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la zona que rodea las colonias. Las colonias de bacterias no

fermentadoras de lactosa permanecen incoloras y no producen
COMBI-PLATE halos de precipitación, aún en cercanía de colonias de
coliformes.
Agar MacConkey / Agar Salmonella – En Agar Salmonella – Shigella, el mayor contenido de sales
Shigella (SS) biliares y verde brillante contribuyen a un aislamiento selectivo
de Salmonellas y Shigellas, junto a una inhibición marcada o
total de la mayoría de las otras enterobacterias. El contenido de
12
l
citrato ferrico y tiosulfato de sodio permite evidenciar colonias

h 285-560 2
bacterias productoras de H2S, tales como Proteus spp. y
Salmonella spp., las que se observarán coloreadas de negro con
halo claro.

V Material para Diagnóstico In Vitro Materiales y Reactivos necesarios, pero no suministrados:

Estufa de cultivo.
Presentación:
PRECAUCIONES PARA SU USO ADECUADO:
Medio de cultivo listo para su uso, estuche de 10 unidades,
Placas de dos sectores de 90 mm x 15 mm. (ref. 285-560).
Material para uso diagnóstico IN VITRO y control
______________________________________________ microbiológico.
Solo para uso profesional. Requiere usuarios con
Composición (gramos / litro): entrenamiento previo.
Contiene compuestos de origen animal, la inocuidad no es
Agar MacConkey: garantizada. Requiere manipulación con precaución relativa a
productos potencialmente infecciosos. NO INGERIR EL
Digesto pancreático de gelatina: 17.00 PRODUCTO, NO INHALAR EL PRODUCTO
No debe ser usado como materia prima para ninguna otra
Lactosa monohidrato 10.00
fabricación.
Cloruro de Sodio 5.00 No debe usarse pasado su fecha de expiración.
Peptona de carne y caseína 3.00 No debe usarse si el envase esta deteriorado. Material
Sales Biliares 1.50 garantizado solo con sellos intactos.
Rojo neutro 0.03 No debe usarse si se observa contaminación biológica.
Cristal violeta 0.001 Temperar la placa sin sello antes de su uso. No utilizar con
Agar Bacteriológico 13.50 condensación excesiva. No resellar.
pH final medio de cultivo listo para el uso: 7.1 +/- 0.2 Para la interpretación de los resultados se debe tener en
cuenta las características propias de cada especie bacteriana
Agar Salmonella – Shigella (SS): sometida a prueba, como asimismo los antecedentes clínicos
o epidemiológicos del caso en estudio.
El material utilizado debe descartarse de manera segura de
Extracto de carne: 5.00 acuerdo a las normativas de bioseguridad vigentes en el país
Digesto pancreático de caseína: 2.50
Digesto péptico de tejidos animales: 2.50 Conservación:
Lactosa: 10.00
Mezcla de sales biliares: 8.50 Conservado refrigerado entre 2º y 12º C es estable hasta la
Citrato de sodio: 8.50 fecha de caducidad. El medio de cultivo se debe almacenar
Tiosulfato de Sodio: 8.50 sellado y con la cubierta de la placa (tapa) abajo. Se
Citrato fèrrico: 1.00 recomienda almacenar a temperaturas cercanas a 8ºC. A menor
Rojo neutro: 0.025 temperatura de almacenamiento mayor probabilidad de
Agar bacteriológico: 13.50 condensación y por tanto mayor riesgo de filtración del sello de
Verde brillante (mg/L): 0.33 PVC. Durante la conservación en frío pueden aparecer
pH final medio de cultivo listo para el uso: 7.0 +/- 0.2 cristalizaciones de sales biliares en Agar SS. Esto no afecta los
resultados obtenidos en el medio de cultivo.
___________________________________________________
Muestras a cultivar:
Descripción:
Muestras de origen clínico, especialmente deposiciones.
Medios de cultivo selectivos, adecuado para el aislamiento de Muestras de la industria de alimentos, aguas y aguas residuales
microorganismos Gram negativos tolerantes a la bilis, a partir de que puedan contener bacterias tolerantes a las sales biliares,
muestras de origen clínico (deposiciones)1, aguas y aguas como por ejemplo enterobacterias y miembros de los géneros
residuales2, y alimentos3,4, así como también otras muestras de Salmonella y Shigella.
origen industrial6. Cumple los requerimientos de USP (United
States Pharmacopeia) para la realización de pruebas de control Inoculación:
de calidad microbiológico6.
Su formulación permite la diferenciación de enterobacterias Para muestras de origen médico sembrar mediante estría en
fermentadoras y no fermentadoras de lactosa. superficie, a partir de muestras primarias. El Agar Salmonella –
El contenido de sales biliares y cristal violeta del Agar Shigella puede ser sembrado intensivamente gracias a su poder
MacConkey inhibe el desarrollo de bacterias Gram positivas, sin inhibidor.
impedir la recuperación de las enterobacterias 8. Los aislados de Para lograr una mejor recuperación de Salmonellas y Shigellas a
bacterias coliformes presentan una coloración rosa-rojo típica, partir de deposiciones, se recomienda realizar un
que puede incluir halos de precipitación de sales biliares como enriquecimiento selectivo previo, sembrando las muestras en
resultado de la acidificación por la fermentación de la lactosa en Caldo Selenito – Cistina, luego incubar no más de 18 a 20 horas

