PARA QUE SE USA

La astaxantina es un carotenoide xantófilo de alto valor añadido sintetizado de

forma natural por algunas levaduras, bacterias, microalgas y, en menor medida,
por las plantas. También está presente en algunos animales, incluidos peces,
crustáceos y aves que consumen estos productores primarios, incapaces de
sintetizar esta molécula. Por lo tanto, la astaxantina se usa ampliamente en la
acuicultura como aditivo para alimentos para colorear salmónidos, camarones y
otros crustáceos de cultivo y, en menor medida, como antioxidante en los sectores
de suplementos dietéticos y cosméticos. Si bien numerosos estudios in vitro, in
vivo y clínicos han demostrado sus actividades biológicas, particularmente debido
a sus fuertes propiedades antioxidantes y antiinflamatorias, la astaxantina ha
adquirido un gran potencial económico para aplicaciones humanas, como un
potente ingrediente alimentario para la nutrición humana y salud.
PROUCCION A PARTIR DE H. PLIVIALIS
3. Haematococcus pluvialis : aspectos biológicos, fisiológicos y bioquímicos
La mayoría de los estudios clínicos presentados anteriormente se referían a la
astaxantina producida y extraída de la microalga H. pluvialis , que es la fuente más
prometedora de astaxantina natural para aplicaciones humanas. Este capítulo
presenta las propiedades biológicas y fisiológicas de esta alga, así como los
aspectos biotecnológicos que permiten la producción de astaxantina.
3.4. Papel fisiológico de la acumulación de astaxantina
De manera normal, la fotosíntesis genera especies reactivas de oxígeno (ROS) en
los cloroplastos que son neutralizadas por un sistema antioxidante endógeno
compuesto por enzimas superóxido dismutasa, catalasa y peroxidasa. Sin
embargo, bajo condiciones ambientales o de cultivo adversas (como alta
luminosidad, alta salinidad, falta de nutrientes, metales pesados, etc.), el equilibrio
entre la generación y la desintoxicación de ROS se rompe y conduce al estrés
oxidativo.
En H. pluvialis , la respuesta temprana al estrés oxidativo implica la regulación
positiva del sistema enzimático antioxidante. Cuando persisten las condiciones
estresantes, esta respuesta se reemplaza por la biosíntesis y acumulación de
astaxantina, lo que puede interpretarse como un mecanismo de defensa a largo
plazo. La astaxantina parece actuar como una pantalla que filtra parcialmente la
penetración de la luz en los cloroplastos, en particular en el campo azul,
reduciendo el daño fotooxidativo del aparato fotosintético causado por el exceso
de luz.
3.5. Composición bioquímica de la biomasa de H. pluvialis
La composición bioquímica de H. pluvialis es muy variable y depende en gran
medida del origen de la cepa, la etapa de su ciclo de vida y las condiciones
ambientales o de cultivo. La biosíntesis y acumulación de astaxantina están
asociadas con cambios en las vías del metabolismo primario, que se resumen en
general en un aumento en los niveles de carbohidratos y ácidos grasos, y una
disminución en los de nucleótidos y aminoácidos (excepto el ácido glutámico y el
glutatión reducido). En las etapas vegetativas del cultivo, en las que predominan
los macrozooides y las células cocoides, la biomasa puede ser relativamente rica
en proteínas y puede representar hasta el 40 % del peso seco. En la etapa roja del
cultivo, cuando predominan los hematocistos, el contenido de proteína puede
disminuir hasta alrededor de un 14 % dependiendo de las condiciones de
estrés. En estas células, el contenido total, de aminoácidos está compuesto por un
46% de aminoácidos esenciales y el ácido glutámico es predominante.
