Informe Lab 5 Grupo 2

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA
SANTANDER
INGENIERÍA BIOTECNOLÓGICA
BIOLOGÍA CELULAR
PRESENTACIÓN DE INFORME LABORATORIO 5
Determinación cualitativa de la actividad proteasa y papaína
Daniel Sebastián Calderon Tarazona (1612049 )

Nicol Daniel Caballero Vergel ( 1612067)
Juan Pablo Rodríguez Vecino ( 1612046 )
San José de Cúcuta
Octubre 18 del 2023

Introducción
Las enzimas proteolíticas, como las proteasas y la papaína, desempeñan un papel vital en la
degradación de proteínas en organismos vivos. La actividad de estas enzimas es esencial
para diversos procesos biológicos, incluyendo la digestión de alimentos, la remodelación de
tejidos y la regulación de procesos intracelulares.
Las proteasas son enzimas que descomponen las proteínas en sus componentes más
simples, los aminoácidos, mediante la ruptura de enlaces peptídicos específicos. Por otro
lado, la papaína, una enzima presente en la papaya, también es una proteasa que posee
propiedades proteolíticas notables.
Este informe se centrará en describir en detalle la metodología utilizada para determinar la
actividad proteasa y de papaína, así como en presentar los resultados obtenidos y su
relevancia en el contexto biológico. Además, se discutirán las posibles implicaciones y
aplicaciones de estos hallazgos. En última instancia, este trabajo pretende contribuir al
entendimiento de la actividad de las proteasas y de papaína, lo que puede abrir nuevas
perspectivas en el ámbito de la biología y la biotecnología.
Objetivos
Objetivo General:
Evaluar y determinar cualitativamente la actividad de las enzimas proteasa y papaina en

muestras biológicas, con el fin de comprender su funcionamiento y su potencial aplicación
en diversos campos biológicos y tecnológicos.
Objetivos específicos
 Preparar las muestras: Preparar las muestras biológicas adecuadas que contengan
proteínas y sean aptas para el análisis de la actividad de proteasa y papaina.
 Realizar los ensayos enzimáticos: Llevar a cabo ensayos específicos para evaluar la
actividad proteasa y de papaina en las muestras, siguiendo los procedimientos
estandarizados.
 Observar los resultados: Registrar observaciones cualitativas de los cambios en las

muestras después de la exposición a las enzimas, como cambios de color, textura o
turbidez.

 Analizar los datos: Interpretar los resultados de los ensayos, identificando la
presencia o ausencia de actividad proteasa y de papaina en las muestras y comparar
los resultados obtenidos con controles.
Materiales
 Salchicha
 Jugo de papaya
 Tubos de ensayo
 Gradillas
 Pipeta
 Pipeteador
 Mortero con pistilo
 Hojilla de bisturí 21
 Embudo
 Vaso de precipitado
 Gasas
 Agua destilada
Reactivos
 NaOH (Hidróxido de sodio)
 C4SO4 (Sulfato de cobre)
Resultados
Esta practica de laboratorio queremos saber que pasa cuando la faccion acuosa de la
salchicha (proteasa) la cual contiene proteína entra en contacto con la papaya (papaína) que
pasa cuando estas dos entran en contacto y se les agrega la reacción de Biuret y se
identifican los cambios que se identicaban de forma visual con un cambio de color o no.
En primera instancia se corta una salchicha en trozos pequeños este se pone en el mortero y
con ayuda del agua destilada y el pistilo, maceramos hasta tener la fase acuosa de la
salchicha luego de esto se separa la fase solida de la acuosa en un vaso de precipitado.
La fracción acuosa se adiciona en los siguientes tubos de ensayo para determinar la

