolisis se mantiene activa a pesar de la existencia de una elevada carga energética con el objetivo de obtener
acetil-CoA a partir del cual se sintetizan AG y luego TAG que serán almacenados en tej. adiposo.
En esta condición también se encuentra activa la vía de las PP para obtener el NADPH necesario para la síntesis
lipídica.
Situándonos con el acetil-CoA ya en el citoplasma, se produce el primer paso de la via:
1- Síntesis de malonil-CoA (primer intermediario)
El malonil-CoA se sintetiza a partir de acetil-CoA y bicarbonato en una reacción catalizada por la acetil-CoA
carboxilasa (ACC) con gasto de 1 ATP. La reacción es tan exergónica que resulta prácticamente irreversible en
condiciones intrac. Al igual que otras enzimas que catalizan reacciones de carboxilación, la ACC utiliza biotina
(vitamina B8) como cofactor unido covalentemente a un grupo épsilon (ɛ) anil-amino de un residuo de lisina →
grupo prostético.
159
Esta reacción en realidad se produce en 2 PASOS:
• La actividad biotina-carboxilasa de la enzima cataliza la formación del intermediario

N-carboxibiotina con gasto de ATP.
• La actividad trans-carboxilasa transfiere el grupo carboxilo activado desde la
N-carboxibiotina al acetil-CoA produciendo malonil CoA.
La acetil-CoA carboxilasa eucariotica consiste en 1 sola proteína que contiene 2 cadenas polipeptídicas
idénticas. La proteína en forma dimerica es inactiva pero ante determinadas señales se polimeriza adoptando una
forma filamentosa activa.
Primer paso de la vía → PRIMER PUNTO DE CONTROL de la síntesis de AG
Estructura del complejo Acidograso Sintasa
La síntesis continua con una secuencia de reacciones que desempeña el complejo de la AG SINTASA.
En animales es un homodimero en el que c/ cadena polipeptídica esta plegada en 7 dominios con actividades
diferentes. 6 de los dominios tiene sitios activos con actividades catalíticas especificas de las secuencias de
reacciones que tienen lugar. El 7mo dominio se denomina proteína transportadora o portadora de acilo (ACP)
y tiene un rol clave actuando como un brazo oscilante que transfiere los intermediarios de reacción entre los 6
sitios activos de la AG sintasa. La ACP puede cumplir esta f(x) ya que a través de un residuo de serina se una a
una fosfopanteteina con un grupo sulfhidrilo reactivo como el de la coenzima A.
TODOS los intermediarios de la β-oxidación se activan mediante su unión a la coenzima; en este caso para la
síntesis se utiliza una activación similar pero la proteína transportadora es ahora ACP.
160
Secuencias de reacciones para sintetizar 1 molécula de ácido palmítico (AG c/ 16 C) a partir de acetil-CoA
La AG sintasa debe cargarse primero con los sustratos de partida. La porción acetilo del acetil-CoA se carga en
la ACP mediante una reacción catalizada por la malonil/acetil-CoA-ACP transferasa o transacilasa (MAT). Este
grupo acilo se transfiere al sulfhidrilo de una cisteína del sitio activo de la β-cetoacil-ACP sintasa (KS)
produciendo acetil unido a KS. La porción fosfopanteteina de la ACP está disponible para cargarse con el 2do
sustrato, el malonil-CoA, también catalizado por la MAT.
La AG sintasa esta ahora lista para el 1er ciclo de elongación de la cadena. En c/ ciclo, un sustrato cebador de
grupo acilo unido a la β-cetocil ACP sintasa (KS) se condensa c/ una molécula extensora, un grupo malonilo
unido a la ACP.
El ciclo de síntesis transcurre mediante 4 REACCIONES:
- Condensación.
- Reducción.
- Deshidratación.
- Reducción.
Empezamos con una molécula de malonil-ACP (el malonilo unido al tiol del ACP) y una acetil-KS (un acetilo
unido al tiol de KS) y en 4 reacciones generamos un butiril-ACP (un acil de 4 C unido a la ACP).
Estas reacciones son las que se asemejan a las 4 reacciones invertidas en la β-oxidación.
Condensación: la reacción 1 es la de formación del enlace C-C, una condensación e/ el malonil-ACP y el acetil-
KS. La reacción esta catalizada por la KS, comporta la descarboxilación del malonilo y la ruptura del tioéster
del acetilo y el grupo tiol de la cisteína de KS liberándola, para la unión del grupo acilo elongado al final ciclo.
Esta reacción explica la observación de que el bicarbonato no se incorpora al producto final sino que todos los
carbonos de los AG proceden del acetil-CoA. El producto de la condensación = β-cetobutiril unido a la ACP (un
acilo de 4 C con un grupo ceto en el Cβ unido a la ACP).
Reducción: A continuación, ocurre la reacción 2, donde se forma un β-hidroxibutiril ACP en una reacción
dependiente de NADPH catalizada por la β-cetoacil ACP reductasa (KR).
Deshidratación: del β-hidroxibutiril ACP catalizada por β-hidroxibutiril ACP deshidrasa (DH) es la reacción 3.
Proporciona un trans-delta 2-butenoil-ACP
Reducción: trans-delta 2-butenoil-ACP sufre una 2da reducción (reacción 4) dependiente de NADPH catalizada
por la enoil-ACP-reductasa (ER) para dar un acil-ACP, el butiril-ACP.
161
Para finalizar el primer ciclo de síntesis el grupo butirilo es transferido de la ACP al grupo tiol de la KS,
marcado como reacción 5. Y la ACP se carga con una 2da molécula de malonil-CoA.
• Explicación detallada reacción por reacción:
Cargado del complejo AG sintasa
162
Reacción 1: condensación
Reacción 2: reducción
Reacción 3: deshidratación
163
Reacción 4: reducción
Reacción de transacilacion: la producción del acil graso saturado de 4 C unido a ACP completa entonces un
paso a treves del complejo de la AG sintasa. El grupo butirilo es ahora transferido desde el grupo tiol de la
fosfopanteteina de la ACP al grupo tiol de la cisteína de la β-cetoacil-ACP sintasa, el cual era portador
inicialmente del grupo acetilo. Esta reacción es cataliza por la actividad acetil-transacilasa del complejo del la
AG sintasa.
Segundo ciclo de reacciones → Liberación del AG
Para empezar el siguiente ciclo de 4 reacciones que alarga la cadena en 2 C +, se une otro grupo malonilo al tiol
de la ACP ahora desocupado. La condensación tiene lugar cuando el grupo butirilo, que actúa igual que el grupo
acetilo en el primer ciclo, se une a 2 C del malonil-ACP con una perdida concomitante de CO2. El producto de
la condensación es un grupo acilo de 6 C que permanece unido covalentemente a la ACP. Su grupo β-ceto es
reducido en las tres etapas siguientes del ciclo de la sintasa produciendo grupo acilo saturado de 6 C.
7 ciclos de condensación y reducción producen un AG de 16 C unido a la ACP. El alargamiento de la cadena

generalmente se detiene en este punto liberándose palmitato libre de la molécula de ACP por acción de una
actividad tioesterasa del complejo de la sintasa.
164
1- Síntesis de malonil-CoA:
7 acetil-CoA + 7 CO2 + 7 ATP 7 → 7 malonil-CoA + 7 ADP + 7 Pi > se repite 7 veces
2- 7 ciclos de condensación-reducción:
Acetil-CoA + 7 malonil-CoA + 14 NADPH + 14 H+ → palmitato + 7 CO2 + 8 CoA + 14 NADP+ + 6 H2O
(los 7 malonil anteriores, y el acetil-CoA para el cargado inicial del complejo de la AG sintasa)
• Proceso global (1+2):

8 acetil-CoA + 7 ATP + 14 NADPH + 14 H+ → palmitato + 8 CoA + 6 H2O + 7ADP + 7 Pi + 14
NADP+
Regulación de la síntesis de AG
La enzima limitante de la velocidad de la acetil-CoA carboxilasa está controlada por mecanismos alostéricos, de
modificación covalente y por regulación de su expresión.
Por modificación covalente
La fosforilación de la acetil-CoA carboxilasa (ACC) produce su inactivación. Se conocen 2 quinasas que

fosforilan a la ACC: proteína quinasa dependiente de AMPc (PKA) y la proteína quinasa activada por AMP no
cíclico (AMPK). Las hormonas que actúa aumentando la [AMPc] para activar PKA son adrenalina y glucagón.
El sistema AMPK actúa como sensor del estado energético c y se activa por aumentos de la relación AMP/ATP.
De esta forma en condiciones de baja carga energética como durante el ayuno o inanición, la AMPK activada
por altos niveles de AMP no cíclico detiene la síntesis de AG al inhibir la ACC mediante su fosforilación.
La insulina por su parte activa la síntesis de AG al activar a la ACC promoviendo su desfosforilación, activando
una proteína fosfatasa.
165
Alosterismo
El citrato y los acil-CoA de cadena larga (palmitoil-CoA por ejemplo) son moduladores alostéricos de la ACC.
La ACC debe experimentar una polimerización reversible para activarse: los acil-CoA de cadena larga impiden
la polimerización e inactivan la enzima y proporcionan una aparente retroinhibición de la vía (acordarse: son los
productos de la síntesis de AG!); el citrato por el contrario es un activador de la ACC al estimular su
polimerización. Como transportador unidades acetilo desde la mitocondria, las [citrato] citoplasmáticas
aumentan las [acetil-CoA y ATP] mitocondriales, de esta forma el citrato actúa como precursor de acetil-CoA
para la biosíntesis de AG y como activador del paso limitante de la velocidad de la vía.
Por regulación de su expresión de genes
Dietas con alto contenido de azúcares promueven la expresión de los genes de ACC y AG sintasa. Por otro lado,
los ácidos grasos poliinsaturados disminuyen la expresión de estas enzimas.
Regulación recíproca y antagónica de síntesis y degradación de AG:
El paso limitante de la β-oxidación está a nivel del transporte de los acil-CoA al interior de la matriz por
actividad de la carnitina-palmitoil transferasa I (CPT I) → el malonil-CoA , el primer intermediario de síntesis
de AG, es inhibidor de la CPT I. Ahora entonces se puede entender la regulación reciproca.
166
Elongación de AG
167
Desaturación de AG
168
Desaturación de AG – Familias de AG
169
Síntesis de triacilgliceroles y glicerofosfolípidos
Tanto TAG como glicerofosfolípidos tienen en sus vías sintéticas un precursor común a partir del cual se
sintetizan: el ácido fosfatídico/fosfatidato, que tiene una estructura simple. Es un derivado del glicerol, de los
cuales los OH de los C 1 y 2 están esterificados con los grupos ácidos de los AG (en este caso R1 y R2).
Generalmente el C1 está esterificado con un AG saturado y el C2 con un AG con al menos 1 insaturación. El
OH del C3 forma un fosfoéster c/ un grupo fosfato.
Panorama general de la síntesis a partir de este precursor
En el caso de los TAG, primero ocurre una hidrolisis del fosfoéster del C3 por una fosfatasa especifica que
libera una molécula de 1,2 diacilglicerol que es nuevamente esterificada por acil-CoA que acila ese C3 del 1,2
diacilglicerol para formar el TAG. Se puede ver que hay una molécula que no tiene una porción hidrofílica,
como ya sabemos el TAG es una de las 1pales funciones que va a tener como almacenaje de energía en gotas
lipídicas dentro de la célula es totalmente hidrofóbica.
En cambio, los glicerofosfolípidos se generan por el agregado en el P del C3 del ácido fosfatídico de un grupo
llamado grupo cabeza, que es una molécula con cierta polaridad. Los fosfolípidos más abundan en c eucariotas
son los que contienen como grupo polar a la serina (alcohol polar), colina, etanolamina, etc. En definitiva esa
molécula va a tener una porción hidrofóbica, como la que representa la porción superior de la imagen, y una más
hidrofílica que es la que contiene el grupo polar. Esto le da a los glicerofosfolípidos su principal característica
estructural para su f (x), esa doble polaridad, como lípidos de membrana para insertarse de una manera que les
permita exponer sus grupos polares a la superficie y sus grupos apolares hacia el interior de las membranas,
además de cumplir con otras f (x) como biosurfactantes en pulmones e importantes en vías de transducción de
señales.
170
Síntesis de ácido fosfatídico
Se sintetiza a partir de glicerol 3-P y es secuencialmente acilado por la enzima glicerol 3-P acil-transferasa que
forma el primer enlace éster en el C1 del glicerol, para formar el lisofosfatidato y luego una acil 3-P
aciltransferasa se encarga de transferir el 2do grupo acilo usualmente insaturado en el C2. Así obtenemos al
fosfatidato. Ocurre fundamentalmente en eucariotas y en procariotas es parecida.
Síntesis el glicerol 3-P (precursor del ácido fosfatídico)
Hay más de una vía de síntesis dependiendo del tejido y de la condición metabólica del organismo.
Podemos afirmar que el glicerol 3-P se sintetiza a partir e la dihidroxiacetona-P (intermediario de la glucolisis).
Ocurre fundamentalmente el hígado, tejido adiposo y otros tejidos, es la vía más abundante de síntesis. Implica
la reducción de una molécula de dihidroxiacetona-P a glicerol 3-P con la concomitante oxidación de 1 NADH a
NAD+.
Otra vía proviene de una enzima especifica que usa glicerol como precursor que lo fosforila en el C3, la glicerol
quinasa, hidrolizando 1 ATP. Ocurre fundamentalmente en hígado, riñón pero NO EN ADIPOSO porque no
expresa la enzima.
La tercera vía es la GLICERONEOGENESIS que parte de piruvato como precursor, y subsecuentemente con
pasos similares en la gluconeogénesis. Entonces, esta vía también genera dihidroxiacetona-P que forma
finalmente el glicerol 3-P por la enzima glicerol 3-P deshidrogenasa. Es la segunda vía que usa
dihidroxiacetona-P como precursor de glicerol 3-P, y también forma la mayor proporción de glicerol 3-P que se
sintetiza. Ocurre en hígado y tejido adiposo, y a pesar de que usan el mismo precursor el origen de la
dihidroxiacetona-P es diferente a la primera explicada.
En hígado, cuando la glucemia es alta, se produce glucolisis a una velocidad apreciable y la dihidroxiacetona-P
es la glucolisis justamente porque la glucemia esta alta y la insulina favorece este proceso.
171
Durante el ayuno, el hígado va a tener activa la gluconeogénesis; entonces también se genera glicerol 3-P
mediante las primeras vías de la glucolisis.
Lo mismo ocurre en el tejido adiposo, hay gliceroneogenesis y también son los primeros pasos de la glucolisis
que forman dihidroxiacetona-P. Este tejido como otros no tienen la glucosa fosfatasa por ende no puede hacer
gluconeogénesis pero SI gliceroneogenesis utilizando varias enzimas en común. No tiene glicerol quinasa, pero
si gliceroneogenesis entonces en ayuno utiliza el piruvato como precursor de dihidroxiacetona-P, mientras que
en presencia de glucosa y mediada por una señal de insulina la glucosa va a ser le precursor de la
dihidroxiacetona-P. En resumen: la única via que tiene el tejido adiposo de obtener glicerol 3-P es a través de
dihidroxiacetona-P que puede porvenir de glucolisis en situación postprandial o en ayuno por los primeros pasos
de la gluconeogénesis.
Ciclo del triacilglicerol
En situaciones de ayuno el glicerol 3-P proviene de las primeras reacciones de la gluconeogénesis, entonces,
tiene sentido de que en situación de ayuno haya síntesis de TAG si es un lípido asociado a la reserva energética?
Si, y es lo que se conocer como el Ciclo del Triacilglicerol y contempla que todo el tiempo hay síntesis y
degradación de TAG. Hay lipolisis y el 75% de los AG generados por la lipolisis en vez de ser utilizados como
energía en algunas ocasiones son reesterificados nuevamente en TAG en diferentes condiciones metabólicas.
Parte ocurre en el tejido adiposos y parte en el hígado. Este ciclo gasta energía en forma fútil (inútil, sin sentido)
a primera vista, pero la función de este ciclo es tener una reserva extra de energía en sangre en forma de AG o
de TAG unidos a la VLDL. Hay una cantidad apreciable que puede variar en situaciones de ayuno, postprandial,
de AG en circulación en forma de TAG pero SIEMPRE hay una reserva, por eso en un análisis de sangre hay
TAG medibles. Resumen → f(x) tener en circulación siempre una fuente de energía para que puedan ser usadas
por los tejidos en forma rápida.
La fuente de TAG requerida para la síntesis de los TAG puede venir y está regulada recíprocamente en tejido
adiposo e hígado complementándose en periodos de ayuno perfecto los glucocorticoides o en periodo
postprandial por efecto de la insulina.
172
Regulación de la síntesis de TAG
Esta fundamentalmente dada por la insulina, que es una señal que activa la glucolisis em el hígado (donde
mayor importancia adquiere esta síntesis) a nivel de la regulación de la fosfofructoquinasa I (enzima regulada
alostéricamente en forma + por la fructosa 2,6 biP, que aumentaba ante la señal de insulina). La insulina
también está activando al nivel de la acetil-CoA carboxilasa el primer paso de la síntesis de novo de AG.
Insulina en hígado → promueve glucolisis para formar acetil-CoA y la síntesis de AG a parti de acetil-CoA.
Posteriormente la esterificación en TAG.
Síntesis de fosfolípidos de membrana
Para esto se requiere la síntesis del armazón de la molécula que puede ser glicerol o esfingosina dependiendo del
glicerofosfolípido que se vaya a sintetizar, y la unión de AG a esta molécula por enlaces éster o amida
dependiendo también de la molécula del armazón. Posteriormente viene la adición de un grupo cabeza
hidrofílico unido al armazón por un enlace fosfodiéster y finalmente, algunas reacciones posteriores que alteran
o intercambian un poco la naturaleza de esa cabeza polar para dar los diferentes tipos de glicerofosfolípidos.
Síntesis de glicerofosfolípidos
Hay 2 enlaces fosfoésteres que forman parte de la molécula. El primero une el alcohol del OH del C3 del
diacilglicerol al acido fosfatídico, es una condensación como todo enlace éster entrega su fosfoéster con
liberación de 1 molécula de H2O, y otro de los OH del ácido fosfórico va a experimentar una reacción similar
con el alcohol proveniente del grupo polar (del grupo cabeza) que al principio se dijo que muchas veces son
alcoholes aminas polares. Eso es lo que forma el enlace fosfodiéster que es el que forma parte de la estructura
del glicerofosfolípido.
Para formar el glicerofosfolípido existen en la naturaleza 2 estrategias diferentes pero tienen en común que
siempre tiene que activar uno de los 2 OH que van a formar parte de la condensación por la unión de un
173
nucleótido de citidina, y después cuando se une el otro OH desplaza que estaba activando y la libera en forma de
citidina monofosfato (CMP). La estrategia en general de activar uno de los grupos que va a reaccionar es similar
a lo que ocurría en la síntesis de glucógeno, donde la glucosa que va a formar parte de la molécula polimérica
previamente era activada por unión de un nucleótido de uridina; así como la glucosa se activaba por UTP, estas
moléculas para formar el fosfodiéster se activan por CTP.
Se puede activar en la estrategia 1 en diacilglicerol, o se puede activar el grupo cabeza que va a entrar en la
estrategia 2. Estas estrategias ocurren así porque la estrategia 1 es una reacción que ocurre tanto en eucariotas
como en procariotas, estos tipos celulares comparten algunos fosfolípidos (4) pero no son exactamente los
mismos. Estos 4 fosfolípidos que comparten se sintetizan a través de la estrategia 1, mientras que los
fosfolípidos exclusivos de eucariotas tienen una segunda vía de biosíntesis, que es la estrategia 2 o estrategia de
recuperación.
ESTRATEGIA 1:
El primer paso consiste en la hidrolisis de CTP para liberar PPi y activar el P del C3 del ácido fosfatídico. El PPi
es una molécula de alta energía. La energía la aporta este PPi por la hidrolisis del mismo catalizada por la
pirofosfatasa. Una vez activado el diacilglicerol en forma de molécula CDP-diacilglicerol interviene la enzima
fosfatidilglicerol 3-P sintasa que condensa con glicerol 3-P a esta molécula y así formar fosfatidilglicerol, luego
de la hidrolisis de 1 P. Esta molécula fosfatidilglicerol es precursor de la cardiolipina (para el cual se produce la
condensación de una 2da molécula de fosfatidilglicerol) y del fosfatidilinositol (exclusivo de eucariotas con f(x)
en las vías de señalización).
174
ESTRATEGIA 2: síntesis de fosfatidilcolina y fosfatidiletanolamina
Es exclusiva de eucariotas, se sintetiza fosfatidilcolina y fosfatidiletanoelamina que son dos fosfolípidos