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Las muestras de origen industrial debe pre enriquecerse y Escherichia coli y Proteus que pueden tolerar el efecto inhibidor
sembrarse de acuerdo a las normativas adoptadas por el del Agar SS, las que presentarán un desarrollo débil a
usuario. moderado.
Las muestras de agua y productos lácteos se deben sembrar Los resultados son orientativos, el usuario debe realizar pruebas
directamente en superficie. Para este efecto deben consultarse de identificación de especie bacteriana.
las normas de la A.P.H.A "Standard
Methods for the Examination of Dairy Products, 11th Ed." así Control de esterilidad*:
como las normas "Standard Methods for the Examination of
Water and Wastewater". 1. - No hubo desarrollo a las 48 horas de cultivo (37ºC,
aeróbico).
Incubación: 2.- No hubo desarrollo a las 96 horas de cultivo (20ºC,
aeróbico).
Para muestras médicas incubar por 24 a 48 horas entre 35º y
37ºC, atmósfera aeróbica. La incubación de siembras en Agar Control de fertilidad*:
MacConkey en atmósfera de CO2 puede reducir el desarrollo y
recuperación de algunas cepas bacterias Gram negativas7. Al cultivar en este lote las cepas de control que se indican, se
Las muestras farmacéuticas deben incubarse entre 12 y 72 esperan los siguientes resultados de desarrollo:
horas a 35º-37ºC
Cultivo a 37ºC, atmósfera aeróbica:
Lectura e Interpretación de Resultados:
Escherichia coli ATCC 25922 sobre Agar MacConkey: bueno.
Una vez completado el período de incubación, observar el Escherichia coli ATCC 25922 sobre Agar Salmonella - Shigella: inhibido.
Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 sobre Agar MacConkey: bueno.
desarrollo bacteriano y verificar las siguientes respuestas Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 sobre Agar Salmonella - Shigella:
culturales: parcialmente inhibido.
Enterobacterias fermentadoras de lactosa o lactosa (+) Salmonella Typhimurium ATCC 14028 sobre Agar MacConkey: bueno.
En Agar MacConkey, colonias color rosa de diversos Salmonella Typhimurium ATCC 14028 sobre Agar Salmonella - Shigella:
tonos, algunas pueden presentar halo de precipitación bueno
de sales biliares.
Enterobacterias fermentadoras de lactosa o lactosa (+) * Cumple norma ISO 13485:2003 y NCh 3162/2.Of2008 Certificados de
conformidad para cada lote deben ser solicitados por el cliente.
En Agar Salmonella – Shigella (SS), colonias color
rosa de diversos tonos, pequeñas a mmedianas, con
desarrollo débil o totalmente inhibidas. Algunas cepas Eliminación de Desechos:
de Escherichia coli pueden presentar desarrollo
El usuario es responsable de la adecuada eliminación de los
Bacterias no fermentadoras de lactosa o lactosa (-) en
materiales para diagnóstico microbiológico estén utilizados o no,
Agar MacConkey: colonias incoloras o ligeramente
para lo que deberá estar en conocimiento cabal de la normativa
coloreadas de beige.
local vigente respecto de la disposición de material infeccioso o
Bacterias no fermentadoras de lactosa o lactosa (-) en potencialmente infeccioso. Cada laboratorio asume la
Agar Salmonella Shigella (SS): colonias incoloras o responsabilidad de la gestión de sus desechos y efluentes, sea