-Cultivo de H. pluvialis para la producción de astaxantina
Proceso de cultivo
H. pluvialis se puede cultivar desde el laboratorio hasta la escala industrial para
producir astaxantina. La mayoría de los cultivos se realizan en condiciones
fotoautotróficas en las que la luz es la fuente de energía para lograr la fotosíntesis
en tilacoides de los cloroplastos, e incorporando carbono mineral (CO 2 ) a la
materia orgánica. Sin embargo, H. pluvialis es una de las pocas microalgas que se
pueden cultivar en condiciones heterótrofas (sin luz) y mixotróficas (con exposición
a la luz) cuando una fuente orgánica de carbono, como el acetato, está presente
en el medio. A escala de laboratorio, H. pluvialis se puede cultivar en sistemas
convencionales utilizados para el cultivo de microalgas, que incluyen placas de
Petri, microtubos, microplacas, tubos de ensayo, matraces, columnas de burbujeo
o de aire, fotobiorreactores de tipo tubular o plano, bolsas, fermentadores o
estanques abiertos. A escala industrial, cultivo fotoautótrofo de H. pluvialisse lleva
a cabo en estanques de raceway abiertos, en los que el medio de cultivo se agita
mediante un proceso de agitación tipo rueda de paletas o en un fotobiorreactor
cerrado que consiste en un circuito translúcido con configuraciones variables
(tubular, cilíndrico, paneles planos, etc.) equipado con una bomba de circulación
para el medio de cultivo. Debido a la fragilidad de las células vegetativas verdes y
la concentración de células relativamente baja en el medio, solo se requiere un
bajo nivel de mezclado al inicio del cultivo para permitir suficiente disponibilidad de
luz y nutrientes, mientras que, a una alta concentración de células, el mezclado
debe ser aumentó para superar el fenómeno de la limitación de la luz debido al
sombreado mutuo de las células.
Se han desarrollado muchas recetas de medios nutritivos para el cultivo de
microalgas, entre las que se encuentran actualmente el Bold Basal Medium (BBM)
o el BBM modificado enriquecido en nitrógeno, y el medio BG-11.
para el cultivo de H. pluvialis . Recientemente, se demostró en el cultivo de dos
pasos que BBM alcanzó una mayor productividad de biomasa en comparación con
BG-11 durante la primera etapa de crecimiento vegetativo, mientras que se obtuvo
un mayor contenido de astaxantina utilizando el medio BG-11 sin nitrógeno.
- Impacto de los factores fisicoquímicos en el crecimiento y la productividad
Varios factores fisicoquímicos afectaron el crecimiento y el ciclo de vida de H.
pluvialis y deben tenerse en cuenta al cultivar esta microalga para producir
astaxantina de manera óptima. Los más fundamentales son la intensidad y calidad
de la luz, la temperatura, el pH del medio, la disponibilidad de nutrientes y la
presencia de compuestos que inducen estrés.
Condiciones
La temperatura óptima para el crecimiento de H. pluvialis varía según la cepa y las
condiciones de cultivo en un rango de 15 a 35 °C
Varios estudios también informaron que H. pluvialis pudo proliferar dentro de un
amplio rango de pH comprendido entre 4 y 9 sin un impacto significativo en el
crecimiento, mientras que la propagación celular disminuyó significativamente a
pH 10 y se detuvo por completo a pH 3.
Cosecha de Biomasa de H. pluvialis
Una vez que se alcanza la etapa de maduración de los hematocistos, la biomasa
se separa del medio de cultivo y se concentra durante los procesos de
recolección.
Las tecnologías de recolección generalmente involucran métodos mecánicos
(sedimentación por gravedad, flotación, filtración y centrifugación), químicos
(coagulación/floculación), biológicos (biofloculación) y, en menor medida, métodos
eléctricos (electroforesis).Entre ellos, la decantación gravitacional, como paso
preliminar para espesar la suspensión de algas en una suspensión (que consiste
en 2% a 7% de Sólidos Suspendidos Totales (TSS)) seguido de centrifugación,
que permite que la suspensión de células se concentre hasta un 25% de TSS , se
aplican convencionalmente a gran escala para la cosecha de H. pluvialisbiomasa
Para preservar la biomasa de H. pluvialis , a menudo se aplica un proceso de
secado para eliminar la humedad para prevenir la degradación de la astaxantina y
extender su vida útil. Los métodos de secado que se han utilizado para las
microalgas incluyen el secado por aspersión, el secado en tambor, el secado
porcongelación y el secado al sol. Entre Para una recuperación eficaz de la
astaxantina de la estructura rígida de la célula del hematocisto, se requiere un
paso de pretratamiento para romper la gruesa pared celular de esporopolenina de
la biomasa seca y húmeda y liberar la astaxantina en el medio.