importantes en la membrana de eucariotas. La fosfatidilcolina es el fosfolípido más abundante.
Se basa en la activación de la colina y no del DAG, la activación mediada por CTP. Lo primero que ocurre es la
fosforilación de la colina por medio de la colina quinasa, formando fosfocolina. Este es sustrato de la CTP-
colina citidil transferasa, que cataliza una reacción similar a la vista anteriormente con liberación de pirofosfato,
el producto es CDP-Colina y se le añade DAG por medio de la CDP-colina-diacilglicerol fosfocolina transferasa
para formar fosfatidilcolina.
Con la fosfatidiletanolamina ocurre algo similar, esta también proviene de la dieta y se activa para formar
fosfatidilserina al agregársele serina, lo cual libera una etanolamina. Fosfatidiletanolamina en el hígado puede
sufrir una metilación en su amonio para generar fosfatidilcolina. El fosfatidilcolina y fosfatidiletanolamina
pueden generar fosfatidilserina por el reemplazo de serina como grupo cabeza polar. En el caso de
fosfatidilcolina, el agregado de serina libera la colina para la formación de fosfatidilserina.
También fosfatidilserina se puede descarboxilar para formar fosfatidiletanolamina, y esta se puede metilar a
fosfatidilcolina. Esto nos permite entender cómo en el hígado se puede realizar pool de fosfolípidos de
fosfatidiletanolamina, donde hay metalización específica para fosfatidilcolina a partir de fosfolípidos producidos
por la estrategia 1, es decir la activación del diacilglicerol por CDP y en este caso formar fosfatidilserina y
descarboxilarla para formar fosfatidiletanolamina o reemplazar el grupo cabeza de la serina por colina, para
formar fosfatidilcolina. Y a su vez, tanto etanolamina como colina provenientes de la dieta, pueden ser activados
por CTP para formar los intermediarios CDP-etanolamina o CDP-colina y condensarse con el glicerol para
formar los correspondientes fosfolípidos. Las dos estrategias contribuyen en mamíferos para generar el pool
sobre todo en el hígado, ya que también los fosfolípidos son lípidos participantes en la formación de
lipoproteínas que van a participar en el transporte de lípidos.
175
Síntesis de esfingolípidos
El esqueleto central en estos es un derivado de la esfingosina, que es una amina de cadena larga, y es el
precursor de cerebrósidos y gangliósidos.
Lo primero que ocurre es la condensación de palmitoil CoA, que es la molécula que le va a aportar la cadena
hidrocarbonada, se condensa con la serina para formar la beta-cetoesfinganina. En el C3 ahora hay un grupo
cetona, que es un intermediario que luego es reducido a alcohol con ayuda de una molécula de NADPH y forma
esfinganina o esfingosina. Esta es la molécula central. El paso siguiente es la acetilación con un Acil CoA, de
esta molécula de esfinganina, es decir que se une otro ácido graso, formando otro intermediario, el N-
acilfinganina, que inmediatamente es desaturado por una oxidasa de función mixta en la cadena
hidrocarbonada, así se forma la ceramida.
Esta ceramida puede seguir dos caminos.
- Puede incorporar azucares para formar cerebrósidos, estos azúcares entran activados unidos a UDP.
- La otra opción es recibir colina a expensas de fosfatidilcolina, lo cual va a liberar diacilglicerol para formar
esfingomielina.
Estos lípidos están en varios tejidos pero son de suma importancia en las membranas de neuronas y de tejido
nervioso central.
Síntesis de cerebrósidos
Ceramida puede recibir azúcares activados por UDP que puede ser galactosa para formar galactolipidos,
específicamente galactocerebrósidos, o puede recibir glucosa para formar los glucocerebrósidos,
específicamente glucocilceramidas. Estas ceramidas, una vez que se une la molécula de glucosa para dar el
cerebrósido, permite que se unan varias azucares activadas para formar los gangliósidos.
Síntesis de gangliósidos
Son los esfingolípidos más complejos porque tienen otros azucares que tienen que unirse a la estructura del
cerebrósido. Son varios tipos de azucares como glucosa, galactosa, N-acetil galactosamida, etc. Al menos uno
de estos azucares es un azúcar acido, como el ácido siálico, las azucares se unen de forma secuencial para
formar el gangliósido y forman estos esfingolípidos complejos que son muy abundantes en el SNC.
Constantemente el SNC se encuentra en síntesis y degradación de estos azucares, el lugar donde se degradan por
176
glucosidasas específicas son los lisosomas. Algunas deficiencias en el funcionamiento de los lisosomas
provocan varias enfermedades asociadas al metabolismo de los gangliósidos, como la enfermedad de Tay Sachs,
en la cual se encuentra una abundancia exacerbada de gangliósidos, porque al tener una alteración en el
funcionamiento normal de los lisosomas, no se pueden degradar estos gangliósidos y se van acumulando hasta
que provocan este tipo de patologías que son incompatibles con la vida.
Degradación de fosfolípidos
En general cada uno de los enlaces de condensación que se generan por conjugación pueden ser hidrolizados
para liberar las moléculas que lo forman. Cada enlace hidrolizable es catalizado por las fosfolipasas, que son
enzimas específicas para cada enlace.
- La fosfolipasa A1, es la encargada de degradar el enlace éster del C1.
- La fosfolipasa A2 es la encargada de degradar en el C2, y produce precursores de lípidos importantes.
- La fosfolipasa C es la encargada de romper enlaces para generar IP3 a partir de fosfatidil inositol.
- La fosfolipasa D rompe el mismo fosfodiéster pero del otro lado de la molécula.
Eicosanoides
Los eicosanoides son lípidos derivados de ácidos grasos de 20C. El ácido araquidónico es liberado por acción de
la fosfolipasa A2 desde los fosfolípidos de membrana, aunque también se podría producir por acción de las
lipasas del DAG en esa posición. Las protanglandinas, tromboxanos y leucotrienos son eicosanoides
importantes, tienen funciones y vías de síntesis disímiles. Las prostaglandinas tienen funciones variables según
el tejido donde se producen, en general se producen en el momento en que se van a utilizar. No tienen función
endócrina, por lo que se utilizan localmente, es decir, en donde se producen.
177
Síntesis de eicosanoides
El ácido araquidónico puede ser removido del fosfolípido por acción concertada por fosfolipasa A2 y fosfolipasa
C, para dar ácido araquidónico e inositol o fosfoinositol, también ese fosfolípido degradado por la fosfolipasa C
puede dar DAG, que puede finalmente dar acido fosfatídico que mediante la fosfolipasa A2 libera el
araquidónico y el ácido lisofosfatídico. También puede a partir de las lipasas específicas del DAG liberarse
acido araquidónico y monoacilglicerol. Así la vía de síntesis de ácido araquidónico a partir de una misma
familia de fosfolípidos puede ir variando secuencialmente por la acción de diferentes fosfolipasas para dar
además de ácido araquidónico otros precursores que pueden ser importantes dependiendo del tejido.
Síntesis de prostaglandinas y tromboxanos
Las prostaglandinas y los tromboxanos tienen una vía de síntesis común, denominada ruta cíclica, se le
denomina así porque está catalizada por una enzima COX (ciclooxigenasa).
El precursor es el fosfolípido que tiene acido araquidónico en posición 2, la fosfolipasa libera ese acido
araquidónico, el cual es el sustrato de las COX. Hay dos diferentes COX que generan prostaglandinas diferentes.
- Cox1: Genera prostaglandinas que regulan la secreción de mucinas gástricas.
- Cox2: Son las prostaglandinas que intervienen en los procesos de dolor, inflamación y fiebre. Estas son
inhibidas por fármacos como aspirina e ibuprofeno, produciendo efecto antitérmico o antiinflamatorio porque
impiden la formación de estas prostaglandinas.
La formación de tromboxanos también es inhibida por las aspirinas, el cual es utilizado para evitar la formación
de trombos. Los tromboxanos son sintetizados en plaquetas, favorecen la constricción de vasos sanguíneos y la
agregación plaquetaria.
La síntesis comienza desde el fosfolípido con ácido araquidónico, el cual por medio de la fosfolipasa A2 libera
un lisofosfolipido y forma araquidónico, y esta molécula mediante la actividad ciclooxigenasa de la COX se
transforma en PGG2, luego mediante la actividad peroxidasa de la COX se forma PGH2, molécula que
dependiendo de si interacciona con reductasas e isomerasas va a formar prostaglandinas, mientras que si
reacciona con tromboxano sintasa forma tromboxano.
Inhibidores de COX clásicos
La aspirina provoca la acetilación de una molécula de serina específica que forma parte del sitio activo de la
COX (ambas isoformas), así impide que la enzima pueda catalizar. Esto es un ejemplo de inhibidor irreversible.
El ibuprofeno o naproxeno, son moléculas que tienen estructura bastante similar, por eso actúan como
inhibidores competitivos de los sitios activos, así que desplazan al verdadero sustrato y así disminuyen los
niveles de prostaglandinas y tromboxanos.
178
Síntesis de leucotrienos
Estas son moléculas que favorecen o producen reacciones alérgicas y producen shocks anafilácticos. Esta vía es
catalizada por la lipooxigenasa, que también utiliza O2. El precursor es el ácido araquidónico, pero ahora es
sustrato de una enzima diferente, esta vía es denominada lineal, y la enzima es la lipooxigenasa, la cual cataliza
la formación de diferentes leucotrienos.
Resumen: Los eicosanoides son lípidos cuyos precursores son AG de 20C, pueden formarse a partir de los
fosfolípidos por acción de la fosfolipasa A2, o de glicéridos lipasas específicas de DAG y son precursores de
leucotrienos (por lipasas lipooxigenasas), y también como sustrato de las COX y de las prostaciclinas, y
tromboxanos sintetasas de las prostaciclinas y de los tromboxanos.
Síntesis de colesterol y metabolismo de lipoproteínas
Colesterol
Esta molécula regula la permeabilidad de las membranas biológicas, es una molécula anfipática debido a la
presencia del OH en su carbono 3, el resto de la molécula es totalmente hidrofóbica. Ese OH le permite
relacionarse con grupos polares y el resto de su estructura con moléculas apolares. Tiene una parte rígida
otorgada por el anillo del ciclopentanoperhidrofenantreno, y tiene una cola hidrofóbica que le otorga cierta
movilidad. La totalidad de sus carbonos vienen del acetato, entonces es una molécula muy compleja pero que se
sintetiza de una muy simple de dos carbonos.
Síntesis de colesterol
Se puede dividir en 4 etapas que permiten tener un panorama global de la síntesis completa:
1. Formación del mevalonato, que es el primer intermediario importante del colesterol, este genera por
condensación de 3 moléculas de acetato.
179
2. Descarboxilación de la molécula de mevalonato de 6C a una molécula de 5C activada, que son los isoprenos
activados por pirofosfato, estas son las unidades que van a empezar a condensarse para formar un
intermediario de 30C.
3. 6 moléculas de isoprenoides de 5C se convierten en escualeno.
4. Este último paso consiste en la ciclación de la molécula lineal de escualeno en un intermediario que es el
naldosterol, y posteriormente se termina de convertir en colesterol por una serie de 20 reacciones en este último
paso.
La síntesis de colesterol ocurre en todos los tejidos porque todas las células lo requieren para regular la
permeabilidad y fluidez. El colesterol es intermediario de otras moléculas importantes, principalmente
vitaminas, por eso hay tejidos como el hígado que necesitan de ciertas moléculas derivadas del colesterol, en los
cuales la síntesis del mismo es muy activa.
Etapa 1: Síntesis de mevalonato a partir de 3 Acetil-CoA
- La primera reacción es la condensación de 2 Acetil-CoA para formar el acetoacetil-CoA, reacción catalizada

por la tiolasa.
- La segunda reacción es la condensación de una tercera molécula de Acetil-CoA al acetoacetil-CoA para formar
la HMG-CoA. Estas dos reacciones ocurren en el citosol.
180
- La primera etapa finaliza con la acción de una enzima de membrana, así que la vía continúa en la membrana
del REL, esta enzima es la HMG-CoA reductasa que lo que hace es reducir el grupo ácido del C5 del
mevalonato en un grupo alcohol. Se utilizan dos moléculas de NADPH en esta etapa porque para pasar de un
grupo ácido a un alcohol es necesario un intermediario carbonilo, así que se necesitan dos equivalentes de
reducción. Esta enzima es la enzima clave en la regulación de la síntesis de colesterol.
Hay dos pooles de HMG-CoA, el anteriormente visto es el citoplasmático, donde es sustrato de la HMG-CoA
reductasa para formar mevalonato, mientras que el pool mitocondrial es sustrato de la HMG-CoA liasa para
formar Acetil CoA y acetoacetato, que es uno de los cuerpos cetónicos que luego se reduce a beta
hidroxibutirato que es otro cuerpo cetónico.
Etapa 2: Conversión de mevalonato en dos isoprenos activados
El mevalonato debe ser fosforilado, por un lado utilizando dos ATP para formar el intermediario pirofosfato que
es el 5-pirofosfomevalonato, luego una tercera molécula de ATP fosforila el C3 de este intermediario, que es lo
que va a facilitar la salida del grupo carboxilo en forma de CO2. Es decir, es necesario el 3-fosfo-5-
pirofosfomevalonato como estrategia para descarboxilar, esto facilita la salida de los carbonos por ser grupos
más electronegativos. Con la salida de este CO2 se genera el intermediario isopentenil pirofosfato. Luego hay
una reacción de isomerización para formar el dimetilAlil pirofosfato. Estas dos últimas moléculas son las que
van a continuar con la síntesis de colesterol.
181
Etapa 3: Condensación de 6 isoprenos activados para formar escualeno
Son 6 moléculas de isoprenos activados que tienen cada una 5C y forman la molécula de escualeno de 30C. La
estrategia consiste en condensaciones con salida de pirofosfato, esta molécula de alta energía saliente es la que
asegura la energía suficiente para que la reacción de condensación se lleve a cabo para formar primero geranil
pirofosfato que es una molécula de 10C activada con pirofosfato y luego la condensación de una segunda
molécula de isopentinil pirofosfato, también con liberación de pirofosfato hidrolizado por una pirofosfatasa para
obtener la energía para que ocurra la reacción y forma el intermediario farnesil pirofosfato, que es un
isoprenoide de 15C. La última etapa es la condensación de dos farnesil pirofosfato para formar el escualeno,
esto implica una reducción porque el escualeno es una molécula totalmente reducida mientras que el farnesil
pirofosfato está oxidado, así que se utiliza una nueva molécula de NADPH para reducir al farnesil pirofosfato y
formar el escualeno.
182
Etapa 4: Ciclación del escualeno en el núcleo esteroideo
Estos esteroles tienen un alcohol, de ahí su nombre. Esta molécula de alcohol se forma por una enzima que
comparten todos los organismos eucariotas que es la escualeno monooxigenasa, que es una enzima de
membrana de retículo que utiliza O2 y NADPH para generar un intermediario epóxido, el escualeno 2,3
epóxido. Ese epóxido se hidroliza luego para formar un alcohol en el C3, y en animales luego se continúa una
serie de pasos de ciclación hasta llegar al colesterol.
Gasto energético de la síntesis de colesterol
Es una ruta costosa para la célula. En la etapa 2 era requerido hidrolizar 3 ATP para formar el isopreno activado,
que se va a condensar, pero como se condensan 6 isoprenos activados, ese gasto de 3ATP hay que multiplicarlo
por 6, así se consume en total 18 ATP. En la etapa 1 se utilizaban 2 NADPH para formar el mevalonato, y como
son 6 moléculas de mevalonatos las requeridas son 12 NADPH consumidos en la primera etapa. Luego se
consume un NADPH en la etapa 3 y una en la etapa 4. Así en total se consumen 14 moléculas de NADPH.
183
Formación de ésteres de colesterol
Una vez que el colesterol es sintetizado como molécula anfipática, esta molécula debe ser almacenada, y la
forma más útil de hacer esto es mediante la creación de moléculas totalmente hidrofóbicas, ya que son más
fácilmente empaquetables en las gotas lipídicas celulares y también para las lipoproteínas que las transforman.
Esto se logra esterificando la molécula de colesterol, es un enlace éster en su oxidrilo del C3, el dador del ácido
graso para esterificar este colesterol es un acil-CoA activado y es catalizado por la enzima ACAT, esta está
activa en las células que almacenan colesterol en forma de ésteres de colesterol.
También puede ocurrir en las HDL la formación de ésteres de colesterol por medio de otras enzimas, las LCAT,
en este caso el dador es un fosfolípido, que es la fosfatidil colina.
Lipoproteínas
Son los encargados de transportar los lípidos insolubles en agua en la circulación, bien sea linfática o sanguínea.
Los quilomicrones transportan lípidos de la dieta, principalmente TAG y colesterol. La estructura de todas las
lipoproteínas son similares, son esféricas con un núcleo muy hidrofóbico compuesto fundamentalmente por los
lípidos más apolares como los TAG y los esteres de colesterol.
Los lípidos más polares que son los fosfolípidos se ubican formando monocapas sobre la superficie donde
también se insertan moléculas de colesterol libre. Las apoproteínas son las que van a estar sobre la superficie y
van a ser reconocidas o a intercambiarse entre las diferentes lipoproteínas. Las apoproteínas son variables, cada
184
una de las lipoproteínas están enriquecidas en algunas apoproteínas en particular, y eso les permite cumplir su
función.
A pesar de que todas son esféricas tienen distintos tamaños, y esto tiene que ver con la relación lípido proteína
que tiene cada una de ellas. Las lipoproteínas con mayor contenido lipídico sobre las proteínas son menos
densas, y el ejemplo más claro es el quilomicrón, que tiene mayormente lípido que proteína.
Luego otras proteínas tienen más proporción de proteínas como la VLDL, que tienen muy baja densidad, y a
diferencia de los quilomicrones los lípidos que transporta son de origen endógeno y no exógeno, además el
contenido de liquidos varía también. Las LDL también tienen baja densidad, pero el contenido proteico aumenta
un poco en comparación a las dos anteriores. También sus ésteres de colesterol son de origen endógeno. Las
HDL son las lipoproteínas con mayor proporción de apoproteína, lo que le confiere mayor densidad.
Apolipoproteínas
Hay varios tipos de apoproteínas, algunas de ellas están asociadas a una sola lipoproteína, pero otras comparten
más de una lipoproteína. Hay un intercambio de lipoproteínas entre las diferentes apoproteínas en circulación, y
ese intercambio es muy importante para el correcto cumplimiento de su función.
Algunas como la apo A, apo C y apo E están presentes en más de una lipoproteína, por lo que son transportadas
en circulación y cedidas una a otra, lo que le permite una función de reconocimiento en algunos tejidos
particulares para cada una de estas lipoproteínas.
En la imagen se ve una presentación global de las principales funciones y que lípidos transportan cada una de las
lipoproteínas.
185
Los quilomicrones se sintetizan en el intestino, transportan lípidos dietarios, específicamente TAG y colesterol.
Este es un tipo de transporte exógeno. En los capilares de los tejidos que captan estos lípidos, como el tejido
adiposo, musculo, o glándula mamaria, una lipoproteína lipasa específica se activa para captar los TAG e
internalizarlos en forma de AGs libres que van a tener diferentes funciones en cada tejido. En musculo por
ejemplo se usan para obtener energía mientras que en glándula mamaria y tejido adiposo se usan para
almacenarlos como TAGs. El remanente de quilomicrón es captado por el hígado.
Las VLDL son sintetizadas por el hígado y transportan TAG y colesterol de origen endógeno, igualmente son
reconocidos por los tejidos a donde son transportados, las lipoprotein lipasas son activados y TAG
internalizados. Los remanentes de LDL tienen dos caminos, uno es que vuelvan a ser internalizados por el
hígado y el otro es que vayan perdiendo su contenido de TAG y se enriquezcan en colesterol, que es el otro
lípido que transporta. Ese enriquecimiento de colesterol hace que la VLDL se vuelva LDL y que sea la fuente de
colesterol para tejidos extrahepáticos que necesiten internalizar ese colesterol. Luego de cumplir esa función las
LDL son internalizadas por receptores específicos en el hígado. Este es un transporte endógeno.
El ultimo es el transporte reverso de colesterol, que es llevado a cabo por las proteínas de alta densidad, que
son las HDL, que se sintetizan en el hígado y en el intestino y recorren los tejidos extrahepáticos, recolectando
los excesos de colesterol y luego los llevan de forma segura al hígado.
Metabolismo de los quilomicrones
En situaciones de ayuna los quilomicrones son prácticamente indetectables, en cambio en situaciones

postprandial son activos, estos contienen dos apoproteínas, que son las apo B48 y la apo A, y van a ir por linfa a
la circulación general, transportando gran proporción de triglicéridos y colesterol provenientes de la dieta, o
exógenos. En la circulación general comienza el intercambio de apoproteínas con otras proteínas,
específicamente con la HDL, que le cede apoproteínas importantes que son la apo E y la apo C, son
importantes porque con estas el quilomicrón puede descargar su contenido lipídico, sin estas apoproteínas el
quilomicrón naciente no puede cumplir su misión.
La apo C, específicamente CII le permite activar a la lipoprotein lipasa de los capilares de los tejidos
extrahepáticos donde va a descargar su contenido lipídico, estos tejidos son principalmente adiposo, muscular y
cardiaco. Esto ocurre en periodos postprandiales, por lo que hay secreción de insulina, entonces la apo C II junto
a la insulina activan de forma importante a la lipoprotein lipasa de estos tejidos y permite la hidrólisis de esos
TAG que son transportados y como ácidos grasos internalizados a esos tejidos bien sea para ser utilizados como
fuente de energía o para ser reservados como TAG de nuevo.
Ese quilomicrón remanente sigue interaccionando con HDL en circulación, de manera que le devuelve la apo
C que ya no necesita porque ya descargó su contenido, también libera la apo A y se queda con la apo B-48 y la
apo E. La apo E es la que le va a permitir ser reconocida por receptores específicos del hígado para ser
internalizadas en moléculas hepáticas.
El quilomicrón remanente tiene un pequeño contenido de TAGs que no pudo descargar en los tejidos
extrahepáticos, y también un contenido mayor de colesterol que va a ser internalizado por el hígado, así el
186
hepatocito forma parte del pool generado de colesterol y los TAGs formaran parte del pool general de ácidos
grasos porque se hidrolizan.
Metabolismo de VLDL, IDL y producción de LDL
Las VLDL se sintetizan en el hígado y transportan TAG y colesterol que son de origen endógeno. Los VLDL se
sintetizan como VLDL naciente, que son lipoproteínas conteniendo la apo B-100, la apo E y la apo C como
apoproteínas. Y en la circulación interacciona con HDL que también lleva apo C y E y además apo A, esta le
cede apo C y apo E a la VLDL. Esta característica le permite a la VLDL ser reconocida por los quilomicrones
por los tejidos extrahepáticos, donde activa a la lipoprotein lipasa por la apo C II y descarga el contenido de
TAGs en forma de AGs.
La molécula remanente de VLDL es la IDL y va a devolver a la HDL la apo C, está formada por un núcleo de
lípidos como TAGs y colesterol pero con menor contenido de triglicéridos porque ya fueron descargados y
mantiene a la apo B100 y a la apo E como apopoproteínas. Esto permite que sean internalizadas por el hígado
porque el mismo la reconoce mediante un receptor específico a la apo E, pero en lugar de ir al hígado podría
también seguir descargando el contenido de TAGs y transformarse en la proteína de baja densidad o LDL. La
LDL está enriquecida en colesterol y a través de receptores específicos en tejidos extrahepáticos, si esas células
en tejidos extrahepáticos están necesitando colesterol van a exponer los receptores de LDL en su membrana y
estas LDL van a ser internalizadas en esos tejidos.
Las moléculas de LDL que no son internalizadas por tejidos extrahepáticos van a ser internalizadas al hígado y
ese colesterol es ingresado al mismo para formar parte del pool de colesterol. Los receptores de LDL tanto del
hígado como de tejidos extrahepáticos van a ser expuestos en sus membranas cuando el contenido de colesterol
sea bajo y necesite ser internalizado.
187
Metabolismo de HDL en el transporte inverso de colesterol
Las lipoproteínas de alta intensidad se sintetizan en el hígado o en el intestino delgado en forma de proteínas
discoidales, es decir que no son esféricas sino planas, porque sus lípidos fundamentales son los fosfolípidos que
forman una bicapa de fosfolípidos en ese disco, y además tienen un contenido mínimo de colesterol. Así la
cantidad de lípidos de la HDL naciente es muy bajo y enriquecido en fosfolípidos pero sí tiene las apoproteínas
y enzimas importantes para cumplir su función.
La apo fundamental es la apo A, y sus enzimas importantes son la LCAT que es una enzima que participa en la
esterificación de colesterol, y también tiene la CETP que es la proteína transportadora de esteres de colesterol.
En este conjunto la HDL entra en la circulación y comienza a recorrer los tejidos extrahepáticos donde lo que
hace es captar el exceso de colesterol de esos tejidos. La molécula de colesterol del tejido con exceso es
presentada en la membrana a través de transportadores ABC, así los HDL pueden captar esos colesteroles y
por acción de LCAT que es activada por la apo A, se empieza a esterificar el colesterol y a introducirlo o
almacenarlo en el interior de esas moléculas. Esto hace que a medida que las HDL van recorriendo tejidos
extrahepáticos captando colesterol y esterificándolo por LCAT activado por apo A, comienza a tomar su forma
esférica.
Otra función importante de la HDL es que tiene la capacidad de intercambiar lípidos con otras lipoproteínas,
específicamente la función importante que cumple la proteína transportadora de ésteres de colesterol (CETP) es
ceder o intercambiar estos esteres de colesterol con VLDL y sus derivados por triglicéridos, esto permite que la
HDL pueda almacenar más colesterol, porque pasa parte de su colesterol esterificado a otras lipoproteínas, así
que va aumentando su capacidad de almacenaje de esteres de colesterol.
Cuando la molécula de HDL se encuentra rica de colesterol, esteres de colesterol y fosfolípidos, que son los
constituyentes con los cuales fue sintetizada, vuelve al hígado. Los receptores de HDL del hígado son diferentes
a los receptores de LDL, cuya expresión depende del contenido de colesterol endógeno, en el caso del hígado
los receptores de HDL no están sujetos a los contenidos de colesterol endógeno, esto permite que la capacidad
de captación de colesterol del hígado a través de las HDL sea ilimitada, estos receptores del hígado son los
receptores scavengers (SR).
Entonces, todo el colesterol en exceso es captado por el hígado a través de los SR y posteriormente
transformados en ácidos biliares que van a ser secretados en la bilis.
Todas las lipoproteínas se relacionan entre sí en circulación, para intercambiarse apoproteínas que le abren o
cierran puertas en los distintos tejidos.
188
La HDL tiene la capacidad de ceder apo CII al quilomicrón o al VLDL para que estos puedan ser reconocidos,
activar a las lipoprotein lipasas e ingresar TAGs a tejidos extrahepáticos, ya sean de origen exógenos o
endógenos.
La capacidad de intercambiar lípidos que transportan entre la HDL, que cede esteres de colesterol por función
de la CETP, a la VLDL, LDL y dervados. También la captación de triglicéridos.
También el colesterol en tejidos extrahepáticos entra por receptores de LDL, es esterificado por la ACAT y
almacenado o sintetizado de novo, esto mediante el ofrecimiento de colesterol a las HDL en los tejidos
extrahepáticos.
Captación de colesterol por endocitosis mediada por receptor
Es mediada por el receptor LDL, el cual es expuesto en tejido extrahepático y en hígado cuando la
concentración de colesterol endógeno es baja. Cuando esto ocurre se expone en sus membranas plasmáticas una
gran cantidad de receptores de LDL que reconocen a la ApoB-100 y endocitan al complejo lipoproteína-receptor
dentro de endosomas, que dentro de la célula se fusionan con los lisosomas y se produce la degradación de las
proteínas en los a.a que los componen, de los TAG dejando ácidos grasos y sobre todo del colesterol que es
almacenado en esteres de colesterol por activación de la enzima ACAT.
La característica que tiene este sistema es que los receptores de LDL no se degradan sino que se almacenan en
vesículas en el Golgi, de manera que si se sigue necesitando de colesterol, estos vuelven a ser expuestos para
seguir captando el colesterol de la LDL.
189
Las partículas de HDL es importante internalizarlas correctamente porque es el “colesterol bueno”, el que haya
una buena cantidad de este colesterol implica que hay una eficiente remoción del exceso de colesterol de las
células extrahepáticas hacia el hígado, donde es excretado. El receptor de HDL siempre está expuesto en el
hígado.
En cambio si el colesterol está en exceso en partículas de LDL, se le conoce como “colesterol malo”, porque
indica un problema que puede estar generado por diferentes causas, como la hipercolesterolemia familiar, donde
hay una mutación en el gen del receptor de LDL, por lo que no son expuestos en membrana y la partícula de
LDL no es correctamente internalizada, esto lleva a que el colesterol se encuentre mucho tiempo en circulación,
en un ambiente muy oxidante donde se terminan oxidando, dejan de cumplir su función, no son reconocidas por
los receptores, y al estar tanto tiempo en circulación comienzan a interaccionar con endotelios de algunos tejidos
acumulándose en las paredes del endotelio, como en las arterias coronarias, y finalmente empiezan a producir
ateromas, que son tejidos que pueden provocar varias patologías graves.
Regulación en respuesta a la concentración de colesterol endógeno
Es muy importante para todas las células regular en extremos no muy amplios la concentración de colesterol
endógeno, porque va a hacer que cumpla bien su función o que no lo haga, porque es lo que regula la
permeabilidad de la membrana. El colesterol que se expone en la membrana está en íntimo contacto con
vesículas de retículo endoplasmático al Golgi, es un sistema muy fino que permite censar la cantidad de
colesterol que hay dentro de la célula.
Ese sistema está formado por varias proteínas
- SCAP, tiene sitios de unión a los esteroides y está interaccionando al SREBP.
- SREBP tiene un dominio citosólico que es un factor de transcripción.
Si la concentración de colesterol es baja este complejo de proteínas migra desde el retículo al Golgi, y en el
Golgi son activadas, sobre todo la SREBP, por dos proteasas específicas que la clivan y liberan la porción
soluble que migra hacia el núcleo, entra por el poro nuclear y reconoce sitios específicos en el ADN que
permiten activar la transcripción de genes relacionados con el metabolismo de colesterol, como el receptor de
LDL que permite la captación a través de las lipoproteínas y también permite aumentar la síntesis de colesterol
endógeno.
La proteína SCAP en niveles de colesterol bajo no reconoce esteroles, por lo que migra el sistema de membrana
al Golgi, y ahí es activado por dos proteasas que son serina proteasa y metalo proteasa que van a liberar la
fracción soluble de SREBP y la envía al núcleo. Esto activa la expresión de niveles de HMG-CoA reductasa y
del receptor de LDL, aparte de otras proteínas relacionadas con el metabolismo lipídico, fundamentalmente para
incrementar los niveles de colesterol, bien sea por síntesis endógena o por captación de colesterol unido a LDL.
190
En el caso de que haya altos niveles de colesterol, la regulación es distinta.
En este caso si hay una abundancia de colesterol va a ser expuesto en membrana, y como el RE está
interaccionando con esa membrana plasmática, el colesterol va a insertarse en esa membrana del retículo y la
presencia de colesterol o esteroles asociados interaccionando con la SCAP, hace que se reclute la proteína
Insig, y este complejo impide que la SREBP sea clivado y que migre el factor de transcripción al núcleo,
entonces en presencia de colesterol el complejo se mantiene unido al RE y no hay activación de ninguno de los
genes, ni de la enzima HMG-CoA reductasa ni del receptor de LDL.
Regulación sobre la degradación de la HMG-CoA reductasa
No solo en presencia de colesterol se impide la transcripción de los genes para que haya más enzimas sino que
las enzimas ya existentes son degradadas.
El mismo sistema de proteínas está interactuando con proteínas que ubiquitinizan, entonces cuando el colesterol
interacciona con la HMEG-CoA reductasa unida al sistema de membrana la envía a degradación, sucede porque
el exceso de colesterol por un lado interacciona con la proteína SCAP y por otro lado interacciona con un
dominio sensible a señales de degradación de la proteína HMG-CoA reductasa; es esa última interacción la que
recluta a la proteína Insig que estaba en ese sistema, y no solo impide la liberación del factor de transcripción,
sino que además activa a las enzimas que ubiquitinizan, y ubiquitinizan a la HMG-CoA reductasa haciendo que
finalmente sea degradada, así se elimina la enzima ya sintetizada para que no haya más síntesis de colesterol
endógeno.
191
Regulación de la HMG-CoA reductasa
Esta regulación controla los niveles de colesterol endógeno. La enzima que cataliza la formación de mevalonato
a partir de HMG-CoA es regulada por más de una vía,
La primera es la carga energética, esto activa a la AMPK cuando la concentración de ATP es baja, esta es una
quinasa especifica que se activa a baja carga energética, y esta enzima fosforila un residuo especifico de la
HMG-CoA reductasa y la inactiva, es una regulación covalente.
El glucagón frena la vía sintética de todos los lípidos por fosforilación.
La insulina estimula la biosíntesis de los lípidos endógenos, entre ellos el colesterol, por activación de una
fosfatasa específica que libera ese fosfato de la HMG-CoA reductasa y la activa.
Los niveles de colesterol intracelular son otro factor de regulación, si son altos en la célula van a activar a la
ACAT, todo el colesterol en la célula debe ser esterificado y almacenado en forma de éster de colesterol.
El colesterol y sus derivados impiden la transcripción de receptores de LDL, entonces cuando hay acumulación
de colesterol en la célula se va a inhibir la transcripción de receptores de LDL, y también como ya se describió,
los receptores de LDL ya sintetizados no van a ser expuestos en la superficie porque el colesterol endógeno
acumulado impide el correcto recambio del receptor de LDL.
El colesterol intracelular estimula la proteólisis de la HMG-CoA reductasa, impidiendo la correcta liberación de