ligeramente coloreadas de beige. Pueden presentar por cuenta propia o mediante terceros que garanticen el
centro negro por efecto de producción de H2S. adecuado tratamiento de estos, y según lo determinen las
Algunas cepas de Proteus pueden presentar reglamentaciones locales vigentes.
desarrollo.
Referencias:
Las características del desarrollo observado no son suficientes 1.- Bopp, Brenner, Wells and Strockbine. 1999. In Murray, Baron, Pfaller, Tenover and
para establecer el diagnóstico de la especie bacteriana. El Yolken (ed.),
usuario deberá aplicar pruebas de identificación para esta Manual of clinical microbiology, 7th ed. American Society for Microbiology,
Washington, D.C.
finalidad. 2.- C Clesceri, Greenberg and Eaton (ed.). 1998. Standard methods for the
examination of water and
Control de Calidad: wastewater, 20th ed. American Public Health Association, Washington, D.
3.- Flowers, Andrews, Donnelly and Koenig. 1993. In Marshall (ed.), Standard methods
for the
El usuario puede someter este medio de cultivo a sus propios examination of dairy products. 16th ed., American Public Health Association,
controles de calidad. La frecuencia de los controles así como las Washington, D.C.
4.- Downes and Ito (ed.). 2001. Compendium of methods for the microbiological
cepas y condiciones de cultivo deberá establecerlas el propio examination of foods,
usuario de acuerdo a la normativa local en vigencia. 4th ed. American Public Health Association, Washington. D.C
A modo de referencia, puede realizarse el siguiente ensayo de 5.-. United States Pharmacopeial Convention, Inc. 2001. The United States
pharmacopeia 25/The
control de calidad: national formulary 20 – 2002. United States Pharmacopeial Convention, Inc., Rockville,
Resultados esperados tras 24 horas de cultivo en atmósfera Md.
aeróbica a 33º-37ºC: 6.- Horwitz (ed.). 2000. Official methods of analysis of AOAC International, 17th ed.
AOAC International,
Gaithersburg, Md.
Cepa de Control sobre Agar MacConkey Resultado esperado 7.- Mazura-Reetz, Neblett and Galperin. 1979. Abstr. C179, p. 339. Abstr. Annu. Meet.
Escherichia coli ATCC 25922 colonias rosa American
Salmonella typhimurium ATCC 14028 colonias incoloras Society for Microbiology 1979.
8.- MacConkey J. H. 5:33. 1905. Joseph Md. State. Dept. Health. Procedures, 1960.
Cepa de Control sobre Agar Salmonella – Resultado esperado European Pharmocopoeia 6.3
Shigella (SS) Pub. Health Reports. 65:1075. 1950. Paper Read at Microbiological Congress, 1950.
Escherichia coli ATCC 25922 Inhibido o debil Proc. 22nd Ann. Meet. Northeastern Conf. Lab.
Salmonella typhimurium ATCC 14028 colonias incoloras Workers in Pullorum Disease Control Burlington, Vermont, June 20-21. 1950.
con centro negro
Rev.02: 11/2010 CIO
Shigella flexneri ATCC 12022 colonias incoloras

Limitaciones de Uso:

El Agar MacConkey y el Agar Salmonella – Shigella son medios

de cultivo selectivos, por lo que solo presentarán desarrollo
aquellas bacterias que posean la capacidad de hacerlo. Otras
bacterias pueden resultar total o parcialmente inhibidas por la
composición del medio de cultivo. No obstante, existen cepas de

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