 Los pretratamientos convencionales generalmente implican métodos mecánicos,
como la disrupción física mediante prensado, molienda y molienda de perlas,
ultrasonido, autoclave u homogeneización.
Los métodos de extracción convencionales para la recuperación de astaxantina a
partir de biomasa de H. pluvialis utilizan disolventes orgánicos. El tipo de solvente
utilizado depende en gran medida de la aplicación industrial debido a su potencial
peligrosidad y toxicidad. Por ejemplo, los productos alimenticios o farmacéuticos
requieren métodos de recuperaciones más suaves. El estrés térmico y/o químico
generado durante el proceso de extracción puede afectar significativamente las
cualidades de la astaxantina extraída, incluida la actividad antioxidante, la
biodisponibilidad y la pureza. Por lo tanto, deben tenerse debidamente en cuenta
las condiciones de operación moderadas, incluido el control adecuado de la
temperatura y el uso y minimización de productos químicos menos tóxicos.
Los solventes orgánicos relativamente suaves como la acetona, el acetato de etilo
y el etanol son efectivos y se prefieren para la recuperación de astaxantina de la
biomasa de H. pluvialis [ 247 ]. Como ya se vio en el capítulo anterior, un
pretratamiento mecánico y/o químico puede mejorar los rendimientos de
extracción. Los solventes también se pueden presurizar para mejorar el
rendimiento y el tiempo de recuperación de la astaxantina.
COMO SE COMPORTA.
De manera normal, la fotosíntesis genera especies reactivas de oxígeno (ROS) en
los cloroplastos que son neutralizadas por un sistema antioxidante endógeno
compuesto por enzimas superóxido dismutasa, catalasa y peroxidasa [155 ] . Sin
embargo, bajo condiciones ambientales o de cultivo adversas (como alta
luminosidad, alta salinidad, falta de nutrientes, metales pesados, etc.), el equilibrio
entre la generación y la desintoxicación de ROS se rompe y conduce al estrés
oxidativo.
En H. pluvialis , la respuesta temprana al estrés oxidativo implica la regulación
positiva del sistema enzimático antioxidante. Cuando persisten las condiciones
estresantes, esta respuesta se reemplaza por la biosíntesis y acumulación de
astaxantina, lo que puede interpretarse como un mecanismo de defensa a largo
plazo. La astaxantina parece actuar como una pantalla que filtra parcialmente la
penetración de la luz en los cloroplastos, en particular en el campo azul,
reduciendo el daño fotooxidativo del aparato fotosintético causado por el exceso
de luz.
ESTRUCTURA
La astaxantina, o 3,3′-dihidroxi-β,β-caroteno-4,4′-diona, es un carotenoide de color
naranja rojizo que pertenece a la familia de las xantofilas, los derivados
oxigenados de los carotenoides. Su fórmula molecular es C 40 H 52 O 4 y su
masa molecular es 596,85 g.mol −1 (C 80,5 %, H 8,78 %, O 10,72 %). Sólido a
temperatura ambiente y liposoluble, su punto de fusión es de 182,5 °C y el log P
(partición octanol/agua) es igual a 13,27.
La astaxantina es un tetraterpeno (40 átomos de carbono) que contiene dos anillos
polares terminales de β-ionona unidos por una cadena de polieno central no polar
[ 11 ] ( Figura 1 ). Esta molécula contiene 13 dobles enlaces conjugados que
confieren a la astaxantina una fuerte actividad antioxidante debido a la capacidad
de neutralizar los radicales libres y eliminar las especies reactivas de oxígeno
(ROS

Cada anillo contiene un grupo hidroxilo (OH) y otro ceto (C=O) que participan en la
actividad antioxidante de la astaxantina y confieren a la molécula su capacidad de
esterificación y una naturaleza más polar que otros carotenoides. Debido a la
presencia de grupos hidroxilo, cada molécula tiene dos centros quirales en C-3 y
C-3`. Por lo tanto, la astaxantina puede presentar tres isómeros configuracionales:
dos enantiómeros (3S, 3`S y 3R, 3`R) y una forma meso (3R, 3`S)