SREBP para la transcripción de HMG-CoA reductasa, y se estimula la proteólisis de las ya presentes.
También existen drogas que actúan como inhibidores de HMG-CoA reductasa, conocidas como estatinas en
forma genérica, estas moléculas tienen una estructura similar al sustrato, así que actúan como inhibidor
competitivo del HMG-CoA reductasa. Hay un efecto secundario de las estatinas, porque la HMG-CoA reductasa
genera mevalonato que es el precursor de los isopentinilos activados, y estos son precursores de otros
metabolitos como las ubiquinonas de la cadena transportadora de electrones, así que el uso constante de
estatinas también inhibe la síntesis de estas quinonas, así que los pacientes que las usan tienden a sentir fatiga
muscular constante.
Otra estrategia en pacientes con colesterol alto es el impedir la absorción de colesterol exógeno, en ese caso se
da una serie de drogas como resinas que lo que hacen es captar el colesterol de la dieta e impedir su correcta
absorción por el intestino, esa unión de la resina con colesterol se excreta por materia fecal, así se impide la
captación y absorción de colesterol exógeno. Muchas veces se combinan estatinas y estas resinas.
Excreción de colesterol
El colesterol no se degrada a CO2 y H2O como sí lo pueden hacer otros lípidos, en cambio es excretado. El
exceso de colesterol es transportado por HDL al hígado y este sí lo puede eliminar en forma segura, o excretado
192
en forma de heces o en mayor proporción como precursor de sales biliares, que son los productos metabólicos
más importantes del colesterol. Además puede formar moléculas importantes como las hormonas esteroideas,
vitamina D3 y otras.
Los ácidos biliares y sales biliares son sintetizados en el hígado como sales primarias y se modifican en el
intestino para dar sales secundarias. Se almacenan en la vesícula biliar y son excretadas luego de la ingesta de
cada comida.
La circulación enterohepática sirve de suministro para las necesidades diarias.
Formación de sales biliares
El exceso de colesterol en el hígado es transformado en ácido cólico por una enzima específica que es activada
alostéricamente por el sustrato (colesterol) e inhibida alostéricamente por el producto (ácido cólico), ese ácido
cólico forma las sales biliares por unión de su grupo ácido a un grupo amino proveniente de la glicina o de la
taurina para formar las dos sales biliares más abundantes.
En la siguiente imagen hay un resumen de la síntesis y degradación de los principales lípidos celulares.
193
Las recalcadas son las vías vistas en este apunte.
194
Mecanismos genéticos básicos
Dogma central de la biología molecular que tiene en cuenta el flujo de información en sistemas biológicos como
la información contenida en el ADN se replica para transferir a las células hijas, como esa información del ADN
se transcribe a ARN y luego se traduce a proteínas.
➔ Excepción al dogma: Transcriptasa reversa. No toda molécula funcional codificada en el ADN es

solamente proteínas ya que se encontraron ARNs con f(x) catalítica.
Se divide a los MGB en: metabolismo del ADN, metabolismo del ARN y síntesis de proteínas.
TEMAS A REPASAR
Metabolismo del ADN: Estructura y composición del ADN, Replicación en eucariotas: características,
mecanismo, Diferencias del mecanismo de replicación e/ eucariotas y procariotas (coordinación con el CC,
polimerasas, rol de los telómeros), Daño en el ADN: Clasificación, alteraciones espontaneas, agentes que causan
daño y mecanismos de reparación, Mutaciones: Naturaleza molecular, clasificación, consecuencias.
Metabolismo del ARN: Diferencias estructurales con ADN y distintos tipos de ARN, Mecanismos de
transcripción en eucariotas, Procesos co-transcripcionales y post transcripción.
Síntesis proteica: Código genético, Procesos de traducción, Inhibidores de transcripción y traducción, Destino
y degradación de proteínas.
Estructura y composición del ADN
El ácido desoxirribonucleico es un ácido nucleico con instrucciones génicas para el desarrollo y funcionamiento
de todos los organismos vivos y algunos virus, responsable de su transmisión hereditaria. Su f(x) principal es el
almacenamiento a largo plazo de información. Muchas veces el ADN es comparado con un plano, o una receta,
o un código, ya que contiene las instrucciones necesarias para construir otros componentes de las células como
las proteínas y las moléculas de ARN. Los segmentos de ADN que llevan esta información son llamados genes,
pero las otras secuencias de ADN tienen propósitos estructurales o toman parte en la regulación del uso de esta
información.
195
Mecanismos de reparación del ADN
El ADN es una molécula muy sensible que puede sufrir una gran variedad de daños
• Por agentes exógenos, como la luz UV, radiaciones ionizantes, químicos mutagénicos; o
• Por causas endógenas como las oxidaciones, alquilaciones, desaminaciones, perdida de bases, errores
en la replicación.
Existen cerca de 150 genes humanos que participan en la reparación del ADN, y gracias a estos sistemas de
reparación, solo 1 de cada 1000 lesiones se convierten en una mutación.
Tipos de daño del ADN
• Apareamientos incorrectos
• Daño espontaneo del ADN: tautomerizacion
• Bases anormales
• Desaminación y depurinación
• Daño por agentes químicos y oxidativos
• Ausencia de bases
• Lesiones del esqueleto
• Daño por radiaciones: dímeros de pirimidinas y rotura de enlaces covalentes
Las células tienen mecanismos de reparación para corregir la mayoría de estas modificaciones.
Se pueden encontrar apareamientos incorrectos que surgen de la incorporación ocasional de nucleótidos

incorrectos. Si bien la ADN polimerasa puede solucionar este tipo de error ya que cuenta con la f(x) exonucleasa
3’→5’ que es la función correctora de pruebas.
Uno de los errores mas frecuentes en la replicación surge de la tautomerizacion. La tautomerización de las
bases nitrogenadas consiste en el equilibrio entre las formas amino e imino y ceto y enol, así produce
apareamientos incorrectos. Por ej: la adenina puede existir en su forma amino o en su forma tautomerica de
imino. Esto produce que cuando la adenina es incorporada en el ADN como su forma amino se aparea
correctamente mediante 2 puentes de H con timina. En cambio, en su forma imino, eso produce el apareamiento
incorrecto con citocina y llevaría a la incorporación de una base incorrecta. En la célula los equilibrios están
desplazados hacia la forma amino que es como habitualmente se incorporan en el ADN.
Otro mal apareamiento por la presencia de bases anormales surge de la desaminación espontanea, alquilación o
exposición de radicales libres de la molécula de ADN. Esto lleva a distintos compuestos como O-metil-guanina
u oxoguanina, por ejemplo.
196
La desaminación espontanea convierte a citocina si pierde el grupo amino en uracilo, apareciendo de forma
atípica dentro de la molécula de ADN; o una 5-metilcitocina (una citocina metilada) si se desamina forma
timina, y esto llevaría a apareamientos incorrectos e/ citocina y adenina por ejemplo.
La depurinación espontanea se produce por perdida espontanea del enlace glucosídico y se separa la BN del
nucleósido. Esto denota la presencia de residuos apurinicos dentro de estas bases anómalas.
Daños por gente químicos y oxidativos: hay agentes oxidantes que es lo que producen por ejemplo la
oxoguanina y agentes alquilantes (agregan alquilos) → en este caso metilos, para formar la 6-O-metilguanina.
La presencia de estos grupos produce una diferencia en el apareamiento con sus bases correspondiente.
También se puede dar la ausencia de bases ocurren por rotura espontánea de enlaces glicosídicos.
Se pueden encontrar también dímeros de pirimidinas se forman cuando el ADN es expuesto a la luz UV, o
también se pueden encontrar aductos por ejemplo con el benzoapireno (componente del humo del tabaco), que
produce daños en el ADN.
197
También aparecen lesiones del esqueleto/cadena de ADN que ocurren por la exposición a radiaciones
ionizantes, radicales libres, etc.
La rotura de enlaces covalentes (bases o esqueleto fosfo-azúcar) por radiación ionizante (rayos X y γ) produce
una ruptura dentro del esqueleto carbonado de la cadena de ADN. La presencia de dímeros de timina o de
aductos inducida por luz UV produce una distorsión dentro de la hélice. Estas 2 son las alteraciones más
difíciles de corregir.
Mecanismos de reparación en eucariotas
Además de la precisión en la replicación, la fidelidad de la información génica de las células se mantiene

mediante distintos mecanismos de reparación del ADN.
• Reparación de apareamientos incorrectos → necesita hebra molde.
• Reparación directa → necesita hebra molde.
• Reparación por escisión: base o nucleótido → necesita hebra molde.
• Reparación por recombinación → cuando se pierde las 2 hebras de ADN.
• Reparación translesión → cuando se pierde las 2 hebras de ADN.
Precisión de la replicación:
En E. coli se comete un error cada 109 - 1010 nucleótidos incorporados (cada 1000 a 10000 replicaciones).
Se sabe que las ADN pol insertan un nucleótido incorrecto cada 10 4 – 105 nucleótidos incorporados (c/ 10.000 o
100.000 nucleótidos incorporados).
La causa más frecuente de producir ese mal apareamiento es por tautomerizacion infrecuente. En su gran
mayoría se corrige por la actividad correctora de pruebas (exonucleasa 3`→5`) de las ADN polimerasas. La
selección de bases y la actividad correctora de pruebas combinadas hacen que en la replicación se cometa un
error cada 106 – 108 bases añadidas (1 millón o 10 millones de bases añadidas). La precisión adicional se debe a
un sistema encargado de la reparación de apareamientos incorrectos.
Reparación de apareamientos incorrectos
Estudiado mucho en bacterias, se vio que participa todo un complejo proteico Mut S y Mut L, enzimas que se
unen a la cadena de ADN y tiene un sitio de unión a ATP. Estas enzimas escanean a la cadena de ADN, cuando
se encuentra una base mal apareada genera una distorsión en la doble hebra. El complejo proteico viaja por los
surcos menores del ADN y donde se produce una distorsión en dicha cadena se detecta y se unen formando el
complejo MutL-MutS; Luego reclutan a una helicasa que desarrolla la cadena de ADN, una exonucleasa que
cliva una porción de ADN dejando una monohebra molde y una ADN polimerasa que se encarga de rellenar el
hueco para que una ADN ligasa luego las una.
Resumen: La cadena cortada (que contiene el nucleótido incorrecto) es degradada por exonucleasas y
resintetizada por ADN polimerasas.
En eucariotas las enzimas participantes son proteína homologa a MutS (MSH) y proteína homologa a MutL
(MLH). La única diferencia en este mecanismo de reparación es que en eucariotas no está MutH cumpliendo una
función helicasa.
En la caso de E.coli la hebra molde/madre que contiene la base correcta se identifica por metilos. Este
mecanismo en eucariotas no existe, y la presencia de discontinuidad en la hebra discontinua en forma de
fragmentos de Okazaki es lo que marca cual es la hebra molde y cuál es la que ha sido sintetizada que tiene el
error, aunque todavía no se sabe bien el mecanismo de como la c eucariota se distingue a la hebra molde.
198
Reparación directa
En eucariotas también existe la reparación directa de aquellas bases, por ejemplo la metilación de la guanina en
el oxígeno 6 que genera la O-metilguanina que en vez de aparearse con citocina lleva al apareamiento con la
timina.
Para desmetilar esa guanina existe la proteína metiltransferasa que transfiere ese metilo de la guanina a su sitio
activo en un residuo cisteína automutilándose, y deja al residuo guanina sin su metilo. La desventaja que tiene
este mecanismo es que es muy caro, porque una vez que la enzima se metila queda inactiva: 1 enzima por
c/guanina metil que tiene que corregirse.
199
Reparación por escisión de bases
El sistema de proteínas que participan reconoce la BN defectuosa o ausente. Actúan ADN glucosilasas que
rompe el enlace entre BN y azúcar generando sitios AP (apurínicos o apirimidínicos), luego una endonucleasa
(endonucleasa AP) reconoce ese sitio, y una exonucleasa corta o hidroliza toda la estructura básica azúcar-
fosfato en la posición de la base faltante o sitios AP, eliminando el residuo azúcar-fosfato. Después una ADN
polimerasa rellena la región y una ADN ligasa sella/liga la muesca. Este es el mecanismo general de como
actuaria dicha reparación.
Reparación por escisión de nucleótidos
Este sistema de reparación reconoce grandes distorsiones en la doble hélice dados por dímeros de timidina,
aductos de benzo[a]pireno, etc). El mecanismo comprende la remoción de un segmento de ADN grande (24-32
nucleótidos) por exonucleasas que escisionan alrededor de la lesión.
Un segmento grande se separa, la ADN ligasa desenrolla dejando libre la monohebra de ADN que se estabiliza
por proteínas SSB y la brecha es rellenada por la ADN polimerasa ε (la que participa en la reparación) y luego
una ADN ligasa une finalmente ese segmento.
Múltiples genes asociados a este mecanismo de reparación, los “genes asociados a XP”, y las proteínas que
participan son XPa, XPd, las que tienen esta función helicasa o exonucleasa. Defectos en este tipo de reparación
originan la enfermedad autosómica recesiva xerodermia pigmentosa, que genera sensibilidad a la luz, lesiones
cutáneas y cáncer de piel.
Esta reparación esta acoplada a la transcripción: El factor basal de transcripción II H (TFIIH), el que tiene
actividad helicasa en la transcripción, recluta proteínas NER que participan en este tipo de reparación a la lesión.
La importancia del acoplamiento e/ transcripción y el mecanismo de reparación es que de esta manera la c se

dedica a reparar específicamente aquellas zonas del ADN que va a ser transcriptas (zonas gelicas, que dan lugar
a un trascripto).
200
Reparación por recombinación
Se utiliza cuando se produce la ruptura de las 2 cadenas y se genera el freno de la horquilla de replicación.
Repara roturas bicatenarias recuperando la información de sus cromosomas homólogos (opera cuando la célula
ya tiene sintetizado los homólogos: no antes de la fase S).
Reparación translesión
Se da cuando una ADN polimerasa que se encuentra con una lesión no reparada. Se utilizan ADN polimerasas
de baja fidelidad (polimerasas de translesión) que copian a través del sitio de la lesión de una manera que no
depende del apareamiento de bases entre el ADN molde y la cadena neosintetizada (sintetiza sin “leer” un
molde). La familia TLS incluye ADN pol η (eta), β, ι (iota) y λ (lambda) → agregan bases al azar.
Es decir, repara esa lesión con la que se encuentra la ADN pol con la adición aleatoria de bases. Esto genera
mutagénesis, es una reparación altamente mutagénica, pero la célula prefiere hacer eso a que no pueda continuar
replicando su ADN en donde las consecuencias pueden ser aun mas graves.
Recombinación génica
Es el reordenamiento de la información genética dentro y entre moléculas de ADN.
Funciones de los sistemas de recombinación genética:
- Participan en sistemas de reparación de ADN especializados.
201
- Regulan la expresión de ciertos genes.
- Contribuyen a la segregación correcta de los cromosomas durante la división celular en los eucariotas
(crossing over).
- Mantienen la diversidad genética.
- Participan en reordenamiento genético programado durante el desarrollo embrionario.
Existen al menos 3 clases de recombinación genética:
1) Recombinación genética homóloga
2) Recombinación específica de sitio
3) Transposición de ADN
Recombinación genética homóloga: Consiste en el intercambio genético entre 2 moléculas de ADN que
comparten una región extensa de secuencia casi idéntica.
A. Crossing over (recombinación durante la meiosis)
- Proporciona una unión física transitoria entre las cromátidas que es necesaria para la segregación ordenada de
los cromosomas en la primera división celular meiótica.
- Aumenta la diversidad genética de una población.
B. Reparación de horquillas bloqueadas
- Contribuye a la reparación de varios tipos de lesiones del ADN.
Los cromosomas homólogos comparten grandes regiones de secuencia homóloga similar. Sin embargo en
ciertos alelos que codifican para ciertos genes puede haber alguna leve diferencia, en 1 BN o en 2.
El homólogo rojo (el primero) es el que contiene la ruptura de las dos cadenas. Esta ruptura es reconocida por
exonucleasas que degradan un poco la cadena, más allá de esa ruptura, dejando libre un extremo 3’ de las
cadenas. Este extremo 3’ puede migrar hacia su homologo y usar la hebra “sana” de su homologo como molde,
formándose un heteroduplex. Por la invasión del extremo 3’ de la cadena, polimerasas utilizan la cadena molde
de su cromosoma homologo para sintetizar el pedacito de ADN faltante. A estos
entrecruzamientos/heteroduplex se los llama intermediarios de holiday.
202
Luego desde otro extremo 3’ se puede continuar la polimerización utilizando la hebra de su cromosoma
homólogo como molde.
Los heteroduplex forman estructuras tridimensionales de cruces que, dependiendo de cómo se cortan (en una
dirección u otra), existe interconversión de material genético o no entre los distintos homólogos.
Otra explicación: Los heterodúplex se forman dada la migración del extremo 3’ libre de una de las hebras de
uno de los cromosomas homólogos en el otro, que lo utilizan las polimerasas como molde para poder sintetizar
la región donde estaban rotas las cadenas. Estos heterodúplex dependiendo de cómo se corten van a llevar a la
combinacion de genes o no.
Recombinación específica del sitio
Los intercambios tienen lugar en una secuencia de ADN particular: aquellas susceptibles a ser recombinadas,
denominadas hot spots. Todos los sistemas de recombinación específica de sitio requieren de una enzima
denominada recombinasa.
Hay dos familias de recombinasas dependiendo de la presencia de una Tyr o Ser en el sitio activo:
203
- Serina recombinasa.
- Tirosina recombinasa.
Estas recombinasas se unen a sitios específicos en los cromosomas homólogos y se produce el