actividad
enzimática:
Marque los tubos del 1 al 5 y adicione según corresponda la cantidad de reactivos.
Tubo 1: 2 mL de fracción acuosa del jamón
(proteína) + 1 mL de agua destilada
Tubo 2 al 4: 2 mL de fracción acuosa del jamón
(proteína) + 1 mL del jugo de papaya
Tubo 5: 2 mL de agua destilada
Ya teniendo estos datos procedemos a verter en cada tubo de ensayo según lo indicado
anteriormente.
Una vez que adicione el jugo de papaya, verifique la hora y regístrela. Adicione 2 mL
NaOH
(10%) + 3 ó 5 gotas de CuSO4 (0,5%) a los tubos 1, 2 y 5. Registre la coloración generada.
A los 15 min después, adicione 2 mL NaOH (10%) + 3 ó 5 gotas de CuSO4 (0,5%) al tubo
3y
registre la coloración generada.
A los 15 min después, adicione 2 mL NaOH (10%) + 3 ó 5 gotas de CuSO4 (0,5%) al tubo
4y
registre la coloración generada.
Resultados y discusiones.
1. ¿En cuál(es) tubo se observó clarificación en el color violeta por la reacción
de Biuret? ¿En qué tiempo se presentó la mayor clarificación del color violeta?
El tubo 1, que contenía 2ml de fracción acuosa de jamón + 1ml de agua destilada.
Fue el que presento el color violeta, Una vez se adicionaron las gotas de NaOH al
(10%) y CuSO4 al (0.5%) cambio de color de manera inmediata, una vez pasó el
tiempo fue perdiendo poco a poco el color violeta pasando a un color más pálido.
2. Explique a qué se debe este resultado, teniendo en cuenta la actividad

enzimática proteolítica de la papaya (papaína).
Los cambios en la coloración en los Tubos 2, 3 y 4 se deben a la presencia de

aminoácidos liberados por la acción proteolítica de la papaína. Cuanto más tiempo
esté expuesta la mezcla de papaína a las proteínas del jamón, mayor será la cantidad
de aminoácidos liberados y, por lo tanto, más intensa será la coloración. Esto
demuestra la actividad proteolítica de la papaína en la digestión de proteínas, como
la que se encuentra en el jamón.
3. Sobre un modelo de ajuste inducido para el acoplamiento proteasa (papaína)-

proteína del jamón, demuestre la reacción que ocurrió cuando la fracción acuosa del
jamón que contiene proteína entra en contacto con las proteasas (papaína) presentes
en el jugo de papaya.
Cuando la fracción acuosa del jamón que contiene proteína entra en contacto con la
papaína, la enzima reconoce y se une al sustrato, en este caso, las proteínas del
jamón. La unión es altamente específica debido a la forma de la papaína y la
estructura de la proteína del jamón. La unión del sustrato a la enzima induce
cambios conformacionales en ambas. La papaína cambia su forma para acomodar
mejor la proteína del jamón (sustrato) y formar un complejo enzima-sustrato. Este
cambio conformacional es lo que se conoce como ajuste inducido.
Una vez que el complejo enzima-sustrato está formado, la papaína cataliza la
reacción química, que, en el caso de la papaína, implica la ruptura de los enlaces
peptídicos en la proteína del jamón. Esto conduce a la descomposición de la
proteína en fragmentos más pequeños. Los productos de la reacción son los
fragmentos de proteína del jamón descompuestos en péptidos más pequeños y
aminoácidos, que son más fáciles de absorber y digerir.
En conclusión, de la reacción que ocurre es que en la enzima papaína se une a la
proteína del jamón en la fracción acuosa del jamón, induce cambios
conformacionales en ambas moléculas para formar un complejo enzima-sustrato y
luego cataliza la reacción química que descompone la proteína en productos más
pequeños. Este proceso es fundamental en la digestión de proteínas en el sistema
digestivo.
4. ¿Cuál es la función de las enzimas proteasas tipo papaína en la papaya?
Explique la función de estas enzimas proteasas producidas durante la digestión de
alimentos ricos en proteína.
-Las enzimas proteasas tipo papaína en la papaya son responsables de descomponer

las proteínas en esta fruta. La papaya contiene estas enzimas para digerir sus propias
proteínas, lo que ayuda a ablandar la fruta a medida que madura. Esto es beneficioso
para la papaya, ya que le permite volverse más comestible a medida que madura y
sus proteínas se descomponen.
-Las enzimas proteasas producidas durante la digestión de alimentos ricos en
proteína tienen la función principal de descomponer las proteínas en los alimentos
en fragmentos más pequeños, como aminoácidos, para facilitar su absorción y
utilización por el cuerpo. Estas enzimas son cruciales para la digestión de proteínas
y la obtención de nutrientes esenciales a partir de los alimentos ricos en proteínas
que consumimos.

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Evaluar y determinar cualitativamente la actividad de las enzimas proteasa y papaina en

 Observar los resultados: Registrar observaciones cualitativas de los cambios en las

La fracción acuosa se adiciona en los siguientes tubos de ensayo para determinar la

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