entrecruzamiento. Se necesita de la fosforilación por ejemplo, de la tirosina, y se produce el ataque nucleofílico
del extremo 3’ hacia la tirosina fosforilada → esto lleva a la formación de un heteroduplex que al cortarlo
genera la recombinación de genes.
Puede generar 3 tipos diferentes de reordenamiento de ADN dependiendo de cómo se actúe:
Si se produce una recombinación de este tipo, dependiendo de los entrecruzamientos, puede llegar a producir la
inserción, la lesión o la inversión de una cierta zona.
Transposición de ADN
Los transposones son segmentos de ADN presentes en casi todas las células que se mueven o saltan de un lugar
del cromosoma (sitio dador) a otro en el mismo o diferente cromosoma (sitio receptor). El movimiento puede
producirse con duplicación del elemento o sin ésta. Generalmente existe la baja selectividad de secuencia para
este movimiento.
Consecuencias:
204
- Puede insertarse dentro de genes, con la supresión completa de la función génica.
- Puede insertarse dentro de las secuencias reguladoras de un gen donde su presencia conduce a la aparición de
cambios en la forma en que el gen se expresa (aumentando su expresión o disminuyéndola).
También hay retrotransposones que se sintetizan, se transcriben a ARNm y después por retrotranscriptasas se
genera un ADN nuevo que puede insertarse en una región para después poder replicarse.
Mutaciones
Mutación: cualquier cambio permanente en la secuencia de nucleótidos o en la organización del ADN.
- Las mutaciones espontáneas ocurren a muy baja tasa.
- Baja frecuencia en la población (menos del 1%).
- Pueden ocurrir en cualquier tejido/célula de un organismo.
Clasificaciones
- Según la supervivencia del individuo portador: letales, subletales, supervitales, etc.
- Según el tejido donde ocurren: somáticas o germinales (en células somáticas no se trasmiten a la progenie,
pero las que ocurren en líneas germinales sí).
- Según la extensión del cambio originado.
Categorías
Mutaciones genómicas: Mutaciones que afectan el número de cromosomas de la célula, que se originan de
errores en la segregación de los cromosomas durante la mitosis o meiosis. Ej: trisomía del par 21 (síndrome de
Down).
Mutaciones cromosómicas: Mutaciones que alteran la estructura de un cromosoma en concreto, como las
duplicaciones o triplicaciones parciales, deleciones, inversiones, translocaciones, que pueden ocurrir de manera
espontánea o ser el resultado de una segregación anómala de un cromosoma traslocado durante la meiosis.
Mutaciones génicas: mutaciones que alteran genes en concreto mediante una modificación pequeña (un solo
nucleótido) o cambios que pueden afectar millones de bases. Estas mutaciones se originan mediante dos
205
mecanismos básicos: errores producidos durante el proceso normal de replicación del ADN o por un fallo en los
mecanismos de reparación del ADN dañado.
Pueden clasificarse a su vez en:
• Mutación con cambio de sentido: se sustituye un nucleótido por otro, y el nuevo codón no codifica para
el mismo aminoácido. Este cambio puede ocasionar una proteína igualmente funcional o una proteína
incapaz de cumplir su función, dependiendo de dónde se ubique el aminoácido distinto en cuestión en
la proteína madura. Por ejemplo si el cambio de aminoácido está en el sitio activo de la proteína esta se
va a ver afectada pero si está solo en el esqueleto no.
• Mutación sin sentido: se sustituye un nucleótido por otro y el nuevo codón resulta ser un codón de stop.
También puede ocurrir que un codón de stop se convierta en un codón codificante. Así obtendrán
proteínas más cortas o más largas que las originales con una pérdida de la función.
• Mutaciones con corrimiento del marco de lectura: una deleción o inserción de uno o dos nucleótidos
causa el corrimiento del marco de lectura. La proteína resultante será no funcional.
• Mutaciones silenciosas: se cambia un par de bases pero el codón codifica para el mismo aminoácido.
No hay ningún cambio.
Recordatorio: el código genético es degenerado, entonces un mismo a.a puede estar codificado por más de
un codón, pero un codón solo codifica para un a.a.
• Mutación neutra: se cambia un aminoácido por otro con propiedades químicas similares. En este
ejemplo se cambia Lys por Arg (2 a.a básicos). No produce grandes cambios.
Las mutaciones son alteraciones estables del material hereditario. Muchas de estas mutaciones afectan
negativamente al organismo y son la causa de las enfermedades genéticas. Las mutaciones son sucesos
aleatorios que constituyen la base de la diversificación del material hereditario y la evolución por selección
natural. No siempre son malignas, son necesarias para generar la diversidad evolutiva.
Las mutaciones pueden originarse en células somáticas y no se transmiten a la siguiente generación.

Alternativamente, pueden darse en células germinales y transmitirse a la progenie → relevancia a nivel
evolutivo.
Regulación de la expresión génica en eucariotas: transcripción
El genoma de todas nuestras células es el mismo, pero hace que nuestras células tengan distinto fenotipo tanto
en el estado de desarrollo de nuestro organismo como a nivel de la diferenciación celular que forma c/u de los
tejidos. Esa diferenciación está dada por el diferente grado de expresión que tienen los genes que forman parte
del genoma humano en cada uno de los tejidos.
La expresión génica va a depender de señales muy finas que las células están censando continuamente y están
muy influenciadas por el entorno que las rodea.
En síntesis, el desarrollo y la diferenciación celular dependen de la regulación de la expresión génica

influenciada por el entorno.
206
Los procesos mediante los cuales una célula puede censar una señal externa y decidir sobre que genes, en que
cantidad expresarlos y traducirlos en proteínas maduras y biológicamente activas puede ser resumido en las
siguientes etapas. Es decir, la concentración celular de proteínas está determinada o regulada por el equilibrio
de:
1. Cambios en el estado de condensación de la cromatina. Las señales pueden favorecer la relajación de la

estructura apretada de la cromatina y exponer los promotores para que sean transcripto.
2. Síntesis del transcripto primario de ARN
3. Modificación post-transcripcionales de ARNm (inmaduro o transcripto primario)
4. Degradación de ARNm (de manera específica)
5. Síntesis de proteínas: control de la traducción.
6. Modificaciones post-traduccionales de las proteínas
7. Destino y transporte de las proteínas (e/ los diferentes compartimientos celulares)
8. Degradación de las proteínas (ya cumplieron su f(x) → proteosomas)
En base a la expresión los genes se clasifican en:
• Genes constitutivos (housekeeping genes): Genes cuyas proteínas producto de su expresión son
necesarios constantemente en la célula → tiene una tasa de expresión constante (Ej: proteínas de las
principales vías metabólicas, complejos encargados de la replicación, etc). Su expresión no está
regulada. La expresión de estos genes reconoce secuencias consenso en los respectivos promotores y en
su transcripción intervienen factores de transcripción basales que sólo se unen al promotor, reclutan la
ARN polimerasa II y los transcribe. Como la secuencia consenso es una secuencia bastante fuerte, una
vez que se inicia esa transcripción inmediatamente el gen es ocupado por un nuevo set de promotores
que recluta nuevamente a la polimerasa y así sucesivamente esa transcripción esta iniciada muy
frecuentemente → es decir, el promotor nunca está libre.
• Genes regulables: Genes cuyos productos son necesarios en algunas etapas → circunstancialmente.
(Ej: enzimas responsables de la reparación del ADN). Además de reconocer al promotor y los factores
de transcripción basales, se necesitan de otras proteínas que van a interaccionar con dichos factores de
transcripción o con otras zonas del ADN, distintas al promotor: factores de transcripción específicos
que van a potenciar la expresión de estos genes cuando una señal así lo indique → su expresión puede
inducirse o reprimirse en respuesta a señales moleculares (Ej: hormonas).
Regulación del inicio de la transcripción
- Para que la transcripción comience la maquinaria de transcripción debe invadir la estructura de la

cromatina para ser capaz de reconocer la estructura del promotor y regiones relacionadas. Debe haber
mecanismos que regulen el desempaquetamiento de la cromatina para hacer accesibles a las regiones
que van a implicar ser reconocidas en el inicio de la transcripción.
- Los factores de transcripción basales reconocen al promotor y no la ARN pol II.
- En eucariotas predomina la regulación positiva (los niveles de transcripción génica no son altos a
menos que sean reconocidos por los activadores) → son mucho más los factores que actúan como
activadores que como represores. Implica una gran ventaja desde el punto de vista energético ya que
tener una regulación negativa (ponerle un freno todo el tiempo a la expresión de los genes) necesitaría
de mucha energía por el gran tamaño del genoma eucariota. Entonces solo se transcriben cuando
aparece el factor activador que los regula.
207
- Las secuencias reguladoras tienen posiciones variables en relación al promotor, no tienen por que estar
adyacentes a él.
Estructura dinámica: La cromatina
Como parte del superenrollamiento del que participaba la estructura del ADN, contemplaba la formación de
nucleosomas que son estructuras en forma de cuenta de collar, formado por un núcleo de proteínas llamas
histonas alrededor de la cual se pliega la cadena del ADN y hay separaciones regulares entre núcleos de histonas
diferentes en esa estructura (regiones de unión).
El núcleo de histonas está formado por la asociación de 4 tipos de histonas diferentes:
- Primero se forman dos pares de dímeros entre las histonas H3 y H4 para formar el tetrámero H3-H4 y entre
H2A y H2B para formar otro tetrámero.
- Estos dos tetrámeros se empaquetan para formar el octámero de histonas que es el que está formando parte de
la estructura.
La característica que tiene este empaquetamiento es que tiene gran cantidad de cargas positivas que se agrupan
en la región debido a la riqueza de a.a básicos de dichas proteínas. Las cargas interaccionan fuertemente con la
carga negativa de los fosfatos del ADN favoreciendo un empaquetamiento cerrado.
Cromatina: composición
- 10% Heterocromatina (cromatina cerrada): está muy empaquetada y no se revierte. Asociada a los centrómeros
o telómeros de los cromosomas. Transcripcionalmente inactivas y poseen principalmente función estructural. 2
tipos: constitutiva (estructural) y facultativa.
- 90% Eucromatina: Transcripcionalmente activa (no toda). Se puede desestructurar. Deficiente de H1.
Regulación epigenética: Cambios en la estructura de la cromatina que están asociados a la regulación de la

expresión génica. Podemos dividirla en 2 grandes grupos:
- Modificación química de las histonas por el agregado de grupos acetilos: es una modificación
covalente independiente de ATP.
- Metilación de algunas bases del ADN: fuerte implicancia de la expresión de los genes metilados.
208
Modificación química de las histonas por acetilación
Es un mecanismo independiente de ATP.
Los residuos de lisina cargados positivamente son acetilados específicamente por la enzima HAT (histona
transacetilasa) la cual pone un grupo acetilo formando un enlace amida con la amina de la histona,
disminuyendo o eliminando la carga positiva.
Cuando esto se produce en gran medida en todas las aminas de las lisinas, esa carga positiva baja de forma muy
importante y deja de haber una interacción tan fuerte con los grupos fosfatos del ADN, rompiéndose
químicamente esa interacción débil. La estructura está más abierta y accesible a los factores de transcripción.
Cuando el mecanismo se tiene que volver para atrás porque la célula decidió que deja de transcribir el gen que
acaba de activar, la reacción es revertida por la enzima HDAC (histona desacetilasa) que quita los grupos
acetilos y vuelve al estado de carga positiva de las histonas que vuelve a interaccionar con el ADN.
En esa estructura de las histonas asociadas con la doble hélice del ADN quedan “colas” de las histonas fuera de
los nucleosomas, susceptibles a la modificación química.
209
Remodelado de nucleosomas
Mecanismo ATP dependiente.
Comprende un complejo de acetilación, pero el complejo actúa porque previamente la región fue reconocida por
un gran complejo llamado complejo de remodelado (formado por aprox 10 proteínas) que junto con
activadores desorganizan el nucleosoma con gasto de ATP para abrir esas regiones que van a ser acetiladas por
un complejo acetilación similar al visto anteriormente.
Metilación del ADN
Se metilan las bases haciendo que se unan proteínas que inactivan los genes. En general citidina que pasa a ser
5-metilcitidina).
Las regiones metiladas van a reconocer a otras proteínas que son las proteínas de unión a la metilcitocina y eso
va a impedir la interacción de todo el complejo de los factores de transcripción basales que se iban a ir
agregando a la zona del promotor. Por otro lado la metilación de esa zona del ADN activa histonas desacetilasas
por lo tanto van a favorecer el empaquetamiento de la cromatina en esa zona.
El efecto de la metilación es doble y tiende a silenciar la expresión del gen.
Regulación en la síntesis del transcripto primario
Una vez que actuaron los mecanismos de regulación epigenética, la cromatina se desempaquetó y quedaron
accesibles las zonas que van a ser reconocidas para la regulación del transcripto primario. Por un lado vamos a
tener al promotor, y por otro:
Factores de transcripción generales/basales: se ensamblan y unen al promotor.
210
Enhancer o potenciador: secuencia de ADN muy alejada del promotor a la que se une un activador o
transactivador (factores de transcripción específicos): proteínas que se unen y reconocen específicamente a estas
regiones potenciadoras del ADN o enhancer.
Co-activadores (mediadores): proteínas mediadoras que nunca interaccionan con el ADN pero si median
reconocimiento e/ proteínas, en este caso e/ los factores de transcripción generales que están unidos al promotor
y los transactivadores que están unidos al potenciador.
Represores (facotres de transcripción específicos): proteínas que actúan inhibiendo la transcripción.
Co-represores: mediadores que inhiben la transcripción génica, algunos con actividad desacetilasa.
Factores de transcripción específicos (activadores/represores)
Son los factores que hacen la diferencia entre los genes regulables de los genes constitutivos.
Reconocen distintas zonas del ADN, diferentes al promotor, como los potenciadores. Tambien esos
transactivadores que se unen a esos potenciadores interaccionan con el complejo formado por los factores de
transcripción basales y la ARN pol II en cercanías del promotor. Esa interacción esta dada por un complejo
mediador que contiene a los co-ativadores. La estructura del complejo mediador es importante porque tiene
varias proteínas muy asociadas tanto a la remodelación de la cromatina como con la subunidad CTD de la ARN
pol II. Se podría ver como que secuencialmente primero son los factores de transcripción basales que reconocen
a la caja TATA en el promotor, después de une la ARN pol II y luego los coactivadores que hacen de
intermediarios entre esos factores de transcripción basal y los específicos que se unen al potenciador; o por el
contrario se podría ver como que el iniciador de todo el proceso son las proteínas que forman parte del complejo
mediador.
De hecho, varias de estas proteínas al estar unidas a la cola CTD de la ARN pol II en realidad se postulo que la
proteínas del complejo mediador son las que inician toda la transcripción de 2 maneras: 1ero llevando a
interacción con la ARN pol II con el promotor por un lado y los factores de transcripción específicos por otro y
además ayudando a remodelar la estructura de la cromatina para permitir que ese promotor sea accesible.
Otro actor que no se menciono hasta ahora son unas proteínas estructurales llamadas HMG (proteínas de alta
movilidad) que son las encargadas de interaccionar con el ADN en las zonas intermedias entre el promotor y el
potenciador, y que de alguna manera esta interacción favorece la formación de ese bucle o estructura que tiene
que formar el ADN para que queden espacialmente cercanas todas las partículas que interactúan en la formación
de ese complejo cerrado que va a permitir el inicio de la transcripción de los genes regulados.
Resumen:
- Reclutan proteínas que modulan la estructura de la cromatina alterando la unión al promotor de los factores de
transcripción generales.
- Interactúan con complejos multiproteicos mediadores o co-activadores que regulan el ensamblaje de los
factores de transcripción generales o basales.
- Hacen la diferencia entre los genes constitutivos y los genes regulables
- El ADN se reacomoda para que los factores de transcripción del promotor y del potenciador interactúen
formando un enorme complejo proteico.
- Estas proteínas se unen a la cola CTD de la ARN pol II. Por lo que se ha postulado que las proteínas del
complejo mediador son las que inician toda la transcripción de dos maneras:
1. Llevando a la ARN poli II a interaccionar con el promotor y los factores de transcripción específicos por el
otro
2. Ayudando a remodelar la estructura de la cromatina para que el ADN sea accesible.
211
Proteínas HMG (de alta movilidad): Son las encargadas de interaccionar con el ADN en las zonas intermedias
entre el promotor y el potenciador y favorece la formación de un bucle para que queden espacialmente cercanos
todas las partículas que interactúan en la formación del complejo cerrado que permite el inicio de la
transcripción.
Los transactivadores no son los únicos factores de transcripción específicos, puede haber muchos otros. Un
ejemplo son algunos receptores de hormonas esteroideas actúan como FT específicos que no reconocen al
potenciador y se unen a secuencias reguladoras del ADN llamadas HRE (elementos de respuesta a hormona). En
este caso especifico de las hormonas esteroideas podemos ver como es el gran complejo iniciador y regulador de
la transcripción, que va desde la unión de TBP (reconoce la caja TATA, recluta a los demás factores de
transcripción y a la ARN pol II formando el complejo basal en la parte inferior de la siguiente imagen; luego
hay otra región alejada del promotor, el potenciador o enhancer que es reconocida por una serie de proteínas que
son FT específicos, los transasctivadores. En la imagen se introduce un 3er elemento de unión de proteínas al
ADN que es el HRE que es reconocido por receptores de hormonas esteroideas en este caso. Se ve tambien
como el complejo mediador, que contiene las proteínas co-activadoras y otras, es la encargada de estabilizar ese
gran bucle que se forma en la zona cercana al promotor y que implica interacción proteína-proteína pero no
proteína-ADN para el caso del complejo mediador. El complejo mediador esta activando por un lado con las
proteínas del receptor hormonal, por otro lado con las proteínas de los transactivadores y tambien con las
proteínas de los FT basales).
212
Aislantes o “insulators”
Una región potenciadora no está interactuando con un solo promotor sino que interactúa con varios promotores,
y para que la célula decida en base a señales externas (proteínas, FT, hormonas, etc), la célula tiene que
responder a la expresión de genes en base a esas señales haciendo interaccionar algunos potenciadores con
algunos promotores y no con otros por ejemplo: en el caso de la imagen, se quiere inducir la expresión del gen
que está regulado por el promotor 2 pero no se quiere inducir la expresión por el mismo enhancer del gen que
está regulado por el promotor 1. En estos casos aparece otra región secuencias aislantes o “insulators” que
controla la activación a distancia de los promotores impidiendo la interacción con algunos transactivadores
unidos a los potenciadores. En la figura se ve como el aislante está impidiendo la interacción del transactivador
unido al potenciador con el promotor 1 pero no está impidiendo esa interacción con el promotor 2.
Ya se vio que un trasactivador unido a una región potenciadora podía controlar a más de un promotor (lo que se
ve en la c de la imagen de abajo). Sin embargo también puede ocurrir que un promotor esté controlado por más
de un transactivador unidos a potenciadores diferentes (lo que se ve en d). Ahí el rol del aislante pasa a ser
importante porque puede hacer un switch y conectar un transactivador unido a un potenciador con un promotor
y no al otro, pero también que ese promotor a pesar de estar bloqueado con ese primer transactivador unido al
potenciador puede recibir el estímulo de otro transactivador y por lo tanto el gen si se esté transcribiendo.
Los factores de transcripción específicos dentro del núcleo es importante que estén regulados.
Regulación de los factores de transcripción (FT o TFs)
Su presencia en el núcleo tiene que estar finamente regulada porque esa presencia o no determina la regulación
de la expresión del gen encargado de controlar. Los TFs están controlados por:
- Por cantidad de factor sintetizado: Si hay una señal que implica un aumento de los factores de transcripción
específicos, va a haber un aumento en la expresión del gen que están regulando.
- Por unión de un ligando estimulatorio o inhibitorio
- Por estimulación de la entrada al núcleo: muchas veces tienen que entrar al núcleo para ejercer su acción.
213
- Por la presencia de otros factores de transcripción (que se acoplan a ellos)
- Por fosforilación
Por cantidad de factor sintetizado
EJ: Factor de transcripción a proteína SREBP-1c (proteína grande asociada a membrana del retículo). Cuando el
colesterol endógeno es abundante se intercala en la membrana del retículo e impide que la SREBP-1c se active,
se separe por proteólisis de la membrana y vaya hacia el núcleo donde tiene su acción como factor de
transcripción.
Su síntesis está incrementada o inducida por la insulina.
Cuando llega la insulina activa su receptor (en una situación de alta glucemia), y a su vez el hígado activa la vía
lipogénica. Lo que hace es aumentar los niveles de transcripción de SREBP-1c por los mismos mecanismos de
traducción de señales vistos, la proteína se separa de la membrana del retículo sufriendo una serie de
modificaciones, entra al núcleo donde ubica a su secuencia consenso, y actúa como factor de transcripción
específico de muchos genes que son codificantes para enzimas necesarias de glucolisis y síntesis de lípidos
(piruvato quinasa, ácido graso sintasa, glucoquinasa, glicerol-3-P acil-transferasa, etc).
Por unión de un ligando en citosol y translocación al núcleo
Son receptores de hormonas que van a actuar como FT en el núcleo. Todos los receptores nucleares comparten
una estructura común porque tienen dominios muy parecidos (ej. receptores de hormonas esteroides y tiroideas),
son receptores de moléculas pequeñas, lipídicas, hidrofóbicas, que atraviesas la membrana plasmática y van a
interaccionar dentro la célula con sus receptores. Los dominios que comparten en común son un dominio de
unión al ADN y un dominio de unión al ligando. La región central es de unión al ADN y la de unión al ligando
es similar entre todas.
Se pueden clasificar según su modo de acción:
- Los que interaccionan entre dominios similares (homodimerización)
- Los que interaccionan entre dominios diferentes (heterodimerización)
EJ: Receptores nucleares que unen al ligando en el citosol, y luego el complejo ligando-receptor entra al núcleo.
Tienen que oligomerizarse en el citosol antes de entrar al núcleo → Su activación es por homodimerización.
214
Receptor de glucocorticoides
Están unidos en el citosol a proteínas chaperonas que aseguran que mantengan su estructura pero que mantengan
bloqueado el sitio de unión a la hormona que es el cortisol. Cuando aparece el cortisol en el citosol interacciona
con el sitio de unión liberando a la proteína chaperona y se dimerizan 2 receptores de cortisol interaccionando
con las 2 moléculas de cortisol correspondientes. Ese dímero entra por el poro nuclear e interacciona con el co-
activador y con el ligando, además del sitio de unión al ADN que es el sitio central de la porción de esa
estructura.
El complejo mediador, del que los co-activadores forman parte, interacciona con el complejo basal, los FT
basales y la ARN pol II, y de esa manera se desbloquea el complejo cerrado a complejo abierto de la
transcripción y comienza la transcripción de genes.
Por unión de ligando y heterodimerización en el núcleo
EJ: Receptores nucleares que esperan a la hormona dentro del núcleo, no en el citosol como en el caso anterior.
Su activación es por heterodimerización.
Receptor de Hormonas tiroideas
El receptor de la hormona tiroidea está unido al complejo de transcripción inactivo formando un heterodímero
con el receptor RXR. Esa estructura ya en el núcleo (es decir, el heterodímero sin la hormona) asegura que el
complejo represor tenga activo el dominio desacetilacion de las histonas, asegura que la cromatina no esté laxa y
por lo tanto que el complejo basal no pueda actuar sobre el promotor. Esa estructura segura que no haya
transcripción.
Cuando aparece la hormona tiroidea entra a la célula y atraviesa el poro nuclear llegando al núcleo para
interaccionar con su receptor ya posado sobre la estructura a transcribir. La unión de la hormona tiroidea (T3 en
este caso) provoca un cambio conformacional en el heterodímero que se traslada al complejo coactivador e
inactiva el dominio del complejo histona-deascetilasa (HDAC) y activa el complejo histona-acetilasa (HAC),
revirtiendo el proceso. La actividad enzimática histona-acetilasa hace que la cromatina se vuelva menos
compacta y como ya está montado todo el complejo sobre las diferentes zonas del ADN inmediatamente
aumenta los niveles de transcripción de los genes regulados por las hormonas tiroideas.
215
Unión de ligando, posterior heterodimerización en el citosol y entrada al núcleo
Es una variante de receptores nucleares vistos anteriormente. El ligando atraviesa la membrana plasmática,
interacciona con el receptor en forma de monómero, en este caso PPAR relacionado con el metabolismo de los
lípidos. El complejo ligando-PPAR recluta a receptores nucleares con ubicación citosólica como RXR, se forma
el heterodímero en el citosol y el heterodímero con el ligando unido ingresa al núcleo por los poros nucleares e
interacciona como factor de transcripción específico, aumentando la expresión de algunos genes.
Genes que aumenta la expresión:
- Involucrados en la oxidación de ácidos grasos, sobre todo en mitocondrias y peroxisomas. La molécula señal
que va a actuar como ligando son ácidos grasos de cadena larga.
- Genes relacionados con la cetogénesis, aumentando la formación de cuerpos cetónicos.
Por fosforilación
Hay factores de transcripción que son fosforilados, por ejemplo el factor CREB, fosforilado en consecuencia de
la cascada de fosforilación desencadenada por glucagón uniéndose a su receptor acoplado a proteína Gs. El
CREB fosforilado va a reconocer a su sitio específico en el ADN (dominio CRE), va a reclutar otra proteína que
va a formar un heterodímero, la CBP/ P300, y esta interacción sobre el dominio CRE va a activar la
transcripción.
216
Otro ejemplo serie el FOXO1 que se activa desfosforilacion, activado por insulina. La dimerización del dominio
tirosin quinasa, lleva a un aumento de la actividad de PKB la cual fosforila en el citosol al factor de
transcripción FOXO1. Esa señal de fosforilación es la señal para que la proteína sea reconocida por ubiquitina,
vaya al proteosoma y se degrade específicamente en citosol. Es decir, FOXO1 fosforilado nunca entra al núcleo
y no interacciona con su sitio de unión al ADN. Si lo ace cuando se activa la fosfatasa específica que libera el
grupo fosfato de FOXO1 aumentando su vida útil, entra al núcleo e interacciona con sus respectivos dominios
en la zona de regulación de la expresión génica.
Uso de promotores alternativos
Sobre todo en los genes grandes es común que tengan varios promotores, y que esos promotores sean
reconocidos como inicio de la transcripción en diferentes tejidos, porque juntamente la señal que hace que todo
el complejo reconozca un promotor y no otro va a responder a señales del entorno. Entonces en c/tejido va a
favorecerse el reconocimiento de un promotor por sobre los promotores alternativos, y la proteína que se va a
traducir va a ser una diferente.
Ej: El gen de la proteína distrofina. Es el gen humano más grande conocido, posee al menos siete potenciales
promotores alternativos con regulación independiente y específica del tejido. La expresión incorrecta de este gen
por una mutación o un reconocimiento fallido del promotor correcto (actúa como amortiguador en los procesos
de contracción muscular) llevan al desarrollo de distrofia muscular de Duchene.
Corte y empalme alternativo (splicing alternativo)
Ocurre en el 95% de los genes humanos. La información para definir los sitios de corte y empalme que
demarcan los exones está codificada dentro de las secuencias de los exones. La forma que sean removidos los
intrones (y quizá algún exón) puede dar variantes diferentes, diferentes proteínas de un mismo gen. Es una
posibilidad muy grande que tienen los eucariotas superiores de generar muchas proteínas con una porción de
genes reducida.
Ej: antígeno T grande y antígeno t pequeño.
217
Corte y poliadenilación alternativos
Otra de las posibilidades de generar diferentes transcriptos maduros a partir de un gen que se transcribe es esta:
sitios de poliadenilacion diferentes o alternativos dentro de un mismo preARNm.
Se ven 2 ejemplos dependientes de tejido. En esos tejidos se encuentran señales que inducen en este caso el
reconocimiento de 1 sitio de poliadenilacion por sobre el otro. En este caso, un mismo ARNm en transcripcion
va a provocar un sitio de poliadenilacion en la tiroides para dar la proteína calcitonina, mientras que en neuronas
va a reconocer un sitio diferente para dar la proteína CGRP que es un vasodilatador.
Edición del ARNm
Otro mecanismo de formación de diferentes ARN maduros a partir de un primer transcripto primario es la
edición del ARNm. Muy simple pero con grandes implicancias funcionales.
Consiste en alterar una de las bases del transcripto de alguna manera, la más común es la desaminación.
Ejemplo: Apo B, apoproteína del transporte de lípidos.
2 proteínas que parten de un mismo transcripto primario: la Apo B48 se expresa en intestino (implicada en el
transporte de lípidos exógenos a través de los quilomicrones) y la Apo B100 en hígado (implicada en el
transporte de lípidos endógenos a través de VLDL). Su transcripto inicial es el mismo, pero en el intestino se
activa una desaminasa específica de intestino que va a quitar el grupo amina de una citidina para formar una
uridina. Entonces el codón CAA se transforma en un codón UAA (codón de Stop) → cuando dicha proteína es
traducida en el intestino, se encuentra el sistema de traducción con el codón de stop y la resultante es una
proteína más corta y funcional. En el hígado sigue.
218
Regulación del ciclo de vida de un ARNm
Tiene implicancia en su tasa de transcripción y en la expresión de los genes. La mayoría de los ARNm son vida
corta pero hay algunos más estables porque van a ser moldes de la traducción de proteínas que se necesitan en
gran cantidad, como por ejemplo las proteínas ribosómicas.
Llega un momento en el que su vida media se termina y deben ser degradados.
Mecanismos de degradación del ARNm
- Eliminando alguna base de los extremos cap 5’ o cola poli-A por una exonucleasa → dichos extremos
protegen al ARNm de la degradación prematura y aumentan su vida media; así se elimina la cap 5’ o se acorta la
cola poli-A.
- Por una endonucleasa → clivaje en el interior de la secuencia.
219
Regulación de la expresión génica: traducción
Las proteínas deben ser sintetizadas en el momento que se necesitan, transportadas hacia la localización celular
adecuada y degradadas cuando ya no son necesarias.
Control de la traducción
- Por modificación de factores de iniciación: globinas → principalmente en eucariotas.
- Por unión de proteínas represoras: ferritina y receptor de transferrina.
- Por microARNs no codificantes.
Por modificación de factores de iniciación
Regulación de la síntesis de globina
Este es el tipo de regulación de la síntesis de globina por el grupo hemo en los reticulocitos. La hemoglobina,
que es la proteína principal de los glóbulos rojos encargada del transporte de oxígeno, esta formada por el grupo
hemo que tiene en su interior el Fe y globinas. Existe una regulación fina y coordinada entre ellas porque…para
que se va a sintetizar globina si la [hemo] es baja?
La regulación se produce a nivel de la iniciación de la traducción.
Al inicio se necesita al factor de iniciación 2 (eIF2) para que transporte el ARNt cargado con metionina al
codón AUG del inicio de la traducción. Ese factor de iniciación 2 tiene unido una molécula de GDP la cual
recluta a una proteína 2B, que cuando se une tiene actividad de reemplazar el GDP por GTP, volviéndolo activo.
Sin embargo, si el factor de iniciación 2 se encuentra fosforilado la enzima eIF2B no puede realizar el
intercambio de GDP por GTP e interacciona de forma estable con el factor fosforilado inactivándolo. Entonces
hay una regulación de fosforilación de este factor que regula el inicio de la traducción, y eso es lo que hace el
hemo.
Hay una quinasa que fosforila al factor de iniciación 2, formando un complejo estable con factor eIF2B. Cuando
aumentan los niveles de hemo, el hemo inhibe la quinasa, por lo que no puede fosforilar al factor eIF2 entonces
se produce el inicio de la traducción.
Altos niveles de hemoglobina nos inducen la síntesis de globina para que estén sus 2 constituyentes, tanto el
hemo y la globina.
Este tipo de control se ve también cuando hay una disminución del pool de a.a para regular la síntesis de
proteínas porque hay pocos a.a en infecciones virales.
220
Regulación de la síntesis de proteínas
Se da tambien en la regulación de la síntesis de proteínas en general por hormonas (insulina, hormona anabólica
que induce su síntesis) y factores de crecimiento (inducen a la proliferación celular).
Hay un factor, el factor de iniciación 4E, que reconoce la caperuza y se le une la proteína 4E-BP que compite
por la unión a ese complejo con otros factores, como el factor 4G que son necesarios para la iniciación de la
formación del complejo de pre-iniciación de la traducción, la unión de la subunidad menor del ribosoma.
Cuando la proteína 4E-BP está unida al factor 4E se inhibe la traducción, no compite por la unión del factor 4G
necesario para la formación del complejo de iniciación de traducción. 4E-BP actúa como una proteína represora.
La insulina o factores de crecimiento, que induce toda una cascada de fosforilación, activan a una quinasa
llamada mTor que lo que hace es fosforilar a la 4E-BP, la cual fosforilada no se puede unir al factor de
traducción y entonces se produce la traducción.
Resumen: 4E-BP se une a 4E que reconoce la caperuza y que cuando esta unido se inhibe la traducción.
Hormonas y factores de crecimiento que inducen la actividad de mTor hace que el represor se separe de ese
factor de iniciación de la traducción y que la misma se produzca.
Por unión de proteínas represoras: ferritina y receptor de transferrina
Proteínas que contienen hierro para su funcionamiento:
Hemoglobina (65%) → en los glóbulos rojos, tetramérica, transporta de O2 en el organismo.
Mioglobina (10%) → proteína de almacenamiento de O2 en musculo.
Citocromos y enzimas con grupo hemo (3%) → cadena transportadora de e-.
Proteínas de depósito (ferritina, hemosiderina) → almacenamiento de Fe.
Homeostasis del hierro
El hierro se incorpora por la dieta y lo que no se absorbe se elimina por heces. En los enterocitos hay receptores
para el hierro en su forma inorgánica (Fe2, Fe3) o como forma orgánica formando parte del hemo, que lo
obtenemos a partir de carnes principalmente. El hierro se absorbe y pasa a circulación por medio de una
221
regulación específica. Es la transferrina la proteína encargada de transportarlo en circulación y llevarlo a los

distintos órganos que lo requieren.
La médula ósea contenida en los huesos es el órgano que mayor cantidad de hierro necesita, ya que su función
es la síntesis de nuevos glóbulos rojos. El hígado y el corazón almacenan hierro. Además, hay otros tejidos que
necesitan hemo particularmente para la síntesis de sus proteínas, citocromos, etc. Es necesaria tener la
regulación específica del receptor que interacciona con la transferrina y la ferritina (almacena hierro).
Los eritrocitos tienen una vida ½ de 90 días, luego pasan a un estado senescente y los MO del sistema retículo
endotelial los eliminan de circulación por fagocitosis. Luego de eso existe un sistema de reutilización de la
hemoglobina ya que el grupo hemo se metaboliza → el Fe se puede almacenar en la ferritina o entrar en
circulación dependiendo la demanda y las globinas se degradan en sus a.a constituyentes.
La forma de eliminar el exceso de Fe es por heces, orina, traspiración o por descamación de las células
epiteliales intestinales.
El hígado, además, puede tomar Fe y almacenarlo en su forma de ferritina. Cuando la ferritina está saturada con
Fe existe un equilibrio en la formación de hemosiderina (complejo formado por agregados de ferritina).
En la homeostasis del hierro es necesario tener la regulación específica del receptor que interacciona con la
transferrina (proteína de transporte) y la ferritina (proteína de almacenamiento).
Regulación rápida: la regulación del receptor de transferrina y del de ferritina es a nivel de la traducción, pero
existe una regulación rápida dada por la hepcidina → hormona secretada por el hígado frente a distintas
situaciones, por ejemplo hipoxia. Se sintetiza hepcidina y provoca la degradación de la ferroportina, que es una
proteína oxidoreductasa que convierte el Fe2 (como se encuentra en enterocito) a Fe3 (forma en la que se
transporta por la transferrina). Por lo que la degradación de ferroportina impide el transporte del hierro por la
transferrina porque Fe2 no puede pasar a Fe3.
Esta regulación esta dado tanto en enterocitos, donde el Fe puede ir a circulación o almacenarse en ferritina, y en
los macrófagos de los eritrocitos senescentes.
222
Regulación lenta: regulación de la síntesis de ferritina y del receptor de transferrina como el ejemplo principal
de unión de proteínas represoras.
En los ARNm que codifican tanto para ferritina como para el receptor de transferrina encontramos estructuras
de horquilla denominados elementos de respuesta al hierro (IRE). Estos IRE son reconocidos por una proteína,
la aconitasa (enzima tambien del ciclo de Krebs, pero esta vez en su isoforma citosólica). Cuando aumentan las
concentraciones de Fe el mismo se une a la aconitasa y la separa de los IRE.
Los IRE en el caso de la ferritina se encuentran en el extremo 5’, mientras que en el receptor de la transferrina
los IRE se encuentran en el extremo 3’. En una situación de baja concentración de Fe la aconitasa se encuentra
unida a los IRE y, como en el caso de la ferritina se encuentra esta estructura en el extremo 5’, la unión de la
aconitasa no permite el acoplamiento de toda la maquinaria de traducción (factores de iniciación, ribosoma, etc)
porque está en el extremo 5’. Por lo que la ferritina no se sintetiza. Sin embargo la unión de la aconitasa en los
IRE del receptor de transferrina en el extremo 3’ le dan estabilidad al ARNm entonces se puede traducir.
Ante una baja [Fe] no se traduce la ferritina, ya que si tengo bajo hierro es al dope almacenarla, pero si aumenta
el receptor de transferrina para poder tomar el poco Fe para aquellos tejidos que lo necesitan.
Ante un aumento de la [Fe], se une a la aconitasa y la aconitasa se separa de los IRE, y como el extremo 5’ de la
ferritina queda libre pudiéndose unir la maquinaria de traducción y se sintetiza ferritina; pero al no estar la
aconitasa en extremo 3’ de la transferrina, los bucles de la horquilla son susceptibles a ser clivados por
endonucleasas, se degrada el ARNm y no se sintetiza el receptor de transferrina → se sintetiza la proteína que
almacena hierro pero no el receptor de transferrina.
223
Por microARNs no codificantes
Los ARNt son ARNs que regulan la expresión de genes en general, son moléculas cortas de ARN (aprox 22
nucleótidos), que regulan la expresión de genes y tienen diferente nombre dependiendo su origen. Ejercen su
función apareándose con los ARNm’s diana específicos:
- miRNAs (micro ARN): inhiben traducción del ARNm diana.
- siRNAs (small interfering ARN): causa degradación de ARNm diana → regula así su traducción.
- piRNAs (piwi-interfering ARN): de expresión en las líneas germinales.
La mayoría de estos ARNs se expresan en tipos celulares específicos en momentos particulares durante la
embriogénesis y después del nacimiento se encontraron muchos más, más de 500 en humanos.
Como actúan
Se obtienen a partir de ARN de doble cadena por un procesamiento, un corte por ARNasas produce ARN chicos
que reclutan una maquinaria de silenciamiento de genes. El ARN chico actúa como conductor del complejo
hacia el ARNm diana y la forma que tiene de regular los genes es induciendo la degradación del ARNm,
reprimiendo la traducción o produciendo una migración hacia el núcleo donde regula la formación de
heterocromatina del ADN silenciando la transcripción del ARN.
Formación del siRNAs: se forman a partir de una doble cadena de ARN ya sea sintetizada dentro de la célula o
sintética (agregada en laboratorio para silenciamiento de genes). Son cortados por una ARNasas que se llaman
Dicer que forman los siRNAs y reclutan la maquinaria de silenciamiento. Están codificados en los ARN que
silencian ellos mismos.
Formación de miRNAs: Son sintetizados por otros ARN de los que actúan, se sintetizan a partir de estructuras de
tipo de horquilla que se encuentra en pre-miARN en regiones codificantes o no codificantes. Este tipo de
estructura en horquilla es reconocido por dos ARNasas, Dicer y Drosha, que reconocen estructuras específicas
de la horquilla para producir los cortes y así generar los miRNAs que tambien reclutan toda la maquinaria de
silenciamiento.
224
Como actúa la maquinaria de silenciamiento
- En ARN de interferencia o siRNA: luego de ser formados, reclutan un complejo de silenciamiento (RISC) que,
entre otras proteínas, tiene una endonucleasa. Cuando el RISC se une al siRNA, la pequeña secuencia de ARN
conduce toda la maquinaria al ARNm target que se aparea por complementariedad fuerte con el ARNm y eso
activa endonucleasas que cortan al ARNm llevándolo a su degradación. De esta manera no se puede traducir.
- En miRNA: luego de ser formados, reclutan al RISC y lo conducen al ARNm target pero el apareamiento no
es tan fuerte ni especifico, es más bien imperfecto. No llega a inducir el corte pero si inhibe la traducción.
Algunos también pueden translocarse al núcleo donde reclutan una enzima metiladora que metila genes
específicos para regular la transcripción → los ARNt puede actuar regulando la expresión de genes tanto a nivel
transcripcional como traduccional, porque regulan la compactación de la cromatina → al metilar esas regiones
se inhibe su transcripción.
225
Integración metabólica
Los metabolismos vistos anteriormente en un organismo tienen que estar precisa y altamente coordinados tanto
a nivel celular como a nivel de órganos o tejidos con el fin de que el suministro de combustibles sea el
apropiado para satisfacer las necesidades del organismo ante diversas situaciones.
Encrucijadas metabólicas
Encrucijada metabólica: Metabolito a nivel del cual se cruzan varias vías metabólicas.
1. Encrucijada de la glucosa 6-P
La glucosa 6P puede provenir de la fosforilación de la glucosa por la hexoquinasa.
La glucosa 6P tiene distintos destinos metabólicos de acuerdo en la célula que se encuentre y en el estado
metabólico del organismo.
Destinos:
- Almacenamiento como glucógeno (glucogenogénesis)
- Oxidación a piruvato (glucólisis)
- Oxidación a ribosa 5P (vía de las pentosas fosfatos) → precursor de nucleótidos y NADPH (implicado en
síntesis reductoras, como AG y colesterol).
A su vez la glucosa-6P se puede sintetizar a partir de precursores como el piruvato mediante la gluconeogénesis
y mediante la glucogenólisis. En hígado principalmente y tambien en riñón puede ser sustrato de una enzima del
RE, la glucosa 6Pasa, que la desfosforila para convertirla en glucosa libre que sale a partir de los GLUT por
difusión facilitada para ser utilizada como combustible en caso de glucemia baja por otros tejidos, como las
neuronas en el cerebro.
2. Encrucijada del piruvato y acetil-CoA
Orígenes del piruvato:
- Vía glucolítica por oxidación de la glucosa.
- Del lactato (producido por la lactato deshidrogenasa) → contracción muscular activa: no alcanza la provisión
de O2 para obtener ATP a partir de la oxidación completa de la glucosa. El piruvato producto de la glucolisis se
226
reduce a lactato mediante la lactato deshidrogenasa; en esa reacción se reoxida el NADH a NAD+ lo cual
permite activar la vía glucolítica para obtener ATP en esa situación particular de anaerobiosis. Dicho lactato va
a hígado y la isoforma hepática de la lactato deshidrogenasa cataliza la reacción inversa.
- Transaminación de la alanina (principal conexión entre el metabolismo de los hidratos de carbono y el de las
proteínas).
Destinos:
- Descarboxilación oxidativa por el complejo de la PDH a nivel de la matriz mitocondrial para dar Acetil-CoA.
- Carboxilación a oxalacetato en la matriz por la piruvato carboxilasa. El oxalacetato va a dar glucosa por
gluconeogénesis.
Orígenes del acetil-CoA:
- Descarboxilación oxidativa del piruvato por el complejo de la PDH.
- β-oxidación de ácidos grasos.
- Esqueleto carbonado de aminoácidos cetogénicos.
Destinos:
- Condensarse: 3 moléculas de acetil-CoA forman el 2-hidroxi-metil-glutaril-CoA (precursor de la síntesis de

colesterol en el citoplasma o de cuerpos cetónicos a nivel de la mitocondria)
- Oxidarse completamente a CO2 mediante el ciclo de Krebs
- Dar sus carbonos para formar el esqueleto carbonado de aminoácidos
- Su salida de la mitocondria hacia el citoplasma como citrato por la citrato sintasa (que condensa oxalacetato y
acetil-CoA); el citrato es luego sustrato de la citrato liasa liberando acetil-CoA que se utiliza a nivel del
citoplasma para la síntesis de ácidos grasos o de colesterol.
Regulación de la actividad enzimática
Las vías metabólicas se “cruzan” en distintos puntos o metabolitos que constituyen distintas encrucijadas
metabólicas. Existen mecanismos celulares para regular la dotación (cantidad) y la actividad de enzimas
implicadas en dichas vías, en respuesta a señales intra y extracelulares (determinadas por las condiciones
metabólicas). Operan en escalas de tiempo que pueden ir de milésimas de segundo hasta horas o días.
227
❊ Mecanismos que actúan modulando la cantidad o dotación de enzima
El número de moléculas de una enzima depende de las velocidades relativas de síntesis y de degradación. La
velocidad de síntesis puede activarse o ajustarse:
• Por activación de factores de transcripción que se unen a regiones específicas del ADN (elementos de
respuesta) cerca del promotor de un gen, estimulando o inhibiendo su transcripción. Los FDT se
activan por fosforilación o unión a un ligando especifico. Un gen está controlado por más de un
elemento de respuesta, que son reconocidos por distintos FDT: todas esas señales deben integrarse para
elaborar una respuesta única. Todo esto es a nivel del inicio de la transcripción.
• Por regulación del transporte de mensajeros desde el núcleo al citoplasma.
• Por degradación de mensajeros.
• Por regulación a nivel de la traducción.
• Por regulación las vías de degradación proteica (vidas medias muy variadas).
❊ Mecanismos que regulan la cantidad de enzima preexistente

- Secuestrar a la enzima o su sustrato en compartimentos celulares diferentes (compartimentalización). Ej:
glucoquinasa o hexoquinasa IV en hígado.
- Regulación por disponibilidad de sustrato.
- Regulación alostérica.
- Regulación de la actividad enzimática por modificación covalente (fosforilación y desfosforilación por

quinasas o fosfatasas especificas).
- Unión de proteínas reguladoras a las enzimas a regular.
Especialización metabólica de los tejidos
Par entender cada una de las vías metabólicas y como se interrelacionan tenemos que considerar el conjunto de
órganos y tejidos del organismo, teniendo en cuenta la función especifica de cada órgano, su anatomía y
patrones metabólicos característicos con diversos requerimientos energéticos.
228
Perfil metabólico de órganos: vías metabólicas mediante las cuales los distintos órganos pueden satisfacer sus
necesidades energéticas que le permiten cumplir su función.\
Hígado
Órgano central desde el punto de vista metabólico encargado de:
- Procesar todos los nutrientes absorbidos de la dieta (grasas, glúcidos y proteínas).

- Sintetizar y distribuir combustibles (lípidos, cuerpos cetónicos y glucosa) para otros tejidos.
- Convertir el exceso de nitrógeno en urea.
- Detoxificar el organismo (uno de los principales órganos encargados de dicha función).
Es el primer órgano en recibir los nutrientes absorbidos a nivel del intestino y las hormonas liberadas por el
páncreas en respuesta a la concentración de la glucosa sanguínea.
La glucosa entra a los hepatocitos luego de una ingesta rica en hidratos de carbono en período posprandial de
manera muy eficiente a través de los GLUT 2 y es rápidamente sustrato de la glucoquinasa (hexoquinasa IV)
que la fosforila para convertirla en glucosa 6P. La glucoquinasa tiene propiedades cinéticas características: tiene
un Km elevado para la glucosa y no se satura por altas concentraciones de la misma; además, no se inhibe por el
producto de su reacción (glucosa 6P).
Destino de la glucosa 6P dentro del hepatocito
- Almacenada como glucógeno (glucogenogénesis)
- Oxidada a piruvato por glucólisis; el piruvato puede ingresar a la matriz mitocondrial donde el complejo de la
PDH lo va a descarboxilar oxidativamente para producir acetil-CoA y dicho acetil-CoA puede entrar a Krebs,
luego a la cadena transportadora de electrones y por fosforilación oxidativa llegar a la producción de ATP, CO2
y H2O.
En una situación metabólica donde la carga energética es alta, (es decir, a nivel de la matriz mitocondrial las
[ATP] y [NADH] son elevadas) el acetil-CoA en vez de entrar a ciclo de Krebs va a salir como citrato de la
229
matriz mitocondrial al citoplasma por un transportador específico, y en el citoplasma la citrato liasa lo va a

clivar (“romper”) para liberar el acetil-CoA, precursor para la síntesis de colesterol y AG.
Los ácidos grasos pueden ser utilizados para la síntesis de TAG y fosfolípidos.
El colesterol y los fosfolípidos pueden quedar formando parte de la membrana del propio hepatocito o pueden
ser incorporados en lipoproteínas plasmáticas para ser llevados a tejidos extrahepáticos.
- Oxidada mediante la vía de las pentosas fosfato, la cual produce principalmente NADPH y ribosa 5P
(precursor para la síntesis de nucleótidos). El NADPH se necesita para la síntesis de colesterol y ácidos grasos,
de manera que en una célula que está muy activa la síntesis de ácidos grasos y colesterol se consume el NADPH
y el NADP+ resultante estimula la vía nuevamente, ya que es modulador alostérico + de la glucosa 6P
deshidrogenasa.
El hígado es el órgano encargado de mantener la glucemia de manera que tiene la capacidad de, mediante
distintas vías metabólicas, enviar glucosa a la sangre cuando baja la glucemia:
Las vías metabólicas que se pondrían en juego son:
• Degradación de la reserva de glucógeno para obtener glucosa 6P (glucogenólisis) → la glucosa se exporta a

sangre
• Síntesis glucosa a partir de precursores no glucídicos (gluconeogénesis): piruvato, lactato y alanina
(enviados por el musculo), glicerol (enviada del tej. adiposo) y aminoácidos.
Ahí en el hígado se puede sintetizar glucosa 6P que es sustrato de la glucosa 6Pasa, enzima de retículo que está
solo en hígado y riñón que tiene la capacidad de desfosforilar la glucosa 6P (procedente de la glucogenólisis y
gluconeogénesis) a glucosa libre. La glucosa a través de los GLUT 2 sale por difusión facilitada a la sangre →
de esta manera se sostiene la glucemia.
Metabolismo de lípidos en el hígado
Los ácidos grasos que entran en el hígado o que son sintetizados tienen distintos destinos metabólicos:
- Síntesis de lípidos del propio hepatocito (fosfolípidos de membrana)
- Los ácidos grasos son el principal combustible sintetizado por el hígado en la mayoría de las instancias
metabólicas.
A partir de los ácidos grasos el hígado obtiene ATP por β-oxidación: los trasporta hasta la matriz mitocondrial
donde obtiene NADH y FADH que ceden sus electrones a la cadena transportadora y acetil-CoA que entra al
ciclo de Krebs, donde se oxidara a CO2 generando más NADH y FADH que llevaran en última instancia a la
producción de más ATP.
- En situación de ayuno, el acetil-CoA que no entra en Krebs porque el oxalacetato se está yendo a
gluconeogénesis en el hígado, se utiliza para la síntesis de cuerpos cetónicos. El hígado los va a volcar a la
sangre para que el músculo esquelético y cardíaco utilicen como combustible y, en situación de ayuno
prolongado, también las neuronas.
-El acetil-coA puede también salir de las mitocondrias donde va a ser utilizado como precursor para la síntesis
de colesterol. El colesterol va a ser precursor para la síntesis de sales biliares en el hígado y volcado a la sangre
tambien va a ser utilizado en la síntesis de hormonas esteroideas.
- Los ácidos grasos pueden ser utilizados para la síntesis de TAG que serán empaquetados en VLDL que el
hígado enviará a circulación para su distribución a los tejidos periféricos. Una pequeña proporción de ácidos
grasos permanece libre y serán volcados a sangre donde, unidos a albúmina, circulan a tejidos periféricos para
ser utilizados como combustible.
230
Metabolismo hepático de aminoácidos
El pool de aminoácidos de los hepatocitos procede de:
- Aminoácidos absorbidos por la dieta
- Síntesis de novo de aminoácidos no esenciales
- Recambio de proteínas
Destino:
- Conversión en proteínas hepáticas y en proteínas plasmáticas (la mayoría sintetizadas allí).
- Utilizados para la síntesis de nucleótidos, de hormonas y otros compuestos nitrogenados, como porfirinas.
- Algunos a.a, sobre todo los procedentes de la dieta, pasan directamente a través del hígado para llegar a otros
tejidos por circulación que los utilizarán para la síntesis de sus propias proteínas.
- También hay catabolismo de aminoácidos en el hígado (comienza con reacciones de transaminación o de

desaminación) y el esqueleto carbonado puede formar piruvato, acetil-CoA o intermediarios de Krebs (que en
última instancia van a terminar formando glucosa o AG además de producir ATP).
En períodos entre comidas, en el músculo se degradan proteínas y sus aminoácidos se catabolizan para obtener
energía. Los grupos amino de los aminoácidos catabolizados confluyen en el piruvato producto de la glucolisis a
nivel muscular, se convierte en alanina y por sangre va a al hígado donde vuelve a transaminarse para dar
piruvato que finalmente se convierte en glucosa por gluconeogénesis.
Los grupos amino procedentes de los tejidos extrahepáticos tambien entran en el ciclo de la urea para
convertirse en urea que se vuelca en sangre para su excreción.
Tejido adiposo
Función: síntesis, almacenamiento y movilización de TAG.
Tejido adiposo blanco: Recibe ácidos grasos dietarios y sintetizados en el hígado a partir de TAG transportados
por quilomicrones y VLDL respectivamente que son hidrolizados por la lipoprotein lipasa activada por la
insulina. Los ácidos grasos se esterifican con el glicerol 3P formado a partir de la glucosa, que ingreso a los
adipocitos a través de los GLUT 4 sensibles a insulina, para formar TAG que se almacenan formando la gota
lipídica que ocupa la mayor parte del citoplasma de los adipocitos y que esta tapizada por proteínas como las
perilipinas.
El glicerol 3P procede de la reducción de la dihidroxiacetona P formada en la glucolisis.
Entonces la mayoría de los TAG almacenados en el tejido adiposos proceden de ácidos grasos y glucosa que
llegaron al adipocito transportados por la sangre. Hay síntesis de novo, pero no es la mayoría.
Situación de estrés o ayuno: se libera glucagón o adrenalina que estimulan la lipólisis → degradación de TAG
almacenados en el tejido adiposo para liberar ácidos grasos y glicerol. El glicerol es transportado por sangre
hacia el hígado donde, a la altura de las triosas fosfato, se incorporará a la vía gluconeogénica. Los ácidos grasos
transportados por albúmina van hacia tejidos donde serán utilizados como combustible, por ejemplo el hígado
gluconeogénico en situación de ayuno → la gran cantidad de ATP que precisa el hígado para hacer
gluconeogénesis en situación de ayuno lo obtiene de la β-oxidación de ácidos grasos que le envía el tejido
adiposo ya que está muy activa la lipolisis.
Tejido adiposo marrón/pardo: lleva a cabo la termogénesis.
231
Músculo esquelético
Puede utilizar ácidos grasos, glucosa o cuerpos cetónicos como combustible. En reposo los ácidos grasos
aportan hasta un 90% de las necesidades energéticas del músculo esquelético.
Tiene la capacidad de almacenar glucógeno sintetizado a partir de la glucosa que capta a través de los GLUT 4
sensibles a insulina (se almacena 3/4 de las reservas totales de glucógeno del organismo). A partir del glucógeno
el hígado obtiene la glucosa que va a oxidar completamente a CO2 y H20 para obtener el ATP necesario para
realizar trabajo mecánico. El musculo, a diferencia del hígado y riñón, no expresa glucosa 6Pasa y por ende la
glucosa producida a partir de la glucogenólisis no puede ser volcada a sangre y es únicamente aprovechada por
el musculo.
Durante la contracción muscular activa la velocidad de la glucólisis es mucho mayor que la del ciclo de Krebs,
por lo que parte del piruvato producido se reduce a lactato por la isoforma muscular de la lactato deshidrogenasa
el cual va a hígado para ser utilizado en la gluconeogénesis.
El músculo esquelético activo tambien utiliza como combustible el esqueleto carbonado de aminoácidos de
cadena ramificada obtenido a partir de la degradación de proteínas. Los grupos amino resultados del
catabolismo son transferidos al piruvato que se convierte en alanina, la cual se vuelca a la sangre para ir a
hígado donde dichos grupos amino entran al ciclo de urea y los carbonos del piruvato se convierten en glucosa
por gluconeogénesis.
Músculo cardiaco
- Metabolismo casi exclusivamente aeróbico.

- Usa como principal combustible ácidos grasos y en parte cuerpos cetónicos.
Cerebro
La glucosa es el único combustible utilizado por el cerebro salvo en ayuno prolongado o en inanición. A nivel
de las neuronas no se almacena ningún combustible por lo que el cerebro necesita que el suministro de glucosa
sea continuo; esto lo logra gracias a la expresión de sus GLUT 3 que tienen bajo Km a la glucosa → saturados
en la mayoría de las situaciones metabólicas ingresando glucosa de manera continua.
A partir de la oxidación completa de la glucosa las neuronas obtienen el ATP necesario para mantener el
potencial de membrana requerido para la transmisión de los impulsos nerviosos. Tambien para la síntesis de
neurotransmisores y de receptores de membrana que participan en la propagación de dichos impulsos.
Ayuno prolongado o inanición: Puede adaptar su metabolismo para utilizar los cuerpos cetónicos como
combustible (aportan el 60-70 % del ATP en casos extremos; el resto de la oxidación de la glucosa).
Eritrocitos
Células mayoritarias de la sangre especializadas en el transporte de gases. A lo largo de su diferenciación

adquieren una forma bicóncava característica que le permite tener mayor superficie para un intercambio de
gases altamente eficiente y deformarse para circular por vasos de bajo calibre o capilares.
Durante dicha especialización pierden sus organelas internas (incluida la mitocondria) y terminan
fundamentalmente ocupados por hemoglobina. Por ende, usan como único combustible a la glucosa que ingresa
por los GLUT 1, la oxidan por glucólisis a piruvato el cual por la lactato deshidrogenasa se reduce a lactato, por
el cual se reoxida NADH a NAD indispensable para seguir haciendo glucólisis. El lactato resultante va por
sangre al hígado donde es sustrato gluconeogénico ya que es oxidado a piruvato.
Otra vía importante en los eritrocitos es la oxidación de la glucosa mediante la via de las PP para producir el
NADPH que actúa como cofactor de la glutatión reductasa (enzima que reduce al glutatión para la prevención
del estrés oxidativo).
232
Repaso general
Hígado
Combustible almacenado → glucógeno y sintetiza TAG (enviados al tejido adiposo para ser almacenados)
Combustible preferido → glucosa en estado bien alimentado y AG
Combustibles exportados → TAG (empaquetados en VLDL), AG libres (trasportados por albumina), glucosa
y cuerpos cetónicos (en situaciones de ayuno)
Tejido adiposo
Combustible almacenado → TAG
Combustible preferido → glucosa (en estado bien alimentado) y AG
Combustibles exportados → en situación de ayuno, glicerol (utilizado como sutarto gluconeogénico) y AG

(transportados por albumina donde serán captados por tejidos para su oxidación y obtención de ATP)
Musculo cardiaco
Combustible almacenado → no almacena
Combustible preferido → AG y cuerpos cetónicos (ayuno nocturno)
Combustibles exportados → no exporta
Musculo esquelético
Combustible almacenado → glucógeno (únicamente en reposo)
Combustible preferido → en reposo, AG; durante el ejercicio, glucosa; durante el ayuno, cuerpos cetónicos.
Combustibles exportados → en reposo, alanina (ayuno, degradación de proteínas musculares); durante el

ejercicio, lactato y alanina (carbonos usados para la gluconeogénesis y grupo amino excretados como urea).
Cerebro
Combustible almacenado → no almacena
Combustible preferido → glucosa; cuerpos cetónicos (durante ayuno prolongado o inanición)
Combustibles exportados → no exporta
Coordinación metabólica: señales neuroendócrinas
El flujo metabólico de las distintas vías metabólicas a nivel celular o entre los órganos está regulado por el
sistema neuroendocrino en función de las necesidades del organismo para optimizar la distribución de
precursores y sustratos energéticos entre los distintos tejidos y órganos para que puedan cumplir su función.
Las hormonas actúan a través de receptores de membrana, citoplasmáticos o nucleares. La unión hormona
receptor es altamente especifica y con alta afinidad; mediante esta unión se activan distintos mecanismos en los
que se altera la actividad y cantidad de enzimas preexistentes.
233
Secreción de insulina
Cuando aumenta la glucemia, a través de los GLUT 2 las células β-pancreáticas captan glucosa y la metabolizan
(la oxidan) llevando a un incremento de la [ATP] intracelular, el cual inhibe a canales de K dependientes de
ATP. Esto hace que se despolarice la membrana activando canales de calcio dependientes de voltaje, llevando a
un aumento de la [Ca] intracelular que produce tambien la liberación de los reservorios de Ca del retículo. Todo
esto lleva a la fusión de vesículas intracelulares con la membrana de las células β y la secreción de insulina.
La insulina va a actuar a través de receptores con actividad tirosin-quinasa para activar al menos 2 vías de
traducción de señales: por un lado la vía de las MAPK, que lleva a la activación de factores de trascripción que
intervienen en la división y crecimiento celular; por otro lado, la vía que tiene más efectos sobre el metabolismo:
la vía que lleva a la activación de PKB/Akt, quinasa que regula por fosforilación enzimas diana preexistentes.
PKB fosforila tanto a nivel del citoplasma y del núcleo factores de transcripción estimulando la síntesis de
enzimas que metabolizan lípidos y glúcidos.
Efectos metabólicos de la insulina
Es una hormona peptídica hipoglucemiante:
- activa mecanismos de oxidación y reserva de glucosa.

- inhibe vías metabólicas que promueven la hiperglucemia
234
Regulación transcripcional en respuesta a insulina
La insulina en humanos regula la transcripción de más de 150 genes diferentes actuando a nivel de 7 o mas tipos
de elementos de respuesta, c/u reconocido por su conjunto de factores de trascripción específicos activados por
insulina.
A través de SREBP-1c estimula la expresión de genes de:
• Enzimas glucolíticas como hexoquinasa II, IV, PFK-1 y piruvato quinasa.

• Enzima bifuncional PFK-2/FBPasa-2
• Enzimas intervinientes en la fase oxidativa de la vía de las PP: glucosa 6P deshidrogenasa y 6-
fosfogluconato deshidrogenasa → para obtener NADPH
• Enzimas de la síntesis de ácidos grasos: complejo de la PDH, acetil-CoA descarboxilasa, enzima
málica (para obtener NADPH), citrato liasa (hidroliza al citrato en el citoplasma para liberar el acetil-
CoA para la síntesis de AG y colesterol) y el complejo de la AG sintasa.
• Enzimas que participan en el síntesis y desaturación de AG: stearoil-CoA deshidrogenasa
• Enzimas que participan en la síntesis de TAG: acil-CoA glicerol transferasas
A través de FOXO disminuye la expresión de genes de:
• Enzimas gluconeogénicas → fosfoenolpiruvato carboxiquinasa

• Enzima de retículo que desfosforila la glucosa para que salga por GLUT a circulación en periodos entre
comidas → glucosa 6Pasa (subunidad catalítica)
Regulación transcripcional de SREBP-1c en respuesta a insulina
El factor de transcripción SREBP-1c, la proteína de unión al elemento de respuesta a esteroles, un factor de

transcripción que regulaba la expresión de genes en el metabolismo del colesterol y de AG.
La insulina a través de su receptor lleva a la activación de la vía de PI3K y esto a la activación de PKB. PKB
fosforila proteínas diana; entre ellas fosforila a la proteína inhibitoria de mTORC, inactivándola. mTORC
activada al ser una quinasa fosforila factores de transcripción que a nivel del núcleo que inducen la expresión
del gen SREBP-1c y tambien la expresión de proteínas que intervienen en el procesamiento de SREBP-1c.
SREBP-1c se encontraba unida a la proteína SCAP a nivel de la membrana del retículo y, ante determinada
situación metabólica, como al censar la diminución de los niveles de colesterol, estimula la translocación o
traslado de este complejo desde la membrana del retículo hasta la del Golgi en donde el factor de transcripción
es activado y escindido mediante un clivaje en 2 pasos para poder ir al núcleo; allí se une a su elemento de
respuesta e induce la transcripción de genes como el de HMG-CoA reductasa (enzima reguladora clave de la
síntesis de colesterol), el del recetor de LDL, el de la citrato liasa y acetil-CoA carboxilasa y AG sintasa.
235
Regulación transcripcional mediada por FOXO en respuesta a insulina
FOXO es un factor de transcripción que se encuentra en el citoplasma. Cuando aumentan los niveles de insulina,
la insulina a través de la vía de PI3K lleva a la activación de PKB. Una de las proteínas diana de PKB es FOXO,
que es fosforilada y eso le impide acceder al núcleo a través del complejo del poro nuclear, induciéndose su
degradación allí en el citoplasma.
Cuando las situaciones metabólicas son opuestas y hay liberación de glucagón, se activa una proteína fosfatasa
que a nivel del citoplasma desfosforila a FOXO. Dicha desfosforilación permite que FOXO ingrese al núcleo, se
una a su elemento de respuesta a nivel del ADN e induzca la expresión de genes gluconeogénicos como el de
fosfoenolpiruvato carboxiquinasa y de la glucosa 6Pasa. Con eso se aumenta la liberación de glucosa desde el
hígado hacia la sangre.
Regulación transcripcional mediada por ChREBP en respuesta a glucosa
ChREBP o proteína de unión al elemento de respuesta a carbohidratos en un factor de transcripción.
236
Este factor de transcripción, en el hígado, si se encuentra fosforilado no puede ingresar al núcleo y no podrá
regular la expresión génica. Cuando aumenta la glucemia la glucosa ingresa a través de los GLUT 2 al
hepatocito y es rápidamente fosforilada por la glucoquinasa; uno de los destinos de la glucosa 6P puede ser el de
la vía de las PP, y dicha vía activa lleva a la acumulación de un intermediario: la xilulosa 5-P. La xilulosa 5-P
activa alostéricamente a una fosfatasa llamada PP2A que elimina 1 grupo fosfato de ChREBP a nivel del
citoplasma. Con el remanente de 1 grupo fosfato, ChREBP puede ingresar al núcleo donde la misma fosfatasa le
elimina el 2do fosfato. De esta manera ChREBP puede reclutar a a Mlx y, como heterodímero, unirse al
elemento de respuesta a carbohidratos a nivel del ADN para estimular la expresión de genes que codifican para
enzimas del metabolismo lipídico y glucídico como piruvato quinasa, AG sintasa, Acetil-CoA carboxilasa y
citrato liasa.
En definitiva, en respuesta a glucosa ChREBP estimula principalmente a nivel del hígado el almacenamiento de
dicha glucosa como AG para luego ser empaquetados como TAG.
Regulación transcripcional mediada por CREB en respuesta a glucagón
CREB es un factor de transcripción.
El glucagón, secretado por las células α-pancreáticas en respuesta a una disminución en la glucemia, interacción
a través de un receptor acoplado de proteína Gs. Gs activa a adenilato ciclasa que aumenta la [AMPc]
citoplasmática y a la subsecuente activación de PKA. PKA produce respuestas rápidas fosforilando enzimas
diana, pero tambien puede producir respuestas lentas ingresando al núcleo fosforilando factores de transcripción.
CREB es uno de esos factores de transcripción que es fosforilado por PKA dentro del núcleo. Tambien recluta a
otra proteína llamada CBP/p300 y juntas se unen a su elemento de respuesta a nivel del ADN para inducir la
expresión de genes glucogénicos como fosfoenolpiruvato carboxiquinasa y de la glucosa 6Pasa.
237
Efectos metabólicos del glucagón
A nivel del hígado
- Estimula la glucogenólisis (activando a la glucógeno fosforilasa)

- Estimula la gluconeogénesis.
- Inhibe glucogenogénesis
- Inhibe la glucolisis
- Estimula la cetogénesis para que envíe a circulación a tejidos extrahepáticos, priorizando la utilización de la
glucosa por parte del cerebro
A nivel del tejido adiposo
- Estimula la lipolisis para la provisión de AG a circulación, utilizados por el hígado para la gluconeogénesis
→ esta activa la lipasa sensible a hormona y la fosforilación de perilipin quinasa
238
Ciclo de ayuno y alimentación
El organismo se tiene que adaptar a la presencia o ausencia de nutrientes y para ello va a tener distintos
mecanismos del control del metabolismo.
El metabolismo va a estar regulado por disponibilidad de sustrato (si hay o no glucosa o AG), la presencia de
inhibidores o activadores alostéricos o la modificación covalente de enzimas o proteínas regulatorias que tenga
la célula en ese momento. Son respuestas rápidas ya que van a estar modificando enzimas preexistentes.
En cambio si se produce la síntesis de nuevas moléculas enzimáticas o regulatorias se habla de respuestas lentas.
Esta regulación va a ser mediada por respuesta hormonal, sea una respuesta rápida o lenta.
Efectos hormonales sobre el metabolismo de las fuentes de energía
Aumenta la glucemia con la alimentación → se libera insulina.
Disminuye la glucemia con el ayuno → se libera glucagón.
Ejercicio o stress → se libera adrenalina.
Ciclo fisiológico de ayuno-alimentación
Es fisiológico. Se da todos los días en nuestro organismo porque la ingesta de alimentos es acotada a lo largo del
día. A su vez entre estos periodos acotados de alimentación vamos a tener periodos más largos de ayuno. Hay 1
ayuno que es más largo que los demás: el ayuno nocturno.
En los períodos de la ingesta del alimento vamos a tener aumento en la glucosa sanguínea y, por ende, de la
insulina para mantener los valores de glucemia normales. A su vez, una disminución de la liberación de
glucagón.
Mas específicamente, la glucosa en sangre tiene concentraciones muy acotadas y no puede irse a extremos.
Cuando tenemos un aumento en la glucemia vamos a tener un pico en la liberación de insulina y una
disminución de la liberación de glucagón (“pico de insulina, caída del glucagón”).
Si bien hay un aumento en la glucemia, el aumento de la insulina es más brusco que la diminución de glucagón.
Esto hace que la glucemia se mantenga constante.
239
Ingesta: interacción entre órganos
Al aumentar la glucosa en sangre, primero se produce la liberación de insulina, como ya se dijo.
Luego la glucosa va a ingresar a los distintos órganos. Dentro del hígado se activa la síntesis de glucógeno, la
lipogénesis y la síntesis de proteínas. En el músculo la síntesis de glucógeno y en el tejido adiposo la
lipogénesis.
También vamos a tener un aumento de los lípidos dietarios que van a ser transportados en forma de
quilomicrones y, al metabolizarse, los ácidos grasos van a ir hacia el tejido adiposo para ser acumulados como
TAG y en el músculo y otros tejidos van a ser utilizados como fuente de energía. Junto con los lípidos que se
sintetizaron por lipogénesis de novo a partir de glucosa en el hígado y de los remanentes de quilomicrones de los
lípidos dietarios se van a formar las VLDL; su metabolismo va a proveer de ácidos grasos a los distintos órganos
para su almacenamiento (como el tejido adiposo) o para su utilización (como el corazón o el músculo).
Hígado lipogénico: Vamos a tener un aumento de la entrada de la glucosa, aumento de la glucosa 6P que va a
tener como fin la síntesis de glucógeno o la glucólisis para sintetizar piruvato. El piruvato va a ser
descarboxilado a acetil-CoA por la PDH, y el mismo va a ir formar ácidos grasos, estos forman TAG que van a
ser exportados vía VLDL. Por otro lado, el NADPH necesario para la síntesis de ácidos grasos va a ser
producido por la vía de las pentosas fosfato que al ser consumido el NADPH para las primeras síntesis de ácidos
grasos se activa la vía para producir más NADPH.
Además, el aumento de acetil-CoA activa la síntesis de colesterol por la 3-hidroxi-3-metil-glutaril-CoA

citosólica. En esta situación el ciclo de Krebs va a estar desplazado hacia la síntesis de citrato porque este va a
salir de la mitocondria y va a ser hidrolizado por la citrato liasa para obtener Acetil-CoA citosólico necesario
para la lipogénesis, además del oxalacetato.
240
Tejido adiposo lipogénico: Va a estar activada la síntesis de TAG a partir de ácidos grasos. Estos AG son
sintetizados de novo a partir de glucosa dentro del mismo adipocito y también, se obtienen de la dieta llegando
principalmente por los quilomicrones luego de la lipolisis por protein lipasa y en menor medida de las VLDL.
Ingresan al hepatocito, se activa el acil-CoA, se sintetizan los TAG y van a ser almacenados en el mismo
adipocito.
Activación de la síntesis proteica por insulina y nutrientes
La insulina también activa la síntesis proteica. Vía PI3K y AKT activan al complejo mTORC (quinasa) que
activa la síntesis de proteínas. El complejo mTORC favorece la síntesis de ribosomas, su activación y la
desinhibición del complejo de iniciación de la traducción (activación a nivel traduccional).
La mTORC, aparte de ser activada por insulina y otros factores de crecimiento que actúan vía PI3K, también
puede ser activada por la presencia de aminoácidos, en especial leucina y otros de cadena ramificada.
241
Efectos de la insulina: Los efectos de la insulina sobre el metabolismo que favorecen el anabolismo (síntesis de
nuevas moléculas) está coordinado con un aumento en la síntesis de proteínas que favorecen el crecimiento y la
diferenciación celular.
Estado de ayuno
Unas horas después de la última ingesta baja la glucemia y el organismo tiene que adaptarse un estado de ayuno.
Ayuno: interacción entre órganos
Para esto el páncreas segrega glucagón y se ponen en marcha los procesos hiperglucemiantes. En el hígado se
activa la gluconeogénesis y la glucogenólisis, liberando la glucosa obtenida al torrente sanguíneo para mantener
la glucemia. En el tejido adiposo se produce lipolisis para que los ácidos grasos liberados a sangre sirvan como
fuente de energía para el músculo, hígado y otros tejidos.
Vamos a tener cierta secreción de adrenalina porque el ayuno da una señal de estrés fisiológico, y en el músculo
(que solo tiene receptores adrenérgicos) se activa la glucogenólisis y va a ser utilizada por el mismo músculo.
Por otro lado, desde el músculo también vamos a obtener sustratos gluconeogénicos como la alanina. El glicerol
que proviene de la degradación del TAG de tejido adiposo va a ir a hígado como sustrato gluconeogénico.
242
Hígado glucogénico: En el estado de ayuno el hígado es glucogénico, va a estar el metabolismo adaptado para
sintetizar glucosa y que esta glucosa sea liberada al torrente sanguíneo. La glucosa proviene del piruvato, el cual
proviene de aminoácidos como la alanina, lactato o glicerol. Tambien la glucosa puede provenir de la
glucogenólisis.
La energética del hepatocito está cubierta por los ácidos grasos que vienen del tejido adiposo. Se van a β-oxidar
a acetil-CoA, van a entrar al ciclo de Krebs para producir NADH, FADH, CO2 y H2O. El exceso de acetil-CoA
va a ser utilizado para formar cuerpos cetónicos vía HMG-CoA mitocondrial. Los cuerpos cetónicos van a ser
utilizados como combustible por tejidos extrahepáticos.
Como el piruvato es utilizado como sustrato gluconeogénico? El piruvato va a ser utilizado como sustrato
gluconeogénico porque va a estar inhibida a este nivel la PDH (para que no se convierta en acetil-CoA) y
activada la piruvato carboxilasa (para la formación de oxalacetato, posterior salida al citosol y formar PEP).
Tambien el ciclo de Krebs y sus intermediarios van a estar desplazados a la síntesis de oxalacetato como
sustrato para la gluconeogénesis.
Tejido adiposo lipolítico: En el estado de ayuno el tejido adiposo es lipolítico. Los TAG van a ser degradados a
ácidos grasos y glicerol. Los ácidos grasos van a ir al músculo y otros tejidos como fuente de energía y al hígado
como sustrato para la cetogénesis. El glicerol va a ir al hígado como sustrato gluconeogénico y el ciclo de Krebs
va a estar provisto por el Acetil-CoA que proviene de la β-oxidación de los ácidos grasos.
243
Renutrición luego de un período de ayuno
Cuando se vuelve a ingerir alimentos después de un periodo de ayuno se entra en un estado de renutrición. El
páncreas secreta insulina y el metabolismo de los lípidos se restablece inmediatamente: la glucosa ingresa en el
hígado, entra glucolisis, se sintetiza acetil-CoA y luego AG y TAG que van a ser acumulados en tejido adiposo
y llevado otros tejidos.
La glucosa utilizada para la síntesis de glucógeno no proviene de glucosa de la sangre. En los primeros estados
de renutrición el metabolismo sigue siendo gluconeogénico.
Fases del ayuno
Fase 1 (1 día) → similar ayuno nocturno (fisiológico)
- Hígado gluconeogénico.
- Inicio lipólisis.
- Catabolismo de proteínas no esenciales (epitelio intestinal, enzimas pancreáticas) → sustratos gluconeogénicos.
Fase 2 (3 días) → objetivo: preservar proteínas esenciales y musculares
- Lipólisis
- Hígado cetogénico: se sintetizan cuerpos cetónicos para órganos que los puedas utilizar como combustible:
corazón, músculo y cerebro (se adapta después de días).
Fase 3 (semana/meses) → se agotan reservas de TAG (inanición)
Si se agotan completamente las reservas de TAG se produce:
- Catabolismo de proteínas musculares y esenciales como fuente de energía → fallo multiorgánico → muerte
Fuentes de glucosa sanguínea: en un estado de buena alimentación la glucosa sanguínea proviene de la glucosa
ingerida, que son las primeras horas después de una ingesta rica en glúcidos. Cuando empiezan a bajar las
[glucosa ingerida] en sangre se activa la glucogenólisis en el hígado (el glucógeno muscular no sirve como
fuente de glucosa sanguínea) y luego comienza a activarse la gluconeogénesis.
• En un ayuno nocturno o de fase 1 va a proveer la glucosa sanguínea la glucosa ingerida y la

glucogenólisis hepática.
• En un ayuno prolongado o inanición la única fuente de glucosa sanguínea que tenemos es la
gluconeogénesis.
Inanición: Vamos a tener una gluconeogénesis muy activa y los sustratos gluconeogénicos van a ser
aminoácidos o el lactato que le provienen los eritrocitos a partir del ciclo de Cori. La principal fuente de a.a del
organismo está en el tejido muscular, que proviene de la degradación de proteínas musculares. Estos a.a se
transaminan a alanina y por el ciclo de la glucosa-alanina van a formar glucosa en el hígado.
Si bien el ciclo de Cori es un ciclo (porque el lactato del eritrocito va a higado, se transforma en glucosa y dicha
glucosa vuelve al eritrocito para seguir realizando glucolisis y obtener ATP) en el caso del musuclo no es así.
La alanina sale del musculo como sustrato gluconeogénico, es convertida en glucosa en el hepatocito y no
vuelve al músculo sino que va a otros tejidos dependientes de glucosa como el cerebro y los eritrocitos.
244
Otra característica del ayuno prolongado es que la glutamina es parcialmente degradada a nivel del epitelio
intestinal → Glutaminólisis: entra al enterocito, se forma el α-cetoglutarato, entra por intermediarios del ciclo de
Krebs, sale de la mitocondria, piruvato transamina a alanina y la alanina vuelve al hígado para ser sustrato
gluconeogénico.
Durante el ayuno baja la glucemia, luego se mantiene constante, sube la [AG libres], luego se mantiene
constante, pero lo que sube mucho es la concentracion de cuerpos cetónicos en sangre.
En los primeros días del ayuno hay un aumento de la concentracion de amoniaco urinario por una alta
degradación proteica y mientras el organismo se adapta a consumir cuerpos cetónicos baja la concentración de
amonio urinario.
245
Combustibles importados
Combustibles exportados
246
247
Regulación del peso corporal
➔
➔
➔
En la regulación del peso corporal existen moléculas que actúan a corto plazo (periodos e/ comida y comida) y
a largo plazo.
Dentro de las moléculas que actúan a corto plazo encontramos:
Grelina: hormona secretada por el estómago cuando la nutrición es deficiente. Es la hormona “del hambre”, y al
secretarse por el estómago actúa a nivel del hipotálamo; este último emite señales que indican un aumento del
apetito y una disminución de gasto energético.
Colecistoquinina (CCC) y Péptido YY (PYY): secretado por el intestino cuando la nutrición es excesiva. Se
secretan junto con leptina e insulina (actúan más a largo plazo). Todas ellas actúan a nivel del hipotálamo que
emitirá una respuesta de disminución del apetito y aumento del gasto energético.
Vimos al tejido adiposo como un órgano de almacenamiento de energía en forma de TAG, pero tambien actúa
como órgano endócrino, secreta:
✓ Leptina: Hormona que regula el apetito y el metabolismo.
✓ Adiponectina: Hormona que reduce la concentración sanguínea de ácidos grasos, favorece el control
glucémico (ya que hace más sensible a la insulina a órganos como músculo y tej. adiposo) e inhibe posibles
respuestas inflamatorias.
La leptina es una proteína pequeña que secreta el tej. adiposo. Cuando los adipocitos aumentan de tamaño y,
por ende, el tejido adiposo crece secreta leptina que actúa a nivel del hipotálamo ya que tiene receptores allí,
disminuyendo el apetito y aumentando el gasto energético y generación de calor a través de la β-oxidación.
La señalización por leptina evolucionó probablemente para ajustar la actividad y el metabolismo durante
períodos de ayuno prolongado, más que como un medio para restringir el aumento de peso corporal.
Mecanismo de acción: es secretada cuando el tej. adiposo aumenta de tamaño, viajando por sangre e
interactuando con sus receptores en el hipotálamo a nivel del núcleo arcuato. Actúa a través de sus receptores y
la traducción de la vía de JAK-STAT. La leptina interactúa con su receptor que conduce a la dimerización y el
reclutamiento de quinasas JAK que fosforilan al receptor; el receptor fosforilado recluta a los factores de
transcripción STAT fosforilándolos. Los STAT fosforilados se dimerizan en el citosol, ingresan en el núcleo y
así se unen a regiones específicas del ADN para regular la trascripción de genes, entre los que se encuentra el
neuropéptido proopiomelanocortina o POMC (péptido que por proteólisis da péptidos más pequeños, entre la
que encontramos a la hormona estimuladora de melanocitos).
En el hipotálamo tambien se generan señales neuronales por la vía simpática que lleva a la activación de
receptores β-adrenérgicos en el adipocito. Cuando el recetor β-adrenérgico se activa, activa la proteína G que
lleva a la activación de la adenilato ciclasa que convierte el ATP en AMPc, y el aumento de AMPc activa PKA.
PKA en el tejido adiposo produce la movilización de AG ya que fosforila las perilipinas y a la lipasa sensible a
hormonas, de manera que hidroliza los TAG en AG, y estos AG pueden ingresar en la mitocondria para β-
oxidarse y producir energía. Pero, la PKA tambien puede ingresar al núcleo y actuar como factor de trascripción
248
regulando la transcripción de ciertos genes como la expresión de la proteína UCP o termogenina (actúa como un
desacoplante, ya que forma un canal en la MMI que hace que se disipe en forma de calor el gradiente H+ motriz
de la cadena transportadora de e-). De esta manera es como la leptina genera calor (termogénesis).
Entrando aún más en detalle, en el hipotálamo hay 2 tipos de neuronas que participan en la regulación del peso
corporal:
• Neuronas anorexigénicas: indican que hay que “comer menos y metabolizar más”.
• Neuronas orexigénicas: indican que hay que “comer más y metabolizar menos”.
Tejidos efectores:
➔ Músculo esquelético
➔ Tejido adiposo
➔ Hígado
La única hormona que actúa sobre las neuronas orexigénicas es la grelina, secretada en el estómago. Las
neuronas orexigénicas en el núcleo arcuato del hipotálamo, luego de la acción hormonal, liberan neuropéptido Y
(NPY) que activa hormonas que promueven que hay que comer más y metabolizar menos → aumentan el
apetito y disminuyen de gasto energético.
La leptina estimula a neuronas anorexigénicas, que mediante la secreción de la hormona estimuladora de

melanocitos alfa (α-MSH) estimula hormonas que promueven que hay que comer menos y metabolizar más →
disminuye del apetito y aumenta el gasto energético. A su vez, tanto la leptina como la insulina inhiben las
neuronas orexigénicas.
En musculo y en hígado el efecto de la leptina esta mediado por AMPK. La AMPK es una quinasa activada
cuando los niveles de AMP aumentan, llevando a una disminución de los procesos anabólicos y una activación
de procesos catabólicos.
249
La adiponectina es una hormona que se secreta cuando el tejido adiposo se “achica”, por ejemplo después de un
ayuno prolongado. El aumento se adiponectina produce la activación de AMPK activado por AMP, un indicador
de niveles energéticos celulares bajos, llevando a una disminución de la actividad de vías anabólicas y una
activación de las vías catabólicas.
AMPK activada produce:
- Activación de la PFK-2, que lleva a un aumento de la glucolisis especialmente en musculo cardiaco.

- Activación de GLUT 1 y 4, aumento la captación/transporte de glucosa.
- Inhibición de la acetil-CoA carboxilasa (ACC) de la AG sintasa, disminuyendo la síntesis de AG y
malonil-CoA, con lo cual la CPT-1 se encontraría activa y por ende se encontraría activa la β-
oxidación.
- Inhibición de la lipasa sensible a hormonas (HSL), inhibiendo la lipolisis.
- Inhibición de la HMG-CoA reductasa (HMGR), inhibiendo la síntesis de colesterol e isoprenoides.
- Inhibición de la glicerol fosfato aciltransferasa (GPAT), inhibiendo la síntesis de TAG.
- Inhibición de la glucógeno sintasa, inhibiendo la glucogenogénesis.
- Inhibición de mTOR y factor de transcripción 2 (eEF2), inhibiendo la síntesis de proteínas.
Efectos en los distintos tejidos:
• Incremento de la β-oxidación, glucolisis y toma de glucosa por parte del musculo cardiaco.
• Incremento de la β-oxidación y toma de glucosa por parte del musculo esquelético.
• Induce respuestas de ingesta de alimentos y de disminución del gasto energético a nivel cerebral.
• Inhibe la secreción de insulina por parte de las células β-pancreáticas.
• Disminución de la síntesis de AG y colesterol en el hígado.
• Disminución de la síntesis de AG y lipolisis en el tejido adiposo → inhibe la lipolisis para evitar el
aumento elevado de AG allí que lleve a una lipotoxicidad.
250
Obesidad
Es un trastorno de los sistemas reguladores del peso corporal caracterizado por una acumulación excesiva de
grasa corporal.
El sobrepeso de una persona se mide por el índice de masa corporal IMC = peso (kg)/altura (m)2
IMC < 25 → Normal
IMC 25 a 30 → Sobrepeso
IMC > 30 → Obesidad
Se puede dar la obesidad por distintos factores: genéticos (debido a alguna mutación), alteración de alguna
hormona mencionada o en su receptor. Además, condiciones ambientales y de comportamiento (sedentarismo,
conductas alimenticias, etc).
Los cambios metabólicos observados en la obesidad son:
✓ Dislipidemias → Las dislipidemias o hiperlipidemias son trastornos en los lípidos en sangre caracterizados
por un aumento de los niveles de colesterol o hipercolesterolemia e incrementos de las concentraciones de TAG
o hipertrigliceridemia.
Entonces, hay un aumento de TAG en sangre, aumento total de colesterol en sangre (LDL) y disminución de
HDL en sangre. Esta diferencia en la relación LDL-HDL da índice de un factor aterogénico peligrando la salud
cardiovascular.
✓ Intolerancia a la glucosa
✓ Resistencia a la insulina
Resistencia a la insulina: contribución de la obesidad
La resistencia a la insulina es la disminución del número de receptores de insulina, su afinidad por la misma o
que exista alguna alteración en su vía de traducción → reducción de la señal “río abajo” de la unión de la
insulina al receptor.
Hay señales provenientes del tejido adiposo que pueden conducir a la resistencia a la insulina.
251
1- En personas delgadas los TAG de la dieta son similares a los TAG catabolizados donde existe un tejido
adiposo normal y la contribución de esos AG al musculo para β-oxidarlos y producir energía. El
musculo se mantiene sensible a la insulina y frente a un aumento de la misma se produce la
translocación de los trasportadores de glucosa a la membrana y la glucosa puede ingresar.
2- A medida que se produce un sobrepeso en donde los TAG de la dieta son mayores en comparación a
los TAG que se catabolizan. El tejido adiposo comienza a aumentar de tamaño hasta cierto limite
donde los adipocitos no pueden almacenar más gotículas de TAG y se preforman nuevos adipocitos
pequeños ávidos por almacenar más TAG.
3- El aumento en el número de adipocitos hace que se produce la proteína quimiotáctica de macrófagos
(MCP-1).
4- De esta manera gran cantidad de macrófagos comienzan a infiltrarse en el tejido adiposo, entrando en
un caso de inflamación crónica.
5- Los macrófagos infiltrados liberan ahí TNF-α que induce la exportación de AG;
6- De esta manera aumenta la cantidad de AG que ingresan al musculo esquelético y, como no todos
llegan a β-oxidarse comienza a producirse la acumulación de gotículas de TAG ectópicas dentro del
tejido muscular.
7- Eso termina interfiriendo en la exposición de los GLUT 4 en la membrana, con lo cual la glucosa lo
podría ingresar al musculo y eso es lo que genera la resistencia a la insulina.
Al aumentar el aporte de AG al musculo por una sobrealimentación o inactividad algunos AG se β-oxidan en la

mitocondria pero no todos. Esto lleva a que el ciclo de Krebs se frene porque disminuye la relación
NAD/NADH, y se produce una sobrecarga mitocondrial de AG que saldrían posteriormente al citosol. En el
citosol se almacenan en forma de goticulas lipídicas de TAG, generando el almacenamiento de TAG de forma
ectópica. Esto TAG inducen a la activación de quinasas inducidas por stress que inhiben la translocación de los
GLUT 4 a la membrana disminuyendo la captación de glucosa por parte del musculo, llevando al aumento de la
glucemia que activa al páncreas para que secrete más insulina. Por este motivo en pacientes obesos o con
resistencia a la insulina se produce una hiperinsulinemia, forzando al páncreas a que secrete más insulina para
vencer esa resistencia. El páncreas no da abasto para cumplir con ese requerimiento y dentro de las vesículas
donde se secreta insulina junto con el péptido C se produce la acumulación de proinsulina → apoptosis de las
células β-pancreáticas.
252
Diabetes Mellitus
• Enfermedad metabólica en la que la glucosa es producida en exceso por el hígado (hiperglucemia) y es

usada de manera deficiente por los demás órganos.
• Diabetes mellitus dependiente de insulina (DMID) o tipo I
- Generalmente ocurre por destrucción autoinmune de células β pancreáticas

- “Juvenil”
• Diabetes mellitus no insulino dependiente (DMNID) o tipo II
- Generalmente asociada a la obesidad

- En adultos
- Las células no responden bien a la insulina → resistencia a la acción de la insulina
Hay más tipos de diabetes, como la diabetes gestacional.
Se sabe que los niveles de glucosa deben mantenerse en un rango entre 60-90 mg/100ml ya que la disminución
de este rango (hipoglucemia) puede ser letal para el organismo, produciendo signos neurológicos, liberación de
glucagón, adrenalina y cortisol, letargia, convulsiones, coma, daño cerebral permanente y finalmente la muerte.
En el caso de una hiperglucemia constante característica de la diabetes es cuando se tiene concentraciones de
glucosa por encima de los 126mg/100ml en ayunas, produciendo glicación de proteínas y acumulación de
polialcoholes.
La glicación de proteínas es un método postraduccional pero en condiciones elevadas de azucares las proteínas
pueden glicosilarse por un mecanismo no enzimático dado por la reacción de Maillard (interacción entre el
aldehído de la glucosa y los grupos amino de las proteínas). La glucosilación de proteínas termina afectando la
actividad enzimática y se produzca estrés oxidativo.
Hay productos tempranos de glucosilación llamados “Amadori” que producen daños oxidativos y respuesta
inflamatoria.
Estos procesos ocurren en horas o pocos días, pero si durante mucho tiempo se somete a las proteínas a la
presencia de altas concentraciones de glucosa lleva a la formación de productos avanzados de glicosilación, los
253
AGEs, que producen entrecruzamientos y cambios estructurales importantes en las proteínas, como el colágeno.
La presencia y aumento de los AGEs son los causantes de neuropatías, retinopatías, disfunción renal, cataratas y
enfermedad cardiaca coronaria en pacientes con diabetes no controlada.
Diabetes mellitus dependiente de insulina (DMID) o tipo I
El páncreas no puede secretar insulina y por ende no se produce la inhibición de la liberación de glucagón; el
páncreas secreta glucagón por más que este en situación de hiperglucemia. En el hígado se sigue produciendo
glucogenólisis y gluconeogénesis (a partir de a.a del musculo, o del lactato de musculo y eritrocitos). El hígado
gluconeogénico libera glucosa al torrente sanguíneo acentuando aún más la condición de hiperglucemia.
Además, la glucosa se acumula pero no puede ser tomada ni por el tejido adiposo ni por el musculo esquelético
porque no hay insulina que induzca la exposición de los GLUT 4.
Teniendo en cuenta que el glucagón produce la movilización de AG hacia el hígado para que este los β-oxide y
obtener la energía necesaria para sintetizar mas glucosa, se produce tambien un aumento de la movilización de
AG que ingresan al hígado para generar síntesis de cuerpos cetónicos. Entonces, en el torrente sanguíneo existe
una acumulación de AG y de cuerpos cetónicos, característico de los diabéticos tipo I.
Por otro lado, al no haber insulina la lipoprotein lipasa esta inactiva y los quilomicrones que transportan AG de
la dieta y VLDL que transportan AG generados por el hígado no pueden metabolizarse; se produce tambien un
aumento de TAG en sangre.
Tratamiento: Insulina, dieta, ejercicio.
Diabetes mellitus no insulino dependiente (DMNID) o tipo II
La resistencia a la insulina en este tipo de diabetes se puede dar por genética, obesidad, estilo de vida sedentario
o envejecimiento. Inicialmente dicha resistencia produce a una hiperinsulinemia forzando al páncreas y
provocando el deterioro de la tolerancia a la glucosa. Esto produce que el páncreas se agote y disminuya la
función de las células β pancreáticas, produciendo una diabetes tipo II.
254
Los cambios metabolicos que vemos son que el pancreas produce una hiperinsulinemia aunque este simpre
secrete insulina de forma basal. La insulina en el higado porduce el almacenamiento de glucosa en forma de
glucogeno; el exceso de glucosa lleva a la sintesis de AG, que luego sintetizan TAG que son transportados por
las VLDL. Pero, al haber un aumento de glucosa en el torrente sanguineo y existir una resistencia al ingreso de
dicha glucosa a tejido adiposo y musculo, lleva a la acumulacion de glucosa (hiperglucemia), TAG y
quilomicrones en sangre.
255
Integración metabólica por PPARs
Los PPARs son receptores intracelulares que interaccionan con distintos ligandos que pueden ser AG o
derivados. Estos en el citosol dimerizan con el receptor para retinoides RXR, ingresan al núcleo y regulan la
expresión de genes que regulan el metabolismo de lípidos y glúcidos en distintos tejidos.
Hay distintos tipos de PPARs y c/u tiene distinta acción:
PPARα (alfa): induce la beta oxidación en musculo; en hígado tambien frente a una respeta de ayuno.
PPARγ (gamma): inducen la sensibilidad del musculo a la insulina, aumentan la síntesis de AG en hígado y
tejido adiposo.
PPARδ (delta): participan en la beta oxidación y termogénesis por parte del musculo y tejido adiposo.
256
Cáncer
Conocimientos previos
Control del ciclo celular
1) Niveles de proteínas regulatorias: Ciclinas → varía su concentración a lo largo de todo el ciclo celular,
porque hay diferencias en la transcripción y degradación de cada una de ellas.
2) Activación de las CDK (quinasas dependientes de ciclinas):
- Por dimerización
- Por fosforilación
3) Proteínas inhibidoras de CDK (CKI): como la p27 o la p21.
Existe también control del ciclo celular por medio de complejos ubiquitin-ligasas que son los que le dan la
irreversibilidad al ciclo celular, que vaya solo en 1 dirección.
SCF
- Fase G1 y S.
- Ciclo G1/S y CKI.
- Actividad constante.
Complejo promotor de anafase (APC/C)
-Fase M.
-Ciclo M y otros.
-Actividad variable.
Puntos de control o “checkpoints”
El ciclo tiene una parte influenciada por señales externas que es hasta el punto R; para esto necesita de la presencia
de mitógenos u otros factores que promuevan la proliferación (entrada de la célula al ciclo celular). Hay otra parte
que es un programa autónomo, una vez que ya se disparó el ciclo celular va a seguir → está dando a nivel de un
punto R de restricción o no retorno, cuando se desencadena la transición G1/S.
La célula censa que el medio extracelular sea favorable y que no haya daño en el ADN. En este punto R participa
la proteína Rb que recluta al factor de transcripción E2F y, cuando Rb está fosforilada, libera a E2F y empieza la
transcripción de genes para que prosiga el ciclo celular.
Otros puntos de control:
Puntos de control en S: la célula censa si hay daño en el ADN.
Punto de control en M: la célula censa que estén todos los cromosomas unidos al huso mitótico para la división
celular.
El daño en el ADN se censa a nivel de distintas quinasas que están activadas por el ADN dañado y una de las más
importantes en este censo es la proteína P53.
257
Cáncer: desregulación del control del ciclo celular
Cuando ocurre esta desregulación va a promoverse una proliferación descontrolada, lo cual puede llegar a generar
un proceso cancerígeno.
Células normales: su crecimiento depende del anclaje y están inhibidas por contacto → se van a formar una
monocapa y el crecimiento de una célula va a inhibir a que siga creciendo la célula de al lado.
Células tumorales: No depende del anclaje (no tiene que estar anclado a una base), no se inhiben por contacto y
forman acúmulos de células en vez de monocapas como forman las células diferenciales.
Proteínas que participan en el control del crecimiento celular y proliferación
Siete diferentes proteínas pueden participar en el control del crecimiento celular y proliferación: moléculas de
señalización, receptores de la señal (celulares o activadores de receptores de la señal codificados por virus),
transductores intracelulares, receptores intracelulares (como res receptores de las hormonas esteroideas), factores
de transcripción, proteínas de reparación del ADN y proteínas de control del ciclo celular o proteínas apoptóticas.
Todas estas proteínas van a estar regulando el ciclo celular y si alguna de estas funciona mal es donde podemos
llegar a tener un proceso cancerígeno.
En circunstancias normales las células viven en un equilibrio homeostático que responde a las necesidades de
supervivencia, proliferación y desarrollo.
El cáncer surge cuando se alteran los genes que controlan estos procesos: proto-oncogenes (genes que codifican
para proteínas que promueven el ciclo celular) y genes supresores de tumores (genes que codifican para proteínas
que inhiben el ciclo celular y promueven la diferenciación).
258
Caso 1: todo normal → Homeostasis. Se van a ir dividiendo la misma cantidad células que las que van entrando
en apoptosis.
Caso 2: División celular aumentada y apoptosis normal. Tengo una mayor cantidad de células, una proliferación
más alta frente a una apoptosis normal y se puede llegar a generar un tumor.
Caso 3: División celular normal y apoptosis reducida. Entran en apoptosis menos células de las que proliferan y
puede llegar a generar un tumor.
Todos los genes que están regulando el nacimiento y la muerte de la célula deben estar en un equilibrio muy
controlado para que no se produzca un proceso tumoral.
Cáncer como un proceso microevolutivo
Los proto-oncogenes o genes supresores de tumores pueden sufrir mutaciones o cambios epigenéticos. Una
mutación le puede dar a una célula una ventaja selectiva que le permita dividirse más frecuentemente, dando lugar
a un clon mutante en crecimiento o evitar la apoptosis.
Sucesivas rondas de mutación, competencia y selección natural.
Ej: Cáncer colorrectal
Primero tenemos los adenomas que tienen la proliferación activada porque han mutado varios genes. Primero se
le muta un gen de la reparación del ADN por lo que se le van generando progresivamente mutaciones que no van
a ser reparadas. La célula tiene una ventaja adaptativa para que muten más genes que favorezcan el cáncer.
Tumor benigno: cáncer circunscripto a un determinado lugar u órgano, se extirpa y se termina el problema.
Tumor maligno: el cáncer se disemina por el organismo.
259
Seis alteraciones básicas que cooperan en la carcinogénesis → Trabajo de Hanahan y Weinberg (2000).
“Los 6 sellos del cáncer”
- Auto-suficiencia en señales de crecimiento
- Evasión de la apoptosis → inmortalidad
- Angiogénesis constante
- Insensibilidad a señales anti-crecimiento
- Invasión de tejidos y metástasis
- Capacidad de división ilimitada
Con que una sola de estas características esté desregulada probablemente no alcance para que se produzca un
cáncer. Se requiere al menos 6-7 mutaciones/alteraciones para que se desarrolle un cáncer, teniendo en cuenta que
algunos canceres requieren más o menos mutaciones para desarrollarse.
Oncogenes
- Mutaciones de los proto-oncogenes, cuya función normal es promover la proliferación celular y/o el bloqueo de
apoptosis → mutación para el desarrollo de la actividad cancerígena.
- Son mutaciones de ganancia de función ya que incrementan la proliferación.
- Son dominantes (con que haya solo un alelo mutado, ya tenemos el producto en mayor cantidad o en mayor
actividad lo que va a expresar la característica mutada).
Funciones normales de proto-oncogenes: factores de crecimiento, receptores, transductores, factores de

transcripción, reguladores positivos del ciclo celular.
Genes supresores de tumores
- Codifican para proteínas que de una u otra forma inhiben la proliferación celular → ej: genes que codifican para
proteínas reparadoras del ADN o p27 y p21 que son CKI.
- Mutaciones con pérdida de función en estos genes promueven la división celular descontrolada → es como
suprimir el freno de mano del CC.
- Son recesivos (con un solo alelo mutado voy a tener el ciclo celular controlado, tienen que estar los dos alterados
para que se produzca un cambio).
Ambos tipos de genes no son más propensos que el resto de los genes a sufrir mutaciones, pero con uno solo que
mute se puede producir una cascada descontrolada de mutaciones que alteren la maquinaria de control del CC.
Genes cuya activación favorece la carcinogénesis → oncogenes
Los oncogenes actúan en vías que:
- Promueven la división celular.
- Promueven la inmortalidad.
- Promueven la angiogénesis.
260
- Promueven la metástasis.
- Inhiben la apoptosis.
Actúan en vías que ratifican los sellos del cáncer. En general, promueven el crecimiento y la malignidad de los
tumores.
Mecanismos de activación de proto-oncogenes
Sufren una mutación activadora, y tienen un producto funcional diferente al del proto-oncogén.
- Puede ser que haya una mutación puntual en un codón y que una proteína normal del CC mimetice estar
permanentemente fosforilada y activada. Por ejemplo con el cambio de un a.a básico por uno acido se puede
mimetizar la carga negativa del fosfato con el grupo R negativo el a.a acido.
- Puede ser que la mutación no esté en el gen per se si no que esté en el promotor, en la parte reguladora. Entonces
hay una proteína normal pero en exceso, por lo que va a tener mayor actividad.
- Puede suceder que haya una traslocación entre cromosomas o distintas secciones del mismo cromosoma
(crossing over anormal) y se tenga una proteína nueva que sea hiperactiva.
- Puede ser que se produzca amplificación génica y que se tenga una cantidad excesiva de una proteína normal.
También hay algunos oncogenes que tiene un origen viral (lo trasmite un virus).
Lo que se activa básicamente son las proteínas hiperactivas o proteínas normales en exceso.
En un montón de canceres las proteínas RAS y Myc están sobreexpresadas (en gran cantidad o hiperactivas).
Genes cuya inactivación favorece la carcinogénesis → genes supresores de tumores
Los genes supresores de tumores actúan en vías que:
- Promueven la apoptosis.
- Inhiben la división celular.
- Inhiben la inmortalidad.
- Inhiben la angiogénesis.
261
- Inhiben la metástasis.
En general inhiben la progresión de tumores malignos.
Mecanismos de inactivación de genes supresores de tumores
En un proceso carcinogénico se inactivan los siguientes factores de regulación:
- Con cambios epigenéticos (por ejemplo metilando al promotor) → silenciamiento a largo plazo.
- Mutación con pérdida de la función.
- Deleción (de un exón o parte del gen y la proteína no funciona).
Tienen que estar ambos alelos mutados para que haya una pérdida de la función de estos genes supresores.
Proteínas codificadas por genes supresores de tumores o proteínas “producto” de los mismos
- Proteínas intracelulares que regulan o inhiben la progresión a través de un estadio específico del ciclo celular
(ej: p21, p16 y Rb).
- Receptores o transductores de señales de hormonas secretadas o señales de desarrollo que inhiben la proliferación
celular o son “anticrecimiento” (ej: TGF-β).
- Proteínas de control de puntos clave que detienen el ciclo celular si el ADN está dañado o los cromosomas son
anómalos (ej: p53).
- Proteínas que estimulan la apoptosis (proapoptoticas).
- Enzimas que participan en la reparación del ADN.
SEIS SELLOS DEL CÁNCER: en detalle
Autosuficiencia de señales de crecimiento
Ejemplo: Factores de crecimiento (GF).
Se une el factor de crecimiento a su receptor, se desencadena la cascada vía de PI3K a PKB y se favorece el
crecimiento de supervivencia celular. Por otro lado, vía una cascada Ras/MAPKs, se activa el factor de
transcripción Myc el cual va a transcribir distintos genes, entre ellos las ciclinas D que desencadenan el ciclo
262
celular. Pasando el punto R de restricción se fosforila la Rb, libera al factor de transcripción E2F y este va a activar
la transcripción de genes de fase S como la ciclina E, A y las enzimas necesarias para la síntesis de ADN como la
ADN polimerasa, etc. Además, estas enzimas son necesarias para la síntesis de nucleótidos.
En un proceso cancerígeno los receptores sin tener unido el ligando desencadena la respuesta celular a la división.
Es decir, se produce la cascada que termina liberando a E2F para la transcripción de genes sin ningún sentido
normal.
¿Por qué ocurre? Porque los receptores están actuando como onco-proteínas. En el caso del receptor de GF hay
una deleción de parte del gen que codifica para el dominio extracelular (el que reconoce el ligando), y en ausencia
del factor de crecimiento epidérmico igualmente tiene actividad tirosin-quinasa que desencadena la señalización.
En otro caso, como el del receptor Her2 de factores de crecimiento, hay una mutación puntal que cambia una
valina por una glutamina y en ausencia de ligando se produce la dimerización y la activación de su actividad
quinasa, desencadenando una señalización en ausencia del ligando.
Evasión de la apoptosis
En ausencia de un factor de crecimiento o trófico la célula cumple su ciclo de vida y entra en apoptosis por
activación de las caspasas.
En presencia de un factor trófico, que les da la señal de supervivencia a las células, la entrada de iones vía BAX
(señalización apoptótica) se inhibe. Esa inhibición impediría que el citocromo C pase al citosol para desencadenar
la cascada de caspasas y, por lo tanto, la célula seguiría viviendo.
BAX actuaría como una proteína codificada por un gen supresor de tumor (“frena” el cáncer) ya que promueve la
muerte celular programa, sea por una anomalía o por el ciclo de vida celular normal.
En procesos cancerígenos una posibilidad es que la proteína BAX no sea funcional, así se impide la entrada de
iones a la mitocondria para desencadenar los procesos apoptóticos y esta célula, aún en ausencia de factores
tróficos, sobreviva.
263
Capacidad de división ilimitada (potencial replicativo ilimitado)
En cada ciclo de división celular los cromosomas pierden un pedazo del extremo 3’ (el cebador), que no se rellena
porque no tiene un 3’ adelante como para que la polimerasa lo complete, entonces los telómeros se van
“acortando”.
En una célula germinal que tiene la telomerasa activa, el largo del telómero va a ser constante durante todas las
divisiones celulares.
La telomerasa tiene una actividad de transcriptasa reversa que alarga los telómeros que se van a cortando en cada
uno de los ciclos de división celular.
Una célula somática que no expresa telomerasa, en las divisiones celulares los telómeros se van acortando. Llega
un momento en la que hay una longitud de telómero que se llama umbral de sentencia que es cuando las células
dejan de dividirse. Si se siguen dividiendo va a llegar a una crisis en donde la mayoría de las células mueren.
Hay algunas células que se inmortalizan, las tumorales, y empiezan a expresar telomerasa para mantener los
telómeros y no perder material genético. En este caso la telomerasa seria producto de un oncogén.
Angiogénesis
Los tumores en un principio son masas celulares y van a vivir en condiciones de hipoxia. Esa misma hipoxia y
otros oncogenes favorecen la secreción del factor de crecimiento de endotelio vascular (VEGF), el factor de
crecimiento fibroblástico (FGF) y el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), los cuales van a
264
favorecer la formación de nuevos vasos sanguíneos (angiogénesis) para que el tumor sea vascularizado y tenga
mayor cantidad de nutrientes para poder seguir creciendo → el mismo tumor se autogenera la angiogénesis.
Invasión y metástasis
Se necesita que la matriz extracelular sea permisiva para que estas células puedan extravasarse al torrente
sanguíneo e ir a colonizar otros sitios dentro del órgano, entonces se expresan y secretan proteinasas que degradan
la matriz extracelular (para facilitarle la salida a las células del tumor primario) y se alteran los receptores de
adhesión para favorecer la invasión y metástasis → tumores netamente malignos.
2011 → se agregan los sellos emergentes y características permisivas
Sellos emergentes:
- Evasión al sistema inmune.
- Desregulación del metabolismo energético.
Características permisivas:
- Inestabilidad y mutación del genoma.
- Inflamación promovida por el tumor.
Inestabilidad genómica y alta tasa de mutación
Como ya se dijo los proto-oncogenes y los genes supresores de tumores tienen productos de promueven a la
carcinogénesis dependiendo la alteración que padezca cada uno, si se activan o se inhiben.
Existen otros genes que son los genes cuidadores que codifican para proteínas que reparan o previenen el daño
en el ADN.
Ej: Enzimas de reparación del ADN.
Las mutaciones son mutaciones con pérdida de función. Esa pérdida de función permite una mayor acumulación
de mutaciones en otros genes, por eso es una característica permisiva. Son genéticamente recesivas y surgen por
deleción, mutación puntual o metilación. A consecuencia de todo esto, aumenta la probabilidad de que un mayor
número de mutaciones se sigan acumulando promoviendo la carcinogénesis.
265
La probabilidad de que ocurran muchas mutaciones claves en una única célula es muy baja. Sin embargo, algunas
mutaciones específicas conllevan a un aumento en la tasa de mutación en células precancerosas, así es que
aumenta la probabilidad de más mutaciones y progresión a cáncer.
Ejemplo: p53 (el guardián del genoma).
El p53 se activa por ADN dañado y activa la transcripción de genes que promueven la apoptosis (como BAX), la
detención sostenida en G1 y G2 (como p21, una CKI), enzimas de reparación de ADN (como BRCA1) y
promueven a la regulación del metabolismo.
Desregulación del metabolismo energético
Las células cancerosas se adaptan para tener una provisión ilimitada de lo que necesiten y desregulan todo el
metabolismo del resto del organismo para que los productos de oncogenes activados o genes supresores de
tumores inhibidos favorezcan a que tengan un suministro ilimitado de nutrientes.
Características de célula tumoral
- Glucólisis anaeróbica → se forma piruvato que luego fermenta a lactato → Efecto Warburg
- Glutaminólisis → se nutren de glutamina
- Lipogénesis → el crecimiento ilimitado necesita de AG para formar los fosfolípidos de membrana, además de
la provisión de energía
En un tejido diferenciado, tanto en presencia como en ausencia de oxígeno, la glucosa pasa a piruvato, este a la
mitocondria para descarboxilarse y entrar al ciclo de Krebs, etc. Finalmente se obtiene CO2, H2O y abundante
ATP. En ausencia de oxígeno el piruvato va a fermentación láctica y se obtiene lactato con muy pocas moléculas
de ATP obtenidas.
En una célula tumoral o un tejido proliferativo tanto en presencia como en ausencia de O2 la glucosa pasa a
piruvato y luego a lactato, y muy poco piruvato entra a la mitocondria. Tenemos rendimiento de ATP muy bajo
pero una formación de intermediarios que me van a servir como bloques para la construcción de otras moléculas.
Esto puede producir acidosis láctica en el microambiente del tumor.
En una célula no cancerosa ocurre el metabolismo energético de la glucosa normalmente, donde obtenemos mucho
ATP y se libera CO2.
266
En una célula cancerosa no hay limitación de la entrada de glucosa (toma toda la que necesita) y saca un montón
de ATP de la glucólisis, no porque se metabolice mejor, sino porque se ingresa mucha cantidad y se la oxida. Voy
a tener como producto de la degradación de la glucosa moléculas que se van a utilizar para sintetizar otras cosas
como nucleótidos, lípidos desde el citosol de la célula cancerosa. Las mitocondrias se utilizan poco para la
producción de energía.
El aporte extra de carbonos proviene de dos genes sobreexpresados:
- GLUT1 (transportador de glucosa de alta afinidad).
- ASCT2 (transportador de glutamina).
En una célula cancerosa tenemos una sobreexpresión de GLUT1 que hace que ingrese mucha más glucosa de lo
normal y entra en glucólisis.
Va a haber muchos genes/proteínas hiperactivados en muchas células cancerosas, como:
• RAS, que activa la trascripción de GLUT1.

• Myc, que activa la glucólisis.
• HIF1, inducido por hipoxia, que también activa el glucolisis.
- La isoforma de la piruvato quinasa (PK- M2) hace que el piruvato esté canalizado hacia la lactato
deshidrogenasa y no hacia el transportador de lactato de la mitocondria.
- HIF1 mediante una quinasa inhibe la piruvato deshidrogenasa (PDH), con lo cual el piruvato no es
catabolizado en la mitocondria y queda en el citosol.
- Las isoformas PK-M1 y PK-M2 son variantes de splicing alternativo. El factor de transcripción asociado
a la transcripción de PK-M2 (es decir, al splicing de ese gen de PK-M cortado y empalmado como PK-
M2) va a ser Myk.
267
Lactato
Sale de la célula o se utiliza. Si sale, en el microambiente extracelular se presenta una diminución del pH y la
presencia de lactato por un cotransporte con H+; esto genera un ambiente inmunopermisivo (baja la actividad
de las células inmunes que debería resguardar al organismo del crecimiento del tumor), activa la inmunosupresión
(a los MO los vuelve facilitadores), activa la angiogénesis (porque se activan los factores anteriormente
mencionados) y activa la invasividad (metástasis).
Son mecanismos que retrolimentan al otro positivamente para que la presencia de oncogenes active el
metabolismo y dicha activación a su vez genere mas oncogenes.
Por mas que no tengamos un factor que active la independencia de factores de crecimiento, tenemos actividad
de PI3K a AKT y esto favorece la trascripción de genes que van a estar involucrados en la síntesis del
transportador de glutamina, síntesis de nucleótidos, síntesis de a.a, entrada de glucosa y glucólisis.
268
Glutaminólisis
Le entra en mucha cantidad la glutamina a la célula. La glutamina se transforma en glutamato por la glutaminasa,
y el glutamato por la glutamato deshidrogenasa se transforma en α-cetoglutarato y este puede entrar a Krebs,
funcionando como una reacción anaplerótica.
En las células cancerosas se produce la glutaminólisis como fuente de C. Además, se expresan dos tipos de
isocitrato deshidrogenasa: la isoforma mitocondrial que transforma el isocitrato en α-ceto-glutarato (reacción
irreversible de Krebs). Y la isoforma citosólica (isocitrato DH 1) que al α-ceto-glutarato lo carboxila a citrato.
IDH1 se expresa solo en células cancerosas y transforma el α-cetoglutarato en citrato citosólico, que va a ser
sustrato de la citrato liasa para dar acetil-CoA y oxalacetato. El acetil-CoA por medio de la AG sintasa va a dar
ácidos grasos → en este caso, la glutamina va a ser sustrato de la síntesis de ácidos grasos; mientras que en una
célula normal el sustrato para dicha síntesis es el piruvato que proviene de la glucosa, que por piruvato DH pasa
a acetil-CoA y luego a citrato que sale de la mitocondria.
Es mecanismo se presenta porque es poco el piruvato que entra a la mitocondria en células cancerosas para luego
dar acetil-CoA y por último citrato.
Ejemplo de oncometabolito (determinante de células tumorales): 2-hidroxiglutarato → mutación de la IDH1.
• Activa proteínas que alteran la expresión génica.
269
MAPA METABÓLICO DE REFERENCIA
Desregulación del metabolismo energético: útil para el diagnóstico
• Tomografía computada
• Tomografía por emisión de positrones: se le da a la persona una glucosa modificada (no metabolizable,
por ende si hay algo queda ahí) a la cual le ponen un flúor 18 que emite positrones y va a dar una imagen.
• Superposición y coloreado: la glucosa modificada ingresa al tumor por GLUT1 y luego con coloreado se
ve la superposición.
- Tumores de cerebro: se utiliza glutamina marcada con flúor 18.
270

Resumenes de BBM 2021 Por Denise Bourlot

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Resumenes de BBM 2021 Por Denise Bourlot

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Resumenes de BBM 2021 Por Denise Bourlot

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Denise Bourlot | 2021

- Estructura y función de aminoácidos y proteínas

Estructura y función de aminoácidos y proteínas

Estructura general y clasificación

Dependiendo la cadena del grupo R, a los a.a los podemos clasificar:

L a.a → desvío de la luz polarizada a la izquierda

D a.a → desvío de la luz polarizada a la derecha

La dirección del desvío se determina experimentalmente.

A pH < pI → carga neta (+) del a.a

A pH > pI → carga neta (–) del a,a

Como se calcula el punto isoeléctrico?

Niveles de organización estructural proteica

Siguiente nivel/grado de plegamiento →

Perdida de estructura: desnaturalización e hidrolisis

Hay procesos de desnaturalización: reversibles e irreversibles

- Simples o conjugadas → clasificación en base a su composición química

TÉCNICAS DE CUANTIFICACIÓN, SEPARACIÓN Y PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS

Técnicas de cuantificación → espectrofotometría (medida de color proteica).

Técnicas de separación y purificación

• Por carga → electroforesis, cromatografía de intercambio iónico.

Se hace in vitro para poder estudiar la función proteica en un organismo/célula.

Esta técnica va para cualquier molécula que presente color.

Técnica de separación. Existen electroforesis que se realizan en condiciones nativas o en condiciones

Se puede realizar sobre distintos soportes, de papel o en gel.

• En una electroforesis nativa se separa según su relación carga-masa.

La electroforesis en la que se utiliza un soporte de papel se utiliza en la bioquímica clínica para el

Plasma → cuando se obtiene sangre en presencia de un anticoagulante.

Alteraciones de proteinogramas de suero humano → valor diagnostico

Ausencia de la banda α1 → deficiencia de α-antitripsina.

Hb del adulto (Hb A) → 2 cadenas alfa y 2 beta.

Definición: catalizador biológico de naturaleza principalmente proteica.

Características de las enzimas

1) La mayoría son proteínas, o ARN (ribozimas).

3) Presentan gran capacidad para acelerar reacciones químicas.

4) Actúan en un rango óptimo de pH y T (temperatura).

✓ Implicadas en patologías de origen genético (una mutación → deficiencia en la actividad enzimática →

✓ Utilidad en el diagnóstico clínico (por su actividad biológica).

✓ Herramientas en técnicas de biología molecular.

✓ Blanco de fármacos en tratamiento de diferentes patologías.

Los cofactores tambien pueden ser clasificados en:

Catalíticos → si no son consumidos en la reacción.

No catalíticos/cosustratos → si son transformados durante la reacción.

ATP: actúa como cofactor transfiriendo grupos fosfato.

Según el tipo de reacción catalizada, las enzimas se clasifican en 6 grandes grupos:

1- Oxidorreductasas: aquellas que catalizan reacciones redox o de oxido-reducción; en ellas se produce

Funcionamiento de las enzimas

La catálisis se realiza disminuyendo la energía de activación de la reacción. El equilibrio de la reacción no se

Que es y cómo podemos medir la velocidad de una reacción?

Velocidad de reacción es el cambio en la concentración de producto en la unidad de tiempo. También puede

Lo que interesa determinar es:

Modelo de Michaelis Menten

Representación gráfica tradicional de Lineweaver-Burk (doble recíproca)

Ordenada al origen → punto donde la recta corta al eje Y

Determinación de Km y Vmax de una enzima que sigue la cinética de M-M: experimento

Por ejemplo 1 UAE puede definirse como:

❊ La cantidad de enzima que transforma un μmol de sustrato/min.

❊ La cantidad de enzima que sintetiza 1mol de producto por segundo.

La determinacion de la misma es importante durante el proceso de purificación de una enzima, porque a

Este valor equivale a la constante de V de transformación del complejo ES en P y se obtiene haciendo: